RECONOCIMIENTO DE LAS DIFERENTES

BIOMOLECULAS PRESENTES EN MATERIA VIVA Y

ACTIVIDAD ENZIMTICA
Morelos Xiomara, Parra Beliza, Perez Carmen, Tejedor Dary Luz, Valiente Ana
Facultad de ciencias exactas y naturales. Material: Biologa

UNIVERSIDAD DE CARTAGENA, CARTAGENA 27 MARZO DE 2015

RESUMEN
Se estudia mediante diferentes tcnicas las biomoleculas presentes en la clula vegetal y animal como
carbohidratos (monosacridos y polisacridos), protenas, lpidos y enzimas. Se observ la presencia
de carbohidratos en una muestra de macerado de fruta (banano) y solucin de almidn con macerado
de pan; para determinar la presencia de protenas se utiliza una muestra como la clara de huevo,
gelatina sin sabor; para identificar los lpidos, se utiliza una muestra de aceite de oliva, grasa animal
(mantequilla) y llena de huevo, y por ltimo se determina la actividad enzimtica en una muestra de
saliva.

ABSTRAC
Biomoleculas in the plant cell and animal as carbohydrates (Monosaccharides and polysaccharides),
proteins, lipids and enzymes is studied using different techniques. It was observed the presence of
carbohydrates in a sample of macerated fruit (banana) and starch solution with marinated bread; to
determine the presence of proteins using a sample as the white of egg, unflavored gelatin; to identify
the lipids, used a sample of olive oil, animal fat (butter) and egg-filled, and finally determines the enzyme
activity in a sample of saliva.

Palabras claves: polisacrido, monosacrido, grasas, protenas, lugol, benedict, sudan, biuret, enlace
peptdico, enzimas

INTRODUCCIN
Las molculas ms abundantes y comunes
presentes en los seres vivos se ceden
agrupar en: azucares y otros carbohidratos,
son alta mentes variables en estructura.
Los monosacridos son monmeros que se
polimerizan para formar polmeros llamados
polisacridos, a travs de diferentes enlaces
glucosdico formado entre un grupo amino
(NH2) y un grupo carboxlico (COOH), Ellos
alcanzan una variedad de funciones, debido

al almacenamiento de energa hasta la

formacin de fuertes fibras estructurales.
Por su parte las protenas estn formadas
por aminocidos encadenados que varan su
estructura y funcin debido a que sus
cadenas varan en descomposicin, en las
cuales se pueden clasificar en:
Primaria: cuando los aminocidos se
disponen en forma lineal.
1

Secundaria: cuando forman hojas plegadas

o hlices.
Terciaria: cuando hay interacciones entre
aminocidos que permiten conformar una
estructura globosa de la protena
Cuaternaria: la protena est formada por
ms de un polipeptido. Por su parte
los lpidos son biomolculas formadas
bsicamente por C, H y O, constituyen un
grupo de sustancias muy heterogneas con
caractersticas qumicas diversas, pero con
algunas propiedades fsicas comunes,
mayoritariamente insolubles en agua y
solubles en disolventes orgnicos, tales
como ter, cloroformo, alcanos (ej.: hexano),
benceno, acetona y alcoholes. Algunas de
las propiedades fsico-qumicas de los
lpidos pueden ser usadas para su
reconocimiento, ya que pueden reaccionar
con una variedad de agentes originndose
productos coloreados, desprendimiento de
vapores, formacin de jabones, entre otros.
La hidrofobicidad (repulsin al agua) es una
caracterstica distintiva de los lpidos, de la
que derivan sus principales propiedades.
Dentro del gran grupo de los lpidos se
encuentran los cidos grasos, stas son
molculas antipticas ya que poseen una
cadena aliftica apolar, y el grupo carboxilo
polar. (1)

observar la presencia de lpidos en la

materia viva porque reacciona con el enlace
peptdico.(4)
Es importante conocer las caractersticas y
funcin que hacen de cada biomolculas
necesaria para el buen funcionamiento de la
clula eucariota, y la activada enzimtica
que permite la degradacin de estas al
consumir alimentos; adems de la capacidad
de identificacin de
los carbohidratos,
protenas, lpidos en materia viva basndose
en su composicin qumica y en algunas
reacciones colorimtricas especficas.
METODOLOGA
1. Se determin
carbohidratos

la

presencia

de

Monosacaridos.
En un tubo de ensayo de depsito 5 mL de
reactivo benedict, la cual se calent hasta
ebullicin, posteriormente se aadi 1mL de
Solucin de glucosa y se calent hasta
ebullicin.
Polisacridos
Se macero un pedacito de banano maduro y
se deposit en un tubo de ensayo,
posteriormente se le adiciono 5 mL de
reactivo benedict y se calent hasta
ebullicin.

existen unos reactivos que permiten realizar

la identificacin de estas biomoleculas, en
las cuales se encuentra el reactivo de
benedict(2), que se aplica para la
identificacin de carbohidratos, en la cual
reacciona con el OH libre, que es la
caracterstica de los azucares reductores
como la lactosa, glucosa, maltosa y
celobiosa, el reactivo de benedict est
compuesto por sulfato cprico, citrato de
sodio y carbono anhdrido de sodio, por lo
que el carbohidrato tiene la capacidad de
reducir el cobre del sulfato cprico, por otro
lado el reactivo de lugol(3) permite la
identificacin de polisacridos, en la que el
yodo y yoduro potsico presentes en el lugol,
se introducen en las espiras de la molcula
de almidn dando una coloracin azul violeta,
que permite; para los lpidos se utiliza la
tcnica del reactivo sudan III que permite

2. Se determin la presencia de protenas

Se diluyo la clara de un huevo en 20 mL de
suero fisiolgico, se tom 1 mL de esta
solucin y se le adiciono unas gotas de
sulfato de cobre al 0,5% e hidrxido de sodio
al 10 %.
En otro tubo de ensayo se deposit 2 mL de
una solucin de gelatina sin sabor y se
procedi a someter al fuego, luego se agreg
1 mL de sulfato de cobre al 0,5 % e hidrxido
de sodio al 10%.

3. Se determin la presencia de lpidos.

En un tubo de ensayo se deposit 3 mL de
agua y se agreg una piza de reactivo sudan
III, posteriormente se adiciono una pequea
muestra de aceite vegetal y se agito dejando
reposar un rato.

muestra de macerado de fruta (banano),

posteriormente se someti al fuego,
observando un cambio de color de azul claro
a un verde manzana, seguido de un verde
amarillento y amarillo oscuro con presencia
de burbujas. (Ver figura 2)

En otro tubo de ensayo se deposit una

pequea muestra de grasa animal
(mantequilla) y se le adiciono una pequea
muestra de reactivo sudan III.

El sulfato cprico presente en el reactivo de

benedict reacciona con el carbohidrato, la
cual reduce el cobre de Cu 2+ a Cu +, la cual
se oxida y el xido de cobre (Cu2O) se
precipita dando las coloraciones de verde a
amarillo y un anaranjado. Y la intensidad de
la turbidez de estos cambios de color
depende de la concentracin de Cu oxidado.
Por ende en la muestra de la solucin de
glucosa se observa una turbidez en las
coloraciones, indicando que hay una
cantidad de concentracin mayor de cobre
reducido con respecto a la muestra de
macerado de banano.

4. Se determin colesterol
En un Beaker se deposit una muestra de
una yema de huevo y se le agrego 10 mL de
cloroformo, se tom 1 mL de esta solucin y
se deposit en un tubo de ensayo, con la
ayuda de un gotero se le adiciono 1 mL de
anhdrido actico y 4 gotas de cido sulfrico,
se agito suavemente para incorporar los
reactivos aadidos.

En un tubo de ensayo se tiene una solucin

de almidn con aspecto turbio y se le
adicionan unas gotas de lugol de color
marrn ocre, la cual se observa un cambio
de color a azul violeta (ver figura 3).

5. Se determin la activad enzimtica

En un Beaker se recogi muestras de saliva
de un estudiante de laboratorio. En dos
tubos de ensayo se depositaron 10 mL de
solucin de almidn y se adiciona 1 mL de
muestra de saliva a cada tubo; uno de los
tubos se somete al calor y se agrega 1 mL
de muestra a una serie de 4 tubos
previamente aadido dos gotas de lugol, se
realiz el mismo procedimiento para la
muestra preparada de saliva y almidn a
temperatura ambiente.

Esto es debido a que los componentes de

lugol (yodo y yoduro potsico) se introducen
en las espiras de la molcula de almidn
cambiando su propiedad fsica como el color,
la cual se observa un color azul violeta.
Posteriormente se somete al fuego y se
observa un precipitado blanco con
desprendimiento de humo blanco, a medida
que se calienta el color azul violeta va
desapareciendo, obteniendo al final un color
parecido a la del almidn (ver figura 4)

RESULTADOS Y DISCUSIN
1. Calentar el reactivo de benedit este no
cambio de color, posteriormente se le agrego
una pequea cantidad de solucin de
glucosa al 3% para luego someter al fuego,
en el cual se observ un cambio de color de
azul agua marina a verde oscuro seguido de
un color naranja (ver figura 1).

Al calentar la muestra las espiras de las

molculas de almidn se desarman creando
espacios vacos en la glucosa la cual vuelve
a su estructura molculas original.
2. En 20 mL de suero fisiolgico se adiciono
15 mL de clara de huevo la cual se le

en otro tubo de ensayo se agreg reactivo de

benedit y se le adiciono una pequea
3

adiciono una solucin de sulfato de cobre al

0,5 %, no se observ ningn cambio de color,
pero al adicionar hidrxido de sodio se
observ que la solucin tomo un color
morado claro (ver figura 5).
En otro tubo de ensayo se deposit una
solucin de gelatina sin sabor, la cual se le
agrego una solucin de sulfato de cobre al
0.5 % no se observ ningn cambio,
posteriormente al calentar la solucin tomo
un morado claro (ver figura 6).

Estas dos fases son debido a que el

cloroformo separa las protenas presentes
en la yema de huevo de los lpidos (grasas)
y carbohidratos que esta material viva
contiene.
5. En un Beaker limpio y seco se recolecto
saliva, la cual se deposit en un tubo de
ensayo con 1 mL de suspensin de almidn
acuosa y se agito. En una serie de tubos de
ensayo se agreg dos gotas de lugol cada 20
segura que en dos; se pas mezcla de
almidn mas saliva a cada uno de los tubos,
4 tubos a temperatura ambiente y otros
cuatro la mezcla calentada.

Esto es debido a que el hidrxido de cobre

generado en la reaccin de sulfato de cobre
e hidrxido de sodio, reacciona con el enlace
peptdico que se da entre el grupo amina (NH2) y el grupo carboxlico (-COOH).

En la muestra a temperatura ambiente se

observ que al adicionarlo tomo una
coloracin azul, esto es debido a que el yodo
y yoduro potsico presente en el reactivo de
lugol se introducen en las espiras de las
molculas de almidn, la cual no es una
verdadera reaccin qumica, si no que se
forma un compuesto de inclusin que
modifica las propiedades fsicas de esta
molcula. (Ver figura 10).

3. Se realiz una solucin con 3 mL de agua

y una pizca de sudan la cual se agito y se
observ que quedaron partculas de sudan
en el medio acuoso, a esta solucin se le
adiciono aceite de olive y se agito,
observando un cambio de color a rojo
brillante quedando en la superficie del tubo
de ensayo (ver figura 7)

En las muestra calentada, se dej actuar la

amilasa salival, en la que se producen
dextrinas y glucosa libre, por lo que al
aadirle lugol se observa inicialmente un
cambio de color azul violeta (que es la
formacin de un compuesto de yodo con
almidn), pero conforme acta la amilasa
este color en teora debe ser sustituido por
uno de los tonos rojizos que indica la
presencia de las dextrinas (ver figura 11).

En otro tubo de ensayo se le agrego una

pequea
porcin
de
mantequilla,
posteriormente se le adiciono una pisca
reactive sudan III, y se observe un cambio de
color de Amarillo claro a un rojo turbio (ver
figura 8).
Este color se observa gracias a la solubilidad
que tiene el sudan III con las grasas la cual
las pigmenta.

CONCLUSIN
A travs de las diferentes experiencias, se
logr
identificar
la
presencia
de
carbohidratos, enzimas, protenas, lpidos y
colesterol en muestras de materias vivas, a
partir de una de sus cualidades como el color
y de esta manera reconocer a composicin
qumica de los distintos reactivos y
reacciones que se utilizaron para la
identificacin de estas.

4. Se tom una porcin de la yema de huevo

y se agreg a un tubo de ensayo al cual se
le adiciono 10 mL de cloroformo, anhdrido
actico y cido sulfrico, al agitarse se
observ una mezcla con dos fases (Mezcla
heterognea). En la primera fase se observ
un color Amarillo parecido al color de la yema
de huevo, pero ms claro (ver figura 9).

BIBLIOGRAFA
(1) Trabajo practico. Lpidosorgnica 2014, pgina 1.pdf
(2) Hoja
de
http://fagalab.
(3) Hoja
de
http://www.itsva.

seguridad

seguridad

Qumica

Benedict.

Lugol.

(4) Bioqumica: tcnicas y mtodos, pilar

roca, pgina 280

ANEXOS

Figura 1. Determinacin de monosacrido en

muestra de glucosa con reactivo de benedict.

Figura 4. Cambio de color de la muestra almidn

mas reactivo de lugol sometida al fuego.

Figura 2. Determinacin de monosacrido en

una muestra de banano con reactivo de benedict.

Figura 5. Determinacin de protena en una

muestra de yema de huevo con reactivo de sulfato
de cobre e hidrxido de sodio.

Figura 3. Determinacin de polisacrido en una

muestra de glucosa con reactivo lugol

Figura 9. Determinacin de colesterol en una

muestra de yema de huevo con cloroformo,
anhdrido actico y cido sulfrico.

Figura 6. Determinacin de protena en una

muestra de solucin de glucosa calentada con
lugol.

Figura 10. Determinacin de la actividad

enzimtica de la amilasa en una muestra de
saliva en suspensin con almidn y lugol.
Figura 7. Determinacin de lpidos en una
muestra de aceite de oliva con reactivo sudan III.

Figura 11. Determinacin de la actividad

enzimtica de la amilasa en una muestra de
saliva en suspensin de almidn sometida al
fuego, y adicin de lugol.

Figura 8. Determinacin de lpidos en una

muestra de mantequilla con reactivo sudan III.