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FACULTAD DE CIENCIAS
TESIS
ELABORADO POR
BERTHA MILAGROS GARCIA GUTIERREZ
ASESOR
Dr. JAVIER SOLANO (ASESOR INTERNO)
DR. MAYER ZAHARIA (ASESOR EXTERNO)
LIMA PER
2014
1
DEDICATORIA
A mis padres, hermanos, sobrinos y cuadas
que son el incentivo y la razn de seguir
adelante.
AGRADECIMIENTOS:
INDICE:
INTRODUCCION.
I.
MARCO TEORICO 8
I.1.RADIOTERAPIA..
10
12
13
16
16
17
18
I.3.1: Ionizacin.
21
21
I.4.RADIACIN GAMMA. 25
I.4.1: Interaccin de los rayos X con la materia
26
26
27
30
30
31
I.5. RADIOBIOLOGIA.
33
35
36
37
I.5.4.Irradiacin de clulas
38
38
ionizantes..
39
I.6.1.A. Aleatoriedad..
39
39
I.6.1.C. No selectividad.
39
39
I.6.1.E. Latencia....
39
II.
40
40
40
I.8. LEUCEMIA.
41
42
42
43
I.6.4.Leucemia en el Per
44
45
47
47
48
MATERIALES Y METODOS.... 49
II.1. AISLAMIENTO DE CELULAS. MONONUCLEARES....
II.1.1. Coleccin de muestras biolgicas..
49
49
II.2. CRIOPRESERVACIN.
49
50
50
51
51
51
5
III.
RESULTADOS. 52
IV.
DISCUSIN 55
V.
REFERENCIAS..
56
INTRODUCCIN:
6
La fsica y los efectos de las radiaciones en los organismos vivos son tema de gran
inters cientfico. Las caractersticas y los efectos de las radiaciones son estudiadas por
diferentes profesionales como los Fsicos Mdicos y Radionclogos principalmente.
El trmino radiacin significa bsicamente transferencia de energa de una fuente a
otra. Los efectos que causa esta energa a la clula estn englobados dentro del rea de la
Fsica Mdica que comprende la Radiobiologa, es dentro de este contexto que se
desarrolla el presente trabajo de investigacin, en el cual se introduce trminos de
radiosensibilidad y radioresistencia de las clulas y la diferencia que existen en las
respuestas a la radiacin de las clulas sanas y clulas neoplsicas, lo que se conoce como
biologa de las clulas tumorales, estas respuestas varan de un tipo de neoplasia a otra, lo
que da lugar a la clasificacin en agresividad tumoral.
La leucemia aguda, es un tipo de cncer que se origina en la mdula sea por la
proliferacin incontrolada de las clulas madres del sistema hematopoytico, esta
proliferacin incontrolada de las clulas, sustituye los elementos normales de la mdula
sea e invade la sangre perifrica, pudiendo infiltrar rgano o tejido del cuerpo humano
formando los llamados cloromas [1].
En el presente trabajo, estudiaremos especficamente las leucemias agudas
(linfoblsticas y mieloblsticas), que a travs de la historia, constituyen uno de los grupos
de enfermedades neoplsicas ms interesantes, por su evolucin y respuesta al tratamiento
con radiaciones ionizantes [1].
I.
MARCO TEORICO:
7
Los diferentes tipos de leucemias agudas, presentan una biologa diferente, lo que
podra traducirse en distinta radiosensibilidad a las radiaciones ionizantes. El objetivo de
esta investigacin, fue evaluar el efecto de una dosis de radiacin ionizante, en la
viabilidad celular, en diferentes subtipos de leucemias agudas.
El uso de la radioterapia en el tratamiento del cncer, se fundamenta en los efectos
citotxicos de las radiaciones ionizantes sobre las clulas malignas, que originan como
consecuencia, la muerte celular.
Las complicaciones del tratamiento radiante, surgen como resultado de la destruccin
de las clulas que integran los tejidos normales [2]. La llamada especificidad de la
radioterapia, se basa sobre todo en principios fsicos ms que biolgicos, por ejemplo, un
plan de tratamiento bien diseado va a permitir la administracin de una dosis apropiada al
tumor, reduciendo al mnimo posible la irradiacin de los tejidos normales, con el objetivo
de prevenir posibles complicaciones. Sin embargo, los conceptos de radiobiologa deben
ser tomados en cuenta al seleccionar esquemas de fraccionamiento, en la determinacin de
las dosis mximas tolerables, en la planificacin del tratamiento adyuvante, y cuando se
plantea el uso de otras modalidades teraputicas en combinacin con la radioterapia [3].
Las leucemias agudas se caracterizan por la proliferacin, acumulacin anormal y
detencin de la maduracin de los precursores hematopoyticos [1].
Existe una variacin a nivel biolgico y clnico entre los diferentes tipos de
leucemias. En lo referente a leucemias agudas, estas se caracterizan por la presencia de un
nmero elevado de clulas inmaduras, un cuadro clnico de comienzo agudo y evolucin
ms agresiva de la enfermedad [2]. Las clulas eucariotas poseen una maquinaria
compleja, responsable de la reparacin de su material gentico a las radiaciones ionizantes.
Las protenas involucradas en el desarrollo de la leucemia incluyen a P53, ATM,
BRCA2, P21, entre otras [3]. La radioterapia en el tratamiento de leucemias, es aplicada a
los rganos de riesgos infiltrados por la enfermedad generalmente en el sistema nervioso, y
a los focos extra medulares de leucemia. El sitio ms importante en la leucemia
linfoblstica aguda es el sistema nervioso central, las clulas neoplsicas infiltran la piel, el
globo ocular y otros depsitos tisulares que son sitios de desarrollo de focos
extramedulares de clulas leucmicas [1].
I.1 RADIOTERAPIA:
La radioterapia se utiliza como tratamiento hace ya ms de un siglo. Uno de los
primeros informes de su uso data de 1899, poco despus de 1895 cuando Roentgen
descubre los rayos X, seguidamente en 1898 cuando Marie Curie descubri el 226Ra.
Es en 1922 cuando la oncologa se establece como disciplina mdica. Desde ese
momento, la radioterapia, al igual que el resto de las tcnicas utilizadas para tratar el
cncer, ha evolucionado mucho. La invencin del equipo de teleterapia con
60
Co por
La primera mquina de
radioterapia que utiliza el 60Co con fines mdicos es llamada bomba de cobalto, se utiliz
por primera vez en un paciente el 27 de octubre de 1951; el equipo se encuentra
actualmente en exposicin en la University of Saskatchewan, tal como lo menciona en su
pgina, ubicada en la ciudad de Saskatoon - Canad.
Posteriormente en los aos 1940 apareci un equipo especial, que mediante
diferentes componentes y partes hace que el equipo cree su propia energa ionizante con
altas dosis de radiacin llamado acelerador lineal de electrones, que es un equipo que emite
energas del orden de 4 hasta 22 megaelectronvoltios (MeV). El uso de fuentes radiactivas
como el 60Co y el acelerador lineal de electrones son los dos tipos de equipos que ms se
usa en el tratamiento de cncer utilizando radiaciones ionizantes.
Por lo general los equipos de 60Co usados en radioterapia utilizan partculas u ondas
de alta energa, llamados rayos gamma, que se utiliza para eliminar o daar las clulas
cancerosas. La radioterapia se conoce adems como terapia de radiacin [6].
La radioterapia es uno de los tratamientos ms comunes contra el cncer. La
radiacin a menudo es parte del tratamiento contra ciertos tipos de cncer, tales como los
cnceres de cabeza y cuello, vejiga, pulmn, leucemias, entre otros. Adems, muchos otros
tipos de cncer son tratados con radioterapia.
La mayora de las clulas del cuerpo crecen y se dividen para formar nuevas
clulas, sin embargo, las clulas cancerosas lo hacen ms rpidamente que muchas de las
clulas normales a su alrededor. La radiacin acta sobre el ADN que se encuentra dentro
de las clulas produciendo pequeas roturas [7]. Estas roturas evitan que las clulas
cancerosas crezcan y se dividan, que a menudo causan la muerte. Puede que tambin las
clulas normales cercanas se afecten con la radiacin, pero la mayora se recupera y vuelve
a tener una funcin normal [8].
Para entender las diferentes maneras como se imparte la radiacin ionizante, es
necesario describir las distintas modalidades de irradiacin, dependiendo del tipo de equipo
de teleterapia, por esta razn decimos que los tratamientos de radioterapia, se realizan
usando un acelerador lineal o un equipo de teleterapia, que tiene una fuente de
60
Co. A
uso clnico son del orden de la decena de MeV ( 100 veces mayor que los equipos
60
11
I.1.2: Equipo de radioterapia de Cobalto: Los equipos para terapia de uso mdico que
usan una fuente de
60
60
mantenimiento especializado, por la energa que emiten, promedio de 1.25 MeV, hace que
su fuente est alojada en un sitio llamado recinto, que es blindado con plomo u otro
material, segn la marca del equipo, para evitar que la radiacin salga a travs del cabezal
del equipo cuando se est tratando al paciente, denominada radiacin dispersa, que es la
radiacin que se genera fuera del haz primario y contribuye a dosis menores en otras partes
del cuerpo del paciente, durante su tratamiento, o cuando est apagado el equipo, que es la
radiacin que genera la fuente de 60Co durante su decaimiento y que atraviesa el recinto
blindado, este tipo de radiacin, contribuye en dosis al personal ocupacionalmente
expuesto y constantemente est emitiendo radiacin de fuga a diferencia del acelerador
lineal que no la presenta, el promedio de radiacin de fuga y contaminacin se mide en
Kerma (kinetic energy released per unit mass), que es la energa liberada por unidad de
masa en un punto [9] se define as:
K=
La unidad del Kerma es el Joule/Kilogramo (J/Kg). El nombre de la unidad de Kerma es el
gray (Gy) donde 1J/Kg = 1 Gy
Las unidades de 60Co producen rayos estables, dicromticos de 1,17 y 1,33 MeV, lo
que resulta en un promedio de energa del haz de 1.25 MeV. La fuente contenida dentro del
equipo debe sellarse para que pueda resistir temperaturas altas por posibles incendios en el
edificio o centro clnico.
La fuga del cabezal [10] con la fuente en posicin Blindada es hasta 20 Gy h-1 a 1
metro de la fuente o hasta 200 Gy h-1 a 5 cm de la fuente.
Esto puede contribuir a una proporcin significativa de la dosis mxima permisible
para el personal.
12
embolo el cual hace que la fuente se desplace de un lado hacia otro colocndola en
posicin de exposicin (ON) y no exposicin (OFF).
FIG. 3. Cabezal de la Unidad Theratron-80. Ref. [6]
El cabezal del equipo est instalado sobre un brazo llamado gantry, que es capaz de
girar de 0 a 360 sobre un nico punto llamado isocentro. En un extremo dentro del
Gantry se encuentra el colimador, Fig. 4 que gira 360 en referencia al punto central del
volumen tumoral del paciente, a este punto tambin se le denomina isocentro Fig. 6, que es
un punto donde se cruzan el giro del grantry o brazo, eje de giro del colimador,eje de giro
de la mesa y eje de giro del punto central del volumen tumoral del paciente. Teniendo una
tolerancia de precisin de 0.2 cm.
El colimador presenta una bandeja donde se coloca los accesorios modificadores
del haz como cuas fsicas con ngulos de 15, 30, 45 y 60. Estas cuas tienen la
funcin de homogeneizar el haz cuando la superficie del paciente es poco homognea,
adicionalmente en el porta bandeja Fig. 4, se puede colocar los moldes del paciente en
caso lo requieran para proteger los rganos de riesgos que pudieran estar dentro del campo
de tratamiento. Estos moldes son confeccionados para cada paciente y para cada haz de
irradiacin, est elaborado de un material llamado Cerrobend que es una aleacin
14
15
60
Co, es por su
facilidad de intercambio de una fuente por otra al estar encapsulada, as como por su
decaimiento de la actividad que es lento, ya que su vida media es relativamente mayor, lo
que hace generalmente que la sustitucin de la fuente, sea realizada dentro de una vida
media, mejorando los costos de tratamientos.
I.2.1: Caracterstica de una fuente de 60Co:
Tpicamente la fuente tiene un dimetro de 1.5 cm, y largo de 2.5cm, por ser
pequea favorece en la formacin de una pequea penumbra fsica.
Este tipo de fuente, presenta una actividad del orden de 185 - 370 TBq, y posee una
tasa de dosis tpica a 80 cm de 1 2 Gy/min.
Su vida media es de 5,26 aos; las partculas beta que se forman en su decaimiento,
son absorbidas por la cpsula que protege a la fuente [12].
Cuando la fuente est en exposicin, se prende una luz de color rojo, indicando que
la fuente est en exposicin, y la radiacin como haz primario, est saliendo por el campo
formado por el colimador, que va del rango de apertura de un campo de 5 x 5 cm 2 hasta 35
x 35 cm2.
I.2.2. Decaimiento de una fuente de 60Co:
La fuente de
60
16
60
Ni. El decaimiento -
por lo general,
60
17
Es importante entender que es el punto isocntrico, debido a que todas las tcnicas de
tratamientos, son isocntricas al volumen tumoral y es en base a la ubicacin del punto
isocntrico, que gira el equipo alrededor del paciente, por eso se define isocentro al punto
donde cruza el eje de giro del brazo, con el eje de giro del colimador y con el eje de giro de
la mesa, Fig. 6. En la unidad de
60
18
19
Donde:
c: velocidad de la luz.
: longitud de onda.
h: constante de Planck
Cada uno de los fotones de la luz visible tiene una energa de unos pocos
electronvoltios; que es mayor que los de luz infrarroja, menor que la luz ultravioleta y
mucho menor que los rayos X o rayos gamma, tal como se aprecia en la figura del espectro
20
neutrones, Observe Fig. 10, su penetrabilidad es muy baja por la carga que posee y notable
masa.
22
emitindose
una
partcula
complementaria
denominada
23
24
Radiacin gamma (): Son fotones usualmente de muy alta energa, emitidos por
ncleos inestables u otros procesos. El ncleo no cambia su identidad sino que nicamente
pierde energa.
I.4. RADIACIN GAMMA:
Antes de definir el concepto de radiacin gamma, primero diferenciemos los
trminos radiacin e irradiacin.
La radiacin es una manera de trasmisin de la energa que se transmite a travs del
espacio en forma de ondas electromagnticas, ejemplo: microondas, la luz, el calor, los
rayos X y los rayos gamma. Si la radiacin presenta suficiente energa para provocar
cambios en los tomos, se dice que es radiacin ionizante por los efectos descrito
anteriormente. La radiacin es similar a la luz visible o a las ondas de radio, se
diferencian en la longitud de onda que es muy corta para radiacin y, por tanto, un nivel
de energa ms alto que la luz. Estas diferencias, facilitan la penetracin profunda de la
radiacin gamma dentro de ciertos materiales, en nuestro caso es el paciente.
La irradiacin est referida al proceso que describe la exposicin deliberada en
forma controlada a un material por la accin de una fuente de radiacin, como pueden ser
los rayos gamma o un haz de electrones.
La radiacin ocurre cuando un ncleo excitado
por decaimiento - o +, alcanza su estado fundamental
; generalmente producido
a travs de la emisin de uno
excitado,
La energa que emite la radiacin gamma se mide a travs de una unidad que se
llama electrn voltio (eV), con sus respectivos mltiplos como (MeV). Un MeV es la
escala que corresponde a fotones gamma de longitudes de onda inferiores a 1011 m o a
frecuencias superiores a 1019 Hz.
Los rayos gamma se diferencian de los rayos X por su origen, este ltimo se genera
a nivel extranuclear, por un fenmeno conocido como frenado electrnico, a diferencia de
los rayos gamma, que se producen por desexcitacin de un nuclen, que se encuentra en
estado excitado a otro de menor energa y por desintegracin de istopos radiactivos.
La radiactividad existe en el entorno natural, ejemplo:
Efecto fotoelctrico.
Dispersin Compton.
Produccin de pares.
II.4.1.A: Efecto fotoelctrico.: En este caso el fotn interactua con los
electrones que se encuentran fuertemente unidos, o presenta una alta energa de ligadura,
Fig. 13, es decir, con los electrones que se encuentran mas cerca al ncleo. El fotn que
interactua cede toda su energa y por lo tanto desaparece, esto hace que el electrn sea
arrancado de su rbita. El electrn es expulsado de su rbita y se llama un fotoelectrn [5].
EK hEB
Dnde:
hEnerga del fotn incidente
EB: Energa de ligadura del electrn
26
FIG. 13. Efecto fotoelctrico.: hacia el lado izquierdo se observa la Interaccin del fotn con un
electrn de la rbita K, hacia el lado derecho se observa la emisin desde el tomo como un
fotoelectrn. Ref. [9]
28
imprescindible que exista en las cercanas del fotn inicial un ncleo (para que se cumplan
las leyes de conservacin de momento y energa).
FIG. 16. Zonas predominio respectivamente de los efectos fotoelctricos, dispersin comptom y
creacin de pares.
Ref. [5]
29
30
FIG. 17. Regin build up en circulo rojo se observa que aumenta con la energa de fotones.
Ref. [5]. Pg. 59
Los efectos de interaccin son ms escasos en los tejidos subcutneos con los
fotones de alta energa, combinados con su gran penetrabilidad, hacen muy adecuado el
tratamiento de lesiones profundas Fig. 17.
I.4.4. Porcentaje de dosis en profundidad (PDD):
Si aumenta la profundidad entonces el nmero de fotones disminuir, a su vez va
disminuyendo el nmero de electrones secundarios, a partir del dmax la dosis cada vez es
menor. Por ejemplo: el mximo de dosis para fotones de terapia superficial se encuentra en
la superficie, para el
60
acelerador lineal alrededor de 3 cm. (Observe la Fig. 18, la diferencia del valor de dmax
conforme va aumentado la energa de fotones).
31
FIG. 18. Curvas de dosis en profundidad (PDD) para 60Co y energas de 4, 6, 10, 18 y 25 MeV
Ref [5]. Pag. 182
En las irradiaciones con fotones de alta energa, el dmax se encuentra por debajo de
la superficie, esto hace que la dosis en la piel slo sea una fraccin de la dosis en dicho
mximo, de forma que se infra dosifica. En los casos en que no se quiera esta reduccin de
dosis, se debern colocar bolus (material utilizado en radioterapia, con el fin de compensar
la distribucin de la dosis en el paciente o para aumentar su valor en las estructuras del
cuerpo del paciente situados a poca profundidad, se coloca directamente en la piel del
paciente. La mayora de bolus utilizan lminas con un espesor de 0,5-1,0 cm, el coeficiente
de absorcin de la radiacin similar a la del agua ionizante. Tienen un espesor de 0,5-1,0
cm, el coeficiente de absorcin de la radiacin similar a la del agua ionizante), en tcnica
W de bolus a menudo se utiliza arroz, de forma que el mximo ocurra cerca de la piel.
Cuanto mayor es la energa de los fotones ms profundo es el mximo y menor es la dosis
en la superficie.
Por lo tanto el PDD se define como la relacin, expresada como un porcentaje, de
la dosis absorbida en el eje central en la profundidad (d) a la dosis absorbida en el punto de
referencia dmax. Fig. 19, .Se tiene:
PDD: Dd x 100
Dd0
32
I.5. RADIOBIOLOGIA:
Es la parte de la fsica mdica, que estudia el efecto de las radiaciones en la clulas
y es el tema principal a desarrollar en este trabajo de investigacin; con el descubrimiento
de la radioactividad en 1,896 por Henry Becquerel y el desarrollo de los Rayos X en 1,895
por William Conrad Roentgen, se observaba los efectos de las radiaciones en el ser
humano, efectos cuya visualizacin han ayudado a mejorar las tcnicas, tratamientos y
optimizacin del uso de las radiaciones para fines mdicos [2]. En trminos generales la
radioterapia se emplea en el tratamiento del cncer, ya sea de modo paliativo o curativo
actuando sobre la enfermedad; resecando el tamao del tumor, eliminando, o controlando
su crecimiento; la cantidad de radiacin que se deposita en un tejido tumoral est
determinada directamente por la radiobiologa, mediante clculos de tolerancia de dosis, y
resistencia de dosis, etc.
Los clculos que se realizan para observar cuanta energa se va a depositar en un
determinado tejido y en funcin del tiempo est a cargo de la radiobiologa, que a su vez
incluyen diferentes parmetros como tipo de tumor, cantidad, volumen, origen tumoral,
33
edad del paciente, estadio, tamao, complicacin de otros rganos adyacentes al tumor, etc.
El uso de la radioterapia en el tratamiento del cncer se fundamenta en los efectos
citotxicos de las radiaciones ionizantes sobre las clulas malignas que traen como
consecuencia la muerte celular [2]. Las complicaciones del tratamiento radiante, surgen
como resultado de la destruccin de las clulas que integran los tejidos normales. La
llamada especificidad de la radioterapia, se basa sobre todo en principios fsicos ms que
biolgicos, por ejemplo, un plan de tratamiento bien diseado, va a permitir la
administracin de una dosis apropiada al tumor, reduciendo al mnimo posible la
irradiacin de los tejidos normales, con objeto de prevenir posibles complicaciones. Sin
embargo, los conceptos de radiobiologa deben ser tomados en cuenta al seleccionar
esquemas de fraccionamiento, en la determinacin de las dosis mximas tolerables, en la
planificacin del tratamiento adyuvante, y cuando se plantea el uso de otras modalidades
teraputicas en combinacin con la radioterapia [8].
La respuesta tumoral tambin va a ser influenciada por los patrones de proliferacin
y perdida celular del tumor en el momento del tratamiento y por el cambio de estos
patrones durante el mismo. Aquellos tumores que poseen una gran proporcin de clulas
proliferativas (una alta fraccin de crecimiento) pueden disminuir de tamao de una
manera ms rpida y dramtica despus del tratamiento, hecho que se debe no a una
mayor radiosensibilidad intrnseca, sino al hecho de que las clulas esterilizadas por la
radiacin van a morir en mitosis, mediante bloqueo de diferenciacin. Por eso, las clulas
proliferativas expresan las lesiones letales y mueren ms rpidamente que las clulas en
estado de reposo. Una reduccin rpida del tumor entonces, no necesariamente implica una
muerte celular de gran magnitud [17]. Igualmente, la tasa de reduccin del tumor va a
depender de otros factores, por ejemplo, en tumores que contienen grandes cantidades de
tejido conjuntivo, el volumen del tumor puede permanecer constante mientras que la
densidad de las clulas malignas ubicadas en el centro del mismo tumor disminuye.
Los patrones de proliferacin celular del tumor pueden cambiar despus del
tratamiento. Estos cambios pueden ser complejos y estn en relacin con diversos factores
[19].
En primer lugar: las radiaciones van a inducir una variedad de bloqueos y retrasos
que impiden que las clulas sobrevivientes y aquellas destinadas a morir, puedan progresar
a travs de los primeros ciclos celulares despus del tratamiento.
34
La radiobiologa es una ciencia que busca establecer las relaciones entre la dosis de
radiacin y la respuesta del organismo. Una relacin dosis-respuesta es simplemente una
relacin matemtica o grfica entre los niveles graduales de dosis de radiacin y la
magnitud de la respuesta observada. En medicina, las relaciones de dosis - respuesta tienen
dos aplicaciones importantes.
Primeramente, las relaciones determinadas experimentalmente son usadas para
disear los tratamientos rutinarios con fines de terapia para pacientes que sufren de
enfermedades malignas.
En segundo lugar, los estudios de radiobiologa han sido diseados para
proporcionar informacin sobre los efectos de irradiacin a bajas dosis. Estos estudios y las
relaciones de respuesta-dosis son la base para las actividades reguladoras y son de
particular significado en la radiologa.
35
FIG. 20. Curvas Dosis- Respuesta el umbral es un nivel de dosis por debajo del cual no se observa
una respuesta. Ref. [21]
Las otras relaciones de dosis respuesta son de tipo no lineal con umbral, en general,
a bajas dosis no se medir ninguna respuesta, pero conforme esta se incremente sobre un
umbral la respuesta crecer hasta un punto donde esta respuesta ser la misma para
cualquier dosis. Fig. 20 [12].
2 keV/ m
0.3 keV/m
3 MeV Rayos X
0.3 keV/ m
1 MeV electrn
0.25 keV/ m
14 MeV neutrons
12 keV/m
1 keV electrn
12.3 keV/m
10 keV electrn
2.3 keV /m
Los rayos X y los rayos gamma son considerados bajos LET (escasamente ionizante),
mientras que los neutrones energticos, protones y partculas cargadas pesadas son de alta
LET (altamente ionizantes). El valor de demarcacin entre la baja y la alta LET es de
aproximadamente 10 keV/m.
37
Al irradiar las clulas aparecen los efectos fsicos que suceden a nivel de los tomos
o molculas, que estn formando las clulas, en ese momento es donde se produce el
posible dao biolgico a las funciones celulares. Los efectos biolgicos de la radiacin son
el resultado principalmente de daos en el ADN que es el objetivo ms crtico dentro de la
clula [24]. Sin embargo, tambin hay otros sitios en la clula que, cuando se daa, puede
conducir a la muerte celular. Cuando la radiacin ionizante se absorbe directamente en el
material biolgico, el dao a la clula puede ocurrir de dos maneras: accin directa y
accin indirecta.
38
morfolgicas y/o funcionales, segn las lneas celulares de que se trate [26].
40
a.
b.
c.
d.
I.8. LEUCEMIA:
41
1.8.1: Leucemia crnica (LC): Las clulas leucmicas de origen crnico, realizan
algunas de las funciones de los leucocitos normales. Esto hace posible que no se presenten
sntomas al inicio de la enfermedad. Es por eso que diagnosticar o prevenir esta
enfermedad es difcil, usualmente se detecta por exmenes de rutinas realizados. [29]
La leucemia crnica empeora lentamente. A medida que aumenta el nmero de clulas
leucmicas en la sangre, las personas empiezan a presentar sntomas, como ganglios
linfticos inflamados o infecciones. Cuando los sntomas aparecen, por lo general son leves
al principio y empeoran poco a poco.
1.8.2: Leucemia aguda (LA) Las clulas de este tipo no realizan ninguna de las
funciones de los leucocitos normales. El cantidad de clulas aumenta rpidamente. Esto
hace empeorar en forma rpida, la enfermedad, que se caracterizan por la presencia de un
nmero elevado de clulas inmaduras, un cuadro clnico de comienzo agudo y de
evolucin fulminante. [30]. Podemos definir las Leucemias Agudas, como una deficiencia
hematolgica maligna que provoca la alteracin en la proliferacin y diferenciacin de un
grupo de clulas inmaduras, de estirpe mieloide o linfoide, hasta reemplazar
completamente la Mdula sea [31].
Los tipos de leucemia pueden agruparse tambin segn el tipo de leucocito
afectado. La leucemia puede comenzar en las clulas linfoides o en clulas mieloides Fig.
21.
42
43
crecimiento rpido. Hay ms de 5 000 casos nuevos de leucemia cada ao. La LLA es
el tipo de leucemia ms comn entre nios pequeos. Tambin afecta a los adultos.
Leucemia mieloide aguda (LMA). Afecta a clulas mieloides y es de crecimiento
rpido. Hay ms de 13 000 casos nuevos de leucemia cada ao. Afecta tanto a adultos
como a nios.
I.8.4: Leucemia en el Per:
HOMBRES
MUJERES
TOTAL
Estomago
1324
1279
2603
696
954
1650
Bronquios y pulmn
729
599
1328
1244
1244
Cuello uterino
Prstata
1100
1100
Mama
14
770
784
360
416
776
Colon
326
412
738
Leucemia
380
344
724
Pncreas
276
289
565
Linfoma no Hodgkin
291
230
521
Boca
114
72
186
Piel
59
57
116
5669
6666
12335
TOTAL DE MUERTES
Es importante saber, que la forma en que los pacientes se ven afectados y los
tratamientos para cada tipo de leucemia no son los mismos. Estos tipos de leucemia s
tienen una caracterstica en comn: comienzan en una clula de la mdula sea. La clula
sufre un cambio y se transforma en un tipo de clula leucmica.
44
actualidad, descrita por el grupo francs americano britnico (FAB). Esta clasificacin es
til en la seleccin del tratamiento y al mismo tiempo aporta informacin en cuanto a las
posibilidades de respuesta al tratamiento.
45
MORFOLOGIA
AGUDA
LINFOCITICA
Tipo comn
Pre B
Clulas T
Clulas B
L1 o L2
L1 o L2
L1
L2
NO LINFOCITICA
Mieloblstica aguda
Promieloblstica aguda
Mielomonocitica aguda
Monoblstica aguda
Erotrocitica aguda
Megacarioblastica aguda indiferenciada
Aguda
CRONICA
Linfoctica (Clulas B y T)
LPL
LCV
LCP
Linfosarcoma
Mieloctica
Crisis blstica
M1 o M2
M3
M4
M5
M6
M7
L1,L2,M1
Linfocitos pequeos
Pro linfocitos
Clulas vellosas
Clulas plasmticas
Linfocitos hendidos
Mielocitos,
metamielocitos
M1, M2, L1 o L2
Es un colorante vital, usado para colorear selectivamente los tejidos o las clulas
muertas de color azul. Es un colorante de tipo diazo, llamado as porque presenta un
componente que es una amina aromtica (tambin llamada componente diazo) y es
transformado en un componente diazonio que a su vez reacciona con un componente de
acoplamiento, que pueden ser phenol, naphtol o una amina, para formar el colorante.
Por la amplia variedad de componentes diazo y componentes de acoplamiento
posibles, el rango de variacin de los azo-colorantes es muy grande. El nmero de
combinaciones se incrementa desde que el tinte azo puede tener ms de un compuesto azo.
Las clulas vivas o tejidos con membranas celulares intactas no son de color.
Debido a que las clulas son muy selectivas en los compuestos que pasan a travs de la
membrana, en un azul de tripn de clulas viables no es absorbida, sin embargo, atraviesa
la membrana en una clula muerta. Por lo tanto, las clulas muertas se muestran como un
distintivo color azul bajo un microscopio. Puesto que las clulas vivas estn excluidos de
tincin, tambin se describe como un mtodo de exclusin del colorante.
47
Azul de tripn se deriva de toluidina, Fig. 22, es decir, cualquiera de varias bases
isomricas, C14H16N2, derivado de tolueno. El azul tripn es llamado as porque se puede
matar a los tripanosomas, los parsitos que causan la enfermedad del sueo. Un anlogo de
azul tripn, es la suramina que se utiliza farmacolgicamente contra la tripanosomiasis. El
azul tripn es tambin conocido como diamina azul y azul Niagara [36].
cido (3Z,3'Z)-3,3'-[(3,3'-dimetilbifenil-4,4'diil)di(1Z)hidracin-2-il-1-ilideno]bis(5-amino4-oxo-3,4-dihidronaftaleno-2,7-disulfnico
Frmula molecular
C34H28N6O14S4
Identificadores
Nmero CAS
72-57-11
PubChem
5904246
Propiedades fsicas
Masa molar
872.88 g/mol
II.
MATERIALES Y METODOS:
El estudio fue un trabajo prospectivo de corte transversal, se evalu el efecto de una
dosis nica de radiacin Gamma, en la viabilidad celular en distintos linajes de leucemias
agudas.
Se recolectaron 20 muestras consecutivas de aspirado de mdula sea de pacientes
con leucemias agudas.
De las cuales 10 correspondieron a leucemias linfoblsticas agudas (LLA) y 10 a
leucemias mieloides agudas (LMA), conforme se colectaron las muestras fueron sometidas
48
II.2. CRIOPRESERVACIN:
50
Dnde:
CV Post-i= clulas viables post irradiacin;
CT Post-i= clulas totales post irradiacin y
V Pre-i= Viabilidad pre irradiacin.
Los pacientes aceptaron donar voluntariamente sus muestras para el estudio mediante
la firma de un consentimiento informado. Este protocolo de investigacin (INEN N 05-43)
fue aprobado por el Comit de tica del Instituto Nacional de Enfermedades Neoplsicas.
III. RESULTADOS
51
52
53
54
IV.
DISCUSION
constituyendo
el grupo de
leucemias
mieloides, un grupo de
radiosensibilidad heterognea.
55
V.
REFERENCIAS.
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Repair.
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59