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INGENIERA
Facultad de Ingeniera Ambiental
LABORATORIO N5
Tema:
Curso:
Microbiologa Sanitaria I
2015 - I
I.
OBJETIVOS:
II.
FUNDAMENTO TERICO:
Las condiciones de salud en una nacin estn determinadas, en gran parte, por
la capacidad de sus habitantes para controlar eficazmente los problemas
microbianos. La costumbre diaria de purificar el agua, pasteurizar la leche o la
conservacin de alimentos, son mtodos para controlar las poblaciones
microbianas. Los microorganismos son tambin capaces de destruir materiales
valiosos como madera y fibras textiles, causando prdidas que necesitan
evitarse con medidas eficaces.
1.- IMPORTANCIA DEL CONTROL MICROBIANO
Iones de plata
Los antimicrobianos son sustancias naturales o sintticas, orgnicas o
inorgnicas, que inhiben el crecimiento de los microorganismos (bacterias y
hongos y levaduras, virus, protozoos). Su eficacia depende de parmetros como
su concentracin, tipo de microorganismo y de sustrato adems de
temperatura, pH, humedad y niveles de oxgeno. Para ser eficaces, los iones de
plata deben interaccionar con el microorganismo y penetrar en l. La plata se
introduce en el interior de la clula a travs de unos transportadores de metales
presentes en su membrana compitiendo con ellos por los lugares de captacin.
Los iones de plata actan interfiriendo en la permeabilidad gaseosa de la
membrana (respiracin celular) y una vez en el interior de la clula, alteran su
sistema enzimtico, inhibiendo su metabolismo y produccin de energa y
modificando su material gentico. El resultado es que el microorganismo pierde
rpidamente toda capacidad de crecer y reproducirse. De esta manera se evita
el desarrollo de microorganismos patgenos como 'Salmonella', 'Legionella',
'Escherichia coli' y 'Staphylococcus aureus', entre otros.
Aplicacin
En las aplicaciones y productos ms propensos al desarrollo microbiano, la
incorporacin de agentes antimicrobianos como los iones de plata en el material
matriz del producto o en el recubrimiento del mismo para inhibir la proliferacin
Zona de estimulacin:
presenta un crecimiento
abundante, hay
cantidades abundantes
de iones txicos.
Zona despejada
Zona oligodinmica
Colorantes:
Hay dos clases de compuestos colorantes que tienen especial inters como
agentes antimicrobianos y son los colorantes del trifenilmetano y algunos
derivados de acridina.
Colorantes de trifenilmetanos
En esta categora se incluyen el verde de malaquita, el verde brillante y el
cristal violeta. Como regla general, los microorganismos gram positivos son ms
susceptibles a estos compuestos que los gram negativos. El cristal violeta inhibe
cocos gram positivos a diluciones de 1:200 000 a 1:300000; se necesita diez
veces esta concentracin para inhibir a Escherichia coli. El verde de malaquita
inhibe a Staphylococcus aureus a concentraciones de 1:1000000; mientras que
se necesitan concentraciones de 1:30000 para inhibir a E. Coli.
III.
PROCEDIMIENTO:
3. Usando
3.
4.
5.
6.
7.
8.
IV.
RESULTADOS:
CRECIMIENTO BACTERIANO
GRUPO
N01
Dilucione Culti Culti
s
vo A vo B
1 : 10,000
1:
100,000
1:
1'000,000
Sin
colorante
GRUPO
N02
Culti Culti
vo A vo B
GRUPO
N03
Culti Culti
vo A vo B
GRUPO
N04
Culti Culti
vo A vo B
GRUPO
N05
Culti Culti
vo A vo B
+
(-) No hay
1 : 10,000
1 : 100,000
Escherichia Coli
Gram Negativa
-
Bacillus Subtilis
Gram Positiva
+
+
1: 1'000,000
Colorante
Concentracin
CRISTAL
VIOLETA
Sin colorante
GRUPO
N01
GRUPO
N02
GRUPO
N03
GRUPO
N04
GRUPO
N05
COLORACION GRAM
COLONIA A
COLONIA B
Gram (+)
Gram (+)
Estreptobacilos
Estreptobacilos
Gram (+)
Gram (+)
Estafilococos
Cocos
Gram (+)
Gram (+)
Estafilococos
Estreptococos
Gram (-)
Gram (+)
Estafilococos
Cocobacilos
Gram (-)
Gram (-)
Cocos
Estreptococos
Grupo
1
Grupo
2
Grupo
3
Grupo
4
Grupo
5
Oligodin
mica
Estimulaci
n
Crecimie
nto
No
No
Poco
Si
Si
No
No
No
Si
Si (poco)
Si
Si
Si
Si
No
inocularon
Grupo 1
Grupo 2
Grupo 3
Grupo 4
Grupo 5
V.
DISCUSIN:
Los resultados de la coloracin Gram no fueron los esperados, esto debido a
muchos factores, como la mala manipulacin de los materiales durante el
experimento.
Los resultados de los grupos N2 y N3 para coloracin GRAM fueron
errneos.
Se debi hacer de nuevo el experimento para obtener los resultados
correctos.
Se supone que si la moneda es ms antigua, entonces debera tener mayor
concentracin.
Lo ms importante para accin oligodinmica es rotar bien el tubo para una
mejor distribucin.
VI.
CONCLUSIONES:
En una mala distribucin en las placas del agar no se puede observar bien el
experimento.
De la observacin en las placas, el cristal violeta inhibe el crecimiento de las
bacterias Gram (+) en mayor proporcin que las Gram (-).
Se nota en las placas que mayor dilucin el efecto bacteriosttico del cristal
violeta sobre las bacterias Gram (+) disminuye.
De la observacin de la accin Oligodinmica de los metales pesados se
puede afirmar que el metal usado (moneda de zinc) inhibe el crecimiento de
microorganismos en sus alrededores.
VII.
RECOMENDACIONES:
Hay que tener cuidado en el manejo del cido ntrico, para la limpieza de la
moneda, tratando de no tener contacto directo y utilizar pinzas para
manipular la moneda con el cido.
VIII. CUESTIONARIO:
1. Qu es un agente bacteriosttico y qu quiere decir una accin bacteriosttica
selectiva? Indique algunas aplicaciones prcticas de este fenmeno.
Agente bacteriosttico:
La accin bacteriosttica se fundamenta en la inhibicin del desarrollo
microbiano mediante el bloqueo de diferentes factores de reproduccin. No
las mata directamente, pues una poblacin de bacterias sin capacidad de
reproduccin o con capacidad disminuida para la misma es una poblacin
condenada a su desaparicin. En cambio un agente bactericida es aquel
capaz de matar a las bacterias.
Accin bacteriosttica selectiva:
Es aquel efecto que slo inhibe el crecimiento o reproduccin de cierto
grupo de microorganismos, mientras que no afecta o afecta en menos
proporcin a otro grupo de microorganismos. Es por ello que se agregan a
medios de cultivos agentes bacteriostticos para que stos tengan carcter
selectivo.
Aplicaciones:
El NaOH se utiliza en la industria del vino para limpiar las cubas de
madera.
El ozono es utilizado desde antes para tratamiento de agua, ahora se ha
extendido su utilizacin y se aplica para tratar ambientes e incluso
podemos tratar directamente sobre el organismo con fines teraputicos
(concentraciones de 0.01 ppm a menos).
Los antibiticos son usados para preservar los alimentos, as tenemos
las tetraciclinas.
IX.
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:
(EFECTO
DE
LOS
AGENTES
http://www.biologia.edu.ar/microgeneral/micro-ianez/19_micro.html
http://enfermerograleducastillo.blogspot.com/2011/09/bactericida-ybacteriostatico.html
http://www.bcrp.gob.pe/docs/Proyeccion-Institucional/Museo/MuseoNumismatico-del-Peru.pdf
Propiedades antimicrobianas de algunos metales (PDF), International Copper
Association Latin America.
X.
ANEXOS:
CocoBacilos
La palabra Cocobacilo se refiere a microorganismos que combinan:
forma de bacilo (bastn), y
forma de coco (esfrica).
Dos ejemplos son las bacterias Haemophilus
influenzae y Chlamydia trachomatis.
Los cocobacilos estn relacionados con la zona vaginal.