AUTOPSIA DE UN ESPECTROFOTMETRO UV-VIS DE DOBLE

HAZ

Diana Isabel Bustillos Ortiz

Universidad Tcnica de Ambato, Facultad de ciencia e

Ingeniera en Alimentos, Carrera de Ingeniera Bioqumica,
Laboratorio de Qumica Analtica II y Termodinmica
bell_diany@hotmail.com

RESUMEN

El espectrofotmetro es una espectroscopia de emisin de fotones y una

espectrofotometra. Utiliza radiacin electromagntica (luz) de las regiones
visible, ultravioleta cercana (UV) e infrarroja cercana (NIR) del espectro
electromagntico, es decir, una longitud de onda entre 380nm y 780nm. La
radiacin absorbida por las molculas desde esta regin del espectro provoca
transiciones electrnicas que pueden ser cuantificadas. Los espectrofotmetros
Ultravioleta Visible son instrumentos de laboratorio utilizados para anlisis
cualitativos y cuantitativos de compuestos qumicos, stas tcnicas de anlisis
tienen gran importancia para los diferentes sectores de la industria, como son ;
qumica, petroqumica, farmacutica, alimenticia, textil, pinturas, papel, entre
muchas otras, por tanto el objetivo es identificar las partes de un
espectrofotmetro de uv-vis de doble haz y su funcin.

Palabras clave: espectrofotmetro uv-vis de doble haz , partes, funcin

RESULTADOS
Fotografa 1. Espectrofotmetro

DISCUCIN
El principio de la espectroscopia ultravioleta-visible involucra la absorcin
de radiacin ultravioleta visible por una molcula, causando la promocin de
un electrn de un estado basal a un estado excitado, liberndose el exceso de
energa en forma de calor. La longitud de onda ( ) comprende entre 190 y 800
nm.
La luz visible o UV es absorbida por los electrones de valencia, stos son
promovidos a estados excitados (de energa mayor). Al absorber radiacin
electromagntica de una frecuencia correcta, ocurre una transicin desde uno
de estos orbitales a un orbital vaco. Las diferencias entre energas varan entre
los diversos orbitales. Algunos enlaces, como los dobles, provocan coloracin
en las molculas ya que absorben energa en el visible as como en el UV,
como es el caso del -caroteno.
Funcionamiento (partes)
Para que un espectrofotmetro realice las funciones correctas es necesario que
cuente con aquellos componentes que lo ayudarn en su labor. Por lo tanto, un
espectrofotmetro se compone de:

Fuente de luz
La fuente de luz ilumina la muestra qumica o biolgica, pero para que realice
su funcin debe cumplir con las siguientes condiciones: estabilidad,
direccionabilidad, distribucin de energa espectral continua y larga vida.
Las fuentes de luz que puede tener un espectrofotmetro son:
- Lmpara de wolframio (tambin llamado tungsteno)
- Lmpara de arco de xenn
- Lmpara de deuterio que es utilizada en los laboratorios atmicos
Monocromador
El monocromador de un espectrofotmetro asla las radiaciones de longitud de
onda deseada, logrando obtener luz monocromtica.
Un monocromador est constituido por las rendijas de entrada y salida,
colimadores y el elemento de dispersin.
Colimador
El colimador es un lente que lleva el haz de luz entrante con una determinada
longitud de onda hacia un prisma, el cual separa todas las longitudes de onda
de ese haz logrando que se redireccione hacia la rendija de salida.
Compartimiento de muestra
En el compartimento de muestra es donde se lleva a cabo la interaccin R.E.M.
con la materia.
Detector
El detector se encarga de evidenciar una radiacin para que posteriormente
sea estudiada y saber a qu tipo de respuesta se enfrentarn (fotones o calor).

Registrador
Convierte el fenmeno fsico en nmeros proporcionales al analito en cuestin.
Fotodetectores
Los fotodetectores de un espectrofotmetro perciben la seal en forma
simultnea en 16 longitudes de onda y cubren al espectro visible, de esta
manera se reduce el tiempo de medida y minimiza las partes mviles del
equipo.
Funcionamiento
1. Encender el espectrofotmetro antes de realizar la prueba teniendo en
cuenta el tiempo de termostatizacin recomendado por el fabricante.
2. Seleccionar la longitud de onda de trabajo. Si tiene un fotocolormetro
seleccione el filtro ms prximo a la longitud de onda indicada.
3. Seleccionar la temperatura de trabajo.
4. Elegir una cubeta en buen estado (sin deformaciones ni suciedad)
5. Llevar a cero de absorbancia con agua destilada.
6. Vaciar la cubeta y enjuagarla con una pequea porcin de la solucin a
medir para evitar arrastre.
7. Cargar la cubeta con la solucin y leer la absorbancia por duplicado
informando la absorbencia promedio.
8. Si se debe medir ms de una solucin, enjuagar la cubeta con una porcin
de la solucin antes de medir y leer como en el paso 7. Tener la precaucin de
empezar siempre por la solucin ms diluida.
Cuidados
1. Limpieza de la superficie del instrumento
2. Limpieza de los filtros y fuentes de luz
3. Verificar las instalaciones elctricas

4. Asegurarse de que las cubetas estn limpias y sin ralladuras, sin huellas
digitales. Esto es cada vez que se utilice.

CUESTIONARIO

A pesar que todos los componentes de un espectrofotmetro de

absorcin molecular son vitales, cual cree usted que es el alma del
instrumento. Justifique su respuesta.

El quemador o atomizador es considerado el componente ms importante del

espectrmetro, debido a que la calidad de este, el tipo de combustible y la
relacin entre el combustible y el oxidante son los factores ms importantes
que afectan el resultado de anlisis de la sustancia colocada en l, por lo que
debe cumplir con caractersticas como: tener alta sensibilidad, estabilidad,
linealidad, etc. (Remington; 2000).

Explique

qu

cuidado

especial

se

debe

tener

con

un

tubo

fotomultiplicador ?
Requieren de una colocacin precisa de toda una serie de rendijas de salida a
lo

largo

del

espectrmetro,

para

poder

detectar

muchos

elementos

simultneamente de otra manera que se desea, adems se debe evitar el

deterioro de las superficies de los dnodos por efecto del calentamiento
localizado previniendo la fatiga del tubo, por lo que debe mantenerse la
corriente del nodo debe mantenerse por debajo de 1mA
(Perez, A ;2006).

Comparados entre si, que ventajas y desventajas presentan los tres tipos de
espectrofotmetros: de haz simple, de doble haz y de red de diodos.

Espectrmetro de haz simple:

Ventajas:
- Es adecuado para medir la absorbancia en un solo punto del espectro.
- Son de bajo coste
- El sencillo sistema ptico ofrece alto rendimiento
- Por consiguiente, alta sensibilidad.
(Owen, T ; 2000).

Desventajas
Es menos apropiado, para medir diferentes compuestos a diferentes
-

longitudes de onda o para obtener espectros de muestras.

Deben rotarse las partes del monocromador, lo que introduce el

problema de i rreproducibilidad mecnica en las medidas.

La adquisicin de datos en serie es un proceso inherentemente lento.

(Owen, T ; 2000).

Espectrmetro de doble haz:

Ventajas:
- Compensan todas las fluctuaciones de la radiacin de la fuente, as
-

como la deriva del detector y del procesador.

Compensan las variaciones de las distintas longitudes de onda

procedentes de la fuente
El diseo se adapta bien a un registro continuo de los espectros de

transmitancia o de absorbancia
Permite mayor estabilidad, se tiene mayor exactitud, y se reduce el
numerode pass en la medicion
(UCLM ; 2008)

Desventajas:
-

contienen ms componentes pticos, lo que reduce el rendimiento y la

sensibilidad.
Para obtener alta sensibilidad, pueden requerirse largos tiempos de

medida.
El diseo mecnico ms complejo del espectrofotmetro de doble haz,
puede resultar en una menor fiabilidad

(Owen, T ; 2000).

Espectrmetro de red de diodos:

Ventajas:
- Es inherentemente, muy rpido debido a su capacidad de adquisicin
-

paralela de datos y de barrido electrnico

Tiene excelente reproducibilidad de longitud de onda
Es de elevada fiabilidad.
Son particularmente adecuados para la configuracin de haz simple, ya
que se adquieren espectros muy rpidamente

El intervalo de tiempo entra las medidas de blanco y muestra es mnimo

(Owen, T ; 2000).
Desventajas:

Cuando se obtienen espectros, que diferencia existe entre un barrido

mecnico y un barrido electrnico

Barrido es la variacin de la longitud de onda, necesaria para la bsqueda de

una max donde el analito absorbe ms luz.
El barrido mecnico tiene las ventajas de alta resolucin ptica, exactitud de
longitud de onda y mide de 380- 780nm
Los espectros con barrido electrnico, miden longitudes de onda (200 800
nm, UV/VIS/IR) (Juanto, 2001)

Muchas veces se utiliza el trmino colormetro como un sinnimo de

espectrofotmetro. Est usted de acuerdo con esto?. Justifique su
respuesta.

No, ya que la diferencia fundamental entre un espectrofotmetro y un

colormetro, consiste en que el colormetro trabaja nicamente en el espectro
de luz visible y selecciona una longitud de onda determinada mediante filtros
fijos.
En cambio, un Espectrofotmetro es capaz de trabajar, no solo con la luz
visible sino que en otras regiones del espectro electromagntico (ultravioleta e
infrarroja). Adems posee un monocromador para seleccionar la longitud de
onda deseada.

Por qu razn el interior de un espectrofotmetro es de color negro?

El color negro, absorbe la luz y no permite que este rebote, facilitando el

funcionamiento del espectrofotmetro.
CONCLUCIN

Se identific las partes de un espectrofotmetro de uv-vis de doble haz y su

funcin, lo cual permitir la comprensin de los procesos realizados al
momento de utilizar un espectrofotmetro.

BIBLIOGRAFA
Juanto, S.(2001). Espectofotmetro . Recuperado : 25 de enero del 2015 . sitio wed:
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Owen, T. (2000). Fundamentos de la Espectroscopia, (pp. 4858).http://blog.utp.edu.co/docenciaedwin/files/2014/03/FUNDAMENTOS_UV_VIS_ESP

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Remington. (2000). Farmacia, 20 edicin, editorial reverte S.A, (pp. 741).

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la mancha, (pp. 10. 12)recuperado de:
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Picado, A. (2008). Quimica I. (pp. 232), recuperado de:

https://books.google.com.ec/books?
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%20la%20llama%20del%20cation%20AL&f=false