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IES Al-ndalus
Biologa 2 de Bachillerato.
Curso 2008-09
Resumen
Los microorganismos forman un amplio grupo de seres vivos fundamentales para la
vida que conviven con nosotros aunque no nos percatemos de ello, debido a su pequeo
tamao.
Esta es una de las razones por las que hemos decidido realizar este trabajo.
Nuestro objetivo principal era familiarizarnos con el material y las tcnicas empleados
en el laboratorio, adems de introducirnos en el mundo de la microbiologa.
Los procedimientos que hemos seguido durante el desarrollo de nuestro trabajo han
consistido en una bsqueda de informacin previa y una serie de prcticas de
laboratorio que incluan la siembra de microorganismos, un seguimiento de su
crecimiento, preparaciones y observaciones en el microscopio.
Finalmente, podemos decir que el trabajo nos ha aportado adems un aprendizaje de
forma prctica y una mayor capacidad para trabajar en grupo.
Summary
Microorganisms form a large group of living beings fundamental for life which live
with us although we dont realize because of their little size.
This is the reason why we have decided to make this work.
Our principal objetive was to get familiar with the equipments and techniques employed
in a laboratory, appart from getting immersed in the microbiology world.
The technics we have followed during the development of our work have consisted on a
reseach o previous information and severals laboratory practices which included the
carring out of sowing of microorganisms monitoring their growth, preparations and
observations in the microscope.
Finally, we would like to say that this work has provided us whit a practical learning as
well as a huge abilily to work in group.
PALABRAS CLAVE
(1)
(2)
Autoclave: es una forma de esterilizar los materiales empleando vapor de agua, creando
una alta presin y temperatura elevada en un recipiente cerrado durante unos 15- 20 minutos.
(6)
(7)
(8)
(9)
(10)
(12)
Cuerpo fructfero: estructura reproductora que produce el hongo sobre el sustrato, cuya
funcin es dispersar las esporas que contiene.
(13)
(14)
(16)
(17)
Esporas: clulas producidas por el hongo que se dispersan con el viento y el agua
generalmente.
(18)
(21)
(22)
(23)
(26)
(27)
(29)
(30)
(32)
(34)
(35)
(36)
Tincin de Gram: Tcnica que se utiliza para diferenciar a las bacterias gram positivas de
las gram negativas, segn el color que adquieran.
(37)
(38)
Unidad formadora de colonia (UFC): Clula bacteriana viva y aislada que en las
condiciones adecuadas da lugar a la produccin de una colonia de bacterias
(39)
ITRODUCCI
1.- Introduccin a la microbiologa
La microbiologa es la rama de la biologa que se encarga del estudio de los
microorganismos(30). Los microorganismos son un grupo de organismos microscpicos que
pueden ser clulas aisladas o agrupaciones celulares. Tambin se encarga del estudio de
organismos(32) microscpicos pero acelulares como virus, viroides y priones. Algunos de estos
organismos son los causantes de enfermedades de seres humanos, animales y plantas, son las
llamadas enfermedades infecciosas.
La microbiologa estudia estos organismos microscpicos y su funcionamiento. Adems
investiga el origen y evolucin de estos microorganismos.
Tiene un papel fundamental ya que se ocupa de muchos problemas prcticos relacionados con
la medicina, la agricultura e industria.
Los filtros tienen poros muy pequeos lo que hace que los microorganismos no
pasen a travs de ellos pero s permiten el paso de los lquidos o los gases, por ello
se utilizan para esterilizar lquidos sensibles al calor y gases.
-Mtodos qumicos:
Estos mtodos se utilizan para objetos no resistentes al calor.
Determinados productos qumicos, naturales o sintticos, controlan el crecimiento
microbiano. Pueden actuar de dos formas:
-Agentes microbicidas: matan los microorganismos y segn el tipo sobre el que acten se
habla de agentes bactericidas, fungicidas o viricidas.
-Agentes estticos: detienen el crecimiento de los microorganismos y se distingue entre
agentes bacteriostticos, fungistticos y viristticos.
Algunos de estos medios qumicos son: el cido fnico, el cido cianhdrico, el xido de
etileno, la clorhexidina, los derivados mercuriales, los derivados del yodo y muchas otras
sustancias. El alcohol etlico no produce esterilizacin completa.
3.2- Pasteurizacin
La pasteurizacin es un mtodo de la microbiologa utilizado sobretodo en la industria
alimentaria y que se dedica a reducir el nmero de microorganismos presentes en los
alimentos. Para ello, se eleva la temperatura de un lquido alimenticio hasta alcanzar una
temperatura inferior a su punto de ebullicin durante un periodo muy corto de tiempo, 15
segundos (debido a este escaso tiempo recibe el nombre de pasteurizacin en flash), para
eliminar de esta forma ciertos microorganismos que puedan estropear los alimentos pero sin
llegar a alterar demasiado el sabor ni las vitaminas de dicho producto y aumentar con esto, el
tiempo de conservacin de los alimentos.
La pasteurizacin es muy utilizada para el almacenamiento de la leche y sus derivados.
Este mtodo recibe el nombre de pasteurizacin debido al qumico y bacterilogo francs,
Louis Pasteur, quien utiliz el calor para controlar el deterioro del vino.
Consistencia adecuada del medio: existen varios tipos de medio segn su estado fsico:
lquido, semislido o slido.
Para transformar un medio lquido en uno slido o semislido, le podemos aadir
varios productos como pueden ser la albmina, la gelatina o el agar (es el ms
utilizado). Sin embargo, en los medios solidificados con gelatinas muchos
microorganismos no crecen adecuadamente, por ello se utiliza menos.
pH: para que se desarrollen mejor los microorganismos debe de haber una cierta
cantidad de iones hidrgeno, los cuales se desarrollan mejor en medios con un pH
neutro.
Esterilidad del medio: todos los medios de cultivo que se utilicen deben de haberse
esterilizado antes, ya que si utilizamos medios de cultivo sin esterilizar, podemos
provocarle a los microorganismos alteraciones, impedirles su crecimiento La forma
de esterilizarlos ms tradicional es el denominado autoclave, que utiliza vapor de agua
a presin para esterilizar los medios.
4.1- Morfologa
Las clulas procariotas estn delimitadas por una pared celular rgida compuesta por
polisacridos y pptidos, que rodean a la membrana plasmtica, la cual est compuesta por
lpidos, protenas y glcidos en menor medida. A travs de ella, se produce el intercambio de
sustancias entre el citoplasma celular y el medio en el que se encuentra la clula.
La clula procariota no posee orgnulos definidos; en el citoplasma solo se encuentran
ribosomas, pero son mas pequeos que los que la clula eucariota posee (ribosomas 70s frente
a ribosomas 80s), pueden presentar flagelos que permite su movilidad, pilis, relacionados con
el intercambio de ADN, fimbrias, relacionados con la adherencia a sustratos y cpsulas,
cubierta de naturaleza glucdica, por ello tambin recibe el nombre de glucoclix.
Las clulas procariotas realizan las tres funciones vitales:
- Funcin de nutricin
Se distinguen dos grupos segn la forma de conseguir materia orgnica:
Procariotas auttrofas: hablamos de procariotas auttrofas cuando son capaces de
producir materia orgnica a partir de materia inorgnica y energa que han captado del
medio ambiente.
Procariotas hetertrofas: ingieren materia orgnica extrayendo de ella parte de su
energa qumica.
- Funcin de relacin
Las funciones de relacin se expresan de una forma u otra dependiendo del tipo de respuesta
que le de con respecto al estmulo recibido. Estas respuestas pueden modificar el metabolismo
o realizar movimientos de aproximacin o de huida, que implica la utilizacin de flagelos o
movimientos de reptacin.
Algunas bacterias forman en su interior esporas de resistencias o endosporas, estas estructuras
se encargan de proteger el ADN y el resto del contenido protoplasmtico. Son estructuras muy
resistentes al calor, la radiacin, los cidos, etc.
- Funcin de reproduccin
Normalmente, la reproduccin de los organismos procariotas se lleva a cabo de forma
asexual por biparticin y en menor medida por gemacin(19).
Adems, las bacterias poseen unos mecanismos de transferencia gentica de tipo parasexual,
mediante los cuales se intercambian fragmentos de ADN, esta transferencia puede ser por
transformacin, conjugacin y transduccin. (Siempre la transferencia se realiza del donante
al receptor):
Transformacin: mediante este procedimiento, la clula receptora capta del medio
donde vive ADN libre procedente de otra clula, el cual, es incorporado en ella.
Las clulas capaces de sufrir transformaciones se las conoce como competentes. Ej:
especies de bacterias y algunas pertenecientes al dominio Archaea(3).
4.2- Tipos
Dominio Bacteria
Podemos definir a las bacterias como aquellos microorganismos unicelulares de tamao
microscpico que carecen de membrana nuclear y por lo tanto su ncleo no se encuentra
diferenciado.
Hay dos tipos de pared celular. Segn esto, distinguimos dos tipos de bacterias:
- Bacterias Gram positivas: la pared celular es muy gruesa, posee muchas capas lineales
formada principalmente por peptidoglucano, y cido teicoico (polmero derivados de
azcares) que va unido a estructuras lipdicas.
Para saber si nos encontramos ante una bacteria gram positiva o una gram negativa,
recurrimos al mtodo de "Tincin de Gram"(36) que consiste en una prueba til y de fcil
realizacin que permite diferenciar las dos principales clases de bacterias. Se colocan sobre un
portaobjeto(35) de bacterias fijadas por calor o secado de algn otro modo y se tien con cristal
violeta.
A continuacin se aade una solucin yodada y luego se realiza un lavado con un agente
decolorante. Luego se usa safranina para teir de rojo las clulas que no hayan retenido el
cristal violeta. En las bacterias gram positiva se van a teir de purpura y el colorante queda
atrapado en la capa de peptidoglucano. En cambio en las bacterias gram negativa presentan
una capa delgada de petidoglucano y no retiene el color violceo.
Desde un punto de vista filogentico encontramos doce reinos:
-Aquifex/Hydrogenobacter: presentan caractersticas termfilas, y crecen mejor en
temperaturas acuticas de 85C a 95 C normalmente crecen cerca de volcanes subacuticos o
fuentes hidrotermales.
-Thermotoga: crecen a temperaturas muy altas, entre otras de sus principales caractersticas
podemos destacar que son extremadamente termoestables por lo que son utilizadas en
procesos industriales normalmente en sectores alimenticios ya que tambin son anaerobias y
son capaces de realizar fermentaciones.
-Bacterias verdes no del azufre o Chloroflexi : son fotosintticos, realizan fotosntesis
anoxignica ya que no producen oxigeno mediante la fotosntesis. Se llaman bacterias verdes
debido a su pigmento verde que se encuentra en los clorosomas (complejo antena fotosinttico
presente en este tipo de bacterias).
-Deinococos y parientes: es una bacteria extremfila (vive en condiciones extremas), y es
muy resistente a la radiacin.
a
-Espiroquetas: es un tipo de bacterias gram negativas que tienen clulas largas y enrolladas
helicoidalmente. Estas bacterias se pueden mover de distinto modo en medio lquido:
rotacin alrededor de su eje, contracciones flexulosas (forma ondas) y movimiento helicoidal
e incluso en ambientes altamente viscosos, y en medios slidos con un 1% de agar.
-Bacterias verdes del azufre o Chlorobi: realizan la fotosntesis anoxignica. Estas bacterias se
encuentran en las zonas ricas en azufre y anaerobias de los lagos.
-Bacteroides-flavobacterias: Son bacilos aerobios e inmviles de tipo gram negativas.
Normalmente se encuentran en agua dulce y salada, alimentos y plantas procesadoras.
-Planctomyces y parientes: presentan agua dulce y marina, tienen forma de ovoide que se une
a una especie de tallo y se reproducen por gemacin.
-Clamydiae: produce infecciones en el tracto genital, respiratorio y ocular.
-Bacterias gram positivas: se tien de azul oscuro o violeta por la tincin de Gram.
Constituyen uno de los grupos de bacterias junto con las bacterias gram negativas.
-Cianobacterias: son bacterias azulverdosas, fotosintticas y contienen clorofila. Normalmente
se encuentran en la corteza de los rboles, rocas y suelos hmedos.
-Bacterias rojas, bacterias prpuras del azufre, o Chromatiales: son fotosintticas y
anaerbicas. Normalmente se encuentran en manantiales abundantes en azufre o en agua
estancada.
Dominio Archaea
Al principio se crea que los Archaea pertenecan al dominio de las bacterias pero ms tarde
se descubri que tienen unas caractersticas diferentes a stas. Las archaeas son genticamente
ms parecidas a las eucariotas que a las procariotas, sin embargo se incluyen dentro de ellas
porque no tienen un ncleo determinado por una membrana.
Los Archaea pueden habitar en medios con condiciones muy extremas ya que algunas de
ellas son hipertermfilas (pueden sobrevivir con temperaturas superiores a los 100C), otras
son extremfilas (pueden habitar en aguas con grandes concentraciones salinas y en medios
con un pH 1), o tambin pueden ser metangenas (habitar en los intestinos de otros
seres vivos). La mayora son auttrofos y capaces de sintetizar azufre, aunque tambin existen
archaeas hetertrofos.
-Morfologa
Los archaea tienen formas y tamaos muy variados. Pueden tener un dimetro comprendido
entre 0,1 y 15 m, pero pueden llegar hasta las 200 m si constan de filamentos agregados.
Su membrana es una pared celular similar a la de las bacterias pero se diferencia en su
composicin. Pueden clasificarse como Gram positivas o negativas.
-Fisiologa
Tienen una sola enzima ARN polimerasa que transcribe a todos los genes de la clula.
Los archaea metangenos no pueden sobrevivir en presencia de oxgeno y obtienen energa
mediante la fermentacin de otras sustancias que transforman en metano.
Tambin pueden actuar en simbiosis con otros seres vivos (por ejemplo facilitando el proceso
de rumiacin).
Los halfilos requieren altas concentraciones salinas para vivir. Estos organismos captan la
luz mediante unos pigmentos de sus membranas y lo transforman en ATP.
Los termfilos requieren azufre, unas temperaturas superiores a 60C y un pH cido para
desarrollarse.
-Tipos
Como los archaea son tan variados que los tipos son muy numerosos. Actualmente se conocen
unos 100 gneros y unas 300 especies. Se distinguen tres reinos:
Crenarchaeota: comprende a la mayora de las especies hipertermfilas. Muchas son
auttrofas y se encuentran en mares y suelos.
Euryarchaeota: Habitan en medios hipertnicos y son capaces de obtener energa en forma
de ATP sin tener clorofila. Tambin pertenecen a este grupo los archaeas metangenos.
- Korarchaeota: Son consideradas las ms primitivas y suponen una pequea parte de las
hipertermfilas.
Orgnulos celulares
Ncleo: Est formado por una membrana nuclear doble y el material gentico. La
membrana nuclear es porosa y permite el paso de pequeas partculas mediante difusin.
Retculo endoplasmtico: Es una agrupacin de cisternas y canales comunicados entre s
y con las membranas celular y nuclear que desempea funciones importantes en la
sntesis de protenas y en el metabolismo celular. El retculo endoplasmtico puede ser
rugoso si tiene adheridos ribosomas. Este tipo de retculo se encuentra rodeando al
ncleo. El retculo endoplasmtico liso no tiene ribosomas y participa en la digestin de
lpidos.
Ribosomas: Son pequeas estructuras supramoleculares formadas por cido ribonucleico
y protenas. Se encuentran dispersos por el citoplasma o adheridos al retculo
endoplasmtico. Se fabrican en el ncleo y su principal funcin es la sntesis de protenas.
Los ribosomas leen el ADN mensajero y une las protenas con los aminocidos que
suministra el ADN transferente.
Aparato de Golgi: Es una estructura formada por un conjunto de membranas apiladas. Se
encarga principalmente de completar la fabricacin de algunas protenas, fabricar los
lisosomas primarios y de transportar al exterior las sustancias de desecho de la clula.
Mitocondrias: Se encargan de suministrar la energa que necesita la clula para realizar
sus funciones (sntesis de ATP). Este orgnulo consta de una membrana externa y una
membrana interna plegada formando las crestas mitocondriales. En su interior se
encuentra la matriz mitocondrial donde se produce el ciclo de Krebs.
Plastos: Son orgnulos celulares exclusivos de las clulas vegetales que poseen
pigmentos (clorofila y carotenoides). Sirven para sintetizar y acumular sustancias de
reserva. Dentro de los plastos encontramos dos grupos: los leucoplastos que carecen de
pigmentos y suelen almacenar sustancias y los cromoplastos que llevan en su interior un
pigmento que les da color. Si este pigmento se trata de clorofila son cloroplastos.
-Tipos
Protozoos: Engloban a un grupo de organismos unicelulares eucariotas hetertrofos y
que no poseen pared celular.
Pueden habitar muchos medios libremente o pueden estar asociados a otros organismos
mediante simbiosis o parasitndolos. Como no tienen pared celular constan de un
exoesqueleto si son parsitos o de una cubierta protectora si viven en el medio libre.
Aunque algunos protozoos permanecen inmviles, adquieren movilidad al menos en
alguna fase de su vida. La movilidad se debe a la presencia de cilios y flagelos o
mediante pseudpodos (conocido como movimiento ameboide).
La nutricin por fagocitosis de partculas slidas u otros organismos pueden pasar a
travs de orificios de la membrana o ser acaparados por pseudpodos que rodean a la
partcula y la incorporan al citoplasma. La nutricin por pinocitosis de macromolculas
en disolucin se realiza mediante la ingestin de estas sustancias a travs de la membrana
u originando una vacuola. La digestin se lleva a cabo en las vacuolas eliminado
posteriormente las sustancias que la clula no puede digerir o las que quedan de desecho.
La reproduccin es normalmente de tipo asexual, por biparticin, aunque tambin puede
darse una divisin mltiple como por ejemplo en las amebas.
Los protozoos pueden clasificarse atendiendo a su forma de movilidad: (Esta
clasificacin no es la ms actual, pero nos servir para diferenciar a los protozoos de
forma general)
Esporozoos: Generalmente son inmviles en su etapa de madurez y parsitos estrictos.
En la actualidad este grupo engloba a una gran diversidad de organismos con
caractersticas similares que han sido adquiridas gracias a las adaptaciones que han
sufrido para ser parsitos. (no son semejantes a nivel de ultraestructura, genes,
protenas, por esta razn se cuestiona esta clasificacin.)
Con frecuencia su ciclo vital tiene lugar en diferentes individuos, pues a veces
necesitan un individuo que acte como vector para terminar de desarrollarse en otro
individuo diferente.
En l presentan alternancia de reproduccin sexual y asexual.
Su reproduccin sexual tiene lugar mediante gametos haploides que forman un
cigoto diploide. Las clulas del individuo diploide resultante son capaces de
reproducirse asexualmente por mitosis. El ciclo vital podemos observarlo con
claridad por ejemplo en el protozoo causante de la enfermedad de la malaria.
Ciliados: Son aquellos protozoos los cuales poseen cilios que permiten su movilidad.
Pueden reproducirse asexualmente por biparticin o por gemacin. La reproduccin
sexual tiene algunas particularidades puesto que poseen dos ncleos, un macroncleo
y un microncleo reservado para esta funcin.
Los microncleos producen gametos que se fusionan creando un cigoto diploide.
Seguidamente se genera un macroncleo a partir del microncleo.
Son capaces de habitar en medios muy diferentes (en el suelo, en agua dulce o
salada, o como parsitos).
Amebas: Su nombre se debe a su movilidad mediante pseudpodos, que son
movimientos del citoplasma que generan prolongaciones que facilitan el
desplazamiento. Su reproduccin es muy simple, se realiza mediante mitosis y
posterior estrangulamiento que da lugar a dos clulas hijas.
Son capaces de habitar en diferentes medios como los ciliados.
Otra caracterstica de algunos de estos organismos es la posesin de un caparazn
de CaCO3 o de silicatos que les sirve para hacerlos mas resistentes a la vida en el
medio exterior.
Algas diato-meas
Algas verdes
Algas pardas
Algas rojas
Hongos: Los hongos son microorganismos eucariticos que pueden ser tanto unicelulares
como pluricelulares, y cuyas clulas se asocian formando cuerpos filamentosos llamados
hifas; el conjunto de estas hifas se denomina micelio. En la asociacin de estos filamentos
a veces se producen falsos tejidos.
Los hongos, al carecer de clorofila, no realizan la fotosntesis, por lo cual su alimentacin
es hetertrofa. La nutricin la realizan de la siguiente forma:
Segregan al exterior enzimas digestivas y una vez digeridos, los alimentos son absorbidos
(digestin externa).
Los hongos se clasifican en tres grupos dependiendo del tipo de alimento que consuman:
- Saprfitos: se encargan de descomponer la materia orgnica.
- Parsitos: se alimentan de los lquidos del interior de otro ser vivo.
- Simbiontes: se asocian con otros seres vivos para favorecerse mutuamente.
Ficomicetos
Ascomicetos
Basidiomicetos
Tipos de hongos:
Levaduras: En microbiologa se llama levadura a todos los hongos con predominio de
una fase unicelular en su ciclo de vida. De esta forma, las levaduras son hongos
unicelulares microscpicos y filamentosos, que pueden aparecer aislados o unidos
unos a otros formando pequeas cadenas o filamentos.
Las levaduras son organismos anaerobios facultativos; en presencia de oxgeno, estos
organismos son capaces de transformar los azcares en dixido de carbono, agua,
cierta cantidad de levadura y energa, creciendo rpidamente (respiracin). En cambio,
en ausencia de oxgeno, estos organismos son capaces de transformar los azcares en
dixido de carbono y alcohol, obteniendo energa y creciendo lentamente
(fermentacin).
En cuanto a la reproduccin de las levaduras, puede ser sexual, por gemacin, o
asexual, por ascosporas. Muchas levaduras siguen un ciclo de reproduccin en el cual
se van alternando los tipos de reproduccin: dos clulas haploides, que actan como
lamentos se unen creando una clula diploide, la cual es capaz, por mitosis, de
reproducirse creando individuos genticamente iguales a ella. En determinadas
condiciones, una de estas clulas diploides, por meiosis, origina clulas haploides, que
actuarn de nuevo como gametos (de cada clula diploide se obtienen cuatro gametos),
cerrando el ciclo.
Las levaduras que no son capaces de recorrer el ciclo completo pertenecen al gnero
Cndida.
Uso
Se tiene constancia del uso de las levaduras desde el ao 10000 a.C, cuando se
utilizaban para elaborar vinos. De aquella fecha en adelante, muchas civilizaciones han
utilizado estos microorganismos para elaborar productos alimenticios, pan, vino,
cerveza, productos de gastronoma
En la actualidad existen algunos productos que sustituyen a la levadura biolgica,
como es la levadura qumica, que nos proporciona resultados de forma ms inmediata,
aunque la levadura biolgica se sigue utilizando.
Hongos mucosos: Este grupo abarca a una serie de microorganismos pertenecientes a
los protoctistas y que a pesar de ser hongos comparten una serie de caractersticas con
los protozoos. Durante su vida se presentan de distinta forma:
Al principio como amebas, despus como masas gelatinosas y por ltimo con un
cuerpo fructfero. Se alimentan de materia en descomposicin o de bacterias y otros
microorganismos mediante fagocitosis.
Los hongos mucosos pueden clasificarse en dos grupos principales:
Los acelulares (Myxogastrea), que no se presentan formando clulas independientes
sino ms bien una masa celular con un gran nmero de ncleos rodeados por una
membrana externa.
Los celulares (Dyctiostelia) formando organismos independientes que solo se unen
bajo condiciones adversas.
Setas: se les llama setas a los cuerpos fructferos de unos hongos pluricelulares
filamentosos, los hongos pertenecientes al grupo Basidiomycetes. Estos hongos
producen unas esporas sexuales haploides que crecen en forma de micelio en un
ambiente adecuado, pero no producirn cuerpos fructferos hasta que no se les unan
otros micelios haploides. Cuando dos micelios haploides se unen, crecen formando
una hifa(21) diploide dicaritica, y aparecen los cuerpos fructferos o setas.
Hongos filamentosos: Los hongos filamentosos tambin son llamados micelares y representan
el ms tpico crecimiento de los hongos microscpicos. Son los tpicos mohos que suelen
aparecer en las frutas, queso, pan viejoy en medios de cultivo slidos.
Estos hongos forman colonias algodonosas o pulvurentas muy caractersticas. Forman
filamentos que se denominan hifas que se entrecruzan desordenadamente dando lugar a
estructuras ms complejas denominadas micelio.
En otros hongos las hifas se entrecruzan con una cierta organizacin pero nunca llegar a
formar una estructura compacta.
Los hongos filamentosos se dividen en inferiores y superiores segn las caractersticas de sus
hifas:
Los hongos inferiores estn formados por hifas anchas (5-10 m) y forman mohos mientras
que los hongos superiores estn formados por hifas finas (0.5-5 m ) y forman adems de
mohos las setas que tienen tamao macroscpico y pueden ser venenosas o comestibles.
A partir de estos micelios algunas hifas formarn conidios que son las hifas areas. Los
conidios son esporas asexuales de fuertes pigmentos como negro, marrn o amarillo.
Estas esporas germinan para dar nuevas hifas.
Los hongos filamentosos son los responsables de muchas alergias adems de contaminar
muchos alimentos.
Aspecto colonial de
hongos que presentan
crecimiento filamentoso
(F) y levaduriforme (L).
Crecimiento de hongos
sobre una naranja.
Crecimiento de hongos
sobre pan viejo.
EUCARIOTAS
Algas, hongos, protozoos,
plantas, animales
Membrana nuclear
Cadenas de ADN, genoma
diploide
Presentes
Presentes
Presentes
Ausentes
Contiene esteroides
No contiene esteroides
Pared celular
Reproduccin
Sexual y asexual
Respiracin
Va mitocondrial
Ribosomas
Grandes (80s )
PROCARIOTAS
Bacterias, archaeas
Subdisciplinas de la microbiologa:
Bacteriologa: Estudio de los procariontes (bacterias, archaeas).
Virologa: Estudio de los virus.
Micologa(29): Estudio de los hongos.
Parasitologa: Estudio de los parsitos
Protistologa: Estudio de los protistas.
Micropaleontologa: Estudio de los microfsiles.
Palinologa: Estudio del polen y las esporas.
Ficologa: Tambin llamada Algologa. Estudio de las algas y microalgas.
Protozoologa: Estudio de los protozoos.
Efectos perjudiciales
Los efectos perjudiciales de los microorganismos radican en el efecto patgeno que estos
ejercen sobre el organismo. La mayora de los organismos perjudiciales para la salud son
parsitos, produciendo infecciones a nivel local o general. Existen por tanto una gran
diversidad de microorganismos patgenos y enfermedades causadas por estos que son capaces
de transmitirse de unos seres a otros mediante el contacto de ambos seres, generalmente a
travs de la sangre o de la saliva entre otras secreciones.
Actan de forma negativa sobre las plantas y los animales causando enfermedades en la piel,
en las vas respiratorias o en el aparato digestivo.
A continuacin referiremos algunos efectos negativos causados por microorganismos
1-. Hongos: Las infecciones producidas por hongos se denominan micosis que pueden ser
cutneas, profundas o superficiales. Suele afectar a la piel, al cabello y a las uas, afectando
ms gravemente a personas con problemas inmunolgicos.
Los ms comunes son la tia y el pie de atleta.
2-. Protozoos: Afectan al ser humano a travs del agua, alimentos, picaduras de insectos
portadores o mediante relaciones sexuales. Una de las enfermedades causadas por protozoos
ms extendida en el mundo es la malaria, transmitida al ser humano mediante el mosquito que
acta como vector de la enfermedad.
3-. Bacterias: Son causantes de las enfermedades ms comunes en el ser humano. Las ms
comunes son las que producen conjuntivitis (Chlamydia trachomatis), neumonas
(Staphylococcus aureus), diarreas e infecciones de las heridas (Aeromonas hydrophila).
MATERIALES Y MTODOS
a) Materiales
Cmara de fotos
Kodak EasyShare CX7525 (5.0 mega pixels)
Mvil Samsung E250V
Para esterilizar:
Gradilla
Placas de petri
Papel transparente
Tubos de ensayo
Caldo
Olla a presin
Olla especial para microondas
Piedras
Algodn
Jeringa
Para preparar los medios:
Placas de petri esterilizadas
Caldo
Mechero
Para realizar las preparaciones:
Porta
Cubre
Glicerina
Agua
Asa de siembra
Mechero
Agar
Balanza
Para realizar las observaciones:
Microscopio binocular
Lupa binocular
Para la tincin de Gram:
Cristal violeta
Agua destilada
Safranina
Lugol
Agua destilada
Agua
Mechero
Asa de siembra
Porta
Balanza
b) Mtodos
1.- Preparacin del caldo y esterilizacin de los materiales
1.1-Preparacin del caldo
Tras la preparacin de un caldo, lo filtramos en fro, lo hervimos de nuevo y le aadimos
azcar (para nutrir ms el caldo).
- Jeringa
Esterilizacin de las placas de petri:
Para esterilizar las placas de petri primero las lavamos y secamos bien. Posteriormente las
introducimos en una olla a presin (que contiene una cierta cantidad de agua) sobre un
soporte y la ponemos al fuego hasta que lleve unos cinco minutos hirviendo. Finalmente
sacamos las placas de la olla y las dejamos enfriar un poco para envolverlas en papel
transparente.
Safranina.........................................................................................0,25 g
Agua destilada..................................................................................100 m
- Agregamos azul violeta (cristal violeta o violeta de genciana) y esperamos 1 min. Este tinte
dejar de color morado las bacterias Gram positivas.
- Enjuagamos con agua.
- Agregamos lugol y esperamos 1 min
- Enjuagamos con agua.
- Agregamos acetona y esperamos 15 s
- Enjuagamos con agua.
- Agregamos safranina (proporciona un color violeta ms intenso a las gram positivas y tie a
las gram negativas de rosa) y esperamos 30 s.
- Enjuagamos con agua.
- Fijamos la muestra
RESULTADOS
Antes de realizar nuestro trabajo hemos hecho una serie de prcticas; entre ellas la preparacin del
caldo y del material que necesitamos. Para ello esterilizamos los materiales en los cuales
cultivaremos posteriormente y estudiaremos la evolucin de los microorganismos que aparezcan.
A continuacin exponemos las prcticas realizadas en varias semanas (estas semanas son
consecutivas pero entre ellas no ha ocurrido el mismo periodo de tiempo puesto que han coincidido
con periodos vacacionales)
SEMANA 1
En primer lugar, ponemos el erlenmeyer al fuego, para calentar el caldo que hemos fabricado.
Basndonos en una receta encontrada en internet, pesamos 5g de agar-agar que utilizaremos para
crear medios slidos.
Vertimos los 5 g de agar-agar con los 250 ml de caldo que tenemos en el fuego y lo disolvemos en
l. Posteriormente, vertimos esta mezcla en las cuatro placas de petri y en un tubo de ensayo de
mayor grosor que los preparados en medio lquido.
Una de estas placas junto con el resto que queda en el erlenmeyer, la dejamos sin tapar para que se
contaminen y as estudiar los organismos que queden en ellas.
El tubo de ensayo que ha sido llenado por la mezcla obtenida lo colamos en posicin inclinada
(apoyndolo sobre un soporte), para obtener un medio slido inclinado.
A diferencia de los otros tubos utilizados anteriormente este tubo no est esterilizado. Finalmente,
dejamos las placas y el tubo solidificar.
SEMANA 2
-Observaciones:
Placa 1: esta placa, la cual habamos dejado abierta para que se contaminara, observamos a simple
vista tres tipos de colonias distintas: una de color naranja, otra de color blanco y otra verde.
Las colonias naranjas son pequeas ms grandes que las anteriores y poseen una especie de fibras
o vellosidades del mismo color.
Las colonias verdes tienen alrededor unas fibras blancas parecidas a las de las colonias blancas.
Erlenmeyer: se observan el mismo tipo de colonias aunque se observa que las colonias naranjas
son de mayor tamao.
-Prcticas:
Cogemos un asa de siembra y con la ayuda de una bombona quemamos el extremo para
esterilizarlo. Esperamos un poco a que se enfre cerca de la llama (dentro de la zona estril).A
continuacin, cogemos una muestra de una colonia naranja, abrimos una placa estril dentro de la
zona estril y rozamos el asa contaminada por la superficie de agar .De esta forma conseguimos
sembrar un tipo de microorganismo de forma aislada.
Repetimos el mismo proceso con los otros dos tipos de colonias. Por ltimo volvemos a hacerlo en
un medio inclinado. En este medio, tras sembrar los microorganismos (en nuestro caso las colonias
naranjas), acercamos la boca del tubo a la llama para esterilizarlo.
SEMANA 3
-Observaciones:
Placa 1: Observamos que las colonias han crecido considerablemente. Adems a simple vista
podemos diferenciar otro tipo de colonia de un verde ms oscuro.
Erlenmeyer: en este medio tambin han crecido las colonias considerablemente y observamos una
fibra blanca que ocupa una gran parte del recipiente.
Para sacar el medio de agar del erlenmeyer lo calentamos para derretir los bordes y separarlos del
cristal. A continuacin lo sacamos y lo introducimos en una placa de petri.
Placa 2: (colonia naranja). En ella observamos cmo los microorganismos se han desarrollado por
la zona la cual rozamos con el asa de siembra. Adems en el centro vemos una colonia circular que
parece diferente por tener un color ms claro.
Placa 3: (verde). Se observan cmo se empieza a desarrollar los microorganismos que hemos
aislado, de un solo tipo.
Placa 4: (blanco). No observamos crecimiento, posiblemente porque no se haya sembrado bien.
Medio inclinado: tambin se observa el crecimiento de los microorganismos pertenecientes a la
colonia naranja.
SEMANA 4
-Observaciones
Placa 1: los microorganismos se han extendido y ocupan toda la superficie de agar .Se observa
como las colonias verdes tienen un crecimiento ms rpido.
Placa 2: en ella se observa que los microorganismos han crecido, tanto la colonia de color naranja
(sembrada por nosotras) como la que reencuentra en la zona central que probablemente haya sido
causado por una posible contaminacin
Placa 3: los microorganismos se han extendido de forma continuada (sin seguir la lnea por la cual
se sembr) y ocupan ms de la mitad de la placa. Adems, se observa un crecimiento por niveles.
La parte central contiene mayor nmero de capas.
Placa 4: sigue sin observarse crecimiento, con lo cual sabemos que no est contaminada
Medio inclinado: se observa como la colonia naranja ha ido creciendo, pero en la zona inferior se
ha desarrollado otra especie de color verde oscuro. Probablemente haya sido causado porque el
tubo utilizado no estaba esterilizado. (Medio lquido +*)
SEMANA 5
-Observaciones:
Placa 1: todas las colonias siguen creciendo, han ocupado totalmente el agar.
Placa 2: no observamos ningn cambio destacable.
Placa 3: observamos que la colonia ha ocupado todo el medio, pero el crecimiento de la zona
externa (la reciente) es diferente al anterior, y existe una lnea de separacin entre los dos
crecimiento.
Placa 4: no observamos ningn cambio destacable.
Medio inclinado: las colonias no sembradas estn ocupando gran parte del medio y los
microorganismos sembrados han sido tapados por estas colonias.
-Prcticas:
Observacin a travs de la lupa binocular de las placas 2 y 3.La colonia de la placa 2 se observa
igual que a simple vista pero con un mayor tamao. En la placa 3 se observa los diferentes niveles
de crecimiento y adems encontramos cuerpos fructferos.
Realizamos una preparacin en glicerina de la placa 1 para observarla al microscopio.
Sembramos una nueva colonia en la placa 4 (a partir de la placa 1) puesto que est sin contaminar.
Realizacin de bocetos de la placa 2 y 3 a simple vista y a travs de la lupa binocular, adems de
otro boceto visto al microscopio de la preparacin de glicerina.
SEMANA 6
-Observaciones
Placa 1: no se observan cambios.
Placa 2: no se observan cambios.
Placa 3: no se observan cambios.
Placa 4: observamos el crecimiento de varios tipos de colonias.
Medio inclinado: ya no se aprecian los microorganismos sembrados ya que los microorganismos
no sembrados estn ocupando todo el medio.
-Prcticas:
Sembramos en medio lquido a partir de la placa 3. Esterilizamos el medio lquido encendiendo
una llama y acercando el tubo a ella y sembramos con el asa de siembra.
Realizamos ms preparaciones en glicerina de las placas 2,3 y 4 para observarlas al microscopio.
Observamos al microscopio las preparaciones realizadas.
SEMANA 7
-Observaciones:
Placa 1: no se observan cambios.
Placa 2: como hemos abierto la placa para obtener muestra se nos ha contaminado. Para intentar
que los nuevos microorganismos que han crecido no cubran a los que habamos sembrado
cortamos con un cter la parte contaminada y la eliminamos.
Placa 3: no se observan cambios.
Placa 4: no se observan cambios.
Medio inclinado: no se observan cambios.
-Prcticas:
Cogemos una muestra de la placa 2 y la depositamos en el porta mezclndola con unas gotas de
agua. La secamos pasndola por una llama y la observamos en el microscopio.
Tras esto cogemos de nuevo la muestra y le aadimos azul de metileno para comprobar si serva
para la tincin de la muestra. Esperamos unos segundos y la enjuagamos con agua corriente. A
continuacin la observamos al microscopio.
SEMANA 8
-Observaciones:
Placa 1: no se observan cambios.
Placa 2: aun habiendo cortado la porcin contaminada, apreciamos que los microorganismos no
sembrados se han extendido.
Placa 3: no se observan cambios.
Placa 4: observamos un crecimiento de cuerpos fructferos.
Medio inclinado: no se observan cambios.
Semana 1
Medio slido inclinado
Medio lquido
Semana 2
Placa 1
Erlenmeyer
Semana 3
Placa 1
Erlenmeyer
Placa 2
SECTOR 1
SECTOR 2
SECTOR 3
SERTOR 4
SECTOR 5
SECTOR 6
Placa 3
SECTOR 1
SECTOR 2
SECTOR 3
SERTOR 4
SECTOR 5
SECTOR 6
Placa 4
SECTOR 1
SECTOR 2
SECTOR 3
SERTOR 4
SECTOR 5
SECTOR 6
Medio inclinado
Semana 4
Placa 1
Erlenmeyer
Placa 2
SECTOR 1
SECTOR 2
SECTOR 3
SERTOR 4
SECTOR 5
SECTOR 6
Placa 3
SECTOR 1
SECTOR 2
SECTOR 3
SERTOR 4
SECTOR 5
SECTOR 6
Placa 4
SECTOR 1
SECTOR 2
SECTOR 3
SERTOR 4
SECTOR 5
SECTOR 6
Medio inclinado
Medio lquido
Semana 5
Placa 1
Erlenmeyer
Placa 2
SECTOR 1
SECTOR 2
SECTOR 3
SERTOR 4
SECTOR 5
SECTOR 6
Placa 3
SECTOR 1
SECTOR 2
SECTOR 3
SERTOR 4
SECTOR 5
SECTOR 6
Semana 6
Placa 1
Erlenmeyer
Placa 2
SECTOR 1
SECTOR 2
SECTOR 3
SERTOR 4
SECTOR 5
SECTOR 6
Placa 3
SECTOR 1
SECTOR 2
SECTOR 3
SERTOR 4
SECTOR 5
SECTOR 6
Placa 4
SECTOR 1
SECTOR 2
SECTOR 3
SERTOR 4
SECTOR 5
SECTOR 6
Medio inclinado
Semana 7
Placa 1
Erlenmeyer
Placa 2
SECTOR 1
SECTOR 2
SECTOR 3
SERTOR 4
SECTOR 5
SECTOR 6
Placa 3
SECTOR 1
SECTOR 2
SECTOR 3
SERTOR 4
SECTOR 5
SECTOR 6
Placa 4
SECTOR 1
SECTOR 2
SECTOR 3
SERTOR 4
SECTOR 5
SECTOR 6
Medio inclinado
Medio lquido
Semana 8
Placa 2
SECTOR 1
SECTOR 2
SECTOR 3
SERTOR 4
SECTOR 5
SECTOR 6
Placa 3
SECTOR 1
SECTOR 2
SECTOR 3
SERTOR 4
SECTOR 5
SECTOR 6
Placa 4
SECTOR 1
SECTOR 2
SECTOR 3
SERTOR 4
SECTOR 5
SECTOR 6
Medio slido
Medio lquido
Nos dedicamos a realizar tinciones de gram de muestras de las placas 2 (tanto de la colonia naranja
como de la colonia del centro), 3 y 4. Para realizar estas tinciones seguimos los pasos que
propusimos anteriormente en la tincin de gram.
Observacin 2
Observacin 3
Primera observacin: colonia naranja (de la placa 2) teida con Azul de Metileno.
10:1
60:1
45:1
60:1
100:1
45:1
60:1
100:1
DISCUSI
Con respecto a los resultados obtenidos, podemos observar que el crecimiento de los
microorganismos de las distintas placas es desigual. La especie de color verde ha
experimentado un crecimiento ms expansivo, ocupando la totalidad de la superficie de
la placa que contamina. Intuimos que la reproduccin de esta especie es por esporas,
debido a que al tener que cortar la parte visiblemente contaminada de la placa 2, dicha
especie volvi a aparecer en esta placa. Por el contrario, la reproduccin de la colonia
naranja no tiene lugar por esporas, puesto que solo crece alrededor de la zona donde ha
sido plantada.
Hemos observado cuerpos fructferos en las placas 3 y 4, por lo que suponemos que son
hongos.
En algunas preparaciones de glicerina al microscopio, hemos observado la presencia de
cocos, bacilos por lo que se trata de bacterias.
Procedimiento:
Antes de preparar el caldo los materiales deben ser esterilizados introducindolos durante
unos minutos en una olla a presin en la cual se coloca una rejilla para sostenerlos y se
aade agua para que hierva.
Una vez esterilizados ponemos los 1000ml de agua a hervir y aadimos todos los
ingredientes. Por ultimo debemos esperar a que la mezcla hierva de nuevo.
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