Articulo: Control ciclo celular

Autores: Andrew W. Murray, Mark W. Kirschner.

Para 1900 ya estaban planteados los procesos bsicos del ciclo celular, sin embargo
la regulacin del ciclo era un misterio; dos lineas de investigacin convergieron para
empezar a dar respuesta a este interrogante, que en este caso, depende en buena
medida de una molcula, la protena cdc2.
En el siglo XIX ya estaban establecidas dos fases del ciclo celular: la interfase y la
mitosis.
La interfase donde el ncleo de la clula permanece estable en tanto la clula crece
y almacena nutrientes suficientes para dar vida a dos clulas, adems se inicia
duplicacin de los cromosomas que contienen el material gentico.
La mitosis, proceso en el cual la clula se divide para dar origen a dos clulas hijas
que contienen el mismo numero de cromosomas, formando dos ncleos a partir de uno
solo. Este proceso comienza con la destruccin de la membrana nuclear; los cromosomas
ya duplicados se unen al huso mittico que los separa para que cada ncleo tenga un
copia de los cromosomas. Posterior a esto, una envoltura nuclear se genera separando
los dos ncleos, luego de esto el resto de la clula comienza el proceso de divisin.
En la meiosis, un proceso similar a la mitosis, se sufre una segunda divisin que da
origen a 4 clulas con la mitad del nmero de cromosomas.
Por este proceso se saba que la clula deba tener un mtodo de regulacin que
pudiera detenerlo en caso de algn error en el ciclo. Por ejemplo, en caso de no existir
una correcta duplicacin de los cromosomas.
En 1971 investigadores identificaron, en huevos de rana, una sustancia que al
parecer regulaba el inicio de la mitosis y meiosis. Se denomino factor promotor de
maduracin (MPF por sus siglas en ingls) a la sustancia que iniciaba el procesos de
meiosis en los ovocitos de rana. El MPF, que se aisl hasta 1988, apareca como el factor
principal de la regulacin en mitosis y meiosis. Cuya teora fue confirmada posteriormente.
Debido a los grandes cambios que sufra la clula, entre ellos la contraccin de la
clula, se dedujo que exista un oscilador que se relacionaba con el MPF, su actividad
fluctuaba desapareciendo en interfase pero apareciendo en mitosis. Adems se demostr
que era necesaria una sntesis de protenas para el inicio de la mitosis, por cual se
determino que ciertas protenas eran esenciales, al igual que el MPF, para la activacin de
la mitosis.
Leland H. Hartwell en 1970 inicio la investigacin, en la Universidad de Washington,
del ciclo celular con levadura de cerveza, organismos unicelulares que se reproducen por
gemacin. En el estudio identific formas mutantes que se estancaban en momentos
especficos del ciclo. As atribuy esto a genes cuyo producto de codificacin resultaba
indispensable para proseguir en el ciclo. Genes del ciclo celular (cdc). Por ordenacin de
los mutantes Hartwell estableci la secuencia normal de los cdc.
Paul Nurse de la Oxford University impulsado por los descubrimientos de Hartwell
inicio la investigacin en 1970 con levaduras de fisin, confirmando lo mostrado por
Hartwell y descifr la secuencia normal de activacin de los genes cdc.

De dichos genes se demostr que el cdc2 intervena en el arranque de la mitosis.

Ciertas mutaciones inducidas en l, determinaban la sntesis de una protena inactiva que
impeda el comienza de la mitosis.
Nurse, por va experimental, demostr que el DNA humano tambin contena una
versin de cdc2 que induca el proceso de mitosis; en 1987 se cartografa la secuencia de
aminocidos, demostrando la similitud en esta protena entre la levadura y los seres
humanos.
Las protenas cdc2 se las incluye entre las quinasas: enzimas que transfieren el
grupo fosfato del ATP a las protenas; donde la adicin o eliminacin del grupo fosfato es
el medio principal de regular la actividad de las protenas celulares.
En 1988 se logro aislar una pequea cantidad de MPF constatando que la sustancia
constataba de dos molculas proteicas, donde por indicios de diversa ndole, parte del
MPF era el cdc2.
A principios de los ochenta, Tim Hunt, de la Universidad de Cambridge, descubri en
erizos de mar la existencia de una protena que desapareca bruscamente en el proceso
de mitosis mientras que las dems protenas aumentaban continuamente. Hunt nombr
ciclina a dicha sustancia; se produca a una tasa constante a por largo del todo ciclo
desapareciendo al final de la mitosis, sugiriendo que era ella quien regulaba la actividad
del MPF. Teora confirmada en 1986 por Joan V. Ruderman.
Los autores del articulo comprobaron demostraron que la sola produccin de la
ciclina produca el proceso de mitosis, y donde a mayor ciclina ms se acortaba la
interfase, tambin se corrobor que la no sntesis de la ciclina conduca a que la mitosis
no se realizar, estancando las clulas en interfase. En sus estudios posteriores
demostraron que la completa degradacin de la ciclina permita la culminacin del
proceso, si esta no se degradaba las clulas perdan la capacidad de culminar la divisin
celular y quedaban detenidos en la mitosis.
La simple unin de la cdc2 y la ciclina no era suficiente para la activacin del MPF,
entonces se gener inters en la cdc25, en donde su acumulacin estableca cundo
ciertas clulas estaba listas para iniciar la mitosis; por ende la cdc25 estimulaba la cdc2 y
la unin de esta ultima con la ciclina daba inicio al proceso de mitosis; el factor de nivel
limite para regular el arranque de la mitosis lo generaba, entonces, la cdc25.
Por tanto, aun cuando la cdc2 sea el regulador central del ciclo celular existen otros
factores que regulan la misma cdc2 como la cdc25, tal como en el ovocito de rana, donde
el MPF necesita de la presencia de la cdc25 para volverse activa y empezar la mitosis.
Hartwell descubri un segundo punto de control, donde este se asegura que la
replicacin del DNA ocurra de manera correcta, para lo cual necesita una adecuada
cantidad de nutrientes. Demostrado en levaduras de gemacin, lo nombr transicin de
arranque. S no existe una cantidad adecuada de nutrientes se suspende el ciclo en el
sitio de arranque.
El punto de arranque esta tan controlado como el inicio de la mitosis, donde la ciclina
relacionada con el inicio de la mitosis es diferente a la ciclina del punto de arranque.

Articulo: Factores moleculares pronsticos relacionados con el control del ciclo celular en
el cncer de mama. Situacin actual
Autores: I. Zapardiel Gutirrez, S. Herrero Gmiz, E. Prez Cabajo y J. Schneider Fontn.
El cncer de mama es la enfermedad maligna mas frecuentes en las mujeres en
todo el mundo, cerca del 15% de las mujeres desarrollan la enfermedad a lo largo de su
vida. Adems es la causa principal de muerte en las mujeres a escala mundial.
El estudio estudio de los factores moleculares implicados en el ciclo celular a
proporcionado un avance sobre el comportamiento de las clulas cancergenas de las
glndulas mamarias, influyendo en el pronstico, su tratamiento y orientando el
diagnstico teraputico posterior.
Entre los pasos para que una clula normal se convierta en una clula tumoral, el
primero es proliferar de manera constante, evitando los mecanismos de control del ciclo
celular. Deben activarse lo oncogenes (a partir de los protooncogenes relacionados con la
proliferacin celular) y deben perder su actividad los oncosupresores, que ejercen una
accin superiora en la proliferacin.
El Gen c-myc es un factor de transcripcin implicado en la regulacin de todas las
actividades celular, entre ellas la proliferacin, la diferenciacin y la apoptosis. El gen se
amplifica entre un 20 a 30% en los cnceres de mama y se correlaciona poco con la
expresin del c-myc; la amplificacin ocurre en mayor medida en el carcinoma ductal
infiltrante que en el carcinoma in situ.
La amplificacin del gen c-myc tambin se asocia a la proliferacin de tumores mas
agresivos y es un factor de mal pronstico ya que se relaciona con un intervalo libre de
enfermedad y una supervivencia global disminuida.
El mecanismo de regulacin del ciclo celular esta constituido por una subunidad
reguladora llamada ciclina y por una subunidad cataltica llamada CDK (cinasa
dependiente de ciclina, por sus siglas en ingles), cuya funcin es inactiva los mecanismos
que impiden la progresin de la clula hacia la divisin en distintas fases.
Las alteraciones en el punto de control entre G1 y S parecen estar relacionadas con
el cncer de mama humano. En su estado normal el complejo CDK-ciclina inicia la
progresin hacia la fase S con la activacin de la protena pRB y la liberacin de factores
de transcripcin E2F, que a su vez, activan los genes de la replicaron del DNA.
La protena ciclina D1 se encuentra sobreexpresada en el 35 a 50% de los casos de
cncer de mama y controla la progresin del ciclo celular. Esto implicado en la
carcinognesis y la progresin tumoral.
La ciclina E se postula como la causante de que la clula entre en la fase S, su
sobreexpresin esta en el 25% de los casos de cncer de mama, se relaciona con los
cnceres de mama ms indiferenciados y podra aumentar la sensibilidad a determinados
tratamientos quimioteraputicos.
Las CKI (inhibidores de las CDK) revelan una alteracin de estas protenas en las
clulas tumores malignas, que les hace perder su capacidad de inhibicin y
oncosupresora, lo que caracteriza un factor de mal pronstico para el cncer de mama.

El c-erb-B2 es un protocooncogen con amplificacin en un 20 a 30% en los tumores

invasivos de mama. Las alteraciones de este gen se registraron en un 40 a 60% de los
casos de calcino ductal in situ. Su sobreexpresin se relaciona con el peor pronstico
tumoral, menor intervalo libre de enfermedad y menor supervivencia global, presencia de
metstasis en ganglios maxilares, mayor capacidad de proliferacin y alta resistencia al
tamoxifeno.
El gen p53 codifica una fosfoprotena que funciona en el control del ciclo celular
como mediadora de la diferenciacin, de reparacin de DNA y de la apoptosis. El gen p53
se encuentra en concentraciones baja en situaciones normales, cuando un agente
extracelular agrede la clula el gen p53 se activa deteniendo el ciclo celular de la clula,
la reparacin del DNA o la entrada en apoptosis. El gen p53 es un oncosupresor y el es
gen somticamente mas mutado en los cnceres espordicos.
La protena p53 induce tanto la parada del ciclo celular que previene la replicacin
del DNA daado como la activacin de la apoptosis para la eliminacin de clulas
defectuosas. En el cncer de mama humano, se han detectado alteraciones de p53 en
protenas o en el DNA en un 25 a 50% o en un 15 a 35% de los casos, respectivamente.
Alteraciones en este gen pueden provocar una mayor inestabilidad en el DNA,
facilitando las mutaciones, adems una perdida en la respuesta a la apoptosis. Tambin
perdida en el control de angiognesis lo que favorecer la progresin tumoral.
Ultimos estudios demuestran que la sobreexpresin del gen p53 se relaciona con la
sobreexpresin del c-erb-B2 y con lo CKI, relacionndose positivamente en la
proliferacin tumoral.
References
Zapardiel Gutirrez, I., Herrero Gmiz, S., Prez Carbajo, E., & Schneider Fontn, J. (2009). Factores
moleculares pronsticos relacionados con el control del ciclo celular en el cncer de mama. situacin
actual. Clnica e Investigacin En Ginecologa y Obstetricia, 36(1), 19-24.

Artculo: As comienza la mitosis

Autores: Sergio Moreno
Todas las clulas eucariotas poseen un reloj molecular que determina cuando deben
dividirse. El componente fundamental de la maquinaria de este reloj es el producto del
gen cdc2
Las clulas de nuestro cuerpo se generan a partir de divisiones consecutivas de una
clula precursora. Estas clulas se dividen para compensar las prdidas que se produce
por muerte celular.
Todas las clulas para su divisin deben antes sufrir cambios fsicos y qumicos, como lo
es crecer y doblar su contenido, incluido el nmero de cromosomas para luego
distribuirlos a las dos clulas hijas. El ciclo celular consta de cuatro fases: una fase S de
sntesis de DNA, en la que lo cromosomas se duplican, una fase M, de Mitosis, en la que
los cromosomas duplicados se dirigen hacia los polos y unas fase G1 y G2, en la que la
clula se prepara bioqumicamente para el inicio de la fase S o la fase M.
Durante la Mitosis ocurre una reorganizacin de la clula. Lo cual incluye ruptura de la
envoltura nuclear, condensacin de cromosomas y formacin de huso mitotico.
Para que se inicie cada uno de los procesos del ciclo celular debe haber una molcula
responsable, como lo son para la mitosis o la replicacin de DNA, de los cuales se tratara
a continuacin.
Para dar con el precursor del inicio de la mitosis, se hicieron investigaciones bioqumica y
genticamente. Dentro de las que se destacan:
Yoshio Masui y Clement Market, de la Universidad de Yale. Los cuales microyectaron
citoplasma de una clula en mitosis a una clula que se encontraba en la fase G2, en la
que esta ltima clula entraba en mitosis. Con esto se dedujo que el citoplasma de una
clula mittica deba contener un factor que promueva la entrada en la mitosis, el cual lo
llamaron: Factor Promotor de Mitosis (FPM).
Este FPM tenia la caracterstica de que era inestable, lo cual impeda su purificacin y
caracterizacin. Fred Lohka, del Laboratorio de Masui, desarrollo un extracto que permita
practicar con pequeas cantidades de FPM, con lo que pudo purificarlo mediante tcnicas
de purificacin bioqumicas para protenas.
Harry Matheus, Robert Inglish y Morton Bradbury, de la Universidad Politcnica de
Portsmouth, dirigieron sus investigaciones hacia el empaquetamiento del DNA, interesado
en el mecanismo por el cual los cromosomas se condensan durante la mitosis. Se le
atribua un papel en la mitosis a la fosforilacin de la H1, histona tambin implicada en el
empaquetamiento e DNA. Pero Bradbury junto colaboradores descubrieron que la
actividad enzimtica de una protena quinasa que fosforilaba a la H1, aumentaba tambin

en la mitosis. Pero el experimento que marco a esta protena quinasa fue al momento de
agregar fracciones semipurificadas a clulas de un tipo de hongo, esto las induca a entrar
prematuramente a mitosis, lo cual identificaba una actividad similar a la FMP.
Lee Hartwell, en la Universidad de Washington y Paul Nurse en Edimburgo, estudiaron el
ciclo celular respecto a su gentica. Hartwell propuso que el ciclo comprenda una serie
de reacciones sucesivas, en el que el inicia de una dependa de la terminacin de la
reaccin anterior. En el que a la misma vez, cada reaccin dependa de una protena
determinada por un gen.
Respecto a esta secuencia de reacciones, se plantea una hiptesis, la cual seria
demostrada experimentalmente. Esta consista en la idea de alterar determinado gen e
inactivar especficamente una de las protenas de cada reaccin del ciclo celular, las
clulas se pararan en el punto del ciclo donde se requiriese la protena. Un problema
para esto es el hecho de que las clulas de la mayora de los eucariotas son diploides, por
lo tanto, contienen dos copias de cada gen, as que mientras se altere uno de estos,
siempre habr otro realizando el trabajo de codificar la protena.
Nurse y Hartwell usaron una senda de levaduras por su carcter haploide, siendo el ciclo
celular de estos similar al de las clulas eucariotas. El experimento se realizo tomando
mutantes termosensibles, los cuales a 35 grados dejaban de dividirse. Estos mutantes
definan 40 genes en S. Ceverisiae y 30 en S. Pombe, a los cuales llamaron genes del
ciclo de divisin celular (cdc). Luego de esto, tendran que descubrir cual de estos genes
cdc controlaban la divisin celular. Entre todos los mutantes, se descubri que la cepa
cdc2 de S. Pombe lo codificaba, ya que a la temperatura restrictiva, se bloqueaba en la
fase G1 y G2, lo cual significaba que era necesaria para que la fase S y M tuvieran lugar.
No solo este descubrimiento por Nurse y Hartwell produjo inters en este gen. Durante el
proceso de aislamiento de los mutantes cdc en S. Pombe, Paul Nurse recurra a la
centrifugacin en gradiente de sacarosa, en la cual examino que en las zonas de mayor
densidad se alojaban la cepa de levaduras con fenotipo alargado. Al observar con
microscopio la zona de menor densidad encontr celular mas pequeas que las de la
cepa silvestre. Cuando estas se cultivaban, se dividan con aproximadamente la mitad del
tamao de las de la cepa silvestre. Esto se deba a que permanecan meno tiempo en G2
y adelantaban la mitosis. A este tipo de mutantes se les denomino: wee (pequeo en
escocs), los cuales comprenda dos genes: wee1 y wee2.
Al cruzar los mutantes wee y cdc, se observo que la cepa wee2 y cdc2 estaban afectadas
en el mismo gen, lo cual indicaba que el producto del gen cdc2, adems de intervenir en
dos puntos del ciclo celular, catalizaba en G2 una reaccin para la entrada a la mitosis.
El trabajo con las levaduras tambin permite aislar un mutante bien caracterizado, a partir
e ah se puede clonar el gen silvestre por el proceso de complementacin, el cual consiste
en preparar una genoteca de DNA de la cepa silvestre (coleccin de fragmentos
pequeos de DNA donde estn representados todos los genes de un organismo), el cual
se introducira a la cepa mutante, lo cual dara como resultado que la clula que reciba el
fragmento de DNA del gen silvestre se dividiera en condiciones restrictivas. Por lo tanto,
complementaria el defecto de la mutacin.
Para preparar dicha genoteca de DNA, se purifica este de la cepa silvestre y se fragmenta
en cortos segmentos mediante enzimas de restriccin. Los segmentos se insertan en un
plsmido, una molcula de DNA circular.

Para clonar el gen cdc2 de S.Pombe, se aisl el plsmido en la bacteria Echerichia coli,
anteriormente insertado en el gen mutante. Una vez aislado en la bacteria, se procedi a
purificar el plasmido y se determino la secuencia de bases del gen que contiene.
Conociendo esta secuencia, se inferir la cadena de aminocidos de la protena
codificada. Con esto se descubri que este gen determinaba una protena de 298
aminocidos con un peso molecular de 34 kilodaltons.
Luego de comparar la secuencia de aminocidos de la protena cdc2 con otras ya
conocidas, se encontr una homologa con una clase de protenas dotada de actividad
quinasa de serina y treonina. Las cuales catalizaban la transferencia de un grupo fosfato
desde una molcula de ATP hacia un residuo de serina o treonina en otras protenas.
Despus de este hallazgo se procedi a demostrar que la protena cdc2 era en realidad
una protena quinasa. En el que Viesturs Simanis, en el laboratorio de la Universidad de
Oxford, sintetiz pptidos correspondientes a diferentes regiones de la protena. Con los
que inmunizo conejos y preparo anticuerpos. Cuando los anticuerpos se mezclaban con
extractos de clulas de levaduras se inmunoprecipitabauna protena con el peso
molecular esperado de 34 kilodaltons.
Posteriormente en los aos ochenta, David Beach, Brbara Durkacz y Paul Nurse, en la
Universidad de Sussex, encontraron que el gen cdc28 de la S. Cerevisiae, era un
homologo funcional del gen cdc2, por el hecho de que permita el crecimiento a altas
temperaturas de mutantes termo sensibles de cdc2. Este gen cdc28 fue clonado por
Steve Reed, de la Universidad de California, con lo que se hayo tambin que al igual que
cdc2, este gen determinaba protenas quinasa e 34 kilodaltons.
En 1987, Melanie Lee en el laboratorio de la Universidad de Oxford y Giulio Draetta y Leo
Brizuela, en el David Beach en Cold Spring Harbor, iniciaron la bsqueda de homlogos
de cdc2 en organismos eucariotas superiores. Hasta el momento se haban clonado
genes de levaduras por complementacin usando genotecas de levaduras, pero Melanie
Lee propuso la idea de clonar genes de otros organismos en levaduras usando la
genoteca indicada.
Lee utilizo la genoteca de DNA complementario humano ( obtenido de RNA mensajero),
clono un gen termosensible de cdc2. Gen que se llamo CDC2Hs, el cual era tan similar a
cdc2 y cdc28, como lo eran estos dos entre si. CDC2Hs es capaz de realizar todas las
funciones de los otros dos genes en los respectivos organismos, en el momento en que
este sustituye a cdc2 y cdc28.
Recientemente, Juan Jimnez en el laboratorio de la Universidad de Oxford, logro aislar
genes homlogos funcionales a cdc2 de Drosophilia Melanogaster. Giulio Draetta y Leo
Brizuela, por otro lado, descubrieron que anticuerpos contra la protena cdc2 reconocan
una protena de 34 kilodaltons en extractos de clulas humanas. Desde entonces, en
todos los organismos eucariotas analizados, se ha encontrado una protena equivalente a
cdc2.
Giulio Draetta en clulas de mamferos y Sergio Moreno en clulas de levaduras,
encontraron que la actividad protena quinasa de cdc2 oscilaba peridicamente durante el
ciclo celular, en donde el pico mximo corresponda al inicio de cada mitosis. A partir de
esto, se especulo sobre la posible relacin entre la cdc2, la FPM y la histona H1 quinasa.

En 1988, Chris Norbury en el laboratorio de la Universidad de Oxford, se dio cuenta de la

similitud en tamao molecular entre la protena cdc2 y el componente de menor tamao
molecular de FMP. Norbury junto a Jean Gautier y Lohka, del laboratorio de Jim Miller en
Denver, observo que ciertos anticuerpo reconocan de manera especifica el componente
de 34 kilodaltons presente en el FPM purificado.
Melanie Lee en colaboracin con Jean-Claude Labb, del laboratorio de Marcel Dore en
Montpellier, descubri que cdc2 era tambin el componente de menor peso molecular de
la histona H1quinasa purificada, a partir de huevo sin fecundar de estrellas de mar.
Al final de los aos ochenta, Tim Hunt, de la Universidad de Cambridge, trabajando con
embriones e almejas, descubri unas protena que se acumulaban durante el ciclo celular
y se destruan al final de cada mitosis, a las que llamo Ciclinas. Varios grupos de
investigacin han demostrado que una molcula de ciclina se asocia a otra molcula de
protena cdc2 para formar un dimero. Por lo tanto, los dos componentes purificados del
FPM eran el producto del gen cdc2 y la ciclina. La activacin de este complejo al final de
la fase G2 es el responsable de la iniciacin de la mitosis mediante la fosforilacin de una
serie de sustratos.
Andrew Murray, de la Universidad de California en San Francisco, descubri que la
sntesis de ciclina era necesaria en cada ciclo celular pata iniciar la mitosis. Sergio
Moreno junto a Jackie Hayles, observaron que la asociacin de la ciclina con la cdc2
difera de la activacin del complejo.
La regulacin de la activacin del complejo se pudo hallar luego de analizar las
modificaciones pos-traducionales que sufra la protena cdc2 durante el ciclo celular. La
fosforilacin de protenas ocurre en los tres aminocidos que contiene grupo hidroxilo:
serina, treonina y tirosina. Viesturs Simanis haba observado que, cuando las clulas de
levadura se marcaban con fosfato portador de fsforo-32 e inmunoprecipitaba con
anticuerpos contra cdc2, se detectaba una fosfo-protena de 34 kilodaltons.
Giulio Draetta, en un experimento similar, descubri que la protena humana tambin era
una fosfoprotena, que contena fosfotreonina y fosfotirosina. Sergio Moreno, observo que
las clulas de levaduras que tenan una mutacin en el gen cdc25 se bloqueaban, a la
temperatura restrictiva, al final del periodo G2, con baja actividad de la protena quinasa
asociada a cdc2, pero en el momento en que estas clula se pasaban a la temperatura
permisiva entraban sincrnicamente en mitosis y a los 10 minutos se activaba la protena
quinasa cdc2, alcanzando un mximo a los 20 minutos, con la clula en metafase.
Kathy Gould, en el laboratorio de la Universidad de Oxford, midi los cambios de
fosforilacion de cdc2, observo que cdc2 se encontraba fosforilaba en tirosina y treonina en
las clulas que se encontraban bloqueadas en la fase G2, sin embargo, cuado las clulas
entraban en mitosis, la protena se desfosforilaba, principalmente en tirosina. Dando como
resultado que, la desfosforilacin de la tirosina coincida con la activacin de la protena
quinasa. El aminocido fosforilado en la protena era la tirosina en la posicin 15 (Tyr15),
este segmento a la misma vez es responsable de la unin del ATP en la reaccin de
transferencia del fosfato.
Con esto se pens en el siguiente mecanismo de regulacin de la actividad enzimtica de
cdc2, la cual consista en que, cuando la protena se encontrara fosforilada en Tyr15, el
ATP no se podra unir y por lo tanto la protena se mostrara inactivada. Pero en el
momento en el que el aminocido se desfosforilase, quedara libre el sitio de unin al ATP
y se activara la protena.

Para comprobar esto, se realizaron dos experimentos. Primero se comprob que el

complejo cdc2/ciclina se activaba in Vitro por tratamiento con una fosfatasa de tirosina
purificada a partir de clulas humanas. Segundo, Kathy Gould, provoco in Vitro una
mutacin de Tirosina en cdc2 a fenilalanina, el cual carece de grupo hidroxilo y como
consecuencia no puede ser fosforilado. Esta versin de cdc2 no se encontrara regulada
por la fosforilacin en tirosina. Por lo tanto, el sitio de unin a ATP estara siempre libre y
la protena se activara en cuanto se elevaran la cantidad de ciclina en la clula. Cuando
este gen mutante de cdc2 se introdujo en una clula de levadura, se obtuvo un fenotipo
conocido como catstrofe mittica, en el que la clula entra en mitosis antes de completar
la duplicacin de DNA y muere.
Dos protenas regulan la activad enzimtica de cdc2. Son una protena quinasa y una
protena fosfatasa de tirosina. Antes de que se conociera que la actividad de cdc2 estaba
regulada por la fosforilacin y desfosforilacin de la Tyr15, Paul Russel, indico
genticamente que la actividad de cdc2 estaba regulada por los productos de los genes
cdc25 y weel. Observo que si se aumentaban la cantidad de cdc25 en la clula, estas
desencadenaran un fenotipo wee, prueba clara de que la cdc25 desencadenaba el
comienzo de la mitosis. Por el contrario, cuando se aumentaba la cantidad de wee1, las
clulas se dividan con mayor tamao que las de la cepa silvestre y por consiguiente, esta
impedia el inicio de la mitosis. Con esto Paul Russel, adelanto y retraso la entrada de la
clula en mitosis, probando con diferentes dosis de cdc25 y wee1.
Hoy se conoce que cdc25 es la proteinfosfatasa que activada cdc2, pero respecto a wee1
aun no se ha probado que sea la protena que fosforila cdc2 en la tirosina-15, solo se
sabe que el gen codifica una protena similar a protenas quinasas.
Se considera que la funcin del gen cdc25 se encuentra conservada a lo largo de la
evolucin, ya que se han encontrado homologias funcionales en S. Cerevisiae,
Drosophilia y clulas humanas. Se encontr que la cantidad de RNA mensajero y protena
cdc25 se acumulaba durante la G2 y alcanzaba su mximo minutos antes de iniciarse la
mitosis.
Para dar con la respuesta a cual es la seal que comunica cdc25 al complejo cdc2/ciclina,
se tomo el trabajo que realizo Tamar Enoch en el laboratorio de la Universidad de Oxford,
el cual hallo que los mutantes que producan exceso de protena cdc25 entraban a la
mitosis sin haber terminado de duplicar el DNA y despus moran. Este resultado
demuestra que, la protena icd25 le comunica a cdc2 que la duplicacin de DNA ha
terminado y puede, por tanto, continuar con la mitosis. Probablemente, al final de la fase
S, se enva una seal para activar la transcripcin del gen cdc25. Cuando aumenta la
concentracin de dicho gen, se promueve la desfosforilacin de Tyr15 de la protena cdc2
y ciclina, se activa la protena quina y se inicia la mitosis.
La mitosis comienza, con la activacin de la protena cdc2, con la que se suceden una
serie de cambios caractersticos de la mitosis, que, en conjunto, permitir que la clula
segregue correctamente sus componentes celulares y asi asegure la integridad funcional
de sus dos clulas hijas.
La lamina B constituye uno de los sustratos que son fosforilados por la protena quinasa
cd2. Estas laminas son protenas que forman polmeros en el interior de la membrana
nuclear, denominado: lamina nuclear, la cual es responsable de mantener la morfologa
del ncleo. En cada ciclo celular, la lamina nuclear se disgrega durante la mitosis para

facilitar la separacin de los cromosomas y se vuelve a ensambla al final de la mitosis.

Matthias Peter, del laboratorio de Erich Nigg en Suiza, observo que la histona H1 quinasa,
purificada por Labb y Dore, fosforilaban la lamina B en la serina localizada en la
posicin 16 (Ser16), el mismo sitio en que se fosforila in Vitro durante la mitosis en clulas
de pollo.
Esta fosforilacin de la lamina B en la serina por la enzima cdc2, desencadena la ruptura
de la lamina nuclear. La fosforilacin de otros sustratos, como vicentinas, nucleolinas y la
subunidad mayor del RNA, por la enzima cdc2 en mitosis, podra ser la responsable de
los cambios en la morfologa de la clula.
Con tcnicas de inmuno fluorescencia, se ha demostrado que, al inicio de la mitosis, el
complejo cdc2/ciclina se acumula en el ncleo y en los centrosomas. En el ncleo la
protena cdc2 fosforilara la histona H1, laminas y nucleolinas y RNA polimerasa, en el
centrosoma, fosforilara alguna protena o protenas que iniciaran la polimerizacin de los
microtbulos. Los cromosomas condensados se uniran por sus centrmeros al huso
mittico y se producira la segregacin de sus cromtidas durante la anafase hacia los dos
polos de la clula.
En la anafase, el complejo cdc2/ciclina se inactiva y los sustratos de la enzima cdc2 se
desfosforilan. Se cree que el cdc2 se inactiva por la destruccin de la ciclina y la
desfosforilacin de cdc2 en la treonina-167. Luego, al final de la mitosis deben intervenir
varias fosfatas de protena que desfosforilan los sustratos de cdc2 y revierten los cambios
inducidos por ella.
La protena cdc2 e necesaria tanto para el inicio de la mitosis como para el inicio de la
duplicacin de DNA. La clula utiliza la misma protena para regular dos proceso
coordinados que deben desarrollarse consecutivamente. Se conoce mas sobre el papel
de la cdc2 al inicio de la mitosis que en la fase S.

Artculo: El ciclo celular, sus alteraciones en el cncer y como

es regulado en clulas troncales embrionarias.
Autor: Marco Antonio Quezada Ramrez.
El ciclo celular es el proceso a traves del cual las celulas se multiplican o
proliferan. Su correcta ejecucion en un organismo pluricelular como el hombre
contribuye a establecer en el una integracion estructural y funcional adecuada
para hacer frente a las condiciones impuestas por el ambiente. Corresponde a
las cinasas dependientes de ciclinas (CDKs, cyclin-dependent kinases) y sus
subunidades activadoras, las ciclinas, dirigir el recorrido de las celulas por las
fases del ciclo celular (G1, S, G2 y M). La elucidacion a traves de decadas de
investigacion del mecanismo molecular con el que operan estas molculas
para lograr sus objetivos nos ha llevado a comprender actualmente muchos
otros procesos celulares como las desregulaciones del ciclo celular que
desembocan en canceres y en los ultimos aos la biologa basica de las
polemicas y esperanzadoras celulas madre embrionarias. El objetivo de esta
revision es describir el mecanismo molecular del ciclo celular, sus alteraciones

en los procesos de cancer y finalmente su estructuracin en las celulas mares

embrionarias.