Cuantificacin de albmina de suero bovino (BSA) por mtodo colorimtrico de

Lowry y absorcin en ultravioleta (=280 nm)

Durn-Cabrera Natalia, Hernndez-Garca Williams, Lujn-Soto Eduardo, RomoCasanueva Hernn, Trujillo-Minero Nicole.
Bioqumica Experimental, Departamento de Bioqumica, Sem. 2016-1, Facultad
de Qumica, UNAM
Av. Universidad 3000, Ciudad Universitaria, CP. 04510, Mxico DF.

RESUMEN
(A manera de prosa)

Palabras Clave: BSA, cuantificacin, curva estndar, Lowry, absorcin a 280 nm.

INTRODUCCIN
Sin

duda

relacin entre la radiacin emergente de la

alguna

una

de

las

muestra

entre

la

radiacin

incidente

determinaciones ms usadas en el mbito

original se le denomina transmitancia1, la

de la investigacin bioqumica es la

cual se relaciona de manera logartmica

cuantificacin de protenas. Estimar la

con la absorbancia2. Este trmino es

concentracin de protena contenida en

proporcional a la concentracin y queda

una muestra es necesario no solo en los

establecido en la Ley de Lambert y Beer.

laboratorios de investigacin, sino tambin

Empleando tal fundamento, se pueden

en la industria farmacutica, alimenticia y

construir

biotecnolgica en general. Para llevar a

observar la variacin de la absorbancia de

cabo esta tarea existen un gran variedad

una especie a una longitud de onda en

de mtodos; la gran mayora utiliza como

funcin de diferentes concentraciones.

herramienta

las

Dentro de los mtodos de cuantificacin

espectrofotomtricas.

ms sencillos y rpidos se encuentra la

Este trmino se refiere al uso de fuentes

absorbancia de soluciones de protena en

de radiacin (UV-Vis) para incrementar la

la regin del ultravioleta; ya que el

energa de las molculas que absorben tal

contenido de residuos de aminocidos

radiacin. Esto genera un estado de

aromticos3

excitacin que se revierte por la emisin de

principalmente) absorben a 280 nm. Sin

parte de la radicacin incidente. A la

embargo, la especificidad del mtodo no es

de

determinaciones

cuantificacin

Bioqumica Experimental- Grupo 06- Equipo 05- Agosto 2015.

curvas

de

calibracin

(triptfano

para

tirosina,

muy alta ya que otras sustancias no

determinacin cuantitativa del contenido de

proteicas

protena de una muestra problema.

(cidos

nucleicos)

absorben

fuertemente en esta regin, ocasionando

interferencias. Por ello se han desarrollado

MATERIALES Y MTODOS

nuevos mtodos dentro de los cuales

destacan

los

colorimtricos,

especficamente el mtodo de Lowry. ste

se lleva a cabo en dos pasos que lleva al
desarrollo de color: el primero es la
reaccin de los enlaces peptdicos

con

Cu2+ en medio alcalino (coloracin tenue)

seguida de la reduccin del reactivo
fosfomolbdico-fosfotngstico (reactivo de
Folin-Ciocalteu)

lo

que

ocasiona

un

incremento en el color de la solucin.

El objetivo general de la experimentacin
fue el de construir curvas de calibracin
(manipulando

el equipo de manera

adecuada) por medio de los

mencionados

para

REFERENCIAS
1.-Garca Arellano H., Duhalt Vzquez
R.,Cuantificacin de protenas, Bio Tecnologa,
vol 3, 1998.
2.- Beat,
R.
D.
(1978).
Concepts,
instrumentation and techniques in atomic
absorpition espectrofotometry. Perkin-Elmer Co.
3.- Wang, C. S., & Smith, R. L. (1975). Lowry
determination of protein in the presence of
Triton X-100. Analytical biochemistry, 63(2),
414-417.

mtodos

realizar

la

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