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INTEGRANTES:
131.0605.056
131.0605.060
131.0605.043
2015
NDICE
INTRODUCCIN ..................................................................................................................3
OBJETIVOS ...........................................................................................................................4
OBJETIVO ESPECFICO..........................................................................................4
INTRODUCCIN
Es indudable que las plantas constituyen una fuente inagotable de una serie de principios
activos, muchas de las cuales han sido usadas como controladores patognicos en zonas
poco accesibles a obtener medicamentos y desinfectantes.
El lupinus mutabilis sweet (chocho) es una leguminosa oriunda de los andes
latinoamericanos; las semillas desamargadas y cocidas son usadas por el poblador andino
como alimento y medicina.
El gnero lupinus por su alto contenido de alcaloides no permite el consumo directo, es
por ello que se debe de quitar su amargor. El lquido del chocho hervido, es usado por los
ganaderos para combatir las garrapatas de los ganados, ovinos y camlidos; tambin son
usados como controladores de crecimiento y fertilizantes.
Probablemente no existe planta medicinal ms conocida y estudiada que el ajo; se ha
usado desde tiempos inmemorables. El ajo es considerado como uno de las plantas de alta
eficacia contra bacterias; sus compuestos qumicos le dan esta caracterstica,
principalmente la alicina, el cual acta como antibactericida.
OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL
OBJETIVO ESPECFICO
MARCO TERICO
EL AJO
Allium sativum
El ajo es una planta perenne bulbosa que posee hojas basales envolventes al tallo.
El uso del ajo se remonta desde tiempos antiguos, y su uso ha sido avalado por
civilizaciones como los egipcios, celtas, romanos y griegos, los cuales destacan las
propiedades medicinales de ste como ingrediente principal de variados medicamentos
para paliar una gran cantidad de enfermedades y malestares.
1.1.Principales componentes del ajo1
Los principales componentes activos del ajo son:
Aminocidos: cido glutmico, argenina, cido asprtico, leucina, lisina, valina,
etc.
Minerales: principalmente: manganeso, potasio, calcio y fosforo, y en cantidades
menores: magnesio, selenio, sodio, hierro, zinc y cobre.
Vitaminas: principalmente: vitamina B6, tambin vitamina C y, en cantidades
menores: cido flico, pantotnico y niacina.
Aceite esencial con muchos componentes sulfurosos.
Alina que, mediante la enzima alinansa, se convierte en alicina.
Quercetina.
Azcares: fructuosa y glucosa.
La composicin alimentaria del ajo por cada 100gr. Est formada por los principales
elementos siguientes:
Agua
59gr.
caloras
149kcal
Lpidos
0.5gr
Carbohidratos
33.07gr
Fibra
2.1gr
Manganeso
1672mg
http://apps.elsevier.es/watermark/ctl_servlet?_f=10&pident_articulo=13097334&pident_usuario=0&p
contactid=&pident_revista=4&ty=102&accion=L&origen=zonadelectura&web=www.elsevier.es&lan=es
&fichero=4v26n01a13097334pdf001.pdf
http://ideasana.fundacioneroski.es/web/es/13/escuela_1/escuela1_ajo.pdf
Potasio
401mg
Azufre
70mg
Calcio
181mg
Fosforo
153mg
Magnesio
25mg
Sodio
17mg
Vitamina B6
1235mg
Vitamina C
31mg
cido glutamnico
0.805g
Argenina
0.634g
cido asprtico
0.489g
Leucina
0.308g
lisina
0,273g
https://teteriaalmedinadotorg2.files.wordpress.com/2012/10/propiedades-del-ajo.pdf
respiratorio
(gripe,
bronquios,
faringitis,
etc.),
digestivo
EL ROMERO
Rosmarinus officinalis
1.4.Composicin qumica3
En la planta se han reportado diversos compuestos qumicos los cuales han sido
agrupados de manera general por diversos autores en cidos fenlicos, flavonoides,
aceite esencial, cidos triterpnicos y alcoholes triterpnicos (Caribe y Campos 1991,
Botsaris 1995, Atti-Santos 2005). Aceite esencial de romero es el componente ms
estudiado cualitativamente.
De manera general, la composicin qumica del aceite esencial de romero ha sido
descrita en trabajos que indican el tipo de molculas activas presentes. Se ha detectado
la presencia de -pineno, -pineno, canfeno, steres terpnicos como el 1,8-cineol,
alcanfor, linalol, verbinol, terpineol, carnosol, rosmanol, isorosmanol, 3-octanona,
isobanil-acetato y -cariofileno; los cidos vanlico, cafico, clorognico,
rosmarnico, carnsico, urslico, oleanlico, butilnico, betulnico, betulina, amirina, -amirina, borneol, y acetato de bornilo (Ruiz 2000, Almela 2006, Montes
de Oca 2010, Tschinggeri & Bucar 2010).
Antecedentes
Faixova & Faix (2008) evaluaron la actividad antioxidante y antimicrobiana de extractos etanlicos de romero in vitro e in situ en un producto crnico. Los dos tipos de
extractos mostraron efecto antimicrobiano en S. aureus, L. monocytogenes y
Salmonella tiphymurium, por otro lado se encontr actividad antioxidante parecida a
http://www.umar.mx/revistas/43/0430103.pdf
los antioxidantes sintticos, por lo que tienen la posibilidad de usarse como aditivos
que son capaces de disminuir la oxidacin de lpidos. Romero et al. (2010),
desarrollaron una aplicacin de la combinacin quitosano y aceites esenciales de
romero al 1% sobre el crecimiento de L. monocytogenes en la superficie de calabazas
(Cucurbita moschata Dutch). Este recubrimiento logr inhibir el crecimiento de esta
bacteria.
EFECTO ANTIBACTERICIDA
El extracto de hoja de R. officinalis afecta a la membrana celular de las bacterias,
la actividad citotxica afecta directamente a la fase mittica de las bacterias Gram
positivas y Gram negativas. Por destacar, Escherichia coli, Listeria
monocytogenes, Salmonella spp. y S. aureus, estos microorganismos son
susceptibles a los componentes del extracto de romero, en cuyo extracto
prevalecen el cido cafico, cido rosmarnico, carnosol, cido carnoslico y
flavonoides.46,47 Tambin se obtuvieron extracto de hoja de romero y se
comprob su actividad contra bacterias Gram positivas: S. aureus, y B. cereus, y
bacterias Gram negativas: E. coli,
Pseudomonas aeruginosa) y antifngica: Candida albicans
EL CHOCHO 4
Lupinus mutabilis Sweet
El aceite y las protenas almacenadas en los cotiledones del chocho, son los elementos de
mayor inters nutricional e industrial.
Sin embargo, el grano contiene algunas sustancias antinutritivas que limitan el uso directo
del grano en la alimentacin humana y animal. Entre estas sustancias se encuentran los
alcaloides, que confieren al grano un carcter txico y sabor amargo (Guerrero, 1987).
La utilizacin potencial de los alcaloides como agentes fungicidas, insecticidas,
bactericidas y nematicidas, se fundamenta en su actividad inhibidora de la sntesis de
protena, del RNA transmisor, depresores del sistema nervioso central, oxitotcicos,
antiarritmicos e hipoglicemiantes (Mc Cawley, 1985).
1.5.Composicin de los alcaloides del chocho
http://www.iniap.gob.ec/nsite/images/documentos/ALCALOIDES%20DEL%20CHOCHO.pdf
componentes
como
la
3--hidroxilupanina
13-hidroxilupanina
1.6.Actividad antibacteriana
a) Ensayos in vitro
A travs del mtodo de dilucin en placas Petri utilizando como medio de cultivo
agar base, como control positivo estreptomicina y agua como control negativo, se
determin que la concentracin inhibitoria mnima (CIM) del extracto de hojas de
chocho, contra staphylococcus aureus (ATCC 25923), es de 10mg/ml.
A diferencia del extracto de hojas, el extracto alcaloidal, obtenido a partir del agua
de coccin del chocho, a una concentracin de 10mg/ml. Presenta actividad
antibacteriana de amplio espectro contra las siguientes sepas de la American Type
Culture Collection (ATCC): Escherichia coli (9637), Salmonella gallinarum
(9184), Klebsiella pneumoniae (10031), Mycobacterium smegmatis (607),
Candida albicans (10213), Pseudomona aeruginosa (27853).
b) Ensayos in vivo
Los extractos alcaloidales obtenidos a partir de las hojas y del agua de coccin del
chocho, a una concentracin es de 10mg/ml, se incorporaron como ingrediente
antibacteriano en la formacin de un gel, el mismo que fue aplicado en la piel de
ratones Mus musculus (20 30 g de peso corporal), con infeccin drmica
inducida por S. aureus y E. coli. En esta prueba como blanco positivo se utiliz un
gel de sulfadiacina de plata; mientras que los blancos negativos constituyeron el
gel si ingrediente antibacteriano y un grupo experimental de animales infectados,
sin tratamiento.
La efectividad del gel conteniendo extracto alcaloidal obtenido a partir del agua
de coccin del chocho, se manifiesta desde el primer da de aplicacin tpica, a
travs de la cicatrizacin de la herida, proceso que se alcanza totalmente a los 18
das de tratamiento contra E. coli y 21 das de tratamiento contra S. aureus. Estos
Microbiologa Ambiental y Sanitaria
10
perodos son ms cortos que el que se obtiene con gel de sulfadiacina de plata (26
das).
1.7.Actividad antifngica
Un agente antifngico o antimictico es cualquier sustancia capaz de producir una
alteracin de las estructuras de una clula fngica, logrando inhibir su desarrollo y
alterando su viabilidad y capacidad de supervivencia directa o indirectamente, lo que
facilita el funcionamiento de los sistemas de defensa del husped (Vlez, 1996).
El extracto crudo de alcaloides obtenido a partir del grano, en concentraciones de 20,
10 y 5 mg/ml, result efectivo en el control de Mycrosporum canis y trichophytom
rubrum actividad manifestada en el halo de crecimiento inferior al 25%, en relacin
al control negativo (tratamiento sin alcaloides). Mientras que el extracto alcohlico de
las hojas del chocho a 25 y 10 mg/ml inhibe el crecimiento de Mycrosporum canis, no
as el de Trichophytom rubrum.
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ANTECEDENTES
El chocho (Lupinus mutabilis Sweet); es una leguminosa de origen andino, que contiene
aceites y protenas almacenados en sus cotiledones. Sin embargo el grano contiene
algunas sustancias antinutritivas que limitan el uso directo del grano en la alimentacin
humana y animal; entre estas sustancias se encuentran lo alcaloides que confieren al grano
un carcter toxico y sabor amargo (Guerrero 1987).
En el chocho los alcaloides son de tipo quinolizidnico poseen un heterociclo nitrogenado
biciclico (quinolizidina) y son de carcter bsico.
Generalmente se extraen con soluciones cidos en agua con lo cual se separan los
alcaloides y las sales. Estos compuestos estn presentes en todos las especies del genero
lupinus, se distribuyen en las plantas y particularmente e las ramas y semillas (Arias
2000).
No se conoce con exactitud de la funcin de estos compuestos en las plantas, parece que
el principal propsito es la defensa del vegetal contra insectos, animales herbvoros y
patgenos microbianos.
Por otra parte, en la industria alimentaria recientemente se ha generado un inters por los
extractos y aceites esenciales derivados de las plantas, debido a su propiedad de controlar
el crecimiento de microorganismos patgenos como
Fusarium spp., Alternaria spp., Aspergillus spp., Penicillium spp. Y Rhizopus spp., que
han sido reportados como agentes causantes de enfermedades producidas por alimentos
en descomposicin.
12
Otro aspecto importante a considerar es que aunque la FDA clasifica los aceites
esenciales en la categora GRAS (Generally recognized as safe), es decir, Generalmente
reconocido como seguro, y ha evaluado y autorizado su empleo en productos destinados
a los seres humanos, su uso como aditivos es limitado debido a los cambios sensoriales
en aroma y sabor que pueden causar en los productos tratados, los cuales no siempre
resultan del agrado del consumidor final.
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MATERIALES Y MTODOS
Materiales:
Matraz
Pipeta
Placas Petri
Tubos de ensayo
Hisopos
Aza de kolle
Gradillas
Mechero
Trpode
Mallas de asbestos
Balanza
Incubadora
Autoclave
Frascos de muestreo
Chocho, romero, ajo
Agares ( manitol salado, agar nutritivo, agar mac conkey, agar sangre)
TSI, LIA, citrato, indol
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PROCEDIMIENTO
La muestra tomada se
siembra en el agar manitol
salado q previamente se
prepar.
Luego se incuba a
37c por 24 hrs.
Se remojo un Isopo en
caldo nutrivo
Luego se incuba a
37c por 24 hrs.
Se tom la muestra
de todo el rededor de
la tasa del inodoro
Se sembr en el agar
Mac conkey
previamente haba
sido preparado
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Se remoj el Isopo
en nutritivo para
tomar la muestra.
Se toma la muestra de la
boca entre la mejilla y
los dientes
Se siembra la muestra
en el agar sangre que ya
estaba preparado.
De las muestras tomadas se sembraron las cepas para su respectiva identificacin o prueba
bioqumica.
-
Se sembr en TSI.
Se sembr en LIA.
Se sembr en CITRATO.
Se sembr en INDOL.
De los microorganismos identificados en la prueba bioqumica se siembra en agar
nutritivo preparados con las muestras respectivas (chocho, romero, ajo).
Se sumergi 7 discos en cada uno de los tubos de muestra donde se encontraban
(E.coli, salmonella, Staphylococcus sp, Psedomona y Streptococcus sp).
En el agar nutritivo se siembran los microorganismos mencionados anteriormente.
Luego se sumerge los 6 discos en las muestras de agua de chocho, romero y ajo;
luego se sac los discos sumergidos en cada muestra y se les coloc en las placas.
Luego se incub a una temperatura de 37C por 24-48 Hrs
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RESULTADOS E INTERPRETACIN
su
poder de
inhibicin
tambin
disminuye,
17
CHOCHO
INTERPRETACIN: los alcaloides del chocho al estar combinados con algn sustrato
disminuyen
su
poder
antimicrobiano
permitiendo
el
18
Staphylocuccus aureus
19
Escherichia coli
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DISCUSIN DE RESULTADOS
CHOCHO
En informes realizados anteriormente por el INSTITUTO NACIONAL AUTNOMA
DE INVESTIGACIONES AGROPECUARIAS (INIAP) indica que los alcaloides del
chocho presentan alta actividad antibacteriana frente a los siguientes microorganismos:
Escherichia coli, Staphylococcus auereus, Salmonella gallinarum, Pseudomona
aeruginosa y otros 5 .
En nuestro proyecto de investigacin comprobamos que los alcaloides que contiene el
chocho no inhiben completamente a las bacterias mencionadas anteriormente por lo que
se supone que se pudo haber usado poca cantidad de granos de chocho para obtener el
agua de coccin, otro factor que pudo haber interferido en la eficacia antibactericida
pudo haber sido el material orgnico propio de los granos del chocho.
Por otro lado se estim que al ser guardado la muestra por un tiempo haya afectado su
capacidad antibacteriana.
AJO
La investigacin realizada por la universidad mayor de San Marcos facultad de
odontologa (E.A.P. de odontologa) seala que el ajo en toda sus formas de uso es eficaz
frente a bacterias como: Pseudomonas, Proteus, Staphylococcus aureus, Escherichia
coli,
Salmonella,
Klebsiella,
Micrococcus,
Bacillus
subtulis,
Clostridium,
Mycobacterium y Helicobacter.
En el proyecto realizados por nuestro grupo se pudo comprobar que esto no es del todo
cierto ya que la alicina no es muy efectiva frente a ciertos microorganismos como:
Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Salmonella, streptococus, por lo que pudimos
observar el crecimiento de estos microorganismos en mnimas proporciones en las
placas. Los resultados obtenidos nos hacen suponer que no se us la cantidad adecuada
de ajo para realizar la prueba. Por otro lado otro factor que pudo haber ocasionado esta
contradiccin pudo haber sido que al ser guardado la muestra por un tiempo haya
afectado su capacidad antibactericida, puesto que la alicina del ajo es muy voltil.
http://www.iniap.gob.ec/nsite/images/documentos/ALCALOIDES%20DEL%20CHOCHO.pdf
21
ROMERO6
El informe realizado por la universidad mayor de San Marcos por la facultad de
odontologa (E.A.P. odontologa) nos da a conocer que el extracto de las hojas del
romero es eficaz frente a las bacterias Gram negativas y Gram positivas como:
Escherichia coli, Listeria monocytogenes, Salmonella spp. y S. aureus. Seala que
estos microorganismos son susceptibles a los componentes del extracto del romero.
http://cybertesis.unmsm.edu.pe/bitstream/cybertesis/3092/1/purca_pt.pdf
22
CONCLUSIONES
El agua de coccin del chocho al ser combinado con el agar nutritivo disminuye su
capacidad antibacteriana; mientras que cuando es usada sin combinarlo resulta ser
ms
El agua de romero al ser combinado con un sustrato resulta no ser bastante efectivo
frente a la salmonella; disminuye su capacidad antibacteriana. Por otra parte al usarlo
sin combinarlo con otras sustancias su eficacia aumenta considerablemente
disminuyendo el crecimiento de los microorganismos con los que se trabaj.
La alicina del ajo es un componente muy voltil e inestable, tiene una vida media y
muy corta, incluso a temperatura ambiente. En unas cuantas horas, la alicina puede
descomponerse en muchos tipos de tiosulfinatos; por lo que al realizar el trabajo se
debi de utilizar con una preparacin instantnea para que esta sea ms efectiva.
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RECOMENDACIONES
Es necesario lavar antes de hacer hervir el chocho para que los compuestos
orgnicos no afecten la eficacia anti bactericida.
Para poder obtener una mayor eficiencia anti bactericida con el agua de chocho
es necesario usarlo en un periodo corto (1 da).
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BIBLIOGRAFA
LINKOGRAFA
http://www.iniap.gob.ec/nsite/images/documentos/ALCALOIDES%20DEL
%20CHOCHO.pdf
http://apps.elsevier.es/watermark/ctl_servlet?_f=10&pident_articulo=131248
40&pident_usuario=0&pident_revista=4&fichero=4v27n07a13124840pdf00
1.pdf&ty=77&accion=L&origen=doymafarma&web=www.doymafarma.co
m&lan=es
http://www.umar.mx/revistas/43/0430103.pdf
http://www.bdigital.unal.edu.co/8044/1/197496.2011.pdf
http://www.scielo.org.ve/pdf/rsvm/v33n1/art08.pdf
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ANEXOS
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