BROMATOLOGIA

I NGENIERA EN
A LIMENTOS

Apellido y Nombre:..

Reg.N Fecha:/./ 2013.

PRCTICA DE LABORATORIO N 1- A
Determinacin de Nitrgeno total en protenas
Objetivos
El alumno al finalizar la prctica deber:

Conocer el fundamento del anlisis de protenas por el mtodo de Kjeldahl.

Realizar la digestin de una muestra de alimento.

Realizar la destilacin mediante el Mtodo de Kjeldahl.

Manejar bureta y realizar valoracin cido base.

Evaluar los resultados frente al estndar.

Fundamento
Las protenas comprenden un grupo de compuestos complejos que contienen nitrgeno.
Mtodo Kjeldahl se utiliza en qumica analtica para la determinacin del contenido de
nitrgeno en muestras orgnicas de gran inters en mbitos alimentario y el medioambiental.
En esta tcnica se digieren las protenas y otros compuestos orgnicos de los alimentos, en
una mezcla con cido sulfrico en presencia de catalizadores. Se pueden distinguir tres
etapas: digestin, destilacin y titulacin.

Digestin, se produce la descomposicin del nitrgeno que contienen las muestras

orgnicas utilizando una solucin de cido concentrado. Esto se obtiene haciendo hervir la
muestra en una concentracin de cido sulfrico. El resultado es una solucin de sulfato de
amonio

Destilacin, se libera amoniaco, el cual es retenido en una solucin con una cantidad
conocida de cido brico. Inicialmente se realiza una destilacin con vapor por el mtodo
de arrastre de vapor de agua, mediante la cual acelera la obtencin del destilado.

Titulacin, se utiliza para valorar finalmente la cantidad de amonio presente en la muestra

destilada

Equipos y materiales

Baln de kjeldhal de 500 ml

Anillo de hierro

Balanza analtica

Refrigerante

Equipo de titulacin

Erlenmeyer de 500 ml

Embudo chico

Mechero, soporte y tela metlica

Drogas y reactivos

cido sulfrico

Hidrxido de sodio (al 50% y 0,1 N)

Selenio

Rojo de metilo

Sulfato de potasio ( o de sodio)

cido clorhdrico 0,1 N

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Procedimiento
Digestin.
1- Pesar entre 1,5 y 2,0 g de muestra y transferir a un baln de kjeldhal seco de 500 800 ml
de vidrio Pyrex.
2- Pesar aproximadamente 10 g de sulfato de sodio anhidro y 0,6 0,8 g de selenio (tambin
se puede tener el catalizador ya preparado y agregarle una punta de esptula y agregarlo a
la mezcla en el baln.
3- Verter 25 ml de cido sulfrico concentrado de modo que sea arrastrado cualquier resto de
slido que quede en el cuello. Sostener el baln en posicin inclinada a 45 grados sobre el
soporte con anillo en una campana bien ventilada.
4- Calentar suavemente el contenido con una llama pequea. Al principio la mezcla formar
espuma y se ennegrecer. Cuando la espuma comienza a formarse con menos vigor,
aumentar la llama hasta que la mezcla hierva tranquilamente. A medida que progresa el
calentamiento la mezcla queda marrn y finalmente la solucin se vuelve perfectamente
incolora. Continuar el calentamiento a llama fuerte 15 minutos despus de la decoloracin.
5- Retirarla de la llama y dejarla enfriar en el baln.
Destilacin.
6- Al producto de la digestin, una vez fro por lo menos a 50C, se le agrega 200 ml de agua
destilada para minimizar los efectos de las mezclas que contienen altas proporciones
acido/sales, se agita.
7- Agregar 100 ml de hidrxido de sodio al 50 % y proceder a la destilacin.
Recoger el destilado en un Erlenmeyer de 500 ml que contenga 50 ml de HCl 0,1 N y unas
gotas de rojo de metilo como indicador.
Titulacin.
8- Titule la muestra con 0.1N de HCl. Un color violeta indica el punto final de la titulacin.
Cada equivalente del HCl usado corresponde a un equivalente de NH3 o a un equivalente de N
en la muestra original. El peso del N en mg est dado por miliequivalentes del cido X 14 (el
peso equivalente del N). El equipo completo utilizado se muestra en la figura 1.

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Fig. N 1: Aparato de Kjeldahl

Clculos
Los valores de nitrgeno y protenas se obtienen a partir de las siguientes ecuaciones.

Donde:
V1: Volumen de HCl, expresada en ml
V2: Volumen de NaOH expresada en ml
P: Peso de la muestra en g.
= Factor de conversin para pasar de contenido en nitrgeno a contenido en protenas.
Discusin de resultados
Los valores obtenidos en la muestra sern constatados por los valores legales permitidos.
Informe
El formato general de presentacin debe respetar segn el Anexo I.
En el informe se debern incluir:

Los valores obtenidos en el laboratorio durante la prctica.

Explicacin de todos pasos realizados.

Forma y clculos de preparacin de soluciones.

Las reacciones llevadas a cabo por el mtodo Kjeldahl.

Valores segn el Cdigo Alimentario.

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Conclusiones generales.

El informe final deber ser ppresentado al profesor una semana despus de finalizada la
prctica.
Bibliografa

A.O.A.C. 1980. Association of Official Agricultural Chemists. Official Methods of Analysis.

Washington, D.C.
Elizabeth Arancibia A., Bonilla Eduardo E., Naranjo Carmen M., Ponce Julio T. Saa
Guillermo G. (1994). Manual de Laboratorio ANALISIS DE ALIMENTO. Ediciones
Universidad de la Serena Chile.
Nielsen, S.S. 1994. Introduction to the Chemical Analysis of Foods. Ed. Jones and Bartlett
Publishers. U.S.A. pp 209-212.
Ranganna, S. 1977. Manual of Analysis of Fruit and Vegetable Products. Ed. McGraw-Hill
Publishing Co. Ltd. New Delhi.
Pearson D. DSc. MHEM A. FRIC FIFST (1986). Tcnicas de Laboratorio para el Anlisis
de Alimentos. Editorial ACRIBIA, S.A. ZARAGOZA (ESPAA).