ENZIMAS

Cuaderno de trabajo 2011

Servicio de Gentica
Hospital Civil de Guadalajara Fray Antonio Alcalde
y
Laboratorio de Bioqumica
Cuerpo Acadmico UDG-CA-80 Enfermedades Genticas, Neurolgicas y Metablicas
Departamento de Biologa Molecular y Genmica
Centro Universitario de Ciencias de la Salud
Universidad de Guadalajara

Guadalajara, Jalisco, Mxico 14 de Febrero del 2011

Guillermo Prez-Garca, Martha Leticia Ornelas-Arana y cols.

Laboratorio de Bioqumica y Cuerpo Acadmico UDG-CA-80 Enfermedades Genticas, Neurolgicas y Metablicas. Departamento de Biologa Molecular y Genmica. CUCS. Universidad de Guadalajara

Enzimas
Son catalizadores biolgicos (son molculas que retardan
o acelaran una reaccin bioqumica).

Enzima

La naturaleza qumica de las enzimas, en su gran mayora

son protenas, algunas son o contienen como parte de su
estructura, cidos nuclicos (RNA).

Protena

Telomerasa

RNA

AAUCCC
TTAGGG 3
Telmero

5
DNA

BIOSNTESIS DE LA ENZIMA
Ribosoma
Enzima

aa

aa
aa
aa

Cadena
polipeptdica

aa
aa
aa
aa
aa
aa

aa

aa aa
aa
aa
aa
aa
aa
aa
aa
aa aa aa

aa
aa
aa

aa

Enzima

aa
aa

aa aa
aa
aa
aa
aa
aa
aa
aa
aa aa aa

aa
aa
aa

aa

aa
aa

Enzima

Enzima

Enzima

aa aa
aa
aa
aa
aa
aa

aa aa
aa
aa
aa
aa
aa

aa
aa

aa
aa
aa aa aa

aa
aa
aa

aa
aa
aa aa aa

aa
aa

aa

aa

aa

aa
aa

aa

aa

aa aa
aa
aa

aa

aa
aa
aa aa aa

aa
aa
aa

aa

Producto

Sustrato

Producto
Sustrato

Sustrato

E+S

Producto

Enzima

E.S

B
E.P

E+P

ENZIMA. ESTRUCTURA
Cofactor (NAD, FAD, FMN)
Coenzima (vitaminas)
Grupo prosttico (Fe, Zn, Co, Mg, Mn)

Zn
Zn
NH3

aa
aa

aa aa
aa
aa
aa
aa
aa COOH

Sitio
alostrico

aa
aa
aa aa aa

aa
aa
aa

aa

Sitio activo

ENZIMA. CARACTERISTICAS
Se localizan dentro y fuera de la clula. Dentro de la clula
se pueden localizar en cualquier parte, ejemplo: enzimas de
membrana celular, enzimas mitocondriales, enzimas nucleares,
enzima de retculo (RER o REL), enzimas de los lisosomas,
enzimas ribosomales, etc. etc. etc.
Hay pequeas cantidades de enzimas, pero suficientes para
llevar a cabo el metabolismo celular.
Son altamente especficas.
Requieren de un pH ptimo
Requieren de una temperatura ptima

Servicio de Gentica. Hospital Civil de Guadalajara Fray Antonio Alcalde

LAS ENZIMAS SON ALTAMENTE ESPECFICAS

E1

E2

CE D
3

E4

E5

E6

Ncleo

Clula
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S
S

Buffer, pH 7 (pH ptimo)

E
E

100%

Actividad
enzimtica
50%

0%
1

7
pH

10

11

12

13

14

Dieta
protenas
Esfago

Colgena
pH cido

Colgena

Estmago

Pepsina: pH ptimo 1

Pepsina

Pepsingeno

Dudeno

Tripsina: pH ptimo 7
Tripsina
y
Quimotripsina

Colgena
Tripsina
y
Quimotripsina

Aminocidos

Temperatura: 37 C
(Temperatura ptima)

E
E

Una persona con fiebre,

por ejemplo de 40 grados,
puede disminuir la actividad
enzimtica, alterar el metabolismo
y morir. Motivo por el cual es muy
importante bajar la temperatura

100%
Cuando una persona se expone a
temperaturas muy frias, por ejemplo
las personas (alcohlicos) que se
quedan dormidos en la calle, en invierno
y no estn abrigados, su temperatura
corporal baja y las enzimas dejan de
funcionar y la persona se muere por
hipotermia.

Actividad
enzimtica

Pero no todas las temperaturas bajas

pueden destruir a las enzimas, ya que
temperaturas bajas hasta -170 grados
se pueden conservar tejidos como
embriones, vulos, espermatozoides,
bajando la temperatura lentamente y
bajo condiciones controladas.

50%

28

29

0%
30 31

32

33

34

35

36

37

38

39

Temperatura grado centgrados

40

41

Servicio de Gentica. Hospital Civil de Guadalajara Fray Antonio Alcalde

HOLOENZIMA: APOENZIMA + COENZIMA

Apoenzima
(protena)

Co
Co

Holoenzima

Coenzima

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ISOENZIMA
Las isoenzimas, son enzimas que llevan a cabo la misma
reaccin enzimtica, pero tienen una estructura distinta.
Enzima: creatinafosfo kinasa (CPK)
M
CPK MM

M
CPK

CPK BB

CPK MB

Creatina

ATP

Creatina-P

ADP

ISOENZIMA
M: muscle
B: brain

CPK MM

Msculo

CPK MB

Corazn

CPK BB

Cerebro

Servicio de Gentica. Hospital Civil de Guadalajara Fray Antonio Alcalde

CLASIFICACION
DE LAS ENZIMAS
(UIB)

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1. Oxidorreductasas
Catalizan reacciones de
oxidaciones y reducciones
Over The Hi L I L

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2. Transferasas
Catalizan la transferencia de
grupos como metilo, glucosilo de
una molcula donadora a una
molcula aceptora

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Laboratorio de Bioqumica y Cuerpo Acadmico UDG-CA-80 Enfermedades Metablicas. Departamento de Biologa Molecular y Genmica. CUCS. Universidad de Guadalajara

Servicio de Gentica. Hospital Civil de Guadalajara Fray Antonio Alcalde

3. Hidrolasas
Catalizan la ruptura hidroltica de
los enlaces C-C, C-O, C-N, P-O

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Servicio de Gentica. Hospital Civil de Guadalajara Fray Antonio Alcalde

4. Liasas
Catalizan la ruptura de los enlaces
C-C, C-O, C-N y otros enlaces
mediante la eliminacin, dejando
dobles enlaces, pero tambin
agregan grupos a los enlaces
dobles.
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5. Isomerasas
Catalizan cambios geomtricos o
estructurales dentro de una sola
molcula

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6. Ligasas
Catalizan la unin de dos
molculas acopladas a la hidrlisis
de un grupo pirofosforilo en el ATP
o un nuclesido trifosfato similar.

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Laboratorio de Bioqumica y Cuerpo Acadmico UDG-CA-80 Enfermedades Metablicas. Departamento de Biologa Molecular y Genmica. CUCS. Universidad de Guadalajara

ENZIMAS QUE PARTICIPAN EN LA

SNTESIS DE HORMONAS ESTEROIDES
22

21

26
20

23

18

24

12
11

19
1
2

25

16

27

15

14

9
10

17

13

HO

Colesterol

20,22, desmolasa
21 CH3

21 CH3

20 C
18
12
11
1
2

12
11

17

13

19

15

14

1
2

19
1

17

13

14

A
4

11

17-a
-hidroxilasa

16

17

13

19

15

Progesterona

1
2
3

A
4

17

14

O
12
11

15

17

13

16

14

19
1
2
3

A
4

17

14

B
6

17

13

14

15

10

12
11

19
1
3

A
4

13

12
11

19
1
2
3

A
4

13
14

17

16
15

14

17

13

14

9
10
5

B
6

8
7

Aldosterona

18

15

12

17

B
6

15

10
5

B
6

14

17

16

13
14

8
7

Estriol

B
6

15

8
7

17-b
-Estradiol (E2)

OH
12
11

10

HO

18

OH

13

16a
-hidroxilasa

16

17

16
15

OH

A
4

13
14

17

16
15

9
10
5

B
6

8
7

Dihidrotestosterona

OH

16

9
8

Cortisol

Aromatasa

Estrona (E1)

9
10

CH2OH

11

20 C
18

HO

C18 C20

15

19

15

Testosterona

21 CH2OH

14

12
11

O
12
11

1
1
b
-hidroxilasa

HO

18

5a
-reductasa

16

18

OH
16

1
8
-hidroxilasa

10

Aromatasa

11-Desoxicortisol

16

Corticosterona

17

9
10

13

21 CH2OH
20 C
18

19
1

OH

OH
18
12
11

15

Androstenediona

9
10

1
1
b
-hidroxilasa

13

3-b
-hidroxiesteoide
deshidrogenasa y D
5,4 isomerasa

9
10

11-Desoxicorticosterona

20 C
18

16

12

21 CH2OH

11

15

17b
-hiroxiesteroide
deshidrogenasa

18
12
11
19
2

19

HO

5
4

2
1
-hidroxilasa

Androstenediol

16

3-b
-hidroxiesteoide
deshidrogenasa y D
5,4 isomerasa

9
10

17

14

9
10

HO

17,20-liasa

15

17-a
-Hidroxiprogesterona

20 C
18
13

OH

14

21 CH2OH

9
10

2
1
-hidroxilasa

12

1
2

13

19

O
16

11

18
12
11

15

21 CH3
20 C
18
12

19

A
4

OH

17b
-hiroxiesteroide
deshidrogenasa

16

9
10

3-b
-hidroxiesteoide
deshidrogenasa y D
5,4 isomerasa

14

HO

9
10

17

13

Dehidroepiandrosterona

17-a
-Hidroxipregnenolona

21 CH3
20 C
18
12

11
19

3-b
-hidroxiesteoide
deshidrogenasa y D
5,4 isomerasa

11

12

17,20-liasa

15

9
10

A
4

Pregnenolona

O
18

OH
16

HO

HO

20 C
18

17-a
-hidroxilasa

16

14

9
10

17

13

19

Km
Constante de Michaelis
Km = la cantidad de sustrato
que es necesaria para alcanzar
la mitad de la velocidad mxima
S
E

E P
P

S
E+S

S
S

Clula

E
In vitro

Buffer de pH 7
Temperatura 6.5 C
Tiempo 5 minutos

E.S

E.P

E+P

Servicio de Gentica. Hospital Civil de Guadalajara Fray Antonio Alcalde

Vmx

Vmx

100%

Vmx

Vmx

50%

100%

50%

Km = normal

Km = alta

0%

0%
2

30

20

10

40

50

60

70

90

80

100

30

20

10

40

Vmx

60

70

90

80

100

Km=26

Km=17

Vmx

50

[S]% de actividad enzimtica

[S mmol/l]% de actividad enzimtica

Vmx

100%

Vmx

50%

100%

50%

Km = baja

0%

0%
2

10

20

30

40

50

60

70

80

[S]% de actividad enzimtica

90

100

20

10

30

40

50

60

70

80

[S]% de actividad enzimtica

Km=10

Km=10
Km=17

Km=26
Laboratorio de Bioqumica y Cuerpo Acadmico UDG-CA-80 Enfermedades Metablicas. Departamento de Biologa Molecular y Genmica. CUCS. Universidad de Guadalajara

90

100

Servicio de Gentica. Hospital Civil de Guadalajara Fray Antonio Alcalde

Inhibidor
competitivo

Inhibidor
no competitivo

INHIBIDORES
ENZIMTICOS

Enzima

Enzima

Enzima

Enzima

Guillermo Prez-Garca, Martha Leticia Ornelas-Arana y cols.

Laboratorio de Bioqumica y Cuerpo Acadmico UDG-CA-80 Enfermedades Metablicas. Departamento de Biologa Molecular y Genmica. CUCS. Universidad de Guadalajara

Servicio de Gentica. Hospital Civil de Guadalajara Fray Antonio Alcalde

INHIBIDORES COMPETITIVOS
Inhibidor
competitivo

I
I

I
Enzima

Enzima

Bloqueo de la
reaccin enzimtica

Guillermo Prez-Garca, Martha Leticia Ornelas-Arana y cols.

Laboratorio de Bioqumica y Cuerpo Acadmico UDG-CA-80 Enfermedades Metablicas. Departamento de Biologa Molecular y Genmica. CUCS. Universidad de Guadalajara

Servicio de Gentica. Hospital Civil de Guadalajara Fray Antonio Alcalde

INHIBIDORES NO COMPETITIVOS
Inhibidor
no competitivo

I
I

I
I

Enzima

Enzima

Bloqueo de la
reaccin enzimtica

I
Ferroquelatasa
(enzima)

Guillermo Prez-Garca, Martha Leticia Ornelas-Arana y cols.

Laboratorio de Bioqumica y Cuerpo Acadmico UDG-CA-80 Enfermedades Metablicas. Departamento de Biologa Molecular y Genmica. CUCS. Universidad de Guadalajara

Plomo (Pb)
(inhibidor)
Ferroquelatasa
(enzima)

Protoporfirina

Hem

Globina

Fe

Hemoglobina

Hem-Globina
Hem-Globina
Hem-Globina
Hem-Globina

Servicio de Gentica. Hospital Civil de Guadalajara Fray Antonio Alcalde

Autores

Martha Leticia Ornelas-Arana

Dra. en C. Gentica Humana
Profesor de Bioqumica, Centro Universitario de Ciencias de la Salud, Universidad de
Guadalajara.
Cuerpo Acadmico UDG-CA-80 Enfermedades Metablicas, CUCS, UDG.
Guillermo Prez Garca
Dr. en C. Gentica Humana
Jefe del Servicio de Gentica, Antiguo Hospital Civil de Guadalajara Fray Antonio
Alcalde.
Jefe del Laboratorio de Bioqumica, Departamento de Biologa Molecular y Genmica del
Centro Universitario de Ciencias de la Salud, Universidad de Guadalajara.
Coordinador del Cuerpo Acadmico UDG-CA-80 Enfermedades Metablicas, CUCS,
UDG.
Rosalinda Mariscal-Flores
Dra. en C. Ciencias de la Salud
Directora Preparatoria No. 16, SEMS, Universidad de Guadalajara.
Cuerpo Acadmico UDG-CA-80 Enfermedades Metablicas, CUCS, UDG.
Nohem Martha Martnez-Zendejas
Maestra en Pedagoga
Profesora del Laboratorio de Bioqumica, Departamento de Biologa Molecular y Genmica
del Centro Universitario de Ciencias de la Salud, Universidad de Guadalajara.
Cuerpo Acadmico UDG-CA-80 Enfermedades Metablicas, CUCS, UDG.
Guillermo Prez Ornelas
Estudiante, Preparatoria No. 5, SEMS
Universidad de Guadalajara
Cuerpo Acadmico UDG-CA-80 Enfermedades Metablicas, CUCS, UDG.
Simn Quetzalcatl Rodrguez Lara
Carrera de Medicina
Centro Universitario de Ciencias de la Salud, Universidad de Guadalajara.
Cuerpo Acadmico UDG-CA-80 Enfermedades Metablicas
Carlos Gerardo Prez Morales
Profesor Preparatoria No. 16, SEMS, Universidad de Guadalajara.
Cuerpo Acadmico UDG-CA-80 Enfermedades Metablicas

Guillermo Prez-Garca, Martha Leticia Ornelas-Arana y cols.

Laboratorio de Bioqumica y Cuerpo Acadmico UDG-CA-80 Enfermedades Metablicas. Departamento de Biologa Molecular y Genmica. CUCS. Universidad de Guadalajara