ndice

1.

Introduo..................................................................................................................2

2.

Objectivos..................................................................................................................4
a)

Objectivo geral.......................................................................................................4

b)

Objectivos especficos............................................................................................4

Parte Experimental............................................................................................................4
Materiais e Reagentes....................................................................................................4
Reagentes.......................................................................................................................4
Procedimentos................................................................................................................4
Resultados e Discusso......................................................................................................5
Resultados......................................................................................................................5
Discusso.......................................................................................................................6
Concluso..........................................................................................................................8
Referncias Bibliogrficas.................................................................................................9
3.

Questionrio.............................................................................................................10

4.

Anexos......................................................................................................................11

1. Introduo
Enzimas

so

proteinas

que

possuem

as

propriedades

dos

catalizadores quimicos que funcionam baixando mais a energia de

activao, e por possuirem natureza proteica tm uma especificidade
muito elevada. Estas compreendem um local de fixao que se
combina com o substrato por ligaes fracas e um centro cataltico
que actua sobre o substrato levando-o a sofrer reaco qumica. As
enzimas possuem um centro activo que constitudo por um conjunto
de aminocidos que entram em contacto com o substrato. Os factores
que afectam a actividade enzimtica so: temperatura, pH e
concentrao do substrato (Campos, 2005).
Elas aceleram as reaces por factores at 1 milho de vezes ou
mais. Realmente, a maioria das reaces nos sistemas biolgicos no
ocorrem em velocidades consecutivas na ausncia de enzimas.
Interferem nas reaces sem serem consumidas (Berg et al., 2008).
As

enzimas

so

extremamente

especficas,

tanto

na

reaco

catalisada como na sua escolha de reagentes, os quais so chamados

de substratos. Uma enzima geralmente catalisa uma s reaco
qumica ou um conjunto de reaces estreitamente relacionadas
(Berg et al., 2008).
Em geral, as enzimas so nomeadas de acordo com o substrato em
que elas actuam e o tipo de reaco que catalisam. Agrega-se o
sufixo ase (exemplo, enzima amilase para amido, e tirosinase para
tirosina) ao nome da substancia atacada (Devlin, 1976).
As enzimas tambm podem ser agrupadas em categorias que fazem
referncia a um certo grupo de compostos sobre os quais elas actuam
(lipases para lpidos e carbohidrases para carbohidratos). Podem
ainda ser nomeadas segundo o tipo de reaco que catalisam, por
2

exemplo, hidrolase para hidrlise e oxidases para oxidao (Devlin,

1976).
As enzimas so influenciadas por diversos factores, como ocorre em
todas reaces qumicas, uma reaco catalisada por enzimas
sensvel s condies externas assim sendo, a concentrao do
substrato da enzima, a temperatura e o pH influem sobre a
velocidade de uma reaco catalisada por uma enzima e inibem a
actividade da mesma (Devlin, 1976).

Concentrao do substrato: quando se tem uma concentrao

constante da enzima, um aumento da concentrao do
substrato repercutira a um aumento da velocidade da reaco
catalisada pela enzima. Quando a concentrao do substrato
aumenta ate um ponto de saturar a totalidade de todos os
pontos activos, diz-se que a enzima a trabalhar com uma
eficincia mxima. Um novo aumento da concentrao do
substrato no ter nenhum efeito sobre a velocidade da
reaco (Devlin, 1976).

Temperatura: o aumento da temperatura acelera a velocidade

da reaco, porm temperaturas muito elevadas a enzima
inactivada. Existe um ponto da reaco em que se observa uma
actividade

mxima

da

enzima,

denominada

temperatura

ptima, embora esta no seja uma caracterstica especfica da

enzima, ela depende da reaco da experincia. Normalmente,
as enzimas desnaturam temperaturas acima de 45C 50C
(Schmidt-Nielsen, 1997).

pH: muitas enzimas mostram a sua mxima actividade em uma

determinada faixa do pH, denominada pH ptimo para a enzima
em questo (Devlin, 1976).

Isoenzimas

ou

isozimas

so

enzimas

com

funo

cataltica

semelhante que tm estruturas e parmetros catalticos distintos e

so codificados por genes diferentes. Por exemplo, diversas isozimas
3

diferentes tm sido encontradas para peroxidase, uma enzima de

paredes de clulas vegetais que participa da sntese de lignina. Uma
isozima de peroxidase foi tambm localizada em vacolos. As
isozimas podem exibir especificidade a tecidos e mostrar regulao
quanto ao desenvolvimento (Taiz e Zeiger, 2009).

2. Objectivos
a) Objectivo geral
Estudar

os

efeitos

da

temperatura

sobre

os

processos

enzimticos.
b) Objectivos especficos
Identificar os efeitos da temperatura sobre a amilase;
Explicar a influencia da temperatura na aco enzimtica.

Parte Experimental
Materiais e Reagentes

2 Copos de Becker de 250 ml;

6 Tubos de ensaio;
1 Termmetro;
Banho-Maria 37C;
1 Proveta graduada de 10 ml;
1 Suporte para tubos de ensaio;
1 Marcador;
gua da torneira (temperatura ambiente);
Pedras de gelo.

Reagentes
Soluo de amido a 1% (100ml total);
Soluo de iodo ou lugol.

Procedimentos
1. Recolheu-se cerca de 3 ml de saliva na proveta graduada;

2. Identificou-se 3 tubos de ensaio com as letras A, B e C e, de

seguida deitou-se em cada um dos tubos 1 ml de saliva, atravs do
processo de pipetagem;
3. Enumerou-se 3 tubos de ensaio;
4. Pipetou-se para cada um dos tubos enumerados 5 ml de soluo
de amido;
5. Sequencialmente adicionou-se uma gota de iodo (ou lugol), em
cada um dos tubos de ensaio 1, 2 e 3. O lugol ou iodo so
identificadores da presena de amido, isto , tomam uma cor azulada
em presena do amido;
6. Preparou-se 2 copos de Becker, um com gua gelada e outro com
gua temperatura ambiente (gua da torneira ~20C). Um BanhoMaria 37C j estava pronto;
7. Colocou-se os tubos 1 e A no copo de Becker com gua gelada, os
tubos 2 e B no copo de gua temperatura ambiente e no BanhoMaria 37C, os tubos 3 e C. Deixou-os ficar 5 minutos para
atingirem a temperatura da gua do recipiente onde estavam
contidos.
8. Passados os 5 minutos, mediu-se a temperatura da gua dos
copos de Becker. Juntou-se a saliva do tubo A ao amido do tubo 1,
agitou-se e recolocou-se o tubo 1 no copo de Becker com gua
gelada. E repetiu-se os passos com os tubos B e 2 e C e 3
respectivamente.

Resultados e Discusso
Resultados
Aps a experincia foi possvel observar que a amilase salivar actua
sobre o amido provocando a sua hidrlise (degradando a molcula de
amido em maltose).

Tabela 1: resultados experimentais

Temperatura (C)
Na gua contendo gelo 12C

Efeito
A amilase no degradou o amido

Na temperatura ambiente 27 C

continuando azul-escuro
A amilase degradou parcialmente

No Banho-Maria 62C

o amido tornando azul claro

A amilase degradou totalmente o
amido

que

ficou

ligeramente

claro

No copo de Becker com gua contendo pedras de gelo, observou-se

que a soluo no mudou de cor mantendo-se a sua cor azul-escuro.
No copo de Becker com gua a temperatura ambiente, mediu-se a
temperatura que era 27C. A esta temperatura foi possvel observar
que a amilase degradava parcialmente o amido tornando-o azul claro.
No Banho-Maria que mediu uma temperatura de 62C, verificou-se
que a amilase degradou o amido em fraces de segundos.

Discusso
A amilase da saliva provoca a hidrlise do amido rapidamente a uma
temperatura compatvel com a vida (ambiente) Elas normalmente
actuam nos seres vivos dentro ou fora das clulas que as produzem.
Mas mantm-se activas fora dos seres vivos, desde que estejam
mantidas em condies ambientais idnticas (Roque e Castro, 1997).
A amilase s consegue transformar o amido em maltose, para
transformar a maltose em glicose seria necessrio adicionar mas uma
enzima, a maltose (Roque e Castro 1997).
Para todas as enzimas h um valor de temperatura que ptimo. A
temperatura muito baixa inibe ou inactivam o efeito das enzimas mas
no as destroem. Podem conservar-se no congelador (Roque e Castro,
1997). Isto explica a permanncia da cor azulada no tubo 1, que se
6

encontrava imersa na gua contendo pedras de gelo, pois as enzimas

no se encontravam em actividade porque estavam num processo de
conservao.
Quando a temperatura ambiente (27C) o processo enzimtico no
cessa, ocorre mas com muita lentido. E nas temperaturas muito
elevadas (a partir de 60C para a maioria) destri-as totalmente de
modo irreversvel, ficando desnaturadas (Roque e Castro, 1997).
Desnaturao a ruptura das ligaes secundrias da cadeia
polipeptdica

que do a protena

a sua

forma

tridimensional

caracterstica. Deste modo, o centro activo perde a configurao que

o caracteriza e deixa de poder ligar-se ao substrato (Roque e Castro,
1997).

Concluso
Tendo feito esta experincia, foi possvel observar que a temperatura
exerce uma funo importante na actuao das enzimas, visto que as
enzimas s realizam a sua actividade de acordo com os parmetros
da temperatura que se localiza na faixa dos 60-62C e pode se
desnaturar ou inactivar, quanto temperaturas elevadas ou baixas
respectivamente.
As enzimas somente actuam como catalisadores baixando a energia
de activao e consequentemente aumentando a velocidade das
reaces qumico-biolgicas.
A amilase degrada o amido a 62C. E cada enzima actua no substrato
de maneira especfica, isto e, cada enzima exerce apenas uma funo
para o seu substrato.

Referncias Bibliogrficas
1. Taiz, Lincoln, Zeiger, Eduardo (2009). Fisiologia vegetal. 4.
Edio, Artmed Editora S. A.
2. Storer, Tracy I., et al., (1979). Zoologia geral. 6. Edio,
McGraw-Hill Book Company. New York.
3. Schmidit-Nielsen, Knut (1997). Animal physiology. 5. Edio,
Cambridge University Press.
4. Roque, Merce, Castro, Aldamiro(1989). Biologia 10. Ano. 4.
Edio, Porto, Porto Editora.
5. Devlin,

Robert

M.

(1976).

Fisiologia

vegetal.

3.

Edio,

Ediciones Omega, S.A., Barcelona.

6. Darnell, James, et al., (1990). Molecular cell biology. 2. Edio,
W. H. Freeman and company, New York.
7. Carneiro, J., Junqueira, L. C. (2004). Histologia Bsica. 10.
Edio, 339pp. Rio de Janeiro, Guanabara Koogan.
8. Berg, Jeremy M., Tymoczko, John L. e Stryer, Lubert (2008).
Bioqumica. 6. Edio, Editora Guanabara Koogan S. A.

3. Questionrio
a) Em que temperatura a amilase da saliva decomps o amido
rapidamente?
R: A amilase da saliva decomps o amido rapidamente aos 62C, visto
que esta a temperatura ideal para a degradao do amido usando
esta enzima.
b) Qual ser o resultado usando um copo de Becker com gua a
90C. Porque?
R: Usando um copo de Becker com gua a 90C as enzimas ficaro
desnaturadas porque estas quando submetidas a altas temperaturas
destroem-se. Logo o amido continuar a existir.

10

4. Anexos

c) Em que temperatura a amilase da saliva decomps o amido

rapidamente?

A amilase da saliva decomps o amido rapidamente aos 62C.

d) Qual ser o resultado usando um copo de Becker com gua a

90C. Porque?

O resultado obtido quando usado um copo de Becker com gua

a 90C a degradao total e rpida da amilase, porque a
temperatura e muito elevada.

11

12