AO DE LA DIVERSIFICACIN PRODUCTIVA Y FORTALECIMIENTO DE LA

EDUCACIN

UNIVERSIDAD NACIONAL DE UCAYALI

FACULTAD DE MEDICINA
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
INFORME DE PRACTICA N 01
CURSO

BIOLOGIA CECLUAR Y MOLECULAR

DOCENTE

BILOGO WASHINTONG ORTIZ URIBE

ALUMNOS

DVILA RIOS VERONICA JIANINA

DOMINGUEZ NAUPAY ROBERTO CARLOS
DUFFOO DEL CASTILLO DANITZA GERALDINE

ESCOBEDO ROJAS ANDRIW ROXXETH

ESQUIVEL HERNANDEZ OSCAR JOSE
CICLO

PUCALLPA - 2015

INFORME DE LABORATORIO 001

I.

INTRODUCCIN:

Las biomolculas orgnicas son las molculas que constituyen a los

seres vivos, a la vez son sintetizadas nicamente por estos. Sus
principales componentes son: Carbono, Hidrgeno, Oxgeno y
Nitrgeno. Las biomoleculas orgnicas se agrupan en cuatro grandes
tipos: Glcidos, Lpidos, Protenas y cidos Nucleicos.
Los Glcidos (azcares) son una fuente primaria de energa para los
seres vivos. Los lpidos (grasas o aceites) desempean papeles
importantes en el almacenamiento de energa, no se disuelven en
agua. Las protenas son casi todas las enzimas, catalizadores de
reacciones metablicas de las clulas. Por ltimo los cidos nucleicos
quienes son las macromolculas que desempean la funcin ms
importante para la vida; contener la informacin gentica.
Las vitaminas son compuestos heterogneos imprescindibles para la
vida, que al ingerirlos de forma equilibrada y en dosis esenciales
promueven el correcto funcionamiento fisiolgico. Hay distintos tipos
que cumplen funciones diferenciadas, por ejemplo la vitamina C o
cido Ascrbico es un antioxidante ideal, por lo que es esencial para
el desarrollo y mantenimiento del organismo
En esta prctica de laboratorio se identific las protenas, lpidos,
carbohidratos, cidos nucleicos y vitaminas a travs de diferentes
experimentos que explicaremos en el desarrollo de este informe.

 Materiales personales y generales para los experimentos:

II.

Bata de laboratorio
Mascarilla
Guantes
Plumn indeleble
Gradilla
Pipeta

EXPERIMENTO 1 - CARBOHIDRATOS
II.1. Identificacin de glcidos reductores (Reaccin de Fehling)

Materiales:
Galactosa (glcido A)
Sacarosa (glcido B)
2 tubos de ensayo
Fehling A y Fehling B
Mechero de alcohol
Pinza de madera

Mtodo:
Poner en un tubo de ensayo 2ml de glcido A y en
otro tubo 2ml de glcido B.

Glcido A

Glcido B

 Aadir a cada tubo 0,5 ml de Fehling A y 0,5 ml de

Fehling B.

Ca
entar a
la
llama

moviendo
constantemente y observar el resultado

Resultados:
REACCIN CON FEHLING

GLCIDO
POSITIVO +
(Reductor)

GLCIDO A
(GALACTOSA)
GLCIDO B (SACAROSA)

NEGATIVO
(no
reductor)
x

COLOR AL CALENTAR A LA
LLAMA
LADRIL
NO CAMBIA DE
LO
COLOR

TUBO DE ENSAYO 1
El resultado obtenido en el tubo de
ensayo con el glcido A (galactosa)
se observ un cambio de color azul a
un color marrn parecido a ladrillo
poniendo el tubo de ensayo a calentar
en el mechero, demostrando que la
prueba de fehling dio un resultado
positivo. El resultado final demostr q
es un azcar reductor.

TUBO DE ENSAYO 2
El resultado que se obtuvo en el tubo
con el glcido B (sacarosa) no se
observ ningn cambio en el color al
calentar en el mechero, demostrando
que la prueba de fehling dio un
resultado negativo demostrando que
no es un azcar reductor.

Discusin :
Segn el libro de Bioqumica escrito por Donald Voet, Judith G. Voet
Ed. Mdica Panamericana, los azcares reductores son aquellos que
poseen su grupo carbonilo libre y que a travs del mismo pueden
reaccionar como reductores con otras molculas.
Segn el libro Bioqumica de Laguna escrito por Jos Laguna y Enrique
Pia G. 6. Ed Editorial Manual Moderno, el reactivo de Fehling es una
solucin compuesta de dos partes, Fehling A (Sulfato cprico cristalizado
y agua destilada) y Fehling B (Sal de Seignette; solucin de hidrxido
de sodio al 40% y agua) que se utiliza como reactivo para la
determinacin de azcares reductores.
El resultado de la prctica es ptimo, conocemos que la experiencia con
el reactivo de Fehling se fundamenta en el poder reductor del grupo
carbonilo en las aldosas, pues tienen la estructura qumica abierta
necesaria para actuar como agentes reductores, lo que se evidencia con
la formacin de un precipitado rojo ladrillo (xido cuproso).
Discutiendo los resultados positivos, que se dio en la galactosa (glcido
A); este reactivo, reacciona principalmente con los aldehdos porque
tienen un grupo carbonilo ms expuesto, que le da el carcter reductor,
y existe la presencia del precipitado rojo ladrillo (xido cuproso).

Por otro lado, la sacarosa (glcido B) ;que no nos dio coloracin, ya que
es un azcar constituida por una molcula de glucosa y de fructosa
(disacrido) , tiene un enlace entre el primer carbono de la glucosa y el
segundo carbono de la fructosa, y no queda grupos reductores
disponibles. Al no ser reductor, la prueba de Fehling es negativa, y por lo
que se intuye, no posee el grupo carbonilo apto y libre, necesario como
para reaccionar con el reactivo Fehling, y a ebullicin, no se observ
ningn cambio.
Conclusiones:

1.

2.

3.

4.

-A partir de la discusin, hemos llegado a la conclusin que el reactivo

de Fehling solo responde a los azucares reductores (monosacridos y
algunos disacridos), los cuales dan un color rojo ladrillo al someterlos al
calor.
-El reactivo de Fehling al reaccionar con azucares reductores es til para
demostrar la presencia de glucosa en la orina.
Cuestionario:
Cul o cules son los azcares reductores? Fundamenta
- Los azcares reductores son los monosacridos y muchos disacridos,
(excepto Sacarosa y Trehalosa).
Son reductores porque poseen un grupo funcional carbonilo libre y que a
travs del mismo pueden reaccionar como reductores con otras molculas
como consecuencia que todos los monosacridos y algunos disacridos son
azucares reductores, ya que al menos tienen un OH libre.
Quin se oxida y quien se reduce en la reaccin?
- Solo se oxida y se reduce el glcido A (galactosa) porque el reactivo de
Fehling se fundamenta en el poder reductor del grupo carbonilo de un
aldehdo. Este se oxido a un cido carboxlico y reduce la sal de cobre (II) en
medio alcalino a oxido de cobre (I), que forma un precipitado de color rojo.
Para qu sirve el tartrato Na-K y el calor?
- El tartrato Na-K estabiliza al hidrxido de cobre, ya que en estas
condiciones es muy reactivo. Y el calor acelera la reaccin.
Qu resultado dara la reaccin de Fehling con maltosa? Y con
ribosa?
-Con maltosa dara un resultado positivo debido a que en enlace se
establece entre el grupo aldehdo de una molcula de glucosa y el otro OH
del carbono 4 de la otra. Queda entonces disponible el grupo aldehdo
(carbono 1) de esta otra molcula y, por consiguiente, la maltosa es un
azcar reductor.
-Con ribosa dara negativo debido a que no tiene poder reductor.
II.2. IDENTIFICACIN DE POLISACRIDOS (PRUEBA DE LUGOL)

PRUEBA DE LUGOL:
El Lugol es una sustancia (disolucin de yodo molecular I2 y yoduro
potsico KI en agua destilada) que se utiliza para detectar la presencia de

polisacridos como por ejemplo el almidn en alguna solucin, alimento o

donde sea. Su nombre proviene del apellido Lugol, un cientfico francs que fue
el primero en prepararla. Tambin se utiliza como colorante para preparar
muestras y verlas en el microscopio (las tie).

Materiales:
Solucin 1 (Almidn)
Solucin 2 (Glucosa)
2 tubos de ensayo
Lugol
Mechero

Mtodo:
Poner en un tubo de ensayo 2 ml de la solucin 1 y
en otro 2 ml de la solucin 2.
Aadir a cada uno de los tubos de ensayo una gota
de Lugol (Iodo 5g + 10g Ioduro Potsico csp 100ml).
Observar el resultado.

Resultados:

MTODO

RECCIN DEL
LUGOL

CARACTERISTICA

FUNDAMENTO

Positivo

La sustancia toma un
color
azul-violeta
caracterstico

Reacciona con
polisacridos

SUSTANCIA
SOLUCIN 1
(ALMIDN)

SOLUCIN 2
(GLUCOSA)

Negativo

La
sustancia
no
presenta
mayores
cambios
que
una
coloracin
amarillenta
muy tenue.

No reacciona
con azcares
simples

Solucin
1
Solucin
2

*Para comprobar que es una Interaccin Fsica

SOLUCION 1
ALMIDN TEIDO DE
AZUL VIOLCEO

AL CALENTAR A LA LLAMA
-EL COLOR IBA
DESAPARECIENDO.
AL FINAL SE VOLVI
INCOLORO

AL ENFRIARLO
-EL COLOR VOLVI,
PERO ERA MENOS
INTENSO (COLOR AZUL
CLARO)

Solucin 1 (Almidn) al
calentar en el mechero
Desaparicin del color

Solucin 1 al enfriarlo
en el grifo- recuperacin
del color azul violceo

DISCUSIN:
El autor Carlos H. Herrera R. manifiesta en su libro Qumica de Alimentos,
manual de laboratorio pagina 103, que la coloracin producida por el Lugol se
debe a que el yodo se introduce entre las espiras de la molcula de almidn.

Por lo tanto, no es una verdadera reaccin qumica, sino que se forma un

compuesto de inclusin que modifica las propiedades fsicas de esta molcula.
A comparacin de la autora Eufrosina Alba Gutirrez R. en su libro La qumica
en tus manos pagina 183, detalla que en solucin acuosa, la amilosa forma
estructuras helicoidales lineales y la amilopectina ramificadas, gracias a la
formacin de puentes de H entre los grupos OH de la glucosa y las molculas
de H2O. Si a una disolucin de almidn se le aade Iodo, esta toma un color
azul intenso. Esta caracterstica es especfica del almidn, debido a su
estructura, y se debe a la absorcin del Iodo por las cadenas helicoidales,
especialmente de la amilosa. Por tanto no es una reaccin qumica, sino una
interaccin fsica reversible por mtodos fsicos. Esto se puede comprobar
fcilmente, pues al calentar la mezcla, el color azul desaparece, y al enfriarla
vuelve a aparecer. Por otro lado, este cambio de color se debe a un proceso
fsico (el efecto ptico del yodo cuando se introduce en las hlices de la
amilasa), se puede calentar el tubo de ensayo, que tras aadir el Lugol, tiene
un color azul violceo. Con el mechero de alcohol: poco a poco ir perdiendo
ese color hasta volverse prcticamente incoloro (debido a que el calor
desnaturaliza la estructura helicoidal y desaparece el efecto ptico). Si
enfriamos el tubo en un grifo, volver a aparecer el color azul-violceo con
menos intensidad porque, al calentar el lquido, parte del yodo habr pasado a
la atmsfera.
Con respecto a la solucin 2 no present mayores cambios que una coloracin
amarillenta

muy

tenue y eso se debe a que el Lugol no reacciona con azcares simples como
la glucosa o
la fructosa.
CONCLUSIONES:

El mtodo del Lugol, viene hacer una reaccin fsica no qumica, en la

que se forma un compuesto de inclusin del yodo en el interior de las
hlices de la amilosa. Est inclusin es reversible y est condicionada
por la temperatura.
Al mezclar una solucin con una gota de Lugol y si su color que toma
es azul violceo, es que el Lugol ha reaccionado con el almidn, es
decir, no se ha descompuesto, pero si el color que toma es el naranja,
propio del Lugol, significa que ya no hay almidn, sino glucosa.
Con el tiempo, se ha descubierto que el yodo de Lugol es til para
realizar varias pruebas. Desde pruebas de almidn, pasando por
pruebas de clulas vaginales con cncer, hasta pruebas de funcin
de la tiroides, el yodo de Lugol ha servido tanto para diagnsticos
como para prevenciones.

 CUESTIONARIO:

1. Cul de las dos soluciones contiene almidn?

La solucin que contiene almidn es la solucin 1, ya que dio como
resultado positivo a la reaccin del Lugol (se ti de azul violceo) a
diferencia de la sustancia 2.
2. El almidn dara positiva a la reaccin de Fehling?
El almidn no dara positiva la reaccin de Fehling, ya que esta sustancia
solo sirve para identificar azcares reductores. El almidn es un
polisacrido, que por s solo no presenta carcter reductor debido a que
sus glucosas; al estar unidas, bloquean sus extremos reductores.
3. La celulosa dara positiva la prueba del Lugol?
- No reaccionaria de manera positiva ya el Lugol tie el almidn,
solamente la amilosa que es la forma helicoidal del almidn, debido a la
atraccin fsica que tiene el yodo a penetrar en las curvas de la
hlice. Por otro lado, la celulosa solo tiene forma lineal y el yodo no
acta fsicamente sobre ella.
4. El azl que aparece tras calentar y enfriar es igual de intenso?
Por qu?
-No es igual de intenso. El cambio de color del almidn con el Lugol se
debe a un proceso fsico (el efecto ptico del yodo cuando se introduce
en las hlices de la amilasa), se puede calentar el tubo de ensayo, que
tras aadir el Lugol, tiene un color azul oscuro. Con el mechero de
alcohol: poco a poco ir perdiendo ese color hasta volverse
prcticamente incoloro (debido a que el calor desnaturaliza la estructura
helicoidal y desaparece el efecto ptico). Si enfriamos el tubo en un
grifo, volver a aparecer el color azul-violceo con menos intensidad
porque, al calentar el lquido, parte del yodo habr pasado a la
atmsfera.
5. Qu es una interaccin fsica?
Una interaccin fsica se puede definir como una accin que se ejerce
recprocamente entre objetos, agentes, fuerzas, etc.; la cual produce
como resultado un cambio en el estado de la materia sin cambiar su
composicin qumica, es decir es la misma materia pero en diferente
estado.
---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------BIBLIOGRAFIA:

Libro de Bioqumica de Donald Voet, Judith G. Voet Ed. Mdica

Panamericana
Bioqumica de Laguna por Jos Laguna y Enrique Pia G. 6. Ed
Editorial Manual Moderno
Carlos H. Herrera R.; Nuria Bolaos V.; Giselle Lutz C., Qumica de
Alimentos, manual de laboratorio pgina 103.
Eufrosina Alba Gutirrez R.; Olivia Rodrguez Z.; Catalina Carmona T.,
La qumica en tus manos pgina 183.
Prcticas de Bioqumica Descriptivo, Eva Irma Vejar Rivera, pgina
86.

--------------------------------------------------------------------------------------------------------------

III.

EXPERIMENTO 2 - LPIDOS
III.1. Reaccin de Saponificacin
Materiales:
1 tubo de ensayo
Aceite
Hidrxido de Sodio (NaOH) al 20%
Bao Mara de Laboratorio

Mtodo:
Aadir aceite (sin pipetearlo) a un tubo de ensayo,
hasta una altura de aproximadamente 2cm.
Aadir 4ml de NaOH al 20% (p/v) en agua.
Agitar enrgicamente.
Calentar al bao Mara por 20 minutos y observar
qu ocurre.

Resultados:

DESPUS DE 20 min DE CALENTAR AL

BAO MARA

SE IDENTIFICA 3 FASES

* Fase Inferior: Contiene una

solucin sosa sobrante con la
glicerina formada.
*Fase Intermedia: Fase
semislida que es el jabn
formado

*Fase Superior: Se observa e

aceite inalterado.

Aceite

SAPONIFICACION
Si presenta saponificacin dado a

con

que el NaOH

NaOH

al entrar en contacto

al con los lpidos que tienen cidos

20%
Aceite

grasos produjo jabn. (Sales sdicas)

No presenta saponificacin dado a

con

que las grasas son solubles con

acetona

disolventes orgnicos, por lo tanto

se observ una sola fase.

Discusin:
Segn el libro Bioqumica de Harper. La reaccin de saponificacin
consiste en la descomposicin de las sustancias grasas cuando se las
hierve con una solucin de un hidrxido fuerte, como el de sodio o el de
potasio.

Este fenmeno es comparable a la hidrlisis pero, en lugar de quedar

libres los cidos, se convierten en las sales del metal del hidrxido
empleado. Estas sales son los jabones.
Como los cidos predominantes en las grasas son el palmtico, el
esterico y el oleico, se formaran mezclas de palmitatos, estearatos y
oleatos de sodio o de potasio, que son los que componen la mayor parte
de los jabones.
Las reacciones de saponificacin no son reversibles ya que es una
reaccin qumica.
Formacin de jabones: La hidrlisis alcalina de steres de cidos
grasos y glicerol (glicridos) conduce a la formacin de sales de los
cidos grasos correspondientes. Estas sales constituyen los conocidos
jabones. El trmino saponificacin, que originariamente designaba la
preparacin artesanal del jabn por tratamiento con sosa de una grasa
animal o vegetal, se generaliz a la hidrlisis bsica de un ster.
Puesto que el aceite no es miscible con el agua, la saponificacin por
accin de la sosa acuosa implica la existencia de un sistema de dos
fases que ralentiza considerablemente la reaccin. Por ello, el proceso
puede acelerarse empleando un catalizador de transferencia de fase que
acta transportando el in hidrxido (OH-)desde la fase acuosa hasta la
fase orgnica, al cambiar el contra-in Na+ por otro de gran lipofilia
(R4N+)
Podemos observar que la formacin de los jabones se da por un proceso
muy complejo. En el experimento se pudo observar muy claramente la
formacin de tres fases al someter a un aceite y al NaOH a una
determinada temperatura.
Las grasas reaccionan en caliente con el hidrxido sdico o potsico
descomponindose en los dos elementos que la forman: glicerina y los
cidos grasos. Estos se combinan con los iones sodio o potasio del
hidrxido para dar jabones, que son en definitiva las sales sdicas o
potsicas de los cidos grasos.

 Conclusiones:
Tras la realizacin de la prctica, concluimos que los
jabones se forman mediante una reaccin denominada
saponifi cacin. Esta re accin consiste en una hidrlisis en
medio bsica de las grasas, que, de este modo, se
descomponen en sales de potasio o sodio (jabones) y glicerina.
Las grasas son insolubles en agua, pero se dispersan
formando micelas cu ando se encuentran en un medio bsico.
Los jabones son sales de potasio o sodio, que emulsionan la
grasa rodeando una microg ota: las cadenas hidrocarbonad as
(hid rfobas) se orientan hacia la grasa, mientras que los
grupos carb oxilo (hid rfi los), se disponen hacia el agua. As los
jabones ayudan a dispersar las grasas de la piel o los tejidos,
junto con los restos de la suciedad adheridos a ellas, siendo
arrastrados por el agua.

Al primer minuto de ingresada la mezcla

mezcla a bao

A los 10 min de ingresada la

al bao Mara.
las distintas fases

Mara. Se pueden observar

que se crean.

CUESTIONARIO:
1. Existen lpidos saponificables en el frasco de aceite?
-S, ya que mediante el experimento realizado hemos podido obtener jabn.
Esto se pudo dar debido a que el NaOH (lcali) al entrar en contacto con un
lpido que contiene cidos grasos nos da como resultado jabn y glicerina.
2. A qu corresponde cada fase de las que aparecen en el tubo?
-Se forman 3 fases:
* Fase Inferior: Contiene una solucin sosa sobrante con la glicerina formada.
*Fase Intermedia: Fase semislida que es el jabn formado
*Fase Superior: Se observa el aceite inalterado.
3. Por qu se da esa disposicin de fases?
-La disposicin de estas fases est distribuida debido a su densidad, la sosa
sobrante junto a la glicerina se encuentra en la parte inferior por ser ms
densa; por el contrario, la fase lipdica de aceite inalterado que es mucho
menos densa se encuentra en la parte superior. Y por ltimo estn los grumos
de jabn formados, estos se van a colocar en medio de estas dos debido a que
no completa del todo el aspecto slido que necesita.
4. Cmo se prepara la NaOH al 20% en agua?
-Se da de la siguiente manera:

100 ml
disolucin
Original.
}}
X ml de
disolucin
original

96 ml de
NaOH puro
20 ml de
NaOH en 100
ml de
disolucin
final

X=100x20/96=20,83 ml
de disolucin original para
disponer de NaOH al 20%

Para 100 ml de NaOH al 20%: 20,83 ml de NaOH al 96%

79,17 ml de agua

III.2. Solubilidad

Materiales:
2 tubos de ensayo
Cloroformo
Agua
Aceite

Mtodo:
Poner 2ml de aceite en dos tubos de ensayo.
Aadir a uno de ellos 2ml de agua y al otro 2ml de
ter u otro disolvente orgnico (cloroformo)
Agitar fuertemente ambos tubos y dejar reposar.
Observar los resultados.

Resultados:

TUBOS DE ENSAYO

ES SOLUBLE CON EL ACEITE?

SI

AGUA
CLOROFORMO

NO

Discusin:
Segn el libro Bioqumica de Horton escrito por H. Robert, la polaridad
determina si una sustancia es soluble en agua. Una sustancia polar es
una sustancia que tiene dos clases de polos, como un imn. Cuando otra
sustancia es tambin polar los dos polos de las sustancias se atraen y
consecuentemente las sustancias se mezclan.
En el experimento pudimos observar que los lpidos son insolubles en
agua. Esta insolubilidad en agua se debe a que la estructura qumica
bsica de los lpidos consiste en cadenas hidrocarbonadas con muchos
enlaces C-C y C-H. Estos enlaces no poseen polaridad y no existe
interaccin con las molculas de agua. Cuando se agitan fuertemente en
ella se dividen en pequesimas gotas formando una emulsin (mezcla
de dos lquidos inmiscibles de manera ms o menos homognea) de
aspecto lechoso, que es transitoria, pues desaparece en reposo por la
reagrupacin de las gotitas de grasa en una capa que, por su menor
densidad, se sita sobre el agua.

Por otra parte, el aceite es soluble en cloroformo por la razn de que

ambos compuestos son no polares, es decir, en sus molculas no se
presentan densidades de cargas opuestas, es neutra en su totalidad, sus
molculas no se atraen por fuerzas electrostticas.
Conclusiones:

A partir del experimento concluimos que las sustancias polares;

como el agua, se disuelven con otras sustancias polares y las
sustancias no polares; como el aceite se disuelven en sustancias
no polares como el cloroformo por afinidad electrosttica.
Es fundamental conocer esta propiedad de una sustancia ya que
te sirve para purificarla, para identificarla, para procesarla y para
utilizarla.
III.3. Prueba de Sudn III:

Materiales:
2 tubos de ensayo
Aceite
Sudn III
Tinta roja

Mtodo:
Disponemos en una gradilla dos tubos de ensayo,
colocamos en ambos tubos 2ml de una Muestra de
lpido (aceite)
Aadimos a uno 4 o 5 gotas de Sudn III y al otro
tubo 4 o 5 gotas de tinta roja.
Agitamos ambos tubos y dejamos reposar.

Resultados:

SUDAN III
TINTA ROJA

ES SOLUBLE CON EL ACEITE?

SI
NO

X
X
(Se asienta y no
se mezcla con
el aceite)

Discusin:
*Segn Watson J.D.et Molecular Biology of the
Gene, 4th Ed.A. Benjamin-cummings, Menlo Park,
CA la prueba de la tinticin de los aceites se debe

a que estn formados por el glicerol y el cido

graso, este tiene una propiedad antiptica al
poseer un lado polar y otro apolar.
Debido a esto la parte apolar seria la cadena
hidrocarbonada, por tanto insoluble en agua;
siendo la parte polar soluble en agua, la que forma
el extremo donde se encuentra el grupo carb oxilo
(-COOH), este carcter ayuda a que interactan
con la tincin de Sudan III, el cual es un colorante
lipfi lo (soluble en grasas). Por esa afi nidad a los
cidos grasos hace que la mezcla de stos con el
colorante se ponga de color rojo, mezclndose
totalmente y convirtindose en un colorante
especfi co utilizado para re velar la presencia de
grasas.
Por otra parte, la tinta roja no tiene interaccin
con los grupos funcionales del cido graso (no es
liposoluble), dando una mezcla heterognea.

Conclusin:
*Llegamos a la conclusin que la tincin del aceite
se debe a que estn formados por el glicerol y el
cido graso, este tiene una propiedad anfi p tica al
poseer un grad o polar y otro apolar. Este carcter
ayuda que interactan con la tinticin.
*El Sudn III sirve para identifi car la presencia de
lpidos, lo que es de suma importan cia ya que
permite observar si hay exceso de grasa en las
heces.

Proceso en el que se observa mediante pasos bien definidos como se da la tincin

del aceite y la muestra de lpidos a travs de la tcnica del Sudan III.

 Cuestionario
1.- Porque el Sudn III colorea los lpidos y la tinta no, qu
grupos interaccionan?
- Este resultado se debe a que el aceite y las grasas son un grupo
de compuestos orgnicos existentes en la naturaleza que consiste
en steres formados por tres molculas de cidos grasos y una
molcula del alcohol glicerina. De tal manera que el Sudan III
(C22H16N4O), lo reconoce y lo tie.
-La tinta roja no es soluble en grasas, por esta razn, el aceite no
se tie de rojo con la tinta puesto que no se mezclan, y la tinta se
deposita en el fondo.
2.- Qu pruebas bioqumicas se usan para identifi car
colesterol?
- Para identifi car coleste rol se usa la prueba del perfi l lipdico,
tambin denominad o lipidograma y perfi l de riesgo coron ario, el
cual mide lo siguiente:

Colesterol total: Que es la suma de los diferentes tipos de

colesterol.
HDL: lipoprotenas de alta densidad (a menudo denominadas
colesterol bueno)
Las lipoprotenas pueden considerarse el sistema de transporte de
la sangre de su hijo. Las lipoprotenas de alta densidad transportan
colesterol al hgado para su eliminacin.
LDL: lipoprotenas de baja densidad (a menudo denominadas
colesterol malo)
Las lipoprotenas LDL que se acumulan en el torrente sanguneo
pueden tapar los vasos sanguneos e incrementar el riesgo de
afecciones cardacas.
Triglicridos: que almacenan energa hasta que el organismo la
necesita. Si el cuerpo acumula demasiados triglicridos, los vasos
sanguneos se pueden tapar y provocar problemas de salud.

 BIBLIOGRAFIA

Molecular Biology of the Gene, 4th Ed.A. Benjamin-cummings,

Menlo Park, CA - Watson J.D.et
Bioqumica de Harpe r.
Bioqumica - Horton, H. Robert.

IV. EXPERIMENTO 3 PROTENAS

IV.1. Identificacin de Protenas (Reaccin de Biuret)

Materiales:
2 tubos de ensayo
Huevo
Agua
Hidrxido de sodio (NaOH) al 10%
Sulfato de Cobre al 5%
Preparacin de la muestra (ovoalbmina): En un
recipiente separar la clara del huevo, batirlo ligeramente y
aadir 5 veces su volumen con agua. La mezcla se filtra por
un embudo y ya est lista para usarse.
Mtodo:
En un tubo de ensayo poner 1ml de la sustancia
muestra
(ovoalbmina) y en el otro poner 1ml de agua.
Aadir a ambos 1ml de NaOH al 10%, mezclar e ir
aadiendo el sulfato de cobre al 5% gota a gota
(aprox. De 3 a 7).
Observa lo que ocurre
Resultados:

TUBOS DE ENSAYO

OVOALBMINA (TUBO DE

REACCIN CON NaOH al

10% + SULFATO DE COBRE
AL 5%
Toma color
Toma color
violeta
celeste
S
No

ENSAYO 1)
AGUA (TUBO DE ENSAYO 2)

No

TUBO DE ENSAYO
2
(AGUA)
TUBO DE
ENSAYO1
(OVOALBMINA

Discusin:
-Segn Atkins y Jones en el libro Principios de Qumica La reaccin de
Biuret es un mtodo general para la determinacin de protenas o
pptidos. Se basa en la reaccin del sulfato de cobre (CuSO4) con
compuestos que tengan dos o ms enlaces peptdicos, en un medio
alcalino. Est hecho de hidrxido potsico (KOH) y sulfato cprico
(CuSO4), junto con tartrato de sodio y potasio (KNaC4O64H2O). El
reactivo, de color azul, cambia a violeta en presencia de protenas, y vira
a rosa cuando se combina con polipptidos de cadena corta.
El Hidrxido de Potasio no participa en la reaccin, pero proporciona el
medio
alcalino
necesario
para
que
tenga
lugar.
Segn el Manual de experimentos de laboratorio para Bioqumica
escrito por Mora, S. Q. (2007), el cual indica que la reaccin de Biuret es
positiva mientras haya dos o ms enlaces peptdicos y da negativo
cuando no hay presencia de protenas, pptidos cortos u otros
compuestos con dos o ms enlaces peptdicos , decimos que en el tubo de
ensayo 1 (ovoalbmina) se observa que la reaccin de Biuret fue
positiva, por este motivo tom una coloracin violeta indicando la
presencia
de
enlaces
peptdicos.
Al contrario, el tubo de ensayo 2 (agua) tom una coloracin celeste
debido a que adopt el color del sulfato de cobre, por lo tanto fue una
reaccin negativa, lo que demuestra que en el agua no existe la presencia
de
protenas
o
enlaces
peptdicos.

Conclusin:
-A partir de la discusin concluimos que el color violeta que apareci en la
muestra de ovoalbmina, se debe a que esta presenta pptidos, formando

as el compelo Biuret que se da cuando una protena se pone en contacto

con un lcali concentrado.
IV.2.

Desnaturalizacin

de

Protenas

(Mtodo

del

calor)

Materiales:
2 tubos de ensayo
Muestra de ovoalbmina
Agua destilada
Vaso de precipitado

Mtodo:
En una gradilla tomar 2 tubos de ensayo y rotular como Muestra y otro
como Control.
Depositar en el tubo Muestra
2ml de solucin de ovoalbmina
preparada y en el tubo Control 2ml de agua destilada.
Se introducen al vaso de precipitado que se encuentre hirviendo. Deje
enfriar.
Resultados:

TUBOS DE ENSAYO

MUESTRA (OVOALBMINA)
CONTROL (AGUA DESTILADA)

VASO PRECIPITADO
HIRVIENDO

AL SACARLO DEL VASO DE PRECIPITADO

CONSISTENCIA Y
NO MOSTR
COLOR DE UN HUEVO CAMBIOS
COCINADO

x
X
(disminucin
del nivel de
agua)

TUBOS DE ENSAYO
ENFRIADOS

MUESTRA
(OVOALBMINA

Discusin:
Segn el libro Biologa Celular y Molecular De Robertis (pgina 37) la
estructura tridimensional de una protena se mantiene mediante
interacciones dbiles, eso quiere decir que si se alteran las condiciones
que mantienen estas fuerzas de atraccin se produce la
desnaturalizacin de la protena que vendra a ser la modificacin
estructural que conduce a la prdida de su funcin.
Uno de los enlaces no covalentes que presentan la estructura

CONTROL
(AGUA
DESTILADA)

tridimensional de protenas son los puentes de hidrogeno. El calor afecta

principalmente estos enlaces de puente de hidrogeno y produce una
desnaturalizacin de las protenas que suele ocurrir de forma brusca al
alcanzar una determinada temperatura.
En el experimento pudimos observar esta desnaturalizacin en el tubo
de ensayo que contena la muestra de ovoalbmina. Colocamos la
muestra en vaso de precipitado hirviendo, despus de unos minuto lo
sacamos y lo dejamos enfriar y observamos el cambio que haba sufrido:
la muestra de ovoalbmina tena la consistencia y color que se observa
en un huevo cocinado. Esto se debe precisamente a que las cadenas de
protenas que hay en la clara de huevo se encuentran enrolladas
adoptando una forma esfrica, y cuando nosotros sometimos la muestra
a calor, las cadenas de protena se desenrollaron y se formaron enlaces
que unen unas cadenas con otras. Lo que le da a la muestra un color
opaco y blanco y tambin la perdida de solubilidad.
Por otra parte el tubo de ensayo denominado control, el cual contena
agua destilada,
solo bajo de nivel debido a que al someterlo a altas temperaturas, se
evapor. Mas no
present cambios qumicos, como la muestra de ovoalbmina, ya que
el agua destilada no
contiene protenas, y solo ocurri un proceso fsico que es la
evaporizacin
Conclusin:
-A partir de la discusin concluimos que el agente fsico (calor) ocasiona
la desnaturalizacin irreversible de la protena de la clara de huevo
(ovoalbmina) y produce la prdida de su funcin celular.

IV.3. Desnaturalizacin de Protenas (Mtodo por alcohol)

Materiales:
2 tubos de ensayo
Muestra de ovoalbmina
Agua destilada

 Etileno

Mtodo:
En una gradilla tomar 2 tubos de ensayo y rotular
como Muestra y otro como Control.
Depositar en el tubo Muestra aadir 2ml de
solucin de ovoalbmina preparada y en el tubo
Control 2ml de agua destilada.
A cada tubo agregar 2ml de alcohol etlico/metanol.
Mezclar suavemente cada tubo. Hacerlo de manera
lenta y segura.

Resultados:

TUBOS DE ENSAYO
MUESTRA (OVOALBUMINA)

CONTROL (AGUA
DESTILADA)

REACCIN CON EL ALCOHOL

- Se observa el mismo color que
presenta un huevo cocinado pero al
inicio es lento observndose primero
una capa delgada de color blanco al
nivel del contacto.
- Despus de media hora volvimos a
ver el tubo de ensayo, y observamos
que el color blanco opaco estaba
casi por todo el tubo de ensayo, pero
no se extendi en su totalidad.
- No hubo cambios

Discusin:
- Como dijimos la estructura tridimensional de una
protena se mantiene mediante interacciones dbiles, eso
quiere decir que si se alteran las condiciones que
mantienen estas fuerzas de atraccin se produce la
desnaturalizacin de la protena que vendra a ser la
modificacin estructural que conduce a la prdida de su
funcin.
En este experimento, al agregar etanol a la muestra de
ovoalbmina
ocurre lo mismo que cuando se coloc la muestra en el
vaso de precipitado hirviendo, pero de manera ms lenta,
ya que primero observamos un capa blanca ,opaca y
delgada, y despus de media hora, vimos que la capa se
extendi un poco por el tubo de ensayo .

Esto se debe a que el agente fsico (calor) acelera la

reaccin ms rpido que el alcohol etlico
Por otra parte, el tubo de ensayo control, que contena
agua destilada no presento cambio alguno, ya que no
contiene protenas.

Conclusin:
-Concluimos que el alcohol es un factor ms que altera la
estructura de las protenas y que da el mismo resultado que
el mtodo del calor. Sin embargo la desnaturalizacin
sucede de forma ms lenta.
-La muestra de ovoalbmina desnaturalizada por alcohol
tiene una consistencia casi igual a la muestra
desnaturalizada por el calor. Pero esta muestra
desnaturalizada por alcohol no es comestible, porque se
necesita de calor para cocerlo

IV.4. Desnaturalizacin de la catalasa por el calor

Materiales:
2 tubos de ensayo
Papa (1 cocida y 1 cruda)
Agua Oxigenada (H2O2)
Mtodo:
Introducir en un tubo de ensayo un trozo de patata
cocida y en otro; un trozo de patata cruda.
Aadir 1ml de H2O2.
Observar los resultados
Resultados:

TUBOS DE ENSAYO
PAPA COCIDA (TUBO DE ENSAYO
1)
PAPA CRUDA (TUBO DE ENSAYO
2)

AADIENDO H2O2
FORMACIN DE
NO HUBO CAMBIOS
BURBUJAS
No
S
S

No

 Discusin:
-Segn Antonio Blanco en su libro Qumica Biolgica La catalasa
es una enzima perteneciente a la categora de las
oxidorreductasas, que se encuentra en las clulas de los tejidos
animales y vegetales.
La funcin de esta enzima en los tejidos es necesaria porque
durante el metabolismo celular, se forma una molcula txica que
es el perxido de hidrgeno, H2O2 (agua oxigenada).
Esta enzima, la catalasa, lo descompone en agua y oxgeno.
En el experimento utilizamos la papa como fuente de catalasa.
Como se observa en los resultados. En el tubo de ensayo 1 (trozo
de papa cocida) no hubo cambios al agregar el perxido de
hidrogeno, ya que la enzima catalasa se desnaturaliz durante el
proceso de coccin (al someter la papa a altas temperaturas,
pierde su funcin enzimtica).
Lo contrario sucedi con el tubo de ensayo 2 (trozo de papa
cruda), al agregar H2O2, se pudo observar un burbujeo. Esto se
debe a que la enzima catalasa est presente en la papa cruda, ya
que esta no ha sido alterada como la papa cocida, y por lo tanto
su funcin enzimtica est intacta: la catalasa acta sobre el
perxido de hidrogeno descomponindola en agua y oxgeno,
siendo el burbujeo que presenciamos la manifestacin del
desprendimiento de O2.

*Conclusiones:
- Para que la catalasa funcione correctamente debe tener un
pH neutro y temperatura ambiente, sino se desnaturaliza
como en el caso de la papa cocida.
- Hemos llegado a la conclusin a que la enzima catalasa es
sumamente importante ya que descompone el perxido de
hidrogeno en sustancias menos txicas (agua y O2) y por lo
tanto reduce los niveles de toxicidad.
*Cuestionario:
1. Qu significa los resultados de la prctica?

-Los resultados de la prctica nos indica que en el caso de la papa

cocida (T1), no se observ reaccin alguna ya que el calor
desnaturaliza las enzimas de la papa (catalasa).

En el caso de la papa cruda (T2), al agregar perxido de

hidrogeno, se not una rpida reaccin ya que la enzima acta
normalmente: La catalasa rompe el perxido de hidrogeno del
agua oxigenada en H2O y O2 y se da el desprendimiento de
oxigeno mediante burbujas.
Por lo tanto la papa cruda posee mayor cantidad de enzimas en
comparacin con la papa cocida, ya que las enzimas de estas se
desnaturalizaron por el calor durante el proceso de coccin.
2. Por qu se forman burbujas? Qu significa?
-Las burbujas se forman debido a la accin de la enzima catalasa;
el agua oxigenada o Perxido de hidrgeno agregado se
transformar en agua y oxgeno.
El burbujeo que se manifiesta significa el desprendimiento del
oxgeno.

Bibliografa:
- Principios de Qumica. Editorial Mdica Panamericana Atkins y Jones
- Manual de experimentos de laboratorio para Bioqumica
-Mora, S. Q. (2007)
- Biologa Celular y Molecular De Robertis (pgina 37).
Editorial El Ateneo.
- Qumica Biolgica Editorial El Ateneo 8 Edicin- Antonio
Blanco
3. EXPERIMENTO 4 VITAMINAS
V.1. Identificacin de Vitamina C (cido ascrbico) en zumos
mediante azul de
metileno

Materiales:
6 tubos de ensayo
Limn
Naranja
Camu camu
Agua
Papa
Pastilla de redoxn
cernidor
Azul de metileno
Preparar: los zumos de limn, naranja, camu camu y papa.
Filtrarlos con cernidor. En medio vaso de agua disolver una
pastilla de redoxn.
Mtodo:

 En 6 tubos de ensayo numerados se vierten 3ml de

zumo de limn, de naranja, redoxn, papa, camu
camu y agua.
Aadir a cada tubo 10 gotas de azul metileno.
Agitar las mezclas y dar una interpretacin de lo
ocurrido en cada tubo de ensayo.

Resultados:

TUBOS DE ENSAYO
ZUMO DE LIMN
ZUMO DE NARANJA
ZUMO DE CAMU CAMU
ZUMO DE PAPA
REDOXN
AGUA

AADIENDO 10 GOTAS DE AZUL

METILENO
TOM COLOR AZULINO
TOM COLOR AZUL
COLOR CASI IMPERCEPTIBLE (CLARO)
TOM COLOR AZULINO
TOM COLOR CELESTE CRISTALINO
TOM COLOR AZULINO

Discusin:
- El primer objetivo es determinar la presencia de vitamina C en zumo de
frutas, para lo cual se agreg azul de metileno a muestras de zumo de
limn, naranja, camu camu, papa y redoxn.
Luego rotulamos un tubo de ensayo como control, en el cual
colocamos agua y agregamos tambin azul de metileno. Como resultado
tuvimos que la coloracin de la muestra de camu camu present un
color casi imperceptible al agregar el azul de metileno, J.B.S Braverman
en su libro Bioqumica de los alimentos y Salvador Badui Dergal en
su libro Qumica de los Alimentos coinciden en que esto se debe a que
la vitamina C ( cido ascrbico) es una sustancia hidrosoluble y
fuertemente reductora, mientras que el azul de metileno es un indicador
de xido-reduccin que es de color blanco ( transparente) cuando se
reduce y de color azul cuando se oxida, por lo que a mayor cantidad de
vitamina C el azul de metileno se reduce y se hace ms transparente.
Sin embargo las muestras de limn, naranja, papa y agua se tornaron
azulinas ya que contenan una proporcin ms baja de vitamina C.
Cabe recalcar que la pastilla de redoxn tomo un calor celeste cristalino,
lo que indica que tena una cierta cantidad de vitamina C, mayor a la de
la muestra de limn, papa y naranja; pero menor que la muestra de
camu camu.

Conclusin:

*Tras realizar el experimento, llegamos a la conclusin que el azul de metileno

ayuda a reconocer la presencia de vitamina C: mientras ms transparente sea
indica mayor presencia de vitamina C; y mayor coloracin azul en las muestras,
significa que existe menor presencia de vitamina C. por otro lado, el sulfato de
cobre contribuyo a la oxidacin de la vitamina C.
*Tambin concluimos que el camu camu es la fruta que contiene mayor cantidad
de vitamina C, incluso mayor de la que contiene la pastilla de redoxn y la naranja.

Bibliografa:
- Bioqumica de los alimentos Edit. Acribia Zaragoza

( Espaa -1968)-J.B.S Braverman

- Qumica de los Alimentos Edit. Pearson Educacin. 3
Edicin 1993- Salvador Badui Dergal
------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------4. EXPERIMENTO 5 ADN
V.1. Extraccin del ADN de las frutas

Materiales:
Vaso de precipitado
Licuadora
Pltano
Cuchara
Champ
Sal
Agua destilada
Papel filtro
Cernidor
Alcohol
Tubo de ensayo
Varilla de vidrio
Portaobjeto
Microscopio
Probeta

Mtodo:
Licuar el pltano por 10 a 15 segundos sin cascara
con una taza de agua destilada hasta tener una

mezcla homognea (si se licua por ms tiempo se

puede romper la molcula de ADN)
En un vaso de precipitado coloca una cucharadita de
champ y 2 pizcas de sal.
Agregar 20ml de agua destilada. Sin producir
espuma, disuelve la mezcla.
Aadir 3 cucharaditas soperas a ras de la mezcla de
pltano y revuelve por 5 o 10 minutos, sin producir
espuma.
Colocar un papel filtro sobre un vaso precipitado,
cuida que no toque el fondo del vaso. Pasa la
solucin por el filtro hasta completar 5ml.
Llenar el tubo de ensayo con el alcohol (este tiene
que estar lo ms fro posible)
Con una pipeta toma la solucin filtrada de pltano y
agrega al tubo de ensayo con el alcohol; deja reposar
por 3 minutos, sin mover.
Se forma un precipitado blanco en el tubo de ensayo
que es el ADN de la fruta. Con la varilla de vidrio
enrolla el precipitado y colcalo en un portaobjeto
estirndolo para poder observar el tamao de la
molcula.
Observa la molcula en el microscopio a 10x, 40x y
100x.

Resultados:
-

Despus de dejar reposar 3

min la probeta que contena
alcohol y la solucin filtrada
de pltano, pudimos
observar la precipitacin ADN
de color blanco en la
interface con el alcohol y
ascender lentamente
formando un grumo de
aspecto algodonoso.

Luego, extrajimos
cuidadosamente el
precipitado con una varilla de
vidrio para su observacin en
el microscopio.

EXTRACCIN DEL ADN

DEL PLTANO

OBSERVACIN DE LA MOLCULA
DE ADN DEL PLTANO

Despus de colocarlo en un
portaobjetos estirndolo, lo
llevamos al microscopio y all
observamos el ADN en forma
de puntos negros en fondo
gris. No se pudo apreciar la
molcula de ADN en su
totalidad ya que no fue una
extraccin profesional.

PARTE SUPERIOR
CON ALCOHOL
PARTE
INFERIOR

L ADN DEL PLTANO DE ASPECTO ALGODONOSO

VESTIGIOS
(LPIDOS, PROTEINAS, ETC)

Discusin:
- Segn el libro Principios de Bioqumica escrito por Albert l. Lehninger,
la extraccin de ADN requiere una serie de etapas bsicas:
* En primer lugar tienen que romperse la membrana plasmtica de la
clula eucariota para poder acceder al ncleo de la clula. En el caso de
los vegetales tambin habr que romper la pared celular.
*A continuacin debe romperse tambin la membrana nuclear para dejar
libre el ADN. *Por ltimo hay que proteger el ADN de enzimas que
puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en
alcohol.
Siguiendo estos parmetros, hemos realizado el experimento. Como se
puede ver en los resultados, logramos extraer el ADN del pltano
mediante todos estos procesos.

El uso del detergente, la sal, el agua destilada y el alcohol jugaron un

papel importante en el proceso de extraccin.
Al licuar el pltano hemos conseguido separar el ADN de los dems
componentes, a travs de la ruptura de los tejidos.
El champ acta como detergente, que al entrar en contacto con las
clulas, captura los lpidos y protenas, que forman parte de la
membrana. En este proceso la membrana plasmtica y la membrana
nuclear han sido destruidas. Adems este proceso permite separar las
protenas de gran tamao que acompaan al ADN.
Los iones de Sodio (sal), impiden que las cargas negativas de los
grupos fosfatos
(en el ADN), interaccionen con las molculas de agua, lo que favorece la
precipitacin en alcohol, ya que el ADN se vuelve insoluble.
El agua destilada permiti la visualizacin del ADN, ya que de no ser
as, no hubiramos podido observar el producto final
El proceso de filtrado sirvi para eliminar los restos celulares y as el
resultado sea ptimo.
Despus de colocar la muestra filtrada junto con el alcohol frio en una
probeta lo dejamos reposar por 3 minutos. Al pasar el tiempo requerido
observamos la formacin de dos capas: alcohol y la muestra filtrada,
despus aparecieron pequeas burbujas que tienden a arrastrar las
fibras de ADN que se ha formado. En el resultado final se observa la
precipitacin del ADN con aspecto algodonoso en la regin del alcohol ya
al ser menos denso se posicion en la parte superior de la probeta y en
la parte inferior quedaron protenas, lpidos y otros componentes
celulares.
El ADN ha sufrido cambios en su estructura, ya que se ha desenrollado y
en consecuencia se observa con una estructura alargada y algodonosa
Al obtener el ADN resultante con una varilla, lo colocamos en un
portaobjeto y observamos esta molcula en el microscopio. No se pudo
observar de forma definida el ADN ya que no realizamos una extraccin
profesional. Pero si logramos observar pequeos puntos negros con un
fondo gris.
Conclusiones:
-En conclusin, logramos comprobar la presencia de ADN en las clulas
de un pltano, comprobando que pueden ser aisladas del resto de las
sustancia. Y que para lgralo podemos utilizar simples materiales de uso
domstico.
-El ADN puede ser extrado de cualquier ser vivo, ya sea animal o
vegetal.

-El ADN que extrajimos del pltano no es 100% puro, ya que,

entremezclado con l, hay fragmentos de ARN. Para obtener ADN 100%
puro se realiza una extraccin profesional aadiendo enzimas que
fragmentan las molculas de ARN y que impiden que se unan al ADN.
---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- Bibliografa:
-Principios de Bioqumica escrito por Albert l. Lehninger. Editorial
Artmed-5 Edicin
----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Gradilla Final: