UNIVERSIDAD TCNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERA EN ALIMENTOS

INGENIERIA BIOQUMICA
MDULO OPTATIVO II
Docente: Dra. Nahir Dugarte
Ayudante: Alex Pastua
Estudiante: Cristina Guevara

Semestre: 6to BQ
Fecha de entrega: 28-06-2015

Tema:
CROMATOGRAFA DE CAPA FINA.
1.-DATOS OBTENIDOS Y RESULTADOS
Tabla1. Distancia recorrida (solventes)
Cafena y analgsico

Colorantes

Solvente 1
2.8 cm
3.1 cm
(1-Butanol:cido Actico: Agua: Hexano)
Solvente 2
2.7 cm
2.6 cm
(Butanol : Etanol : Amoniaco)
Elaborado por: Guevara, C (2015)
Fuente: Lab. Mdulo II. FCIAL. UTA.
Tabla2. Distancia recorrida (estndar de cafena y analgsico)
Solvente 1

Solvente 2

Muestra patrn

2.7 cm

2.2 cm

Analgsico.

2.7 cm

2.2 cm

Elaborado por: Guevara, C (2015)

Fuente: Lab. Mdulo II. FCIAL. UTA.
Tabla3. Distancia recorrida por los colores (Solvente 1)
Colorantes
RC
RF
AM
M
Elaborado por: Guevara, C (2015)
Fuente: Lab. Mdulo II. FCIAL. UTA.

MEDICIO
N
2.7 cm
2.7 cm
1.5 cm
2.7 cm

Tabla4. Distancia recorrida por los colores (Solvente 2)

Colorantes
RC
RF
AM
M
Elaborado por: Guevara, C (2015)
Fuente: Lab. Mdulo II. FCIAL. UTA

MEDICIO
N
1.7 cm
1.8 cm
1.8 cm
2 cm

Calculo del RF

RF =

2,7 cm
3,1 cm
RF =0,8710
Tabla5. RF (estndar de cafena y analgsico)

Solvente 1
Muestra patrn
0,8710
Cafena en la pastilla
0,8710
Elaborado por: Guevara, C (2015)
Fuente: Lab. Mdulo II. FCIAL. UTA.

Solvente 2
0,6875
0,6875

Tabla6. RF de colores (Solvente 1)

Colorantes

Medicin

RC

0,8710

RF

0,8710

AM

0,4839

0,8710

Elaborado por: Guevara, C (2015)

Fuente: Lab. Mdulo II. FCIAL. UTA.

Tabla7. RF de colores (Solvente 2)

Colorantes
RC
RF
AM
M
Elaborado por: Guevara, C (2015)

Medicin
0,5313
0,5625
0,5625
0,6250

Fuente: Lab. Mdulo II. FCIAL. UTA.

2.- DISUCISN.
En la tabla 1 se identific la polaridad de los eluyentes en la lmina de slice, debido a
que esta es una sustancia muy polar tiende a atraer en mayor medida a los componentes

ms polares, por lo que al realizar la cromatografa se identific que el eluyente ms

polar fue la muestra 1, la cual est compuesta por 1-Butanol: cido Actico: Agua:
Hexano (4:3:5:1), la muestra 2 tambin se present polaridad pero en menor cantidad.
En la tabla 2, 3 y 4 se estableci que los eluyentes con mayor polaridad arrastraron los
compuestos del patrn de cafena, analgsico (Aspirina) y colorantes ms fcilmente,
as con el eluyente 1 las dos sustancias recorrieron 2,7 cm cada una, mientras que con el
eluyente dos fue de 2,2 cm. De igual forma en los colorantes se identific que los
compuestos se muevan ms rpidamente, debido a que segn Yerga, 2010 el eluyente
con mayor polaridad estar ms atrado por el soporte y los componentes sern ms
libres de moverse mejor.
El anlisis de los colorantes mostr que el RF por arriba de 0,5 nos indica que la
relacin es buena, por lo cual la polaridad del eluyente es la adecuada para el anlisis de
la cafena y de los colores presentes en el rojo Congo y rojo fenol, mientras que el azul
de metileno presento mayor afinidad con el eluyente 2,
De acuerdo con el RF de la cafena presente en el analgsico as como en la muestra
patrn de 0,8710 indic una relacin alta entre la cafena con la mezcla del solvente 1,
el cual sera el ms indicado para un anlisis cualitativo de la cafena presente en
analgsicos de venta comercial.
3.- CUESTIONARIO
Indique la clasificacin de la cromatografa de acuerdo al estado fsico del
eluyente y del mecanismo de separacin.
La cromatografa en papel.- Es un proceso muy utilizado en los laboratorios para
realizar unos anlisis cualitativos ya que pese a no ser una tcnica muy potente no
requiere de ningn tipo de equipamiento. La fase estacionaria est constituida
simplemente por una tira de papel filtro. La muestra se deposita en un extremo
colocando pequeas gotas de la solucin y evaporando el disolvente. Luego el
disolvente empleado como fase mvil se hace ascender por capilaridad.
La cromatografa en capa fina.- Es una tcnica cromatografa que utiliza una placa
inmersa verticalmente. Esta placa cromatografa consiste en una fase estacionaria
polar (comnmente se utiliza slice gel) adherida a una superficie slida. La fase
estacionaria es una capa uniforme de un absorbente mantenido sobre una placa, la
cual puede ser de vidrio, aluminio u otro soporte.
Cromatografa de lquidos.- es una tcnica de separacin y no debe confundirse
con una tcnica cuantitativa o cualitativa de anlisis. Es una de las tcnicas
analticas ampliamente utilizadas, la cual permite separar fsicamente los distintos
componentes de una solucin por la adsorcin selectiva de los constituyentes de una
mezcla.
La cromatografa de gases.- es una tcnica cromatografa en la que la muestra se
volatiliza y se inyecta en la cabeza de una columna cromatografa. La elucin se
produce por el flujo de una fase mvil de gas inerte. A diferencia de los otros tipos
de cromatografa, la fase mvil no interacta con las molculas del analito; su nica
funcin es la de transportar el analito a travs de la columna.
La cromatografa de fluidos supercrticos (SFC).- es una tcnica hbrida entre la
cromatografa de gases (GC) y la HPLC, que combina lo mejor de ambas tcnicas.
Esta tcnica es importante porque permite la separacin de mezclas en las que no es

adecuada la aplicacin de la GC ni de la HPLC. En concreto, se aplica a compuestos

no voltiles o trmicamente inestables que no pueden ser separados mediante GC, o
aquellos que contienen grupos funcionales que imposibilitan su deteccin en HPLC.
(Gonzales, 2001)

En qu consisten las fuerzas propulsoras y las fuerzas retardantes en

cromatografa?
Las fuerzas propulsoras actan para hacer mover las sustancias desde su punto de
origen desplazarlas en la direccin del flujo del solvente.
Las fuerzas retardantes actan para impedir el movimiento de las sustancias
arrastrndolas fuera del solvente de flujo de regreso al papel (Cceres, 2014).
Qu es el RF?
El ltimo punto alcanzado por el disolvente en su avance se denomina frente del
disolvente. Puede usarse como punto de referencia para expresar las distancias
relativas recorridas por las diferentes sustancias en un cromatograma. El smbolo
utilizado para designar esta distancia relativa es Rf y se define mediante:
Distancia recorrida por el compuesto desde el origen
Rf =
Distancia del origen al frente del disolvente
Como el denominador es siempre mayor que el numerador en Rf debera ser un
decimal. Por razones de conveniencia se suele expresar como un porcentaje.
As un Rf de 50 indicara que el compuesto avanzo la mitad de la distancia del frente
del disolvente.
El valor del Rf Depende del eluyente?
Debido a que el eluyente lleva el producto qumico hasta la placa, el eluyente
utilizado en particular tambin tendr un impacto sustancial en el valor del factor de
retencin de la sustancia qumica. Un eluyente que tiene una interaccin ms fuerte
para un determinado producto qumico superar ms fcilmente cualquier afinidad
del qumico para la capa absorbente, y mover ese qumico ms lejos en un
determinado perodo de tiempo. Las mezclas de eluyentes tambin pueden tener
efectos diferentes en funcin de la proporcin de cada eluyente.
(Willard, 2010)

Qu es el TR?
TR= Tiempo de retencin.
Corresponde al tiempo transcurrido desde que se inyecta la muestra en el
sistema.
(Smith, 2009)

Explique las razones por las cuales unos solventes son ms polares que
otros. Considerar los solventes utilizados en la prctica.
La polaridad de un disolvente al parmetro que mide su polaridad y le confiere
propiedades de solubilizacin de diferentes solutos. En general, las reacciones
qumicas tienen lugar en fase homognea, ya que, para que dos especies entren
en contacto, deben estar en la misma fase.
(Willard, 2010)

Por qu se dice que la cromatografa en capa fina es un criterio parcial y

no total de identificacin?
Porque permite separar una mezcla en sus componentes principales sin embargo
no se puede caracterizar los diferentes compuestos sin embargo solo el posible
cuantificar su RF e identificar la afinidad del compuesto con el eluyente.
(Sharapin, 2000)

Cul es la importancia y las aplicaciones de cromatografa de capa fina?

La cromatografa de capa fina es un mtodo muy til, rpido y barato que se
puede utilizar principalmente para:
Identificacin de alguna sustancia conocida en una mezcla por su comparacin
con un patrn de la sustancia pura.
Medir el grado de pureza de una muestra, si existen varias manchas en el
cromatograma, es seal de que existen varios componentes en la muestra.
Obtener una medida semi cuantitativa de algn componente. Pichando la
misma cantidad en la placa cromatografa, cuanto mayor sea la mancha obtenida
en el cromatograma, la concentracin de esa sustancia ser mayor.
(Bols, 2007)
Qu significa que una sustancia tenga: Rf menor a 0.5, mayor a 0.5 e igual
a 0.5?
a) Rf<0.5 La sustancia el muy soluble en el disolvente empleado y que es poco
polar.
b) Rf=0.5 La solubilidad en el disolvente empleado medio y que es polar.
c) Rf>0.5 Poco soluble en el disolvente empleado porque corri muy poco y que
es muy polar a comparacin del disolvente empleado
(Durn, 2008)
Segn lo realizado en la prctica cul ser el resultado de los siguientes
errores en cromatografa en capa fina?
a. -Aplicacin de solucin muy concentrada
La muestra se obtendra con una mayor coloracin dificultando la
identificacin de las fases a obtener.
b. -Utilizar eluyente de alta polaridad
Que disolvera a la sustancia empleada y de igual forma dejara mancha
en toda la cromatoplaca.
c. -Emplear gran cantidad de eluyente en la cmara de cromatografa
La nuestra se diluir demasiado lo que generara un error considerando el
tamao de nuestra placa debemos considerar una cantidad moderada para
evitar el desplazamiento innecesario de la muestra.
4.- CONCLUSIONES
Se aplic cromatografa de capa fina (CCF) para muestras de analgsicos y colorantes
lo que mostr un RF alto para la relacin de las dos mezclas de solventes con Aspirina
presente en el analgsico de venta comercial de 0,8710 para el solvente 1 y 0,6875 para
el segundo solvente, identificando que la sustancia es muy soluble en los disolventes
empleados y es poco polar.
Se estableci la afinidad de las dos mezclas de solventes con los colorantes rojo
Congo, rojo fenol y azul de metileno el cual fue de 0,8710 con la mezcla de 1-Butanol,
cido actico, Agua y Hexano.
Se compar una muestra de un patrn de cafena con un analgsico comercial lo que
permiti comprobar que el compuesto desplazado en la parte inferior por la revelacin

de la cromatoplaca bajo la luz UV y con yodo presentaba cafena en su composicin

debido a que el desplazamiento de ambos compuestos fueron iguales.
5.- BIBLIOGRAFA:
Ackman, R. G.; Mcleod, C. A.; Banerjee, A. K. (1990). An Overview Of
Analyses By Chromarod-Latroscan Tlc-Fid. Jpc. Journal Of Planar
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Bols, J., Et Al.(2007). Nueva Tcnica De Elucin En La Cromatografa En
Capa Fina Cuantitativa. Cien. Ind. Farm, Vol. 9, P. 11-277.
Cceres, W. (2014). Cromatografa de Capa fina. Recuperado el, 01/07/2015, de,
https://es.scribd.com/doc/198465151/Cromatografia-Papel-Capa-Fina-1
Gonzlez, Antonio G., Et Al. (2001). Nuevas Fuentes Naturales De Sapogeninas
Esteroidales Ix. Solanum Vespertilio Ait. En Anales De Qumica. P. 433-439.
Maestro Durn, R., Et Al. (2008). Biodegradacin De Los Compuestos
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Randerath, Kurt; De Los Ros, Eduardo Garca; De Los Ros, Helga Garca.
(1999).Cromatografa De Capa Fina. Urmo.
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Smith, I.; Feinberg, J. G. (2009). Cromatografa Sobre Papel Y Capa Fina.
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Willard, Hobart Hurd; Merritt, Lynne L.; Dean, John A. (2010). Mtodos
Instrumentales De Anlisistabla N1. Pesos De Obtenidos
Yerga, D. (2010). Cromatografa de capa fina. Recuperado el, 01/07/2015, de,
http://es.slideshare.net/yerga/cromatografia-de-capa-fina