Btn

Ac(m) = anticuerpo monoclonal biotinilado (cantidad en exceso)

AgI(Tg) = antgeno nativo (Cantidad variable)
Ag(Tg) -BtnAc(m)= complejo antgeno-anticuerpo (cantidad variable)
ka = Tasa constante de la Asociacin

2. Dispensador (s) para dispensados repetidos de volmenes

0.100ml y 0.350ml con una precisin de mejor de 1.5%
(opcional).
3. Lavador de Micro placas o una botella de apretado (opcional).
4. Lector de microplacas a 450 nm y 620 nm de longitud de onda
capacidad de absorcin (El filtro de 620nm es opcional)
5. Papel absorbente para retirar excesos de los pozos de la
microplaca.
6. Plstico envolvente o tapa para la microplaca de las etapas de
incubacin.
7. Aspirador de vaco (opcional) para los pasos de lavado.
8. Cronometro
9. Recipientes de almacenamiento para el almacenamiento de
tampn de lavado.
10. Agua destilada o desionizada.
11. Materiales de Control de Calidad

k-a = una tasa constante de disociacin

Ag(Tg) -BtnAc(m) + Estreptavidina C.W. inmovilizada complejo

(IC)
EstreptavidinaC.W. = Estreptavidina inmovilizada en el pozo
Complejo inmovilizado (IC) = Ag-Ac unido al bien

Tiroglobulina (Tg)
Sistema de Prueba
Cdigo producto: 2225-300
1.0

INTRODUCCION

Uso provisto: La microplaca de ELISA para Tiroglobulina de

Monobind esta diseada para la determinacin cuantitativa de la
tiroglobulina (Tg) los niveles en suero humano. La prueba es para
uso diagnstico in vitro solamente.

Despus de un perodo de incubacin adecuado, la fraccin de

anticuerpo-antgeno unido es separada del antgeno no unido
por decantacin o aspiracin. Otro anticuerpo (dirigido a un
eptope diferente) marcado con una enzima, se aade. Otra
interaccin ocurre para formar un complejo anticuerpo-biotiniladoantigeno-anticuerpo marcado con una enzima en la superficie de
los pocillos. El exceso de enzima se lava a travs de un paso de
lavado. Un substrato adecuado se aade para producir color
medible con el uso de un espectrofotmetro de microplacas. La
actividad enzimtica en el pozo es directamente proporcional a la
concentracin del antgeno nativo. Mediante la utilizacin de
diversas referencias de concentracin de antigeno conocidas, se
generada un curva de dosis-respuesta de la cual la concentracin
desconocida de antigeno puede ser determinada.
k
(IC)

2.0

RESUMEN Y EXPLICACION DE LA PRUEBA

La Tiroglobulina humana (Tg) es una glicoprotena grande (660

kD) que se almacena en el coloide folicular de la glndula
tiroides. Funciona como una prohormona en la sntesis
intratiroidea de las hormonas tiroideas primarias como
triyodotironina (T3) y tiroxina (T4).
La Tg se eleva en la tiroides folicular y el carcinoma papilar,
adenoma de tiroides, la tiroiditis subaguda, tiroiditis de Hashimoto
y la enfermedad de Graves. Niveles de Tg se encuentran como
normales en pacientes con carcinoma medular de tiroides. Las
determinaciones seriadas de Tg son ms tiles en la deteccin
de la recurrencia del carcinoma de tiroides diferenciado despus
de la reseccin quirrgica o ablacin con yodo radiactivo. La
Determinacin de la Tg se utiliza como un complemento de la
exploracin con yodo, pero no como un sustituto del mismo. La
evaluacin de los niveles de Tg ayuda en el manejo de los nios
con hipotiroidismo congnito.
La determinacin de la Tg se ha hecho con diversos mtodos que
utilizan unin competitiva directa RIA y doble anticuerpo
sndwich IRMA o ELISA, de los cuales este ltimo es el ms til.
Todos estos mtodos presentan interferencia por autoanticuerpos
endgenos a Tg. Es til determinar el efecto de autoanticuerpos
antes del tamizaje que se le hace a los pacientes para determinar
los niveles de Tg. Monobind ofrece Elisa autoanticuerpos Tg para
descartar dicha interferencia. (Por favor vea Monobind anti Tg
Cat Elisa # 1025 a 300)

3.0 PRINCIPIO
Ensayo
secuencial
Inmunoenzimomtrico
(tipo
4):
Los reactivos esenciales requeridos para un ensayo
inmunoenzimtico incluye anticuerpos de alta afinidad y
especificidad (enzima e inmovilizado), con diferentes y distintos
epitopes de reconocimiento, en exceso, y antigeno nativo. En
este procedimiento, la inmovilizacin se lleva a cabo durante el
ensayo en la superficie de una microplaca, bien a travs de la
interaccin de estreptavidina recubierta en el pozo con el
anticuerpo adicionado exgenamente tipo monoclonal, biotinilado
contra la Tiroglobulina.
Cuando el anticuerpo monoclonal biotinilado se mezcla con un
suero que contiene el antgeno de Tg, se produce una reaccin
entre el antgeno y el anticuerpo Tg, para formar un complejo
anticuerpo-antgeno. Simultneamente, la biotina unida al
anticuerpo se une a la estreptavidina recubierta en los
micropocillos resultando en la inmovilizacin del complejo. La
interaccin se ilustra mediante la siguiente ecuacin:
ka
Ag(Tg) +

Btn

Ag(Tg) -BtnAc(m)

Ac(m)
k-a

Enz
Ab(Tg)

Enz
Ab(Tg) - IC
k

Enz
Ab (Tg)

-b

= Anticuerpo marcado con enzima (cantidad en exceso)

IC = Complejo Antigeno-Anticuerpo
(Tg)
kb = Constante de velocidad de asociacin
EnzAc

k-b = Constante de velocidad de disociacin

4.0 REACTIVOS
Materiales suministrados:
A. Calibradores Tiroglobulina - 1.0 ml / vial - Iconos A - F
Seis (6) frascos de referencia para el antgeno tiroglobulina (Tg)
con niveles de 0 (A), 2.0 (B), 10,0 (C) 40, (D), 100 (E) y 250 (F)
ng / ml. Un conservante se ha aadido.
Nota: No se conocen, estndares internacionales aceptados para
tiroglobulina disponible. La Tg utilizados en los calibradores a
base de suero es una altamente purificado (98 +% de pureza)
preparacin humana de Tg que es calibrada gravimtricamente
contra el material de referencia obtenido de la Oficina
Comunitaria de Referencia # CRM 457.
B. x Tg-Biotina reactivo - 13ml/vial - Icono
Un (1) vial contiene biotina anti-Tg monoclonal de ratn IgG en
solucin, colorante y preservativo. Almacenar de 2 a 8 C.
C. Tg Reactivo enzimtico - 13 ml / vial - Icono E
Un (1) frasco que contiene anti-tiroglobulina IgG marcada con
peroxidasa de rbano (HRP) en solucin, colorante y
preservativo. Almacenar a 2 8 C.
D. Placa cubierta con Estreptavidina - 96 pozos - Icono
Una, de 96 pocillos (rotura mdulos as) microplaca recubierta
con estreptavidina y empacado en una bolsa de aluminio con un
agente de secado. Almacenar de 2 a 8 C.
E. Solucin de Lavado Concentrado - 20 ml - Icono
Una (1) vial contiene surfactante en solucin salina. Un
conservante se ha aadido. Almacene de 2 a 8 C.
F. reactivo de sustrato - 12ml/vial - Icono de SN
Un (1) botella contiene tetrametilbenzidina (TMB) y perxido de
hidrgeno (H2O2) en solucin. Almacenar de 2 a 8 C.
G. Solucin de parada - 8 ml / vial - icono
Un (1) frasco contiene un cido fuerte (H2SO4). Almacenar de 2 a
30 C.
H. Instrucciones del producto.
Nota 1: No utilice los reactivos despus de la fecha de
vencimiento del kit.
Nota 2: Evite la exposicin prolongada al calor y la luz.
Los reactivos abiertos son estables por sesenta (60) das
cuando se almacenan a 2 8 C. Kit y la estabilidad de los
componentes estn identificados en la etiqueta.
Nota 3: Por encima de los reactivos son para una sola
microplaca de 96 pocillos
STOP

4.1 Necesarios pero no suministrados:

1. Con una pipeta (s), capaz de dispensar volmenes de 50 y
100l con una precisin mayor de 1.5%.

5.0 PRECAUCIONES
Para uso diagnstico in vitro
No es para uso interno o externo en humanos o animales
Todos los productos que contienen suero humano han sido
evaluado como no reactivos para el antgeno de superficie de
hepatitis B, HIV 1 & 2 y de HCV requeridas por la FDA. Puesto
que ninguna prueba puede ofrecer completa seguridad de
ausencia de agentes infecciosos, todos los productos
humanos con suero deben ser manejados como
potencialmente peligrosos y capaces de transmitir
enfermedades. Las buenas prcticas de laboratorio para
manejo de productos sanguneos se pueden encontrar en el
Centro de Control de Enfermedades / Instituto Nacional de
Salud, "Bioseguridad en laboratorios microbiolgicos y
biomdicos," 2da Edicin, 1988, HHS.
La eliminacin segura de los componentes del kit debe ser
de acuerdo a los requerimientos reglamentarios y
estatutarios locales.

6.0 RECOLECCION Y PREPARACION

Las muestras deben ser sangre, suero y las precauciones
habituales en la toma de muestras por venopuncin deben ser
observados. Para la comparacin exacta de los valores normales
establecidos, se debe tomar una muestra de suero de la maana
en ayuno. La sangre se debe recoger en un tubo de puncin
venosa normal de tapa roja sin aditivos o barrera de gel. Dejar
que la sangre se coagule. Centrifugar la muestra para separar el
suero de las clulas.
Las muestras pueden ser refrigeradas de 2 a 8 C durante un
perodo mximo de cinco (5) das. Si la muestra(s) no se
puede(n) procesar dentro de este tiempo, la muestra(s) puede(n)
ser almacenadas a temperatura de -20 C por hasta 30 das.
Evite el uso de dispositivos contaminados. Evite ciclos de
congelamiento y descongelamiento. Cuando se realice el anlisis
por, se requiere 0.100ml de muestra.
7.0 CONTROL DE CALIDAD
Cada laboratorio debe procesar controles en los niveles de rango
bajo, normal y alto, para supervisar funcionamiento del anlisis.
Estos controles deben ser tratados como desconocidos y
determinar sus valores en cada corrida. Se debe llevar grficas
de control de calidad para seguir el funcionamiento de los
reactivos. Los mtodos estadsticos pertinentes deben ser
empleados para comprobar tendencias. Las desviaciones
significativas del funcionamiento establecido pueden indicar un
cambio experimental en las condiciones o la degradacin de los
reactivos del kit. Se deben utilizar reactivos frescos para
determinar la razn de las variaciones.
8.0 PREPARACION DEL REACTIVO:
1. Tampn de lavado
Diluir el contenido de la solucin de lavado concentrado en
1000ml de agua destilada o desionizada en contenedor de
almacenamiento adecuado. El tampn de lavado diluido puede
almacenarse a temperatura ambiente (20-27 C) por hasta 60
das.
Nota 1: No utilice el sustrato de trabajo si se ve de color azul.
Nota 2: No utilizar los reactivos que estn contaminados o
que tienen crecimiento de bacterias

9.0 PROCEDIMIENTO DE PRUEBA (Tiempo 4hr 15min)

Antes de proceder con el anlisis, llevar todos los reactivos,
referencias de suero y controles a temperatura ambiente (20 - 27
C).
** Procedimiento de prueba debe ser realizado por un
profesional especializada o capacitado **
1. El Formato de los pozos de los microplacas para cada muestra
de calibrador, control y paciente deben ensayarse por duplicado
Vuelva a colocar las tiras de los micropozos no usados en la
bolsa de aluminio, sellado y almacenar de 2-8 C.
2. Pipetear 0.050 ml (50 l) de los calibradores correspondientes,
controles
y
muestras
en
los
pocillos
asignados.
3. Aadir 0,100 ml (100l) del Reactivo xTg biotina a cada pocillo
Es muy importante dispensar todos los reactivos cerrando
el fondo de los pocillos.
4. Mezclar la microplaca suavemente por 20-30 segundos de
mezclado. Cubra con una envoltura de plstico o con la tapa de
la microplaca.
5. Incubar durante 2 horas a temperatura ambiente.
6. Deseche el contenido de la microplaca por decantacin o por
aspiracin. Si decanta, golpee ligeramente y seque la placa con
papel absorbente.
7. Aadir 350l del tampn de lavado (vase la seccin de
preparacin de reactivos), decantar (golpee y seque) o aspire.
Repita dos (2) veces adicionales para un total de tres (3) lavados.
Un lavador de placas automtico o manual puede ser
utilizado. Siga las instrucciones del fabricante para el uso
apropiado. Si un frasco de apretado se usa, llene cada pozo
hasta la parte superior apretando el envase (evitando
burbujas de aire). Decante el lavado y repita dos (2) veces
adicionales.
8. Aadir 0,100 ml (100l) de Reactivo enzimtico Tg a todos los
pocillos
NO AGITE LA PLACA DESPUS DE LA ADICIN DE LA
ENZIMA
9. Cubra con una envoltura de plstico. Incubar a temperatura
ambiente
durante
120
minutos.
10. Repita los pasos 6 y 7.
11. Aadir 0,100 ml (100 l) de sustrato a todos los pocillos
Agregue siempre los reactivos en el mismo orden para
minimizar las diferencias de tiempo de reaccin entre los
POZOS.
NO AGITE LA PLACA DESPUS DE ADICIN DEL SUSTRATO
12. Cubra con una envoltura de plstico o con la tapa de
microplacas. Incubar a temperatura ambiente durante 15 minutos.
13. Agregue 0.050 ml (50 l) de solucin de parada a cada pozo
y mezcle suavemente por 15-20 segundos
Agregue siempre los reactivos en el mismo orden para
reducir al mnimo las diferencias de tiempo de reaccin entre
los pozos.
14. Leer la absorbancia de cada pocillo a 450 nm (usando una
longitud de onda de referencia de 620-630nm para reducir al
mnimo imperfecciones del pozo) en un lector de microplacas Los
resultados deben ser ledos dentro de los treinta (30)
minutos de agregar la solucin de parada.
9.1 PROCEDIMIENTO ALTERNATIVO (Tiempo 2hr 15min)
Este procedimiento se puede utilizar con la ayuda de un
agitador de laboratorio de hematologa.
1. Formato de los pozos de los microplacas para cada muestra
de calibrador, control y paciente sean analizados en duplicado.
Reemplace cualquier tira de pozos no utilizado en la bolsa de
aluminio, sellado y almacenar a 2-8 C.
2. Pipetear 0.050 ml (50 l) de los calibradores adecuados
controles y muestras en los pocillos asignados.
3. Aadir 0,100 ml (100l) del anticuerpo monoclonal marcado
con biotina a cada pocillo. Es muy importante para dispensar
todos los reactivos cerca del fondo de los pocillos y agitar para
mezclar.
4. Incubar a temperatura ambiente durante 1 hora mientras se
agita constantemente en un agitador de a hematologa a150
RPM.
5. Deseche el contenido de la microplaca por decantacin o
aspiracin. Si decanta, golpee ligeramente y seque la placa con
papel
absorbente.
6. Aadir 350l del tampn de lavado (vase la seccin de
preparacin de reactivos), decantar (golpee y seque) o aspire.
Repita dos (2) veces adicionales para un total de tres (3) lavados.
Un lavador de placas automtico o manual puede ser utilizado.
Siga las instrucciones del fabricante para el uso apropiado. Si un
frasco se usa, llene cada pozo en la parte superior apretando el

10.0 CALCULO DE RESULTADOS

Una curva dosis-respuesta se utiliza para determinar la
concentracin de tiroglobulina humana (Tg) en muestras
desconocidas.
1. Registre la absorbancia obtenida del listado del lector de
microplacas conforme al ejemplo 1.
2. Trace la absorbancia para cada referencia duplicada del suero
contra la concentracin correspondiente de Tg en ng/ml en papel
grfico lineal (no el promedio de los duplicados de las referencias
de suero antes de trazarlos).
3. Dibuje la curva de mejor ajuste a travs de los puntos
trazados.
4. Para determinar la concentracin de Tg para una muestra
desconocida, localizar la absorbancia promedio de los duplicados
para cada muestra desconocida en el eje vertical de la grfica,
encontrar el punto de interseccin de la curva, y leer la
concentracin (en ng/ml) del eje horizontal de la grfica (los
duplicados de la muestra desconocida se promedian segn lo
indicado). En el ejemplo siguiente, la absorbancia media (0424)
intersecta la curva dosis-respuesta en 25,2 ng/ml de
concentracin de Tg (Ver Figura 1).
Nota: El software de reduccin de datos diseado para ensayos
de ELISA tambin se puede utilizar para la reduccin de datos.
Si este tipo de software que se utilice, la validacin del software
debe ser comprobada.
Ejemplo 1
(Datos basados en el procedimiento de prueba de 9.0 tiempo de 4 h 15 min.)

Cal F
Control 1
Control 2
Paciente
1

Valor

Cal E

0.047

(ng/ml)

Cal D

Promedio

Cal C

0.047

Abs (B)

Cal B

Abs (A)

Nmero de
pozos

ID de la
muestra

A1

Cal A

B1

0.047

C1
D1
E1
F1

0.093
0.090
0.221
0.214

0.091
0.217

10

G1
H1
A2

0.612
0.634
1.343

0.625

40

B2
C2
D2
E2
F2

1.335
2.596
2.557
0.142
0.150

G2
H2
A3

1.622
1.566
0.426

B3

0.422

1.339

100

2.577

250

0.146

4.99

0.876

125.0

0.424

25.2

* Los datos presentados en el Ejemplo 1 y la Figura 1 son slo para

ilustracin y no debe ser utilizada en lugar de una curva dosisrespuesta preparada con cada ensayo.

11.0 Q. C. PARAMETROS
Para que el ensayo muestre resultados que se consideran
vlidos los siguientes criterios deben cumplirse.
1. La absorbancia (OD) del calibrador A debe ser <0,10.
2. La absorbancia (OD) del calibrador F debe ser> 1,3
3. Cuatro de cada seis controles de calidad deben estar dentro de
los rangos establecidos
12.0 ANALISIS DE RIESGOS
El Formulario de Anlisis de Riesgo y la MSDS de este producto
est disponible a peticin de Monobind Inc.
12.1 Ensayo de Rendimiento
1. Es importante que el tiempo de reaccin en cada pocillo se
mantenga constante para conseguir resultados reproducibles.
2. El pipeteo de las muestras no debe extenderse ms all de
diez (10) minutos para evitar la deriva del anlisis.
3. Muestras altamente lipmicas, hemolizadas o ampliamente
contaminadas
(s)
no
deben
ser
utilizadas.
4. Si ms de una (1) la placa se utiliza, se recomienda repetir la
curva de dosis-respuesta.
5. La adicin de solucin de sustrato inicia una reaccin cintica,
que termina mediante la adicin de la solucin de parada. Por lo
tanto, el sustrato y la solucin de parada deben ser aadidos en
la misma secuencia para eliminar cualquier desviacin de tiempo
durante la reaccin.
6. Los lectores de la placa miden verticalmente. No tocar el fondo
de los pocillos.
7. Fallas en el paso de remover adecuadamente la solucin
adherida en la etapa de lavado, aspiracin o la decantacin se
puede dar como resultado una rplica pobre y a resultados
falsos.
8. Utilizar los componentes del mismo lote. No mezcle los
reactivos de diferentes lotes.
9. Las muestras de pacientes con concentraciones de
tiroglobulina por encima de 250 ng/ml puede diluirse con el
calibrador cero y ser reprocesadas. Multiplicar el valor obtenido
por el factor de dilucin para obtener el valor corregido.
10. El pipeteo preciso y exacto, asi como seguir los
requerimientos de tiempo y temperatura descritos es
fundamental. Cualquier desviacin de instrucciones de uso dadas
por
Monobind
puede
producir
resultados
inexactos.
11. Todas las normas nacionales aplicables, reglamentos y leyes,
incluyendo, pero no limitado a los procedimientos de laboratorio,
se deben seguir estrictamente para garantizar el cumplimiento y
el uso adecuado del dispositivo.
12. Es importante para calibrar todo el equipo, por ejemplo
Pipetas, lectores, lavadoras y/o de los instrumentos
automatizados utilizados con este dispositivo, y para realizar el
mantenimiento preventivo de rutina.
13. Anlisis de riesgos - como es requerido por la marca CE IVD
la Directiva 98/79/CE - para este y otros dispositivos, fabricados
por Monobind, se puede solicitar a travs de correo electrnico
de Monobind@monobind.com.
12.2 Interpretacin
1. Las mediciones y la interpretacin de los resultados debe ser
realizada por una persona especializada o profesional
capacitado.
2. Los resultados de laboratorio por s solos son un nico
aspecto de la determinacin de la atencin al paciente y no debe
ser la nica base para la terapia, sobre todo si los resultados son
discordantes con otros determinantes.
3. Para obtener resultados vlidos en el examen, los controles
adecuados y otros parmetros debe estar dentro de los rangos y
los requisitos de ensayo.
4. Si los kits de ensayo se modifican, producto de mezcla de
diferentes kits, puede producirse resultados falsos de las, o si se
hace una incorrecta interpretacin de los resultados estn mal
interpretado, Monobind no tendr ninguna responsabilidad.
5. Si la reduccin de datos controlados computarizados se utiliza
para interpretar los resultados de la prueba, es imperativo que los
valores previstos para los calibradores varen dentro del 10% de
las concentraciones asignadas

Figura 1

Figure 1

13.0 VALORES DE REFERENCIA

Con base en los datos clnicos recogidos por Monobind en
concordancia con la literatura publicada se estableci un rango
normal.
Tabla 1: Valores Esperados para TG
POBLACION
RANGO
Adultos
3.5 56 ng/ml

3.00
2.50

Absorbance(s)

2.00
1.50
1.00
Patient

0.50
0.00
0

50

100

150

Tg valores en ng/ml
Tg Values in ng/ml

200

250

La Tg se encuentra elevada en pacientes con linfoma folicular de

tiroides y el carcinoma papilar, adenoma de tiroides, la tiroiditis
subaguda, tiroiditis de Hashimoto y la enfermedad de Graves.
Los bajos niveles de Tg son una indicacin de la tirotoxicosis
facticia.
Es importante tener en cuenta que establecer el rango normal
depende de una multiplicidad de factores como la especificidad
del mtodo, la configuracin regional, la poblacin analizada y la
precisin del mtodo en las manos de los tcnicos. Por estas
razones cada laboratorio debe depender del rango de valores
esperados establecidos por el fabricante solamente hasta que en
el rango de una casa puede ser determinada por los tcnicos
usando el mtodo con una poblacin autctona de la zona en la
que se encuentra el laboratorio.
14.0 CARACTERISTICAS DE RENDIMIENTO
14.1 Precisin
Las precisiones intra e inter ensayo del anlisis de la tiroglobulina
AccuBind sistema de prueba de ELISA se determinaron por
anlisis en tres diferentes niveles de control de los sueros. El
nmero (N), el valor medio (X), la desviacin estndar () y el
coeficiente de variacin (CV) para cada uno de estos sueros de
control se presentan en la Tabla 2 y la Tabla 3.
TABLA 2
Precisin Intra Ensayo (Valores en ng/ml)
Muestra
N
X
C.V.

Pool 1
22
6.2
0.41
6.6%
Pool 2
22
64.4
2.23
3.6%
Pool 3
22
194.1
8.17
4.2%
TABLA 3
Precisin Inter Ensayo* (Valores en ng/ml)
Muestra
N
X
C.V.

Pool 1
10
5.8
0.52
9.0%
Pool 2
10
62.2
3.82
6.1%
Pool 3
10
192.3
10.90
5.7%
* Si se mide en diez experimentos por duplicado en siete das

14.2 Sensibilidad
La sensibilidad analtica (lmite de deteccin) fue comprobada
determinando la variabilidad del calibrador de0 ng / ml y el uso de la
estadstica de 2 (95% de certeza) para calcular la dosis mnima. La
sensibilidad del ensayo se encontr como 0,44 ng/ml.
14.3 Precisin
La Tg AccuBind ELISA sistema de prueba se compar con un
radioinmunoensayo referencia tubo recubierto (IRMA). Se utilizaron
muestras biolgicas de la poblacin (sintomtica y asintomtica). Los
datos obtenidos se muestran en la Tabla 4.
TABLA 4

Metodo

Media
(x)

Regresin por
mnimos cuadrado
anlisis

Coeficiente
de
correlacin

Este Mtodo
13.6
y = 2.55 + 0.908 (x)
0.975
Referencia
11.4
La ecuacin de regresin cuadrtica y el coeficiente de correlacin
indican una excelente concordancia de los mtodos
14.4 Especificidad
La reactividad cruzada de la tiroglobulina mtodo AccuBind
ELISA para sustancias seleccionadas se evalu mediante la
adicin de la sustancia interferente(s) para una matriz de suero
en las siguientes concentracin. La reactividad cruzada se
calcul mediante la derivacin de una relacin entre la dosis de
sustancia interferente a dosis de tiroglobulina necesaria para
producir la misma absorbancia.
Sustancia
Tiroglobulina
Triyodotironina
Tiroxina
TBG

Concentracin
100 ng/ml
1000 ng/dl
1000 ng/ml
100 ng/ml

Reactividad cruzada
100.0%
N/D
N/D
N/D

14.5 Efecto de dosis alta

Dado que el ensayo es secuencial en el diseo, las concentraciones
altas de Tg no muestran el efecto gancho. Las muestras con

concentraciones de ms de 50.000 ng/ml mostraron niveles

extremadamente altos de absorcin.
15.0 REFERENCIAS
1. Beever K, J Bradbury, Phillips D, et al, "de alta sensibilidad
Los ensayos de autoanticuerpos contra tiroglobulina y peroxidasa
tiroidea ", Clin Chem, 35, 1949-1954 (1989).
2. Ladenson PW, "las pruebas de laboratorio ptimo para el
diagnstico y seguimiento de los ndulos de la tiroides, el bocio y
el cncer de tiroides", Clin Chem, 42, 183-187 (1996).
3. Mayo Medical Laboratories: Catlogo de pruebas, Rochester,
MN (1997).
4. Spencer CA, Takeucho M, Kazarosyn M, "Situacin actual y
objetivos de rendimiento para las pruebas de tiroglobulina srica",
Clin Chem, 42, 164-173 (1996).
5. Tietz N. Ed.: Gua clnica para exmenes de laboratorio. 3 ed.
Filadelfia. Saunders (1995).
6. Surks, MI, Chopra, IJ, Mariash, NC, la "directrices de la
American Thyroid Association para el uso de pruebas de
laboratorio en trastornos de la tiroides", JAMA, 263, 1529-1532
(1990).
7. Ng, M., Rajna, A, Khalid, B, "Inmunoensayo enzimtico para la
medicin simultnea de anticuerpos contra la tiroglobulina y los
microsomas tiroideos en el suero", Clin Chem, 33, 2286-2288
(1987).
8. Spencer, CA, Takeucho M, Kazarosyn M, Wang CC, Guttler
RB, Singer PA, et al, "auto-anticuerpos de tiroglobulina srica, la
prevalencia, la influencia en las mediciones de tiroglobulina
srica, y la importancia pronstica en pacientes con carcinoma
diferenciado de tiroides", J Clin Endocrinol Metab , 83, 1121-1127
(1998).
9. Spencer CA, JS LoPresti, S Fatemi, JT Nicoloff, "Deteccin de
cncer de tiroides diferenciado residual y recurrente por las
mediciones de tiroglobulina srica", la tiroides, 9, 435-41 (1999).
10. Schlumberger M, Baudin E, "las determinaciones de
tiroglobulina srica en el seguimiento de pacientes con carcinoma
diferenciado de tiroides", Eur. J. Endocrinol, 138, 249-252 (1998).
Revisin: 3
Fecha: 052912
Cat #: 2225-300
Tamao

Reactivo (lleno)

envase (evitando las burbujas de aire). Decante la lavada y repita

dos (2) veces adicionales.
7. Aadir 0,100 ml (100l) de Reactivo enzimtico Tg a todos los
pocillos
8. Incubar a temperatura ambiente durante 1 hora mientras se
agitaba constantemente en un agitador de hematologa a 150
RPM.
9. Repita los pasos 5-6 como se describe en el "Procedimiento de
prueba" en la seccin anterior.
10. Siga los pasos 11-14 para el desarrollo de color y medida.

DCO: 0704

96(A)

192(B)

A)

1ml

1ml

B)

1 (13ml)

2 (13ml)

C)

1 (13ml)

2 (13ml)

D)

1 placa

2 placas

E)

1 (20ml)

1 (20ml)

F)

1 (12ml)

2 (12ml)

G)

1 (8ml)

2 (8ml)