Principio de la Espectrofotometra

En la espectrofotometra se aprovecha la absorcin de radiacin

electromagntica en la zona del ultravioleta y visible del espectro. La muestra
absorbe parte de la radiacin incidente en este espectro y promueve la
transicin del analito hacia un estado excitado, transmitiendo un haz de menor
energa radiante. En esta tcnica se mide la cantidad de luz absorbida como
funcin de la longitud de onda utilizada. La absorcin de las radiaciones
ultravioletas, visibles e infrarrojas depende de la estructura de las molculas, y
es caracterstica de cada sustancia qumica.

La espectrofotometra ultravioleta-visible utiliza haces de radiacin del

espectro electromagntico, en el rango UV de 180 a 380 nm, y en el de la luz
visible de 380 a 780 nm, por lo que es de gran utilidad para caracterizar los
materiales en la regin ultravioleta y visible del espectro.

Ley de Beer[editar]
La Ley de Beer afirma que la cantidad de luz absorbida por un cuerpo depende
de la concentracin en la solucin.

Por ejemplo, en un vaso de vidrio tenemos agua con azcar disuelta y en otro
vaso tenemos la misma cantidad de agua pero con mayor cantidad de azcar
en solucin. El detector es una celda fotoelctrica, y lo que se mide es la
concentracin de la solucin de azcar.

Segn la ley de Beer, si hiciramos que un rayo de luz atravesara el primer

vaso, la cantidad de luz que saldra del otro lado sera mayor que si
repitiramos esto en el segundo, ya que en este ltimo las ondas
electromagnticas chocan contra un mayor nmero de tomos o/y molculas y
son absorbidos por estos.1

Ley de Lambert[editar]
La Ley de Lambert dice que la cantidad de luz absorbida por un objeto depende
de la distancia recorrida por la luz.

Por ejemplo, retomando el ejemplo de los vasos, pensemos que ambos tienen
la misma cantidad de agua y la misma concentracin de azcar; pero el
segundo tiene un dimetro mayor que el otro.

Segn la ley de Lambert, si hiciramos que un rayo de luz atravesara el primer

vaso, la cantidad de luz que saldra del otro lado seria mayor que si
repitiramos esto en el segundo, ya que en este ltimo las ondas
electromagnticas chocan contra un mayor nmero de tomos o/y molculas y
son absorbidos por estos, tal como se explic en la ley de Beer.

Ley de Bouguer-Beer-Lambert[editar]
Una ley muy importante es la de Bouguer-Beer-Lambert (tambin conocida
como ley de Lambert Bouguer y Beer), la cual es solo una combinacin de las
citadas anteriormente.

Transmitancia y absorcin de las radiaciones[editar]

Por las leyes mencionadas anteriormente, al hacer pasar una cantidad de

fotones o de radiaciones hay una prdida que se expresa con la ecuacin:

It/Io=T-kdc''

donde It es la intensidad de luz que sale de la cubeta y que va a llegar a la

celda fotoelctrica (llamada radiacin o intensidad transmitida); Io es la
intensidad con la que sale al atravesar la celda (radiacin intensidad
incidente), y la relacin entre ambas (T) es la transmitancia.

En el exponente, el signo negativo se debe a que la energa radiante decrece a

medida que el recorrido aumenta. El superndice k es la capacidad de la
muestra para la captacin del haz del campo electromagntico, d es la longitud
de la cubeta de espectrofotometra que recorre la radiacin, y c es la
concentracin del soluto en la muestra ya ubicada en la cubeta.

La ecuacin simplificada de la ley de Beer-Lambert

A = .d.c

comprende la mnima ecuacin que relaciona la concentracin (c), la

absorbencia de la muestra (A), el espesor recorrido por la radiacin (d) y el
factor de calibracin (). El factor de calibracin relaciona la concentracin y la
absorbancia de los estndares.

La absorcin (o absorbancia) es igual a A, que es el logaritmo recproco de la

transmitancia:2

A= log 1/T

lo que es igual a:

A= -log T

Las ecuaciones mencionadas de las leyes son vlidas solo y solo si:2

la radiacin incidente es monocromtica;

las especies actan independientemente unas de otras durante la absorcin;
la absorcin ocurre en un volumen de seccin trasversal uniforme.
Aplicaciones[editar]
Las aplicaciones principales son:

determinar la cantidad de concentracin en una solucin de algn compuesto

utilizando las frmulas ya mencionadas;
ayudar en la determinacin de estructuras moleculares;
la identificacin de unidades estructurales especficas, ya que estas tienen
distintos tipos de absorbancia (grupos funcionales o isomeras);
determinar constantes de disociacin de indicadores cido-base.

Tipos de espectrofotometra[editar]
Espectrofotometra de absorcin molecular VIS-UV. 13,
Espectrofotometra de absorcin molecular IR.15.
Espectrofotometra de absorcin y emisin atmica.
Espectrofotometra con atomizadores electrotrmicos.
Espectrofotometra de emisin con plasma.
Espectrofotometra de fluorescencia molecular.
Vase tambin[editar]
Colorimetra
Colormetro
Espectrofotmetro
Espectrofluorimetra
Qumica
Anlisis qumico
Espectro electromagntico