INSTITUTO TECNOLGICO

DE TIJUANA
Subdireccin acadmica
Departamento Bioqumica y Qumica
Ing. Bioqumica
Qumica orgnica
Prctica 10: Cromatografa en capa fina.
Barroso Guerrero Isabela Dennys
14211978
Garca Chavz Alondra
14211379
Quintana Yi Zaid Daniel
14211387
Saudo Osorio Dennis Azucena
14211392

17 de mayo de 2015 Tijuana Baja California MEX.

Introduccion
La cromatografa en capa fina (en ingls thin layer chromatography o TLC) es una
tcnica analtica rpida y sencilla, muy utilizada en un laboratorio de Qumica Orgnica. Se
basa en la preparacin de una capa, uniforme de un absorbente mantenido sobre una placa,
la cual puede ser de vidrio, aluminio u otro soporte. La fase mvil es lquida y la fase
estacionaria consiste en un slido. La fase estacionaria ser un componente polar y el
eluyente ser por lo general menos polar que la fase estacionaria, de forma que los
componentes que se desplacen con mayor velocidad sern los menos polares.
Entre otras cosas permite:
Determinar el grado de pureza de un compuesto. Se puede determinar as, por ejemplo, la
efectividad de una etapa de purificacin.
Comparar muestras. Si dos muestras corren igual en placa podran ser idnticas. Si, por el
contrario, corren distinto entonces no son la misma sustancia.
Realizar el seguimiento de una reaccin. Es posible estudiar cmo desaparecen los
reactivos y cmo aparecen los productos finales o, lo que es lo mismo, saber cundo la
reaccin ha acabado.
Por las palabras griegas que la forman significara: escritura en colores. El botnico ruso
Mikhail S. Tsvet formaliz el uso de la cromatografa en los estudios cientficos -por el ao
1910-, dio ese nombre a la tcnica y la aplic a la separacin de los pigmentos naturales
que se encuentran en las plantas (conocidos como carotenoides y clorofilas ya que
logr la separacin de los pigmentos naturales de una planta en cada segmento de
color

definido

haba

un

pigmento

diferente.

Como su nombre indica las tcnicas de separacin slo sirven para eso, separar, y que no
nos dan ninguna otra informacin acerca de la naturaleza de los componentes separados, la
mayora de los casos estas tcnicas o mtodos de separacin vayan acompaados de otros

mtodos de anlisis con el fin de identificar, y en algunos casos, cuantificar los

componentes de la muestra separados.

Objetivos

Observar como los pigmentos que contienen las soluciones previamente preparadas,
son separados mediante un disolvente orgnico.

Determinar a qu tipo de colorante corresponde cada color que el disolvente

orgnico fue arrastrando a travs del papel

Conocer la tcnica TLC de separacin e identificacin de compuestos

Calcular la relacin existente entre la distancia recorrida por el compuesto y la

recorrida por el disolvente en el mismo de dos sustancias

Identificar un compuesto sintetizado usando la tcnica de cromatografa en capa

fina (en ingls thin layer chromatographyo TLC)

Marco terico.
El procedimiento ms importante para la separacin de pigmentos es la
cromatografa. La palabra cromatografa proviene del griego chroma que significa color.
Hoy en da casi no hay campo de la qumica, biologa, medicina, etc. en el que no se utilice
la cromatografa en alguna de sus formas, tanto en su vertiente preparativa como en la
analtica; por otra parte el desarrollo sobre el uso conjunto de la cromatografa con otras
tcnicas analticas, as como el desarrollo de otros tipos de cromatografa, como es por
ejemplo la de fluidos supercrticos, hace previsible una extensin an mayor de su uso.
Existen varios tipos de cromatografa, pero en todos ellos la mezcla inicial se dispersa en un
lquido o gas mviles. Esta fase mvil fluye con otra estacionaria que es una capa uniforme
de un absorbente mantenido sobre una placa, la cual puede ser de vidrio, aluminio u otro

soporte; cada uno de los distintos componentes se intercambian rpidamente, pero en

distinta proporcin entre las dos fases debido a diferencias de carga, tamao o polaridad.
Por este motivo cada uno se traslada a lo largo del sistema a distinta velocidad, da paso
lento de fluidos a travs de la fase inmovil de modo que acaban separndose. El proceso
cromatogrfico se da como resultado de repetidos procesos de sorcin-desorcin. A la
distribucin final de los componentes en funcin de su posicin sobre el lecho estacionario,
del tiempo en que eluyen se le denomina cromatograma. Las separaciones se realizan
generalmente por el procedimiento ascendiente.
Para realizar la TLC, se debe apoyar la placa cromatogrfica sobre algn recipiente
o cmara que contenga la fase lquida de aproximadamente un centmetro (la distancia entre
el principio de la placa y la muestra que se desea analizar) cerca de un extremo de una
lmina de plstico o aluminio que previamente ha sido recubierta de una fina capa de
adsorbente (fase estacionaria)con tubos capilares o micropipetas. El proceso de siembra se
realiza tocando con la punta del capilar (micro pipeta, etc) sobre la placa preparada. La
lmina se coloca en una cubeta cerrada que contiene uno o varios disolventes mezclados
(eluyente o fase mvil). A medida que la mezcla de disolventes asciende por capilaridad a
travs del adsorbente, se produce un reparto diferencial de los productos presentes en la
muestra entre el disolvente y el adsorbente.
Los productos a examinar se disolvern, cuando sea posible, en un disolvente orgnico que
tenga un punto de ebullicin lo suficientemente bajo para que se evapore despus de la
aplicacin, lo ms comn es usar acetona. Si los compuestos separados no son coloreados
es necesario revelar la posicin de dichos compuestos, para ello existen dos tipos de
mtodos:

Mtodos qumicos. Consisten en realizar una reaccin qumica entre un reactivo

revelador y los componentes separados, para ello se pulveriza la placa con los

reactivos reveladores.
Mtodos fsicos. El ms comn consiste en aadir al absorbente un indicador
fluorescente. De tal forma que al colocar la placa bajo una lmpara ultravioleta, y
dependiendo del indicador y de la longitud de onda, aparecen manchas fluorescentes
en las zonas en las que hay componentes, o en otros casos aparece toda la placa
fluorescente excepto donde hay componentes. Algunos compuestos poseen cierta

fluorescencia (aunque no es normal) con lo que pueden ser detectados directamente

en una lmpara de ultravioleta.

Material y equipo

Reactivos

Bote de gerber con su tapadera

Capilar de vidrio
Tijeras
Pipeta
Probeta

Papel de cromatografa
Benceno
Alcohol etlico
Indicador universal
Azul de metileno
Anaranjado de metilo
Naftaleno

Procedimiento
Mezclamos 5mL el benceno con 5mL de alcohol etlico.
Posteriormente los colocamos en el bote de gerber y lo tapamos.
Cortamos el papel de cromatografa de 2cm de ancho por 7cm de altura
aproximadamente, luego le dibujamos una line a unos 5mm sobre el lmite del
disolvente.
Ya que se tiene el papel listo vamos a colocar las siguientes muestras:
a) En el primer papel de cromatografa colocamos una gota (sobre la lnea) de azul de
metilo y naranja de metilo, lo ponemos en el bote degerber por unos 5min o hasta
que el disolvente lo haya cubierto por completo. (observar el desplazamiento de
ambos).
b) En el segundo papel de cromatografa vamos a colocar una gota de indicador
universal y una de naranja de metilo, (para colocar las gotas se utiliza un capilar).
c) Para la tercera prueba (podemos usar un papel de cromatografa nuevo o si tmenos
espacio en alguno de los otros lo podemos hacer ah) colocaremos una gota de
naftaleno.
Al terminar cada una de las muestras, se sacan y se ponen a secar al aire libre.

Resultados
Calcularemos el RF de cada sustancia.

1imagen

RF= (distancia recorrida por el compuesto)/ (distancia recorrida por

el disolvente)
Sustancia

RF

Naranja de metilo

2cm
RF= 5 cm =0.4

(Imagen 1)
Azul de metilo

RF=

(imagen 1)

1.4 cm
=0.28
5 cm

Naranja de metilo
(Imagen 2)

RF=
3.8 cm
=0.63
6 cm

Indicador (imagen RF=

2naranja

de

metilo)

3.8 cm
=0.63
6 cm

Indicador (imagen RF=

2, rojo de metilo)

4.2 cm
=0.7
6 cm

Indicador (imagen RF=

2, fenolftalena)

Naftaleno
(imagen 3)

5 cm
=0.83
6 cm
RF=

Imagen 2

1.5 cm
=0.3
5 cm

Imagen 3

Ejercicios
1- Cmo se pueden poner en evidencia las manchas en un cromatograma?
Por medios qumicos, por ejemplo la fenoftaleina se le tuvo que aplicar una sustancia
qumica para poder observar el desplazamiento de la mancha en el papel poroso
2- Qu combinacin de las propuestas empleara para separar una mezcla de compuestos
muy

polares?.

a. Un adsorbente muy activo y un eluyente poco polar

b. Un adsorbente muy activo y un eluyente muy polar
c. Un adsorbente poco activo y un eluyente poco polar
d. Un adsorbente poco activo y un eluyente muy polar
La

separacin de

compuestos

muy

polares mediante

cromatografa de adsorcin requiere, debido a la gran retencin que

ofrecen, la utilizacin de adsorbentes muy poco activos, o bien,
tratamientos qumicos previos a fin de reducir su polaridad.

Conclusines
Barroso Guerrero Isabela Dennys
Una vez que se concluy el experimento, se observ que en el papel se plasmaron los
pigmentos del naftaleno, indicador universal y el naranja de metilo, en distintas posiciones
del papel, esto debido a la diferencia de polaridad entre los tipos de pigmentos, la marca de
la fenoftaleina no se observaba con facilidad, por lo que tuvimos que agregarle un qumico
para que se pudiera ver.
Saudo Osorio Dennis Azucena
El principal objetivo de esta prctica fue poder identificar los compuestos (en base a su
color o pH) que se obtenan en la cromatografa, el ms interesante fue el del indicador
universal, ya que de ah podamos observar el naranja de metilo, el rojo de metilo y el
naftaleno, es fcil reconocerlo por su color, pero en caso de ser transparentes o de no estar
muy claro podemos identificarlo por su pH.