Metodologa

Cajas
1. Se pesaron 3g de agar sangre , agar chocolate , agar CASO y
agar para Enterococos y fueron diluidos cada uno de estos en
74 ml de agua destilada en un matraz, se dejo reposar durante
20min para despus agregar calor y menear hasta presentar
principios de comenzar a hervir.
2. Una vez listo el matraz con agar, se envolvieron y se metieron a
esterilizar.
3. Para los agares sangre debemos de tener preparado unos
minutos antes una jeringa , la liga y al donador de sangre el
cual se le sacaran 8ml de sangre por agar en este caso son 2
agar sangre y agar chocolate
4. Ya que salieron de la esterilizacin pasamos a los gares sangre
en los cuales al momento de que salen se le agregan 8 ml de
sangre para que quede realizado el agar chocolate
5. En el agar sangre puedes esperar a que quede templado el
matraz no es necesario que este tan caliente ah tambin
agregamos 8ml de sangre
6. Para los dems agares es necesario ponerlos a refrescar para de
ah pasar a vaciarlo en las cajas
7. Ya que nuestras cajas contienen los agares gelificados podemos
pasar a sembrar en nuestras cajas si antes recordar tener todos
los materiales necesario para la realizacin de esto.
8. Para el agar enterococos se agrega una pequea muestra de
residuos fecales de un menor de menos de 1 ao, agar sangre y
chocolate se agrega una muestra de exudado farngeo y ala
agar caso se agrega una muestra de exudado corporal (para
esta prueba los lugares mas recomendaos son detrs de las
rodillas y cuello )
9. Una vez ya sembrado pasamos a dejar nuestras cajas
incubando 24 hr.
Prueba catalaza
1. Tomamos 2 porta objetos marcamos en uno staphylococcus y el
siguiente streptococcus
2. Colocar una gota de agua oxigenada sobre un portaobjetos con
ayuda de una pipeta Pasteur.
3. Suspender la bacteria.
4. Detectar la formacin de burbujas.
Prueba de reduccin de nitratos a nitritos
1. El medio de cultivo lquido se inocula introduciendo en l una
carga de bacterias de la cepa en estudio mediante el asa
bacteriolgica.
2. Se incuba a 37C durante 24 horas y tras la incubacin se
aaden dos gotas de los reactivos A y B de nitratos que
revelarn la presencia de nitritos en el medio.
3. Si los nitratos han sido reducidos, el caldo de cultivo virar a un
color rojo intenso por la presencia de nitritos.

4. Si todo el nitrato ha sido reducido hasta nitrgeno, no se

revelar la presencia de nitritos, pero se observar la aparicin
de burbujas de nitrgeno que se desprenden dentro del tubo
(similar a burbujas de cava).
Prueba de fermentacin de carbohidratos
1. para esta prueba se utiliza un medio de cultivo llamado base de
rojo fenol y el carbohidrato : lactosa, sacarosa, dextrosa,
manitol
2. Pasamos a inocular cada una de nuestras pruebas en los tubos
3. Se dejan de 24-48 hr
4. Checamos resultados
Prueba de cuagulasa
1. Se agregan 3ml de sangre por cada tubo la dejamos un
momento que coagule
2. Por siguiente pasamos a colocarla en la centrifuga
3. Es decantado para as tener la obtencin del plasma humano,
una asada grande de la bacteria aprobar. Rotar suavemente el
tubo sin sacudir.
4. Incubar a 35 grados C de 4-6 horas, observe cada 30 minutos.
Pruebas de sensibilidad o resistencia a la novobiosina
1. Dentro de las especies clnicamente importantes de los
Staphylococcus: aureus, epidermidis y saprophyticus; la prueba
de resistencia a la novobiocina a una concentracin mayor de
1.6 mgr/ml.
2. Para identificar el Staphylococcus saprophyticus, pues es el
nico que presenta resistencia.
3. Pueden utilizarse discos de sensibilidad antibitica de 5 mgr/ml.
Se prepara una suspensin de la colonia que tenga turbidez de
0.5 de la escala utilizando agar antibitico , esta suspensin
4. se siembra masivamente con un hisopo de algodn sobre una
caja de agar antibitico y se coloca un disco de novobiocina
sobre la superficie de la caja ya sembrada.
5. Se incuba por 18-24 horas a 37 C y se lee la zona de inhibicin.
Si esta es menor o igual a 16 mm se considera resistencia
positiva para la novobiocina.
Pruebas de DNAsa
1. Se inocula el microorganismos en manchas densas sobre el
agar DNA.
2. Despus de 18 a 24 hr de incubacin.
3. Revelar con HCL al 1%, que precipita el DNA nativo del medio
Prueba de camp
1. En placa de agar sangre se siembra una estra de la cepa de s.
Aureus

2. Perpendicularmente a esta (lo mas cerca posible , sin llegar a

tocarla) sembrar la cepa de estreptococos en estudio.
3. Incubar 24hr en aerobiosis (el CO2 aumenta los falsos
positivos )

Resultados
Se realizaron cajas con agares caso , chocolate , sangre en los cuales
con el crecimiento de estos sacamos para realizar las pruebas sig:
Prueba catalasa :
staphylococcus + ya que la prueba arrojo espuma
Streptococcus en esta quedo normal la prueba
Prueba de reduccin de nitratos a nitritos:
Enterococcus y caso (staphylococcus ) nos dieron un resultado (-) ya
que no hubo cambio de coloracin en nuestros tubos
Nuestros tubos con las pruebas de los agares sangre y chocolate
(streptococcus ) los resultados lanzaron (+) ya que hubo un cambio
de coloracin a rojo
Prueba de Fermentacin de carbohidratos :
Nuestros 4 tubos resultaron amarillos todos esos quiere decir que son
(+)
Prueba de cuagulasa:
Nuestros tubos resultaron con el contenido muy acuoso esto quiere
decir que podemos tener como resultados staphylococcus epidermis
staphylococcus saprophyticos
Pruebas de sensibilidad o resistencia a la novobiosina:
Notamos que al rededor de la novobiosina en una de nuestras caja de
streptococcus se formo una halo bien definido fue sensible al
medicamento sin crecimiento
Y en la segunda caja staphylococcus nos resulto el halo no tan
definido pero si hubo una buena respuesta ya que no realizo ningn
crecimiento
Pruebas de DNAsa
En nuestras 4 cajas nos resulto con un halo opaco amarillento y no
resulto algn cambio mas esto quiere decir que nuestros resultados
son (-)
Prueba de camp

En nuestra prueba de camp tomamos como resultado que entre ellas

se da un espacio ya que no llegan unirse llegamos a la conclusin que
fue (-)

3
4
Resultado en nuestras cajas
Cajas con los siguientes agares :
1. Agar caso estrindose staphylococcus (exudado corporal como:
cuello, parte trasera de las rodillas etc.)

2. Agar para Enterococcus estrindose en este Enterococcus (eses

fecales de bebe de menos de un ao )
3. Agar chocolate estrindose streptococcus (exudado farngeo )
4. Agar sangre estrindose streptococcus (exudado farngeo )

1
2

5
6
Resultados de las pruebas
1. Pruebas de sensibilidad (sensibilidad a la novobiocina)

2. Pruebas de fermentacin de carbohidratos

3. Pruebas de pico de flauta agregando cada una de nuestras
privas para ver su crecimiento
4. Prueba de CAMP
5. Prueba DNAsa
6. Pruebas de la catalaza

IMGENES ENTRE EL PROCESO DE LAS

PRUEBAS
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.

Proceso de realizacin de las pruebas

Cajas de DNAsa y caja de antibiograma
Proceso para la realizacin de picos de flauta
Resultado de uno antibiograma
Caja con la prueba de CAMP
Resultado final caja de agar sangre
Caja de antibiograma resultados de alos
Resultados de las pruebas de reduccin de nitratos a nitritos
Proceso de sembrado

Discusin
Llegamos a una conclusin en la cual al finalizar nuestras pruebas
notamos como de una pequea muestra sacada de algunas partes de
nuestro cuerpo de cosas de nuestro alrededor tenemos resultados
en los cuales si nos salen positivos se tienen que realizar mas pruebas
para sabes que probabilidades hay de que esta llegue a mutar o
saber como y con que llega a sobrevivir y con ello poder dar paso a
eliminar un porcentaje de estas .