La fosforilacin oxidativa es la culminacin del metabolismo productor

de energa en organismos aerbicos.

Todas las etapas oxidativas en la degradacin de los hidratos de

carbono, grasas y aminocidos convergen en esta etapa final de la

respiracin celular, en el que la energa de la oxidacin impulsa la
sntesis de ATP

Peter Mitchell
Nuestra comprensin actual de la sntesis de ATP en la mitocondria y los
cloroplastos se basa en la hiptesis, introducida por Peter Mitchell en 1961, la cual
expresa que las diferencias en la concentracin de protones transmembrana son
el reservorio de la energa extrada de las reacciones de oxidacin biolgica.
Esta teora quimiosmtica ha sido aceptado como uno de los grandes principios
unificadores de la biologa del siglo XX.

Modelo quimiosmtico

La fosforilacin oxidativa y fotofosforilacin son mecnicamente similar

en tres aspectos.
(1) Ambos procesos implican el flujo de electrones a travs de una
cadena de transportadores unidos a la membrana.
(2) La energa libre disponible por el flujo de electrones "cuesta abajo
(exergnico) est acoplado al transporte "cuesta arriba" de protones
a travs de una membrana impermeable al paso de los protones, la
conservando la energa libre de oxidacin del combustible como un
potencial electroqumico transmembrana.
(3) El flujo transmembrana de protones hacia abajo de su gradiente de
concentracin a travs de los canales de protenas especficos
proporciona la energa libre para la sntesis de ATP, catalizada por un

complejo de protenas de membrana (ATP sintasa) que acopla el

flujo de protones flujo a la fosforilacin del ADP.

Albert L. Lehninger 19171986

Las nicas especies que cruzan
esta membrana lo hacen a travs
de transportadores especficos
La membrana interna lleva los
componentes de la cadena
respiratoria y la ATP sintasa.

La fosforilacin oxidativa
implica la reduccin de O a
HO con electrones donados

por NADH y FADH

La fosforilacin oxidativa comienza con la entrada de electrones en la cadena
respiratoria. La mayor parte de estos electrones se derivan de la accin de
deshidrogenasas que recogen los electrones de las vas catablicas y la
energa permanece dentro de aceptores universales de electrones, la

nicotinamida (NAD nucletidos o NADP) o los nucletidos de flavina (FMN o

FAD).

Ubiquinone, coenzyme Q, o Q
Adems de NAD y flavoproteinas,
otros tres tipos de molculas que
transportan electrones funcionan
en la cadena respiratoria: una
quinona hidrfobica (ubiquinona) y
dos tipos diferentes de protenas
que contienen hierro (citocromos y
protenas

hierro-azufre).

La

ubiquinona (coenzima Q tambin

llamado, o simplemente Q) es una

benzoquinona liposoluble con una
cadena lateral larga deisoprenoide

Citocromos
Los citocromos son protenas
con una caracterstica, fuerte
absorcin de la luz visible,
debido
a
sus
grupos
prostticos
hemo
que
contienen hierro. El citocromo
c de las mitocondrias, una
protena soluble que se asocia
a travs de interacciones
electrostticas
con
la
superficie exterior de la
membrana interna.

protenas hierro-azufre
En las protenas hierro-azufre, el
hierro no est presente como grupo
hemo, sino en asociacin con tomos
de azufre inorgnicos o con los
En la reaccin catalizada por la

tomos de azufre de los residuos Cys

cadena respiratoria mitocondrial, los

en la protena, o ambos. Estos

electrones

el

centros de hierro-azufre (Fe-S) van

otro

desde estructuras simples con un

donante de electrones primario, a

solo tomo de Fe coordinados a

travs de flavoproteins, ubiquinona,

cuatro Grupos Cys-SH con ms de

protenas

un complejo con dos o cuatro tomos

NADH,

se

mueven

succinato,

desde
algn

hierro-azufre,

los

citocromos, y finalmente hasta el O

de Fe.

La cadena respiratoria mitocondrial consta de

una serie de transportadores de electrones que
actan secuencialmente, la mayora de las
cuales son protenas integrales con grupos
prostticos capaces de aceptar y donar ya sea
uno o dos electrones.

Complejos I y II catalizan la transferencia de electrones a la ubiquinona a

partir de dos diferentes donadores de electrones: NADH (Complejo I) y
succinato (complejo II). Complejo III lleva electrones de la reduccin de
ubiquinona al citocromo c, y Complejo IV completa la secuencia mediante la
transferencia de electrones desde el citocromo c a O

Complejo

I:

NADH

ubiquinona.

Complejo I, tambin llamado NADH:

reductasa

NADH

deshidrogenasa

ubiquinoneoxido, es una gran enzima

compuesta

por

42

cadenas

de

polipptidos diferentes, incluyendo una

flavoproteina que contiene FMN y al
menos seis centros de hierro-azufre.
Microscopa

de

electrones

de

alta

resolucin muestra que el Complejo I

tiene forma de L, con un brazo de la L
en la membrana y la otra se extiende en
la matriz.

Complejo I cataliza dos procesos obligatoriamente acoplados y simultneas

(1) la transferencia exergnica a la ubiquinona de un ion hidruro desde un
NADH y un protn desde la matriz, expresada por

y (2) la transferencia endergnica de cuatro protones desde la matriz al

espacio intermembrana. Por lo tanto, el complejo I es una bomba de
protones impulsada por la energa de transferencia de electrones, y la

reaccin que la cataliza es vectorial: se mueve protones desde una

direccin especfica desde, la matriz, que se carga negativamente con la
salida de protones, a otro, que es la espacio intermembrana, que se
carga positivamente.

Complejo II: succinato de ubiquinona la

succinato deshidrogenasa, la nica
enzima unida a la membrana en el ciclo
del cido ctrico . Aunque es ms
pequeo y ms simple que el Complejo
I, contiene cinco grupos prostticos de
dos tipos y cuatro sub unidades
protecas diferentes.

Ubiquinol
(QH),
la
forma
completamente reducida se difunde en
la membrana mitocondrial interna desde
el Complejo I al Complejo III, donde se
oxida a Q en un proceso que tambin
implica el movimiento hacia afuera de
H+.

Complejo III: ubiquinona al citocromo C.

El complejo respiratorio, Complejo III, tambin llamado complejo citocromo
bc1 o ubiquinona: citocromo c oxidorreductasa, acopla la transferencia de
electrones desde el ubiquinol (QH2) al citocromo C con el transporte

vectorial de protones desde la matriz al espacio intermembrana.

Modelo quimiosmtico

For each pair of electrons transferred to O four protons are pumped out by
Complex I, four by Complex III, and two by Complex IV

The
electrochemical
energy
inherent in this difference in
proton
concentration
and
separation of charge represents a
temporary conservation of much
of the energy of electron transfer.
The energy stored in such a
gradient, termed the protonmotive force, has two
components: (1) the chemical
potential energy due to the
difference in concentration of a
chemical species (H) in the two
regions
separated
by
the
membrane, and (2) the electrical
potential energy that results from
the separation of charge when a
proton
moves
across
the
membrane without a counterion

Reacciones
Redox enlazadas

FUERZA MOTRIZ DEL PROTN

Liberan ~ 220 kJ
Sntesis de ATP requiere 50 kJ

Alrededor de 200 kJ (de los 220 kJ liberados por oxidacin de 1

mol de NADH) se conserva en el gradiente de protones.

Para pH (0,75 unidades) y (0.15 V)

en esta ecuacin da G 19 kJ / mol
(de protones). Debido a que la
transferencia de dos electrones de
NADH a O se acompaa por el
bombeo hacia fuera de 10 protones.

Las especies reactivas de oxgeno pueden causar estragos al reaccionar con

enzimas, lpidos de membrana, y cidos nucleicos En mitocondrias que respiran
activamente, del 0,1% al 4% del O utilizado en la respiracin, es ms que
suficiente para tener efectos letales, a menos que el radical libre sea eliminado
rpidamente.
Para prevenir el dao oxidativo por ,
las clulas tienen varias formas de la
enzima superxido dismutasa que
cataliza la reaccin

Superxido

El perxido de hidrgeno (HO) as

generado se vuelve inofensivos por la
accin de la glutationa peroxidasa.
La glutatin reductasa recicla el
glutatin oxidado a su forma reducida,
utilizando electrones de la NADPH
generado
por
el
nucletido
nicotinamida transhidrogenasa (en la
mitocondria)

El glutatin reducido tambin sirve para mantener a los grupos sulfhidrilo de

protenas en su estado reducido, previniendo de algunos de los efectos nocivos del
estrs oxidativo

RESPIRASOMA

Cada vez hay ms evidencia experimental de que en la mitocondria intacta, los complejos
respiratorios fuertemente asociados entre s en la membrana interna en forma de
respirasomes que son combinaciones funcionales de dos o ms complejos de transferencia
de electrones.
La evidencia apoya la cintica de transferencia de electrones a travs de un estado slido, y
por lo tanto el modelo respirasome.

SINTESIS DEL ATP

La transferencia de electrones, y la fuerza conservas protnmotriz conservan mas que suficiente energa libre (alrededor
de 200 kJ) por mol " de pares de electrones para impulsar
la formacin de un mol de ATP, que requiere
aproximadamente 50 kJ. Por lo tanto, la fosforilacin
oxidativa mitocondrial no plantea ningn problema
termodinmico.

cul es el mecanismo qumico que acopla el flujo de

protones con la fosforilacin?
.

La energa electroqumica inherente a la diferencia en la concentracin de

protones y la separacin de la carga a travs de las membranas
mitocondriales- la fuerza motriz de protones- maneja la sntesis de ATP, a
medida que los protones flujen pasivamente a la matriz a travs de un
poro de protones asociada con la ATP sintasa

Acoplamiento de la transferencia de e- a la
sntesis de ATP
Inhibe la transferencia de e a la
citocromo oxidasa

Inhibidores de la ATP sintasa (Fo)

Dinitrofenol (DNP) agente

desacoplante

Agentes
Desacoplantes
Ciertos compuestos qumicos causan
desacoplamiento sin interrumpir la
estructura mitocondrial.
Los desacopladores qumicos incluyen
2,4-dinitrofenol
(DNP)
y
carbonylcyanide-p
trifluoromethoxyphenylhydrazone
(FCCP), cidos dbiles con propiedades
hidrfobas que les permiten difundir
fcilmente travs de las membranas
mitocondriales
Despus de entrar en la matriz en la forma protonada, pueden liberar un
protn, disipando as el gradiente de protones.
Ionophores such as valinomycin

ATP sintasa o
Complejo V
oligomicina

Poro de protones

ATP sntesis
ATP sintasa, tambin llamado
Complejo V, tiene dos
componentes distintos: F 1, una
protena perifrica a la membrana,
y Fo (o denota oligomicinasensible), que es parte integral de
la membrana

Las mediciones de las

constantes de unin muestran
que F o F 1 se une ATP con
muy alta afinidad (K d> 10 -12
M) y ADP con mucho menor
afinidad (K d 10- 5 M). La
diferencia en la Kd corresponde
a una diferencia de
aproximadamente 40 kJ / mol en
energa de enlace, y esta
energa de unin desplaza el
equilibrio hacia la formacin del
ATP.

Reversibilidad de la reaccin
ADP Pi
ATP + H2O
Go ~ 0

Gradiente de
H+

FoF1 Kd ATP 10 -12 M

ADP 10 -5 M

ATP es estabilizado

Mitochondrial F1 has nine subunits of five different types, with the composition
Each of the three beta subunits has one catalytic site for ATP synthesis.

Cada subunidad asume conformaciones diferentes

1
-ADP

-ADP
2

-ATP

ADP

ATP
-vaco
3
-vaco

Subunidad-
9 subunidades de 5 tipos diferentes

-ATP

Fo posee 10 subunidades c

Subunidades a,b y c

Complejo FoF1

8000 Da

isis rotacional
This produces a
cooperative
conformational
change in which the
-ATP site is
converted to the empty
conformation, and
ATP dissociates;
the -ADP site is
converted to the ATP
conformation,which
promotes
condensation of
bound ADP + P to
form ATP;and the empty site becomes
a -ADP site, which
loosely binds ADP+
P entering from the
solvent.

Subunidad-

rotacin

biotina

Yoshida y Kinosita

Los valores de consenso para el nmero de protones

bombeados por par de electrones son 10 para NADH y 6 para
succinato. El valor experimental ms ampliamente aceptada
para el nmero de protones necesarios para impulsar la sntesis
de una molcula de ATP es 4, de las cuales 1 se utiliza en el
transporte de P 1, ATP y ADP travs de la membrana
mitocondrial

Fuerza originada por protones energiza

transporte activo

atractilosida

Sistemas de transporte indirectamente llevan el NADH

citoslico dentro de las mitocondrias por Oxidacin

About 2.5 molecules of ATP are generated as this pair of electrons passes to O
.

Liver, kidney, and heart mitochondria

NADH dehydrogenase

El msculo esqueltico y el cerebro utilizan un sistema de transporte

NADH diferente, el sistema de transporte 3-fosfato glicerol

Se diferencia del transporte

malato-aspartato en que
entrega los equivalentes
reductores desde NADH a
ubiquinona y por lo tanto en
Complejo III, no Complejo I,
proporcionando
slo
suficiente
energa
para
sintetizar 1,5 molculas de
ATP por par de electrones.

The mass-action ratio of the ATP-ADP system, [ATP]([ADP][P]). Normally this

ratio is very high, so the ATP-ADP system is almost fully phosphorylated. When
the rate of some energy-requiring process (protein synthesis, for example)
increases, the rate of breakdown of ATP to ADP and Pi increases, lowering the
mass-action ratio. With more ADP available for oxidative phosphorylation, the
rate of respiration increases, causing regeneration of ATP. This continues until
the massa ction ratio returns to its normal high level, at which point respiration
slows again
i

Fosforilacin Oxidativa es
regulada por las necesidades
energticas de la clula

[ ATP]

/ ([ ADP] [ Pi])
Gasto de ATP

+ ADP disponible
respiracin

ATP

La mayora de los mamferos recin nacidos,

incluidos los humanos, tienen un tipo de tejido
adiposo llamado tejido adiposo marrn, no sirve
para producir ATP, pero para generar calor para
mantener caliente el recin nacido

Hibernating animals also depend on the activity of uncoupled

BAT mitochondria to generate heat during their Long dormancy

And the rotary motion of

bacterial agella is provided by
proton
turbines,molecular
rotary motors driven not by ATP
but
directly
by
the
transmembrane electrochemical
potential
generated
by
respiration-linked
proton
pumping . It seems likely that the
chemiosmotic
mechanism
evolved
early,
before
the
emergence of eukaryotes.

Mutaciones en genes mitocondriales causa

enfermedades
Encefalomiopatas mitocondriales: encefalopata y lesiones
musculares
Neuropatia optica: Mutacin puntual (Arg aHis) en el
Complejo I

The human mitochondrial chromosome contains 37 genes (16,569 bp), including

13 that encode subunits of proteins of the respiratory chain; the remaining genes
code for rRNA and tRNA molecules essential to the protein-synthesizing
machinery of mitochondria. The great majority of mitochondrial proteinsabout
900 different typesare encoded by nuclear genes, synthesized on cytoplasmic
ribosomes, then imported into and assembled in the mitochondria