DISEO Y MANEJO DE UN BIORREACTOR

ANAERBICO
Introduccin
El diseo en bioingeniera no es solo la aplicacin de conceptos
bsicos y tericos que conlleven a lograr un prototipo; para la
realizacin ntegra de un modelo, otra gran parte, trata de la
adaptacin creativa y de la utilizacin del ingenio propio para lograr el
objetivo de conjuntar el ambiente biolgico de un cultivo vivo con el
ambiente artificial de un dispositivo controlado; este es el resultado
denominado
biorreactor
o
reactor
biolgico.
Un biorreactor es por tanto un dispositivo biotecnolgico que debe
proveer internamente un ambiente controlado que garantice y
maximice la produccin y el crecimiento de un cultivo vivo; esa es la
parte biolgica. Externamente el biorreactor es la frontera que
protege ese cultivo del ambiente externo: contaminado y no
controlado. El biorreactor debe por tanto suministrar los controles
necesarios para que la operacin o proceso (bioproceso) se lleve a
cabo con economa, alto rendimiento (productividad) y en el menor
tiempo posible; esa es la parte tecnolgica.
Los tratamientos biolgicos son de gran inters en los procesos
depuracin sobre todo para las aguas residuales. Su uso,
fundamenta en el aprovechamiento de la capacidad para degradar
ciertos microorganismos, de igual manera sus capacidades
acumular, adsorber, precipitar o volatilizar una gran variedad
contaminantes presentes en el agua contaminada en este caso.

de
se
de
de
de

El desempeo de los biorreactores depende casi en su totalidad del

microorganismo que se selecciona para obtener el producto de
inters. Aunque la productividad del proceso est relacionada con la
optimizacin de los parmetros de operacin del equipo, siendo la
clula la entidad donde se desarrolla toda actividad manufacturada.
Debido a que la produccin depende de la poblacin de
microorganismos el ambiente donde las clulas se cultivan debe
proporcionar lo necesario para que ellas rindan los resultados
esperados.
Una etapa que juega un importante rol en el desarrollo de estos
procesos, es el diseo de los biorreactores o reactores biolgicos. A
diferencia de lo que ocurre con equipos para procesos de
transferencia de masa o de calor, no existe una metodologa para el
diseo de equipos, dentro de los cuales se desarrolle una reaccin o
conversin bioqumica, debido principalmente a que el diseo del
biorreactor est regido por el sistema de reaccin especfico que se
va llevar acabo y el tipo de microorganismos que se emplee.

Un biorreactor o fermentador es aquel dispositivo que proporciona un

medio ambiente controlado que permite el crecimiento eficaz de las
clulas (microorganismos) para la transformacin de una materia
prima en un producto. Este medio ambiente, debe tener niveles
ptimos de temperatura, pH, sustrato, sales, y oxgeno.
Los biorreactores son equipos donde se realiza el proceso de cultivo,
sea en estado slido o lquido. Su diseo debe ser tal que se asegure
homogeneidad entre los componentes del sistema y condiciones
ptimas para el crecimiento microbiano y la obtencin del producto
deseado.
El biorreactor se configura para proveer al usuario un sistema tipo
paquete que contiene elementos necesarios para funcionar en un
proceso de fermentacin; los dispositivos bsicos requeridos para
funcionar en un proceso de fermentacin son:

Equipo para suministrar aire. ( transferencia de masa)

Equipo para generar y controlar la temperatura.
(transferencia de energa)
Equipo para agitacin mecnica. (transferencia de
movimiento)

Un biorreactor est diseado para brindar las caractersticas

necesarias de monitoreo de diferentes variables como temperatura,
presin y concentracin de gases, originadas como resultado de la
transformacin qumica, las mismas que deben mantenerse
controladas a fin de ofrecer condiciones ptimas para el desarrollo y
la accin del microorganismo (Novoa, 2010).
Otros equipos como bombas, rotmetros, vlvulas, filtros, tuberas,
abrazaderas, pH-metros y sus controladores, deben ser adquiridos
aparte, teniendo en claro que el equipo puede emplearse para
realizar una fermentacin controlando manualmente el pH, el oxgeno
disuelto y el nivel de espuma.
En el diseo del biorreactor se tiene en cuenta, adems del tipo de
proceso microbiolgico, el efecto del flujo, el tiempo de residencia, el
pH, la temperatura, la biomasa, la concentracin de nutrientes y la
velocidad de agitacin para que se desarrolle en forma ptima la
conversin de los lodos.

MARCO TERICO
DISEO BSICO DE UN BIOREACTOR
Las decisiones tomadas en el diseo del reactor tienen un efecto
considerable sobre el rendimiento global del proceso. Todava no
existen procedimientos sencillos o estndar para el diseo reactores
que cubran todos los aspectos del recipiente y de su operacin.
El conocimiento de cintica de las reacciones es esencial para
comprender cmo funcionan los reactores biolgicos, aunque tambin
son necesarias otras reas de ingeniera de bioprocesos como
balances de materia y energa, la mezcla, la transferencia de materia
y la transmisin de calor. (Doran, 1998)
El diseo de biorreactores es una tarea de ingeniera bastante
compleja. Los microorganismos o clulas son capaces de realizar su
funcin deseada con gran eficiencia bajo condiciones ptimas. Las
condiciones ambientales de un biorreactor tales como flujo de gases
(por ejemplo, oxgeno, nitrgeno, dixido de carbono, etc.),
temperatura, pH, oxgeno disuelto y velocidad de agitacin o
circulacin, deben ser cuidadosamente monitoreadas y controladas.
La mayora de los fabricantes industriales de biorreactores usan
recipientes, sensores, controladores y un sistema de control
interconectados para su funcionamiento en el sistema de
biorreaccin.
La misma propagacin celular (fenmeno conocido como Fouling)
puede afectar la esterilidad y eficiencia del biorreactor, especialmente
en los intercambiadores de calor. Para evitar esto, el biorreactor debe

ser fcilmente limpiable y con acabados lo ms sanitario posible (de

ah sus formas redondeadas).Se requiere de un intercambiador de
calor para mantener el bioproceso a temperatura constante. La
fermentacin biolgica es una fuente importante de calor, por lo que
en la mayor parte de los casos, los biorreactores requieren de agua
de enfriamiento. Pueden ser refrigerados con una chaqueta externa o,
para recipientes sumamente grandes, con serpentines internos.
En un proceso aerobio, la transferencia ptima de oxgeno es tal vez
la tarea ms difcil de lograr. El oxgeno se disuelve poco en agua (y
an menos en caldos fermentados) y es relativamente escaso en el
aire (20,8 %). La transferencia de oxgeno usualmente se facilita por
la agitacin que se requiere tambin para mezclar los nutrientes y
mantener la fermentacin homognea. Sin embargo, existen lmites
para la velocidad de agitacin, debidos tanto al alto consumo de
energa (que es proporcional al cubo de la velocidad del motor) como
al dao ocasionado a los organismos debido a un esfuerzo de corte
excesivo.
Los biorreactores industriales usualmente emplean bacterias u otros
organismos simples que pueden resistir la fuerza de agitacin.
Tambin son fciles de mantener ya que requieren slo soluciones
simples de nutrientes y pueden crecer a grandes velocidades.
En los biorreactores utilizados para crecer clulas o tejidos, el diseo
es significativamente distinto al de los biorreactores industriales.
Muchas clulas y tejidos, especialmente de mamfero, requieren una
superficie u otro soporte estructural para poder crecer y los
ambientes agitados son comnmente dainos para estos tipos de
clulas y tejidos. Los organismos superiores tambin requieren
medios de cultivo ms complejos.
Para el diseo de un biorreator pueden resumirse del siguiente modo
dependiendo del tipo de reactor y la fermentacin a utilizar:
1. El tanque debe disearse para que funcione aspticamente
durante numerosos das, para evitar la aparicin de
contaminantes en las operaciones de bioprocesos de larga
duracin.
2. Debe permitir una mayor rea de contacto entre las fases
bitica y abitica del sistema, es decir, se debe proporcionar un
sistema adecuado de aireacin y agitacin para cubrir las
necesidades metablicas de los microorganismos.
3. El consumo de energa debe ser el mnimo posible

4. Entradas para la adicin de nutrientes y el control del pH.

5. El crecimiento microbiano es generalmente exotrmico, por lo
que, el biorreator debe facilitar las transferencia de calor, del
medio hacia las clulas y viceversa, a medida que se produce el
crecimiento celular, adems de mantener estable la
temperatura deseada.
6. Mantener las clulas uniformemente distribuidas en todo el
volumen del cultivo
7. Suministrar oxgeno a una velocidad tal que satisfaga el
consumo.
8. El diseo debe ser tal que permita mantener el cultivo puro; una
vez que todo el sistema ha sido esterilizado y posteriormente
inoculado con el microorganismo deseado.
Los biorreactores ms utilizados a nivel industrial estn provistos de
mecanismos de agitacin, dispersin y aireacin as como de
sistemas para el control de la temperatura, pH.

CONJUNTO BIORREACTOR-SISTEMA
El conjunto biorreactor-sistema de cultivo debe cumplir con los
siguientes objetivos:
1.

Mantener las clulas uniformemente distribuidas en todo el

volumen de cultivo.

2.

Mantener constante y homognea la temperatura.

3.

Minimizar los gradientes de concentracin de nutrientes.

4.

Prevenir la sedimentacin y la floculacin.

5.

Permitir la difusin de gases nutrientes a la velocidad requerida

por el cultivo.

6.

Mantener el cultivo puro.

7.

Mantener un ambiente asptico.

8.

Maximizar el rendimiento y la produccin.

9.

Minimizar el gasto y los costos de produccin.

10.

Reducir al mximo el tiempo.

Las operaciones realizadas por estos biorreactores son las siguientes:

Homogenizacin, para mantener la temperatura

distribucin de concentracin de manera uniforme.

Mezcla slido/lquido, para mantener una suspensin con una

distribucin de slidos uniforme.

Procesos lquido/lquido, para dispersar una fase en otra, formar

emulsiones y realizar extracciones.

Procesos gaseoso/lquido, para dispersar el gas en los lquidos,

airear el lquido.

la

Intercambio de calor

CLASIFICACIN DE LOS BIORREACTORES

Clasificacin operativa
Se clasifican de
semicontinuo,

acuerdo

al

modo

de

operacin: discontinuo,
continuo.

Esta es una clasificacin operativa y se aplica a cualquier reactor, sea

qumico o biolgico. En este ltimo, el modo de operacin define el
sistema de cultivo que es el mismo y delimita la clasificacin
procesal-productiva del cultivo. Al operar un biorreactor en cualquier
modo de operacin, automticamente queda determinado el modo de
cultivo del sistema y se definen los parmetros y las caractersticas
operativas y de diseo que intervienen en el proceso productivo del
sistema.
Clasificacin biolgica
Los

biorreactores

se

clasifican

biolgicamente

de

acuerdo

al

metabolismo procesal del sistema de cultivo: anaerbico, facultativo,

aerbico.

Los bioprocesos de cultivo y las fermentaciones estn basados en el

metabolismo celular del cultivo. El metabolismo define los parmetros
y caractersticas operativas-biolgicas de diseo y de operacin del
biorreactor, y estas caractersticas son las que intervienen en la parte
biolgica del sistema y tienen que ver con el crecimiento,
productividad y rendimiento del cultivo.

Discontinuo(batch): por lotes o tandas, sistema cerrado, sin

alimentacin (F); se coloca dentro del biorreactor la carga total de
cada proceso (tanda o lote) de cultivo o fermentacin y se dejar que
se lleve a cabo el proceso productivo o la fermentacin por el tiempo
que sea necesario, este tiempo se denomina tiempo de
retencin. Son sistemas cerrados que se caracterizan por cambiar las
condiciones fisiolgicas y ambientales. No hay entrada ni salida de
medio de cultivo.
A estos reactores se los carga una vez de forma total o por intervalos
durante varios das. Este tipo de reactores son aplicables cuando hay
problemas de falta de personal o cuando el material para degradar no
existe de forma continua.

Ventajas:

Procesamiento de una gran variedad de sustratos.

Admite cargas secas y con alta humedad.

Trabajo

en

ciclos

para

una

operacin

menos

personalizada.
o

Desventajas:
La carga y descarga requiere de una mayor
operacin de manera personalizada.

S
e
m
i
c
o
n
t
i
n
u
o
(batch alimentado): por lotes alimentados, con alimentacin de
entrada (F1); se alimenta una lnea de entrada (F 1) para que el
sistema de cultivo tenga un producto con mximo de crecimiento
(exponencial) y aumente la productividad. Estos sistemas operan
adicionando medio fresco, pero sin remocin del existente. Son muy
tiles cuando se requiere una elevada densidad celular en la etapa de
iniciacin del proceso que implica un alto consumo de nutrientes,
especialmente de fuente hidrocarbonada que suele funcionar como
sustrato limitante.
Son muy tiles cuando se necesita una elevada densidad celular en la
etapa de iniciacin del proceso que implica un alto consumo de
nutrientes (fuente hidrocarbonada que suele funcionar como sustrato
limitante).

Consiste en remover, al final de la operacin entre un 80

y un 90 % del cultivo y reemplazarlo por medio fresco.

De esta manera puede satisfacerse sencillamente la

necesidad de contar con inculos de gran tamao y a su vez evitar la
esterilizacin del reactor entre dos ciclos.
Continuo: Por quimioestato, se alimenta una lnea de entrada F 1 o
alimentacin y se drena una lnea de salida F 2o lavado; de manera
que los flujos o caudales de ambas lneas sean iguales y la produccin
sea continua. El caudal de entrada de medio fresco es igual al de
salida de medio utilizado. Son utilizados en cultivos donde la
velocidad de crecimiento celular es constante por lo que existe un
suministro constante de nutrientes o para la remocin permanente de
producto sobre todo en sistemas inmovilizados.
Ventajas:

Son utilizados en cultivos donde la velocidad de crecimiento celular es

constante ya que hay un constante ingreso de nutrientes o para la
remocin permanente de producto sobre todo en sistemas
inmovilizados.
o

Para su buena aplicacin se requiere minimizar lo que se

denomina lavado del cultivo.

Una variante es la Perfusin que implica la remocin y

suministro de medio dejando la biomasa ocluda en una malla.
Desventajas:

Presenta inconvenientes con respecto al mantenimiento de las

condiciones de asepsia del proceso, y se dificulta debido a la
tendencia a formar agregados de las clulas vegetales en cultivo, la
formacin de merengue y el lento crecimiento celular.

Para su buena aplicacin se requiere del diseo de sistemas que

permitan suplementar continuamente el medio de cultivo evitando la
remocin de las clulas y as minimizar lo que se denomina lavado del
cultivo.

CONTROL Y MONITOREO DEL BIOPROCESO

Los parmetros a controlar dentro de un bioreactor son:

Temperatura
pH
Presin parcial de O2
Formacin de espuma

Temperatura
La temperatura es un importante parmetro en la fermentacin, si es
que hay una desviacin de un par de grados puede disminuir
drsticamente el crecimiento y la biosntesis de productos. Es por
esto que la variacin de temperatura debe variar entre 0,5 C.
pH
El pH en un bioproceso tiene menos efecto sobre la actividad
biolgica de los microorganismos que la temperatura, frecuentemente

las bacterias crecen en un intervalo de pH de 4 8, las levaduras de 3

6 y los mohos de 3 7. Esto tambin es aprovechado en la industria.
Por ejemplo, las fermentaciones de levaduras generalmente operan a
un pH tan bajo como sea posible para reducir la contaminacin por
bateras.
Espuma
La aparicin de espuma es un fenmeno muy indeseable ya
que existe el riesgo de perder el caldo de fermentacin y no es
posible llevar a cabo anlisis de alta calidad y mediciones con la
presencia de espuma en el reactor. La espuma tambin interfiera en
la velocidad de transferencia de materia en los fluidos como se
menciona en Uso de agentes antiespumantes para el consumo de
Oxgeno

OBJETIVOS

Diseo y manejo de un biorreactor anaerbico

Inoculacin de un microorganismo (Bacillus Suptillus).
Monitorear y medir el crecimiento microbiano mediante la
intensidad de la luz con una longitud de onda de 570nm
(Absorbancia).

MATERIALES

1 botella de vidrio de 2 lts.

Tubos
Vlvulas
Piedra difusora
Equipo de Nebulizacin
Planta de Poro Flex.
Cultivo de Bacillus Suptillus.
6 cocos (cocos nucfera).
Tubos de ensayo.
Placas Petri.

Mechero.
Asa de coli.
Cuchillos.
Agua destilada.

EQUIPOS

Espectrofotmetro.
Incubadora.

PROCEDIMIENTO
1. Se dio inicio a la elaboracin del diseo del biorreactor,
utilizando como materiales los ya mencionados.

2. Se concluy el diseo del biorreactor.

3. Preparacin
Bacillus Suptillus.

del cultivo a realizar:

4. Se
esteriliz
biorreactor, para luego inocular el microorganismo.

el

5. Inoculacin del microorganismo:

biorreactor, como medio de
cultivo el agua de coco.

el

6.

Bacillus

Suptillus

en

o
s
t
e
r
i
ormente
se
realiz
el
monitoreo del desarrollo del microorganismo en el biorreactor
durante 6 das.

7. Durante los 6
das se determin el
crecimiento
microbiano mediante
la Absorbancia, utilizando como equipo el Espectrofotmetro a
una longitud de onda de 570 nm.

RESULTADOS
Absorban
cia

Da 1

Da 2

Da 3

Da 4

Da 5

Da 6

0.194

0.208

0.864

0.904

2.593

2.769

Absorbancia

CONCLUSIONES

Se dise y manej el biorreactor anaerbico.

Se inocul el microorganismo Bacillus Sptillus correctamente al
biorreator.
Se encontr el medio de cultivo contaminado con diferentes
microorganismos.

DISCUSIONES
Los resultados del monitoreo del crecimiento del Bacillus Suptillus se
debi por los siguiente factores.
Factores Que Afectan Al Funcionamiento

Concentracin de los compuestos necesarios para el crecimiento y actividad

bacterianas (nutrientes y sustratos).

Mantener los parmetros fsico-qumicos (temperatura, pH) del medio en rangos

relativamente limitados para que la actividad de los microorganismos sea ptima.

Diseo del sistema para que sea capaz de resistir variaciones de las condiciones

normales de operacin.
Agitacin

Factores Que Afectan Al Resultado Del Proceso

Las caractersticas del efluente que se alimenta (porcentaje de slidos, presencia de

cloro, etc.).
La cintica de crecimiento bacteriano y de transformacin de los lodos.
La composicin de la poblacin bacteriana en el biorreactor.
La calidad de la materia orgnica que se aade al proceso.
El funcionamiento estable del reactor depender de los siguientes factores:
Concentracin de los compuestos necesarios para el crecimiento y actividad

bacterianas (nutrientes y sustratos).

Mantener los de parmetros fsico-qumicos (temperatura, pH) del medio en rangos
relativamente limitados para que la actividad de los microorganismos sea ptima.

SOLUCIONES

El tanque debe disearse para que funcione aspticamente

durante numerosos das, para evitar la aparicin de
contaminantes en las operaciones de bioprocesos de larga
duracin.

Mantener el cultivo puro.

Mantener un ambiente asptico.

La temperatura de los biorreactores de laboratorio puede ser
controlada de las siguientes maneras:
o Colocando un calentador situado en el interior del
biorreactor, mediante tuberas con paredes delgadas que
estn conectados con una vlvula electromagntica con
el agua de refrigeracin.
o Controlando
la
calefaccin
y
refrigeracin con un
termostato, el agua termostatizada con la ayuda de una
bomba circula a travs de la camisa de biorreactor.
El control de pH se basa en la comparacin del punto fino
de ajuste y los valores de pH reales, para esto se utilizan
nicamente electrodos estriles Mettler-Tolede. El control de los
valores de pH se asegura con la ayuda de las bombas
peristlticas que dosifiquen cido y lcali. Las mediciones de pH

deberan ser precisas, con valores de 0,02 unidades de pH, ya

que la dinmica de los cambios de los valores de pH
proporcionan cambios valiosos sobre la cintica del proceso.
La eliminacin de la espuma es posible mediante un agente
antiespumante teniendo en cuenta que una sobredosis podra
disminuir dramticamente los parmetros de cinticos
microbianos.
Es conveniente el uso de dispositivos de
medicin mecnica de espuma, este es un dispositivo especial
instalado en la cubierta superior del biorreactor que empieza a
funcionar si hay formacin de espuma.
Una solucin ptima es la combinacin de ambos mtodos. La
aplicacin de la variante uno se usa ms en biorreactores de
laboratorio.

LINKOGRAFIA

https://procesosbio.wikispaces.com/Dise%C3%B1o+B
%C3%A1sico
http://es.wikipedia.org/wiki/Biorreactor
http://www.myminstrumentostecnicos.com/wenv/file_data.php?
id=397
Novoa, D. 2010. Introduccin a las bioseparaciones. Consultado
el 4 de Enero del 2012. Disponible
en:http://soebi.wordpress.com/bioprocesos-e-industrias-dealimentos/
Cunill, Fidel. Reactores
Quimicos.http://diposit.ub.edu/dspace/bitstream/2445/12703/1/
APUNTS%20DE%20REACTORS%20QU%C3%8DMICS.pdf

AO DE LA PROMOCIN DE LA INDUSTRIA
RESPONSABLE Y COMPROMISO CLIMTICO
UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA
FACULTAD DE INGENIERIA INDUSTRIAL
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

CURSO

BIOTECNOLOGIA

TEMA

DISEO Y MANEJO DE UN BIORREACTOR

ANAERBICO.

DOCENTE

Mcbl. JORGE BERMEJO

INTEGRANTES

CHIMBO CASTILLO LUIS

DOMINGUEZ CHOZO JUNIOR SMITH

IPANAQU MAZA EDGAR JOEL
TAVARA SAAVEDRA KEVIN GERMAN
VELSQUEZ CARRASCO CARLOS ALBERTO

JULIO 2014
PIURA- PERU