UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS

CARERA DE BIOQUMICA CLNICA
LABORATORIO DE BIOQUMICA CLNICA I
Prctica # 7
NOMBRE: ALEX SANTIAGO CHICAIZA ALOMOTO
FECHA DE ENTREGA: 2015-01-12
1 TEMA: HDL y LDL
2 OBJETIVOS:
Investigar el fundamento del mtodo que se utiliza para la
determinacin de HDL y LDL en suero.
3 INTRODUCCION
LDL (low-density lipoprotein)
Es la lipoprotena ms rica en colesterol y la genera el metabolismo de
las VLDL en circulacin, con menor contenido de triglicridos y mayor
de colesterol y protenas que las VLDL. La principal apoliprotena que
contiene es la apo B100. (Gonzles H., 2010)
LDL CHOLESTEROL liquicolor que es un a prueba enzimtica homognea
para la determinacin cuantitativa de LDL. El LDL es considerado como
un componente lipdico que incrementa el riesgo enfermedades
cardiovasculares (ECV). Junto con HDL es de importancia diagnstica
para estimar el riesgo individual.
Mtodo
La prueba combina dos pasos especficos: en el primer paso se eliminan
y destruyen los quilomicrones, y los colesteroles VLDL y HDL por
reaccin enzimtica. En el segundo paso, se determina el colesterol
restante de la fraccin LDL, a travs de reacciones enzimticas bien
establecidas en presencia de surfactantes especficos para LDL.
Reacciones
1er paso:
HDL, VLDL y Quilomicrones
CHE+CHO
Colestenone+ H2 O2

2H2 O 2 Catalasa

2H2 O+O2

2do paso:
LDL CHE+CHO Colestenona+ H2 O 2

H2 O2 +Cromgeno peroxidasa pigmento quinona

Procedimiento
1. Atemperar los reactivos y las cubetas a 3 C y mantener constante
2. Pipetar directamente en la cubeta :
10 l de gua + 750 l de enzima
Blanco de reactivo
10l CAL + 750 l de enzima
Calibrador
10l muestra + 750 l de enzima
Suero problema
3. Mezclar con cuidado e incubar por 5 min exactos a 37 C
4. Pipetear en cada cubeta (blanco de reactivo, calibrador y muestra)
250 l del reactivo SUB
5. Mezclar con cuidado e incubar nuevamente a 37 C y a los 5
minutos leer la absorbancia a 593 nm.
Valores de referencia

bajo riesgo de ECV

alto riesgo de ECV

Hombre
< 50 mg/dl
> 172 mg/dl

Mujer
< 63 mg/dl
> 167 mg/dl

HDL (high density lipoprotein)

Es un lipoproteina que se sintetiza en el hgado e intestino e intestino. Es
la ms pequea y de mayor densidad de la lipoprotenas por su
contenido alto en protenas y fosfolpidos. Las principales apoliproteinas
que contien son la apo AI y apo AII. (Gonzles H., 2010)
Para la determinacin utilizamos el kid comercial: HDL CHOLESTEROL
liquicolor que es un a prueba enzimtica homognea para la
determinacin cuantitativa de HDL.
Mtodo
La prueba combina dos pasos especficos: en el primer paso se eliminan
y destruyen los quilomicrones, y los colesteroles VLDL y LDL por reaccin
enzimtica. En el segundo paso, se determina el colesterol restante de la
fraccin HDL, a travs de reacciones enzimticas bien establecidas en
presencia de surfactantes especficos para HDL.
Reacciones
1er paso:
LDL, VLDL y Quilomicrones CHE+CHO Colestenone+ H2 O2

2H 2 O2 Catalasa 2H 2 O+O2

2do paso:

HDL CHE+CHO Colestenona+ H 2 O2

H2 O2 +Cromgeno peroxidasa pigmento quinona

Procedimiento
1. Atemperar los reactivos y las cubetas a 3 C y mantener constante
2. Pipetar directamente en la cubeta :
10 l de gua + 750 l de enzima
Blanco de reactivo
10l CAL + 750 l de enzima
Calibrador
10l muestra + 750 l de enzima
Suero problema
3. Mezclar con cuidado e incubar por 5 min exactos a 37 C
4. Pipetear en cada cubeta (blanco de reactivo, calibrador y muestra)
250 l del reactivo SUB
5. Mezclar con cuidado e incubar nuevamente a 37 C y a los 5
minutos leer la absorbancia a 593 nm.
Valores de referencia
< 35 mg/dl factor de riesgo para ECV
> 60 mg/dl bajo riesgo para ECV

Bibliografa:
HDL Cholesterol liquicolor. Human Gesellschft fr Biochemica mbH Max
Planck Ring 21 D 65205 Wiesbaden. Germany
HDL Cholesterol liquicolor. Human Gesellschft fr Biochemica mbH Max
Planck Ring 21 D 65205 Wiesbaden. Germany
GONZLES H., . (2010). Principios de Bioqumica Clica y Patologia
Molecular. Barcelona (Espaa): Elsevier.