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VIABLES
1. INTRODUCCIN:
La mayora de los alimentos industrializados (excepto, por ejemplo, los
productos fermentados) deben ser considerados como inadecuados
para el consumo cuando contienen un gran nmero de microorganismo
aun cuando las caractersticas del mismo no hayan sido alteradas
Recuentos altos indican que: Las materias primas contaminadas,
tratamientos sanitarios no satisfactorios. En productos perecederos
pueden
indicar
tambin
condiciones
inadecuadas
de
tiempo/temperatura.
La presencia de un nmero elevado de bacterias aerobias Mesfilos que
crecen bien a temperatura corporal o prximo a ella, pueden haberse
desarrollado microorganismos patgenos de origen humano o animal.
Algunas cepas bacterianas no consideradas como agentes de
enfermedades transmitidas por alimento pueden causar enfermedad a
un elevado nmero de clulas viables en los alimentos. Todas las
bacterias patgenas presentes en los alimentos son mesfilas y en
algunos casos contribuyen con su presencia a los recuentos en placas.
Cuando el alimento contiene 10 6 microorganismos por gramo sus
caractersticas organolpticas se ven alteradas, algunos ya son
inaceptables con 107 bacterias por gramo. En productos fermentados
(queso, embutidos, etc.) alcanzan niveles de 10 9/gramo, en contraste los
no fermentados ya tendran una alteracin muy avanzada. Las bacterias
mesfilas (las que crecen en placa de agar a 30-37C) se consideran
como organismos indicadores aunque representan una medida mucho
menos precisa y fiable del peligro de intoxicacin alimentaria que otros
indicadores. Los recuentos elevados de bacterias mesfilas en
productos crudos o no tratados, a menudo estn constituidos por la
microflora normal o quizs indican una alteracin insipiente del alimento
y no un peligro potencial para la salud del consumidor.
Es preciso advertir que el recuento de la flora aerobia mesfila tiene un
valor limitado en algunos casos:
multiplicacin
bacteriana,
con
una
fermentacin
impropios
no
pueden
diferenciarse
grmenes.
Los recuentos de bacterias mesfilas son de escaso valor a la
hora de predecir la vida til de un alimento conservado en
refrigeracin, ya que muchos microorganismos mesfilos no
crecen a temperaturas por debajo de los 5C. Para esta finalidad
es preferible el recuento de bacterias viables psicrotrficas con
C durante 15 min.).
Placas Petri de vidrio (100 x 15).
Pipetas bacteriolgicas de 1, 5 y 10 ml.
Estufa.
Estufa de incubacin.
Contador de colonias (modelo Quebec de campo oscuro
o equivalente).
Agar para recuento en placa
Formula:
Triptona
5g
Glucosa
1g
Extracto de levadura
2,5 g
Agar
15 g
Aadir los ingredientes en 1 litro de agua destilada,
calentar en ebullicin agitando hasta obtener la completa
dilucin, dejar enfriar a 45-60 C, autoclavar a 121 C
por 15 min. Este medio existe en el mercado en forma
deshidratada, reconstituido en la forma indicada en el
envase.
3.1.2. Tcnica:
Preparar la muestra del alimento por los mtodos de
dilucin, agua peptonada.
Aproximadamente se aadir en un matraz de 500 ml
225 ml de agua peptonada estril, posteriormente
3.2.
por dilucin).
Preparacin de la muestra y diluciones (se usarn
diluciones ms altas si se sospecha que la muestra
Drigalsky
Incubar las placas Petri invertidas durante 3 das a
29-31C.
Realizar el conteo de colonias escogiendo dos
4. CLCULOS:
4.1. Clculo del Recuento Estndar en Placa:
Si las placas escogidas de cierta dilucin tienen 30 y 300
colonias.
Se cuentan todas las colonias de cada placa.
placa.
Si una de las placas de la dilucin escogida presenta algo
menos de 30 colonias o algo ms de 300.
Contar todas las colonias y proceder como en el caso
anterior.
Si las placas de dos diluciones consecutivas presentan
entre 30 y 300 colonias.
Deben hallarse el recuento en placa de todas las
colonias de cada dilucin.
El resultado ser la media de los dos valores, a no
ser que uno de ellos sea superior al doble del otro.
En ese caso se dar como recuento estndar en
multiplicar
por
el
factor
de
dilucin
correspondiente.
Dar el valor obtenido como el recuento estndar en
4.2.
placa estimado.
Clculo del Recuento Estndar en Placa Estimado:
Si todas las placas presentan ms de 300 colonias.
Dividir las dos placas correspondientes a la dilucin
ms elevada, en secciones radiales (2, 6, 8).
Contar todas las colonias que se hallan en una o
ms secciones.
placa estimado.
Si en las placas inoculadas con la dilucin menos
concentrada se encuentran ms de 200 colonias en una
seccin correspondiente a la octava parte de la placa
Multiplicar 1, 600 por el factor de dilucin
Expresar el recuento estndar en placa estimado
4.3.
dgito
4.4.
4.5.
se a podido contar.
Siempre que la zona ocupada por este tipo de colonias
corresponda.
Para decidir si una partida de alimentos se acepta o se
rechaza, debe tenerse en consideracin nicamente:
El recuento estndar en placa y nunca el recuento
4.6.
placa es de 25 a 250.
Usan la siguiente frmula para sus clculos.
Casos:
Placas Normales (25-250):
Seleccione placa(s) libre de esparcimiento. Cuente
todas las unidades formadoras de colonia (UFC).
Placas con ms de 250 colonias:
Cuando la cantidad de UFC por placa excede a 250,
para todas las diluciones, registre los recuentos
como demasiado numeroso para el conteo.
Placas con menos de 25 colonias:
Registrar el conteo como menos de 25 1/d cuando
d es el factor de dilucin para la dilucin de la que
se obtuvieron los primeros recuentos.
Placas sin UFC:
Cuando las placas de todas las diluciones no tienen
colonias, reportar el APC como menos de 1 vez la
correspondiente dilucin ms baja utilizada.
Todas las placas con crecimiento difusivo
(esparcimientos) y/o accidentes de laboratorio.
Reportar respectivamente como:
Propagacin (SPR).
Accidente de Laboratorio (AL).