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305689 - BIOTECNOLOGA
FEDRA LORENA ORTIZ BENAVIDES
(Director Nacional)
PASTO
Julio de 2012
INDICE DE CONTENIDO
UNIDAD 1 : : ASPECTOS GENERALES DE BIOTECNOLOGA
Leccin 4:
13
13
15
19
23
23
23
26
28
29
Leccin 4: Biorreactores
29
31
33
33
37
40
41
41
43
44
46
47
47
47
47
49
50
51
54
54
Leccin 5: Prebiticos
59
60
60
61
66
70
71
72
CAPTULO DOS:
ALIMENTARIA
78
81
81
81
83
83
84
86
88
Leccin 4: Xantano
88
Leccin 5: Dextranos
lEC
BIBLIOGRAFIA
104
LIISADO DE TABLAS
Nombre
Pgina
Tabla 1
34
Tabla 2:
38
Tabla 3:
41
Tabla 4
49
Tabla 5
Enzimas utilizadas
alimenticia
Industria
50
Tabla 6
Caractersticas
de
la
industrial de cido ctrico
produccin
96
en
la
Figura 7
Figura 8
Figura 9
Figura 10
Figura 11
Figura 12
Figura 13
Figura 14
Figura 15
Figura 16
Figura 17
Figura 18
Figura 19
Figura 20
Figura 21
Figura 22
Figura 23
Figura 24
Figura 25
Figura 26
Figura 27
Figura 28
Figura 29
Figura 30
Figura 31
Nombre
Fases del metabolismo microbiano
Curva de crecimiento microbiano
Fermentacin continua en quimiostato
Efecto de la velocidad del flujo sobre la concentracin de
sustrato
Productividad total y productividad mxima
Productividad en relacin a la concentracin de cidos
grasos en un proceso de produccin de protena de origen
unicelular
Esquema de un reactor aerobio con agitacin mecnica
Esquema de un reactor tipo Air lift
Enzimas complejos
Ejemplo de cofactor
Enzimas de oxido-reduccin
Transferasas
Hidrolasas
Liasas
Ejemplo de isomerizacin
Ligasas
Cintica enzimtica
Curva : Velocidad enzimtica/concentracin de la enzima
Curva de enzimas alostricas
Esquema para la produccin de enzimas por fermentacin
Clasificacin deformas de obtencin de enzimas
La separacin de los cidos nucleicos
Procedimientos bsicos del ADN recombinante
Replicacin del ADN, utilizando (PCR)
Mutagnesis
Mutagnesis dirigida
Mutacin por casette
Mejoramiento gentico en bovinos
Ejemplo de plantas genticamente modificadas
Alimentos basados en soja fermentada
Ruta de la produccin de citrato
Pgina
34
36
39
INTRODUCCIN
Aunque la utilizacin de organismos vivos para obtener productos comerciales se
remonta a la antigedad, cuando el hombre sin saberlo utilizaba microorganismos para
obtener el vino, o pan, los acontecimientos cientficos en las ltimas dcadas han
revolucionado el panorama industrial con productos de diversa ndole obtenidos a travs
de la manipulacin o transformacin de los organismos vivos.
aplicada. Las tcnicas de esta ciencia se han utilizado para estudiar los mecanismos de
la replicacin y expresin gnicas en procariotas, eucariotas y sus virus. Algunos de los
ms importantes descubrimientos bsicos de la gentica se han realizado utilizando
tcnicas ingenieriles. En cuanto a la investigacin aplicada, la Biotecnologa permite el
desarrollo de cultivos microbianos capaces de fabricar productos valiosos, tales como la
insulina humana, la hormona humana del crecimiento, interfern, vacunas y enzimas
industriales. La aplicacin industrial de la Biotecnologa, parece tener un potencial
ilimitado.
Nuestro pas, tiene un desafo de gran envergadura ante fenmenos tales como la
globalizacin neoliberal, el deterioro ambiental, la crisis financiera y otras amenazas que
pueden afectar seriamente sus potencialidades de desarrollo futuro. Como una estrategia
para hacer frente a los retos de la post - modernidad es necesario aprovechar los
recursos naturales, utilizar racionalmente la biodiversidad y desarrollar proyectos
productivos.
UNIDAD 1
CAPITULO 1. CONTEXTUALIZACIN DE LA BIOTECNOLOGA
Leccin 4:
13
13
15
19
23
23
23
26
28
29
29
31
Objetivos de la unidad
Contextualizar el estudio de la Biotecnologa
alimentaria
analizar su impacto en la sociedad contempornea
AUTOEVALUACIN.
Segunda poca
El trabajo preliminar de los
primeros microscopistas, como van
Leeuwenhoek y Hooke (siglo XVII), facilit un par de siglos ms tarde,
la comprensin, de la verdadera importancia de las clulas procariticas
y eucariticas, en procesos relacionados con la fermentacin y en el
origen de las enfermedades infecciosas.
Un segundo factor contribuyente al nacimiento de la ciencia
microbiolgica fue el establecimiento de la relacin que une ciertas
transformaciones qumicas que se dan en las infusiones con el
crecimiento de los grmenes en ellas existentes. Cagniard-Latour en
1836, y Schwann y Ktzing en 1837 haban sugerido que las levaduras
eran las causantes de la fermentacin alcohlica por la que el azcar
pasa a alcohol etlico y dixido de carbono, pero se encontraron con la
crtica adversa de los grandes qumicos de la poca (Berzelius, Wohler y
Liebig). Liebig, hacia 1840, haba realizado importantes confirmaciones
a la "teora mineral" sobre la nutricin de las plantas, enfrentndose a la
"teora del humus" sostenida por Thaer, asestando un golpe a las ideas
vitalistas heredadas de Leibniz. Puesto que se consideraba a las
levaduras como plantas microscpicas, se supona que los procesos de
fermentacin y putrefaccin se deban a fenmenos qumicos de
descomposicin y muerte encuadrables en el marco de la teora mineral
de la fisiologa vegetal. Su convencimiento de que toda actividad vital se
poda explicar en trminos de qumica y fsica retras por algn tiempo
la adscripcin de estos fenmenos a clulas vivas.
Fue Pasteur (que, desde sus primeros estudios sobre las propiedades
pticas de los cristales de tartrato, vena suponiendo que estos
compuestos tenan un orgen orgnico) quien de nuevo intervino en el
debate de forma decisiva. En 1857 demostr que los agentes de la
fermentacin lctica eran microorganismos, trabajando sobre un
problema que haba surgido entre los destiladores de Lille cuando en sus
cubas la fermentacin alcohlica se vio sustituida por una indeseable
fermentacin lctica. Este fue el inicio de una larga serie de estudios que
habra de durar hasta 1876, en los que Pasteur identific distintos
microorganismos responsables de diferentes clases de procesos
fermentativos. As, en 1860 adscribe inequvocamente la fermentacin
alcohlica a ciertos tipos de levaduras, y en 1866, en sus tudes sur le
vin resume sus hallazgos al respecto, inaugurando la Microbiologa
Aplicada, una de las primeras derivaciones prcticas no empricas
emanadas de la Biologa. A finales del siglo XIX eminentes bilogos
como Hansen, en Copenhague, y Beijerink, en Delft, desarrollaban su
actividad en industrias y destileras.
Tercera poca
En la historia de la biotecnologa se caracteriza por desarrollos en cierto
sentido opuestos, ya que por un lado la expansin vertiginosa de la
industria petroqumica tiende a desplazar los procesos biotecnolgicos
de la fermentacin, pero por otro, el descubrimiento de la penicilina por
Fleming en 1928, sentara las bases para la produccin en gran escala
de este antibitico con el fin de satisfacer las demandas generadas en la
II Guerra Mundial, en esa poca, la produccin de penicilina es el
resultado de avances importantes en tcnicas de esterilizacin a gran
escala, mejora de las instalaciones de fermentacin, comprensin y
control de procesos de fermentacin (incluyendo temperatura, pH,
Leccin 3:
La biotecnologa en la
Impacto
de
la
Biotecnologa
en
el
contexto
los Estados Unidos, Italia, Blgica y Francia que utilizan como materia
prima melazas de remolacha. La importancia que tiene cada una de las
aplicaciones mencionadas es incuestionable desde el punto de vista
econmico.
A pesar que en el siglo XX, cuando la Gentica haba resuelto el misterio
de la naturaleza del material de la herencia, las posibilidades que haba
para actuar sobre dicho material eran limitadas: cruces entre plantas y
animales de la misma especie (o de especies similares), seleccin de los
individuos con rasgos deseados, retrocruzamientos (un proceso largo y
lento), mutaciones con agentes fsicos (rayos UV, rayos X) o qumicos,
con ulterior bsqueda (seleccin o rastreo -screening) de alguna
variante de inters (algo tedioso y frecuentemente infructuoso), etc.
Debimos esperar a la dcada de los 70 para que surja un conjunto de
tcnicas de laboratorio revolucionarias que por primera vez permiten
"tocar" de modo racional el sancta sanctorum de la vida. Son tcnicas y
herramientas con las que se puede modificar el ADN de acuerdo a
diseos previos y objetivos concretos (de ah el nombre popular de
Ingeniera Gentica).
La Ingeniera Gentica (I.G.), mejor llamada tecnologa del ADN
recombinante in vitro, se caracteriza por su capacidad de cortar y
empalmar genes o fragmentos de ADN de organismos distintos, creando
nuevas combinaciones no existentes en la Naturaleza, combinaciones
que ponemos a trabajar en el interior de una variedad de organismos
hospederos, para nuestro provecho.
Teniendo en cuenta lo anterior se puede inferir que las tendencias
cientficas mundiales a todos los niveles y clasificacin de la
Biotecnologa, se han concentrado en seis aspectos:
-
El uso de
conservacin
determinados
separacin de
ACTIVIDADES DE AUTOEVALUACIN
Lectura 1. Aplicando el mtodo de Lectura Auto regulada IPLER;
Realice un ensayo de la siguiente lectura.
Los beneficios de la biotecnologa alimentaria
La biotecnologa ya nos est ayudando de muchas maneras:
Proteccin del medio ambiente. Los cientficos lograron que algunos
alimentos, como la papaya y la papa, sean ms resistentes a las plagas.
Estos cultivos necesitan ahora menos productos qumicos para estar
protegidos de insectos o virus dainos, lo que es mucho mejor para el
agua y la vida silvestre. Otros cultivos estn protegidos de los herbicidas
que se usan para controlar a las malezas. El mejor control de las
malezas permite que los agricultores conserven el suelo ya que no
tienen que arar la tierra con tanta frecuencia.
Mayores rendimientos. Los agricultores tambin usan la biotecnologa
para ayudar a las plantas a sobrevivir. Por ejemplo, las nuevas
variedades de maz y algodn rechazan a los insectos dainos, y la soya
mejorada puede tolerar los herbicidas. Los agricultores pueden esperar
mayores rendimientos de la cosecha en estas plantas ms resistentes.
Alimentos con mejor sabor y ms frescos. Pimientos ms dulces y
tomates que maduran ms despacio son slo dos ejemplos de cmo la
biotecnologa puede producir alimentos ms frescos y de mejor sabor.
El futuro de la biotecnologa
En el futuro, la biotecnologa podr ayudarnos a:
Cultivar ms alimentos en menor superficie. En la actualidad hay 6,000
millones de personas viviendo en la Tierra. Para el ao 2050, seremos
9,000 millones. Al usar la biotecnologa, los agricultores podrn
producir mayores cosechas en la misma superficie que utilizan en la
por
los
macronutrientes
mayoritarios:
carbono
nitrgeno
Macronutrientes: Prcticamente la totalidad de la masa celular est
formada por sustancias con cuatro tipos de tomos: Carbono, oxgeno,
su
vez
este
es
el
elemento
mayoritario
de
las
macromolculas.
Despus del carbono, el siguiente elemento ms abundante en la clula
es el nitrgeno. Una bacteria tpica contiene aproximadamente el 12%
de nitrgeno (peso seco) y a su vez el nitrgeno es un componente
mayoritario de protenas, cidos nucleicos y otros constituyentes
celulares. El nitrgeno se encuentra en la naturaleza tanto en forma
orgnica como inorgnica. Sin embargo, la globalidad del nitrgeno
utilizable est en forma inorgnica, bien como amonaco (NH3), nitrato
(NH3-) N2. La mayora de las bacterias pueden utilizar amonaco y
muchas adems nitrato. El nitrgeno molecular (gas), sin embargo,
puede ser fuente de nitrgeno para un reducido grupo de bacterias
(bacterias fijadoras de nitrgeno).
Otros macronutrientes: P,S,K,Mg,Ca,Na,Fe
El fsforo acontece en la naturaleza en forma de fosfatos orgnicos o
inorgnicos y es
los
micronutrientes
son
requeridos
en
muy
pequeas
requieren tomar
son
molculas
orgnicas.
(Martinez,
J;
1995)
Los
compuestos que llevan acabo estas dos funciones son usualmente dos
metabolitos diferentes derivados de un sustrato fermentable simple
(como azcar, por ejemplo). En la fermentacin el sustrato da lugar a
una serie de compuestos, unos ms oxidados y otros ms reducidos; en
el proceso fermentativo mantiene un estricto balance O-R. El nivel de
oxidacin promedio de los productos finales es muy cercano al del
sustrato. De ah que la generacin de ATP asociada a la fermentacin se
Glucosa
(C6H12O6)
2 lactatos +2 H+
2(C3H4O3- + 2CO2)
Ntese que sta es una reaccin balanceada y que los productos, lactato
ms protones, tienen la misma proporcin de tomos de hidrgeno y
oxgeno que la glucosa. Esta reaccin puede analizarse desde tres
puntos de vista: Termodinmicamente, por la energa de enlace y por el
metabolismo intermediario.
Desde el punto de vista termodinmico, las fermentaciones se
caracterizan por ser una suma de reacciones, al final de las cuales los
productos poseen un contenido energtico menor que el inicial. Si
analizamos la fermentacin a travs de la energa de enlace, tendremos
que en ella se producen reordenamientos moleculares en los que se
pasa de funciones de mayor contenido a funciones de menor contenido
energtico. As, en la mayora de las fermentaciones se pasa de grupos
carbonilo e hidroxilo a grupos carboxilo de menor contenido energtico.
Cada una de estas vas tiene funciones y unidades especficas para los
microorganismos. Las dos primeras vas son comunes tanto a
organismos
respiratorios
como
fermentativos,
procariontes
o
eucariontes. La tercera se halla restringida a procariontes. Al existir
diferentes vas de fermentacin se obtienen tambin diferentes
productos: Algunos productos derivados de la fermentacin se observan
en la siguiente tabla:
Tabla 1. Productos derivados de la fermentacin
Tipo de fermentacin
Producto(s)
Fermentacin lctica
Lactato
Fermentacin
etanol, CO2
alcohlica
Fermentacin
cida- Etanol,
succinato,
mixta
lactato, CO2, H2
Fermentacin
Butilnglicol, CO2
acetato,
formiato,
butirato,
butanol,
butilngliclica
Fermentacin
butrica
aceto- Acetato,
acetona,
etanol, CO2, H2
que
han
sido
denominadas
reacciones
metablicas.
de
cuatro
tipos:
cidos
nucleicos,
protenas,
formacin
de
metabolitos
secundarios
es
sumamente
lo
cual
implica
un
aumento
de
la
masa
celular
que
crecimiento
balanceado
no
restringido
durante
unas
pocas
composicin
del
tienen,
su
temperatura
ptima
tiempos
de
generacin muy cortos (15, 20 min), mientras que otros tienen crecen
ms lentamente, con tiempos de generacin que pueden ser de varias
horas o incluso das.
4) Fase de aceleracin negativa, de crecimiento desequilibrado, que
conduce a
5) Fase estacionaria: Esta fase se caracteriza porque el coeficiente
neto de crecimiento se hace nulo ( = 0), pero an existe crecimiento.
Lo que ocurre es que el crecimiento bruto se equilibra con las muertes
celulares.
N = No2n Donde:
N= numero final de clulas,
No = nmero inicial de clulas
N = nmero de generaciones
se aplica una
donde,
t = horas o minutos de crecimiento exponencial
Una expresin alternativa del crecimiento se deriva de asumir que la
velocidad de incremento en la masa celular o densidad celular (dx/dt)
en un tiempo (t) es proporcional a la densidad celular en dicho tiempo.
Por consiguiente:
de donde:
et
X1 = Xo
Entonces:
= 0.693/td
Ejemplo explicativo:
A continuacin se muestran los datos de un experimento de crecimiento bacteriano de E. colli el
cual se realizo durante 5 horas. El numero de celulas fue cuantificado por unidades formadoras de
colonia por cajas petri. Con los datos de la tabla calcular el numero de generaciones, el tiempo
generacional y la velocidad especifica de crecimiento ().
Debido a que el crecimiento bacteriano es una progresin geomtrica, existe una relacin directa
entre el nmero de clulas presente en el momento inicial y el habido en un momento determinado
del crecimiento exponencial de modo que:
N= N2n
Donde N = nmero final de clulas, No= nmero inicial de clulas y n = numero de generaciones,
por tanto despejando la ecuaciones anteriores tenemos que:
n= ( logN-logNo) / log 2
n =( log N log No ) / 0,301; remplazando tenemos
ln 2 /td
= 0.693/td
0.6931/ 2.15
0.3223
que
la
velocidad
de
crecimiento
es
una
funcin
de
la
mx
bajos.
Capitulo 3:
SISTEMAS DE FERMENTACIN
de
la
solucin
de
nutrientes
se
aaden
en
pequeas
el
proceso
de
alimentacin,
tienen
que
ser
medidos
3) Fermentacin continua.
En la fermentacin continua se establece un sistema abierto. La solucin
nutritiva estril se aade continuamente al biorreactor y una cantidad
equivalente
de
solucin
utilizada
de
los
nutrientes,
con
los
X/S),
(a
productos
como
piruvato,
acetato
cidos
hxL
Velocidad de flujo
: h-1
Discontinuo
0,1
Productividad
total X(g/l). D(h-1)
-X .0,05
48-72
>72
300
1000
5000
0,15
0,2
0,2
0,2
0,2
X.0,08
X
X.0,171
X.0,191
X.0,198
Hoy
los
coeficientes
generales
de
rendimiento
se
utilizan
para
El aire se inyecta por la parte inferior del tanque y es distribuido por una
corona que posee pequeos orificios espaciados regularmente. El chorro
de aire que sale de cada orificio es "golpeado" por las paletas de la
turbina inferior generndose de este modo miles de pequeas burbujas
de aire, desde las cuales difunde el O2 hacia el seno del lquido. El
sistema de agitacin se completa con cuatro o seis deflectores que
tienen por finalidad cortar o romper el movimiento circular que
imprimen las turbinas al lquido, generando de este modo mayor
turbulencia y mejor mezclado. El tanque est rodeado por una camisa
por la que circula agua, lo que permite controlar la temperatura. Para
tanques mayores que 1000 2000 litros este sistema ya no es eficiente
y es reemplazado por un serpentn que circula adyacente a la pared
interior del tanque. Debe tenerse en cuenta que a medida que es mayor
el volumen de cultivo tambin lo es la cantidad de calor generado, por lo
que se hace necesario una mayor rea de refrigeracin. Los tanques son
La velocidad de transferencia de 0 2,
Producto
1-20.000
Enzimas
sustancias
molecular
para
diagnstico,
para
biologa
40-80.000
100- 150.000
450.000
en
trminos
tambin
microbiolgicos
permiten
graficar
o
los
bioqumicos.
datos
Las
obtenidos
un
periodo
corto,
anaerobiosis
parcial,
con
el
cultivo
serias
puede
consecuencias
experimentar
en
trminos
una
de
de
una
planta
piloto
es
deseable
una
cuidadosa
se
fermentador industrial.
obtengan
Actividades:
Investigue en su localidad los sustratos o subproductos que pueden
utilizarse como fuente de Carbono, nitrgeno y fsforo. Enuncie sus
caractersticas relacionadas en cuanto a
UNIDAD 2
CAPITULO CUATRO : BIOTECNOLOGA ENZIMTICA
Leccin 16 : Las enzimas biocatalizadores de naturaleza proteica
Leccin 17: Naturaleza de las enzimas
Leccin 18: Clasificacin de enzimas segn la naturaleza de la reaccin y cofactores
Leccin 19: Cintica enzimtica
Leccin 20: Produccin de enzimas
CAPITULO CINCO : PRINCIPIO DE INGENIERIA GENETICA APLICADO A LA
BIOTECNOLOGA
Leccin 21: Tcnicas utilizadas en la manipulacin gentica in vitro.
Leccin 22: Tecnologa del ADN recombinante
Leccin 23: La reaccin en cadena de polimerasa ( PCR)
Leccin 24: Muta gnesis , Muta gnesis dirigida por oligonucletidos
Leccin 25: Muta gnesis en casette o interrupcin gnica
CAPITULO SEIS : APLICACIONES
INDUSTRIA ALIMENTARIA
DEL
ADN
RECOMBINANTE
EN
LA
Objetivos
Consolidar conceptos de Biologa molecular esenciales para
aproximarse y comprender las transformaciones genticas en
los seres vivos que se pueden traducir en la obtencin de
nuevos alimentos mejoramiento de procesos de inters en la
industria alimentaria.
Adquirir bases tericas que respaldan los procesos de ingeniera
gentica aplicada a la industria alimenticia.
Analizar y discutir las oportunidades y desventajas que ofrece
la Biotecnologa en la alimentacin mundial
Obtener una visin holstica del debate que se ha planteado a
cerca de las ventajas y desventajas sobre la introduccin de
alimentos transgnicos en la alimentacin mundial.
Capitulo CUATRO: BIOTECNOLOGA ENZIMTICA
Leccin 16: Las enzimas biocatalizadores de naturaleza proteica
El choque entre dos molculas produce energa que puede ser absorbida
por las molculas mismas, o puede ser disipada bajo forma de calor en
el medio.
Si la energa absorbida por el substrato (S) es suficiente para franquear
la barrera de potencial, llamada energa de activacin, el substrato se
ES
E+P
Grfico 9:
Enzimas complejos
Fuente: http://www.portalsaofrancisco.com.br/alfa/enzimas/conceitos-e-funcoes1.php
La reaccin catalizada.
Fuente: http://www.portalsaofrancisco.com.br/alfa/enzimas/conceitos-e-funcoes1.php
. 2007
TRANSFERASAS
Catalizan las reacciones de transferencia de radicales o de
agrupamientos (metilo, hidroximetilo, carboxilo, acilo, glucosilo, amino,
etc.).
En esta clase, que lleva la cifra 2, se reagrupan las transferasas,
fosforilasas, cinasas, entre otras Las sub-clases se definen por la
Fuente: http://www.portalsaofrancisco.com.br/alfa/enzimas/conceitos-e-funcoes1.php
HIDROLASAS
Provocan la hidrlisis de diversos tipos de enlaces: ster, acetal
(osdico), amida (peptdico), (Fig. 13)
Las subclases son definidas por la naturaleza general del enlace que es
hidrolizado. El nombre sistemtico se forma de acuerdo al modelo
"substrato hidrolasa", un prefijo que precisa la naturaleza del grupo
eliminado cuando la enzima es especfica para este enlace.
El nombre comn que se recomienda es, en la mayor parte de los
casos, formado por el nombre del substrato al cual se adiciona el sufijo
"asa". En general las hidrolasas son holoprotenas. Algunas pueden
tener un grupo prosttico, por ejemplo el fosfato de piridoxal.
Fig.13 HIDROLASAS
LIASAS
Son enzimas que rompen los enlaces C - C, C - O, C - N u algn otro,
por medios diferentes a la hidrlisis o a, la oxidacin, con formacin de
un doble enlace en alguno de los dos fragmentos. Cuando ellas actan
en sentido inverso -condensacin de dos molculas con desaparicin de
un doble enlace se les designa con el nombre de sintetasas.
Las subclases son definidas por la naturaleza del enlace roto y las sub.
clases precisan la identidad de la fraccin eliminada: CO2, aldehdo,
amoniaco, etc. El nombre sistemtico se forma de acuerdo al modelo,
substrato: fraccin eliminada-liasas.
ISOMERASAS
Catalizan las reacciones de isomerizacin: racemizacin, epimerizacin,
isomerizacin
cis-trans,
o
tambin
originan
modificaciones
intramoleculares tales que transfieren un agrupamiento o producen
oxidorreduccin.
Para su nomenclatura se retiene el principio "substrato. . .asa", pero el
trmino isonerasa se reserva a ciertas subclases; un prefijo hace
precisa la naturaleza de la isomerizacin, por ejemplo cis-trans
isomerasa.
LIGASAS O SINTETASAS
Son enzimas que catalizan la reaccin de unin de dos molculas,
acopladas a la ruptura, sin intervencin del agua, de un enlace
pirofosfrico en el ATP o eventualmente en un nucletido trifosfrico del
mismo tipo.
Las subclases corresponden al tipo de enlace que se establece (C - , C S, C - N, C - C) y la sub-subclases se refieren a la naturaleza del producto formado (amida, pptido, etc.) o a la reaccin que es catalizada.
El nombre sistemtico es formado de acuerdo al modelo, " X: Y ligasa
(formando ADP), X Y , son los dos substratos que se condensan; el
producto formado a partir del nucletido trifosfrico implicado .en la
reaccin (ADP o AMP) se indica entre parntesis.
Para darle nombre comn se utiliza, en general, el nombre del producto
formado seguido del trmino "sintetasa".
Fig. 16: Ligazas
Leccin 18:
Cintica enzimtica
Enzimas Michaelianas
Principales hechos experimentales: Debemos subrayar, como un
prembulo, la necesidad absoluta de que las enzimas sean puras y
desprovistas de actividad parsita.
Los tres hechos experimentales principales, en que se basan las leyes
generales de la cintica enzimtica son:
a) El substrato, S, forma con la enzima, E, un complejo intermediario
transitorio ES. Este complejo resulta de una complementaria de la
estructura entre el sitio activo de la enzima y la molcula del substrato.
b) La velocidad de la reaccin en el tiempo t, es decir la velocidad de
dS/dP desaparicin del substrato, o de aparicin del producto, dt/dt
que se representa por la pendiente de la tangente a la curva, P o S =
k3
ES
E + P
k2
Figura 17:
Cintica enzimtica
Toneladas
de
enzima pura/ao
PROTEASA
500
GLUCOAMILASA
300
AMILASA
300
GLUCOSA
ISOMERASA
50
AMILASA FNGICA
10
PECTINASA
10
PROTEASA FNGICA
10
RENINA
MICROBIANA
10
La fundamentacin de la produccin de enzimas microbianas exocelulares es muy simple: un microorganismo es cultivado en un medio
apropiado, a partir del cual es extrada la enzima (para las enzimas
endocelulares es necesario Un tratamiento previo de la biomasa). Los
problemas radican en los detalles de proceso.
En la Industria alimentara, existe una gran variedad de enzimas de
mucha importancia. En el cuadro (2) se muestran algunos ejemplos:
Produccin Industrial de enzimas
En la produccin industrial de las enzimas se consideran las siguientes
etapas. (Scriban, 1985)
A. Definicin de la enzima que se busca
La produccin de una enzima industrial que responda, en principio, a
una exigencia potencial de quienes la pueden utilizar, hace necesario
determinar las propiedades que esta enzima pueda tener.
Prioritariamente, de acuerdo a Sicart (1980):
- La especificidad: Aunque en la industria las enzimas sean utilizadas
para la hidrlisis de macromolculas complejas en las cuales los sitios de
acoplamiento con, frecuencia se desconocen, el efecto global que se
busca involucra, generalmente, la utilizacin de un tipo preciso de
enzima. En ciertos casos, como sucede con la pectinasa, una enzima
asocia tres actividades diferentes, y se debe precisar estrechamente la
relacin entre estas tres actividades de acuerdo al producto que se vaya
a tratar.
Fuente: http://www.porquebiotecnologia.com.ar/educacion/cuaderno/ec_54.asp,
(2008)
- El valor ptimo de pH: Este factor tiene una influencia variable segn
las enzimas; algunas de ellas, como la proteasa alcalina an son activas
a pH = 10, en tanto que las enzimas fngicas funcionan an a pH = 3.
- El valor ptimo de temperatura: Generalmente, quienes utilizan enzimas se interesan en poder disponer de enzimas que soporten temperaturas elevadas, ya que estas temperaturas conservan en parte la
esterilidad del medio de fermentacin.
Despus, es necesario definir el sistema que se adoptar para medir su
actividad, pero conviene disociar la nocin de actividad que se aplica a
la cantidad de enzima presente en una preparacin, la que se puede
determinar mediante un mtodo de laboratorio, de la nocin de eficacia
que caracteriza el comportamiento de la misma preparacin colocada en
las condiciones industriales en las que vaa utilizarse. (Sicart, 1980).
Se necesita tomar precauciones a nivel de la construccin del fermentador y para la eleccin de las instalaciones y los equipos colaterales.
Durante toda la fermentacin, una ligera supresin de aire en el
fermentador impide la penetracin de contaminantes, esta precaucin la
refuerzan las protecciones de vapor en todos los puntos de
comunicacin con el exterior (fig. 20).
An no se ha establecido el modelo cintico general para la sntesis de
enzimas, pero, ya se ha estudiado la regulacin de la formacin de
algunas enzimas. Algunas enzimas se forman durante la fase
exponencial de crecimiento, pero la mayor parte aparecen en la fase
postexponencial. Segn sean las enzimas y los procedimientos, la
fermentacin dura de 30 a 150 horas. La cantidad de protena -enzima
en el medio, al final de la fermentacin, representa de 1 a 5% de la
materia seca inicial, en tanto que la biomasa celular puede alcanzar de 2
a 10%.
La calidad de las enzimas producidas est en estrecha relacin a la
forma en que se condujo la fermentacin. La seleccin de las materias
primas, el mtodo de esterilizacin, el procedimiento para regular la
formacin de espuma, la aireacin y la agitacin, as como la duracin
de la fermentacin afectan, no solamente al rendimiento y al costo de
produccin, sino tambin al color, olor y a la estabilidad de la enzimas
Fig. 20: Esquema para una produccin de fermentacin
para la produccin de enzimas
del
microambiente:
pH
local,
interacciones
CIBERGRAFIA:
http://www.arrakis.es/~lluengo/enzimas.html.
Sitio
que
informacin acerca de las enzimas, su funcin y caractersticas.
incluye
Leccin
21: TCNICAS UTILIZADAS EN LA MANIPULACIN
GENTICA IN VITRO.
ADN
1. Obtencin de
restriccin).
fragmentos
especficos
de
ADN
(enzimas
de
un
avance
Por otra parte, los prebiticos son ingredientes no digeribles que afectan
benficamente al hospedero estimulando selectivamente a un nmero
limitado de bacterias del colon promoviendo el crecimiento, la actividad
o los dos aspectos en estas poblaciones microbianas. Los dos prebiticos
ms estudiados son los fructo-oligosacaridos o FOS conocidos como
oligofructosa e inulina. Otras de las sustancias ms comercializadas
estn:
Fructooligosacaridos-Suntory(Japn),
Isomaltooligosacarido, Showa Sangyo(Japn)
Oligomate(galactooligosacaridos) Yakult(Japn)
Palatinosa-Sudzucker(Alemania)
polidextrosa
.Estos carbohidratos presentes en vegetales como ajo, cebolla, puerros,
esparrago, alcachofas, tomates, pltanos, entre otros.
Leccin 30: Probiticos: es de origen griego y significa "a favor de la
vida este trmino se utiliza para bacterias benficas que viven en el
cuerpo de los animales o del hombre trabajando en simbiosis con el
hospedero. Entre las bacterias que presentan esta caracterstica se
puede mencionar a Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus bulgaricus,
Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium
infantis
Este tipo de microorganismos se consideran como la primera lnea de
defensa de nuestro cuerpo contra los microorganismos potencialmente
patgenos que se inhalan o ingieren. Estas bacterias estn presentes en
la piel, la boca, el sistema digestivo y la mucosa vaginal, donde realizan
numerosas e indispensables funciones para proteger al cuerpo y los
rganos contra las bacterias patgenas. Entre los mecanismos por los
cuales actan estas bacterias se pueden mencionar: primero, la
transformacin de la lactosa en acido lctico, este ultimo compuesto
humanos
AUTOEVALUACIN
Realice un Glosario de la Unidad estudiada. Recuerde que para ello es
necesario sacar palabras o conceptos que encuentran en el texto;
organizarlos por orden alfabtico y definirlos de acuerdo a las
caractersticas esenciales de cada uno.
UNIDAD 3
CAPITULO 7: APLICACIN DE LA BIOTECNOLOGA EN LA OBTENCIN DE PRODUCTOS
DERIVADOS DEL METABOLISMO ENERGTICO POR VA FERMENTATIVA.
y condiciones de la
UNIDAD 3: PRODUCTOS
ALIMENTARIO
BIOTECNOLGICOS
DE
INTERES
utilizados en la
Leccin
33:
organolpticos:
Compuestos
C2H5OHCH3CHO+H2OCH2CH OH2CH3COOH+H2O
La materia prima de la fermentacin del vinagre de alcohol (white spirit)
consiste usualmente en etanol purificado diluido. Los vinagres de vino,
sidra, malta y arroz se obtienen por fermentacin alcohlica de zumos
de uva, manzana, cebada malteada y arroz, respectivamente. La
fermentacin del vinagre requiere tambin una fuente de nitrgeno y
una combinacin apropiada de minerales y con frecuencia es necesaria
la suplementacin con nutrientes. Las modernas fermentaciones de
vinagre consisten en procesos sumergidos muy aireados. El acetator
Frings (Fig. 7.8), muy utilizado en la produccin comercial de vinagre,
es un fermentador provisto de deflectores, cuyo fondo contiene una turbina de cuerpo hueco que gira a 1.450-1.750 rpm, cuya rotacin hace
Uso veterinario
Industrias alimentarios
BIBLIOGRAFIA BSICA
.Aspectos
legales
de
la
Biotecnologa.
de
Estados
Americanos.:
Microbiologa
CIBERGRAFA
Fundamentos de Ingeniera Bioqumica
http://www.csic.es/mostrar/instalaciones/area7/iata1/planta.
htm
Planta piloto de Biotecnologa Alimentaria
http://tamarugo.cec.uchile.cl/~btcursos/fermentacion/clases.h
tml
Material
de
asignatura,
Universidad
de
http://instruct1.cit.cornell.edu/courses/biomi290/
Chile.
Cornell.
Enzimas.
http://www.science.oas.org/espanol/publica_bio.htm
Textos en formato electrnico en el rea de la biotecnologa
alimentaria (OEA)
FAO: www.fao.org/biosecurity/
Bayer: www.bayervet.net/bs_index.html
Nieser: www.nieser.com.ar/esp/bioseguridad.asp
Biotecnologa de los Alimentos: IATA www.iata.csic.es/iata/dbio
Biotecnologa en Alimentacin y Agricultura
www.fao.org/biotech/index.asp?lang=es
CENTRO BIOINFO MONSANTO:
www.biotechknowledge.monsanto.com/
DIVERSIDAD BIOLGICA:
www.fao.org/biodiversity/index.asp?lang=es
GLOSARIO BIOTECNOLOGA:
www.monsanto.es/biotecnologia/glosario.html
www.fao.org/biotech/find-formalpha-n.asp