REA DE SUSTENTABILIDAD PARA EL DESARROLLO

PROGRAMA ACADMICO DE QUMICA

ESPECIALIDAD TECNOLOGIA AMBIENTAL
GRUPO
QU-304
MATERIA
MICROBIOLOGIA AMBIENTAL
TITULO
AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE MICROORGANISMOS
DE LA MATRIZ AMBIENTAL: SUELO
ASESORA
Dra. ROSA RICO MATA
DATOS DE IDENTIFICACIN DE LOS ANALISTAS
Fecha de inicio del anlisis: 30 de junio del 2015.
Fecha de trmino: 09 de julio del 2015.
Nombre
Ilse Vernica vila Araujo

Cargo
Responsable

Mara Guadalupe Gmez Navarro

Administrador

Janet Valeria Guerra Navarro

Laboratorista 1

Reyna Mara Guadalupe Rendn Delgado

Laboratorista 2

GENERACIN: 2014-2016

MICROBIOLOGA AMBIENTAL UTL

ASESORA:

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DATOS DEL SITIO EN ESTUDIO

1.- Breve descripcin del estatus ambiental del sitio de estudio:
Rodeado de rboles, haba mucha humedad, basura, muy poca composta, pero se perciba el olor a materia
orgnica en descomposicin.
Nombre

Ubicacin
/coordenadas GPS

CUPA - Universidad
Tecnolgica de Len

Imagen de mapa satelital

21 3'52.25"N
10134'56.71"O

2. Evidencia fotogrfica del sitio

SITIO DE
MUESTREO

Fecha: 30 de junio del 2015.

Hora: 10:44h

Fecha: 30 de junio del 2015.

Hora: 10:44h

DATOS DE LAS MUESTRAS A ANALIZAR

1. Identificacin
Matriz ambiental: Suelo

Hora de toma de muestra: 10:48h

Punto de Muestreo (ubicacin /coordenadas GPS):

21 3'52.25"N 10134'56.71"O
Nombre del/ los analistas que tomaron la muestra:
Mara Guadalupe Gmez Navarro

Hora de siembra: 13:36h

Tiempo de exposicin (aplica solo para muestra de aire)

Nombre del/ los analistas que sembr la muestra:
Reyna Mara Guadalupe Rendn Delgado

2.Parmetros Fisicoqumicos
Color: Caf tabaco

Temperatura (oC) ambiental:

Olor: Humedad y materia en descomposicin

Describir condiciones climatolgicas: Nublado

20C

pH: 6.8

3. Evidencia fotogrfica del sitio de toma de muestra

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ASESORA:

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AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS
1. Justificacin del proceso para la identificacin bacteriana
Es necesario identificar la morfologa de la bacteria para conocer sus caractersticas fsicas, lo cual, permite
la descripcin presuntiva de su taxonoma. Por otro lado el metabolismo de las bacterias es importante porque
a travs de ella se especifican las condiciones ptimas en las que se desarrolla, permitindonos conocer
bacterias benficas para el ambiente que ayudan a remover los contaminantes existentes en las matrices de
agua, suelo y aire. Todo esto se logra siguiendo una serie de pruebas bioqumicas en las que se detectan
caractersticas del metabolismo como la presencia de enzimas especficas para sustratos especficos,
generacin de compuestos finales a travs de reacciones qumicas que se llevan a cabo en las reacciones
catablicas, tambin se observa la produccin de diferentes tipos de gases como el cido sulfhdrico (H2S),
dixido de carbono (CO2) y oxgeno , as como la generacin de cambios de color en los medios de cultivo los
cuales indican acidez o alcalinidad debidas a los compuestos que se generan de la degradacin de sustratos
orgnicos por las bacteria. Es as como se logra identificar el tipo de familia a la que pertenece.
2. Dos medios de siembra (Nombre y Composicin)
1. Medio 1: Agar Mac Conkey
Frmula (en gramos por litro)
Peptona
17.0
Pluripeptona
3.0
Lactosa
10.0
Mezcla de sales biliares
1.5
Cloruro de sodio
5.0
Agar
13.5
Rojo neutro
0.03
Cristal violeta
0.001
pH final: 7.1 0.2

2. Medio 2: Agar EMB (Eosina y Azul de Metileno)

Frmula (en gramos por litro)
Peptona
10.0
Lactosa
5.0
Sacarosa
5.0
Fosfato dipotsico
2.0
Agar
13.5
Eosina
0.4
Azul de metileno
0.065
pH final: 7.2 0.2

Morfologa Colonial (Medio 1)

Descripcin

Puntiformes, convexas, acuminadas

Incoloras, rosas con punto oscuro.
Se presentan solas o en cadena.

Morfologa Colonial (Medio 2)

Descripcin

Puntiformes, convexas
Incoloras, verdes, negras.
Se pueden presentar solas o en cadenas.

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ASESORA:

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3. Dos Medios selectivos de resiembra (Nombre y Composicin)

1.

Medio 1: Agar XLD

Frmula (en gramos por litro)
Lactosa Monohidrato
Sacarosa
Tiosulfato sdico
Cloruro Sdico
L-Lisina
Xilosa
Extracto de Levadura
Desoxicolato sdico
Citrato Frrico de Amonio
Rojo Fenol
Agar Bacteriolgico
pH final: 7.0 0.2

2.

7.5
7.5
6.8
5
5
3.5
3
2.5
0.8
0.08
13.5

Medio 2: Salmonella Shigella Agar

Frmula (en gramos por litro)
Pluripeptona
5.0
Extracto de carne
5.0
Lactosa
10.0
Mezcla de sales biliares
8.5
Citrato de sodio
8.5
Tiosulfato de sodio
8.5
Citrato frrico
1.0
Agar
13.5
Verde brillante
0.00033
Rojo neutro
0.025
pH final: 7.4 0.2

Morfologa Colonial (Medio 1)

Descripcin

Puntiformes, convexas.
Incoloras, negras.
Se presentan aisladas o en cadena de forma
circular.

Morfologa Colonial (Medio 2)

Descripcin

Puntiformes, convexas, circulares.

Incoloras
Con el centro negro
Se presentan solas o en cadena

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ASESORA:

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4. Procedimiento de Aislamiento
(describir detalladamente la cantidad de materiales y los pasos a seguir)
Materiales/Reactivos/Medios de cultivo/ Equipo a utilizar
Lista de materiales, reactivos y equipo
Materiales
1 Chalora de aluminio
1 Esptula pequea
1 Matraz Erlenmeyer de 250 mL
1 Probeta de 100 mL
1 Gradilla
2 Cajas Petri
1 Mechero Fisher
1 Aza de nicromo
2 Hisopos

Reactivos
Agar Mac Conkey
Agua destilada

Equipo
Balanza analtica
Autoclave
Incubadora
Refrigerador
Campana de flujo laminar

Preparacin del medio de cultivo:

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.

Pesar en la charola de aluminio 3 g de Agar Mac Conkey.

Al matraz Erlenmeyer, adicionar 60 mL de agua destilada y el agar pesado anteriormente
Agitar constantemente hasta disolver
Esterilizar a 120 C por 15 minutos.
Distribuir en la campana de flujo laminar 30 mL de medio a cada caja Petri.
Dejar solidificar el agar.
Reservar en el refrigerador.

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Pasos para el aislamiento del microorganismos (siembra, seleccin de la colonia y resiembra):

Siembra
1. Tomar en una charola de aluminio con ayuda de una esptula, una muestra aproximada de 5 g de suelo
de CUPA para el anlisis.
2. En el laboratorio, sacar una caja Petri del refrigerador y colocarla en la campana de esterilizacin.
3. Encender la campana.
4. Dentro de la campana, embarrar un hisopo con la muestra.
5. Abrir la caja Petri para hacer el estriado.
6. Cerrar la caja Petri y meterla a la incubadora.
7. Incubar por 24h a 35-37C
Seleccin de la Colonia
1. Segn la morfologa de la colonia que se espera encontrar, seleccionar de la placa sembrada una
colonia aislada que cumpla con las caractersticas de dicha morfologa.
2. Posteriormente encerrar las colonias deseadas por la parte de debajo de la caja Petri con un marcador
indeleble para una mayor identificacin a la hora de tomarla.

Resiembra
1. Tomar del refrigerador una placa con medio de cultivo (Agar Mac Conkey) solidificado para hacer la
resiembra.
2. Acercar tambin la caja Petri con la siembra.
3. Encender el mechero Fisher.
4. Flamear el aza de nicromo hasta que est de color naranja.
5. Abrir la caja Petri con la siembra por atrs del mechero Fisher.
6. Tomar con el aza de nicromo la colonia deseada.
7. Abrir la caja Petri con el cultivo nuevo por atrs del mechero Fisher.
8. Hacer el estriado correspondiente de forma horizontal y posteriormente vertical.
9. Flamear el aza de nicromo.
10. Cerrar la caja Petri con la resiembra.
11. Incubar 24h a 35-37C.
12. Apagar el mechero Fisher.
La resiembra se har como se muestra en la imagen 1.

Imagen 1 Modo de resiembra

Nota: Es importante el uso de cubre-bocas y guantes durante todo el proceso.

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5. Esquema del Perfil bioqumico (metablico )

para la identificacin del microorganismo seleccionado
Bacteria
desconocida
Morfologa
Bacilos

Cocos
Gram
Negativa

Positiva
Cpsula
Positiva

Negativa

Motilidad
Positiva

Negativa
F. de Lactosa

Positiva

Negativa
Sacarosa

Positiva

Negativa
CO2

Positiva

Negativa
Degradacin de Citrato

Positiva

Negativa
H2S

Positiva

Negativa
Indol

Positiva

Negativa

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5. Esquema del Perfil bioqumico (metablico )

para la identificacin del microorganismo seleccionado
Continuacin

cido mixto
Negativa

Positiva
Glucosa
Positiva

Negativa

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ASESORA:

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RESULTADOS DEL AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN

1. EVIDENCIA FOTOGRAFICA DEL CULTIVO DE LA MUESTRA (SIEMBRA)

Medio de cultivo: Agar Mac Conkey

Medio de cultivo: Agar Mac Conkey
2. MORFOLOGA COLONIAL OBSERVADA
Tipo de colonia 1: Descripcin
Presenta una forma irregular con bordes ondulados, su elevacin es tipo
convexa, tiene la superficie lisa y cremosa con color rosado. Se presenta
en forma de cadena.

Tipo de colonia 2: Descripcin

Presenta una forma circular con borde entero, tiene una elevacin
convexa, su superficie es lisa y cremosa con un color rosado. Se
encuentra aislada.

Tipo de colonia 3: Descripcin

Presenta una forma irregular con bordes lobulados, su elevacin es
convexa y la superficie es spera, cremosa con color rosado.

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ASESORA:

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3. EVIDENCIA FOTOGRAFICA DEL CULTIVO PURO ( RESIEMBRA)

Medio de cultivo: Agar Mac Conkey
Medio de cultivo: Agar Mac Conkey

4. MORFOLOGIA COLONIAL OBSERVADA

Descripcin

Hay muchas colonias agrupadas, y

pocas aisladas, se puede observar que
todas tienen un color rosado prpura,
presentan textura mucoide, con borde
irregular y convexa

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ASESORA:

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5. EVIDENCIA FOTOGRFICA DEL RESULTADO DEL PERFIL BIOQUMICO

Nombre de la
prueba

Medio de cultivo
utilizado

Resultado obtenido
(positivo/negativo)

1. Tincin de
Gram deteccin
de pared celular

N/A

Negativa

Evidencia fotogrfica

Fundamento de la prueba

El fundamento de la tcnica se basa en las diferencias entre las paredes celulares de las bacterias Gram positivas
(color morado) y Gram negativas (color rosado). La pared celular de las bacterias Gram positivas posee una gruesa
capa de peptidoglucano, adems de dos clases de cidos teicoicos: Anclado en la cara interna de la pared celular y
unido a la membrana plasmtica se encuentra el cido lipoteicoico, y en la superficie, el cido teicoico est anclado
solamente en el peptidoglucano (tambin conocido como murena). Por el contrario, la capa de peptidoglucano de las
Gram negativas es delgada, y se encuentra unida a una segunda membrana plasmtica exterior (descomposicin
distinta a la interna) por medio de lipoprotenas. Tiene una capa delgada de peptidoglicano unida a una membrana
exterior por lipoprotenas. La membrana exterior est hecha de protena, fosfolpido y lipopolisacrido.
Por lo tanto, ambos tipos de bacterias se tien de distintos colores debido a estas diferencias constitutivas de su
pared. La clave es el peptidoglicano, ya que es el material que confiere su rigidez a la pared celular bacteriana, y las
Gram positivas lo poseen en mucha mayor proporcin que las Gram negativas.

2.-Tincin de
cpsula

N/A

Positiva

Fundamento de la prueba
Tambin conocida como: tinciones negativas/tinta china
No es una tincin como tal. Se llama as porque lo que realmente se tie es el fondo del portaobjetos en el que
estn los microorganismos apareciendo estos despus sin teir.
Para ver la cpsula a travs del microscopio, se emplea tinta china (suspensin coloidal de carbono o nigrosina)
ya que las partculas de carbono no penetran la clula bacteriana sino que tien su entorno y la bacteria puede ser
observada como un cuerpo refrctil sin teir.

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3.-Prueba de
Motilidad

Agar SIM

Negativo

Fundamento de la prueba
Lo que se detecta son la presencia de cilios y flagelos y por eso se mueve el medio SIM slido lo permite. El que el
medio se enturbie es solo porque se difunde la bacteria

4.- Desarrollo
lactosa

de

Agar inclinado
Triple Azcar y
Hierro T.S.I

Positivo

Fundamento de la prueba

La fermentacin de la lactosa requiere dos enzimas, permeasa y -galactosidasa, mientras la permeasa facilita la
penetracin de la molcula de lactosa dentro de la clula bacteriana, la -galactosidasa hidroliza la lactosa para
formar galactosa y glucosa. Las bacterias no fermentadoras de lactosa carecen de ambas enzimas, sin embargo hay
bacterias que tienen -galactosidasa pero no permeasa.
Si el organismo fermenta lactosa, la estra permanecer cida (amarilla). Si no fermenta lactosa, la estra se vuelve
alcalina (roja).

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5.- Fermentacin
de Sacarosa

Agar inclinado
Triple Azcar y
Hierro T.S.I

Positivo

Fundamento de la prueba

La sacarosa aadida permite la exclusin de determinados organismos coliformes y algunas especies como
Proteus, que pueden atacar la sacarosa , pero no la lactosa, en un periodo de incubacin de 24 48 h.
Tambin, esta puede suprimir los mecanismos enzimticos responsables de la produccin del sulfuro de
hidrgeno.
Si la bacteria problema fermenta sacarosa, acidifica el medio en su superficie volvindolo de color amarillo,
mientras que si no lo es, la superficie del medio continuar de color rojo

6. Fermentacin
de Glucosa

Agar inclinado
Triple Azcar y
Hierro T.S.I

Positivo

Fundamento de la prueba

Primero los microorganismos empiezan a fermentar la glucosa, produciendo cidos y virando totalmente el
medio a color amarillo. Como solamente utilizan la glucosa, no pueden usar la sacarosa ni la lactosa, cuando la
glucosa que se halla en baja concentracin se consume (antes de las 24hs) los microorganismos comienzan a
utilizar la peptonas con produccin de amonaco que alcaliniza el medio dando un color rojo, pero solamente
en el pico, quedando el fondo cido

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7.-Produccin de
CO2

Agar inclinado
Triple Azcar y
Hierro T.S.I

Positiva

Fundamento de la prueba

Es una prueba usada para la fermentacin de la glucosa, lactosa y sacarosa y la produccin de H2S por parte
de la bacteria sumndole tambin que puede producir gas (CO2).
La presencia de burbujas que rompen el medio al fermentar los hidratos de carbono presentes tienden a
expulsarlo lo cual indica presencia de gas como producto final de la fermentacin.

8. Degradacin
de Citrato por la
enzima citrato
permeasa

Agar inclinado
Citrato de
Simmons

Positiva

Fundamento de la prueba
En el medio de cultivo, el fosfato mono-amnico es la nica fuente de nitrgeno y el citrato de sodio es la
nica fuente de carbono. Ambos componentes son necesarios para el desarrollo bacteriano. Las sales de
fosfato forman un sistema buffer, el magnesio es cofactor enzimtico. El cloruro de sodio mantiene el balance
osmtico, el azul de bromotimol es el indicador de pH, que vira al color azul en medio alcalino y el agar es el
agente solidificante.
El medio de cultivo es diferencial en base a que los microorganismos capaces de utilizar citrato como
nica fuente de carbono usan sales de amonio como nica fuente de nitrgeno, con la consiguiente
produccin de alcalinidad.
El metabolismo del citrato se realiza, en aquellas bacterias poseedoras de citrato permeasa, a travs
del ciclo del cido tricarboxlico. El desdoblamiento del citrato genera progresivamente, oxalacetato y
piruvato. Este ltimo, en presencia de un medio alcalino, da origen a cidos orgnicos que al ser utilizados
como fuente de carbono, producen carbonatos y bicarbonatos alcalinos. El medio entonces vira al azul y esto
es indicativo de la produccin de citrato permeasa.
Citrato
Piruvato
CO2 + Na + H2O
Na2CO3
Azul de Bromotinol

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9. Produccin
de H2S

Agar SIM

Negativa

Fundamento de la prueba
.
La actividad de las bacterias sobre aminocidos que contienen azufre, frecuentemente producen la liberacin
de sulfhdrico, lo cual se demuestra empleando sales de metales pesados como el hierro. El sulfhdrico
reacciona con tales metales dando una coloracin oscura al medio de cultivo.
Para detectar la capacidad de producir el H2S, el tiosulfato de sodio que contiene el medio, es el sustrato
necesario para la produccin de cido sulfhdrico, el sulfato de hierro y amonio, es la fuente de iones Fe3+, los
cuales se combinan con el cido sulfhdrico y producen sulfuro de hierro
El tiosulfato de sodio que se reduce a sulfuro de hidrgeno reacciona luego con una sal de hierro
proporcionando el tpico sulfuro de hierro de color negro. Dicha reaccin es llevada a cabo por enzimas, como:
cistena, desulfhidrasa y latiosulfato reductasa que son las encargadas de liberar al azufre.

10. Produccin
de Indol

Agar SIM

Negativo

Fundamento de la prueba
El Indol, es uno de los productos de la degradacin metablica del aminocido triptfano. Las bacterias que
producen la enzima triptofanasa son capaces de hidrolizar y desaminar el triptfano con produccin de Indol,
cido pirvico y amoniaco. La prueba del indol est basada en la formacin de un complejo rojo cuando el Indol
reacciona con el grupo aldehdo p-dimetilaminobenzaldehdo. Este es el principio activo del reactivo de
Kovacs.
En la prueba, segundos despus de aadir el reactivo de Kovacs, el desarrollo de un color rojo-fucsia en la
interface del reactivo y de los medios, indican la presencia de indol y por lo tanto se considera una prueba
positiva.
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11. Fermentacin
de cido mixto
(Rojo de
Metilo)

Caldo MR-VP

Negativo

Fundamento de la prueba
En el medio de cultivo, la pluripeptona aporta los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano y la
glucosa, lo que es el hidrato de carbono fermentable.
La glucosa puede ser metabolizada por los microorganismos, a travs de distintas vas metablicas. Segn la va
utilizada, se originarn productos finales cidos (cido lctico, cido actico, cido frmico), o productos finales
neutros (acetil-metil-carbinol).
Esta diferencia en el metabolismo bacteriano, podra ser reconocida por la adicin de un indicador como rojo
de metilo, para revelar la presencia de productos cidos, y la produccin de alfa naftol e hidrxido de potasio
para evidenciar la presencia de productos finales neutros.
Glucosa

Fermentacin Acida Mixta

12. Fermentacin
de Glucosa

Caldo MR-VP

cidos lctico, Actico y Succinico + CO2, H2 y etanol

Positivo

Fundamento de la prueba
Voges y Proskauer describieron una coloracin rojiza que apareca despus de adicionar hidrxido de
potasio a los cultivos de ciertos microorganismos en medio con glucosa. Esta coloracin se debe a la oxidacin
del acetil-metil-carbinol a diacetilo, el cual reacciona con la peptona del medio para dar un color rojo.
Para determinar la capacidad de algunas bacterias para generar un producto final neutro (acetoina y
2,3 Butanodiol) a partir de la fermentacin de la glucosa, los productos neutros formados en la presencia de
oxigeno atmosfrico, alcalisis (Hidrxido de Potasio al 40%) y peptonas, se oxidan en diacetilo, reactante para el
color producido en la reaccin. El Alfa naftol acta como catalizador para revelar un complejo color rojo.

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IDENTIFICACIN DEL MICROORGANISMO AMBIENTAL

EN LA MATRIZ DE ESTUDIO: Suelo
1.- Nombre cientfico del o los microorganismo identificado de acuerdo a los resultados
del perfil bioqumico planteado ( gnero y especie)
Gnero : Klebsiella
Especie: K. pneumoniae

2. Taxonoma del o los microorganismo identificados

Dominio : Bacteria
Filo : Proteo bacteria
Clase : Gammaproteobacteria
Orden: Enterobacteriales
Familia : Enterobacteriaceae
Gnero : Klebsiella
Especie: K. pneumoniae

3. Caractersticas generales
Son bacterias Gram negativas, la asimilacin y la fermentacin de la lactosa se pueden observar en el agar Mac
Conkey donde las colonias son de color rosado y en el medio Kliger o TSI donde son cido/cido, es decir
fermentador de la lactosa ms la produccin de gas; y en la fermentacin acetnica o prueba de Voges
Proskauer son positivos. Por ltimo, sus condiciones ptimas de cultivo son en agar nutritivo a 37 C, pH de 7.0,
presin osmtica de 1 atm
4. Ciclo(s) biogeoqumicos en el (los) que intervienen
Nitrgeno
5. La funcin que juegan en la transformacin de la materia orgnica a travs
de los ciclos biogeoqumicos

La bacteria K. pneumoniae a pesar de no contar con un metabolismo, se encuentra de forma natural en el

suelo, participa en el ciclo del nitrgeno en la parte de la fijacin del N2 que hay en la capa de materia orgnica
hacia las races de las plantas, por lo tanto, se considera como una bacteria diazotrfica de vida libre, pues al
menos 30% de las cepas pueden fijar el N2 en condiciones anaerbicas.
El gnero al que pertenece esta bacteria (K. pneumoniae), es considerado importante por tener una
amplia capacidad de degradacin de compuestos recalcitrantes que se encuentren en el suelo, tales como:
bromoxinil, benzonitrilo, butironitrilo y dibenzofurano, cabe mencionar, que dichos compuestos son aquellos
que presentan estructuras qumicas muy estables y son resistentes a los ataques biolgicos o
poseen elementos estructurales que raramente se encuentran en la naturaleza

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6. Conclusin parcial sobre las interacciones bacterianas en la matriz estudiada y la importancia de la

microbiologa en el rea ambiental
El estudio de la microbiologa aparte de ser una amplia gama de estudio es de suma importancia por estar
presente en las matrices del rea ambiental (agua, suelo y aire), y de las cuales podemos obtener y comprender
el comportamiento e interaccin de los microorganismos existentes, as como los daos y beneficios que
pueden causar al ambiente, y a partir de ello se pueden elegir diferentes tipos de bacterias de acuerdo a su
metabolismo para realizar remediaciones, degradaciones, fermentaciones entre otras con el fin de mejorar la
calidad ambiental.
Durante esta prctica se adquirieron conocimientos como: toma de la muestra, mtodos de siembra, resiembra
y tcnicas de estriado, preparacin de agares y montaje de las pruebas bioqumicas las cuales sirvieron para
observar su comportamiento y parte de su metabolismo a partir de una serie de reacciones qumicas como lo
son: produccin de gas, fermentacin de lactosa, degradacin de citrato, produccin de cido sulfhdrico (H2S)
entre otras, tomando en cuenta los resultados obtenidos en las pruebas y con ayuda de un esquema
bioqumico previamente hecho, se logra obtener su identificacin.
En el presente trabajo, se plantearon una serie de pruebas bioqumicas teniendo como objetivo encontrar a
travs de ellas la bacteria Proteus vulgaris partiendo de una muestra de suelo tomada del rea de compostaje
de CUPA ubicado dentro de las instalaciones de la UTL.
Dicha muestra, el mismo da que se tom a 3cm de profundidad partiendo de la superficie del suelo de CUPA,
fue sembrada en el laboratorio con un hisopo en la campana de flujo laminar, pero lamentablemente a la hora
de hacer el aislamiento de la colonia que contaba con las caractersticas fsicas aparentes de la bacteria
deseada, se tom otra por error.
Los resultados que se observaron en los tubos que contenan los agares y el caldo para realizar las dichas
pruebas, fueron distintos a los que se esperaban, ya que en algunas pruebas nos dio el resultado contrario,
estas fueron: la degradacin de citrato que sali positiva al mostrar una coloracin azul en el pico cuando se
esperaba diera negativa, la produccin de H2S en la que se esperaba un cabio de coloracin a negro y qued en
el mismo color (amarillo), la produccin de Indol la cual se deba generar un aro color rosado en la parte
superficial del tubo al agregarle unas gotas de reactivo Kovacs y sin embargo no lo obtuvo, la fermentacin de
cido mixto en el caldo MR-VP, que al agregarle el indicador rojo de metilo deba cambiarse a color rojo y no
cambi y por ltimo la prueba de Voges Proskauer (glucosa) la cual no deba tener un cambio de coloracin en
la parte media superior del caldo y cuando se le agregaron los reactivos correspondientes si la hubo ya que vir
a rosa.
Por consiguiente, se busc una bacteria la cual coincidiera con cada uno de los resultados que se obtuvieron en
las pruebas del perfil bioqumico que se haba planteado, los cuales nos llevaron a determinar que la bacteria
que se haba sembrado en la caja de Petri era Klebsiella pneumoniae ya que es la que coincide con todos los
resultados del perfil elaborado.
Partiendo de este trabajo, se puede decir que el proceso de la identificacin de una bacteria en una muestra,
puede ser largo y un tanto complicado porque intervienen distintos factores, como: una buena siembra y una
correcta aislacin de la colonia en condiciones estriles es decir, aislar la colonia cerca de un mechero
encendido o bien dentro de la campana de flujo laminar, sin embargo este tipo de pruebas estn basadas en el
metabolismo y el comportamiento de la bacteria en diversos agares lo cual nos permite poder identificarlas
correctamente.

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