Cuestionarios Qumica Analtica Instrumental

Cuestionario N 6: Cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC).

1.- Esquematice un cromatgrafo lquido, indique sus componentes y explique brevemente su
funcin.
2.- Mencione las fases cromatogrficas en HPLC ms habituales.
3.- Como influye el tamao de partcula de los rellenos de las columnas en HPLC en la resolucin y
tiempos de anlisis?
4.- Porque son tiles las pre columnas?
5.- Que detectores son tiles en HPLC?
6.- Explique cmo y porque se modifican las bandas cromatogrficas con la velocidad de la fase
mvil.
7.- Que pasa si hay un equilibrio qumico en la fase mvil? (por ejemplo, una reaccin acido base con
un buffer de fase mvil)
8.- Porque hay que sembrar el menor volumen posible de muestra? Cual sera un criterio razonable
en funcin del tamao de la columna?
9.- Como relaciona las constantes de distribucin o de equilibrio fase fija/mvil con los tiempos de
elucin?
10.- Que relacin hay entre el flujo de la fase mvil y el tiempo de elucin? El volumen y tiempo de
retencin son siempre equivalentes e intercambiables?
11.- Que es el tiempo muerto y porque hay que restarlo del tiempo de elucin para evaluar el
coeficiente de distribucin?
12.- En qu circunstancias el tiempo de retencin no sirve como criterio de identificacin?
13.- Indique en qu situacin es conveniente usar los siguientes mtodos de cuantificacin:
a) Normalizacin de reas
b) normalizacin de reas con factor de respuesta?
c) curva de calibracin
d) mtodo de agregado estndar.
14.- Que incerteza ayuda a compensar el mtodo del estndar interno? Porque no es til cuando se
inyecta con loop?
15.- De que variables depende la retencin de un analito?
16.- De qu manera cambiara la separacin de dos analitos entre s?
17.- Defina elucin con gradiente e indique su utilidad
18.- Los parabenos se utilizan en la industria cosmtica como conservantes. Su frmula general es
dada en la figura 1, donde R es un grupo alqulico. Un fabricante de columnas de fase reversa C18
recomienda las siguientes condiciones de uso: Fase mvil: 40/60 Acetonitrilo/agua, buffer fosfato pH
7.0 con los resultados observados en la Figura 1.
i.- Cuando se intent hacer un cambio en la fase mvil usando 40/60 Acetonitrilo/agua, buffer
pH 4.0 se obtuvo el cromatograma de la figura 2. Que efecto tiene en la corrida una disminucin del
pH. Explique
ii.- Como reducira el tiempo de la corrida si tiene la posibilidad de aplicar un gradiente de
solventes.

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19.- El cido etidronico se utiliza para el tratamiento de osteoporosis. Con el fin determinar dicho
acido en una tableta que contiene como excipiente NaCl, se utiliza un equipo de cromatografa
liquida con una columna de intercambio anionico y un detector conductimetrico. Utilizando como
fase mvil cido ntrico 1,5 mM se observa que el pico correspondiente al acido se superpone con el
de Cloruro. Que cambios realizara para separarlos. cido etridronico, pK1:1,3; pK2: 2,5;pK3: 7,0 pK4:
11,0
Cuestionario N 7: CROMATOGRAFIA GASEOSA
1.
2.
3.
4.

Que requisitos deben cumplir las sustancias para que puedan ser analizadas por CG?
Porqu el inyector se encuentra a temperaturas mayores que la columna?
Cuales son las diferentes maneras de medir las reas de los picos cromatogrficos?
Enumerar los tipos de detectores habitualmente empleados y evaluar su mbito de
aplicacin.
5. Discutir la eleccin del gas portador a utilizar en relacin al tipo de detector con que se
cuenta. Qu caractersticas debe reunir el gas elegido?
6. Discutir la aplicacin de la ecuacin de Van Deemter para modificar la eficiencia de un
anlisis.
7. De qu manera influyen las condiciones instrumentales en el cromatograma?
8. Discutir la conveniencia de considerar como seal la altura o el rea del pico obtenido
como respuesta de la muestra.
9. Compare el coeficiente b para dos columnas capilares con dimetro de 0,24 y 0,36 mm que
contienen el mismo espesor de fase estacionaria, 0,2 ?m. Cul de ellas es ms conveniente
para el anlisis de compuestos de bajo punto de ebullicin y cual para un compuesto
termolbil?
10. Para la determinacin de residuos de xido de etileno en tubuladuras para uso mdico
esterilizadas con dicho gas, una muestra dentro de un frasco cerrado se calent a 60 C por
20 minutos, se tomaron 500 mL de la fase gaseosa (head space) y se us una columna
empacada de polietilenglicol de 3 mm de dimetro y 1.80 m de largo. La temperatura de la
corrida es 60 C y el detector del tipo FID. Considerando que el materia de la tubuladura es
PVC y los posibles productos de reaccin del xido de etileno son etilenglicol (PE: 197 C) y 2cloroetanol (PE: 129 C):
a. Discuta la conveniencia de la temperatura utilizada, la fase estacionaria y el tamao de
columna.
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b. Para determinar etilenglicol y 2-cloroetanol, qu cambios debe realizar en la toma de

muestra, en el tipo de columna y en la temperatura de trabajo?
11. Una muestra contiene las sustancias X e Y. Se desea determinar cuantitativamente X
utilizando el mtodo del estndar interno. Se probaron los compuestos 1, 2 y 3 como posibles
estndares internos, obtenindose el siguiente cromatograma:

a. Cul elegira como estndar y qu condiciones variara en el cromatograma para su uso?

b. Una vez conseguida las condiciones ptimas, cmo procede para la determinacin?
12. El fabricante de una columna para CG basada en poliestireno-polidivinilbenceno sugiere la corrida
que se muestra a continuacin para la separacin de una serie de compuestos disueltos en metanol
(condiciones indicadas en el cromatograma). Como se puede apreciar en el cromatograma, los dos
primeros compuestos salen sobre la cola que corresponde a la seal de metanol.
a. Examine los componentes de la muestra y establezca qu propiedades entran en juego en el orden
de elucin de los mismos.
b. Qu sucedera si se trabaja a 70 C?

13.-Esquematice un cromatgrafo gaseoso, indique todos sus componentes, explique brevemente su

funcin.
14.- Describa bsicamente el funcionamiento de los detectores de conductividad trmica, captura
electrnica y el de ionizacin de llama. Indique para que analitos es ptimo cada uno de ellos y
cuando NO sirven. Mencione que otros detectores existen?
15.- Como se inyecta la muestra?
16.- Que gases se usan como carriers en CGL y porque?
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17.- Porque las rampas de temperatura son tan populares en CGL?

18.- Que tipo de columnas usara para separar componentes de una nafta y cual para analizar
muestras de aire?
19.- Porque las columnas capilares permiten separar tan eficientemente los componentes de una
muestra? Se puede usar la misma idea en cromatografa liquida?