DISCIPLINADEAGRESSO,DEFESA,ADAPTAOEDOENA(ADAD)

MICROBIOLOGIA

Profa.ResponsvelDra.RucheleDiasNogueiraGeraldoMartins

CONTEDOTERICOPRTICO

Curso:ODONTOLOGIA

01

08

02

VistosROTEIROS

03
04
05

09

10

11

12

06

07

NOMEDOACADMICO:____________________________________________________________

RA:_____________________TURMA:________________________________

PERODO:__________________________
CONTATO:_________________________

ROTEIRO1:APRESENTAODADISCIPLINAeNORMASDESEGURANANOTRABALHONOLABORATRIODE
MICROBIOLOGIA

1.NORMASGERAIS
AsaulasprticasdeMicrobiologiatmcomoobjetivoensinaraoacadmicoosprincpiosgeraisemtodosutilizados
noestudodemicrobiologia.Nestasaulasutilizaremosumavariedadedebactrias,sendoalgumaspatognicaspara
ohomem,portantoessencialqueasnormassejamseguidas,afimdeseevitarcontaminaesacidentais.

01
02
03
04
05
06
07

Ousodoaventalbrancoecompridoobrigatrio.
Cabeloslongosdevemseramarradosdeformaanointerferircomreagenteseequipamentos.
Limparedesinfetarasuperfciedasbancadasantesedepoisdecadaaulaprtica.
Lavaresanificarasmosaoiniciaraanlise,aosairdolaboratrioesemprequefornecessrio.Seforportador
dealgumferimentonasmos,procurarnotocarnomaterial.
Identificarasamostras,bemcomoomaterialaserutilizadoantesdeiniciaraanlise.
Utilizarexclusivamentematerialestrilparaaanlise.
Nocasodederramamentodomaterialcontaminado,procederimediatamenteadesinfecoeesterilizao.O
mesmoprocedimentodeverserrepetidoseocorrerferimentosoucortes.
Nocomer,beberoufumarnolaboratrio.
Mantercanetas,dedoseoutroslongedaboca.
Noutilizarmaterialdeusopessoalparalimparosobjetosdetrabalho.
Avisaraoprofessoremcasodecontaminaoacidental.
Depositartodoomaterialutilizadoemrecipienteadequado,jamaisosdeixandosobreabancada.
Flambarasalas,agulhasepinasanteseapsouso.
Oscultivosapsaleituradevemseresterilizados,portantonooscolocarnaestufaoudespejarnapia.
AoacenderoBicodeBunsen,verificarsenohvazamentodegsousubstnciasinflamveisporperto.
Trabalhesempreprximoaofogo.

08
09
10
11
12
13
14
15
16

OBS: A utilizao do Bico de Bunsen essencial pois visa a

diminuio de microrganismos no campo de trabalho atravs
do calor. Para isso ele apresenta uma regula gem que torna
possvel selecionar o tipo de chama ideal para o trabalho. No
caso da Microbiologia deve ser utilizada a chama azul porque
esta atinge maior temperatura e no forma fuligem.
importanteressaltarqueachamaapresentadiferenteszonas,e
tal fato importante para que o processo de Flambagem seja
executado adequadamente, j que certas zonas da chama
devem ser evitadas. As zonas da chama so: Zona Neutra (
uma zona fria e, portanto, no deve ser utilizada para
Flambagem), Zona Redutora e Zona Oxidante (so zonas onde
jocorreacombustoe,portanto,jpodemserusadasparaa
Flambagem).(fig.1).

2.CONCEITOS

INFECOCRUZADA:Passagemdeumagenteetiolgicodeumindivduoparaoutrosusceptvel.

FONTESDEMICRORGANISMOS
1. Endgenos:saliva,sangue,pele,fezes.
2. Exgenos:poeira,gua,instrumentais,atmosfera.

VIASDETRANSMISSO

Contato,inalao,ingesto,inoculao.


CONTAMINAO:Transfernciadeumagenteetiolgicopodeounoresultareminfeco:
Virulncia
Quantidadedoagente
Estadoimunolgicodohospedeiro
Susceptibilidadedolocal

Assepsia:oconjuntodemedidasqueutilizamosparaimpedirapenetraodemicrorganismosnumambienteque
logicamentenoostem,logoumambienteasspticoaquelequeestlivredeinfeco.

Antisepsia:oconjuntodemedidaspropostasparainibirocrescimentodemicrorganismosouremovlosdeum
determinadoambiente,podendoounodestruloseparaistoutilizaseantisspticosoudesinfetantes

CLASSIFICAODOSMATERIAIS

Crticos:penetramnostecidossubepiteliais,nosistemavascularergosisentosdemicrobiotaesterilizados

Semicrticos:entramemcontatocommucosantegra

Nocrticos:Noentramemcontatodiretocomopaciente

3.BIOSSEGURANA:Medidasdeprecauopadro

Principio1:Profissionaisdevemtomarmedidasde
proteoindividualedesuaequipe
LAVAGEM
Lavagemdasmos
DAS MOS
Imunizaes
Stiers et al.
Espaos
Dorso
Palma
Evitaracidentes
interdigitais

Polegar

Princpio2:Osprofissionaisdevemevitarcontato
diretocommatriaorgnica
Usodebarreirasprotetoras
gorro,mscara,luvas,avental,culos

Articulao

Unhas e extremidades

Punhos

Princpio3:
Osprofissionaisdevemlimitarapropagaode
microrganismos

Preparaodoambiente
Descontaminaodesuperfcies
Coberturadesuperfciespassveisde
contaminao
Antisepsiaprviadotecido
Materialdescartvelcontaminadorotulado

Princpio4:Osprofissionaisdevemtornarseguroousodeartigos,peasanatmicasesuperfcies:
instrumental
moldesemodelos
materiaisdebipsia,dentesextrados
manipulaoderoupasujaelixo

Esterilizao
Procedimentos indicados
Mtodo
Autoclave
- por gravidade
-por alto-vcuo
Estufa
Imerso em
glutaraldedo 2%

Temperatura

Tempo

121 C (1atm)
132 C (2atm)

20 min
4 min

160 C
170 C

120 min
60 min

10 horas

4.MATERIAISPESSOAISPARAAULASPRTICAS:
lpisdecor(roxo,rosa,verde,marrom,amarelo,preto)oucanetasgis
gorro,mscara,luva,jaleco,culosdeproteo;
roteirosdeaulasprticas

Roteiro2:TAXONOMIAENOMENCLATURADEMICRORGANISMOS
INTRODUOAMICROBIOLOGIA

A cincia da Microbiologia [do grego: mikros (pequeno), bios (vida) e logos (cincia)] o estudo dos
organismosmicroscpicosedesuasatividades.Preocupasecomaforma,aestrutura,areproduo,afisiologia,o
metabolismo e a identificao dos seres microscpicos. Inclui o estudo da sua distribuio natural, suas relaes
recprocasecomoutrosseresvivos,seusefeitosbenficoseprejudiciaissobreoshomenseasalteraesfsicase
qumicasqueprovocamemseumeioambiente.
Em sua maior parte, a Microbiologia trata com organismos microscpicos. Nas assim chamadas formas
superiores de vida, os organismos so compostos de muitas clulas, que constituem tecidos altamente
especializados e rgos destinados a exercer funes especficas. Nos seres unicelulares, todos os processos vitais
sorealizadosnumanicaclula.Independentementedacomplexidadedeumorganismo,aclula,narealidade,a
unidadebsicadavida.

OQUEUMMICRBIO?
Tradicionalmente, os micrbios so descritos como organismos de vida livre, muito pequenos (menos de 100
micrmetros[m]),sendovisveissomentesobomicroscpio,emboraalgunsmicrbiospossamsersuficientemente
grandesparaseremvistosaolhonu.
As menores bactrias tm apenas 0,2 m de comprimento, mas bactrias gigantes e protozorios podem ter
mais de 1 mm de comprimento. Os micrbios so procariotos (clulas desprovidas de um ncleo verdadeiro) ou
eucariotos(clulascomumncleoverdadeiro).
Os micrbios eucariotas, exceto as algas e os fungos, so coletivamente chamados de protista (seres
unicelulares, microscpicos, com clulas eucariticas, portanto com ncleo verdadeiro, semelhante s clulas dos
animais e das plantas. Ex.: protozorios e algas formadoras do plncton marinho). Os protistas podem ainda ter
adaptaesdeformaeestruturadeacordocomoseumododevida:parasita,oudevidalivre.Exemplodealguns
protozoriosparasitas: Leishmaniabraziliensiscausaaleishmaniosetegumentar. Trypanosomacruzicausaa
doenadeChagas. Giardialambliacausaagiardase(intestinal). Trichomonasvaginaliscausaatricomonase
(noaparelhogenital).

CELULASPROCARITICASEEUCARITICAS.
Apesar de sua complexidade e variedade, todas as clulas vivas podem ser classificadas em dois grupos, as
procariticaseaseucariticascombaseemcertascaractersticasfuncionaiseestruturais.
Procariotos e eucariotos so quimicamente similares, no sentido de que ambos contm cidos nuclicos,
protenas,lipdeosecarboidratos.Utilizamsedosmesmostiposdereaesqumicasparametabolizaroalimento,
formarprotenasearmazenarenergia.Adistinoentreprocariotoseeucariotosestbaseada,principalmente,na
estrutura das membranas e paredes celulares, e na ausncia de organelas (estruturas celulares especializadas que
possuemfunesespecficas).

Asprincipaiscaractersticasquediferenciamosprocariotosdoseucariotosestoexplicitadasnoquadroabaixo:

Principaiscaractersticasquediferenciamasclulasprocariticasdaseucariticas.

CLULASPROCARITICAS
CLULASEUCARITICAS
1SeuDNAencontradononcleodasclulas,
1SeuDNAnoestenvolvidoporuma
queseparadodocitoplasmaporumamembrana
membrana,nopossuinucloloegeralmentepossuium
nuclear,possuinuclolo,apresentamltiplos
nicocromossomodearranjocircular.
cromossomoslineares.
2SeuDNAnoestassociadocomhistonas
2SeuDNAconsistentementeassociados
(protenascromossmicasespeciaisencontradasem
protenascromossmicashistonas.
eucariotos),outrasprotenasestoassociadasaoDNA.
3Possuemdiversasorganelasrevestidaspor
3Poucasousemorganelas,nosorevestidaspor membranas,incluindomitocndrias,retculo
endoplasmtico,complexodeGolgi,lisossomose
membranas.
algumasvezescloroplastos
4Suasparedescelulares,quandopresentes,so
4Suasparedescelularesquasesemprecontmo
quimicamentesimples(incluiceluloseequitina).
polissacardeocomplexopeptdeoglicano.
5Normalmentesofremdivisoporfissobinria,
Duranteesseprocesso,oDNAduplicadoeaclula
divideseemduas.Afissobinriaenvolvemenos
estruturaseprocessosqueadivisodasclulas
eucariticas.
6Tamanhodaclula:0,2a2,0mdedimetro.
7Unicelular

5Adivisocelulargeralmenteenvolvemitose,na
qualoscromossomossoduplicadoseumconjunto
idnticodistribudoparacadaumdosdoisncleos.A
divisodocitoplasmaedeoutrasorganelasseguesea
esseprocesso,demodoquehaverproduodeduas
clulasidnticas.
6Tamanhodaclula:10a100mdedimetro.
7Pluricelularcomdiferenciaoedivisoem
tecidos.

Todosossistemasbiolgicostmasseguintescaractersticascomuns:
1) habilidadedereproduo;
2) capacidadedeingestoouassimilaodesubstnciasalimentares,metabolizandoasparasuasnecessidades
deenergiaedecrescimento;
3) habilidadedeexcreodeprodutos
4) capacidadedereagiraalteraesdomeioambiente(algumasvezeschamadade"irritabilidade"),e
5) suscetibilidademutao.

OsprincpiosdaBiologiapodemserdemonstradosatravsdoestudodaMicrobiologia,poisosmicrorganismos
tmmuitascaractersticasqueostornaminstrumentosideaisparaapesquisadosfenmenosbiolgicos.Estesseres
fornecemsistemasespecficosparaainvestigaodasreaesfisiolgicas,genticasebioqumicas,quesoabase
davida.Elespodemcrescer,demaneiraconveniente,emtubosdeensaiooufrascos,exigindo,assim,menosespao
e cuidados de manuteno do que as plantas superiores e os animais. Alm disso, crescem rapidamente e se
reproduzemnumritmomuitoalto;algumasespciesbacterianasdemonstramquase100geraesnumperodode
24horas.Osprocessosmetablicosdosmicrorganismosseguemospadresqueocorremnosvegetaissuperiorese
nosanimais.
EmMicrobiologiapodeseestudarosorganismosemgrandedetalheeobservarseusprocessosvitaisduranteo
crescimento,areproduo,oenvelhecimentoeamorte.Modificandoseacomposiodomeioambiente,possvel
alterarasatividadesmetablicas,regularocrescimentoe,atalteraralgunsdetalhesdopadrogentico,tudosem
causaradestruiodomicrorganismo.
Osprincipaisgruposdemicrorganismossoosprotozorios,fungos,algasebactrias.Osvrus,apesardeno
serem considerados vivos, tm algumas caractersticas de clulas vivas e por isso so estudados como
microrganismos.

DistribuiodosMicrorganismosnaNatureza
Os microrganismos se encontram em praticamente todos os lugares da natureza. So transportados por
correntes areas desde a superfcie da Terra at as camadas superiores da atmosfera. Mesmo os microrganismos
tpicosdosoceanospodemserachadosamuitosquilmetrosdedistncia,noaltodemontanhas.Soencontrados
emsedimentosnofundodomar,emgrandesprofundidades.Socarregadosporcorrentesfluviaiseatmares;e,se
dejetos humanos contendo bactrias patognicas forem despejados em correntes de gua, a doena pode
disseminarsedeumlugarparaoutro.
Os microrganismos ocorrem mais abundantemente onde puderem encontrar alimentos, umidade e
temperatura adequados para seu crescimento e multiplicao. Uma vez que as condies que favorecem a
sobrevivnciaeocrescimentodemuitosmicrorganismossoasmesmassobasquaisvivemaspopulaeshumanas,
inevitvelquevivamosentregrandequantidadedemicrorganismos.Elesestonoarquerespiramosenoalimento
queingerimos.Estonasuperfciedenossocorpo,emnossotratodigestivo,naboca,nonarizeemoutrosorifcios
naturais.Felizmente,amaioriadosmicrorganismosincuaparaohomem,eestetemmeiosderesistirinvaso
daquelesquesopotencialmentepatognicos.
Na natureza, os microorganismos podem existir como clulas separadas que flutuam ou nadam
independentementeemumlquido,oupodemestarligadosumao

reasdeaplicaodaMicrobiologia
Existem numerosos aspectos no estudo da Microbiologia, que so divididos em duas reas principais: a
microbiologiabsicaeamicrobiologiaaplicada.
Amicrobiologiabsicaestudaanaturezafundamentaleaspropriedadesdosmicrorganismos.Preocupasecom
assuntosrelacionadosaosseguintestemas:
caractersticasmorfolgicas(formaetamanhodasclulas,composioqumica,etc.);
caractersticas fisiolgicas (necessidades nutricionais especficas e condies necessrias ao crescimento e
reproduo);
atividadesbioqumicas(mododeobtenodeenergiapelosmicrorganismos);
caractersticasgenticas(hereditariedadeevariabilidadedascaractersticas);
caractersticas ecolgicas (ocorrncia natural dos microrganismos no ambiente e sua relao com outros
organismos);
potencialdepatogenicidadedosmicrorganismose
classificao(relaotaxonmicaentreosgruposdomundomicrobiano).

Namicrobiologiaaplicadaestudamsecomoosmicrorganismospodemserusadosoucontroladosparavrias
finalidades prticas. Os principais campos de aplicao da microbiologia incluem: medicina, alimentos e laticnios,
agricultura,indstriaeambiente.
Nareaindustrial,porexemplo,osmicrorganismossoutilizadosnasntesedeumavariedadedesubstncias
qumicas, desde o cido ctrico at antibiticos mais complexos e enzimas. Certos microrganismos so capazes de
fermentar material orgnico animal e humano, produzindo gs metano que pode ser coletado e usado como
combustvel.Abiometalurgiaexploraasatividadesqumicasdebactriasparaextrairminerais,comocobreeferro
de minrios de baixa qualidade. A indstria do petrleo tm utilizado bactrias e seus produtos, como os
exopolissacardeos presentes externamente clula bacteriana, para aumentar a extrao do petrleo de rochas
reservatrio. Na rea ambiental, estudase a utilizao de microrganismos que podem degradar poluentes
especficos,comoherbicidaseinseticidas.

AEvoluodaMicrobiologia
AMicrobiologiacomeouquandoseaprendeuapolirlentes,feitasapartirdepeasdevidro,eacombinlas
at produzir aumentos suficientemente grandes que possibilitassem a visualizao dos microrganismos. Durante o
sculoXIII,RogerBaconpostulouqueadoenaeraproduzidaporseresvivosinvisveis.Asugestofoinovamente
feitaporFracastorodeVerona(14831553)eporVonPlenciz,em1762,masestesautoresnodispunhamdeprovas.
No incio de 1658, um monge chamado Kircher se referiu a "vermes" invisveis a olho desarmado nos corpos em
decomposio,nopo,noleiteeemexcreesdiarreicas.
Em 1665, Robert Hooke viu e descreveu clulas em um pedao de cortia. Estabeleceu o fato de que os
organismos de "animais e plantas, complexos que sejam, so compostos de algumas partes elementares que se
repetemfrequentemente"citaonodevidaaHooke,masoriginadadadescriodeAristtelessobreaestrutura
celulardascoisasvivas,datadasdosculoIVa.C.

Emboranotenhasido,provavelmente,oprimeiroaverasbactriaseosprotozorios,oholandsAntonyVan
Leeuwenhoek(16321723),foioprimeiroarelatarsuasobservaes,comdescriesprecisasedesenhos.Apalavra
bactria vem do termo bacterium, que foi introduzido pelo alemo C.G. Ehrenberg, em 1828, como uma
denominaogenricaparacertostiposbacterianosrepresentativos.Derivadapalavragregaquesignifica"pequeno
basto".Apalavramicrbiofoiintroduzidaem1878,pelocirurgiofrancsCharlesEmmanuelSedillot.

GeraoEspontneaversusBiognese
A descoberta dos microrganismos focalizou o interesse cientfico sobre a origem dos seres vivos. No que se
refere s formas superiores de vida, Aristteles (384322 a.C.) pensava que os animais podiam se originar,
espontaneamente,dosolo,deplantasedeoutrosanimaisdiferentes,esuainflunciaaindaatingiuosculoXVII.Era
aceito como fato, por exemplo, que as larvas podiam ser produzidas pela exposio da carne a o calor e ao ar,
emboraFrancescoRedi(16261697)duvidassedomesmo.Elerealizouumaexperincianaqualcolocoucarnenuma
jarra coberta com gaze. Atradas pelo odor da carne, as moscas puseram seus ovos sobre a cobertura e, destes,
emergiramaslarvas.Estaexperinciaeoutrasparecemterresolvidooassunto,aomenosnoquesereferiaatais
formasvivas.Comosmicrorganismos,contudo,eradiferente;seguramenteelesnotinhampais.
Em 1749, John Needham (17131781), trabalhando com carne exposta a cinzas quentes, observou o
aparecimentodemicrorganismosquenoexistiamnoinciodaexperincia,concluindoqueasbactriastinhamse
originadodacarne.Quasequeaomesmotempo,Spallanzani(17291799)ferveucaldodecarneduranteumahora,
fechandologoaseguirosfrascos.Nenhummicrorganismoapareceu,masseusresultados,aindaquerepetidos,no
convenceramNeedham.Esteinsistiaemqueoareraessencialparaaproduoespontneadosseresmicroscpicos,
eesteartinhasidoexcludodosfrascospelofechamento.60a70anosmaistardedoispesquisadoresresponderam
aesteargumento.FranzSchulze(18151873)aeravainfusesfervidas,fazendooaratravessarsoluesfortemente
cidas,enquantoTheodorSchwann(18101882)foravaoaratravsdetubosaquecidosaorubro.Emnenhumdos
casossurgiramosmicrbios.Osadeptosdageraoespontneanoseconvenceram,dizendoqueocidoeocalor
que no permitiram o crescimento dos micrbios. Por volta de 1850, Schrder e Von Dush realizaram uma
experinciamaisconvincente,fazendooarpassaratravsdoalgodoparafrascosquecontinhamocaldoaquecido.
Assim,asbactriasforamretidaspelasfibrasdealgodo,tantoquenohouveseudesenvolvimento.

TeoriaMicrobianadasDoenas
Antes de Pasteur ter provado experimentalmente que as bactrias so a causa de algumas doenas, muitos
observadores j argumentavam a favor desta teoria. Fracastoro de Verona sugeriu que as doenas podiam ser
devidasaorganismosinvisveis,transmitidosdeumapessoaparaoutra.Em1762,VonPlenciz,deViena,noapenas
estabeleceu que seres vivos fossem causas de doenas, como tambm suspeitou que microrganismos diferentes
fossem responsveis por enfermidades diferentes. O mdico Oliver W. Holmes (18091894) insistia que a febre
puerperal era contagiosa e, provavelmente, causada por um germe transmitido de uma me para outra por
intermdio das parteiras e dos mdicos. Quase na mesma poca, o mdico hngaro Ignaz P. Semmelweis (1818
1865)introduziaousodeantisspticosnaprticaobsttrica.
NaFrana,LouisPasteur(1861)estudouosmtodoseprocessosenvolvidosnafabricaodevinhosecervejas.
Observouqueafermentaodasfrutasedosgros,resultandoemlcool,eraefetuadapormicrbios.Examinando
muitasamostrasde"fermentos",isoloumicrbiosdeespciesdiferentes.Nosbonslotes,predominavaumtipo;nos

produtos pobres, outro tipo estava presente. Selecionando adequadamente o microrganismo, o fabricante podia
estar seguro de conseguir produtos bons e uniformes. Porm os micrbios j estavam nos sucos; deviam ser
removidos e fermentao iniciada com uma cultura proveniente de um tonel que tinha sido satisfatrio. Pasteur
sugeriu que os tipos indesejveis de microrganismos deveriam ser eliminados pelo calor, no to intenso que
prejudicasseogostodosucodefruta,massuficienteparatornarincuososgermes.Observouque,mantendoos
sucos a uma temperatura de 6263 C, durante uma hora e meia, obtinha o resultado desejado. Este processo
tornouseconhecidocomopasteurizaoehojeamplamenteutilizadonasindstriasdefermentao,porma
indstria dos derivados do leite que est mais familiarizada com este mtodo, visando a destruio dos
microrganismospatognicos,presentesnoleite.

Na Alemanha, o mdico Robert Koch (18431910) estudou o problema do carbnculo hemtico, que uma
doenadogadobovino,caprinoe,svezes,dohomem.Eledescobriuosbacilostpicoscomextremidadescortadas
em ngulos retos, no sangue de animais mortos pela infeco carbunculosa. Inoculou as bactrias em meios de
cultura, em seu laboratrio, examinouas ao microscpio para estar seguro de que apenas uma espcie tinha se
desenvolvidoeinjetouasemoutrosanimaisparaverificarseestessetornavamdoentesedesenvolviamossintomas
clnicosdocarbnculohemtico.Apartirdestesanimaisexperimentais,Kochisoloumicrbiosiguaisaosquetinha
encontradooriginalmentenoscarneirosinfectados.Estafoiaprimeiravezqueumabactriafoicomprovadacomo
causadeumadoenaanimal.
ApartirdistoforamestabelecidosospostuladosdeKoch:


2.ClassificaodosMicrorganismos
A cincia da classificao, especialmente a classificao de seres vivos, denominada taxonomia, do grego taxi
(arranjo)enomos(lei,ordem).Assim,oobjetivodataxonomiaclassificarorganismosvivos,ouseja,estabeleceras
relaesentreosgruposdeorganismosediferencilos.Entreosmicrorganismos,devidoapoucosregistrosfsseis,
a sua classificao ainda est longe do ideal. Um sistema taxonmico nos possibilita identificar um organismo
previamentedesconhecidoeentoagruplosouclassificloscomoutrosorganismosquepossuamcaractersticas
similares.
A taxonomia tambm fornece uma referncia comum na identificao de organismos. Por exemplo, quando uma
bactria suspeita isolada de um paciente, caractersticas daquele isolado so comparadas a uma lista de
caractersticas de bactrias previamente classificadas para identificar a amostra. Depois que a bactria foi
identificada, drogas que afetam esta bactria podem ser selecionadas. Portanto, a taxonomia uma ferramenta
bsicaenecessriaparaoscientistaseforneceumalinguagemuniversaldecomunicao.Novastcnicasdebiologia
molecularesegenticasvmfornecendonovasideiasnaclassificaoeevoluoenvolvendoataxonomiamoderna.
Vriossistemasdeclassificaoetestesusadosnaidentificaodemicrorganismostmpermitidoasuaclassificao
eposicionamentofilogentico.

2.1.RelaesFilogenticas
Entre os diferentes organismos j identificados em nosso planeta, existem muitas similaridades, mas tambm
diferenas.Estaspodemseratribudassobrevivnciadosorganismoscomcaractersticasmelhoresadaptadasao
seu Habitat. No sentido de facilitar as pesquisas e a comunicao, os organismos so arranjados em categorias
taxonmicasoutaxa(sing.,taxon)querefleteograudesimilaridadeentreosorganismos.Ahistriaevolutivadeum
grupoconhecidacomofilogenia,eahierarquiadotaxarevelamrelaesevolutivasoufilogenticas.

2.2.OsReinos
Em1969,RobertH.Whittakerdescreveuumsistemadecincoreinosparaaclassificaobiolgica,considerandoos
procariotes como ancestrais de todos os eucariotes (Fig.1). Neste sistema, todos os procariotes esto includos no
Reino Procaryote ou Monera, e os eucariotes compreendem os outros quatro reinos. Os organismos eucariotes
simples, a maioria unicelular est agrupada no Reino Protista, que incluem tambm os multicelulares (sem
organizao de tecidos). O Reino Protista inclui os bolores aquticos semelhantes a fungos, bolores limosos,
protozorios e as primitivas algas eucariticas. Os fungos, as plantas e os animais perfazem os trs reinos dos
organismos eucariticos mais complexos, sendo a maioria multicelular. O Reino Fungi inclui as leveduras
unicelulares, bolores multicelulares e espcies macroscpicas como os cogumelos. O Reino Plantae inclui algumas
algas e todos os musgos, samambaias, conferas e plantas com flores. Todos os membros desse reino so
multicelulares. O Reino de organismos multicelulares denominados Animalia (animais) inclui as esponjas, vrios
vermes,osinsetoseosanimaiscomesqueleto(vertebrados).

2.3.ClassificaodosOrganismos
Osorganismosvivossoagrupadosdeacordocomascaractersticassimilares(classificao),eacadaorganismo
atribudo um nico nome cientfico. As regras para a classificao e nomeao, so utilizadas no mundo todo por

bilogos e microbiologistas, fazendo parte de um sistema que fornece dois nomes para cada organismo, e este
sistemadenominadodenomenclaturabinomial,comoporexemplo:HomosapiensouRhizopusnigricans.
Onomedognerosempreemletramaisculaesempreumsubstantivo.Onomedaespciesempreemletra
minsculae,geralmente,umadjetivo.Osbinmiossoutilizadosporcientistasnomundotodo,semconsiderar
sualnguanativa,aqualpermitequeelescompartilhemseuconhecimentodeumaformaeficienteeexata.Vrias
entidadescientficassoresponsveispeloestabelecimentoderegrasquegovernamadenominaodeorganismos.
Asregrasparaadenominaodenovasbactriasrecentementeclassificadaseadesignaodestasparaumtxon
esto estabelecidas pela Comisso Internacional de Bacteriologia Sistemtica, e publicadas no Cdigo
Bacteriolgico.
AsdescriesdasbactriasedasevidnciasdesuaclassificaoestopublicadasnarevistaInternationalJournalof
SystematicBacteriology,antesdeseremincorporadasnoBergey'sManualofBacteriology.DeacordocomoCdigo
Bacteriolgico os nomes cientficos so derivados do latim (o nome de um gnero tambm pode ser derivado do
grego) ou latinizados pela adio de um sufixo apropriado. Os sufixos para ordem e famlia so ales e aceae,
respectivamente.Comonovastcnicasdelaboratriopermitemcaracterizaesmaisdetalhadasdasbactrias,dois
gnerospodemserreclassificadosemsomenteum,ouumgneropodeserdivididoemdoisoumaisgneros.Por
exemplo, o gnero Diplococcus e Streptococcus foi combinado em 1974; a nica espcie de diplococos agora
denominada Streptococcus pneumoniae. (O Cdigo Bacteriolgico determina que o gnero mais antigo deve ser
mantidonessescasos.)

ATIVIDADESRoteiro2
Nomedo(a)acadmico(a):

Responda:

1.Oqueteoriagerminaldadoena?
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________________

2.ContribuiodeLouisPasteurrevolucionouosestudosmdicos
autora:AlaneBeatrizVermelhopesquisadoradoInstitutodeMicrobiologiaProfessorPaulodeGes,da
UniversidadeFederaldoRiodeJaneiroUFRJ.Fonte:http://redeglobo.globo.com/globociencia)

Louis Pasteur nasceu no dia 27 de dezembro de 1822 na Frana e contribuiu de modo extraordinrio para o
desenvolvimento da cincia e do pensamento cientifico. No foi um aluno brilhante at descobrir sua verdadeira
vocao que era a Cincia e iniciar a sua carreira aos 19 anos. Em 1842 se graduou e em 1847 completou seus
estudosdedoutoradonaescoladeFsicaeQumicaemParis.Aos26anosdeidade,seutrabalhonareadaQumica
comoscristaisdetrtarolherenderamopremioda"Lgiond'Honneur"francesa.curiosopensarcomoPasteur,no
seu tempo, com um conhecimento terico sobre a Microbiologia bem menor do que o dos cientistas de hoje,
conseguiu elaborar experimentos criativos que superaram o limitado conhecimento da poca. Fez importantes
descobertasquerevolucionaramosconceitosdamedicinaelanaramasbasesdamodernaMicrobiologiaindustrial.
Aintroduodoconceitodequeasdoenassocausadaspormicrbios,osestudossobrefermentaomicrobiana,o
processodepasteurizaoeasvacinasforamfrutosdamentebrilhantedeumcientistaqueestavamuitoafrentedo
seu tempo. Sua preocupao em solucionar os problemas prticos da sociedade, aliadas a uma mente curiosa e
criativa,era,respectivamente,asuamotivaoesucessonasmetodologiaselaboradasparatestarsuashipteses.
Durante a sua vida Pasteur sofreu muitas perseguies de colegas, devido as suas teorias. Teorias essas que,
emboratenhamgeradomuitascontrovrsias,estavamabsolutamentecorretas.
Aquedadateoriadegeraoespontnea
At o incio do sculo XIX, existia a teoria da gerao espontnea, tambm denominada abiognese. Nesse
conceito, acreditavase que os microorganismos poderiam surgir, espontaneamente, a partir de um material
inanimado.Essahiptesesurgiubaseadanasobservaesqueacarnemantidaatemperaturaambienteentravaem
processodeputrefao.Apresenadelarvasdeinsetosnolixoemdecomposiotambmreforavaesseconceitoda
vida,demodogeral,surgindodeformaespontnea.
Nesseperodo,mtodosdaconservaodealimentosforamdesenvolvidoscomoodeapertizaodeNicholas
Appert.Nessemtodo,osalimentos eramcolocadosemfrascos vedadose aquecidosemguafervente.Emborao
mtodo tenha sido um sucesso para preservar esses alimentos e interromper a gerao espontnea, a teoria
continuava em vigor. O prprio Nicholas Appert no conseguiu explicar porque os alimentos fervidos no
estragavam.OutropesquisadorchamadoLazarroSpallanzanirealizouexperimentosusandotemposdeaquecimento
diferentes em frascos totalmente selados, sem oxignio. Seu objetivo era tentar atribuir a presena de micro
organismoscomacausadaputrefaoeaeliminaodosmesmospelocalorepelaaausnciadeoxigniocomo
motivo da preservao. Foi, entretanto, contestado pelos conservadores que alegavam que o aquecimento e a
remoodooxignioestariam,naverdade,eliminandoaforavitalquegeravaavida.
AteoriadageraoespontneafoitotalmentederrubadaporLouisPasteurqueemumasriedeexperimentos
demonstrouqueoalgodousadoparavedarosfrascoscontinhaesporosdefungos.Seestesesporosentrassemem
contatocomosalimentosnostubosfechadosiniciariamoprocessodedecomposiodoalimento.Completandosuas
observaes, o cientista sugeriu que os micrbios presentes no ar eram os responsveis por todo o processo. Para
provarsuahiptese,eleusoufrascoscomumdesenhoespecial,chamadosdefrascoscompescoosdecisne.
PasteuriniciouapesquisasobreafermentaotrabalhandocomosprodutoresdevinhonaFrana,ajudandono
processo de fermentao e desenvolvendo a pasteurizao para eliminar as bactrias, que azedavam o vinho ao
contaminlos,sendoessesestudospatenteadosnosEstadosUnidos.
Foi o primeiro cientista a demonstrar que a produo do vinho envolvia a ao de microorganismos,
especificamenteleveduras,umtipodefungo.Esseprocesso,denominadofermentao,transformavaoscarboidratos
(acares) dosuco dauvaemlcool.Adescobertafoirealizadacomumexperimentomuitosimples:ao ferver um
vinhoemfermentaocessavase,assim,aproduodolcool.Oprocessoeramonitoradopelomicroscpionoqual

era possvel ver as leveduras mortas aps o aquecimento. Essa descoberta no foi bem recebida pela comunidade
cientfica, que acreditava que o lcool era produzido por reaes qumicas, e no por reaes biolgicas, que
ocorriamnosucodauva.
Os produtores enfrentavam um problema com as exportaes de vinho que azedavam nas garrafas, se
transformadoemvinagre.Pasteurcoletouvriasamostrase,asobservandonomicroscpio,constatouquequandoo
vinho azedava, muitas bactrias eram encontradas. Foi para resolver esse problema que a pasteurizao foi
inventada.ApropostadePasteurfoiaquecerasgarrafascomovinhotemperaturade55Celsius.Dessemodo,as
propriedadesdovinhoerampreservadaseasbactriaserameliminadas.Apasteurizaoaindahojeomtodode
escolha para o controle dos microorganismos na conservao de alimentos, como o leite, e de algumas bebidas
alcolicas,comoovinhoeacerveja.Comotempo,omtodofoiaperfeioado,masoprincpiopermaneceomesmo.

OsavanosprovenientesdePauster
As descobertas cientficas ocorrem de modo progressivo com os resultados e concluses sendo realizados por
vrioscientistasemtodoomundo.Observase,entretanto,queosgrandecientistastmacapacidadedepromover
grandes saltos, periodicamente, transformado os dados ento disponveis em respostas, solues e novas
descobertas.Pasteur,semdvida,sebaseounosexperimentosdeNicholasApperteLazarroSpallanzaniparachegar
s sua brilhantes descobertas, assim como usou o microscpio descoberto por Robert Hooke e Anton van
Leeuwenhoek como ferramenta . Mas, sua curiosidade natural, criatividade na elaborao dos experimentos, forte
conexo das idias, mtodo cientifico e motivao em auxiliar a sociedade, promovendo o desenvolvimento,
certamenteolevaramaocompletoxitoemsuacarreira

Graasassuadescobertafoipossvel:

ComprovarquenoexistiaageraoespontneaefirmaroconceitodaBiognese;
A descoberta de que muitas doenas eram causadas por micrbios. Nesse quesito, fez muitos avanos,
incluindoaintroduodoconceitodevrus,melhoriadasprticashospitalaresdemodoaminimizarinfeces;
Realizarestudosimunolgicosemicrobiolgicosquelevaramaosconceitosdaimunidadeedasvacinas,como
a raiva. Esses estudos contriburam tambm para a cura e o controle de doenas de animais, como a clera de
frangos;
Estabelecerosprincpiosdafermentaoe,pelaprimeiravez,provarqueumaleveduraeraaresponsvelpor
esseprocesso;
Criar um dos principais mtodos de controle de microorganismos, que a pasteurizao, e estabelecer os
princpios que levariam tambm ao desenvolvimento dos mtodos de esterilizao (eliminao total de qualquer
formamicrobiana).

ExpliqueoExperimentodePasteurcomosfrascosemformadepescoodecisne


3.Expliqueoqueculturapura?

4.QualaimportnciadeAlexanderFlemingparacontroledasinfeces?

5.Qualafinalidadedeumsistemataxonmico?

6.Quaissooscincoreinos?
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

7.Oquelinhagemecomoidentificada?
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
8.QualaimportnciadospostuladosdeKOCH?
_______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________

9.Reescrevaassentenasaseguircorrigindoanomenclaturabinominaldosmicrorganismos.

a)StreptococcusMutansoprincipalagenteetiolgicodacrie
________________________________________________________________________________
b)Lactobacilosacidophilusummicrorganismocomumenteencontradonasgenitlias.
________________________________________________________________________________
c)Mycobacteriumtuberculosiscausatuberculose.
________________________________________________________________________________

Roteiro3:MORFOLOGIABACTERIANA
MICROSCOPIAEMMICROBIOLOGIA

Entre as principais caractersticas das clulas bacterianas esto suas dimenses, forma, estrutura e arranjo. Estes
elementosconstituemamorfologiadaclula.

Embora existam milhares de espcies bacterianas diferentes, os organismos isolados apresentam uma das trs
formas gerais: elipsoidal ou esfrica, cilndrica ou em bastonete e espiralada. As bactrias espiraladas (singular =
spirillum; plural = spirilla) ocorrem, predominantemente, como clulas isoladas. As clulas individuais de espcies
diferentes exibem, contudo, ntidas diferenas no comprimento, nmero e amplitude das espirais e na rigidez das
paredescelulares.Asbactriascurtascomespirasincompletassoconhecidascomobactriascommaouvibries

As clulas bacterianas esfricas ou elipsoidais so chamadas de cocos e podem apresentar os arranjos vistos na
abaixo. As clulas bacterianas cilndricas ou em bastonetes (bacilos) comumente apresentamse isoladas e
ocasionalmenteocorremaospares(diplobacilos)ouemcadeias(estreptobacilos).

A unidade de medida das bactrias o micrmetro, que equivale a 10 mm. As bactrias mais freqentemente
estudadas em laboratrio medem, aproximadamente, 0,5 a 1,0 m por 2,0 a 5,0 m. Os estafilococos e
estreptococos,porexemplo,tmdimetrosvariveisentre0,75e1,25m.Asformascilndricas,taiscomoobacilo
dafebretifideedadisenteria,apresentamumalargurade0,5a1,0meumcomprimentode2a3m.Algumas
formas filamentosas podem exceder os 100 m de comprimento, mas seu dimetro est de modo caracterstico,
entre 0,5 e 1,0 m. A figura 7 mostra o tamanho comparativo de uma clula de uma bactria, um vrus e um
protozorio.

MICROSCOPIAEMMICROBIOLOGIA

A microbiologia caracterizase pelo estudo de organismos muito pequenos e difceis de serem vistosclaramente e
individualizados a olho nu. Assim, para visualizao de microrganismos h necessidade de equipamentos de
aumentos, como por exemplo, o microscpio ptico composto ou microscpio de luz que um instrumento de
precisoquepermiteavisualizaodemicrorganismosobservadosatravsdele.Constituisebasicamentede:

PARTE MECNICA: representada pelo corpo ou brao do microscpio, o qual se encontra apoiado, pela
extremidadeinferioremumabasemetlicadetamanhoepesosuficientesparaasseguraroequilbriodoaparelho.A

extremidade superior do brao articulase com um tubo metlico conhecido como "canho", o qual suporta as
lentes.Odeslocamentodocanho(oudamesa,conformeomodelodomicroscpio)parabaixoeparacimaocorre
atravsdosparafusosmacroemicromtricos.Oparafusomacromtricopermitedeslocamentosrpidosedegrande
amplitude,aopassoqueomicromtricopermitepequenosdeslocamentos.

Naparteinferiordotubomicroscpicosocolocadasasobjetivas,emnmerovarivel,queserorosqueadasnum
dispositivomveldenominadoderevlver,oqualpermiteointercmbiodasobjetivas.Entreocanhoeabasedo
microscpioexisteumaplataformametlicachamadamesaouplatinadomicroscpio.Sobreaplatinacolocadaa
lminacomapreparaoaserexaminada,aqualserfixadapormeiodepresilhasafimdequepermaneaimvel.
Paracorrertodoocampodomicroscpio,existeumdispositivoespecialdenominadoCharriot,queporintermdio
dedoisparafusos,permiteodeslocamentodapreparao.

3.PARTEPTICA:constitudapelaslentesepelosistemadeiluminao

Lentesoculares:soadaptadasnaextremidadesuperiordotubodomicroscpioeatravsdelaqueoobservador
olha.Aoculargeralmenteproduzaumentosde10x,entretanto,existemocularesde5e15aumentos:

Lentesobjetivas:soconstitudasporumconjuntodelenteseachamsedispostasnaextremidadeinferiordotubo
do microscpio. A maioria dos microscpios possui trs objetivas a "seco" (pequeno, mdio e grande aumento) e
umaobjetivadeimerso(possuiumatarjetabrancaoupreta),

Objetivadeimerso:dmaioraumentoepermiteveroobjetocommaisnitidez.Atcnicasimples:colocaruma
gotadeleodecedrosobreapreparaoebaixaraobjetivaprpriasobrealmina,deformaqueesselquidodenso
seinterponhaentreaobjetivaeoobjetoaserexaminado.Nessecasoosraiosluminososnosofremdesvio,poiso
ndicederefraodoleoigualoumuitoprximoaodovidro.

Sistemadeiluminao:representadopelocondensadorquedirigeosraiosdeluzparaoobjetoeumafontedeluz,
a qual pode ser direta ou refletida por um espelho. O condensador possui um diafragma com a finalidade de
controlaraquantidadedeluzdesejada.

4.AUMENTODOMICROSCPIO
O aumento final da preparao dado pelo produto do aumento da objetiva multiplicado pelo valor da ocular.
Chamase poder resolvente de uma objetiva a capacidade que permite ver nitidamente o menor espao
compreendidoentredoispontos.

5.PASSOAPASSOPARAAFOCALIZAO
Colocaraoculardesejada;
Acenderafontedeluzacoplada;
Posicionarocondensadoromaisprximopossveldaplatina;
Verificarseodiafragmaestcompletamenteaberto;
Colocaremfocoaobjetivademenoraumento;
Fixarapreparaoaserexaminadanaplatina,atravsdaspresilhas;
Observarocampomicroscpico;
Paraobservarapreparaocomobjetivadeimerso,colocarumagotadeleodecedrosobrealmina;
Girar o revlver para colocar a objetiva de imerso em foco (geralmente a objetiva de imerso se distingue das
demais,porapresentarumfinoaneldecorpreta);
Olhandopelolado,fazerdescerocanhocomoparafusomacromtrico,atquealentefrontaldaobjetivafique
encostadanoleodecedro.Nosedevefocalizarbaixandoaobjetivaenquantoseolhapelaocular;
Olhando pela ocular, mover o parafuso macromtrico delicadamente, at conseguir focalizar grosseiramente a
preparao;
Moveroparafusomicromtricoatconseguirumaboafocalizao;
Paramudarocampomicroscpico,moverocharriotnumounoutrosentido.

6.PROCEDIMENTOSDEAULA
Reconheceraspartesdomicroscpio;

 Focalizar os preparados (lminas com bactrias) em imerso; repetir a focalizao tantas vezes quantas forem
necessrias;
Observaramorfologiadasbactriasfocalizadas.
Distanciaraobjetivadalmina,usandooparafusomacromtrico;Retiraralminadaplatina;
Limpartodasaslentescompapelabsorventeespecial;
Removeroleodecedrodaobjetivadeimersocompapelabsorvente;
Desligarosistemadeiluminao,recobriroaparelhocomarespectivacapa.
Reconhecerasparteseaprenderamanusearomicroscpioptico.
Aprenderafocalizarpreparadosnomicroscpio,inclusiveemimerso.


AtividadesRoteiro3
Nomedo(a)acadmico(a):__________________________________________________

ATIVIDADES
1.Citeasestruturasquediferenciagrampositivadenegativa

2..Falesobrefatoresdevirulncia

5.Comosereconheceaobjetivadeimerso?
______________________________________________________________________________

6.Comosecalculaoaumentofinaldoobjetoapsfocalizao?
_______________________________________________________________________________

7.Qualafinalidadedodiafragma?
_______________________________________________________________________________

8.Quaissoostiposdematerialgentico

9.Coloqueosnomesnaspartesdomicroscpio

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11

Roteiro4:MICROBIOTAHUMANANORMALEXPERIMENTODEPRICE

MicrobiotahumanaNormal

MicrobiotahumanaNormal
Todoserhumanonascelivredemicrorganismos.Aaquisiodamicrobiotabacterianaenvolveumatransmisso
infecciosa de microrganismos. A colonizao de superfcies expostas como a pele, o trato respiratrio, o sistema
gnitourinrioeotratodigestrio,comeaimediatamenteapsonascimentosejaduranteopartonormal,parto
cesarianaouamamentao.Padresdealimentao,hospitalizaoetratamentocomantibiticossofatoresque
afetamacomposiodamicrobiotaintestinalemcrianas.
Asdiversaspartesdocorpohumanoapresentamcondiesambientaisdiversasqueoferecemcertasvantagens
edesvantagensparaavidamicrobiana.Diferentesespciesdemicrorganismosadaptamseaosdistintosambientes
docorpo.
A microbiota normal humana desenvolvese por sucesses, desde o nascimento at as diversas fases da vida
adulta,resultandoemcomunidadesbacterianasestveis.
Osfatoresquecontrolamacomposiodamicrobiotaemumadadaregiodocorpoestorelacionadoscoma
natureza do ambiente local, tais como temperatura, pH, gua, oxigenao, nutrientes e fatores mais complexos
comoaaodecomponentesdosistemaimunolgico.
Estimase que o corpo humano que contm cerca de 10 trilhes de clulas seja rotineiramente portador de
aproximadamente100trilhesdebactrias.Acomposiodamicrobiotabacterianahumanarelativamenteestvel
com gneros especficos ocupando as diversas regies do corpo durante perodos particulares na vida de um
indivduo.Amicrobiotahumanadesempenhafunesimportantesnasadeenadoena.
Osmicrorganismosmembrosdamicrobiotahumanapodemexistircomo
(1)mutualistas,quandoprotegemohospedeirocompetindopormicroambientesdeformamaiseficienteque
patgenos comuns (resistncia colonizao), produzindo nutrientes importantes e contribuindo para o
desenvolvimentodosistemaimunolgico;
(2)comensais,quandomantmassociaesaparentementeneutrassembenefciosoumalefciosdetectveise
(3)oportunistas,quandocausamdoenasemindivduosimunocomprometidosdevidoinfecopeloVrusda
Imunodeficincia Humana, terapia imunossupressora de transplantados, radioterapia, quimioterapia anticncer,
queimadurasextensasouperfuraesdasmucosas.
Amicrobiotahumanaconstituiumdosmecanismosdedefesacontraapatognesebacteriana,masaindaquea
maioria dos componentes da microbiota normal seja inofensiva a indivduos sadios, esta pode constituir um
reservatrio de bactrias potencialmente patognicas. Muitas bactrias da microbiota normal podem agir como
oportunistas. Nestas condies a microbiota residente pode ser incapaz de suprimir patgenos transitrios, ou
mesmo, alguns membros da microbiota podem invadir os tecidos do hospedeiro causando doenas muitas vezes
graves.Emindivduossadios,algumasespciesdebactriasdamicrobiotaoralcausamcriesem80%dapopulao.

FontesMicrobianas
Ahigienizaodasmosereconhecida,mundialmente,comoumamedidaprimria,masmuitoimportanteno
controledeinfecesrelacionadasassistnciaasade.Porestemotivo,temsidoconsideradacomoumdospilares
daprevenoecontroledeinfecesdentrodosserviosdesade,incluindoaquelasdecorrentesda transmisso
cruzadademicrorganismosmultirresistentes.

Microbiotanormalporregiodocorponoserhumano.
Regio

Pele

Microbiotaencontrada
Propionibacterium,
Staphylococcus,Corynebacterium,
Micrococcus,Acinetobacter,
Brevibacterium,Pityrosporum
(fungo),Candida(fungo)eMalassezia
(fungo).

Olhos
(conjuntiva)

Staphylococcusepidermidis,S.
ureos,difteroides,
Propionibacterium,Corynebacterium,
estreptococos,Micrococcus.

Sistema
respiratrio
superior(narize
garganta)

Staphylococcusepidermidis,S.
ureosedifteroidesnonariz;
Staphylococcusepidermidis,S.
ureos,difteroides,Streptococcus
peneumoniae,Haemophiluse
Neisserianagarganta.

Boca

Intestino
Grosso

Sistema
reprodutivoe
urinrio

Streptococcus,Lactobacillus,
Actinomyces,Bacteroides,V
eillonella,Neisseria,Haemophilus,
Fusobacterium,Treponema,
Staphylococcus,Corynebacteriume
Candida(fungo).

E.coli,Lactobacillus,
Fusobacterium,Bacteroides,
Enterococcus,Bifidobacterium,
Enterobacter,Citrobacter,Proteus,
KlebsiellaeCandida(fungo).

Staphylococcus,Micrococcus,
Enterococcus,Lactobacillus,
Bacteroides,Difteroidesaerbicos,
Pseudomonas,KlebsiellaeProteus
nauretra;Lactobacilli,
Streptococcus,Clostridium,Candida
albicans(fungo)eTrichomonas
vaninalis(protozorio)navagina.

Comentrios
Amaioriadosmicrbiosemcontatodireto
comapelenosetornaresidentedevidoasecrees
deglndulasdeleosesuor,quepossuem
propriedadesantimicrobianas.
Aqueratinaumabarreiraresistente,eo
baixopHdapeleinibeosmicrbios.
Apeleapresentasecombaixaumidade.

Aconjuntivacontmbasicamenteamesma
microbiotaencontradanapele.
Aslgrimaseoatodepiscareliminamalguns
micrbiosouimpedemqueoutroscolonizem.
Emboraalgunsmicrbiosdamicrobiota
normalsejampotencialmentepatgenos,sua
capacidadeemcausardoenareduzidapelo
antagonismomicrobiano.
Secreesnasaismatamouinibemmuitos
microorganismos,enquantoomucoeosmovimentos
ciliaresremovemmuitosmicrbios.
Umidadeabundante,caloreapresena
constantedealimentosfazemdabocaumambiente
idealquesuportaumavastaediversapopulao
microbiananalngua,nasbochechas,nosdentese
nasgengivas.
Asmordidas,amastigao,osmovimentosda
lnguaeofluxodesalivadesalojamdiversos
micrbios.Asalivacontmvriassubstncias
antimicrobianas.
Ointestinogrossocontmosmaiores
nmerosdemicroorganismosdamicroflora
residentenocorpo,principalmenteemrazoda
disponibilidadedeumidadeenutrientes.
Omuco,adescamaoeaproduodeuma
sriedesubstanciasantimicrobianaprevinemque
muitosmicrbioscolonizemorevestimentodo
tratodigestrio.
Aparteproximaldauretraemambosos
sexoscontmumamicrobiotaresidente;avagina
possuiumapopulaodemicrbioscido
tolerantesemvirtudedanaturezadesuas
secrees.
Omucoeadescamaoperidica
previnemquemuitosmicroorganismoscolonizemo
revestimentodotratogenitourinrio;ofluxode
urinaremovemicrbiosmecnicamente.
Cliosemucoexpelemmicrbiosdecrvice
uterinaparaavagina,ondeaacidezinibeoumata
muitosmicrbios.

Sucesso Microbiana Intestinal

Ps-parto
Colonizadores secundrios:
Bacteroides, Clostridia,
Bifidobacterium

Nascimento
Colonizadores primrios:
E. coli e Enterococcus

A partir dos 6 meses

Microbiota mais diversa e
complexa

At 6 meses

Adulto

Microbiota sofre
Reduo gradual da
interferncia do tipo diversidade Bacteroidetes
alimentao
e Firmicutes e estabilidade

Junho-2010 n. 12

ART I GO
M icrobiota endgena humana e a importncia do
Projeto M icrobioma Humano
Ao falarmos em biodiversidade, mu itas
vezes recordamos da exuberante variedade de plantas e
animais que habitam os mais variados ecossistemas do nosso
planeta, sejam eles terrestres ou aquticos. Aos poucos, vamos
pensando tamb m nas fantsticas adaptaes desses
organismos, que esto associadas com as mais distintas
condies impostas pelo ambiente em que vivem.
Porm, mu itas vezes esquecemos que o mundo e o nosso
corpo, em part icular, esto literalmente colonizados por uma
rica e co mplexa d iversidade de microorganismos, que, a cada
dia, tem surpreendido os estudiosos com suas elevadas taxas
de mutaes, e, consequentemente, de adaptao e resistncia
s mais variadas condies ou, no caso dos microorganis mos
patognicos, aos mais potentes antibiticos existentes.
Segundo Burton & Kirk (2005), o nosso corpo apresenta
aproximadamente 10 trilhes de clulas e cerca de dez vezes
ma is microorganismos, habitando a superfcie e o interior do
nosso organismo. Ao conjunto desses microorganismos, que
incluem as bactrias, fungos, vrus e protozorios
denomina mos microbiota endgena humana, chamada
antigamente de flora normal, que composta de 500 a mil
espcies diferentes.
A microbiota endgena humana, tambm denominada
residente, varia muito nas mais diversas regies do nosso
corpo, dependendo de vrias condies, tais como, umidade,
pH, temperatura e nutrientes disponveis (BURTON & KIRK,
2005). Segundo um estudo desenvolvido pelos
Institutos Nacionais de Sade dos Estados
Unidos (NIH), que tinha como objetivo fazer
uma anlise gentica dos microorganismos
coletados em vrias regies da superfcie
do corpo de pessoas saudveis, as reas
secas e midas da pele tem u ma
diversidade maior de micrbios do que as
oleosas.
Os
pesquisadores
desse
estudo
afirmaram que axilas midas e co m plos,
por exemp lo, ficam a u ma curta distncia de
antebraos lisos e secos, mas, esses dois locais so to
ecologicamente diferentes quanto florestas tropicais e

Por: Monique Santos do Carmo

desertos. Partindo dessa linha de raciocnio,
podemos afirmar que somos um verdadeiro bio ma,
constitudos por ricas comunidades microbianas que mantm
relaes indispensveis com o nosso organismo, sendo muito
importante para a garantia de nossa sobrevivncia.
importante ressaltar que, alm da microbiota residente, o
nosso corpo est constantemente sujeito a adquirir outros
microorganis mos ( medida que nos alimentamos e
deslocamos para os mais diversos lugares), constituindo a
chamada microbiota transiente. Esta microbiota normalmente
reside em carter temporrio no interior ou exterior do corpo.
Porm, em alguns casos pode chegar a desenvolver patologias
(quando a microbiota residente no est em condies de
competir co m eles) (BURTON & KIRK, 2005).
Alm da competio, existem outros mecanismos que
inibem ou dificultam a mult iplicao da microbiota residente
em nosso corpo, tais como: a produo de excrees ou
secrees corpreas (urina, fezes, suor e lgrimas), o carter
cido ou alcalino de determinadas regies do corpo e at
mes mo o banho, que pode remover determinados
microorganis mos, dependendo do grau de proliferao
(BURTON & KIRK, 2005).
Aquisio da microbiota endgena
Um feto no apresenta microbiota endgena, de modo que,
o primeiro contato com os microorganismos ocorre no parto.
Quando a criana nasce de um parto normal, a microbiota dela
inicialmente constituda pelas bactrias da flora fecal
materna, que contamina o canal do parto. Porm,
quando a criana nasce de um parto cesariano, de
incio, no h participao da flora fecal da
me, de modo que o aparecimento de
enterobactrias e anaerbios (bactrias da
flora intestinal) mais tardio. Vale lembrar
que, em ambos os casos, a flora da criana
constituda tambm a partir do contato com
bactrias do ar e dos alimentos. Sendo assim,
mu ito importante que os hospitais tenham um
bom padro no que diz respeito s condies
sanitrias, visto que, como as crianas esto em processo
de composio da flora, elas no apresentam uma microbiota

ATIVIDADESRoteiro4
Nomedo(a)acadmico(a):__________________________________________________

AtividadePrtica

ParteIPrtica
Dividirofundodaplacadegarsangueemtrspartescomcanetapermanente.Identificaraplaca.
Umedeceroswabemguaestril
Esfregarsobreapalmadamoesemearemumapartedaplacaidentificando:
MOSEMLAVAR
Lavarasmoscomdetergente(sabo)vigorosamente,emtodasassuperfciespor5minutos,semearnaplacae
identificar:MOLAVADA
Desinfetarasmosprlavadascomlcool70%durante1minuto.
A seguir esfregar nas palmas da mo com swab umedecido e semear na terceira parte do meio de cultura.
Identificar:MODESINFETADA.Incubara37por24horas

ParteIIResponda
1.Exemplifiquefatoresambientaisquepodemcontribuirparaacomposiodamicrobiota.
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________

3.Expliqueporqueamicrobiotahumananormalpodeserbenficaparaoorganismo.
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________

4.Descrevaemquesituaoamicrobiotahumanapodesetornaroportunista.

_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________________________

ParteIIIResultadoPrtica
1.Qualreafoiademenornmerodecolnias.Porqueistoocorreu?
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________

Roteiro5:ESTUDODACLULABACTERIANA:FIXAOECOLORAO
(SIMPLESEDIFERENCIADORADEGRAM)

Corantessosubstnciasquepossuemapropriedadedetransmitirsuacoraoutroscorpos.Preparaescoradasso
comumente usadas no exame microscpico de bactrias em microbiologia, nas quais esfregaos do material so
submetidosaodeumoumaiscorantes,apsfixao.

COLORAODEBACTRIAS

Asbactriaspodemserobservadasdeduasmaneiras:comesemcolorao.
1Semcolorao:osmicrorganismossoobservadosvivos,podendoserevidenciadaamotilidade.
2Comcolorao:osmicrorganismossocoradosapsseremmortos.

Apesar de quimicamente distintas do meio que as rodeiam, as bactrias so quase incolores no.
Apresentando contraste suficiente com o meio em que se encontram o que dificulta sua visualizao. A diferena
qumicaentreasbactriaseomeioquenospermitedistinguilaspormeiodecolorao,poisocorantenoreage
comomeioexterno,tornandoasquandocoradas,maisvisveisaomicroscpio.Destamaneirapoderemosobservar
suas formas fundamentais, dimenses e arranjos. A colorao apresenta ainda outras vantagens, pois com a
utilizao da objetiva de imerso teremos uma maior amplificao da imagem, alm de nos permitir o estudo de
estruturasdaclulabacterianacomo:paredecelular,endsporos,flagelosecpsula.

As bactrias coramse com os derivados de anilina (azul de metileno, fucsina,cristal, violeta, etc..) que so
corantesbsicos(oncolorido=ction)equepossuemafinidadepelocitoplasmadestasclulas.Estaafinidadese
deve ao fato do citoplasma bacteriano apresentar carga eltrica negativa, derivada, principalmente, dos radicais
fosfatosdoscidosnuclicosqueaseencontram.

Sodoisosprocessosquenospermitemcorarasbactrias:
COLORAOSIMPLES:
Nestacoloraoutilizamosapenasumcoranteeelabaseiasenadiferenaqumicaexistenteentreasbactriaseo
meio.Umavezcoradas,apresentamcontraste,podendosermaisbemvisualizadas.

COLORAODIFERENCIAL:
Nesta colorao utilizamos geralmente 2 corantes, alm do mordente e do diferenciador. Baseiase na diferena
qumica existente entre as bactrias e consequentemente na reao diferente que as bactrias podem apresentar
frente a um determinado corante. utilizada para distinguir diferentes tipos de bactrias. Os mtodos de Gram
(1884)edeZiehlNeelsen(1882)soexemplosdecoloraodiferencial.

COLORAODEGRAM
A parede celular de bactrias Grampositivas composta basicamente por peptideoglicano, que constitui uma
espessa camada ao redor da clula. Imersos nesta camada podem estar presentes outros polmeros, como cidos
lipoteicicosepolissacardeos.NasbactriasGramnegativasopeptideoglicanoconstituiumacamadabasaldelgada,
sobreaqualseencontraoutracamada,compostaporlipoprotenas,fosfolipdeos,protenaselipopolissacardeos,
denominada membrana externa. A colorao de Gram consiste basicamente em tratar bactrias sucessivamente
comcristalvioleta,lugol,lcoolesafranina.OcristalvioletaeolugolpenetramtantonasbactriasGrampositivas
quantonasGramnegativas,formandoumcomplexodecorroxa.Otratamentocomlcoolaetapadiferencial;nas
GRAMPOSITIVAS, o lcool no retira o complexo cristal violeta+lugol, pois sua ao desidratante faz com que a
espessacamadadepeptideoglicanosetornemenospermevel,retendoocorante.NasGRAMNEGATIVAS,devido
pequena espessura da camada de peptdeoglicano, o complexo corado extrado pelo lcool, deixando as clulas
descoradas.Otratamentocomsafranina:
noalteraacorROXAdasGRAMPOSITIVAS,
alteraacordasGRAMNEGATIVAS,descoradaspelolcooltornamseAVERMELHADAS.

Muitas explicaes j foram sugeridas na tentativa de elucidar o mecanismo da reao de Gram. As mais
plausveis dizem respeito diferena na estrutura qumica da parede celular. Num primeiro momento, todas as
bactrias ( G+ e G ) absorvem igualmente o cristal violeta (corante bsico que possui afinidade pelos seus
citoplasmas, devido a carga eltrica negativa oriunda principalmente dos radicais fosfatos dos cidos nuclicos). A
seguir,olugolreagecomocristalvioletaformandoocomplexoiodopararosanilina,quesefixaecoraaclulamais
intensamente.
Posteriormente,quandotratamosoesfregaocomlcool,asbactriassecomportamdemaneiradiferente:

1) as Grampositivas no se descoram facilmente pelo tratamento com o lcool. Isto se explica pelo fato de
comporem sua parede celular uma espessa camada de peptideoglicano, alm de outros possveis componentes,
como: c. teicicos, protenas. polissacrides e etc., substncias estas, no solveis em lcool. O lcool atua
desidratandoasvriascamadasdestaparede,oquetrazcomoconseqnciaumadiminuionasuaporosidadee
esta diminuio reduziria a permeabilidade da parede, dificultando a extrao (sada) do complexo CVI ( que se
encontranocitoplasma)dedentrodaclula.Almdisto,parecehaverumaretenodoCVInaparedeapsaao
do lcool, o que tambm contribuiria para a diminuio de sua porosidade. A bactria Grampositiva permanece
entocomamesmacoloraoatofinal.
2)asbactriasGramnegativassodescoradaspelotratamentocomolcool.Talfatoseexplicaporcomporema
parededestasbactrias:delgadacamadadepeptideoglicano(menorentrecruzamento,oquenosuficientepara
impedir a passagem do solvente) alm de substncias ricas em lpides (lipoproteina de apoio, fosfolpides da
membrana externa e lipdio A que participa do LPS). O lcool solubiliza (dissolve) estes lipdeos (muitas vezes
extraindo a camada da membrana externa), aumentando a porosidade da parede, o que contribuiria para um
aumento da permeabilidade. Assim sendo, o lcool penetra dentro da clula (atravessando a membrana
citoplasmtica),removendoocomplexoCVI,descorandoaclula.Finalmenteasbactriasdescoradaspelolcool,
por no apresentarem contraste que permita sua visualizao, seriam coradas pelo corante secundrio que a
fucsina.Asclulasquenoforamdescoradaspelolcool(etiveramsuapermeabilidadediminuda)permaneceriam
coradascomacordocoranteprincipalatofinaldacolorao,poisnoabsorveriamafucsina.

AtividadesRoteiro5
Nomedo(a)acadmico(a):__________________________________________________

ParteIPrtica
a)Esfregao:
Identificaroladodalminaondeserfeitooesfregao,assimcomosuaprocedncia,natureza,etc.;
Quandoalminaapresentarextremidadefosca,amesmadeveserdeixadaesquerdaeparacima;
Utilizaraaladeplatinaparaobteromaterial;
Tomarumalmina(anteriormentepreparada)comamoesquerdaedepositarnocentroaamostradecultura
commovimentosderotao,paraobterumesfregaodeformaoval,bemfinoeuniforme;
Deixaroesfregaosecarnaturalmente,nasproximidadesdachama.

b)Fixao:
Fixaroesfregaocortandolentamenteachamapor3vezes,afimdequeomaterialfiquebemaderente
lmina.Afixaosemprefeitadoladocontrrioaoesfregaobacteriano.

c)TcnicadecoloraodeGram:
Fazerumesfregaobemhomogneo,fixarpelocaloreesperaresfriar;
Cobrircomcristalvioletaedeixaragir1minuto;
Lavarrapidamenteemgua;
Cobrircomsoluodelugolpor1minuto;
Lavaremguacorrente;
Descorarpelolcoolabsolutooulcoolcetona(aproximadamente15segundos);
Corarcomsafraninapor30segundos;
Lavaremgua,secareobservaremobjetivadeimerso.

e)Resultados:
ClulasGrampositivas:roxoescuro.
ClulasGramnegativas:avermelhadas(rosadas).

DesenheaspreparaescoradaspeloGramobservadas.

ParteIIResponda
1.Comosefazafixaodeumesfregaobacteriano?Qualafinalidadedafixao?

Roteiro6:COLORAODEGRAMDASALIVA

1.OBJETIVOS
Observarasmorfologiasbacterianasencontradasnaboca
PraticaratcnicadacoloraodeGram;

2.TcnicadecoloraodeGram:
Embeberumswabestrilemguaecoletaramostrasdostrsnichos:boca,narizepele
Fazerumesfregaobemhomogneo,fixarpelocaloreesperaresfriar;
Cobrircomcristalvioletaedeixaragir1minuto;
Lavarrapidamenteemgua;
Cobrircomsoluodelugolpor1minuto;
Lavaremguacorrente;
Descorarpelolcoolabsolutooulcoolcetona(aproximadamente15segundos);
Lavarrapidamenteemgua
Corarcomsafraninapor30segundos;
Lavaremgua,secareobservaremobjetivadeimerso.

3.Resultados:Grampositivas:roxoescuroGramnegativas:avermelhadas(rosadas).

4.ATIVIDADES:
DesenheaspreparaescoradaspeloGramobservadas.

Descrevaostiposdecolniasencontradas
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________

Roteiro7:CRESCIMENTOECULTIVOMICROBIANO

Quandoabordamosotemacrescimentomicrobiano,estamosnosreferindoaonmerodeclulas,noaotamanho
delas.Osmicrorganismosexibemosmaisdiversosmecanismosnutricionaisparaoseucrescimento.Emrelaoaos
procariotos (Bacteria e Archaea), a nutrio ocorre predominantemente pela absoro, uma vez que a grande
maioriadestesorganismospossuiumaespessaparedecelular,impossibilitandoarealizaodefagocitose.
A nutrio microbiana pode ser definida como um mecanismo que fornece s clulas as ferramentas qumicas
necessrias sntese dos diversos monmeros para o seu desenvolvimento. Essas ferramentas qumicas
correspondemosnutrientes.Nemtodososnutrientessonecessriosnasmesmasquantidades;osmacronutrientes
sonecessriosemgrandesquantidades.Emcontrapartida,osmicronutrientesouelementostraossorequeridos
emmenoresquantidades.
Osfatoresnecessriosparaocrescimentomicrobianopodemserdivididosemduascategoriasprincipais:fsicose
qumicos. Os fatores fsicos incluem temperatura, pH e presso osmtica. Os fatores qumicos incluem fontes de
carbono e nitrognio (principais macronutrientes), enxofre, fsforo, potssio, magnsio, clcio e sdio (outros
macronutrientes),micronutrientes,fatoresorgnicosdecrescimentoeoxignio.

2.FATORESFSICOS.
2.1Temperatura:
Osmicrorganismoscrescebemnastemperaturasideaisparaossereshumanoseanimais.Contudocertasbactrias
socapazesdecresceremextremosdetemperaturaqueimpediriaasobrevivnciadequasetodososorganismos
eucariticos.
Osmicrorganismossoclassificadosemtrsgruposprincipaiscombaseemsuafaixapreferidadetemperatura:os
psicrfilos, que crescem em baixas temperaturas; os mesfilos, que crescem em temperaturas moderadas; e os
termfilos,quecrescememaltastemperaturas.
Cadaespciebacterianacresceaumatemperaturamnima,timaemximaespecfica.Atemperaturamnimade
crescimento a menor temperatura na qual a espcie pode crescer. A temperatura tima de crescimento a
temperaturanaqualaespciecrescemelhor.Atemperaturamximadecrescimentoamaiortemperaturanaqual
ocrescimentopossvel.

Arefrigeraoomtodomaiscomumdepreservaodosalimentosetemcomobaseoprincpiodequeas
velocidades de reproduo microbiana decrescem nas baixas temperaturas, podendo ficar totalmente dormentes
em temperaturas prximas do congelamento. A temperatura dentro de um refrigerador bem ajustado retardar
muito o crescimento da maioria dos organismos deteriorantes, impedindo o crescimento da maior parte das
bactriaspatognicas.


Os microrganismos mesfilos (temperatura de crescimento entre 25 e 40oC) so os mais comumente
encontrados. Estes se adaptaram a viver dentro dos corpos dos animais geralmente tm uma temperatura tima
prximadaqueladeseushospedeiros.Atemperaturatimadecrescimentoparaamaioriadasbactriaspatognicas
de cerca de 37oC, e as estufas para culturas clnicas em geral so ajustadas nessa temperatura. Os mesfilos
incluem a maioria dos organismos deteriorantes e patognicos. Os termfilos so microrganismos capazes de
cresceremtemperaturasaltas,comumatemperaturatimadecrescimentoemtornode50a60oC.

2.2pH:

Osorganismosdevemmanterumequilbrioconstanteentrecidosebasesparapermaneceremviveis.Se
umaconcentraodecidooubasemuitoaltaoumuitobaixa,asenzimasmudamdeformaenopromovemde
maneiraeficienteasreaesqumicasdentrodaclula.Amaioriadasbactriascrescemelhoremumafaixaestreita
depHpertodaneutralidade,entre6,5e7,5.PoucasbactriascrescememumpHcidoabaixode4.Essaarazo
pelasquaismuitosalimentoscomoochucrute,piclesemuitosqueijossoprotegidosdadeterioraopeloscidos
produzidos pela fermentao bacteriana. No entanto, algumas bactrias chamadas de acidfilas, so resistentes a
acidez.Ex.Helicobacterssp.,bactriaresponsvelporgastriteaguda,lceras(gstricaseduodenais),dorabdominal
eatcncernohomemeanimais.Asalcalfilassobactriasquecrescememlagosdesodacusticanosdesertosdo
Oesteamericano,empH11,5.OsprocariotosemvezdeseadaptaremaopHdesfavorvel,comofazememrelao
temperatura desfavorvel, eles resistem ao mesmo bombeando prtons para dentro ou para fora de suas clulas,
mantendo,comisso,umpHinternoquaseconstante.
2.3Pressoosmtica:

O homem adiciona sal a sua comida a fim de conservla muito antes de saber que o sal possua a
propriedadedeinibirocrescimentodosmicrorganismosqueestragamosalimentos.NosculoXIX,acarnedeporco
salgada era o principal produto consumido pelos marinheiros em longas viagens. Concentraes altas de sais
interrompemcompletamenteocrescimentodemicrorganismosqueestopresentesnosalimentos.
3.FATORESQUMICOS.

As populaes microbianas so to difundidas que elas definem a extenso da biosfera: onde existe vida,
existem micrbios; onde no existem micrbios, no existe vida. Uma caracterstica chave dos microrganismos
correspondesuacapacidadederealizarreaesqumicasedeorganizarasmolculasemestruturasespecficas.O

resultadofinaldessaorganizaoocrescimento(replicao).Antesqueareplicaocelularocorra,umavariedade
dereaesqumicasdeveserrealizadapelaclula,denominadometabolismo.

3.1Carbono:

Almdagua,umdosfatoresmaisimportantesparaocrescimentomicrobianoocarbono.Ocarbonoo
esqueletoestruturaldamatriaviva;elenecessrioparatodoscompostosorgnicosqueconstituemumaclula
viva.Metadedopesosecodeumaclulabacterianacompostadecarbono.Estudosdemonstramqueasbactrias
podem assimilar vrios compostos orgnicos de carbono, utilizandoos na sntese de novos materiais celulares.
Aminocidos, cidos graxos, cidos orgnicos, aucares, bases nitrogenadas, compostos aromticos e outros
inumerveis compostos orgnicos podem ser utilizados por uma ou outra bactria. Alguns procariotos so
autotrficos, isto , so capazes de sintetizar todas as suas estruturas orgnicas a partir do dixido de carbono
(CO2).

3.2Nitrognio,enxofreefsforo:

Almdocarbono,osmicrorganismosnecessitamdeoutroselementosparasintetizaromaterialcelular.Por
exemplo, a sntese de protenas requer quantidades considerveis de nitrognio e enxofre. Aps o carbono, o
elementomaisabundantenasclulasonitrognio.Umaclulabacterianatpicacompostaporcercade14%do
seupesosecodenitrognio.Onitrognioumimportanteelementoconstituintedeprotenas(aminocidos),cidos
nuclicosevriosoutroscompostoscelulares.Podeserencontradonanaturezanaformainorgnica(amniaNH3,
nitrato NO3 ou N2) ou orgnica (compostos orgnicos nitrogenados aminocidos e bases nitrogenadas dos
nucleotdeos).Algumasbactriasimportantes,comomuitasdascianobactriasfotossintticasutilizamonitrognio
gasoso (N2) diretamente da atmosfera. Esse processo chamado de fixao do nitrognio, e utilizado por
microrganismosdevidalivre,dosoloenasrazesdasplantasleguminosas.

Oenxofrenecessriodevidoaoseupapelestruturalnosaminocidos,cistenaemetionina,etambmpor
estarpresenteemumasriedevitaminas,comoatiamina,biotina,cidoliplicoenacoenzimaA.Oenxofresofre
vrias transformaes qumicas na natureza, muitas das quais realizadas exclusivamente por microorganismos,
tornando se disponvel aos organismos sob vrias formas. Fontes importantes de enxofre incluem o on sulfato
(SO42),osulfeto(HS)eosaminocidoscontendoenxofre.

Ofsforoessencialparaasntesededoscidosnuclicosedosfosfolipdeosdasmembranascelulares.
tambmencontradonasligaesdeenergiadoATP.
3.3Outrosmacronutrientes(K,Mg,CaeNa):

Todososorganismosrequerempotssio(K),incluindoumavariedadedeenzimasenvolvidasnasntesede
protenas.Omagnsio(Mg)possuiimportantepapelnaestabilizaoderibossomos,membranascelularesecidos
nuclicos, alm da atuar ativamente em muitas enzimas. O clcio (Ca) auxilia na estabilizao da parede celular e
desempenha papelchave na termoestabilidade dos endsporos. O sdio (Na) requerido apenas por alguns
microrganismos, dependendo da influncia do hbitat no qual se desenvolve. Ex.: microorganismos marinhos
geralmenterequeremsdioparaoseucrescimento.
3.4Elementostraos(micronutrientes):

Os microrganismos requerem quantidades muito pequenas de elementos traos (micronutrientes), como

ferro, cobre, molibdnio e zinco. Embora necessrios em pequenssimas quantidades, os elementos traos so
fundamentais para o funcionamento celular adequado dos macronutrientes, desempenhando papel estrutural em
variasenzimas.Seummeiodeculturaforconfeccionadopelaadiodecompostosqumicosaltamentepurificadose
dissolvidos em gua destilada altamente purificada, poder haver a deficincia de um ou mais elementos traos,
prejudicandoodesenvolvimentobacteriano.
3.5Fatoresdecrescimento:

Os fatores de crescimento incluem vitaminas, aminocidos, purinas e pirimidinas. Embora a maioria dos
microrganismos seja capaz de sintetizar todos esses compostos, no dependendo de fontes externas, alguns
microrganismos os requerem prformados a partir do meio. As vitaminas correspondem ao fator de crescimento

maiscomumenterequerido,comoatiamina(vitaminaB1),biotina,piridoxina(vitaminaB6)ecolabamina(vitamina
B12).
3.6Oxignio:
Estamos acostumados a pensar no oxignio (O2) como um elemento necessrio para a vida, mas, em algumas
circunstncias,esseelementopodeserconsideradoumgstxico.

4.CULTIVOMICROBIANO

Os meios de cultura destinamse ao cultivo artificial dos microrganismos. uma mistura de nutrientes
necessrios ao crescimento microbiano. Basicamente deve conter a fonte de energia e todos os elementos
imprescindveisvidadasclulas.Aformulaodeummeiodeculturadevelevaremcontaotiponutritivonoqual
omicrorganismopertence,considerandoseafontedeenergia(luzousubstnciaqumica),osubstratodoadorde
eltrons (orgnico ou inorgnico) e a fonte de carbono (protenas ou aucares), fontes de nitrognio (peptonas).
Estabelecidas as condies gerais, o meio de cultura deve ainda atender as necessidades especficas do grupo, da
famlia, do gnero ou da espcie que se deseja cultivar. Assim, imprescindvel acrescentar ao meio, vitaminas,
cofatores, aminocidos, etc., quando estes compostos no so sintetizados pelos microrganismos que se deseja
cultivar.

ClassificaodosMeiosdeCultura
a)Quantoaconsistncia:MeiolquidoeMeiosslidosemplacasdePetrioutubos
b)Quantoafuno:simples,enriquecidos,seletivos,seletivosdiferenciais

TcnicadeEsgotamentoemPlaca

Colnia=conjuntodemicrorganismosoriginadosapartirdeumanicaclula,emmeiodecultivoslido
Diversidademorfolgicadascolnias

CRESCIMENTO

CURVADECRESCIMENTOMICROBIANO

5
4

3
2

10

12

14

16

18 20

Tempo (horas)

AtividadeRoteiro7
Nomedo(a)acadmico(a):__________________________________________________

ParteIPrtica

PREPARODOSMEIOSDECULTURA
Pesagemdop(meiodecultura)eDissoluoemgua
AquecimentoembanhoMariaparadissoluodoAgar
Distribuioemtubos
Autoclavao
Plaqueamento
Comprovaodaesterilidade
Armazenamentosobrefrigerao

PROCEDIMENTOS:
Semeaduraemmeiolquido
Semeaduraemplaca
SemeaduraemplacaporesgotamentoemplacadePetri
Dividirasplacasemdoispedaosenomelas:Bactria1eBactria2
Carregaraalacomcadaumadasbactriaseemmovimentosdeziguezagueespalharasbactrias
Incubaraplacaa37Cpor2448horaseanalisarosresultados

ParteIIResponda
a)Qualoobjetivodatcnicadeesgotamento?
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________

b)Qualaimportnciadascondiesdeincubao?
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________

c)Oquerepresentaumacolnia?
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________

ParteIIIResultados

a)Indiquesehouvecrescimento.
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________

b)Comoocorreuocrescimentonomeiolquido.
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________


Roteiro8:OBTENODECULTURADEAMOSTRADESALIVA

O contato contnuo do ser humano com uma imensa variedade de espcies microbianas ao longo de sua
existncia faz com que a cavidade bucal, assim como outros locais do corpo, abrigue, mesmo em condies de
normalidade,centenasdediferentesespciesdemicrorganismos,taiscomo,bactrias,fungos,vruseprotozorios.
Acavidadebucaldiferesedeoutroslocaisdoorganismo,vistoque,umsistemadecrescimentoaberto,ouseja,os
nutrientes e os microrganismos so repetidamente introduzidos e removidos deste sistema. Este meio abriga
diversos locais distintos, com caractersticas fsicas qumicas distintas (temperatura, tenses de oxignio,
concentrao de ons H+, disponibilidade de nutrientes, etc..), sendo que cada mantm o crescimento de uma
comunidademicrobianacaracterstica.

Acavidadeoralpodeserconsideradaumaincubadoramicrobianaideal.Suascaractersticasintrnsecasalta
umidade, temperatura relativamente constante (34 a 36C), pH prximo da neutralidade permitem o
estabelecimentodeumamicrobiotaaltamentecomplexacompostapormaisde350espciesbacterianashabitando
asdiversasreasdaboca.Cercade70%dasbactriassocultivadasatravsdemtodosdeanaerobiose.
Somente se estabelecem os microrganismos que possuem capacidade de aderncia s superfcies da
cavidadebucal,ouquedealgumamaneirafiquemretidos.Algumasbactriasconseguemsefixaremsulcos,fissuras
ou espaos interproximais. Outros microrganismos tm que utilizar mecanismos especficos de aderncia para
vencerasforasderemoodassuperfciesbucais.Ascaractersticasdestassuperfciessoespecficasesomente
determinadas bactrias so capazes de aderir. Isto significa que a boca possui uma microbiota prpria e que a
maioriadeseuscomponentesnocapazdecolonizarqualqueroutrolocaldocorpohumano.

OBJETIVOS

Cultivodebactriasorais

Procedimentos

Comauxliodeumapipeta,coleteumaamostradesalivaeespalhenomeiodecultura.

ATIVIDADES

Desenheaplacademeiodecultura

Roteiro9:MICRORGANISMOSDOMEIOAMBIENTE

Existemdiversostiposdistintosdemorfologiascoloniais,oquepodevariarentreespcies,comportamento
emdeterminadosmeiosdecultura.Afiguraabaixoexemplificaosdiversostiposcoloniaisquepodemser
encontrados,tantonaforma,elevaoemargem.

OBJETIVOS
Coletarumaamostraemumdeterminadolocal;
Observarocrescimentomicrobianoeosdiferentestiposdecolnias;

ATIVIDADES:

Emquelocalfoirealizadaacoleta?
________________________________________________________________________________

Quantostiposdistintosdecolniascresceram?

Descrevaeconteonmerodecolniasquecresceramnaplacadepetri.
_______________________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________________
_________________________________________________

EsquematizeaspreparaescoradaspeloGramobservadas.

Roteiro10:METABOLISMOMICROBIANO

Osprocessosdemanutenodavida,mesmodosorganismosestruturalmentemaissimples,comoosprocariotos,
envolvemumgrandenmerodereaesbioqumicascomplexas.Amaioriadosprocessosbioqumicosdasbactrias
tambm ocorre nos microrganismos eucariticos e nas clulas dos organismos pluricelulares, incluindo os seres
humanos. Mas existem reaes exclusivas das bactrias, possiblitando por exemplo o processo de digesto da
celulose ou a utilizao de petrleo como nutriente. Com este metabolismo, as bactrias transformam elementos
depois que outros organismos os usaram. Outras bactrias podem utilizar elementos inorgnicos para o seu
desenvolvimento,comoodixidodecarbono,ferro,enxofre,gshidrognioeaamnia.

IMPORTNCIADOMETABOLISMOBACTERIANO:

Relaomicrorganismosedoenas;
Papeldosmicroorganismosnanatureza;
Exploraoeconmicadosmicrorganismos;
Cultivoecontroledosmicrorganismos;
Desenvolvimentodemtodosmolecularesparadiagnsticoecontrolemicrobiano;
Controledosprocessosdedeterioraodemateriais;
Reciclagemdamatria.

2.REAESCATABLICASEREAESANABLICAS.

Otermometabolismoutilizadoparasereferirsomadetodasasreaesqumicasdentrodeumorganismo
vivo.Comoasreaesqumicastantoliberamquantorequeremenergia,ometabolismopodeservistocomoumato
de balanceamento de energia. Consequentemente, o metabolismo pode ser dividido em duas classes de reaes
qumicas:aquelasqueliberamenergia(catablicas)eaquelasquerequeremenergia(anablicas).

Nas clulas vivas, as reaes qumicas reguladas por enzimas que liberam energia geralmente so aquelas
envolvidas no catabolismo (reao catablica ou degradativa quebra de compostos orgnicos complexos em
compostosmaissimples).

As reaes catablicas em geral, so reaes hidrolticas (reaes que utilizam gua e nas quais as ligaes
qumicassoquebradas)esoexergnicas(produzemmaisenergiadoqueconsomem).
Ex.:quebradoacaremdixidodecarbonoeguareaocatablica.

As reaes reguladas por enzimas que requerem energia esto envolvidas principalmente no anabolismo
(reao anablica ou biossinttica construo de molculas orgnicas complexas a partir de molculas mais
simples).Osprocessosanablicosmuitasvezesenvolvemreaesdesntesepordesidratao(reaesqueliberam
gua) e so endergnicos (consomem mais energia do que produzem). Ex.: formao de protenas a partir de
aminocidosouaformaodepolissacardeosapartirdeacaressimplesreaoanablica.

Asreaescatablicasfornecemosblocosconstrutivosparaasreaesanablicaseaenergianecessriapara
dirigilas. Esse acoplamento de reaes que requerem energia e liberam energia possvel pela molcula de
trifosfatodeadenosina(ATP).OATParmazenaaenergiaderivadadasreaescatablicasealiberaposteriormente
paradirigirasreaesanablicasourealizaroutrostrabalhoscelulares.

AsreaesanablicassoacopladasquebradoATP,easreaescatablicassoacopladassntesedoATP.
A composio qumica de uma clula viva est mudando constantemente, enquanto algumas molculas so
quebradas, outras so sintetizadas. Esse fluxo balanceado de compostos qumicos e de energia mantm a vida de
umaclula.

Somente parte da energia liberada no catabolismo est disponvel para as funes celulares, pois parte da
energia perdida no ambiente como calor. Antes de se discutir como as clulas produzem energia, devese
considerar as principais propriedades de um grupo de protenas envolvidas em quase todas as reaes
biologicamente importantes: as enzimas. As vias metablicas da clula (sequncias de reaes qumicas) so
determinadasporsuasenzimas,queporsuavezsodeterminadaspelaconstituiogenticadaclula.

3Produodeenergia:
As vrias reaes nas vias catablicas concentram energia dentro das ligaes do ATP, que serve como um
transportadorconvenientedeenergia.OATPreferidocomotendoligaesdealtaenergia,masnaverdade,o
termomaisapropriadoprovavelmentesejaligaesestveis.Emboraaquantidadedeenergianessasligaesno

seja muito elevada, elas podem ser liberadas de modo rpido e fcil. As ligaes instveis de alta energia do ATP
suprem a clula com uma energia prontamente disponvel para reaes anablicas. Consideremos dois aspectos
geraisdaproduodeenergia:oconceitodeoxidaoreduoeosmecanismosdegeraodoATP.

METABOLISMO
ANAERBICO
ausnciade
oxignio

Gliclise

Componentes
orgnicosso
doadorese
receptoresde
eltrons

ProcessoIncompleto

Fermentao

Glicoseoxidadacidopirvico

Respirao

CiclodeKrebs
Transportedeeltrons

ATP

O2

Respirao
Aerbica

Sulfatos,nitrato
oudixidode
carbono

Respirao
Anerbica

3.1Respiraocelular:
Apsaglicosetersidoquebradaemcidopirvico,essecidopodeserguiadoaoprximopassodefermentaoou
darespiraocelular.ArespiraocelularousimplesmenterespiraodefinidacomoumprocessogeradordeATP
no qual molculas so oxidadas e o aceptor final de eltrons , quase sempre, uma molcula inorgnica. Uma
caracterstica essencial da respirao a ao de uma cadeia de transporte de eltrons. Existem dois tipos de
respirao, dependendo se um organismo aerbico (aquele que utiliza oxignio) ou anaerbico (no utiliza
oxignio e pode ainda ser morto por ele). Na respirao aerbica, o aceptor final de eltrons o oxignio; e na
respirao anaerbica, o aceptor final de eltrons uma molcula inorgnica que no o oxignio ou, raramente,
umamolculaorgnica.


3.1.1Respiraoaerbica:
CiclodeKrebsociclodeKrebs,tambmchamadodeciclodoscidostricarboxlicos(TCA)ouciclodocidoctrico,
uma srie de reaes bioqumicas na qual uma grande quantidade de energia qumica potencial armazenada na
acetilCoAliberadaporetapas.
Cadeiadetransportedeeltrons(sistema)consisteemumasequnciademolculascarreadorasquesocapazes
derealizaroxidaoereduo.Enquantooseltronspassamaolongodacadeia,ocorreumaliberaogradualde
energia que utilizada para conduzir a gerao quimiosmtica de ATP. Nas clulas eucariticas, a cadeia de
transporte de eltrons est contida na membrana interna de mitocndrias; nas clulas procariticas, ela
encontradanamembranaplasmtica.
MecanismoquimiosmticodegeraodeATPomecanismodesntesedeATPutilizandoacadeiadetransporte
deeltronschamadodequimiosmose.Naquimiosmose,aenergialiberadaquandoumasubstnciasemoveao
longodeumgradiente,queutilizadaparasintetizarATP.

3.1.2Respiraoanaerbica:
Na respirao anaerbica, o aceptor final de eltrons uma substncia inorgnica diferente do oxignio. A
respiraoanaerbicaporbactriasutilizandonitratoesulfatocomoaceptoresfinaisessencialparaosciclosdo
nitrognio e do enxofre que ocorrem na natureza. Como somente uma parte do ciclo de Krebs funciona sob
condies anaerbicas, e nem todos os carreadores na cadeia de transporte de eltrons participam na respirao
anaerbica, o rendimento de ATP nunca to elevado quanto na respirao aerbica. Consequentemente, os
anaerbicostendemacrescermaislentamentequeosaerbicos.

3.2Fermentao:
Apsaglicosetersidoquebradaemcidopirvico,essecidopodesercompletamentequebradonarespirao,ou
pode ser convertido em um produto orgnico na fermentao. A fermentao pode ser definida de diversas
maneiras,masnsadefinimosaquicomoumprocessoque:
i.Liberaenergiaapartirdeaucaresououtrasmolculasorgnicas,comoaminocidos,cidosorgnicos,purinase
pirimidinas.
ii.Norequeroxignio(maspodeocorrernapresenadele).
iii.NorequerautilizaodociclodeKrebsoudeumacadeiadetransporte
deeltrons.
iv.Utilizaumamolculaorgnicacomoaceptorfinaldeeltrons.
v. Produz somente uma pequena quantidade de ATP, porque grande parte da 8 energia original na glicose

permanecenasligaesqumicasdosprodutosorgnicosfinais,comocidolcticoouetanol.

Osmicrorganismospodemfermentarvriossubstratos;osprodutosfinaisdependemdomicrorganismoespecfico,
do substrato e das enzimas que esto presentes e ativas. Anlises qumicas desses produtos finais so teis para
identificarosmicrorganismos.Consideraseaseguirdoisdosmaisimportantesprocessos:afermentaodocido
lticoeafermentaoalcolica.

Fermentao do cido lctico durante a gliclise, que a primeira fase da fermentao do cido lctico, uma
molculadeglicoseoxidadaemduasmolculasdecidopirvico.Essaoxidaogeraaenergiaqueutilizadapara
formar duas molculas de ATP. No prximo passo, as duas molculas de cido pirvico so reduzidas por duas
molculasdeNADHparaformarduasmolculasdecidolctico.Comoocidolcticooprodutofinaldareao,
ele no sofre mais oxidao, e a maior parte da energia produzida pela reao permanece armazenada no cido.
Portanto, essa fermentao produz somente uma pequena quantidade de energia. Dois importantes gneros de
bactriasdocidolcticosoosStreptococcuseosLactobacillus.Comoessesmicroorganismosproduzemsomente
cido lctico, os mesmos so denominados homolticos (ou homofermentativos). A fermentao do cido lctico
pode resultar na deteriorao de alimentos. Contudo, o processo tambm pode produzir iogurte a partir de leite,
chucruteapartirderepolhoeconservasdepepino.

Fermentaoalcolicatemseuinciocomagliclisedeumamolculadeglicoseparaproduzirduasmolculasde
cidopirvicoeduasmolculasdeATP.Nareaoseguinte,asduasmolculasdecidopirvicosoconvertidasem
duas molculas de acetaldedo e duas de CO2. As duas molculas de acetaldedo so ento reduzidas por duas
molculasdeNADHparaformarduasmolculasdeetanol.Afermentaoalcolicatambmumprocessodebaixo
rendimento energtico, porque a maioria da energia contida na molcula inicial de glicose permanece no etanol,
produto final. A fermentao alcolica realizada por diversas bactrias e leveduras. O etanol e o dixido de
carbonoproduzidospelaleveduraSaccharomycessoresduosparaasclulasdeleveduras,massoteisparaos
humanos.Oetanolproduzidopelaslevedurasolcooldasbebidasalcolicaseodixidodecarbonopromoveo
crescimentodamassadopo.
Osorganismosqueproduzemcidolcticojuntocomoutroscidosoualcoissoconhecidoscomoheterolticos
(ouheterofermentativos).


AtividadeRoteiro10
Nomedo(a)acadmico(a):__________________________________________________

Responda
1. Oquemetabolismobacteriano?
2. Qualadiferenaentreanabolismoecatabolismo?
3. Quaisasprincipaisformasdeobtenodeenergiados
microrganismos?
4. Porqueoprocessodefermentaolargamenteutilizado
naindstriaalimentcia?
5. Diferencierespiraoanaerbicadeaerbica.


Roteiro11:GENTICAMICROBIANA

SEXOBACTERIANO
Bactrias podem trocar ou transferir DNA entre elas por trs diferentes vias. Em todos os casos, as clulas que
fornecemoDNAsochamadasdeDOADORASeasquerecebemsodenominadasRECEPTORAS.ODNAdodoador
incorporado ao DNA do receptor por recombinao. Se a recombinao envolver um alelo diferente daquele
presentenogenedoreceptor,ogenomaeofentipodosegundoseresalterados.Astrsformasdetransferncia
deDNAentrebactriasso:(1)TRANSFORMAO,(2)CONJUGAOe(3)TRANSDUO.

DNACROMOSSOMAL(1)
DNAEXTRACROMOSSOMALouPLAMIDIAL(2)

PLASMDEOS
Plasmdeossomaisbementendidos,seosconsiderarmoscomosendominicromossomosquesocompostosde
DNA disposto em molculas circulares que variam em extenso, mas cuja maioria contm entre 1.000 e 25.000
paresdebase,contraos4.000.000bpdogenomacromossmico.Essessegmentosreplicamsedeformaautnoma,
e comumente, so encontradas vrias cpias em uma nica clula. Ainda, uma clula pode albergar diferentes
plasmdeosouconternenhum.Plasmdeosgeralmentecarregamgenesquenosoessenciaisparaasobrevivncia
da clula, exceto em circunstncias especiais. Por exemplo, muitos plasmdeos carreiam genes para resistncia
antibitico,equandoessesplasmdeosestopresentesemumaclula,essasetornanoafetadapordeterminados
antibiticos,masseoplasmdeoeseu(s)gene(s)deresistnciasoperdidos(curaplasmidial),aclulahospedeira
tornase sensvel a um(s) dado(s) antibitico(s). Alguns plasmdeos carregam genes de resistncia vrios
antibiticos, fazendo deles patgenos muito perigosos. Em outro caso, plasmdeos denominados plasmdeos de
virulncia,carregamgenesdevirulnciaqueaumentamapossibilidadedaclulabacterianaemcausardoenas.Isso
umabactriaportandoumplasmdeocomgenesdevirulnciacapazdecausarumadeterminadadoena,mas
quandoesseplasmdeoperdido,amesmabactriatornasseincapazdepromoveraquelapatologia.

TRANSFORMAO: O fenmeno da transformao

envolve um processo no qual o DNA (de uma clula
doadora) livre no meio tomado por uma segunda
(receptora), resultando em alteraes genotpicas
nessa. Para a clula conseguir captar o DNA
necessrio que a mesma encontrese em estado de
competncia clciodependente. O DNA aderese
faceexterna damembranacelular bacteriana,quando
ento, DNA binding proteins e endonucleases clivam
esseDNAemfragmentosmenoresde6.0008.000bp.
Algumas exonucleases clivam as pontes de hidrognio
estabelecidasentreosparesdebaseeseparamasduas
metadesdaduplafita,paraquesomenteumaentrena
clula.Umaveznocitoplasma,oDNAaliengenaligado
s DNA binding proteins (que evitam a digesto pelas
DNAses) encontra o cromossomo da clula receptora
ouumplasmdeoeocorrearecombinaoemstiosde
homologia.

ExperimentodeGriffith(Decadade20)

TRANSDUO
OsegundomeiodetransferirDNAentreorganismosenvolveamediaodevrusbacterianosquesochamadosde
bacterifagos,ousimplesmentefagos.

Atransduoocorredaseguintemaneira:
1.UmfagoinfectaumabactriasusceptvelinjetandoseuDNA.
2.ODNAfgicoinduzaclulahospedeiraaconvertertodoseumetabolismoparaasntesedenovosfagos.
3. Finalmente, ao trmino do ciclo ltico do fago, vrios componentes das partculas virais, no citoplasma, so
montadoseaclulalisada,liberandonovosfagosinfectivos.
Durante o processo de montagem, alguns erros ocasionais ocorrem e grandes segmentos de DNA bacteriano
acabamporseincorporarnogenomadonovofago,emdetrimentodeporesdoDNAdoprpriovrus.Essesnovos
fagossodenominadosfagosdefectivos.Contudo,essesfagosdefectivosaindaapresentamacapacidadedeinjetar
seuDNAnumasegundabactria.Umavezqueessesfagos,quasequeexclusivamente,apresentamDNAsomenteda
primeira bactria, a infeco propriamente dita no ocorre. A recombinao pode ocorrer entre os segmentos de
DNA da primeira clula e o DNA da nova clula, sendo que alguns alelos carreados pelo fago defectivo podem
tornarseincorporadosnonovogenoma,comalteraodoseugentipo.

CONJUGAO
Adescobertadaconjugao,ahabilidadedasclulasbacterianasemtransferirDNAporcontatofsico,comoforma
detrocadematerialgentico,noinciodadcadade1950,surpreendeualgunscientistasdevidosuasimilaridade
antropomrfica de troca de genes. Desde sua descoberta, a troca conjugacional de DNA em bactrias tem sido
documentada e mostrada como sendo a forma mais comum e promscua. Inicialmente, acreditavase que a
conjugaofosseocorreriasomenteentrebactriasdemesmaespcieouentreespciesmuitorelacionadas,masa
observaomaisapuradamostrouqueaconjugaoocorretambmentreespciesnorelacionadas.
Ascondiesbsicasparaaconjugaoso:
Clulasdoadorasdevemcarrearaomenosumnicoplasmdeoquecontenhaumgrupodegenesquepossibilitea
conjugao.Essesplasmdeossoconhecidoscomoplasmdeossexuaisoudefertilidadeeclulasqueospossuem
sochamadasdeclulasmachosouF+,aopassoqueaquelasqueperdemounopossuemtalRegiodeintegrao
aocromossomo.AsclulasquereceberamoplasmdeopassamaserchamadasdeclulasfmeasouF.Osgenes
contidos nesses plasmdeos so responsveis pela sntese de pili proteicos especiais longos, finos e tubulares, em
cujas extremidades livres possuem receptores que se ligam firmemente ligantes moleculares nas paredes de
clulasF.
Aps a unio de duas clulas com reao sexual oposta atravs desses pili, essas tornamse unidas por meio de
umaponteconjugativaquepassaapermitiracontinuidadedocontedocitoplasmticonessasduasclulas.
UmaenzimaespecialclivaumadasfitasdoDNAdodoadorF+emumnicostioeumarecmsintetizadafitade
DNApassaatravsdaponteconjugativaparaointeriordaclulareceptoraF.Essafitaconvertidanumaformade
fitaduplaqueestaaptaasofrerpermutacomregiesdehomologianoDNAdaclulaF,porrecombinao.A
formamaiscomumdeconjugaoenvolveatransfernciadeplasmdeos,deumaclulaparaoutra,eseoplasmdeo
transferidoforumplasmdeodefertilidade,aclulaFtornaseumaF+queimediatamentecomeaacombinarse
comoutrasclulasF.

F-pilus

Clula F+

Clula F-

DUPLICAO DO MATERIAL GENTICO

F-pilus

Clula F+

Clula F-

TRANSFERNCIA DO MATERIAL GENTICO

AtividadeRoteiro11:GENTICAMICROBIANA
Nomedo(a)acadmico(a):__________________________________________________


Roteiro12:Bactriasdeinteressemdico


AtividadesRoteiro12
Nomedo(a)acadmico(a):__________________________________________________

1.OBJETIVOS
Observar microscopicamente esfregaos corados
peloGram.
Diferenciar bacilos grampositivos e gram
negativos.
Tomar conhecimento das excees da colorao
deGram.

2.INTRODUO
De acordo com a colorao de Gram, os Cocos so geralmente Grampositivos, com exceo dos pertencentes ao
gnero Neisseria (gonococos e meningococos). Os Bacilos so geralmente gramnegativos, com exceo dos
pertencentesaosgnerosCorynebacterium(bacilodiftrico),Bacillus(bacilodocarbnculo)eClostridium(bacilodo
ttano).

BACILOSGRAMPOSITIVOSEGRAMNEGATIVOS

Fig. 1 Bastonetes grampositivos, corados pela

colorao de Gram, visualizados em Roxo,
conservandoacorvioleta.

Fig.2Bastonetesgramnegativos,coradospela
coloraodeGram,visualizadosem
vermelho/roseo

COCOSGRAMPOSITIVOS:ESTAFILOCOCOSEESTREPTOCOCOS

ESTAFILOCOCOS
So cocos Grampositivos, imveis, agrupados em
massas irregulares ou em cachos de uva. Aerbios
ou anaerbios facultativos, catalase positivos.
Fermentamaglicosecomproduodecido,tanto
em aerobiose, como em anaerobiose. As culturas
jovensdecertascepaspodemexibircpsula,porm
de um modo geral, consideramse os estafilococos
como no encapsulados. Grampositivos nas
culturas recentes tendem a perder essa
propriedadenasculturasvelhas.


ESTREPTOCOCOS
So cocos gram positivos, que se arranjam aos
pares ou em cadeias. A maioria das espcies
anaerbia facultativa, usualmente no apresentam
motilidade e no formam endosporos. Vrias
espcies esto presentes na microbiota normal
residente, sendo algumas delas patognicas,
associadasainfecesemhumanos.
4.ESQUEMATIZEASLMINAS

Roteiro13:ColoraesEspeciais

Esporos(WirtzConklin)
O esporo bacteriano uma clula de parede espessa formada no interior de algumas bactrias. muito
resistenteaocalor,dessecaoeaoutrosagentesqumicosefsicos;capazdepermaneceremestado
latente por longos perodos e, em seguida, germinar, dando origem a uma nova clula vegetativa. A
estruturadoesporoconstitudadeumaprimeiracamadainterna,prximoaocernedoesporoaparede
doesporocompostadepeptdeoglicano,aqualvaidarorigemparededaclulavegetativaporocasio
da germinao. Envolvendo a parede do esporo fica o crtex, camada espessa, composta de um
peptdeoglicano diferente que apresenta menos ligaes cruzadas que o peptdeoglicano existente na
parededaclulaqueooriginou.Externamenteaocrtexficaacapadoesporo,estruturargidacomposta
deprotenaricaemligaesdedissulfetosintramoleculares;elaconfereresistnciaaosagentesqumicos.
Acamadamaisexternarecebeonomedeexsporoeconsistenumamembranalipoproticaquecontm
aminoacares.Osesporossodifceisdeseremcorados,poisoscorantesnoatravessamaparededo
esporoanoquesejautilizadoocalor,comonacoloraodeWirtzConklin.
Esta colorao baseiase no grau de afinidade que a estrutura do esporo possui ao corante, comparada
com o resto da clula bacteriana, tornando possvel sua diferenciao. Este mtodo de colorao dos
esporos emprega o verdemalaquita em 5% a quente como corante principal, que resiste lavagem
subsequentecomguae,posteriormente,asafranina,comocorantedecontraste.Destaforma,osesporos
secoramdeverde,pormorestodaclulaouaclulaquenopossuiesporosetingeemvermelhoou
rseo.

Coloraoparaespiroquetas

As espiroquetas so bactrias espiraladas, delgadas e flexveis. Amplamente distribudas na natureza,

muitas so encontradas na cavidade oral humana e algumas podem causar doenas como a sfilis, a
leptospirose e a doena de Lyme. As espiroquetas compreendem trs gneros: Treponema, Leptospira e
Borrellia.Essesmicrorganismospodemserobservadosaomicroscpioempreparaesafrescooupela
tcnicadeFontanaTribondeaux,emquesaisdeprataimpregnamasuperfciedabactriatornandoamais
espessa. As espiroquetas tm pouca afinidade pelos corantes comumente empregados e coramse
fracamente. Quando tratados com sais de prata, as espiroquetas podem ser visualizadas em marrom
escuroounegrocontraumfundocastanhoamarelado.

ColoraodebactriaslcoolcidoResistentes

As micobactrias so bacilos aerbios, imveis, no esporulados; finos, diferentes das demais bactrias
devido a uma srie de propriedades, muitas das quais esto relacionadas com a quantidade e tipos de
lipdeoscomplexosqueestesmicrorganismoscontmnaparedecelular.Outrascaractersticasincluemo
crescimento lento de algumas espcies em meios especiais a 37C, enquanto que formas saprfitas
crescem rapidamente na maior parte dos meios de cultura a 37C e a 22C. A maior parte das
micobactrias responsvel por infeces pulmonares e cutneas, como em outros rgos. O gnero
Mycobacterium contm grande nmero de espcies, microrganismos saprfitas que no causam
tuberculosemicobacterianaemicrorganismosparasitas,incluindoosdoisprincipaispatgenoshumanos,
MycobacteriumtuberculosiseMycobacteriumleprae.Asmicobactriassocidolcoolresistente(BAAR),
oquesignificaqueduranteosprocedimentosdecoloraopelafucsina,nosedeixamdescorarporuma
misturadelcoolecidoclordrico.Estapropriedadeparecedecorrerdafirmefixaodafucsinaacertos
lipdeosdaparede.OmtodoparaseverificarseumabactriaBAAR,odeZiehlNeelsen.Estemtodo
consiste em se tratar o esfregao por fucsina e, em seguida por uma mistura de lcool (97%) e cido
clordrico(3%).Depoisdelavadocomgua,oesfregaocoradocomazuldemetileno.Asbactriasque
retmafucsina(BAAR)adquiremacordestecorante(vermelho)easquenoretm,secorampeloazulde
metileno.

4.Procedimentos
Coletarumaamostradesaliva
Realizarumesfregaoemlmina
CorarpelaColoraodeRyu:

cobriroesfregaocomsoluodeformalina1minutoeescorrersemlavar

cobriroesfregaocombicarbonato(35gotas)eimediatamenteacrescentar10gotasdefucsina
paracadagotadebicarbonato,deixaragirpor5minutos

lavar,secareexaminaraomicroscpio

AtividadesRoteiro13
Nomedo(a)acadmico(a):__________________________________________________

ATIVIDADES

Responda:
1.Falesobreaimportnciaparaasdoenas,naformaodosesporos?
_______________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________

2.PorquenoseutilizaacoloraodeGramparaasespiroquetas?
_______________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________

2.PorquealgumasbactriassochamadasdeBAAR?
_______________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________

3.Esquematizeaslminascoradas

Roteiro14:ISOLAMENTOEIDENTIFICAODEMICRORGANISMOS

O isolamento e a identificao de bactrias de pacientes podem auxiliar na escolha e direcionamento do

melhor tratamento, j que algumas doenas infecciosas so causadas por bactrias diferentes apresentam uma
variedade de cursos e consequncias. Testar a susceptibilidade de isolados clnicos a antibiticos, ou seja,
estabelecer a concentrao inibitria mnima ou CIM pode ajudar na seleo de antibiticos para a terapia. O
reconhecimentodequecertasespciesdebactrias(oulinhagens)atpicaspodesugerirumsurtodedoena,por
exemplo, de suprimentos hospitalares contaminados ou por no utilizao de tcnicas de assepsia adequadas por
partedeaequipehospitalar.Quandosesuspeitadequepacientesestejamcomumainfecobacteriana,usual
procederse ao isolamento de colnias visveis em cultura pura, em placas de meio de cultura slido e, ento,
identificaromicrorganismo.
A identificao baseada em princpios taxonmicos aplicados situao microbiolgica em curso. Os
mtodosclssicosparaaidentificaodebactriassobaseadosemcaractersticasmorfolgicasebioqumicas.H
numerosos testes para cada um dos muitos patgenos. Tcnicas de biologia molecular (para a caracterizao de
genesespecficosousegmentosdegenes)estosetornandocomunsnoslaboratriosdediagnstico.Abordagens
taxonmicasmodernasempregammetodologiasmaiscomplexasecentramsenoestabelecimentodacomposio
estrutural das bactrias. Isto frequentemente envolve abordagens baseadas na biologia molecular ou na qumica
analtica.

Passosnoisolamentoeidentificaodeumabactria
Passo1:amostrasdefluidosorgnicos(porexemplo,sangue,urina,fluidocefalorraquidiano)soespalhadosem
placas contendo meio de cultura slido; colnias isoladas de bactrias (visveis a olho nu) aparecem aps a
incubaodasplacasporumavriosdias.Cadacolniaconsistedemilhesdeclulasdebactrias.Aobservao
dascaractersticasdessascolniasemrelaoatamanho,forma,textura,core(secrescidasemmeioagarsangue)
reaes de hemlise altamente importante como um primeiro passo na identificao bacteriana. Se a bactria
requerounooxignioparacrescerumaoutraimportantecaractersticaparaaidentificao.
Passo2:ascolniasisoladassocoradaspeloMTODODEGRAMeclulasindividuaisdebactriassoobservadas
aomicroscpio.
Passo3:Asbactriassoidentificadasusandosecolniasisoladas.Istofreqentementerequeroutras24horasde
incubaoadicional.

ACOLORAODEGRAM
Observaseaaparnciadasbactriassobmicroscpio.Perguntase:ElassoGrampositivasounegativas?Qualasua
morfologia(bacilos,cocos,espiraladas,pleomficas[formasvariadas],etc.)?
Asclulasocorremdeformaisolada,emcadeiasouempares?Qualotamanhodasclulas?
Alm da colorao de Gram, h outros mtodos de colorao menos comumente empregados, por exemplo, a
coloraodeesporosoucpsulas.

Outra colnia obtida a partir daquela primariamente isolada , ento, testada quanto s suas PROPRIEDADES
BIOQUMICAS. Por exemplo, a bactria fermenta algum acar, tal como a lactose? Em alguns casos, as bactrias
so identificadas (por exemplo, por aglutinao) com anticorpos disponveis comercialmente e que reconhecem
antgenos de superfcie especficos. Outros testes moleculares comerciais so agora amplamente utilizados. H
considerveldiversidademesmodentrodeumaespcie.

PROVASBIOQUMICAS
AinvestigaodasatividadesmetablicasdasbactriasinvitrochamadadeProvasBioqumicaseservempara
auxiliar o microbiologista a identificar grupos ou espcies de bactrias ou leveduras atravs da verificao das
transformaes qumicas, que ocorrem num determinado substrato, pela ao das enzimas de um dado
microrganismo. Como muitas vezes um determinado microrganismo possui um sistema enzimtico especfico,
promovendotransformaobioqumicaespecfica,asprovasbioqumicaspodemserutilizadasnaprticaparaasua
caracterizao.Paraarealizaodasprovasbioqumicasnecessrioutilizarmeiosdecultivoespeciaiscontendoo
substrato a ser analisado e fornecer ao microrganismo as condies nutritivas e ambientais necessrias ao seu
desenvolvimento.
Asprincipaisemaisutilizadasprovasbioqumicasso:

1.ProduodecatalaseEstaenzimaatuasobreaguaoxigenada(perxidodehidrognio3a5%)desdobrandoa
emoxignioegua.Aprovafeitacolocandoumagotadesoluoaquosadeperxidodehidrognioa35%numa
lminae,emseguida,comumaaladeplatina,colocarumaporodocrescimentobacterianosobreagota.Oude
outraforma,adicionandose0,5mldamesmasoluoaumaculturaemmeiolquidoouemgarinclinado.Aprova
considerada positiva quando h borbulhamento ou efervescncia devido liberao do oxignio. A catalase
produzidapormuitosmicrorganismoseusualmenteempregadaparadiferenciarStaphylococcusaureus,queso
catalasepositivosdeStreptococcusmutans,catalasenegativos.

2. Utilizao do citrato como nica fonte de carbono Baseiase na utilizao do citrato como nica fonte de
carbono.AlgunsmicrorganismoscomoaEscherichiacolinopossuemapermeasedocitrato,quefazotransporte
do citrato para o interior da clula, no conseguindo, portanto, crescer no meio contendo como nica fonte de
carbonoocitrato,emborapossuamasenzimas,intracelulares,quedegradamocitrato.Aprovafeitasemeandose
a bactria no meio slido inclinado de citrato de Simmons (CIT), contendo azul de bromotimol como indicador, o
qualempH6,8a7,0apresentaseverde.Aprovapositivaresultanotransportedocitratopelapermeaseeasua
utilizao pela enzima citratase resulta na formao de oxaloacetato e acetato. O consumo do citrato induz a
clivagem do fosfato de amnia, alcalinizando o meio. Tambm, com o metabolismo do citrato h formao de
carbonatosquealcalinizamomeio,demodoqueacordoindicadorviraparaazul.Naprovanegativaomeionose
alteraacorverdepoisnohcrescimentomicrobiano.

Meioazulpositivo
Meioverdenegativo

3.Provadaproduodeurease(meiogaruria)Aureaseumaenzimaquedegradaauriaemduasmolculas
deamniaeumadeanidridocarbnico.Aprovaconsisteemtransferirumaporodocrescimentobacterianocom
uma ala para o meio contendo uria, pH neutro e um indicador de pH, o vermelho fenol. Aps o crescimento a
provareveladapositivaquandoaureaseatacaauriaalcalinizandoomeioquetomaacoloraorosachoque.Na
prova negativa no h alterao da cor do meio. Os organismos do gnero Proteus so urease positivos
diferentementedamaioriadasenterobactrias.

Rosachoquepositivo
LaranjaclaroNegativo

4.ProvadaproduodeH2S,motilidadeeindol(meioSMI)Usadoparadiferenciaodeenterobactrias,para
determinao da produo de sulfetos de hidrognio. Aao hidroltica de algumas bactrias sobre aminocidos
sulfurosos (ex. Cistena) resulta na formao de H2S. Sua produo observada atravs da adio de compostos
inorgnicoscontendoferronomeiodecultura.OcomplexadoH2S+ferroresultaemumprecipitadoinsolvel(FeS)
quecorescuraaolongodalinhadeintroduodabactria.

Meioestril(mbar)negativo
Meiomarrompositivo

Oindolresultantedadegradaodoaminocidotriptofanopelaenzimatriptofanase.Aprovarealizada
inoculandose o meio contendo excesso de triptofano. Aps a incubao colocar 0,5 ml do reagente de Kovac
(soluoaquosadepdimetilaminobenzaldedo,respectivamente)atravsdaparedeinternadotubo.Oresultado
positivo(vermelho)devidocomplexaodoindolcomoaldedo,emmeiocido,formandoocompostocolorido.
Aprovanegativacomqualqueroutratonalidadedecor(originaldomeiooumarrom)

MeiovermelhoProvapositiva

5.ProvadafermentaodecarboidratosEstaprovapodeserrealizadadevriasmaneiras.Amaisusualenvolvea
utilizaodeummeiocomglicoseououtroacare/oulcoolcompHneutroeumindicadordepH(Indicadorde
Andrade, prpura de bromocresol). A prova positiva indicada pela viragem da cor do meio de incolor com
Indicador de Andrade ou prpura com prpura de bromocresol, para vermelho ou amarelo, respectivamente,
devido a produo de cidos, com abaixamento do pH do meio. A prova negativa revelada pela ausncia de
mudana de cor ou at mesmo pela acentuao da cor prpura quando o reativo o prpura de bromocresol,

indicandoutilizaodosaminocidos,comalcalinizaodomeio.Deveselembrarque,paraproduziressemeiobem
comoaqueleusadoparapesquisadaproduodeurease,osacareseauriadevemseresterilizadospreviamente
porfiltraoe,posteriormente,colocadosassepticamentenomeiobsico.

Ex.MeioTripleIRONSugargar

Negativolaranjaavermelhado
Positivoamarelo

6.Procedimentos
Repicarosdiversostiposmicrobianosnosmeiosdeculturadiferenciais
Incubara37oC

AtividadesRoteiro14
Nomedo(a)acadmico(a):__________________________________________________

ATIVIDADES

Preenchaatabelacomosresultadosobtidos:

Microrganismos
Provas
Bioqumicas/
Meios
de
cultura

ROTEIRO15:PROVASDEAMILASEeCATALASEPORMICRORGANISMOS
Nomedo(a)acadmico(a):__________________________________________________

Produodeamilase:Amilaseumaenzimaquecatalisaahidrlisedoamidoemmolculasmenores.Estpresente
nasalivahumana,sendosecretadapelasglndulassalivares.Algunsmicrorganismosproduzemestaenzimaquese
difundenomeiodeculturahidrolisandooamidoemdextrinaemaltose.Quandodaevidenciaocomoiodo,oqual
coraoamidocomazul,ocorreaformaodehaloincoloraoredordascolniasdemicrorganismosqueproduzema
enzima.

ProvadaCatalase:Estaprovasedestinaaverificaodapresenadaenzimacatalase.usadaparadiferenciaode
estafilococos e estreptococos que so catalasenegativos. A catalase uma enzima que decompe o perxido de
hidrognio (H2O2) em oxignio e gua. O perxido de hidrognio se deixado acumular letal para as clulas
bacterianas, A prova feita aplicando a gua oxigenada (3%) sobre microrganismos a ser testado, observandose
umaproduodegs(provapositiva)

Materiais
PlacascomculturasemgaramidoeBHI
SoluodeLugol
Soluodeguaoxigenadaa3%
ColoraodeGram

Procedimentos
Coraraplacacomlugolemmeiogaramidoe1gotadeguaoxigenadaemgarBHI
Observaroresultado

ATIVIDADES:
EsquematizeoshalosformadosparaProvadaAmilase
Microrganismo
Positivo
Negativo

EsquematizeoshalosformadosparaProvadaCatalase
Microrganismo
Positivo
Negativo

Roteiro16:ControledocrescimentoMicrobiano


AtividadedoROTEIRO16
Nomedo(a)acadmico(a):__________________________________________________

Antibiogramas so bioensaios conduzidos in vitro que visam testar a sensibilidade de bactrias aos
antimicrobianos.Apropostaprimriadestetesteguiaroclniconaescolhadoagenteapropriadoparaaterapia.Os
testesderotinafornecemdadosacumulados,quesoinformaessobreosagentesparausoemprico.Almdisso,
estes testes so utilizados para avaliar in vitro a atividade de novos agentes, e auxiliar no mapeamento da
emergncia de bactrias resistentes. A suscetibilidade antimicrobiana pode ser reportada qualitativamente como
sensvel,intermedirioouresistente;ouquantitativamenteemtermosdeMIC(minimuninhibitoryconcentration)ou
MBC(minimunbactericidalconcentration).
1 Teste Quantitativo da sensibilidade aos antimicrobianos: Mtodo de diluio: consiste em preparar
sucessivas diluies dos antibiticos em meio slido ou lquido e em seguida semear a bactria em estudo. Aps
incubaodeterminaseMICe/ouMBC.
2MtododedifusodeBawereKirk:umtestequalitativo,noqualdiscosdepapelimpregnadoscomo
antibiticosocolocadosnasuperfciedogaruniformementesemeadocomomicrorganismo.Adrogasedifunde
nogareproduzinibiodoagentesensvel,formandoumhalodeinibioquedevesermedidoecomparadocom
tabelaspadronizadas.Paraagarantiadestatcnica,algunsfatoressoessenciais:
Meio de Cultura: normalmente utilizado o meio MullerHinton, que se caracteriza por ser um meio
enriquecedorecomausnciadesubstnciasantagnicas.
CulturaBacteriana:otestedeveserrealizadocomculturapuradebactrias,devendoserealizaracolorao
deGram.

OBJETIVOS
Realizaromtododedifuso
Verificaraaodeantibiticos

PROCEDIMENTOS
1 Satureumaaladeplatinacomasuspensobacteriana(Fig1).

Ala de Platina

2 Semeie a suspenso sobre a superfcie estril de uma placa contendo gar MullerHinton, utilizando
sucessivamentetrsdireesparaobteruminculouniformementeespalhadosobretodaasuperfciedogar(
Fig2).

3 Distribuacincodiscosdeantibitico,sendocadaumdeumantimicrobianodiferente,sobreasuperfciedogar
inoculado,seguindooesquemaabaixo(Fig3).Deixeumadistnciadeaproximadamente1cmentreabordada
placaeodisco.

4 Pressionelevementeosdiscosparaquenosedesprendamduranteaincubao.
5 Incubeasplacaspor24horasa37C.

RESULTADOS

Atravs da anlise dos resultados poderemos classificar os microrganismos testados em: resistente,
intermedirio, moderadamente sensvel, e sensvel, dependendo da formao ou no de halo inibitrio e
tambmdeseudimetro(Fig4).

Nocasodeformaodeumhaloinibitrio,estedeveterseudimetromedido,eamedidaencontradadeve
sercomparadacomtabelaspadronizadas(Fig5).Demodogeral,estastabelasdeterminammedidasdedimetro,e
dessa forma a medida encontrada em cada caso pode ento ser enquadrada em uma das quatro categorias
supracitadas.

FIGURA5:ExemplodeTabeladeHalosdeSensibilidade

HalosdeInibio(mm)
Antimicrobiano Cdigo
Resistente Intermedirio
Sensvel

Bacitracina
BAC
<8
9a12
>13

Cefotaxima
CTX
<14

>23

Gentamicina
GEN
<12

>13

Tetraciclina
TET
<14
15a18
>19

Vancomicina
VAN
<9
10a11
>12

PeniciliaG
PEN
<20
2128
>29

Cloranfenicol
CLO
<12
1317
>18

Ampicilina
AMP
<11
1213
>14

EXERCCIOS

1 Desenhaedescrevaosresultadosobtidosnaplacademeiodecultura,indicandoqualabactria
utilizada,aformaoounodohalodeinibioparacadaantimicrobianoutilizado,indicandoo
tamanhodohalo,casoestetenhaseformado,eaclassificaodabactriaarespeitodesua
sensibilidadeacadaantimicrobiano.

2 Completeoquadroaseguir,mensurandooshalosdeinibioeaconcluso:Resistente(R),
intermedirio(I)ouSensvel(S)encontradaentreoscolegas:

HalosdeinibiodosANTIBITICOS(mm)
Antibiticos
Microrganismo

3Indiquesefoisensvel(S),Intermedirio(I)ouResistente(R)

Antibitico
SENSIVEL
INTERMEDIARIO

RESISTENTE

Roteiro17:EfeitodeAntimicrobianossobremicrorganismosinvitro
Nomedo(a)acadmico(a):__________________________________________________

INTRODUO
Desinfetantes so substncias capazes de destruir microrganismos presentes em superfcies, instrumentais, sem
eliminar formas esporuladas. O desinfectante ideal deve ser capaz de destruir a forma vegetativa de todos os
microrganismos patognicos, requerer tempo limitado de exposio e ser eficaz em temperatura ambiente, no
corrosivo, atxico para seres humanos e de baixo custo. Devido s semelhanas na composio qumica e
metabolismo entre os seres humanos e microrganismos, pouco provvel alcanar este ideal. Na prtica, o uso
correto dos desinfetantes qumicos disponveis ir pelo menos reduzir o nmero de microrganismos patognicos
viveispresentesemsuperfciesparanveisquepermitiramaprevenodeinfecespelosmecanismosdedefesa
naturais do indivduo sadio. O mecanismo de ao pode ser agindo sobre a membrana citoplasmtica danificando
suaestrutura,promovendosualise(clorexidina,fenisealcois).Outrosagembloqueandoasadadecomponentes
celulares, matando os microrganismos (glutaraldedo e formaldedo)e ainda, outros desinfetantes promovem a
oxidaodosconstituintescelulares(hipocloritoseiodforos).

1.OBJETIVOS
Verificaraaodosdesinfetantessobreosmicrorganismos;
Observaraaodediferentesdesinfetantes;

2.PRIMEIRAAULA
Pipetar0,5mldemicrorganismoetransferirparaotubocontendosalina
(1)eparaosoutrostrstuboscontendoosdiferentesdesinfetantes2,3e
1
2
4(nadiluiode1mldesinfetante+1mldeguaestril)
Aguardar15minutos
Dividir o fundo da placa de Agar nutriente em quatro partes com
caneta permanente e identificar cada parte da placa de acordo com o
4
3
desinfetante.
Semearcomaladeplatinaapartirdostubosnaspartescorrespondentes
Incubara37por48horas

3.SEGUNDAAULA
Observarocrescimentodascolniasnasquatropartesdaplaca
Contaronmerodecolnias

4.ATIVIDADES

Desenheedescreveoqueaconteceucomaspartes1,2,3e4naplacadePetri

Roteiro18:Efeitodeenxaguatriosbucais
Nomedo(a)acadmico(a):__________________________________________________

1.OBJETIVOS
Verificaraaodeenxaguatriosbucaissobreosmicrorganismos;

2.PROCEDIMENTOS_PRIMEIRAAULA

ExperimentoI
DividirofundodaplacadeAgaremduaspartescomcanetapermanenteeidentificarcadapartedaplacadeacordo
comautilizaoounodeenxaguatrios
Semearcomaalaassalivasanteseaps1minutodebochechoemcadaporodaplaca
Incubara37por48horas

3.SEGUNDAAULA
Observarocrescimentodascolniasnasplacas
Contaronmerodecolnias

4.ATIVIDADES

DesenheedescreveoqueaconteceucomaspartesdasplacasdePetri

Roteiro19:FUNGOS

Osfungos(dolatimfungus=cogumelo)temsidotradicionalmenteconsideradoscomo"semelhantesaplantas".A
maioria das espcies cresce por extenso continua e ramificao de estruturas filiformes. Em adio, eles so
imveisemsuemaioriaesuasparedescelularesassemelhamseasdeplantas,emespessurae,atcertoponto,em
composio qumica e em estrutura ultramicroscopica. Os fungos crescem como clulas nicas, as leveduras, ou
como colnias filamentosas multicelulares, os bolores e cogumelos. As formas multicelulares no possuem folhas,
caulesourazesesomuitomenosdiferenciadasdoqueasplantassuperiores,pormsomuitomaisdiferenciadas
doqueasbactrias.Contudo,osfungosnopossuempigmentosfotossintticose,assim,elesestorestritosauma
existnciasaprofticaouparasita.Umanicaclulauninucleadapodeproduzircordesmultinuclearesfilamentosos,
leveduras, rgos de frutificao com diversos esporos e clulas que so diferenciadas sexualmente (em muitas
espcies).Aindamais,algumasespciesformamnotveisarmadilhasparaacapturadevriosmicrorganismos.
Osfungossoabundantesnosolo,nosvegetaiseemmassasdegua,ondevivemmuitobememfolhasmortasou
em madeira. Seus esporos ubquos, transportados pelo ar, so frequentemente incmodos contaminadores de
culturas de bactrias e de clulas de mamferos. De fato, foi um desses contaminadores numa cultura de
estafilococosqueeventualmentelevouadescobertadapenicilina.

ESTRUTURAECRESCIMENTO
Fungosfilamentosos.Oprincipalelementodaformavegetativaoudecrescimentodeumbolorahifa(dogrego
hyphe=teia),umaestruturatubularramificadacomcercade2a10dedimetro,isto,muitomaiordoqueas
bactrias. que podem ser septados ou asseptados. A medida que uma colnia, ou talo, cresce, suas hifas formam
uma massa de filamentos enovelados, chamados miclio (do grego mykes= cogumelo). As hifas crescem pelo
alongamentodesuaspontas(crescimentoapical)epelaproduoderamificaeslaterais.Ashifasquepenetramno
meio,ondeabsorvemnutrientes,socoletivamenteconhecidascomoomicliovegetativo,enquantoqueaquelas
que se projetam acima da superfcie do meio constituem o miclio areo; como esse ltimo visto de regra tem
clulasreprodutivasouesporos,tambmchamadomiclioreprodutivo.Amaioriadascolniascrescenasuperfcie
de meios lquidos ou slidos como lenis irregulares, secos e filamentosos. Devido ao enovelamento das hifas
filamentosas,ascolniassomaisresistentesdoqueasdebactrias.Nocentrodascolniasmicelianasashifasso
frequentementenecrticasdevidoafaltadesuprimentodenutrientesedeoxignioetalvezaoacmulodecidos
orgnicos.
A estrutura em miclio confere aos fungos uma elevada relao rea/volume, facilitando a aquisio de alimento,
pois esta estrutura rapidamente se estende em todas as direes sobre o alimento, podendo crescer mais de um
quilmetropordia,nototal,eafastarsemaisde30metrosdolocaldeiniciodocrescimento.Porestemotivo,um
fungo tem um importante efeito no meio, nomeadamente na degradao de substrato e na acumulao de
partculas.Ocrescimentodashifasocorreapenasnasextremidades,podendoaszonasmaisantigasestarlivresde
contedocitoplasmtico.
As hifas septadas tm paredes septos a separar os compartimentos celulares entre si. Os septos no so, no
entanto,completos,existemporosquepermitemacomunicaoentreoscitoplasmasadjacentes.Estetipodehifa
pode apresentar um nico ncleo por compartimento monocaritica ou dois ncleos por compartimento
dicaritica

Figura4Tiposdehifas:noseptadasoucenocticaseseptadas


Figura5Aspergillusssp.Esquemadaestruturareprodutiva

Patogenia:
AspergillusflavusAspergilose

Levedura.Aslevedurassofungosunicelularesovaisouesfricos,geralmentede3a4dedimetro.Asvezesas
leveduras e sua prognie aderem entre si e formam cadeias ou "pseudohifas". Citologia. Leveduras e bolores
assemelhamseaplantassuperioreseaanimaisnacomplexidadeanatmicadesuasclulas.Soeucariticos,com
vrios cromossomos diferentes e uma membrana nuclear bem definida, possuindo mitocndrias e um retculo
endoplasmtico.Aindamais,suasmembranascontmesteris,assemelhandose,assim,aformassuperioresenoa
bactrias.

Figura 3.
Clulaleveduriformeeesquemadebrotamentodasleveduras

Amorfologiacelulardaslevedurasmuitovarivel.Geralmente,sounicelulares,apresentandoformaoval
ou cilndrica. Outras formas podem ser encontradas como: esfrica, elpticas, elipsides ou filamentosas (pseudo
miclioconstitudoporclulasunidasentresi).
As leveduras apresentam membrana celular bem definida, pouco espessa, em clulas jovens; rgidas em
clulas adultas, de constituio varivel, com predominncia de hidratos de carbono, e menor quantidade de
protenas e cidos graxos. O ncleo bem definido, principalmente em clulas em fase de reproduo; pequeno,
esfrico,delocalizaovarivel,associadoaovacolonuclear.

Patogenia:
CandidaalbicansassociadaaCandidiaseOralesistmicaemindivduosimunossuprimidos.

DIMORFISMOFUNGICO
Algumas espcies de fungos crescem somente como bolores e outras apenas como leveduras. Muitas espcies,
contudo,podemcresceremambasasformas,dependendodomeioambiente.Essacapacidadeeconhecidacomo
dimorfismo.Elaclinicamenteimportantepoisamaioriadosfungosmaispatognicos(paraohomem)dimrfica;
eles via de regra aparecem nos tecidos infectados como leveduras, mas quando cultivados in vitro, em condies
convencionais, aparecem como bolores tpicos. O dimorfismo pode ser experimentalmente controlado pela
modificao das condies culturais, sendo decisivo, s vezes, um nico fator. Por exemplo, o patgeno humano
Blastomycesdermatitidiscrescecomomiclioa25C,mascomoleveduraa37C.Algunsfungosproduzemformas
micelianasaocresceremnasuperfciedemeioslquidosdecultura,eformasdeleveduraquandoocrescimentose
danaprofundidadedessesmeios.

AtividadesdoRoteiro19
Nomedo(a)acadmico(a):__________________________________________________

ATIVIDADES
1.Descrevaamorfologiadasclulasleveduriformes.

2.Desenheepinteasestruturasobservadas

Microrganismo:

3.Descrevaamorfologiadasclulasfilamentosas.

4.Desenheepinteasestruturasobservadas

Microrganismo:


Roteiro20:Vrus

Apalavravrusoriginadolatimesignificavenenooufluidovenenoso.Osvruscomopartculasextracelulares,no
tm atividades metablicas independentes e so incapazes de reproduo por cissiparidade, gemulao ou outros
processosobservadosentreasbactriaseoutrosmicrorganismos,sendoportantoparasitasintracelulares.
HISTRICO
AvirologiateveseuincionofinaldosculoXIX,comoreconhecimentodaexistnciadeagentesinfecciososcapazes
depassaratravsdefiltrosqueretinhambactrias,sendoportantomenoresdoqueestas.Aprimeiradescriodo
vrusdevemosaDmitriiIwanowskiqueem1892,referiuqueoagentedadoenadomosaicodotabaco,poderia
passar livremente atravs dos filtros, pois utilizandose de filtrados de plantas sofrendo da dessa doena, foram
capazesdeproduziradoenaemumanovaplantahospedeira.
Iwanowski e colaboradores concluram que tinham descoberto uma nova forma de vida patognica, que eles
chamaram de seres inanimados, mas funcionais. Hoje com a evoluo dos conhecimentos tericos e cientficos
verificousequenemtodososagentesfiltrveispodiamserclassificadoscomovrus,poissabesequeasmenores
bactriascomoChlamydiaeMycoplasmasotopequenasquantoosmaioresvruseportantopodempassarpor
filtrosqueretm99%deoutrasespciesdebactrias.
Avirologiaexpandiuseconsideravelmentenosprimeiros30anosdestesculo,comacaracterizaodeumnmero
crescentededoenashumanas,animaisevegetaiscausadasporvrus.Nesteperodo,foramtambmdescritosvrus
capazes de infectar bactrias, os chamados bacterifagos. Os bacterifagos (comedores de bactrias), foram
observados.
Independentementenosanosde1915(TWORT),naInglaterrae1917(d`HERELLE),noinstitutoPasteurdeParis.Os
vrus, no entanto, no foram visualisados at o desenvolvimentodo microscpio eletrnico, na dcada de 30
verificandosequeosbacterifagossoconsideradososvrusdeestruturamaiscomplexa.Novosvrusestosendo
descobertos o tempo todo. O marco fundamental na histria da virologia corresponde ao momento em que foi
descoberto por Stanley (1940) que o vrus do mosaico do tabaco podia ser cristalizado (assim como os sais
inorgnicos e protenas moleculares) e que os cristais inanimados, podiam produzir doena em plantas sadias. A
controvrsia,deseremosvrusorganismosvivosouno,foientonovamentereanimada.
Essadescobertateveumgrandeimpactonocampodascinciasbiolgicasemgeral,dacinciamdica,edentrodo
prprio campo da bioqumica, onde os conhecimentos que se acumulam, sobre a estrutura viral, deram origem a
umanovareadoconhecimento,abiologiamolecular.Existemdiferenasfundamentaisentreosvruseasclulas
vivas,queforamenumeradasporStainerecolaboradores(1969)queso:
a)apresentampropriedadesmuitodiferentesdaunidadeestruturaldeumservivo,aclula;
b) Enquanto o genoma celular constitudo por DNA e RNA, no genoma viral s se encontra um dos dois cidos
nuclicos;
c)apresentamcomoconstituintesorgnicosapenascidonuclicoeprotena;
d)podemconterumaoualgumasenzimas,pormseucomplementoenzimticoinsuficienteparareproduziroutro
vrus,ouseja,ovrusnopossuiportanto,aocontrriodaclula,sistemaenzimticoprprio;
e)semprereplicadoexclusivamenteapartirdeseumaterialgenticoporumaclula;
f)ovrusfinalizaseuprocessodemultiplicaopororganizaodeseusconstituintessintetizadopelaclula.
Estasdiferenas,eofatodeosvruspoderemsercristalizados,semperderopoderinfeccioso,permitenos,numa
anlise simplista, considerar os vrus como microrganismos de grande simplicidade ou molculas de grande
complexidade. Alm de seu tamanho reduzido de 20 nm (109 metro) a 250 nm, os vrus replicam seu material
gentico, que como todas as formas de vida, composto por polmeros de cidos nuclicos. Os vrus tm
caractersticasemcomum:
soentidadesparasitasintracelularesobrigatrios,
soincapazesdecrescerereproduzirseforadeumaclulaviva,
apresentamumaorganizaoecomposioestruturaiscaractersticas,
almdeumprocessonicodereplicao.
Para uma anlise mais cuidadosa da estrutura e natureza dos vrus, necessrio um estudo mais detalhado em
relaoacaracterizaodosvrus,emorfologiaviral.
MORFOLOGIAVIRAL
Com a descoberta da microscopia eletrnica, tornouse possvel estudar a morfologia dos vrus. As fotografias das
imagens virais em microscopia eletrnica, revelaram suas formas, dimenses e estruturas internas, demonstrando
que cada vrus possui caractersticas prprias. Cada partcula viral ou virion constituda por cerne ou ncleo de

cido nuclico (DNA ou RNA, mas nunca ambos) recoberto por um invlucro protico denominado cpside ou
capsdio; o conjunto cido nuclico/invlucro protico constitui a nucleocpside ou nucleocapsdio. A cpside
formadapormltiplassubunidadesdenominadascapsmeros.

ExistemaindanucleoprotenasqueenvolvemoDNAouRNAviral,comoumacapa.proteocontraataquesdas
enzimas da clula infectada. Alm delas alguns vrus carregam protenas que ajudam na replicao. Alguns vrus
possuem a nucleocpside envolvida por um envoltrio, envelope ou invlucro de glicoprotenas e/ou lipdios. Os
vrus sem esse envelope so denominados vrus nus, e aqueles que possuem esse envelope so denominados
encapsuladosouenvelopados.Asespculassoconstitudasdeprotena,esoessasestruturaspresentesnosvrus
com envoltrio que se ligam aos receptores expressos na superficie da clula, a forma dessas espculas e dos
receptoresoquedefinequepartesdocorpoovrusvaiinfectar.
Estesvruspodemserorganizadossegundoestruturasicosadricos,helicoidaisedeestruturacomplexa:
Tiposmorfolgicos:
1) Vrus Icosadricos: Os capsmeros organizamse em
icosadricos(20facestriangularesequilteras,12vrtices,e30
arestas), os capsmeros dos vrtices de cada face so
chamados pentons e os capsmeros das faces de hexons.
Ex.poliemielite,adenovrus,herpesvrus.

2)VrusHelicoidaisouTubulares:Oscapsmerosorganizamse
segundo simetria do tipo helicoidal (vrus do mosaico do
tabaco,dabatata,vrusdainfluenzaecaxumba),dispondoseo
cido nuclico na parte interna das unidades proticas,
associadoasmesmas.
3) Vrus envelopados: Possuem envelope e so geralmente
pleomrficos, pois o envelope no rgido. Exs. Esfricos
(arbovrus;arboencefalites),paraleleppedos(poxvrus;varola),
daraiva

4)Vruscomplexos:BACTERIFAGO:
1. Cabea: Onde est contido o cerne de cido nuclico (DNA
na maioria dos bacterifagos, alguns possuem RNA) e um
capsdioproteco.
2. Cauda ou Bainha: Tubular oco, com uma bainha de
filamentosespiraladosdeprotenacontrtileumaplacabasala
qualseligamprolongamento(fibrasdacauda).
3.Fibrasdacauda:Saemdaplacabasalenestasfibras,existem
regies proticas especficas de ligao (ancoragem) do
bacterifagocomaclulashospedeira.

CULTIVODOSVRUS:

1)Inoculaoemanimalsensvel.Ex.raiva,co.
2)Cultivoemovosembrionados(galinhaoupata)nacavidadealantide,nacavidadeamniticaenosacovitelnico.
Utilizadoprincipalmenteparaproduodevacina,porqueummtodobaratoebemestabelecido.
3)Cultivoemclulastecidos.Culturasdeclulasprimriasoudelinhagemcontnua(carcinomauterinohumano).
MECANISMODEINFECODOVRUS:
Parafinsdidticosomecanismodeinfecodosvrusdivididobasicamenteem5etapas:

1) Adsoro ligao do vrus com a

clulahospedeira.
2) Penetrao e Desnudamento
Injeo do cido nuclico dentro do
citoplasma.
3) Perodo de Eclipse: No h qualquer
evidnciademultiplicao.
4) Replicao e Biossntese
Multiplicaoedoscomponentesvirais.
4.1)Ciclodevidadosfagos:
4.1.1CicloLtico
4.1.2CicloLisognico
5) Liberao do vrus completo da
clulahospedeira


AtividadesdoRoteiro20
Nomedo(a)acadmico(a):__________________________________________________


Roteiro21:CONCEITOSGERAISSOBREPARASITOLOGIA

Parasitologiaacinciaqueestudaosparasitas,osseushospedeiroserelaesentreeles.
EnglobamfiloProtozoa(protozorios),ReinoProtistaeNematoda
(nematdes),annelida(aneldeos),Platyhelminthes(platelmintos)eArthropoda(artrpodes).
Os protozorios so unicelulares, enquanto os nematdeos, aneldeos, platelmintos e artrpodes so organismos
multicelulares.
Protozorios
Protozoriossomicrorganismoscuja classificao feita com base nas estruturas de locomoo que eles
apresentamedevidoaissoforamagrupadosnoReinoProtistajuntosalgasunicelularescrisfitas,euglenfitase
pirrfitas de acordo com suas semelhanas mais evidentes. Todos so seres eucariontes, ou seja, possuincleo
celularorganizadodentrodeumacarioteca,amaioriasohetertrofosecomemdiversosalimentosemboraalguns
sejamauttrofosproduzem clorofila e com ela fazem afotossntesee assim conseguem produzir seus prprios
alimentos. Alocomoodesses microrganismos no meio aqutico feita atravs do batimento
decliosos(Ciliados)ou batimento deflagelosnos(Flagelados)que so estruturas mais adaptadas para a natao;
outros protozorios os(Rizpodos)rastejam com movimentoamebideum tipo de locomoo onde os micro
organismosvomudandoaformadoseucorpopelaemissodepseudpodes(dogrego,"pseudo",em portugus
falsooufalsos)e(dogrego"podo",emportuguspoups)portantoliteralmente"pseudpodos"significam"falsos
ps"; outros protozorios no possuem organelas locomotoras nem vacolos contrteis so os
chamados(Esporozorios), que so parasitas que se disseminam pelo ambiente atravs da produo de muitos
esporos que so levados pela gua, pelo ar ou so levados atravs de animais vetores (moscas, mosquitos,
carrapatosetc.)quesecontaminamcomessesprotozoriospatognicos,ficamdoentesetransmitemessasdoenas
paraoutrosanimais.
As maiorias dosprotozoriosso de vida livre e aqutica podendo ser encontrados nagua doce,salobraougua
salgada, levam vida livre tambm em lugares midos rastejando pelo soloou sobrematria
orgnicaemdecomposio,no entanto algumas espcies levamvida parasitrianos organismos de diversos
hospedeiroseassimpassamamaiorpartedavidaparasitandodiversasespciesdeseresvivosedessaformalhes
causandomuitasdoenas.Areproduodosprotozoriosgeralmenteassexualacontecendopordivisomltipla
ondeomicrorganismoapenassedivideemcpiasdelemesmo,algunsproduzemesporosparasedisseminarempelo
ambiente,svezesalgunstambmapresentamreproduosexualhavendontidatrocadematerialgenticoentre
ummicrorganismoeoutro.

FormasdeTransmisso>DIRETAouINDIRETA


PrincipaisparasitosescausadasporPROTOZORIOS

Leishmaniose
uma protozoose (Leishmania donovani) largamente espalhada pelas regies tropicais e subtropicais do globo
terrestre. Caracterizase clinicamente por febre irregular de longa durao, hepatosplenomegalia, emagrecimento,

quedadosplos,anemia,leucopenia,hiperglobulinemia,epistaxeehematmese.Epidemiologicamente,caracteriza
seporserumazoonosedecandeoseroedores,transmitindoseaohomemporintermdiodeflebtomos.

Giardase
A Giardia lamblia foi observada pela primeira vez por Leeuwenhoek, em 1681, em suas prprias fezes. Durante
muitos anos esse protozorio teve denominaes diversas, at que, em 1915, Stiles criou a designao Giardia
lamblia em homenagem ao Prof. A. Giard, de Paris e Dr. Lambl, de Praga. Atualmente, muitos parasitologistas,
principalmente os europeus, preferem a denominao Giardia intestinalis. Giardase ou lamblase a infeco
causadaporGiardialamblia,cujossintomassecaracterizamporperturbaesintestinaiscomaeliminaodefezes
pastosas ou diarricas e dores abdominais discretas. A profilaxia da giardase de difcil execuo, uma vez que
dependenosdotratamentodamatriafecaledolixo,mastambmdocombateaosinsetosresponsabilizados
pela transmisso. Outro cuidado necessrio, a fim de ser impedida a disseminao da parasitose, diz respeito
proteo da gua potvel e dos alimentos, evitando a contaminao dos mesmos com os cistos dos protozorios.
Medidaprofilticaimportantetambmaobservaodospostuladosdaeducaosanitriaedahigienepessoal.

MALRIA
A malria ou impaludismo uma doena infecciosa, no contagiosa, de evoluo crnica, com manifestaes
episdicas de carter agudo e perodos de latncia que podem simular a cura. As infeces do homem e dos
mamferossotransmitidaspormosquitosdogneroAnopheleseasdasaves,porculicneos.

AMEBASE
Asamebassoprotozoriosque,deacordocomamodernaclassificao,estabelecidaem1964porumacomisso
de estudos sobre Problemas de Taxinomia, da Sociedade de Protozoologistas, devem ser includas na superclasse
Sarcodina. Caracterizamse os sarcodinos pelo fato de, quando na forma vegetativa, apresentarem movimentao
pormeiodeumaorganelaespecialchamadapseudpode.


DOENADECHAGAS
AdoenadeChagasumainfecogeneralizada,denaturezaendmicaeevoluoessencialmentecrnica,causada
por um protozorio o Trypanosoma cruzi (Chagas, 1909), famlia Mastigophora e transmitida ao homem e a
outrosanimaishabitualmenteatravsdetriatomneos.

HELMINTOS
PrincipaisDoenasCausadasporHelmintos
(Vermes)
Ascaridase

A ascaridase o resultado dainfestao do helmintoAscaris lumbricoidesno organismo, sendo mais

frequentemente encontrado no intestino. Aproximadamente 25% da populao mundial possuem estes parasitas,
sendo tais ocorrncias tpicas de regies nas quais o saneamento bsico precrio.Este patgeno, conhecido
popularmentecomolombriga,temcorpocilndricoealongado,epodechegarat40centmetrosdecomprimento.
Fmeassomaioresemaisrobustasqueosmachos;eestesapresentamacaudaenrolada.Acontaminaoporele
sedpelaingestodeseusovos,geralmenteencontradosnosolo,gua,alimentosemosquetiveramumcontato
anteriorcomfezeshumanascontaminadas.Nointestinodelgado,liberamlarvasqueatravessamasparedesdeste
rgoesedirecionamaosvasossanguneoselinfticos;seespalhandopeloorganismo.Atingindoafaringe,estas
podem ser liberadas juntamente com a tosse ou muco; ou, ainda, serem deglutidas, alcanando novamente o
intestino. L, reproduzemse sexuadamente, permitindo a liberao de alguns dos seus aproximados 200 mil ovos
dirios,pelasfezes,propiciandoacontaminaodeoutraspessoas.Devidoaoespalhamentodaslarvas,febre,dor
de barriga, diarreia, nuseas,bronquite,pneumonia, convulses e esgotamento fsico e mental so
algunssintomasque podem se apresentar; dependendo do rgo que foi afetado. Entretanto, em muitos casos a
verminoseseapresentaassintomtica.

CiclodaAscaridase

TENASE
Atenaseuma infeco intestinal causada pela fase adulta daTaenia soliume daTaenia saginata. Estes so
parasitashermafroditasdaclassedoscestdeos,dafamliaTaenidae,tambmconhecidocomosolitria.Soseres
extremamente competitivos pelo seu habitat, no precisando nem de parceiro para a cpula, j que so seres
monicos com estruturas fisiolgicas para autofecundao. O complexo tenasecisticercose constituise de duas
entidades distintas, porm causadas pelo mesmo parasita, sendo um srio problema para a sade pblica.
Atenaseeacisticercosesocausadaspelomesmoparasita,squeemfasesdistintasdevida.Atenasecausada
pelaTaeniasoliumouTaeniasaginataquandopresentenointestinodelgadodoshumanos(hospedeirosdefinitivos),
jacisticercose,causadadevidopresenadalarva,podeestarpresenteemhospedeirosintermedirios,sendoque
o cisticerco daT. solium encontrada na musculatura dos sunos edaT. saginata encontrada na dos bovinos. A
tenase causada pelaT. soliumno considerada fatal, enquanto que a cisticercose causada por ela pode levar
morte.Muitasvezesestadoenaassintomtica,masquandoapresentasinaisclnicos,namaioriadasvezes,esto
relacionados a problemas gastrointestinais como dor abdominal, anorexia, diarreia, enjoo, podendo tambm
apresentarirritao,fadigaefraqueza.

ESQUISTOSSOMOSE
AesquistossomosecausadaporplatelmintosdaclasseTrematoda.Estesocorrememdiversasregiesdomundo
sendo que, no Brasil, o responsvel pela doena oSchistossoma mansoni. Este tem a espcie humana
comohospedeirodefinitivo,ecaramujosdeguadocedogneroBiomphalaria,comohospedeirosintermedirios.
Pessoascontaminadaspermitemcomqueoutrosindivduosadquiramadoenaaoliberarovosdoparasitaemsuas
fezeseurina,quandoestassodepositadasemrios,crregoseoutrosambientesdeguadoce;ouquandochegam
atesteslocaispelasenxurradas.Ossintomas,quandoaparecem,surgemaproximadamentecincosemanasapso
contato com as larvas. Nafase aguda(a mais comum), a doena se manifesta por meio de vermelhido e coceira
cutneas, febre, fraqueza, nusea e vmito. O indivduo pode, tambm, ter diarreias, alternadas ou no por
constipaesintestinais.Nafasecrnica,fgadoebaopodemaumentardetamanho.Hemorragias,comliberao
desangueemvmitosefezes,eaumentodoabdome(barrigadgua)sooutrasmanifestaespossveis.

ANCILOSTOMOSE
A ancilostomose causada por trs tipos de vermes: oNecator americanuse outros dois do gneroAncylostoma,
oA. duodenalise oA. ceylanicum. As espcies se diferenciam pelas estruturas formadas por quitina (mesma
substnciadasconchasdoscaracis),semelhantesadentes.Afmea,deacordocomaespcie,peentrequatroe
30milovospordia.Essesovossoliberadosnasfezes,seascondiesclimticasforempropcias,eclodemeentre
cinco e dez dias tornamse larvas infectantes. A infeco ocorre quando a larva atravessa a pele do indivduo por
meiodocontatodiretocomsolocontaminado(porexemplo,aoseandardescalonaterra).Osprimeirossintomas
so a palidez (o que caracteriza o nome popular de amarelo), desnimo, dificuldade de raciocnio, cansao e
fraqueza. Tudo causado pela falta de ferro (anemia) no organismo. Com o tempo, a situao pode progredir e se
agravar, aparecendo dores musculares, abdominais e de cabea, hipertenso, sopro cardaco, tonturas e ausncia
das menstruaes nas mulheres. A ancilostomose particularmente perigosa para as grvidas, pois pode afetar o
desenvolvimento do feto, e para as crianas, retardando (por vezes de modo irreversvel) seu desenvolvimento
mentalefsico.
Ancylostomabraziliensis(larvamigranscutnea,bichogeogrfico)
ObichogeogrficopredominanteemmuitospasestropicaisesubtropicaisenosEstadosUnidos,especialmente
nosestadosdoGolfoedoAtlnticosul.Oorganismoprimariamenteumvermecaninoedegatos,masaslarvas
filariformes em fezes animais podem infectar o homem e causar erupes na pele. Uma vez que as larvas tm a
tendncia de se mover, a erupo migra na pele ao redor do local da infeco. Os sintomas duram o perodo da
persistncialarvalquevariade2a10semanas.Umainfecoamenapodesertratadapelocongelamentodarea
envolvida.Infecesmaioressotratadascommebendazol.Ainfecopodeserevitadapeloafastamentodeguae
solocontaminadocomfezesinfectadas.