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Semestre 2014-2
Lunes 17:00 - 20:00
Nombre: MORENO RUZ MONTSERRAT
Calif: ______
Grupo: 2
Equipo: 2
Actividad
CL501000
500 CL50<1000
100 CL50<500
0 CL50<100
Inactivo
Medianamente
inactivo
Activo
Muy activo
Pi (Anlogo
1)
0
0
0
0
0.15
0.40
Pi (Anlogo
2) 0.20
0.28
0.36
0.464
0.576
0.696
Pi (Anlogo
3)
0
0.33
0.45
0.66
0.78
0.84
Pi (Anlogo
4)
0
0
0.03
0.08
0.17
0.32
Pi (Anlogo
5)
0
0.01
0.03
0.16
0.43
0.76
De
a los
acuerdo
datos
obtenidos y los criterios anteriores, indique si los anlogos son activos o no,
seleccione 2 anlogos para continuar con el experimento.
C
(g/mL=pp
m)
0
10
30
100
300
Log C
Pi
(Anlogo
1)
0
1
1.4771212
55
2
2.4771212
55
0
0.15
0.4
1000
ANLOGO 1
5
Yi
0
1.8 2 2.2 2.4 2.6 2.8 3 3.2
Log C
y = 1.9332x - 0.9782
=1.9332
S= 1821.0039
= -0.9782
EEM= 191.950665
CL50=
1237.04552
LSC= 1613.26883
CL84=
4022.44361
LIC= 860.82222
CL16=
Pi'
Pi Miller
Yi
0.017
0.017
0.15
0.15
3.96
0.4
0.4
4.75
2.81
380.435818
Intervalo de confianza: 1237.04552 (860.82222-1613.26883) ppm
C
(g/mL=pp
m)
0
Log C
10
1
1.4771212
55
0.28
0.464
300
2
2.4771212
55
1000
0.4696
30
100
Pi
(Anlogo
2)
0.2
ANLOGO 2
Pi'
Yi
0.1
3.72
10
Yi
0.36
0.2
4.16
0.33
4.56
0.47
4.92
0.62
5.31
5
0
0.5
0.576
y = 0.7877x + 2.9658
S=
= 0.7877
3442.83334
EEM=
= 2.9658
362.906499
CL50=
LSC=
382.344854
1093.64159
CL84=
LIC=
6906.83233
-328.951883
CL16=
21.1656488
Intervalo de confianza: 382.34 (-328.95-1093.64) ppm
ANLOGO 3
10
Yi
5
0
0.5
C
(g/mL=pp
m)
0
Log C
10
1
1.4771212
55
0.33
2
2.4771212
55
0.66
0.84
30
100
300
0.7518x +
3.8233
=
S=
0.751 380.1
8
68234
1000
Pi
(Anlogo
3)
0
Pi'
Yi
0
0.33
4.56
0.45
4.87
0.66
5.41
0.78
5.77
0.84
5.99
0.45
0.78
EEM=
40.0732505
LSC=
115.286765
LIC=
-41.8003767
= 3.8233
CL50=
36.7431942
CL84=
762.107953
CL16=
1.77148437
Intervalo de confianza: 36.7431942 (-41.8003767-115.286765) ppm
ANLOGO 4
5
f(x) = 0.87x + 1.88
R = 1
Yi
0
0.5
1.5
2.5
3.5
Log C
C
(g/mL=pp
m)
y = 0.8744x
0
Log C
Pi
(Anlogo
4)
0
Pi'
+ 1.8792
0
= 0.8744
S=
24996.6563
10
0
0.017
1
= 1.8792
EEM=
2634.87893
30
1.4771212
0.03
0.03
55
CL50=
LSC= 8871.81812
100
0.08
0.08
3707.45542
2
300
2.4771212
0.17
0.17
CL84=
LIC= -1456.90728
55
50266.7583
1000
0.32
0.32
3
CL16=
273.445636
Intervalo de confianza CL50: 3707.45542
ANLOGO 5
10
Yi
5
0
0.5
Yi
2.81
3.12
3.59
4.05
4.53
(-1456.90728-8871.81812) ppm
C
(g/mL=pp
m)
0
Log C
10
1
1.4771212
55
0.01
2
2.4771212
55
0.16
0.76
30
100
300
1000
y = 1.5574x + 0.9655
S= 796.680534
= 1.5574
= 0.9655
EEM= 83.9775019
CL50=
389.525154
LSC= 554.121058
CL84=
1683.48926
LIC= 224.92925
CL16=
90.1281933
Pi
(Anlogo
5)
0
Pi'
Yi
0
0.01
2.67
0.03
3.12
0.16
4.01
0.43
4.82
0.76
5.71
0.03
0.43
C
(g/mL=pp
m)
0
10
30
100
300
Log C
Pi
(Anlogo
2)
0.2
1
1.4771212
55
0.28
2
2.4771212
55
0.464
y = 0.7877x + 2.9658
1000
3
= 0.7877
S=
3442.83334
EEM=
= 2.9658
362.906499
CL50=
LSC=
382.344854
1093.64159
CL84=
LIC=
6906.83233
-328.951883
CL16=
21.1656488
Pi'
Pi Miller
Yi
0.1
0.1
3.72
0.2
0.2
4.16
0.33
0.33
4.56
0.47
0.47
4.92
0.62
0.62
5.31
0.36
0.576
0.4696
Pi =
|P i pruebaP icontrol|
1P i control
0.20.2
=0
10.2
Pi =
0.280.2
=0.1
10.2
Pi =
0.360.2
=0.2
10.2
Pi =
0.5760.2
=0.47
10.2
2. Con los datos corregidos se utiliz la Tabla Probit obtener los valores Probit (Yi).
3. Se grafic Yi vs LogC (no se graficaron los valores del grupo control), obtuvo la
siguiente ecuacin:
y = 0.7877x + 2.9658
Yi=LogC +
C=10
Yi
C L16=10
C L50=10
4.012.9658
0.7877
C L84 =10
52.9658
0.7877
=382.3448 54 ppm
=21.1656488 ppm
5.992.9658
0.7877
=6906.83233 ppm
S=
EEM=
2S
23442.83334
=
=362.906499
2 N
2180
Conclusin:
Anlogo
Anlogo
Anlogo
Anlogo
Anlogo
Para los anlogos 1 y 4 el porcentaje de muertes no llega al 50%, por lo que los
valores de CL50 obtenidos son resultado de una extrapolacin. Ambos son inactivos
porque su potencia es tan baja que para observar un efecto mnimo teraputico y/o
txico (CL50) se requiere administrar concentraciones muy altas de frmaco, por lo
que su manejo experimental en estudios posteriores no es satisfactorio ni rentable.
Los anlogos 2 y 5 son los frmacos seleccionados porque son activos,
cuyas concentraciones letales mnimas que presentan permite hacer
experimentaciones y administrar diversas concentraciones del frmaco,
que
hagan posible llegar a observar cierta respuesta que se est
estudiando sin llegar rpidamente a la muerte del 50% de la poblacin,
lo que limitara en tiempo, magnitud y precisin las observaciones
requeridas en el estudio. As pues, dichos anlogos son opcin para
experimentos futuros.
En contraste con los anlogos 2 y 5, el anlogo 3 no es buena opcin para
continuar el experimento puesto que al ser muy activo, la potencia del frmaco es
1:
2:
3:
4:
5:
Inactivo
CL50 382.3448 ppm Activo
CL50 36.7432 ppm Muy activo
Inactivo
CL50 389.5251 ppm Activo
tal que a muy baja concentracin se llegar a la muerte del 50% de la poblacin
limitando el dominio de la experimentacin y la variedad de concentraciones a las
que puede someterse la poblacin estudiada. As pues, el manejo experimental del
anlogo 3 en estudios posteriores generara resultados muy limitados e imprecisos.
2) Los compuestos anteriormente probados, se cree actan a nivel del receptor GABA A.
Para estos compuestos se hace un estudio para determinar la DE 50 y compararla con
un frmaco prototipo.
a. De acuerdo a la informacin de cmo se cree que actan estos anlogos, cul
sera el frmaco de referencia (prototipo) que escogera para comparar las DE 50?,
fundamente su respuesta, en la eleccin del prototipo.
No se cuenta con una amplia informacin sobre datos farmacocinticos y
farmacodinmicos de los frmacos anlogos, ms que su CL 50. Para esto,
si se sabe que para Anlogo 2, su CL50 = 382.3448 ppm (= 382.3448 mg/L)
y para el Anlogo 5, su CL50 389.5251 ppm (= 389.5251 mg/L), se concluye
que la ventana de actividad biolgica de ambos frmacos puede ser muy
amplia (si a dosis muy bajas se observan efectos farmacolgicos) o muy
corta (si los efectos son observables a dosis altas y cercanas a las dosis
letales), lo que adems definira la potencia de los frmacos
desconocidos. De tal manera, se requerir de un frmaco cuyo sitio de
accin sea especficamente el receptor GABAA y cuya ventana de actividad
biolgica sea amplia, siendo su CL50 similar a las conocidas, lo que
permitir la comparacin de dosificaciones e iguales administradas con
respecto a los frmacos desconocidos y los efectos que se presenten.
Adems, se considerar la rapidez de accin, la duracin del efecto y el
grado de biodisponibilidad del frmaco prototipo elegido.
La
benzodiacepinas
son
frmacos
que
potencian
la
accin
hiperpolarizante del GABA. El receptor GABA A es el que se relaciona con
los receptores de las benzodiacepinas, las cuales actan por modulacin
alostrica.
Se elige como prototipo el CLORDIAZEPXIDO porque al ser una
benzodiacepina acta a nivel del receptor GABAA, con una afinidad
intermedia por el sitio benzodiacepinrgico del receptor GABA A ; su
biodisponibilidad es elevada, oscilando entre el 100% (variable con
administracin IM); cuya CL50 321 mg/L; su rango de dosis teraputica
de 5-300mg/Kg aproximadamente, lo que muestra una amplia ventana de
actividad biolgica que permitir hacer comparaciones en las
dosificaciones
variadas administradas con respecto a los frmacos
anlogos y sus respectivos efectos farmacolgicos, lo que sera clave en
la comparacin de DE50 determinadas; se absorbe de tal manera que tras
su administracin los efectos se observan rpidamente; es una
benzodiacepina de semivida larga (8 a 20 h), pues si su t 1/2 fuera corto, su
eliminacin sera rpida y sus efectos seran observados durante un
periodo de tiempo ms limitado; se excreta por orina , donde se puede
encontrar un 1 a 2% de frmaco inalterado, lo que garantiza que
prcticamente la dosis administrada completa produce efecto. Adems
esta sustancia consiste en un polvo cristalino blanco, inodoro, cuya
solubilidad es tal que 1g es soluble en 10 mL de agua, lo que facilitar su
administracin por alguna va parenteral (IM) haciendo posible la
preparacin de una solucin acuosa del frmaco.
b.
Cul sera su hiptesis de trabajo para comparar el efecto entre los anlogos
escogidos y el frmaco prototipo seleccionado en lo que a potencia se refiere?
Sabiendo que las CL50 del clordiazepxido y los anlogos 2 y 5 son
relativamente muy similares, se espera que si el grado de potencia de los
frmacos
anlogos
estudiados
es
relativamente
igual
al
del
clordiazepxido, entonces se observarn respuestas farmacolgicas
similares en los individuos tras la administracin de dosis iguales (por
una misma va de administracin), en periodos de tiempo semejantes con
respecto al frmaco control.
%E
(Anlogo
%E (Ctrl)
x)
3.22
13.04
10
33.33
25
60
52.63
83.33
76.92
93.75
91.74
98.04
%E
(Anlogo
y)
4.62
13.86
32.33
60.62
80.83
91.51
1/Dosis
1/%E
3.3333333
0.310559
33
01
1
0.1
Emax-E
96.78
90
E/(EmaE)
log (E/
(Emax-E))
0.033271
34
-1.47792975
0.111111 -0.95424251
25
0.4771212
55
10
52.63
30
76.92
1.4771212
55
100
91.74
0.3333333
33
0.04
0.019000
0.1
57
0.0333333 0.013000
33
52
0.010900
0.01
37
75
47.37
23.08
8.26
11
0.333333
33
-0.47712125
1.111040
74
0.04572999
3.332755
63
0.52280347
11.10653
75
1.04557869
PROTOTIPO
1.5
1
f(x) = 1x - 0.95
0.5
R = 1
0
Log (E/(Emax-E)) -1 -0.5 0 0.5 1 1.5 2 2.5
-0.5
-1
-1.5
-2
Log D
y = 1.0002x - 0.9545
E
log
=h logDhlog DE 50
E mxE
La pendiente es:
h = 1.0002
La ordenada al origen es:
hlog DE 50=0.9545
0.9545
=0.9543
1.0002
0.9543
DE 50 =10
1/Dosis
1/%E
Emax-E
E/(EmaE)
log (E/
(Emax-E))
X)
0.5228787
45
0
0.4771212
55
0.3
13.04
33.33
60
10
83.33
30
93.75
1.4771212
55
100
98.04
3.3333333
0.076687
33
12
1
0.030003
0.3333333 0.016666
33
67
0.012000
0.1
48
0.0333333 0.010666
33
67
0.010199
0.01
92
86.96
66.67
40
16.67
6.25
1.96
0.149954 -0.82404194
0.499925 -0.30109514
1.5
4.998800
24
0.17609126
15
50.02040
82
1.17609126
0.69886578
1.69914723
ANLOGO X
2
1.5
f(x) = 1x - 0.3
1=1
R
Log (E/(Emax-E))
0.5
0
-1 -0.5 0 0.5 1 1.5 2 2.5
-0.5
-1
Log D
y = 1.0001x - 0.3011
log
E
=h logDhlog DE 50
E mxE
La pendiente es:
h = 1.001
La ordenada al origen es:
hlog DE 50=0.3011
Se sustituye el valor de h y finalmente se despeja DE50:
0.3011
=0.301
1.0001
DE 50=100.301
DE50 = 2 mg/ Kg
3. ANLOGO Y: Modelo hiperblico del Efecto mximo (Emx), porque R =
1, indicando que para este caso la ecuacin generada con el ajuste de
Lineweaver Burke es el modelo que mejor se ajusta al comportamiento
farmacodinmico del frmaco:
%E
Dosis
(Anlogo Log Dosis
mg/kg
x)
0.5228787
0.3
4.62
45
1
13.86
32.33
0.4771212
55
10
60.62
30
80.83
1.4771212
55
100
91.51
1/Dosis
1/%E
Emax-E
E/(EmaE)
log (E/
(Emax-E))
3.3333333
0.216450
33
22
95.38
0.048437
83
-1.31481534
0.072150
07
86.14
0.160900
86
-0.79344164
0.3333333 0.030931
33
02
67.67
0.477759
72
-0.32079047
0.016496
21
39.38
1.539360
08
0.18734022
19.17
4.216484
09
0.62495047
8.49
10.77856
3
1.03256087
0.1
0.0333333 0.012371
33
64
0.01
0.010927
77
ANLOGO Y
0.25
0.2
0.15
1/%Efecto
0.1
0.05
0.5
1.5
1/Dosis
y = 0.0618x + 0.0103
1 DE 50 1
1
=
+
E Emx C Emx
La pendiente es:
DE 50
=0.0618
Emx
1
=0.0103
E mx
2.5
Emx =
1
=97.09
0.0103
Estado
fsico
Punto
de
Solubilidad
(agua)
Densidad
pKa/pKb
Coeficiente
Prototipo
Anlogo X
Anlogo Y
Cristales, inodoros
e incoloros o
ligeramente
amarillos
Cristales de color
blanco a amarillo
con olor
caracterstico
Polvo blanco
amorfo inodoro
136C
15 g/L a 37C
1.39 g/cm3
3.49 pKb
0.19
145C
8.4 g/L
1.7 g/cm3
3.3 pKb
1.2
128C
5.5 mg/mL
1.5 g/cm3
3.7 pKb
1.15
25 g de peso
25 g de peso
mg frmaco
=0 .225 mg frmaco
( 9.0013
1000 g de peso )
=0.25 mL solucin
( 0.110mLg desolucin
peso )
0.2255 mg frmaco
=0.90013 mg /mL
0.25 mL solucin
2. Para el Anlogo X:
25 g de peso
25 g de peso
2 mg frmaco
=0 .05 mg frmaco
( 1000
g de peso )
=0.25 mL solucin
( 0.110mLg desolucin
peso )
0.05 mg frmaco
=0.2 mg/ mL
0.25 mL solucin
3. Para el Anlogo Y:
25 g de peso
6 mg frmaco
=0 .15 mg frmaco
( 1000
g de peso )
( 0.110mLg desolucin
peso )
25concentracin
g de peso
=0.25 mLdebe
solucin
La
de la solucin
ser:
0.15 mg frmaco
=0.6 mg/ mL
0.25 mL solucin
5) De acuerdo a su respuesta del inciso c de la pregunta 4 (va de administracin
elegida), indique en forma de diagrama lo siguiente:
b) Factores
que influyen
en la
absorcin
de los
principios
activos:
El frmaco se introduce en el
msculo esqueltico.
La solucin acuosa del
frmaco se disemina
rpidamente en el perimisio,
mientras que los aceites
forman primero un glbulo
que se extiende lentamente a)
a lo largo de las hojas deLiberacin
tejido conectivo situadasdel frmaco
entre las fibras musculares.tras su
administraci
ADMINISTRACIN
DEva
n por
CLORDIAZEPXIDO
intramuscul
ar:POR VA
c) Sitio de
accin del
frmaco:
d) Va de
eliminacin:
A=Solucin
2
3
B=_______________
4
4
C=______________
6
6
3
1
5
5
4
4
6
4
5
3
3
4
6
1
4
6
a. Qu prueba estadstica usara para valorar estos resultados?, explique por qu.
Se usara la prueba ANOVA porque se cuenta con ms de dos muestras
con datos no pareados, con una escala numrica. Dicha prueba permite la
comparacin de las medias de las muestras. Si hay diferencia significativa
(cuando P<0.05), entonces se puede realizar una prueba post hoc, tal
como Dunnet (recomendable), Holm-Sidak Bonferroni para la
comparacin contra un grupo control: pruebas post hoc como Tukey
(recomendable), Duncan Fisher LSD para la comparacin de todos
contra todos en pares.
b. Realice la prueba estadstica sugerida e indique si hay diferencias entre los grupos
tratados.
Con el programa estadstico SigmaPlot 12.0 se obtuvo:
H0: A=B =C
H1: ABC
One Way Analysis of Variance
Data source: Data 1 in Notebook1
Passed
(P = 0.674)
Group Name
Col 1 7
1
Col 2 7
1
Col 3 7
1
Passed
N
Missing
2.333 1.211
4.333 1.033
5.167 0.983
Mean
0.494
0.422
0.401
(P = 0.063)
Std Dev
SEM
Source of Variation DF
SS
MS
F
P
Between Groups
2
25.444 12.722 10.905 0.001
Residual
15 17.500 1.167
Total
17 42.944
The differences in the mean values among the treatment groups are greater than
would be expected by chance; there is a statistically significant difference ( P =
0.001).
Power of performed test with alpha = 0.050: 0.964
Hay diferencia significativa entre las medias de las muestras (P =
0.001<0.05), por lo que hay la suficiente evidencia para rechazar H0. As
pues, se procedi a realizar una prueba post hoc: Dunnet, para la
comparacin contra el grupo control (AvsB y AvsC). Para esto se
generaron los siguientes resultados:
Multiple Comparisons versus Control Group (Dunnett's Method):
q'
4.543
P P<0.050
<0.001
3.207 0.011
Yes
3
3
3
6.425
1.890
4.536
0.001
0.398
0.015
P<0.050
Yes
No
Yes
A
B
C
Tras una administracin por va intraperitoneal en el experimento de
CDRG se esperara una curva como la representacin A.
Tras una administracin por va intramuscular para los experimentos de
con la DE50 se esperara una curva como la representacin A.
A
2310.4
3495.2
5058.3
5952.67
6430.26
6211.53
5296.71
5161.66
4482.07
3494.86
3240.94
2853.82
2716.12
2654.91
B
2386.77
3060.99
4040.77
5127.71
5718.71
5831.41
5496.41
5157.12
4651.05
3836.73
3395.41
3081.03
2860.36
2848.66
2000
0
10 15
Tiempo (hr)
Frmaco A:
Cp0= 6140.7367 g/mL
Cmax= 6430.26 g/mL
tmax= 2 h
t1/2= 8.078638468 h
Ka= 1.8919 h-1
Ke= 0.0858 h-1
ABC= 74581.30699 g/mL
Vd= 0.0241 mL
Cl= 0.0021 mL/hr
Frmaco B:
(h)
(mcg/mL)
2.5
6211.53
5296.71
3.5
5161.66
4482.07
4.5
3494.86
3240.94
2853.82
y=0.0858 x+ 8.7227
2716.12
12
2654.91
A: ELIMINACIN
9
8.5
LnC
8
7.5
7
10 12 14
Tiempo (hr)
Donde:
m=Ke=0.0858 hr
b=LnC p
t1 =
2
1
8.7227
C p =e
=6140.73671 g/mL
ln2
ln 2
=
=8.07 h
K 0.0858
Extrapolacin (g/mL)
Cp^ -Cpexp
Ln (Cp^ -Cpexp)
6140.73671
3830.33671
8.25070799
0.5
5882.8699
2387.6699
7.77807323
5635.83164
577.531638
6.35876323
1.5
5399.16721
-553.502792
--
5172.44098
-1257.81902
--
8.5
8
7.5
Ln(Cp^-Cpexp)
7
6.5
6
LnC=0.0858 t +8.7227
Cp=6140.73671 g /mL
y=1.8919 x+8.4085
Donde:
m=Ka=1.8919 h1
C pltima
C p 0 +C p1
C p1 +C p2
ABC =
t 10 ) +
t 2t 1 ) ++
=74581.30699 g /mL
(
(
2
2
K
Cl=
FD 1 6180 0.025
=
=0.0021 mL /min
ABC
74581.30699
Vd=
Cl 0.0021
=
=0.0241 mL
K 0.0858