RECONOCIMIENTO DE MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS DE

LABORATORIO.

INTRODUCCIN:

La prueba de Papanicolaou (llamada as en honor de Georgios

Papanicolaou, mdico griego que fue pionero en citologa y deteccin temprana de
cncer), tambin llamada citologa exfoliativa o citologa vaginal, se realiza para
diagnosticar el cncer cervicouterino.
El objetivo de esta prueba consiste en encontrar los cambios de las clulas
del cuello uterino que son precursoras del cncer, antes de que empiecen a
causar sntomas y permitiendo que los tratamientos sean eficaces. El cncer
cervicouterino es una enfermedad 90 % prevenible, si la prueba de Papanicolau se
realiza regularmente.
Esta prueba deben realizrsela todas las mujeres que hayan iniciado su
vida sexual una vez al ao durante dos o tres aos consecutivos, y si los
resultados son negativos se repetir cada tres a cinco aos en caso de no haber
factores de riesgo y hasta los 65 aos.
Si existen factores de riesgo para cncer de cuello de tero (Factores
hereditarios, edad, inicio a temprana edad de relaciones sexuales, infeccin por
VPH o historia personal de ETS, tabaquismo, multiparidad, inmunodepresin o
toma de anticonceptivos orales) el seguimiento tendr que ser anual.
La tcnica de Papanicolau puede aplicarse asimismo a la citologa de otro
rganos, desde material expectorado de las vas respiratorias hasta un cepillado
endoscpico gstrico sin dejar de mencionar un hisopado nasal o rectal.

OBJETIVOS.
1. Identificar cada uno de los equipos, reactivos y materiales que se usan en
el procedimiento de la coloracin PAP.
2. Conocer el porqu del uso de los diferentes reactivos en este tipo de
coloracin.
3. Conocer el fundamento de los colorantes usado

Marco terico:

Los materiales, reactivos y equipos observados fueron los siguientes, a

continuacin se detallar a cada uno de ellos.
1. Materiales:
1.1. Vidrio.
1.1.1. Canastilla de vidrio:
Sirve para colocar un nmero limitado de lminas (10) para poder
sumergirlas en cada uno de los reactivos a utilizar durante la
coloracin.

1.1.2. Cubeta de vidrio:

Se utiliza para almacenar reactivos, agua, cidos, alcohol, el cual
facilitar el proceso de coloracin de las lminas.

1.1.3. Bagueta.
Se utiliza para mezclar los reactivos y realizar el montaje a las
lminas con el blsamo de Canad.

1.1.4. Probeta.
Se utiliza para medir volmenes para realizar el preparado de los
reactivos a utilizar en el proceso de coloracin.

1.1.5. Embudo:
Se utiliza para realizar el filtrado de los reactivos con ayuda de un
papel filtro.

1.1.6. Beakers:
Se utiliza para trasvasar volmenes de un recipiente a otro.

1.1.7. Cubeta de Koplic.

Se usa exclusivamente para depositar xilol u alcohol.

1.1.8. Lminas portaobjetos:

Son utilizados para realizar el extendido de las muestras.

1.1.9. Pipetas.
Se utiliza para medir reactivos en volmenes pequeos.

1.2. Otros.
1.2.1. Campo.
Se utilizado para trabajar en una zona ms segura y evitar la
contaminacin de la muestra.

1.2.2. Papel filtro:

Utilizado para filtrar los reactivos al momento de su preparacin.

1.2.3. Lpiz marcador de vidrio punta de diamante:

Utilizado en el marcaje de las lminas para evitar que se borre la
codificacin por accin de los reactivos.

1.2.4. Mascarilla:
Se utiliza como proteccin personal para evitar el contagio con
agentes patgenos.

1.2.5. Papel absorbente:

Utilizado para el secado de las canastillas de vidrio antes de
pasar de una cubeta de vidrio con reactivo a otro.

1.2.6. Parafilm:
Se utiliza como proteccin de las cubetas de vidrio para dar
proteccin a las cubetas que contienen los reactivos.

2. Reactivos:

2.1. Alcohol al 96 %:
El Alcohol Etlico al 96% reemplazar el agua extracelular e
intracelular debido a que los colorantes posteriores son ms solubles
en alcohol que en agua.

2.2.

Hematoxilina:

Las molculas colorantes de Hematoxilina de Harris penetrarn en la

clula y se dirigirn al ncleo de la misma por un proceso Fsico
Qumico del Tipo Atraccin Electrosttica. Esta unin se debe gracias
a los grupos Fosforitos cidos (-) del ncleo que le dan carga global
Negativa a la estructura celular tindolo de un color violeta.

2.3.

2.4.

cido clorhdrico:
Es una dilucin del cido Clorhdrico al 1%, por lo que presenta una
carga fuertemente cida (-). Las Cargas Negativas ingresarn a la
clula y se unirn por diferencia de carga con las Cargas Positivas,
en este caso, con los Grupos Auxocromos (+) de las molculas de
Hematoxilina.

Hidrxido de amonio.

Le darn carga global negativa a algunas molculas de

Hematoxilina separndolas del ncleo, logrando la decoloracin
parcial evitando la sobresaturacin de colorante en el ncleo que
podran impedir la observacin de finos detalles nucleares.

2.5.

Orange G:
Es un colorante monocromtico penetra rpidamente en el
citoplasma celular y tie especficamente la Queratina de un
color naranja brillante. La Queratina normalmente no se
encuentra en el citoplasma de las clulas normales pero aparece
en las clulas epiteliales crvico vaginales en Carcinomas
Queratinizados

2.6.

Eosina.
La Eosina teir de rosado el citoplasma de las Clulas Maduras:
Superficiales, al unirse electrostticamente a las protenas
citoplasmticas exclusivas de clulas Metabolicamente
Inactivas

2.7.

Etanol absoluto:
Busca eliminar el agua intra y extracelular, ya que los posteriores
procesos de Aclaramiento y Montaje emplean insumos que nos
son miscibles en Agua.

2.8.

Xilol:
Elimina de los espacios intra y extracelulares, ya que el posterior
proceso de Montaje emplean sustancias que nos son miscibles
en Alcohol. El Xilol cambia el ndice de Refraccin de la Clula
transparentndola y permitiendo una mejor observacin de
detalles celulares.

2.9.

Blsamo de Canad:
Se utiliza para realizar el montaje de las lminas para evitar la
prdida de la muestra coloreada.

3. Equipos:
3.1. Microscopio:
Constituye uno de los principales y esenciales equipos del
laboratorio, para dar lectura de las lminas coloreadas.

4. Pasos y orden de los reactivos:

1. Alcohol 96%. Remueve los restos de laca.

2. Agua. Hidrata la muestra para recibir al primer colorante.

3. Hematoxilina. Colorea al ncleo.
4. Agua.
5. HCL al 0.5%.
6. Agua.
7. Agua amoniacal.
8. Agua.
9. Alcohol 96%. Mordiente y permeabiliza.
10. Orange.
11. Alcohol 96%.
12. Alcohol 96%.
13. Eosina.
14. Alcohol 96%.
15. Alcohol 96%.
16. Alcohol absoluto.
17. Alcohol absoluto.
18. Xilol.
19. Xilol.
20. Xilol.

Conclusiones:
1. Logre identificar cada uno de los equipos, reactivos y materiales que se
usan en el procedimiento de la coloracin PAP en el laboratorio de citologa.

2. Con ayuda del docente se logr conocer el porqu del uso de los diferentes
reactivos en este tipo de coloracin.
3. Durante el proceso de prctica y al elaborar el informe se logr conocer el
fundamento de los colorantes y reactivos usado en la coloracin.