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Miguel ngel Inocente Camones , Gloria Eva Tomas Chota , Juana Huamn Malla ,
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Ana Mara Muoz Juregui , Rosa Isabel Garca Morn , Glorinda Quispe Fuentes ,
1
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Christian Jess Palomino Pacheco , Evelyng Del Rosario Taype Espinoza .
RESUMEN
Esta investigacin tuvo como finalidad evaluar la capacidad antioxidante y fotoprotectora de
una locin y un gel elaborados con extracto estabilizado de los frutos de camu camu
(Myrciaria dubia Kunth). Se realiz los controles de calidad fisicoqumica, microbiolgica y
estabilidad a condiciones normales y aceleradas, lo cual permiti elaborar parmetros
iniciales para los protectores solares con extracto de camu camu. Se determin la actividad
antioxidante por el mtodo de DPPH y ABTS, valores de 876,729 umol Trolox/g camu camu
para el gel y 1389,650 umol Trolox/g camu camu para la locin (mtodo DPPH) y valores de
15,330 mmol Trolox/g camu camu para el gel y 23.384 mmol Trolox/g camu camu para la
locin (mtodo ABTS). El FPS de las formulaciones se determin mediante un mtodo in vitro
desarrollado por Mansur. Se obtuvo valores de 10,897 0,298 para el gel y 13,401 0,319
para la locin.
Palabras clave: Myrciaria dubia Kunth., capacidad fotoprotectora, capacidad
antioxidante, locin, gel, extracto estabilizado.
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camu camu for lotion (ABTS method). The SPF of the formulations was determined by an in
vitro method developed by Mansur. 10.897 0.298 values were obtained for the gel and
13.401 0.319 for lotion.
Keywords: Myrciaria dubia Kunth, photoprotective capacity, antioxidant capacity,
lotion, gel, stabilized extract. 6322. Urb. Santa Luzmila. Comas.
INTRODUCCIN
Se ha desarrollado numerosos estudios sobre el efecto de los antioxidantes en la prevencin
del eritema cutneo, aunque el espectro de accin de los antioxidantes se superpone con el
espectro de accin de la radiacin UVA (320-400 nm), por lo que la eficacia fotoprotectora de
los mismos no slo vendr determinada por la proteccin frente al eritema fotoinducido, sino
tambin por la proteccin sobre los daos moleculares y sobre el ADN derivados del estrs
oxidativo generado por la radiacin UV. La sensibilidad del mundo cientfico al dao
generado por el estrs oxidativo en todos los mbitos de la salud y el hecho de que la radiacin
ultravioleta sea el agente ms eficaz en la produccin de dao cutneo por estrs oxidativo,
hace que actualmente se est en una bsqueda permanente de sustancias antioxidantes que
acten en este mbito tanto por va tpica como sistmica. 1
Segn la normativa de la Comunidad Andina. Decisin 516, artculo 21; se puede utilizar
sustancias nuevas de origen subregional que no se encuentren consideradas en los listados
internacionales reconocidos, siempre y cuando un pas miembro apruebe su comercializacin
e informe de este hecho a los dems pases miembros. De esta manera se impulsa un proceso
de investigacin y desarrollo basado en el uso sostenible de la inmensa diversidad biolgica de
los pases andinos 2.
Racan et al. 3 desarrollaron un protector solar con lquenes ricos en cido snico, con un FPS
3,4. As, tambin analizaron la capacidad fotoprotectora del Peumus boldus y de los
compuestos aromticos de lquenes chilenos que viven en las reas de alta incidencia de
radiacin ultravioleta y encontraron FPS mximo de 10 para las formulaciones producidas
con los lquenes y FPS igual a 3.4 para la formulacin con Peumus boldus. Tabriz et al 4,
analizaron el FPS de lociones fotoprotectoras con el extracto de flor de Rosa damascena que
presenta flavonoides en su composicin. Souza et al 5, estudiaron los extractos de las flores y
hojas de Achillea millefolium, planta que presenta flavonoides; sin embargo, no fueron
efectivos en la preparacin de un producto fotoprotector. Nascimento S. et al 6, estudiaron el
incremento del FPS en formulaciones fotoprotectoras utilizando extractos de prpolis verde y
rojo, demostrando que se produce un efecto sinrgico de estos extractos con el filtro sinttico
empleado en una formulacin, lo que se traduce en una mayor proteccin solar. Velasco et al. 7
evaluaron la eficacia fotoprotectora de rutina con filtros sintticos como poctilmetoxicinamato y bezofenona-3, llegando a la conclusin que existe sinergismo en la
elevacin del FPS cuando este flavonoide es asociado con filtros sintticos en concentraciones
mnimas. Casagrande et al. 8 estudiaron la quercetina, flavonoide que posee alta actividad
antioxidante entre los flavonoides; demostraron que formulaciones tpicas conteniendo
quercetina inhiben satisfactoriamente el dao cutneo inducido por la radiacin UVB en
ratones.
Otros autores como Aquino et al. 9 evaluaron la actividad antioxidante in vitro y la actividad
fotoprotectora in vivo de los extractos etanlicos de Culcitium reflexun que demostraron
marcada efectividad como antioxidantes y fotoprotectores. Sustancias como los flavonoides
del tipo kaempferol y derivados de la quercetina e hidroxicinamatos como cido cafeico,
cido ferlico, cido p-cumrico y cido cinmico fueron relacionados en el estudio realizado
por Bonina et al.10 al demostrar la actividad antioxidante y fotoprotectora de extractos
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COMPOSICIN (MUESTRA)
COMPOSICIN (PLACEBO)
COMPOSICIN (MUESTRA)
COMPOSICIN (PLACEBO)
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La concentracin requerida para el 50% de inhibicin del radical libre DPPH (IC) fue
calculada mediante la ecuacin de la grfica de concentracin del producto y trolox vs %
inhibicin. El blanco para calibrar el equipo fue metanol: agua (2:1). El blanco es DPPH en
metanol 0,1 mM. Como control positivo se prepar una curva patrn de trolox a las mismas
condiciones de anlisis de la locin y gel, para comparar las IC. Los resultados se expresan en
umol de Trolox/g de camu camu. Los resultados fueron procesados utilizando programas
SPSS 21 y Microsoft Excel 2013. Todos los experimentos se realizaron por triplicado y
expresados como valores promedio +/- DS.
Evaluacin de la actividad antioxidante mediante el mtodo ABTS
Para la segunda tcnica el radical ABTS+ 18 slo es estable mximo 2 das; por tal razn se ha
preparado 2 litros solucin stock del cido 2,2'-Azinobis-(3-etibenzotiazoln-6-sulfnico)
(3,8 mg/mL) con persulfato de sodio (37,5 mg/mL) a temperatura ambiente (25C). La mezcla
se coloc en recipiente color mbar y en oscuridad durante 16 horas a temperatura ambiente
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hasta lograr la estabilidad del reactivo. Posteriormente se tom 0,5 mL de la solucin madre de
ABTS y se enras a 50 mL con etanol absoluto, y se lee a 754 nm, se ajust hasta obtener una
absorbancia de 0,700,02. Despus de que la solucin de ABTS alcanz la absorbancia
requerida, se tom 3,9 mL de la solucin y se mezcl con 0,1 mL de la locin y gel. Se
homogeniz por 1 minuto y se midi la absorbancia a 7 minutos de reaccin, a 754 nm.
Se emple las siguientes ecuaciones para obtener el % de inhibicin.
% inhibicin de ABTS = [1- (A2 A3)/A1] 100
Donde:
La concentracin requerida para el 50% de inhibicin del radical libre ABTS (IC) fue
calculada mediante la ecuacin de la grfica de concentracin del extracto y trolox vs %
inhibicin. El blanco para calibrar el equipo fue metanol: agua (2:1). El blanco es ABTS en
metanol 0,1 mM. Como control positivo se prepar una curva patrn de trolox a las mismas
condiciones de anlisis de la locin y gel, para comparar las IC. Los resultados se expresan en
mmol de Trolox/g de producto. Los resultados fueron procesados utilizando programas SPSS
21 y Microsoft Excel 2013. Todos los experimentos se realizaron por triplicado y los
resultados expresados como valores promedio +/- DS.
Determinacin in vitro del Factor de Proteccin Solar (FPS) de la locin y gel.
El Factor de Proteccin Solar (FPS) de la locin y gel elaboradas se determin siguiendo la
metodologa in vitro descrita por Mansur et al. 19 ste anlisis consiste en un mtodo
espectrofotomtrico en el cual la formulacin se diluye en etanol absoluto hasta una
concentracin de 0,2 mg/mL, condicin establecida por el autor para crear una correlacin con
el mtodo in vivo. A travs de la frmula matemtica desarrollada segn el mtodo, se
relacionan los valores de absorbancia obtenidos de las muestras con el FPS de la formulacin.
El presente estudio evala el FPS en el rango de 290 a 320 nm (rango UVB), mas no en el rango
UVA ni UVC.
Para obtener las muestras diluidas de las formulaciones (0,2 mg/mL), se pes 1,0 g de las
formulaciones y se transfirieron a un matraz aforado de 100 mL, se agrega 50 mL de etanol, se
agita por 5 minutos, y luego se diluye a volumen con etanol; se homogeniza y luego se filtra
descartando los primeros 10 mililitros. Una alcuota de 5,0 mL del filtrado se transfiere a un
matraz aforado de 50 mL y se diluye a volumen con etanol. Luego una alcuota de 5,0 mL de la
ltima dilucin se transfiere a un matraz aforado de 25 mL y se lleva a volumen con etanol. Las
absorbancias de las soluciones fueron determinadas en el rango de 290 a 320 nm, con
intervalos de 5 nm utilizando una cubeta de cuarzo de 1cm. Los anlisis fueron realizados por
triplicado y el FPS fue calculado de acuerdo con la ecuacin desarrollada por Mansur et al. 19:
Donde:
FPS=
FC= 10
EE ()=
I () =
Abs ()=
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EE () x I ( )
0,0150
295
0,0817
300
0,2874
305
310
0,3278
0,1864
315
320
0,0839
0,0180
TOTAL
1,000
RESULTADOS Y DISCUSIN
De la evaluacin de la calidad de la locin y gel con filtro y extracto de camu camu
Del anlisis fisicoqumico y sensorial de la locin y gel
Los resultados del pH de la locin y gel (tabla 4), se encuentran en un rango de 3,0 a 5,0, lo cual
indica que se encuentran en condiciones favorables para la piel humana.
Los resultados de la viscosidad demuestran la condicin fsica de los productos, y de acuerdo a
ello se enmarca a estabilidad relacionado con la consistencia.
Tabla 4. Resultados del anlisis fisicoqumico de los protectores solares
Anlisis fisicoqumico
pH (25C)
Viscosidad cps (25C)
Gel
Locin
3,38
5,04
457,50
5,00
Anlisis microbiolgico
Numeracin de aerobios mesfilos ufc/g
Numeracin de mohos ufc/g
Numeracin de levaduras, ufc/g
Presencia de Staphylococcus aureus/g
Presencia de Pseudomonas aeruginosa/g
Presencia de Escherichia coli/g
Gel
< 10
< 10
< 10
Ausente
Ausente
Ausente
Locin
37 x 10
< 10
48 x 10
Ausente
Ausente
Ausente
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Levaduras, ufc/g
Tiempo cero
Tiempo de evaluacin
3 mes
6 mes
Anaranjado ligeramente
turbio
Sui generis
Homogneo
Lquida
Anaranjado ligeramente
turbio
Sui generis
Heterogneo
Lquida
Anaranjado
ligeramente turbio
Sui generis
Heterogneo
Lquida
5,04
5,00
4,24
5,00
4,78
5,00
37 X 10
< 10
48 X 10
< 10
< 10
< 10
< 10
< 10
< 10
Levaduras, ufc/g
Tiempo cero
Tiempo de evaluacin
3 mes
6 mes
Anaranjado ligeramente
turbio
Anaranjado oscuro
ligeramente turbio
Anaranjado oscuro
ligeramente turbio
Sui generis
Heterogneo
Lquida
Sui generis
Heterogneo
Lquida
Sui generis
Heterogneo
Lquida
5,68
5,00
5,20
5,00
4,83
5,00
< 10
< 10
< 10
< 10
< 10
< 10
< 10
< 10
< 10
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Levaduras, ufc/g
Tiempo cero
Tiempo de evaluacin
3 mes
6 mes
Amarillo turbio
Sui generis
Homogneo
Espesa
Amarillo turbio
Sui generis
Heterogneo
Ligeramente espesa
Amarillo turbio
Sui generis
Heterogneo
Ligeramente espesa
3,38
457,5
3,22
137,5
2,89
77,5
< 10
< 10
< 10
< 10
< 10
< 10
< 10
< 10
< 10
Parmetro
Organolpticos
Color
Olor
Aspecto
Consistencia
Fisicoqumicos
pH (25C)
Viscosidad 25C, cps
Microbiolgicos
Aerobios mesfilos, ufc/g
Hongos filamentosos, ufc/g
Levaduras, ufc/g
Tiempo cero
Tiempo de evaluacin
3 mes
Amarillo turbio
Sui generis
Heterogneo
Espesa
Sui generis
Heterogneo
Ligeramente espesa
Amarillo oscuro
turbio
Sui generis
Heterogneo
Semilquido
3,38
140
3,18
57,5
2,87
20,0
< 10
< 10
< 10
< 10
< 10
< 10
< 10
< 10
< 10
6 mes
De la actividad antioxidante
De acuerdo al mtodo DPPH, se obtuvieron valores expresados en umol Trolox/g camu camu
de 876,729 para el gel con filtro y extracto y 1328,937 para el gel con extracto. En el caso de la
locin se obtuvo 1389,650 para la locin con filtro y extracto, y 1657,625 para la locin con
extracto. (figura 1).
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De acuerdo al mtodo ABTS, se obtuvo valores expresados en mmol Trolox/g camu camu de
15,330 para el gel con filtro y extracto, y 16,667 para el gel con extracto. En el caso de la locin
se obtuvo 23,384 para la locin con filtro y extracto y 30,516 para la locin con extracto.
(figura 2).
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El fruto de camu camu (Myrciaria dubia HBK) brinda una excelente alternativa para ser
utilizado como sinergista de los fotoprotectores en formulaciones cosmticas por poseer en su
composicin compuestos con actividad biolgica, los que resaltan sustancias antioxidantes,
como compuestos fenlicos y vitamina C 12,13.
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BIBLIOGRAFA
De Glvez MV. Antioxidantes en fotoproteccin, realmente funcionan? Actas Dermosifiliogrficas. 2010; 101(3): 197-200.
Comisin de la Comunidad Andina. DECISION 516. Armonizacin de Legislaciones en
materia de Productos Cosmticos. Gaceta Oficial del Acuerdo de Cartagena No. 771 del
14 de marzo de 2002.
Racan F, Rosan S, Boehm K, Fernandez E, Hidalgo M, Quihot W. et. al. Protection against
UVB irradiation by natural filters extracted from lichens. J. Photochem. Photobiol. B.
2002; 68 (2-3): 133-9.
4.
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9.
10.
11.
12.
13.
14.
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