Universidade Estadual de Santa Cruz UESC

Departamento de Cincias Exatas e Tecnolgicas - DCET

Bacharelado em Qumica V Semestre

CROMATOGRAFIA

Ilhus-Ba
Julho / 2012

Universidade Estadual de Santa Cruz UESC

Departamento de Cincias Exatas e Tecnolgicas - DCET
Bacharelado em Qumica V Semestre

CROMATOGRAFIA

Relatrio solicitado pelo professor Reinaldo

da Silva Gramacho como cumprimento das
atividades da disciplina Qumica Orgnica II

Por: via Ferreira

Leilane Cezr

Ilhus-Ba
Julho /2012

1. RESUMO

A cromatografia um mtodo fsico-qumico de separao. Ela est

fundamentada na migrao diferencial dos componentes de uma mistura, que
ocorre devido a diferentes interaes, entre duas fases imiscveis, a fase mvel
e a fase estacionria. A grande variedade de combinaes entre fases mveis
e estacionrias a torna uma tcnica extremamente verstil e de grande
aplicao.

2. INTRODUO
A cromatografia em coluna foi inicialmente desenvolvida pelo qumico de
petrleo D.T. Day em 1900. M. S Tswett, o botnico polons, usou em 1906, as
colunas de absoro nas suas investigaes de pigmentos de plantas. Ele criou o
termo cromatografia, no se sabe por ter separado pigmentos de coloraes diferentes
ou porque Tswett significa cor em russo. At 1930, esse mtodo no tinha sido
extensivamente estudado pelos qumicos. No incio da dcada de 50 James e Martin
introduziram a cromatografia gasosa.[1]
A sensibilidade, velocidade, exatido, e simplicidade para separao
identificao

determinao

de

substancias,

resultaram

em

um

grande

desenvolvimento deste mtodo. As diferentes modalidades de cromatografia so

responsveis por mais de 70% da Qumica Analtica realizada hoje em dia. [1]
A cromatografia esta baseada na repartio dos analitos entre duas fases uma
estacionaria e um mvel. [1]
A separao entre dois, ou mais, componentes, resultar da diferena de duas
constantes de equilbrio de distribuio entre duas fases. Simplificando, quando mais
tenazmente um componente preso pela fase estacionria, mais alta porcentagem
das molculas daquele componente que nela ficam retidas provocando um
retardamento na migrao das mesmas. [1]
O conceito de cromatografia liquida abrange uma diversidade de tcnicas de
separao, todas com envolvimento de uma fase mvel lquida. As substncias so
separadas por partio entre um liquido mvel e uma fase estacionria slida,
finamente divida, ou um lquido imobilizado em uma superfcie slida. Os
componentes de uma mistura a ser analisada distribuem-se entre as duas fases, de
acordo com a afinidade que tm pelas mesmas. Como a mistura, desloca pela fase

mvel, percola atravs das partculas slidas (estacionrias), os compostos se

movem em zona discreta. [1]

A cromatografia lquida clssica muito utilizada para isolamento de

produtos naturais e purificao de produtos de reaes qumicas. As fases
estacionrias mais utilizadas so slica e alumina, entretanto estes adsorventes
podem servir simplesmente como suporte para uma fase estacionria lquida.
Fases estacionrias slidas levam separao por adsoro e fases
estacionrias lquidas por partio. [2]
A Cromatografia Lquida de Alta Eficincia (CLAE) uma tcnica
analtica usada para separar e quantificar componentes numa mistura lquida. A
utilizao de suportes com partculas diminutas so os responsveis pela alta
eficincia desse mtodo de cromatografia. A fase mvel (lquida) movimenta-se
continuamente atravs da coluna contendo a fase estacionria (slido). [2]
A Cromatografia gasosa uma tcnica de separao e anlise de
misturas por interao dos seus componentes entre uma fase estacionria e
uma fase mvel. O principal mecanismo de separao da cromatografia gasosa
est baseado na partio dos componentes de uma amostra entre a fase mvel
gasosa e a fase estacionria lquida. A cromatografia em camada delgada
(CCD) uma tcnica de adsoro lquido slido. Nesse caso, a separao se
d pela diferena de afinidade dos componentes de uma mistura pela fase
estacionria. [2]
Esta prtica teve como objetivo introduzir a tcnica de cromatografia e
em seguida purificar e separar uma mistura de compostos orgnicos.

3.MATERIAIS E METDOS
3.1 Cromatografia em camada delgada (CDD)

Em uma placa cromatogrfica previamente preparada fez-se o spot da

substncia A, um spot com a substncia B, e na substncia C. Deixou
evaporar o solvente e em seguida transferiu-se para uma cuba de vidro
contendo aproximadamente 30 mL de etanol, atentou-se para este no
ultrapassar a altura dos spots das substncias. Dentro da cuba colocou-se um
pedao de papel de filtro, apoiando-se atrs da placa cromatogrfica, tampouse a cuba at o final da eluio, como mostrado a figura 1. Aps o final da
eluio, retirou-se a placa cromatogrfica e deixou secar e posteriormente fez
anlise dos resultados e mediu-se o Rf (em cm) de cada substncia.

Figura 1. Montagem da Cuba Cromatogrfica

3.2 Cromatografia em coluna

Lavou-se a coluna cromatogrfica (bureta) usando acetona comercial,
em seguida deixou secar. Colocou-se na extremidade inferior, logo acima da
torneira um pequeno chumao de algodo seco, levemente compactado e em
seguida introduziu-se a slica em gel, at a marca de 6 mL. Transferiu-se a
slica para um bquer e molhou com lcool. Transferiu-se a mistura
homogeneizada novamente para a coluna e esperou-se decantar. Passou 10
mL de etanol da coluna e recolheu-se em um erlenmeyer. Adicionou-se a
mistura com um auxlio de uma pipeta volumtrica de 2 mL , acrescentou-se
etanol 10 mL atentando para deixar ocorrer a secura da coluna. Coletou-se as
fraes em um erlenmeyer de 25 mL. E para finalizar

adicionou-se uma

mistura cido actico 5% e etanol e recolheu-se as fraes em outro

erlenmeyer.

4. RESULTADOS E DISCUSSES
4.1 Cromatografia em camada delgada (CDD)

Figura 2

5.CONCLUSO
6.REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
1. COLLINS, C.H.; BRAGA, G.L. e BONATO, P.S. Introduo a mtodos
cromatogrficos. 5 ed. Campinas: Editora da Unicamp, 1993.
2.