Tema 1. Introduccin a la tecnologa de DNA recombinante: desarrollo histrico. Los microorganismos como herramienta esencial en la Biotecnologa. Aplicaciones en la produccin de productos sanitarios. Consecuencias e impacto social. Tema 2. Genomas microbianos. Concepto de metagenoma y pangenoma. Tcnicas de secuenciacin masiva de genomas microbianos. Ensamblaje de genomas. Genmica funcional. Tema 3. Bases de datos de inters en biotecnologa. Tipos de bases de datos. Recuperacin de secuencias de DNA. Sistema de anotacin. Genomas microbianos y su visualizacin. Tema 4. Aislamiento de genes mediante PCR. Utilidades de la PCR en Biotecnologa microbiana. Tema 5. Purificacin DNA. Enzimas usadas en manipulacin de DNA: ligasas, polimerasas, retrotranscriptasas, enzimas de restriccin, nucleasas etc. Tcnicas de manipulacin de DNA in vitro. Tema 6. Software para diseo de oligonucletidos. Ejemplos y problemas. Anlisis in silico de DNA. Bsqueda de ORFs en DNA e identificacin de seales reguladoras. Anlisis primario: composicin y propiedades fisicoqumicas. Utilizacin de codones. Tema 7. Vectores de clonacin utilizados en sistemas microbianos. Principales caractersticas funcionales. Marcadores genticos: tipos y utilidades. Seleccin gentica. Plsmidos y fagos. Sistemas de seleccin de recombinantes. Sistemas de introduccin de DNA en clulas microbianas. Tema 8.
Sistemas de rastreo que utilizan microorganismos como
husped gentico. Caractersticas, limitaciones y posibilidades. Tema 9. Comparacin de secuencias. BLAST. Funcin por homologa Tema 10. Anlisis in silico de protenas. Motivos funcionales
II. Expresin de protenas heterlogas en microorganismos
Tema 11. Expresin heterloga en microorganismos. Problemas generales. Expresin heterloga en sistemas procariticos. Vectores de expresin. Bacterias utilizadas. Ventajas y limitaciones. Tema 12. Expresin heterloga en sistemas eucariticos. Vectores de expresin. Levaduras y hongos filamentosos utilizados. Ventajas y limitaciones. Uso de baculovirus y cultivo de clulas de insectos. Tema 13. Optimizacin de codones. Expresin gnica. Secuencias seal etc. Tema 14. Optimizacin de la expresin heterloga. Fusiones gnicas: Aplicaciones. Estabilidad y purificacin de protenas. Cromatografa de afinidad. Ingeniera de protenas. Construccin de protenas de fusin y mutagnesis dirigida. Ejemplos y problemas. Tema 15. Optimizacin de la expresin heterloga para la produccin industrial. Estabilidad del DNA, optimizacin de la expresin gnica y del crecimiento celular. Sistemas de produccin a gran escala. Fermentadores y condiciones de cultivo. Tema 16. Produccin de protenas recombinantes de uso farmacolgico: hormonas, enzimas, factores de crecimiento y citoquinas. La insulina y sus derivados. Tema 17.
Produccin de metabolitos primarios y secundarios. Mejora
de cepas industriales por ingeniera metablica. Biologa Sinttica. Tema 18. Sistemas de escrutinio de frmacos. Desarrollo de nuevos frmacos: diseo estructural, qumica y biosntesis combinatoria. Levaduras humanizadas. Tema 19. Sistemas de presentacin en fagos como herramienta de investigacin biolgica. Liberacin y uso de OMGs. Legislacin