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Para obtener energa y elaborar nuevos componentes celulares, los organismos tienen que
disponer de materias primas, o nutrientes. Los nutrientes son sustancias que se emplean en
la biosntesis y produccin de energa y, en consecuencia, son necesarios para el crecimiento
microbiano.
5.1 Requerimientos nutritivos esenciales
El anlisis de la composicin de la clula microbiana revela que ms del 95 % del peso seco
de la clula est constituido por unos pocos elementos: carbono, oxgeno, hidrgeno,
nitrgeno, azufre, fsforo, potasio, calcio, magnesio y hierro.
Estos se denominan macroelementos o micronutrientes, porque los microorganismos los
captan en cantidades relativamente grandes.
Los seis primeros (C, O, H, N, S y P) son componentes de los hidratos de carbono, lpidos,
protenas y cidos nuclecos.
Los cuatro macroelementos restantes se encuentran en la clula en forma de cationes y
desempean diversos papeles. Por ejemplo,
el potasio (K+) es necesario para la actividad de varias enzimas, incluyendo algunas que
participan en la sntesis de protenas.
El calcio (Ca2+) contribuye, entre otras funciones, a la termorresistencia de las endosporas.
El magnesio (Mg2+) acta como cofactor de muchas enzimas, forma complejos con el ATP, y
estabiliza los ribosomas y las membranas celulares.
El hierro (Fe2+ y Fe+) forma parte de los citocromos y es cofactor de enzimas y de protenas
transportadoras de electrones.
Todos los organismos, incluidos los microorganismos, requieren diversos micronutrientes o
elementos traza: manganeso, cinc, cobalto, molibdeno, nquel y cobre.
Sin embargo, las clulas precisan de unas cantidades tan pequeas, que contaminantes
presentes en el agua, recipientes y en los componentes habituales del medio son a menudo
suficientes para el crecimiento.
Por ello, es muy difcil demostrar la necesidad de un micronutriente. En la naturaleza, los
micronutrientes son alicuotas y probablemente, por lo general, no limiten el crecimiento.
Estos micronutrientes son normalmente parte de enzimas y cofactores, y facilitan la catlisis
de reacciones y el mantenimiento de la estructura de protenas. Por ejemplo,
el cinc (Zn2+) se encuentra en el centro activo de algunas enzimas, pero tambin est
involucrado en la asociacin de las subunidades reguladoras y catalticas de la aspartato
carbamoiltransferasa en E. coli.
El manganeso (Mn2+) facilita a muchas enzimas la transferencia cataltica de los grupos
fosfato.
El molibdeno (Mo2+) es necesario para fijar nitrgeno; y
El cobalto (Co2+) es un componente de la vitamina Bt 2. Enzimas y transportadores de
electrones.
Adems de los macroelementos o micronutrientes, los microorganismos pueden tener
necesidades especiales que reflejen la naturaleza especial de su morfologa o de su habitat
natural.
Las diatomeas necesitan cido silcico (H4SiO4) para construir sus hermosas paredes
celulares de slice [(SiO)].
Experimentos de laboratorio indican que no existe ninguna molcula orgnica natural que no
pueda ser utilizada por algn microorganismo.
Los actinomicetos pueden degradar alcohol amlico, parafina e incluso caucho. Algunas
bacterias pueden emplear casi cualquier sustancia como fuente de carbono; por ejemplo,
Burkholderia cepacia puede utilizar ms de 100 compuestos diferentes de carbono.
Bacterias omnvoras, otras son extremadamente exigentes y catabolizan pocos
compuestos de carbono. As, las bacterias metilotrofas metabolizan slo metano, metanol,
monxido de carbono, cido frmico y similares molculas de un tomo de carbono.
Leptospira utiliza solamente cidos grasos de cadena larga como fuente principal de carbono
y energa.
Parece ser que en los entornos naturales poblaciones muy complejas de microorganismos
son capaces incluso de metabolizar sustancias sintetizadas por el hombre, como por ejemplo
los pesticidas.
Molculas en principio indigestibles son oxidadas y degradadas en presencia de un nutriente
que favorece el crecimiento y que es metabolizado al mismo tiempo, proceso denominado
cometabolismo. Los productos resultantes de este proceso pueden ser utilizados como
nutrientes por otros microorganismos. Biodegradacin y microorganismos.
5.3 Tipos nutricionales entre los microorganismos
Adems de los requerimientos de carbono, hidrgeno y oxgeno, todos los organismos
necesitan fuentes de energa y electrones para su crecimiento.
Los microorganismos pueden agruparse en clases nutricionales basadas en cmo satisfacen
dichos requerimientos. (Tabla 5.1).
Tabla 5.1 Fuentes de carbono, energa y electrones
Fuentes de carbono
Autotrofos
CO2 como nica o principal fuente de carbono
Heterotrofos
Molculas orgnicas preformadas reducidas, procedentes
de otros organismos
Fuentes de energa
Fototrofos
Luz
Quimiotrofos
Oxidacin de compuestos orgnicos o inorgnicos
Fuentes de electrones
Litotrofos
Molculas inorgnicas reducidas
Organotrofos
Molculas orgnicas
Ya hemos visto que los microorganismos pueden clasificarse en hetertrofos o autotrofos con
respecto a su fuente preferente de carbono.
Por otra parte, existen nicamente dos fuentes de energa disponibles para los organismos:
1) la energa lumnica para la fotosntesis, y
2) la energa derivada de la oxidacin de molculas orgnicas o inorgnicas.
Los fototrofos emplean luz como fuente de energa;
Los quimiotrofos obtienen la energa a partir de la oxidacin de compuestos qumicos
(orgnicos o inorgnicos). Tambin, los microorganismos tienen solamente dos fuentes de
tomos de hidrgeno, o electrones.
Los litotrofos (esto es, que comen piedras) utilizan sustancias inorgnicas reducidas como
fuente de electrones.
Los organotrofos obtienen electrones o hidrgeno de compuestos orgnicos.
Fase lumnica de la fotosntesis; Oxidacin de molculas orgnicas e inorgnicas .
Fotoorganotrofa
heterotrfica
(fotoorganoheterotrofa)
Quimiolitotrofa
autotrfica
(quimiolitoautotrofa)
Quimioorganotrofa
heterotrfica
(quimioorganoheterotrofa)
hidrgeno/electrones (H/e~)
CO2 como fuente de carbono
Energa
lumnica
Dador
orgnico de H/e~ Fuente
orgnica de carbono (puede
emplearse tambin CO2)
Fuente de energa qumica
(inorgnica)
Dador inorgnico de H/e~
CO2 como fuente de carbono
del azufre
Cianobacterias
Bacterias
prpuras
no
sulfreas
Bacterias
verdes
no
sulfreas
Bacterias oxidantes del
azufre
Bacterias del hidrgeno
Bacterias nitrificantes
Bacterias oxidantes del
hierro
Fuente de energa qumica Protozoos
(orgnica)
Hongos
Dador orgnico de H/e~ La mayora de las bacterias
Fuente orgnica de carbono
no fotosintticas
(incluyendo la mayor parte
de los microorganismos
patgenos)
Se han aislado bacterias que pertenecen a otras categoras nutricionales. Los tipos descritos se basan en
las fuentes de energa, electrones y carbono. Entre parntesis se indica el nombre abreviado.
cido lipoico
Precursor de la coenzima A:
transporta grupos
acilo (oxidacin del piruvato,
metabolismo de los cidos grasos)
Metabolismo de los aminocidos
(p. ej., transaminacin)
Precursor de NAD y NADP:
transporta electrones y tomos de
hidrgeno
cido pantotnico
Piridoxina (Be)
Niacina
(cido nicotnico)
Riboflavina (B2)
Tiamina (B,)
Los microorganismos representativos son miembros de los siguientes grupos: bacterias (B), hongos (H), algas (A) y protozoos
(P).
Difusin facilitada
Algunas sustancias, como el glicerol, pueden atravesar la membrana plasmtica por difusin
pasiva.
La difusin pasiva, denominada a menudo simplemente difusin, es el proceso por el cual las
molculas se desplazan desde una regin de concentracin elevada a otra con menor
concentracin, debido a una agitacin trmica aleatoria. El nivel de difusin pasiva depende
de la diferencia de gradiente de concentracin entre el exterior de la clula y su interior
(Figura 5.1).
Es necesario un gradiente de concentracin bastante elevado para que se realice una
captacin de nutrientes adecuada por difusin pasiva (esto es, la concentracin externa del
nutriente debe ser alta), disminuyendo el nivel de captacin a medida que se adquiere ms
nutriente, salvo que ste se utilice inmediatamente. Molculas muy pequeas como H 2O, O2 y
CO2 atraviesan a menudo las membranas por difusin pasiva. Grandes molculas, iones y
sustancia polares no atraviesan las membranas por difusin pasiva.
Transporte activo
Los mecanismos de difusin facilitada no son siempre adecuados y la clula debe utilizar
otros mtodos. Los dos procesos de transporte ms importantes para estas situaciones son el
transporte activo y la translocacin de grupo.
El transporte activo permite el transporte de molculas de soluto hacia concentraciones ms
elevadas, o en contra de un gradiente de concentracin, utilizando un aporte de energa
metablica. Como el transporte activo comprende la actividad de un transportador proteico, se
parece en algunos aspectos a la difusin facilitada. Las protenas transportadoras o
permeasas se unen a determinados solutos con una gran especificidad por las molculas que
transportan. En ambos sistemas, difusin facilitada y transporte activo, molculas de soluto
similares pueden competir por la misma protena transportadora.
El transporte activo se caracteriza tambin por el efecto de saturacin del transportador en
concentraciones de soluto elevadas (Figura 5.1). Sin embargo, el transporte activo se
diferencia de la difusin facilitada por el uso de energa metablica y su capacidad de
concentrar sustancias. Los inhibidores metablicos que bloquean la produccin de energa
inhibirn el transporte activo, pero no afectarn a la difusin facilitada (al menos, por un
perodo corto de tiempo).
En bacterias Gram negativas, los solutos deben atravesar antes la membrana externa,
requirindose otros sistemas de transporte activo.
Translocacin de grupo
En el transporte activo, las molculas de soluto se desplazan a travs de una membrana sin
modificarse. Muchos procariotas captan tambin molculas mediante translocacin de
grupo, proceso por el cual una molcula es transportada al interior celular despus de
alterarse qumicamente. El sistema de translocacin de grupo que mejor se conoce es el
dependiente de fosfoenolpiruvato: sistema fosfotransferasa de azcares (PTS, sugar
phosphotransferase system). Transporta diversos azcares al interior de las clulas
procariotas, fosforilndolos mediante fosfoenolpiruvato (PEP) como dador de fosfato.
PEP + azcar (exterior) > piruvato + azcar-P (interior) El PTS es bastante complejo.
Captacin de hierro
Casi todos los microorganismos necesitan hierro para vivir; est presente en citocromos y
muchas enzimas. La captacin de hierro es difcil debido a la extrema insolubilidad del ion
frrico (Fe3+) y de sus derivados, quedando poco hierro libre disponible para su transporte.
Muchas bacterias y hongos han superado esta dificultad gracias a la secrecin de siderforos
[Griego, transportadores de hierro]. Los siderforos son molculas de bajo peso molecular
capaces de acomplejar hierro frrico y aportarlo a la clula. Estas molculas transportadoras
de hierro son normalmente hidroxamatos o fenolatos-catecolatos.
Despus de que el hierro ha entrado en la clula, se reduce a la forma ferrosa (Fe +). El hierro
es tan fundamental para los microorganismos que stos pueden utilizar ms de una va de
captacin de hierro para asegurar un aporte adecuado.
CRECIMIENTO MICROBIANO
Conceptos
1. El crecimiento de un microorganismo se define como el aumento de sus componentes
celulares, que puede tener como resultado un incremento de su tamao o del nmero de su
poblacin, o de ambos.
de la
fermentacin de azcares altas concentraciones de cido lctico y otros cidos orgnicos, que
acidificarn su medio, inhibiendo el crecimiento.
Es en esta fase cuando el viraje del indicador de pH presente en el medio de cultivo cambia
de color.
Finalmente, hay evidencias que indican que el crecimiento puede cesar cuando se alcanza un
cierto nivel crtico poblacional. En definitiva, un cultivo est en fase estacionaria como
consecuencia de varios factores que actan conjuntamente.
Como acabamos de ver, las bacterias en un cultivo discontinuo pueden entrar en fase
estacionaria en respuesta al estrs nutricional, hambre.
Probablemente, esto ocurre en la naturaleza ya que numerosos ambientes tienen muy bajos
niveles de nutrientes.
Sin embargo, el hambre puede ser una experiencia positiva para la bacteria. Algunas
responden con cambios morfolgicos muy significativos, como la formacin de endosporas.
La mayora, simplemente disminuyen su tamao, normalmente acompaado de una reduccin
del protoplasto y condensacin del nucleoide, y se producen cambios significativos a nivel de
la expresin gnica y fisiolgicos.
Las bacterias en condiciones de estrs nutricional producen frecuentemente una serie de
protenas del hambre, que las hacen mucho ms resistentes al dao por diferentes
mecanismos.
Incrementan los puentes cruzados del peptidoglicano y, por consiguiente, la fuerza intrnseca
de la pared celular. Se producen protenas que se unen y protegen al DNA (Dps, DNA-binding
proteins from tarved cells). Chaperonas protegen a las protenas de su desnaturalizacin,
adems de recuperar el estado nativo de protenas daadas.
Como consecuencia de estos y muchos otros mecanismos, las clulas en condiciones de
hambre se vuelven ms resistentes a la destruccin por el hambre en s mismo y a otros
factores, como compuestos qumicos txicos, como el cloro.
Estos cambios son tan efectivos que algunas bacterias pueden sobrevivir en estas
condiciones de estrs nutricional durante aos.
Comprensiblemente, estas consideraciones tienen una enorme implicacin prctica en
medicina y en la industria.
Las Celula Vegetativa microbiana al final de esta fase de crecimiento son ms resistentes a
Tratamientos letales.
Hay evidencias de que Salmonella typhimurium y algunos otros patgenos se vuelven ms
virulentos cuando pasan hambre.
VI.- Fase de muerte acelerada: (tramo entre F y G),
En esta fase se produce un desequilibrio y la tasa de muerte de las bacterias es mucho
mayor a la de las bacterias viables.
VII. Fase de muerte o muerte logartmica: (tramo entre G y H),
Esta fase inicia en cuanto la velocidad de muerte de las bacterias es constante.
Clulas vegetativas
Esporas
Levaduras
Mohos
Bacteriasa
5 minutos a 50-60C
30 minutos a 62C
10 minutos a 60-70C
5 minutos a 70-80C
30 minutos a 80C
De 2 a ms de 800
minutos a 100C
0.5-12 minutos a 121C
Virus
30 minutos a 60C
a
Condiciones para bacterias mesfilas.
a)
b)
c)
d)
Modo de accin:
Bacteriostticos: Inhibidores de sntesis proteica por unin al ribosoma, que es
reversible, pues se disocia de este cuando disminuye en concentracin.