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Introduccin

Que son las enzimas?


Son sustancias orgnicas de naturaleza proteica, elaboradas por las clulas que tienen como
funcin acelerar o provocar las reacciones qumicas que se efectan en los seres vivos. Las
enzimas son de accin especfica ya que actan exclusivamente catalizando un tipo de
reaccin qumica.
Accin cataltica
Gracias a las enzimas, las clulas pueden efectuar sus reacciones a bajas presiones, a
temperaturas moderadas, a cambios en la alcanidad o acidez (variaciones en el pH.). El
substrato es la sustancia sobre la cual la enzima reacciona.
Cmo actan las enzimas en las reacciones qumicas?
Las enzimas actan acelerando la velocidad de una reaccin o bien haciendo posible una
determinada reaccin. Para realizar su accin la enzima se une al substrato, por absorcin,
encajando la superficie de una en la otra de una forma tal, que se poda comparar con una
llave de una cerradura. Esta combinacin origina un complejo reversible enzima - substrato
intermedio, que luego se descompone para liberar los productos de una reaccin y la
enzima que es capaz de unirse a otra molcula del mismo substrato para as comenzar de
nuevo la accin.
Como es la especificidad de accin enzimtica?
Cada tipo de enzima cataliza un tipo especfico de reaccin qumica. Por ello, se necesitan
centenares de tipos de enzimas diferentes en el metabolismo de cualquier clase de clulas.
Es decir las enzimas presentan un alto grado de especificidad, ya que cada una de ellas
acta exclusivamente en una determinada reaccin y sobre un determinado substrato. La
ureasa por ejemplo solo acta sobre la urea. Las hidrogenasas alcohlicas actan sobre los
alcoholes.
-Factores que afectan a la actividad enzimtica

La temperatura: es importante porque cambia la actividad enzima por dos razones:


o Si se aplica calor: al calentarse las molculas adquieren mayor energa
trmica, presenta mayor energa cintica (mayor velocidad), si aumenta la
velocidad del sustrato y el enzima, facilita el encuentro de los dos (el calor

puede ser en un principio beneficioso ya que aumenta la velocidad y facilita


el encuentro), pero si se aplica demasiada calor puede provocar la
desnaturalizacin de la protena (decae la actividad cataltica),
desnaturalizacin de la enzima.
o Pero si disminuye la temperatura, disminuye la velocidad, la energa
cintica, no se van a encontrar con tanta velocidad, su posterior unin y su
posterior formacin. Si se disminuye tanto la temperatura, puede ocurrir la
desnaturalizacin de la protena de la enzima.
Se desnaturaliza antes si se aplica demasiada temperatura que si se disminuye demasiado la
temperatura. Todos los enzimas van a tener una temperatura optima, para que la actividad
de los enzimas sea perfecta, trabajan mejor que nunca (la de los seres humanos es la de
36.5)

El pH: las enzimas tiene que trabajar en unas concentraciones de pH concreta (como
protenas que son) si se salen de esas condiciones de pH se pone la enzima en
condiciones desfavorables y se puede producir la desnaturalizacin del enzima. Es
malo tanto el pH bsico como el pH cido. Nuestros enzimas tienen un pH ptimo
de trabajo, sobre pH 7.

En esta prctica se realizaran experimentos con un catalizador inorgnico (MnO2) y otro


orgnico (peroxidasa) esta ltima se encuentra tanto en tejidos vegetales como animales y
acta sobre el perxido de hidrogeno o agua oxigenada (H2O2), este perxido es un
producto de la actividad celular que al acumularse en exceso intoxica la celula por lo cual
debe ser degradado por una enzima especifica.
Objetivos
1-Observe el efecto de la enzima peroxidasa, que se halla presente en tejidos animales y
vegetales, sobre el agua oxigenada.
2-compare la accin de la peroxidasa (catalizador orgnico) y del bixido de magnesio
(catalizador inorgnico) sobre un miso sustrato (agua oxigenada).
3-compruebe el efecto de la variacin de la temperatura en la actividad enzimtica.

Materiales y reactivos
-tubos de ensayo de 17 x 150 milmetros
-gradillas
-pinzas de madera
-morteros
-Agua oxigenada
-hgado fresco
-papas
Procedimiento:
N1

ia n c t c r oi o d n u dc ie r ue n 3 t u b o s d e e n s a y o u n a
pc ae tq a u l ie z a ad o c r a n t i d a d d e b i o x i d o d e m a g n e s i o
ei n n o rc g a a d n a i c u o n so o b r e e l
a g u a o x ig e n a d a

N2

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N3

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1
NOTA: los tubos de ensayo que se sometieron al bao mara sern reutilizados para
observar que sucede cuando se aumenta y disminuye la temperatura.
Resultados
procedimiento
1

Tubo 1
Reacciona
(burbujeo)

Reacciona
(burbujeo)

Reacciona
(burbujeo)

Tubo 2
Reacciono con
muchas ms
intensidad
(burbujeo)
No reacciona

No reacciona

Tubo 3
Reacciono con
muchas ms
intensidad
(burbujeo)
Reacciona de
forma mucho
ms lenta
Reacciona de
forma mucho

Tubo 4
X

Reacciona con
mucha ms
intensidad
Reacciona con
mucha ms

ms lenta
NOTA: En todas las reacciones presentes hubo desprendimiento de calor.

intensidad

Anlisis de resultados
Las enzimas poseen ciertas condiciones para actuar tales como la temperatura, el pH, el
tamao del sustrato y la informacin gentica, a lo largo de la practica observamos que a
mayor o menor temperatura menos actividad enzimtica, ya que cuando las enzimas pasan
de 37C que es su temperatura optima se destruyen o desnaturalizan, y cuando bajan, no se
destruyen, pero las protenas de las enzimas estn muy rgidas y la reaccin se vuelve lenta.
Por tales razones obtenemos que cuando el hgado se encontraba a temperatura ambiente la
reaccin ocurri rpido, y cuando se someti a calor en el bao mara, la reaccin no
ocurri porque la enzima se desnaturalizo, y cuando estuvo en el hielo la reaccin se
demoro para ocurrir; lo mismo sucedi en con la papa en la temperatura ambiente la
reaccin ocurri al instante, cuando se calent, no ocurri y al enfriarla ocurri lentamente;
al ocurrir las reacciones se desprendi calor y H2O + O2, en forma de espuma. Las
reacciones con catalizadores inorgnicos como el permanganato sucedieron de una manera
diferente, ya que en todas las temperaturas (ambiente, calor, frio) reacciono, pero siempre
volviendo a su estado inicial.
Se obtuvieron observaciones tales como: cuando se macera, las reacciones ocurren
rpidamente ya que se encuentra el sustrato ms rpido; la enzima catalasa es ms eficiente,
el hgado posee dos enzimas; el catalizador inorgnico no se desnaturaliza, por lo cual en el
calor reacciona ms rpido.
Conclusiones
1-se pudo observar con claridad el efecto de la enzima peroxidasa sobre el agua oxigenada,
ya que se vio una reaccin en forma de burbujeo.
2-se pudo comparar la accin que ejerce la peroxidasa de las sustancias orgnicas e
inorgnicas sobre un mismo sustrato (H2O2)
3-La temperatura como una variable en la actividad enzimtica, afecta considerablemente
la eficacia que puede tener la reaccin entre la peroxidasa y el sustrato, aumentndola o
disminuyndola.
Preguntas
1. En toda reaccin enzimtica hay liberacin de energa? Explique
Se libera energa solo en reacciones que den lugar a productos fosforados. El ATP a veces
se hidroliza directamente a ADP + fosfato, liberando energa para distintas actividades. Las
enzimas que catalizan la hidrlisis de ATP se conocen como ATPasas.

2. Siempre que en una reaccin enzimtica se libera energa es en forma de calor?


Explique
Como parte de la energa liberada en la reaccin degradativa, es transferida a la reaccin
cintica en forma diferente al calor, los trminos qumicos normales exotrmico y
endotrmico no pueden aplicarse a estas reacciones. En su lugar se emplean las palabras
exergnico y endergnico para indicar que un proceso se acompaa por prdida o ganancia,
respectivamente, de energa libre, independientemente de la forma de energa en que se
trate. Las reacciones exergnicas constituyen el catabolismo (degradacin u oxidacin de
molculas combustibles), en tanto que las reacciones sintticas que forman sustancias se
denominan anabolismo. El conjunto de procesos catablicos y anablicos constituye el
metabolismo.
3. Qu cambios pueden sufrir, con relacin a la estructura qumica y al nmero inicial de
molculas, el sustrato y laenzima en una reaccin?
* Cuando un reactante se une a un catalizador, una secuencia importante es que este
aumenta la concentracin del reactante en un rea localizada de la solucin, por arriba de su
concentracin en solucin libre. As ya no nos enfrentamos con una solucin qumica
homognea, si no heterognea.
Reactante + catalizador complejo catalizador-reactante
* A raz de la presencia de enzimas, las clulas son capaces de desarrollar reacciones
qumicas a gran velocidad y a temperaturas comparativamente bajas. Por ejemplo: La
combinacin de dixido de carbono con agua en el cuerpo humano es catalizada por una
enzima, la anhidrasa carbnica. Esta es una de las enzimas ms veloces que se conocen;
cada molcula de enzima cataliza la produccin de 6x10 a la 5 (600000) molculas de cido
carbnico por segundo. La reaccin catalizada es 10 a la 7 veces ms rpida que la no
catalizada.
4. Si usted hace reaccionar agua oxigenada con perxidasa y espera hasta que termine la
reaccin, Cmo comprobara que la enzima conserva su poder cataltico?
Como la peroxidasa es un catalizador y estos siendo sustancias que disminuyen la energa
de activacin forman una asociacin pasajera con las molculas que reaccionan, por tanto,
no sufren ninguna alteracin y se pueden volver a utilizar rpidamente, en efecto,
agregaramos ms agua oxigenada y esperaramos a que la peroxidasa reaccione
nuevamente.
5. En culorganela celular se sintetizan las enzimas?

Muchas de las enzimas se encuentran simplemente disueltas en el citoplasma de la clula.


Es posible preparar un extracto acuoso de hgado molido y encontrar en l todas las
enzimas necesarias para transformar la glucosa en cido lctico. Otras enzimas estn
ntimamente unidas a otros sitios en la clula. Las enzimas respiratorias que catalizan el
metabolismo del cido lctico (y tambin las sustancias derivadas de cidos aminados y
cidos grasos), hasta bixido de carbono y agua, se encuentran unidas a la mitocondria; en
realidad, es posible que las membranas mitocondriales estn formadas en gran parte por las
mismas enzimas. Hay otras, que intervienen sobre todo en la sntesis de protena; son parte
integrante de partculas citoplasmticas menores llamadas ribosomas.
6. Las enzimas naturales actan nicamente en el interior de las clulas? Explique por
medio de varios ejemplos
La mayora de las reacciones enzimticas se producen en el interior de la clula ya que
activan el metabolismo celular ya sea por va anablica (sntesis) o catablica
(degradacin), sin embargo por exocitosis, las enzimas lisosmicas son liberadas hacia el
exterior de la clula constituyendo una barrera de defensa extracelular para la clula.
Ejemplos:
* En el hgado se secretan enzimas lisosmicas a la bilis.
* La secrecin de enzimas y hormonas por clulas animales especializadas tiene lugar en el
aparato de golgi,ya que los materiales destinados para la exocitosis son elaborados y
empaquetados por este.
7. qu otro factores, adems de los cambios en la temperatura y en el pH, influyen en la
actividad de una enzima?
Acidez: las enzimas son, adems, sensibles a los cambios de pH, sea de acidez o
alcalinidad del medio. La pepsina, enzima que digiere las protenas, secretadas por la
mucosa gstrica, tiene la notable particularidad de que solo acta en medio muy cido de
pH=2. La tripsina, otra enzima proteoltica producida por el pncreas, es ejemplo de una
enzima que interviene mejor en medio alcalino, de pH prximo a 8.5. La mayor parte de
enzimas intracelulares que tienen ptimos pH cerca de la neutralidad, por lo que no acta
en medios cidos ni alcalinos, los cidos y bases enrgicos las inactiva irreversiblemente.
La influencia neta del pH sobre la actividad enzimtica puede preverse por el hecho de que
las enzimas son protenas. El nmero de cargas positivas y negativas asociadas por la
molcula protenica, y la topografa de la superficie molecular depende en parte, del pH.
Probablemente, un gesto particular de la molcula enzimtica con un nmeroespecfico de
cargas positivas y negativas, resulta activo como catalizador.

Concentracin de enzima, substrato y cofactor: Si el pH y la temperatura de un sistema


enzimtico se mantienen constantes, pero hay exceso de substrato, la intensidad de la
reaccin es directamente proporcional a la cantidad de enzimapresente. En consecuencia
puede medirse la cantidad de una enzima determinada presente en un extracto tisular. Si se
mantienen constantes el PH, la temperatura y la concentracin de enzima en un sistema
la intensidad inicial de reaccin es proporcional a la cantidad de substrato, hasta un valor
lmite. Si el sistema enzimtico requiere una coenzima o un ion activador especifico, la
concentracin de dicha sustancia en algunos casos ser la que determine la intensidad
global de la reaccin.
Venenos Enzimticos. Algunas enzimas resultan muy sensibles a ciertos venenos (cianuro,
acido yogo-actico, fluoruro, etc.). Resultan inactivadas a un frente a concentraciones bajas
de estos venenos. La Citocromooxidasa, una de las enzimas del sistema de transporte de
electrones, es especialmente sensible al cianuro; la persona que se envenena con cianuro
muere porque se inhiben sus enzimas de citocromo.
8. Desde el punto de vista enzimtico Qu diferencia hay entre la leche cruda y la
pasteurizada?
La leche cruda contiene enzimas naturales como la lactasa que permite que el organismo
humano pueda digerirla. Cuando sufre el proceso de pasteurizacin son eliminadas
enzimas, entre ellas la lactasa lo que hace que para el organismo sea difcil digerir la leche
y que se comience a presentar la intolerancia a la leche.
9. Cmo explicara el hecho de que la ptialina de la saliva acte sobre el almidn en la
boca pero no en el estmago?
La ptialina convierte el almidn en azucares simples que son los que van al estomago; aun
que con ellos pueden llegar pocas cantidades de almidn que son desnaturalizados por el
pH acido del estomago. Pero en general lo que llega al estomago son azucares simples.
10. Cite cinco enzimas con los sustratos respectivos sobre las cuales actan y los productos
que obtiene.
* La ureasa acta sobre la urea produciendo amoniaco y bixido de carbono.
* La maltasa acta sobre la maltosa produciendo glucosa.
* La sacarasa acta sobre la sacarosa produciendo una molcula de glucosa y una de
fructosa.
* La amilasa acta sobre el almidn produciendo maltosa.
* La ptialina acta sobre el almidn produciendo monosacridos y disacridos.

Anexos

A continuacin se presentaran las imgenes relacionas con las reacciones que se


evidenciaron al llevar a cabo cada procedimiento:
Procedimiento N1
Tubo1

Tubo 2

Tubo 3

Procedimiento N2
Tubo1

Tubo 2

Tubo 3

Procedimiento N3
Tubo 1

Tubo 2

Tubo 3

Referencias bibliogrficas

Tubo 4

* Por qu biotecnologa. La enzima catalasa y su accin en los alimentos [Internet].


[Consultado 2011 sept. 5].Disponible:
http://www.porquebiotecnologia.com/adc/uploads/pdf/12Enzima_catalasa_en_alimentos.pd
f
* Por qu biotecnologa. La enzima catalasa y su accin en los alimentos [Internet].
[Consultado 2011 sept. 5].Disponible:
http://www.porquebiotecnologia.com/adc/uploads/pdf/12Enzima_catalasa_en_alimentos.pd
f
* Universidad de Antioquia, Instituto de matemticas. Accin de una enzima presente en
tejidos animales y vegetales [Internet].[Consultado 2011 sept. 5] Disponible:
http://matematicas.udea.edu.co/~actubiol/publicaciones_pdf/1981/10%20(38)/MSS
%20PDF's%2010%20(38)/3%20Uribe,%20F%20et%20al.pdf

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