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Cleavace-invader Technology:
Tecnologa / invasor Cleavase es un mtodo de amplificacin de la sonda que se basa en
el reconocimiento especfico y la escisin de las estructuras particulares de ADN por los
miembros de la solapa endonucleasa-1 familia de ADN polimerasas (Lyamichev, 1999).
Los cientficos necesitan rpida, rentable, y las pruebas de fcil uso para la deteccin de
mutaciones. En 1993, Third Wave desarroll un sistema que incluye mtodos novedosos y
enzimas para la deteccin y la escisin de ADN y ARN
http://www.expertconsultbook.com/expertconsult/ob/book.do?
method=display&type=bookPage&decorator=none&eid=4-u1.0-B978-1-4377-09742..00066-X--s0075&isbn=978-1-4377-09742#lpState=open&lpTab=contentsTab&content=4-u1.0-B978-1-4377-0974-2..00066-X-s0080%3Bfrom%3Dtoc%3Btype%3DbookPage%3Bisbn%3D978-1-4377-09742&search=none
http://www.atp.nist.gov/eao/sp950-3/third_wave.pdf
Cycling Probe Technology:
Tecnologa de sonda de ciclo (CPT) es un mtodo rpido, simple, isotrmica para la
deteccin de secuencias diana especficas. CPT utiliza una nica secuencia de la sonda
quimrica de ARN-ADN-ADN que proporciona un enlace escindible sensible a la RNasa H
cuando se hibridan a una secuencia de ADN diana complementaria. En presencia de ADN
diana, la reaccin de ciclacin convierte de longitud completa de la sonda quimrico en
fragmentos de sonda escindidos, que se acumulan y se cuantifican
Un ciclo de sonda Tecnologa (CPT) de ensayo con un dispositivo de flujo lateral (tira) fue
desarrollado para la deteccin del gen mecA de Staphylococcus aureus (MRSA) culturas
resistentes a la meticilina.
http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0890850899902359
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC86959/
Degnerate Oligomucleotide PCR (DOP-PCR):
La reaccin en cadena de la polimerasa cebado oligonucletido degenerado (DOP-PCR)
fue desarrollado con el fin de amplificar de forma representativa ADN para estudios
citogenticos. DOP-PCR es una herramienta fiable para amplificar el ADN con precisin y
de manera uniforme. Ha sido ampliamente utilizado para amplificar el ADN de FACS
ordenados cromosomas o de micro diseccionado bandas cromosmicas.
C. Kiss et al. / Biomolecular Engineering 19 (2002) 31/34
Digital PCR:
PCR digital funciona mediante la particin de una muestra de ADN o ADNc en muchos
individual, las reacciones de PCR paralelas; algunas de estas reacciones contienen la
molcula diana (positivo), mientras que otros no lo hacen (negativo). Una sola molcula
puede ser amplificado de un milln de veces o ms.
Aplicaciones dPCR:
Absoluta La cuantificacin de la carga viral
Absoluto Cuantificacin de Normas de cido nucleico
Absoluta Cuantificacin de Next Gen Secuenciacin Bibliotecas
Deteccin alelo raro
Low Fold Copy Number Discriminacin
Enriquecimiento y la separacin de mezclas
http://www.lifetechnologies.com/mx/es/home/life-science/pcr/digital-pcr.html
DNA Cloning:
Para obtener mltiples copias de un gen o de otra pieza de ADN debe aislar, o "corte", el
ADN de su fuente y luego "pegar" en un vector de ADN que puede replicarse (o copiar) en
s.
Trabajar a cabo la funcin del gen
Investigar las caractersticas de un gen (tamao, expresin, distribucin tisular)
Mira cmo las mutaciones pueden afectar la funcin de un gen
Hacer grandes concentraciones de la protena codificada por el gen
http://biotechlearn.org.nz/themes/dna_lab/dna_cloning
Dot Blot:
Un dot blot es una tcnica en la biologa molecular utilizado para detectar biomolculas, y
para la deteccin, anlisis, y la identificacin de protenas. En una transferencia puntual
las biomolculas que se detecten no se separan primero por electroforesis. En su lugar,
una mezcla que contiene la molcula a detectar se aplica directamente sobre una
membrana en forma de punto, y luego se detecta a travs de plantillas circulares
directamente sobre la membrana o sustrato de papel.
Dot blot se utiliza para detectar anticuerpos Antidiacyltrehalose en pacientes tuberculosos
y la fiebre tifoidea. Este examen podra aumentar el nmero de vidas salvadas que se ven
afectados con estas enfermedades.
http://docsetools.com/articulos-noticias-consejos/article_136440.html
General Hybridization:
Hibridacin normal requiere el aislamiento de ADN o ARN, que lo separa en un gel, que
secante sobre nitrocelulosa y sondaje con una secuencia complementaria.
La composicin de la solucin de hibridacin es crtica en el control de la eficiencia del
proceso de hibridacin. La hibridacin depende de la capacidad del oligonucletido para
hibridarse a una cadena de mRNA complementario justo por debajo de su punto de fusin
(Tm). El valor de la Tm es la temperatura a la que un medio del oligonucletido est
presente en una forma monocatenaria.
http://www.genedetect.com/insitu.htm
General PCR Primers:
Las reacciones de PCR requieren cebadores, u oligonucletidos (oligos), para comenzar
la replicacin del ADN hebra. Un cebador de PCR incorrecta puede conducir a una
reaccin-fracasado en el que se sintetiza el fragmento del gen mal o ningn fragmento.
El anlisis de secuencia del virus del papiloma humano (VPH) de cebador general de GP5
/ 6 productos de PCR mediadas revel la presencia de secuencias cortas altamente
conservadas adyacentes a los extremos 3 'de ambos cebadores.
http://learn.genetics.utah.edu/content/labs/pcr/
Journal of General Virology (1995), 76, 1057-1062. Printed in Great Britain
Helicase-Dependant Amplification:
es un mtodo de amplificacin de ADN isotrmica que es similar a la PCR convencional,
sino que utiliza la accin de una enzima helicasa termoestable, en lugar de calor para
separar los cidos nucleicos y permitir cebadores marcados para hibridarse a la plantilla
de ADN y alargar bajo la accin de la polimerasa.
Helicasa dependiente de amplificacin para el diagnstico ms simple de la
tripanosomiasis africana humana
http://www.quidel.com/molecular-diagnostics/helicase-dependent-amplification-tests
Microarray:
Un chip de ADN (del ingls DNA microarray) es una superficie slida a la cual se une una
coleccin de fragmentos de ADN. Las superficies empleadas para fijar el ADN son muy
variables y pueden ser de vidrio, plstico e incluso de silicio.
Microsphere-based array:
Debido a que cada microesfera est conectada pticamente a una fibra, las interacciones
especficas de cada superficie de las microesferas se pueden monitorizar de forma
independiente. ptica de deteccin basados en microesferas de ADN fibra es una
alternativa viable a otros mtodos de microarrays de alto rendimiento.
Anlisis tpico microarrays implica la comparacin de dos estados fisiolgicos variadas;
Por ejemplo, el tejido canceroso en comparacin con tejido no canceroso. Estos ensayos
se hibridan dos bibliotecas de ADNc representativos simultneamente, empleando dos
colorantes diferentes para representar cada estado. De esta manera, las microesferas que
muestran mayor seal para un colorante se relacionan directamente con mayores
ocurrencias de la transcripcin de genes especficos.
Biosensors and Bioelectronics 18 (2003) 541/546
Nested PCR:
Nested PCR significa que dos pares de cebadores de PCR se utilizaron para un solo
locus. El primer par amplific el locus como se ve en cualquier experimento de PCR. El
segundo par de cebadores (cebadores anidados) se unen en el primer producto de PCR y
producen un segundo producto de PCR que ser ms corta que la primera. La lgica
detrs de esta estrategia es que si el locus mal fueron amplificados por error, la
probabilidad es muy baja que tambin se amplific una segunda vez por un segundo par
de cebadores.
http://www.bio.davidson.edu/genomics/method/NestedPCR.html
Next generation sequencing:
Aprovecha la secuenciacin mediante tecnologa de sntesis (SBS) - el seguimiento de la
adicin de nucletidos marcados como la cadena de ADN se copia - de una manera
paralela masiva.