Produção de Resíduos Sólidos de Matérias-Primas Amiláceas Na Fabricação de Bioetanol para Analise de Segurança

III
UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA JLIO DE MESQUITA FILHO

FACULDADE DE CINCIAS AGRONMICAS
CAMPUS DE BOTUCATU
PRODUO DE RESDUOS SLIDOS DE MATRIAS-PRIMAS AMILCEAS

NA FABRICAO DE BIOETANOL PARA ANALISE DE SEGURANA
EM ALIMENTAO DE RATOS WISTAR.
ILEANA ANDREA ORDOEZ CAMACHO
Tese apresentada Faculdade de

Cincias Agronmicas da UNESP Campus de Botucatu, para obteno
do ttulo de Doutor em Agronomia
(Energia na Agricultura).
BOTUCATU SP
Junho 2013
UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA JLIO DE MESQUITA FILHO

FACULDADE DE CINCIAS AGRONMICAS
CAMPUS DE BOTUCATU
PRODUO DE RESDUOS SLIDOS DE MATRIAS-PRIMAS AMILCEAS

NA FABRICAO DE BIOETANOL PARA ANALISE DE SEGURANA
EM ALIMENTAO DE RATOS WISTAR.
ILEANA ANDREA ORDOEZ CAMACHO

Orientador: Prof. Dr. CLAUDIO CABELLO
Tese apresentada Faculdade de

Cincias Agronmicas da UNESP Campus de Botucatu, para obteno do
ttulo
de
Doutor
em
(Energia na Agricultura).
BOTUCATU SP
Junho 2013
Agronomia
III
Dedico esse trabalho aos meus pais, que mesmo longe sempre me acompanham.
Juntos conquistamos mais um sonho...
IV
AGRADECIMENTOS
A Deus muito obrigado!

Ao Prof. Dr. Claudio Cabello, pela orientao do presente trabalho
e pelos ensinamentos com sua experincia acadmica.
Ao Professor Dr. Luis Fernando Barbisan, sempre que precisei
estava pronto para ensinar e ajudar em todas as minhas dvidas e anlises com os
animais de laboratrio.
Ao PC e a equipe do Biotrio pela ajuda com os cuidados dos
animais estudados.
A minha amiga Maira pela ajuda com as analises estatsticas.
A equipe do CERAT pelos auxlios na utilizao do laboratrio e
pela colaborao em todas as atividades decorridas.
A toda minha famlia pelo apoio e incentivo em todas as fases
desse trabalho, especialmente ao meu filho Nicolas, pelo simples fato de existir e por
trazer muita alegria a minha vida.
A todos que de alguma forma contriburam e me incentivaram, para
a execuo deste trabalho.
SUMARIO
LISTA DE FIGURAS .......................................................................................................
VII
LISTA DE TABELAS .......................................................................................................
IX
LISTA DE ABREVIATURAS .........................................................................................
RESUMO ...........................................................................................................................
ABSTRACT .......................................................................................................................
1. INTRODUO .............................................................................................................
2. REVISO DE LITERATURA ....................................................................................
2.1. Bioetanol ....................................................................................................................
2.2 Matrias-Primas ..........................................................................................................
12
2.2.1 Mandioca ................................................................................................................
14
2.2.2 Sorgo ......................................................................................................................
17
2.2.3 Arroz .......................................................................................................................
19
2.2.4 Milho ......................................................................................................................
20
2.2.5 Batata-doce .............................................................................................................
21
2.3 Resduos do Processamento ........................................................................................
23
2.4. Experimentao Animal .............................................................................................
27
2.4.1 Condies ambientais .................................................................................................
28
2.4.2 Rato ............................................................................................................................
29
2.4.2.1 Requerimentos Nutricionais ....................................................................................
32
2.4.2.2 Eutansia .................................................................................................................
33
2.4.3 Anlises Laboratoriais ................................................................................................
34
2.4.3.1 Histologia ..........................................................................................................
34
2.4.3.2 Perfil Sanguneo ................................................................................................
36
3. MATERIAL E MTODOS ..........................................................................................
38
3.1 Matria-Prima ..............................................................................................................
38
3.2 Processamento .............................................................................................................
39
3.3 Experimentao Animal ..............................................................................................
40
4. RESULTADOS E DISCUSSO ..................................................................................
47
4.1 Matrias-Primas ..........................................................................................................
47
4.2. Resduos Slidos ........................................................................................................
48
4.3. Experimentao Animal .............................................................................................
49
4.3.1 Raes ....................................................................................................................
50
4.3.2. Analise Comportamental dos Ratos ......................................................................
56
4.3.3. Desempenho ..........................................................................................................
62
4.3.3. Funo Renal .........................................................................................................
63
4.3.4. Funo Heptica ....................................................................................................
64
4.3.5. Histologia ..............................................................................................................
65
5. CONSIDERAES FINAIS .......................................................................................
71
6. CONCLUSES .............................................................................................................
72
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS ............................................................................
74
VII
LISTA DE FIGURAS
Figura 1.
Estgios da produo de etanol a partir de matrias-primas de origem

vegetal...........................................................................................................
Figura 2.
Processo para obteno de etanol a partir de matrias-primas de origem

vegetal............................................................................................................
Figura 3.
Pontos de ao das enzimas na hidrlise do amido.......................................
Figura 4.
Rendimento mdio de bioetanol para diferentes culturas..............................
13
Figura 5.
Balanos de massa do Etanol, gua, CO2 e Efluentes no processamento

industrial da mandioca para produo de etanol...........................................
16
Figura 6.
Calendrio Bioenergtico..............................................................................
18
Figura 7.
Rato Wistar....................................................................................................
30
Figura 8.
Passos para obteno dos resduos slidos de matrias-primas amilceas

na produo de lcool....................................................................................
Figura 9
39
Fluxograma para produo dos resduos slidos de matrias-primas

amilceas na produo de lcool...................................................................
43
Figura 10
Marcao dos animais...................................................................................
45
Figura 11
Valores mdios dos valores, por animal, dos pesos e consumo da rao
formulada como testemunha........................................................................
Figura 12
formulada com incluso de resduo slido do procesamento de mandioca..
Figura 13
57
formulada com incluso de resduo solido do procesamento de milho.......
Figura 14
56
58
formulada com incluso de resduo solido do procesamento de batatadoce................................................................................................................
Figura 15
formulada com incluso de resduo solido do procesamento de sorgo.......
Figura 16
59
60
formulada com incluso de resduo solido do procesamento de arroz........
60
Figura 17
usada como testemunha comercial................................................................
Figura 18.
61
Fotomicrografias representativas de cortes de estmago (poro

glandular) dos diferentes grupos experimentais, 1 a 7 respectivamente
(objetiva de 10x). ..........................................................................................
Figura 19.
Fotomicrografias representativas de cortes de fgado dos diferentes grupos

experimentais, 1 a 7 respectivamente (objetiva de 10x)................................
Figura 20.
66
67
Fotomicrografias representativas de cortes de intestino delgado (poro

jejuno/leo) dos diferentes grupos experimentais, 1 a 7 respectivamente
(objetiva de 10x)............................................................................................
Figura 21.
Fotomicrografias representativas de cortes de intestino grosso dos

diferentes grupos experimentais, 1 a 7 respectivamente (objetiva de 10x)...
Figura 22.
Figura 23.
68
69
Fotomicrografias representativas de cortes de rim dos diferentes grupos

experimentais, 1 a 7 respectivamente (objetiva de 10x)................................
70
Planta piloto para fabricao de etanol CIAT-Colmbia..............................
71
IX
LISTA DE TABELAS
Tabela 1.
Principais tipos de carboidratos usados na fabricao de etanol................
11
Tabela 2.
Capacidade de produo de amido de culturas amilceas no Brasil. .........
13
Tabela 3.
Parmetros Fisiolgicos de ratos................................................................
32
Tabela 4.
Requerimentos nutricionais de ratos Wistar...............................................
42
Tabela 5.
Distribuio dos animais no biotrio..........................................................
44
Tabela 6.
Composio centesimal das matrias-primas.............................................
47
Tabela 7.
Composio fsico-qumica dos resduos slidos do processamento das

matrias-primas...........................................................................................
Tabela 8.
Composio porcentual e bromatolgica da rao usada como

Testemunha ................................................................................................
Tabela 9
54
Composio porcentual e bromatolgica da rao com incluso de

resduo a partir da matria-prima Arroz.....................................................
Tabela 14.
53

resduo a partir da matria-prima Sorgo.....................................................
Tabela 13.
52

resduo a partir da matria-prima Batata-doce............................................
Tabela 12.
51

resduo a partir da matria-prima Milho.....................................................
Tabela 11.
50

resduo a partir da matria-prima Mandioca...............................................
Tabela 10.
48
55
Resultados do desempenho mdio dos grupos de consumos das raes

formuladas..................................................................................................
56
Tabela 15.
Valores mdios dos valores, por grupo, dos pesos dos rins e fgado..........
57
Tabela 16.
Valores mdios da concentrao de ALT e AST no plasma de indivduos

dos grupos de ensaio ..................................................................................
Tabela 17
58
Valores mdios da concentrao de ureia e creatinina no plasma de

indivduos dos grupos de ensaio ................................................................
59
LISTA DE ABREVIATURAS
ABAM: Associao Brasileira dos Produtores de Amido de Mandioca

ABEGS: Associao Brasileira das Empresas Distribuidoras de Gs Canalizado
ALT: Alanina transaminase
ANP: Agncia Nacional do Petrleo, Gs Natural e Biocombustveis
AST:Aspartato transaminase
ATR: acar total recupervel
BioTGA: Frum Nacional de Batata-Doce Industrial para produo de Etanol e
Derivados
CA: Converso Alimentar
CR: Consumo de Rao
CEPEA: Centro de Estudos Avanados em Economia Aplicada ESALQ/USP
CERAT: Centro de Razes e Amidos Tropicais
CONAB: Companhia Nacional de Abastecimento
EMBRAPA: Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuria.
FAPEMAT: Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de Mato Grosso
FAO: Organizao das Naes Unidas para Agricultura e Alimentao (sigla em ingls)
FMB: Faculdade de Medicina de Botucatu
FMVZ: Faculdade de Medicina Veterinria e Zootecnia
GP: Ganho de Peso
IBGE: Instituto Brasileiro de Geografia e estatstica
LTF: Laboratrio de Tecnologia Farmacutica
UFPB: Universidade Federal da Paraba
SECITEC: Secretaria de Estado de Cincia e Tecnologia
UFT: Universidade Federal do Tocantins
UNICA: Unio da Industria De Cana de Acar
RESUMO
A produo de bioetanol utilizando matrias-primas amilceas d
origem a um resduo lignocelulsico que junto com o vinho esgotado nas colunas de
destilao so os principais resduos do processo. O resduo lquido segue para
tratamento em lagoas de estabilizao enquanto o slido descartado no ambiente. O
presente trabalho teve como objetivo caracterizar os resduos slidos de mandioca,
sorgo, milho, arroz e batata-doce obtidos em ensaios numa planta piloto de fabricao
de bioetanol e verificar os efeitos de sua incluso em raes para ratos de linhagem
Wistar. Cada matria-prima foi processada separadamente e o resduo slido foi secado
em estufa para posteriores estudos. A produo dos resduos teve inicio com adio de
gua aos resduos estocados para formao de uma polpa com 20% de amido, sendo
adicionadas em duas etapas as enzimas alfa-amilase (90C / 2 horas / pH 6.0), seguida
de amiloglucosidase (60C/ 14 horas /pH 4.5). Na sequencia o hidrolisado foi
submetido a fermentao (28C / 24 horas) com levedura Sacharomyces cerevisiae,
seguida da separao das partes slidas e lquidas com filtro a vcuo; a parte slida
coletada formou o resduo estudado, que para melhor conservao foi em seguida seco e
modo. Os cinco tipos de resduos foram caracterizados com anlises fsico-qumicas
(protenas, lipdios, fibras, acares e amido). Na fase experimental com animais foram
formuladas raes para ratos da linhagem Wistar com 10% de incluso dos resduos,
cujos animais provenientes do Biotrio Central da Administrao Geral do Campus da
UNESP (Botucatu), foram instalados no Biotrio da Patologia por um perodo de 42
dias, durante os quais foram realizadas as colheitas dos dados referentes a consumo e
peso. Aps este perodo os ratos foram sacrificados e foram tomadas amostras de
sangue para analises de transaminases (ALT/AST), ureia e creatinina, e coletados
rgos (rins, fgado, estmago, intestino) para analise de lminas histolgicas.
Nas condies em que os experimentos foram realizados, os resultados permitiram
concluir que ocorreram diferenas significativas no desempenho dos animais quando
alimentados com resduo proveniente de batata-doce (maior consumo 12,98g/dia, menor
ganho de peso 4,10g/dia e menor converso alimentar 2,02); as outras matrias-primas
estudadas no apresentaram diferenas comparando-as com rao comercial. Nenhuma
das raes experimentais apresentou efeitos adversos nas funes hepticas e/ou renais.
Nenhuma alterao histolgica foi encontrada.
Palavras-chave: bioetanol, amido, resduo, rato, roedor, Wistar.
SOLID WASTE PRODUCTION IN THE MANUFACTURE OF ETHANOL

WITH STARCHSTO ANALYZES SECURITY IN FEEDING WISTAR RATS.
SUMMARY: The production of ethanol using starches produces two residues, a solid
lignocellulosic and a liquid coming from the distillation columns. The following liquid
waste treatment in stabilization ponds while the solid is discarded into the environment.
This study aimed to produce and characterize solid waste of cassava, sorghum, maize,
rice and sweet potatoes processed in a pilot plant production of ethanol and verify the
effects of its inclusion in diets for rats Wistar.
Each material was processed separately. The production of waste started with addition
of water and formation of a pulp with 20% starch, were added alpha-amylase enzyme
(90 C / 2 hr / pH 6.0), followed by amyloglucosidase (60 C / 14 hours / pH 4.5) the
hydrolyzate was subjected to fermentation (28 C / 24 hours) with yeast Saccharomyces
cerevisiae were separated solid and liquid parts with vacuum filter, the solid residue
formed was studied (for the better conservation was dried and ground). The five types
of waste were characterized with physicochemical analysis (proteins, lipids, sugars and
starches).
In the phase experimental with animals were formulated diets for rats Wistar with 10%
waste inclusions, the animals from the Central Animal Laboratory of the General
Administration Campus of UNESP (Botucatu/SP) settled in the Animal Pathology for a
period of 42 days, was made to collect data relating to consumption and weight, after
this period the rats were sacrificed and samples were taken to analyze blood
transaminases (ALT / AST) and creatinina/urea and collected organs (kidneys, liver,
stomach, intestine) for analysis of histological slides.
With these experimental conditions, the results showed significant differences in the
performance of animals when fed with sweet potato waste (higher consumption 12.98
g/day, less weight gain 4.10 g/day and lower feed conversion 2.02), other materials did
not alter performance comparing with commercial feed. None experimental diets had
adverse effects on liver function and/or kidney. None histological abnormality was
found.
Keywords: Ethanol, starch, waste, rat, rodent, Wistar.
INTRODUO
A partir da crise energtica da dcada de 1970 e das principais

conferncias sobre o meio ambiente, as questes sobre a eficincia da gerao e do uso
da energia foram intensificadas e ampliadas, considerando, principalmente, os seus
impactos ambientais, buscando cada vez mais o uso de fontes renovveis de energia,
que possam contribuir para reduzir as emisses de gs carbonico(CORTEZ, 2010).
As matrias primas amilceas como as tuberosas tropicais,
representam uma fonte alternativa para a produo de etanol (CABELLO, 2005).
Nos sistemas de produo de etanol por fermentao onde se
utilizam matrias primas amilceas h a formao de um resduo slido que juntamente
com o vinho esgotado nas colunas de destilao, constituem-se nos principais resduos
gerados no processo(CEREDA, 2001).
Normalmente os resduos lquidos seguem para tratamento em
lagoas de estabilizao, enquanto que, os resduos slidos so descartados no ambiente
incorporando esta biomassa ao solo;entre as alternativas encontradas para o uso de este
tipo de resduos esto a sua aplicao nas reas de adubao, alimentao animal e na
cogerao de energia.
Alm do aspecto ambiental o descarte indevido constitui
desperdcio de uma matria-prima que poderia ser aproveitada(CEREDA, 2001).
A crescente preocupao com a questo ambiental associado
busca por novas fontes de energia renovvel ampliou as pesquisas ligadas ao
aproveitamento deste tipo de resduo agroindustrial, proporcionando o aproveitamento
dos materiais, assim como um ganho econmico e ambiental (SAITO, 2005).
O presente trabalho teve como objetivos a produo e
caracterizao de resduos slidos gerados em sistemas de produo de etanol a partir de

mandioca, batata-doce, sorgo, milho e arroz (matrias-primas amilceas) para analise de
segurana em alimentao de ratos WISTAR.
2. REVISO DE LITERATURA
2.1 Etanol
O etanol usado de diversas formas h milhares de anos e,
recentemente, emergiu como combustvel para motores de combusto interna,
(ABRAMOVAY, 2009). O Brasil pioneiro na utilizao do etanol como combustvel
veicular (VIEIRA, 2006).
O pas utilizou etanol em automveis pela primeira vez na dcada
de 1920, mas a indstria produtora de etanol ganhou grande impulso somente na dcada
de 1970, com o lanamento do PROGRAMA NACIONAL DO LCOOL - Prolcool,
programa federal de estmulo criado como resposta crise mundial do petrleo
(PENIDO, 1981).
O etanol comercialmente conhecido como lcool etlico, tem
frmula molecular: C2H5OH ou C2H6O.
Quando fabricado a partir de matrias-primas vegetais,
considerado um biocombustvel, ou seja, um combustvel renovvel, que no utiliza
materiais de origem fssil como o petrleo (DORADO, 2009).
produzido desde os tempos antigos pela fermentao dos
acares encontrados em produtos vegetais, embora tambm possa ser feito
sinteticamente de fontes como o eteno derivado do petrleo (BASTOS, 2007)
Etanol pode ser produzido a partir de qualquer material que
contenha quantidades significativas de carboidratos, particularmente amido ou acares
como sacarose, glicose, frutose e maltose (MENEZES, 1980).
O processo de fabricao de etanol a partir de matrias-primas de

origem vegetal consiste em trs grandes estgios descritos na Figura 1.
2
3
Preparo da matria-prima.
Converso de carboidratos (quando necessrio) em aucares fermentveis.
Fermentao de acares em lcool
Separao e purificao do lcool.
Figura 1. Estgios da produo de etanol a partir de matrias-primas de origem vegetal.
Durante o Prolcool havia diversas condies favorveis para

investir no aperfeioamento das tecnologias nas diversas etapas do processo, desde a
produo e tratamento da matria-prima at o reaproveitamento dos resduos da
fabricao do lcool, o programa era representado por um expressivo setor aucareiro.
Muitas inovaes foram introduzidas para que fossem alcanados
os resultados que alavancaram o Brasil posio de maior produtor mundial de lcool
combustvel derivado de cana-de-acar (ABRAMOVAY, 2009).
Na etapa de produo da matria-prima, foram introduzidos novos
equipamentos de colheita, novas variedades selecionadas de cana-de-acar, novas
tecnologias de manejo da plantao, dos resduos e o reaproveitamento do vinhoto para
adubagem do solo (CABELLO, 2005).
Na etapa industrial, foram aperfeioados os processos e
equipamentos de extrao do caldo e de destilao do produto, foi usado o controle
biolgico da fermentao e foram reduzidos os gastos de energia com o
reaproveitamento dos resduos da matria-prima para queima (SALLAS, 2008).
Com o fim dos subsdios o uso do lcool foi reduzido at quase
desaparecer. Porm a mistura do lcool anidro gasolina passou a ser obrigatria pelo
decreto 19.717, de 20 de fevereiro de 1931, que estabeleceu a aquisio obrigatria de
lcool anidro de procedncia nacional, na proporo de 5% da gasolina importada,
revigorando o setor.
Os resultados alcanados pelo Brasil na produo de etanol

demonstram a validade dos esforos empreendidos em pesquisa e desenvolvimento
(VIEIRA, 2006).
A fabricao de etanol a partir de matrias-primas de origem
vegetal como apresentada na Figura 2, pode ser realizada utilizando matrias-primas
aucaradas diretamente fermentescveis,como o caso da cana-de-acar e a beterraba
ou matrias-primas amilceas, cujo amido deve ser convertido em acar antes da
fermentao como o caso de mandioca, trigo e milho entre outras.
Matria-prima
Lavagem
Desintegrao
Matria-prima amilcea:
Trigo, cevada, mandioca etc.
Liquefao
Matria-prima aucarada:
Cana-de-acar, beterraba.
Sacarificao
-Hidrlise-
Fermentao
-Micro-organismosResduos
slidos
CO2 - calor
Destilao
Resduos
Lquidos.
Licor
Etanol
Figura 2. Processo para obteno de etanol a partir de matrias-primas de origem

vegetal.
Resumidamente as operaes unitrias ilustradas na Figura 2podem

ser descritas como:
1. Lavagem: Elimina impurezas que possam interferir no processamento.
2. Desintegrao: Aumenta a superfcie de contato da matria-prima, expondo

mais facilmente ao calor e aos agentes sacarificantes, de modo a tornar mais
eficientes as operaes posteriores de hidrlise e fermentao.
3. Liquefao: Em esta operao so liberados os gros de amido ligados aos
compostos lignocelulsicos facilitando a reao entre os agentes sacarificantes
e o amido nas etapas seguintes, como resultado do aquecimento, o gro de
amido absorve gua, intumesce, a parede celular se rompe e o amido se
gelatiniza, no final desse processo, a massa torna-se liquefeita pela ao do
calor combinado com a enzima alfa-amilase (LEONEL, 2001).
4. Sacarificao: Os materiais amilceos contm carboidratos mais complexos

como amido que podem ser quebrados em glicose pela hidrlise cida ou ao
de enzimas num processo denominado sacarificao (FILHO, 2003).
A hidrlise realiza-se por via qumica ou biolgica. O processo qumico utiliza

cido para a quebra do amido. J a hidrlise biolgica (mais empregada
atualmente), faz-se por ao enzimtica ou pela ao de microbiana de certos
fungos (LIMA, 1987).
A enzima alfa-amilase rompe as ligaes alfa 1-4, de maneira que se formam

pequenas cadeias de dextrose denominadas dextrinas tornando a pasta
gelatinizada do amido menos viscosa e fornecendo maior numero de terminais
de cadeias para a ao das enzimas sacarificantes, nesta fase um 85% do amido
e convertido em aucares fermentescveis (LEONEL, 1998).
A amiloglucosidase ataca as ligaes alfa 1-6 das molculas de maltose, e, em

menor grau, as dextrinas formando glicose. Com o trabalho conjunto dessas
enzimas possvel hidrolisar completamente a molcula do amido.
A Figura 3 apresenta a hidrlise do amido gelatinizado, que envolve o

desdobramento das ligaes alfa 1-4, que ligam as molculas de glicose em
longas cadeias e as ligaes alfa 1- 6, que formam os pontos de ramificao do
componente amilopectina do amido.
Figura3. Pontos de ao das enzimas na hidrlise do amido.
A velocidade de hidrlise depende do tipo (linear ou ramificada) e da extenso

da cadeia de amido: as ligaes alfa 1-4 se hidrolisam mais facilmente que as
ligaes alfa 1-6, porm a maltotriose, e especialmente a maltose, hidrolisa
mais lentamente que os oligosacardeos. (LEONEL, 1998).
5. Fermentao: O processo de fermentao alcolica caracteriza-se como uma

via catablica, na qual h a degradao de molculas de acar (glicose ou
frutose), no interior da clula de microrganismos (leveduras ou bactrias), ate
a formao de etanol e CO2, havendo liberao de energia qumica e trmica
(FILHO, 2003).
A via fermentativa com uso de leveduras o mtodo utilizado na obteno de

etanol no Brasil e na maior parte dos pases do mundo (VIEIRA, 2006). Apesar
de no ser o nico microrganismo capaz de produzir lcool, propriedades
especficas das leveduras como a tolerncia a altas concentraes de lcool e
gs carbnico, o crescimento rpido e a capacidade de fermentao as tornam
os micro-organismos mais adequados para a operao em escala industrial

(PENIDO,1981).
Existem vrias linhagens desse micro-organismo, que foram selecionadas ao

longo do tempo, para maior tolerncia a variaes de pH, maior resistncia ao
lcool e rendimento da fermentao porem as leveduras mais importantes para
a produo de lcool so as Saccharomyces cerevisiae e Saccharomyces
carlsbergensis (CAMILI, 2009)
Diversos fatores fsicos (temperatura, presso osmtica), qumicos (pH,

oxigenao, nutrientes minerais e orgnicos, inibidores) e microbiolgicos
(espcie, linhagem e concentrao da levedura, contaminao bacteriana),
afetam o rendimento da fermentao, ou seja, a eficincia da converso de
acar em etanol (CAMILI, 2009).
A biomassa das leveduras pode ser recuperada como subproduto da

fermentao e transformada em levedura seca, que se constitui em matriaprima para fabricao de rao animal ou suplemento vitamnico
(CAMACHO, 2009).
6. Destilao: O mosto fermentado (vinho) que vem da fermentao possui, em

sua composio, 7 a 10 % em volume de lcool, alm de outros componentes
de natureza lquida, slida e gasosa (PENIDO, 1981).
O lcool presente no vinho recuperado pela destilao, processo de

separao de componentes de uma mistura baseado nas suas capacidades de
evaporao em uma dada temperatura e presso.
Na destilao, a mistura aquecida at a fervura, sendo que os vapores so

resfriados at se tornar lquido novamente.Assim, o efeito final o aumento da
concentrao do componente mais voltil (lcool) no vapor e do componente
menos voltil (caldo fermentado) no lquido. Por este processo obtm-se, a
partir de um vinho de 7 a 9% de teor alcolico, um teor prximo a 96% em
etanol (PENIDO, 1981).
O lcool hidratado, produto final dos processos de destilao e retificao,

uma mistura binria lcool-gua que atinge um teor da ordem de 96GL. Este
lcool hidratado pode ser comercializado desta forma para ser utilizado em
carros a lcool e bicombustveis ou pode sofrer um processo de desidratao
para se tornar anidro, utilizado como mistura carburante na gasolina.
Considerando a produo com base em matrias-primas aucaradas

como o caso da cana-de-acar, o processo mais simples, envolvendo menos
operaes unitrias, uma vez que os acares disponveis so diretamente fermentveis,
dispensando etapas de hidrlise (MENEZES, 1980)
Matrias-primas ricas em carboidratos podem ser agrupadas em
duas categorias, as diretamente fermentescveis que no necessitam de converso prvia
do carboidrato, e as indiretamente fermentescveis que precisam sofrer essa converso
previa antes da fermentao, de modo a torn-lo assimilvel pela levedura alcolica
(MENEZES, 1980)
Os principais tipos de carboidratos, sua principal fonte fornecedora
e a categoria en que so enquadrados esto descritos na Tabela 1.
Tabela 1. Principais tipos de carboidratos usados na fabricao de etanol.
Categoria
Tipo de Sacardeo
Glicose
Diretamente Fermentescveis
Frutose
Sacarose
Principais Fontes
Polpa de frutas
Cana-de-aucar, beterraba,
sorgo sacarino (colmo)
Mandioca, batata-doce,
Amido
milho, gras de cereais em

geral, babau, batata,
tuberculos em geral.
Indiretamente Fermentescveis
Madeira, bagao de cana,

Celulose
palha de arroz, casca de

amendoim, sabugo de milho.
Fonte. MENEZEZ, 1980
Qualquer produto que contenha uma quantidade considervel de

carboidratos (acares) constitui-se em matria-prima para obteno de lcool pela via
fermentativa. Entretanto, para que seja vivel economicamente, preciso que se
considere o seu volume de produo, rendimento industrial e o custo de fabricao.
Embora no Brasil o uso de cana acar para produo de lcool
seja muito bem sucedido, outras matrias-primas podem ser consideradas, bem seja para
possibilitar a produo em regies sem vocao agrcola de alguma cultura ou pelo
aproveitamento das perdas resultantes da produo agrcola existente, tanto na colheita
como na classificao final (FILHO, 2003).
2.2. Matrias-primas amilceas

O amido o polissacardeo de reserva dos vegetais e est
armazenado sob a forma de grnulos, que apresentam certo grau de organizao
molecular, o que confere aos mesmos um carter parcialmente cristalino, ou
semicristalino, com graus de cristalinidade que variam de 20 a 45% (YOUNG, 1984).
O amido constitui-se em grnulos compactados de amilose e
amilopectina. A amilose um polissacardeo composto de unidades de glicose unidas
em longas cadeias predominantemente lineares atravs de ligaes alfa 1-4. A
amilopectina formada por unidades de glicose com ligaes alfa 1-4 nas pores
retilneas e apresenta ramificaes devidas presena de ligaes alfa 1-6 entre as
cadeias de glicose (ELLIS, 1998).
O amido pode ser obtido de diversas fontes vegetais, como cereais,
razes e tubrculos, e tambm de frutas e legumes, no entanto, a extrao em nvel
comercial de amido se restringe aos cereais, razes e tubrculos (LIMA, 2004).
As principais fontes de amido comercial no mundo so milho,
arroz, trigo e mandioca e batata (ELLIS, 1998; LEONEL, 2001).
Culturas como arroz, batata, batata-doce, taro, inhame, mandioca e
milho so produzidas no Brasil. A Tabela 2 apresenta a capacidade de produo de
amidopor hectare e por ano de estas culturas, permitindo visualizar o potencial de uso
das mesmas na produo de alcool (CABELLO, 2010)
Tabela 2. Capacidade de produo de amido de culturas amilceas no Brasil.
Arroz
Amido
%
0,77
Amido/rea
t/ha
2,93
Batata
0,12
2,68
Batata-doce
0,15
3,0
Taro
0,15
7,5
Inhame
0,17
6,8
Mandioca
0,30
9,0
Milho
0,56
5,0
Matria-prima
Fonte: CABELLO, 2010.
O balano energtico de cada matria-prima ou a relao entre a

energia produzida e a energia consumida para produzir etanol um fator altamente
importante para a adequao e seleo dos materiais a serem usados. (EMBRAPA,
2009).Na Figura 4 mostrada uma relao comparativa entre etanol obtido a partir de
diferentes matrias-primas.
Figura 4. Rendimento mdio de bioetanol para diferentes culturas.

Fonte: EMBRAPA, 2009
Pode-se observar que o rendimento mdio maior quando se

utiliza matria-prima composta por acares diretamente fermentescveis como o caso
da cana-de-acar e da beterraba. Das matrias-primas amilceas o milho apresenta
rendimento superior.
2.2.1 Mandioca
A palavra mandioca deriva do vocbulo manioc (palavra de origem
tupi), mas sua denominao cientfica Manihot esculenta Crantz, a espcie de maior
interesse agronmico. O gnero Manihot apresenta cerca de 180 espcies descritas, a
maioria das quais nativas do Brasil (LIMA, 2001).
A mandioca uma planta perene, helifila, herbcea quando nova,
lenhosa, subarbustiva ou raramente arbrea na maturidade, no ramificada ou
ramificando-se de vrios modos, arbustiva, de razes tuberosas, folhas pecioladas,
inflorescncia em panculas onde se encontram separadas, flores masculinas e
femininas. A cultura tem grande importncia tanto agronmica como cultural, pois essa
planta a principal fonte de alimento nas regies pobres do pas, alm de ter seu centro
de origem e domesticao na regio Amaznica (SAMPAIO, 2005).
O sistema radicular da mandioca tem uma baixa densidade de
razes, porm tem uma penetrao profunda, o que d planta parte da capacidade para
resistir a longos perodos de dficit hdrico, suportar o clima quente, tolerar seca e
adaptam-se s mais variadas condies de clima e de solo (LIMA, 2001).
A mandiocultura no Brasil encontra-se em diferentes condies,
variando desde a cultura tradicional, de subsistncia, com pouca ou nenhuma tecnologia
e de baixa produtividade (8 a 12 t/ha), at polos na regio oeste do Paran, Mato Grosso
do Sul e noroeste de So Paulo, com plantios de mandioca empresarial, mecanizados,
com tecnologia, visando alcanar produtividades de 40 t/ha (SCHWENGBER, 2009).
A abundancia do cultivo em todo o territrio nacional, sua
robustez, facilidade de propagao, elevada tolerncia estiagem e ao excesso de
chuvas, bons rendimentos mesmo em solos de baixa fertilidade, baixa exigncia em
insumos modernos, potencial resistncia/tolerncia a pragas e doenas, elevado teor de
amido nas razes, possibilidade de consorcio com inmeras plantas, resistncia
propagao do fogo, alternativa para reutilizao das reas degradadas, cultivo e
colheita em qualquer poca do ano so alguns atributos para a gerao de energia de
baixo impacto ambiental (SALLA, 2008).
Dados do Instituto Brasileiro de Geografia e Estatstica IBGE
mostraram que para 2012 o Brasil teve uma rea colhida de 1,72 milhes de hectares
com produtividade agrcola de 14,6t/hectare, com isto a produo para 2012 foi de 25,2
milhes de toneladas 3,7% inferior obtida na safra 2011 onde foram produzidas 26,1
milhes de toneladas.Atualmente, seis dos dez maiores municpios produtores do

tubrculo do Brasil esto na regio norte onde a maior parte do cultivo realizada em
pequenas propriedades.
A mandioca um vegetal considerado como matria-prima para
produo de lcool (CABELLO, 2005). Basicamente, cinco grupos de substncias so
encontrados nas plantas: carboidratos (87%), protenas (3%), lipdeos (1%), lignina
(3%) e cidos orgnicos (3%) (PEREIRA, 1989).
O lcool de mandioca j foi produzido no Brasil no perodo de
1932 a 1945, quando a disponibilidade energtica da poca da guerra era bastante
limitada. Naquele tempo, tcnicos j apregoavam a fabricao do lcool carburante,
tendo o Pas produzido 60 milhes de litros anuais para mistura com gasolina, produo
que superava de lcool para bebidas (MENEZES, 1980).
Atualmente o Programa Biolcool, iniciativa do Instituto
Ecolgica, Organizao da Sociedade Civil de Interesse Pblico que desenvolve planos
de orientao a pequenos produtores nortistas tem como foco a produo de lcool
retificado ou neutro, com baixo grau de impurezas, utilizado em indstrias
farmacuticas, de cosmticos e de tintas. (COSTA, 2010).
Quando considerada a produtividade por tonelada da mandioca em
relao cana-de-acar na fabricao do etanol, a mandioca tem um melhor
desempenho, enquanto uma tonelada de cana-de-acar, com 140 kg de acar total
recupervel (ATR), produz 85 litros de lcool, uma tonelada de mandioca, com 25% de
amido, pode produzir 170 litros de lcool. Considerando a produtividade agrcola mdia
em torno de 18 toneladas por hectare, implica um rendimento industrial de 3.060 litros
de bioetanol por hectare. (CABELLO, 2005).
Com a tecnologia atual, cada tonelada de mandioca pode produzir
200 litros de lcool. Ou seja, a cada 5 quilos da raiz se produz um litro de combustvel
(PEDUZZI, 2009). Para cada quilograma de massa produzida pela desintegrao das
razes de mandioca foram obtidas 166 gramas de etanol, 99,5 GL (SALLAS, 2008).
A Figura 5 ilustra os balanos de massa do etanol, gua, CO2 e
efluentes no processamento industrial da mandioca para produo de etanol.
Figura 5. Balanos de massa do etanol, gua, CO2 e efluentes no processamento

industrial da mandioca para produo de etanol.Fonte: SALLAS, 2008
Foi determinado que a quantidade mnima de gua necessria para bom

funcionamento dos processos de sacarificao foi de 1,6 litros de gua para cada
quilograma de massa gerada pela desintegrao das razes (SALLAS, 2008).
A gua adicionada para fazer a diluio da massa ralada, somada quela
contida naturalmente nos tecidos das razes de mandioca (62%) produziu efluentes na
ordem de 2,27 kg para cada quilograma de razes desintegradas (SALLAS, 2008).
Durante o processo de fermentao de um quilograma de razes
desintegradas de mandioca foram gerados 154 gramas de CO2 (SALLAS, 2008).
2.2.2Sorgo
A origem do sorgo tem sido motivo de muita controvrsia entre
pesquisadores. Existem relatos de sua explorao em runas de Egito, na China, e na
ndia, onde era cultivado muito antes da Era Crista. Entretanto, tem-se como provveis
centros de origem do sorgo o Centro-Leste da frica e partes da sia (BRINHOLI,
1996).
No continente Americano existe registros da sua introduo por
sementes trazidas de navios que transportavam escravos. No Brasil a introduo do
sorgo relativamente recente e efetivou-se no Rio Grande do Sul, onde a cultura
desenvolveu-se a partir do inicio da dcada de 70 (BRINHOLI, 1996).
O sorgo uma planta anual, pertencente famlia Poaceae e
caracteriza-se pela grande produo de massa e gros de constituio semelhantes aos
do milho. A altura da planta varia de 1,00 a 1,70 m, dependendo do cultivar e do
ambiente (SHERTZ & DALTON, 1980).
Existe cultivares de duplo propsito (gros e forragem) com altura
media em torno dos 2,00 m. O colmo formado de ns internos, com uma folha em
cada n. As folhas assim como o caule, apresentam uma fina camada de cera em sua
superfcie, que no so recobertas por pelos, permitindo a identificao da planta nos
estgios iniciais de desenvolvimento. No pice do colmo encontra-se a pancula que
pode variar de 20 a 40 cm de comprimento (SHERTZ & DALTON, 1980).
O sorgo o quinto cereal mais importante no mundo e seus gros
tambm podem ser utilizados para a produo de farinha para panificao, amido
industrial e lcool (LIMA, 2012).
No Brasil, as zonas de adaptao da cultura se concentram no Sul
(regio de fronteira) em plantios de vero, no Brasil Central em sucesso a plantios de
vero (safrinha) e no Nordeste em plantios nas condies do semirido com altas
temperaturas e precipitao inferior a 600 mm anuais; uma cultura com custo
significativamente mais baixo quando comparado ao milho, com poucos problemas de
pragas e doenas e, muito tolerante condio de stress hdrico (LIMA, 2012).
Segundo a Companhia Nacional de Abastecimento - CONAB. No
ano de 2012, Gois,foi o Estado com maior representao na produo total do sorgo
com rea estimada em 325,8 mil hectares e produo de 1,0 milho de toneladas,
seguido por Minas Gerais, com rea de 134,8 mil hectares e produo de 419,6 mil
toneladas, e por Mato Grosso, com 308,7 mil toneladas produzidas, em uma rea de
154,1 mil hectares.

Pesquisas da Embrapa Milho e Sorgo, de Sete Lagoas, na Regio
Central de Minas Gerais, estudam 25 novos cultivares de sorgo sacarino para produo
de lcool, os trabalhos comearam ainda na dcada de 1970(SHAFERT, 2010).
Todo o processo, da colheita ao produto pronto, leva trs dias, e o
resultado um lcool puro, sem aditivos ou corantes e com graduao entre 95 e 96
graus GL, que pode ser consumido diretamente nos motores, inclusive de carrosdia
(SHAFERT, 2010).
O etanol produzido a partir de sorgo vem suprir uma lacuna na
plantao de cana,onde a colheita acontece entre abril e novembro. A falta de etanol
entre dezembro e maro eleva o preo na entressafra. H diversos tamanhos de
refinarias e a produo pode variar entre 500 litros e 5000 litros por dia (OLIVEIRA,
2012).A Figura 6 mostra o calendrio Bioenergtico com uma proposta de introduo
da cultura Sorgo na matriz energtica Brasileira.
Figura 6. Calendrio Bioenergtico. Fonte: OLIVEIRA, 2012
De perodo curto de crescimento, em no mximo 120 dias o sorgo

plantado e colhido, uma cultura que pode ser semeada ocupando reas de renovao
da terra na plantao de cana, que deve acontecer a cada cinco anos, ou na constituio
de novas lavouras, principalmente em terrenos antes dedicados a pastagem de bovinos,
situao presente no noroeste paulista, no norte paranaense, em Mato Grosso do Sul e
Gois (LIMA, 2012).
Experimentos com a produo de etanol com sorgo, tambm na
entressafra da cana, realizados na Colmbia mostraram bons resultados, outra vantagem
para o sorgo que o caldo extrado de seus colmos se adapta bem ao processo industrial
das usinas de cana onde o etanol produzido, as modificaes nos equipamentos so
mnimas, em ajustes pontuais (OLIVEIRA, 2012).
As mquinas para a colheita usadas na cana tambm servem para

colher o sorgo. Assim, as usinas reduzem o perodo de entressafra, principalmente entre
maro e abril (OLIVEIRA, 2012).
Considerando uma produtividade industrial de 40 litros de etanol
por tonelada de sorgo processado e os valores de produtividade agrcola de 50 toneladas
por hectare, foi observado em reas plantadas com o cultivar BR 505, desenvolvido pela
Embrapa, no Centro Nacional de Pesquisa de Milho e Sorgo, objetivando a produo de
bioetanol, uma produtividade agroindustrial de 2.500 litros de bioetanol por
hectare(REDDY, 2004).
O uso do sorgo sacarino ainda apresenta dificuldades que precisam
ser superadas antes de sua efetiva adoo como matria-prima para obteno de etanol,
como sua reduzida resistncia degradao aps a colheita, a limitada base de
germoplasma, a pouca adaptabilidade ambiental e a baixa resistncia a pragas e doenas
(SIMON, 2009; OLIVEIRA, 2012; LIMA, 2012).
2.2.3 Arroz
O arroz constitudo por sete espcies, Oryza barthii, Oryza
glaberrima,
Oryza
latifolia,
Oryza
longistaminata,
Oryza
punctata,Oryza
rufipogoneOryza sativa; uma das plantas alimentcias mais antigas. Na literatura

chinesa e no vale de Yang Ts Kiang existem restos de arroz de 4000 anos de
antiguidade (ANGLADETTE, 1969).
O arroz considerado o produto de maior importncia econmica
em muitos pases em desenvolvimento, constituindo-se em alimento bsico para cerca
de 2,4 bilhes de pessoas, quando comparado com as demais culturas, se destaca em
segundo lugar em extenso de rea cultivada no mundo, superado apenas pelo trigo
(FAO, 2012).
O arroz a fonte primria de energia e protena para os povos das
naes mais populosas da sia, frica e Amrica Latina, considerado um dos alimentos
com melhor balanceamento nutricional, fornecendo 20% da energia e 15% da
protena per capita necessria ao homem (DOS SANTOS, 2004).
O arroz uma cultura que apresenta ampla adaptabilidade s
diferentes condies de solo e clima, sendo a espcie com maior potencial de aumento
de produo e, possivelmente, de combate fome no mundo (ANGLADETTE, 1969).
Aproximadamente 90% de todo o arroz do mundo cultivado na
sia por mais de 250 milhes de pequenas propriedades, no sistema irrigado, onde a
maioria da populao alimenta-se deste cereal (FAO, 2012).
A produo mundial de arroz deve ter aumento na safra 2012/2013,
chegando a 735 milhes de toneladas base casca, significa um aumento de 2,2% em
relao safra 2011/2012.O crescimento concentrado principalmente nos principais
produtores asiticos, como China, ndia e Indonsia.(FAO, 2012).
A produo brasileira de arroz na safra 2011/2012 foi de 9,9
milhes de toneladas, este volume 4,6% menor em relao produo da safra
passada, de 11,4 milhes de toneladas.(CONAB, 2012).
Duas empresas de agroindstria no Rio Grande do Sul comearam
a produzir etanol do arroz, em escala experimental. A perspectiva criar uma
alternativa para a produo do combustvel e no futuro ter mais uma destinao para o
arroz no consumido como alimento (DIOS, 2012).
O arroz tem uma produtividade para etanol que pode se equivaler
ao rendimento da cana de acar, e superior a do sorgo e do trigo. Com 420 litros de
etanol por tonelada de arroz, contra 400 litros de etanol por tonelada de trigo como
produzido na Rssia, Canad e Inglaterra (DIOS, 2012).
2.2.4. Milho
O milho (Zea mays L.) uma planta que pertence famlia
Gramineae/Poaceae. O carter monico e a sua morfologia caracterstica resultam da
supresso, condensao e multiplicao de vrias partes da anatomia bsica das
gramneas (MAGALHES et al., 2002).
O milho especialmente rico em carboidratos (acares),
essencialmente o amido, o que o caracteriza como alimento energtico. Essa frao
corresponde, em mdia, a 72% dos gros, porm outros importantes nutrientes esto
presentes, como os lipdios e as fibras dietticas, que constituem 4,5 e 2,0% dos gros,
respectivamente (FRANCO, 1992).
O gro de milho utilizado principalmente para consumo humano
e animal, sendo um alimento essencialmente energtico, pois seu principal componente
o amido (FRANCO, 1992).
A cultura do milho encontra-se amplamente disseminada no Brasil.
Isto se deve tanto sua multiplicidade de usos na propriedade rural quanto tradio de
cultivo desse cereal pelos agricultores brasileiros (MAGALHES et al., 2002).
Dentre os cereais cultivados no Brasil, o milho o mais expressivo,

com duas safras, normal e safrinha. No Brasil, a rea total de milho plantada nas duas
safras de 2012 foi de 15.12 mil hectares, com uma produo de 67.79 mil milhes de
toneladas.O maior crescimento se deu no Mato Grosso que acrescentou 732,7 mil
hectares cultivados na safra 2012.(CONAB, 2012). Nos ltimos anos, Mato Grosso tem
exportado grande parte do milho produzido.
O milho passou a ser uma cultura importante para a sobrevivncia
dos produtores de Mato Grosso, o Brasil s consome 74% do milho produzido e no caso
de Mato Grosso apenas 30% do total produzido consumido no mercado interno, os
produtores se veem obrigados a exportar, mas a cada duas sacas enviadas ao porto uma
delas se perde em frete (SILVEIRA,2012).
No municpio de Campos de Jlio, em Mato Grosso comeou a
funcionar uma usina flex,alm da cana, tambm usa o milho para produzir lcool, a
usina produz etanol de cana desde 2006 e comeou os testes com milho em 2011.
Foram investidos quase R$ 20 milhes em novos equipamentos e adaptaes, parte das
mquinas usadas no processamento da cana tambm serve para a moagem e
fermentao do milho (GLOBO, 2012).
Na atualidade existem 95 refinarias nos Estados Unidos, as quais
utilizam o milho como a principal matria-prima para a produo de lcool. Para
cumprir a cota de substituio deste produto, o governo norte-americano estabeleceu
uma meta de produo de combustveis renovveis de 132,5 bilhes de litros at 2017,
dos quais, em grande parte, ser cumprida pelo etanol (BRITO, 2008).
Para cada tonelada de milho produzido em mdia 401 litros de
etanol, 323 kg de CO2 e 323 kg de resduos secos de destilaria, conhecidos como
DDGS (Dried Distillers Grains with Solubles) que esto sendo considerados como
subproduto a ser utilizado na alimentao animal (BRITO, 2008).
2.2.5 Batata-doce
A batata-doce (Ipomoea batatas Lam) originria das Amricas
Central e do Sul, sendo encontrada desde a Pennsula de Yucatan, no Mxico, at a
Colmbia. Relatos de seu uso remontam de mais de dez mil anos, com base em anlise
de batatas secas encontradas em cavernas localizadas no Vale de Chilca Canyon, no
Peru, e em evidncias contidas em escritos arqueolgicos encontradas na regio
ocupada pelos Maias, na Amrica Central (SILVA, 2004).
A batata-doce a 4 hortalia mais consumida no Brasil. uma

cultura tipicamente tropical e subtropical, rstica, de fcil manuteno, boa resistncia
contra a seca e ampla adaptao (CARDOSO, 2005).
Apresenta
custo
de
produo
relativamente
baixo,
com
investimentos mnimos, e de retorno elevado, tambm uma das hortalias com maior
capacidade de produzir energia por unidade de rea e tempo [kcal/ha/dia](CARDOSO,
2005)
A batata-doce cultivada em climas tropicais, subtropicais e em
regies temperadas. Apresenta alta tolerncia a seca e baixo custo de produo
(MONTEIRO et al., 2007).
A batata-doce uma planta de grande importncia econmicosocial, participando do suprimento de calorias, vitaminas e minerais na alimentao
humana, as razes apresentam teor de carboidratos variando entre 25% a 30%, dos quais
98% so facilmente digestveis (AZEVEDO, 2002). Comparada com outras estruturas
vegetais amilceas, a batata-doce possui maior teor de matria seca, carboidratos,
lipdios, clcio e fibras que a batata, mais carboidratos e lipdios que o inhame e mais
protena que a mandioca (CABRAL, 2004).
No Brasil, o Rio Grande do Sul o maior produtor de batata-doce,
com uma produo de 158.629 toneladas, que representa 31,4% da produo nacional
de 505.310 toneladas. Os municpios que possuem maior produo so Mariana
Pimentel, com uma produo de 10.314 toneladas, Pelotas, com 7.187 toneladas, e
Santa Maria, com uma produo de 6.267 toneladas (CABRAL, 2004).
A produtividade mdia brasileira, est em torno de 8,7 t/ha.
Entretanto, produtividade superior a 25 t/ha pode ser facilmente alcanada, desde que a
cultura seja conduzida com tecnologia adequada (CABRAL, 2004).
Desde os anos 70 muitos pesquisadores j buscavam desenvolver
combustvel de batata-doce, em mdia, uma tonelada de batata doce rende at 180 litros
de lcool e 300 quilos de resduo, utilizado para produo de farinha e de rao animal.
O lcool de batata-doce um produto de alto valor agregado destinado fabricao de
bebidas, cosmticos, tintas e remdios, utilizados em vrios pases como a Blgica e o
Japo. (CASTRO & EMYGDIO, 2008). A produo de etanol a partir da batata-doce
tem sido alvo de pesquisas e discusses, em Mato Grosso, o tema foi discutido durante
o Frum Nacional de Batata-Doce Industrial para produo de Etanol e Derivados
BioTGA, 2012.
2.3 Resduos do processamento

Um resduo no , por princpio, algo nocivo, muitos resduos
podem ser transformados em subprodutos ou em matrias-primas para outras linhas de
produo (CEREDA, 2001).
A manipulao correta de um resduo tem grande importncia para
o controle do risco que ele representa, pois um resduo relativamente inofensivo, em
mos inexperientes, pode transformar-se num risco ambiental bem mais grave
(BASTOS, 2007).
O Brasil um dos pases que mais produzem resduos
agroindustriais, devido a sua grande atividade agrcola. Produtores e indstrias da rea
enfrentam o problema de descarte dos resduos gerados, que embora sejam
biodegradveis, necessitam de um tempo mnimo para serem mineralizados
constituindo-se numa fonte de poluentes ambientais (CAMPOS, 2005).
Durante a fabricao do lcool, alem do produto desejado,
aparecem certos produtos secundrios, resultado do processo qumico e tecnolgico,
que dificilmente podem ser evitados, a fim de diminuir a desvantagem deste fato,
procura-se sempre uma utilidade para estes produtos compensando a inconvenincia.
(RASOVSKY, 1973).
Um dos grandes desafios das usinas produtoras de etanol a partir de
cana-de-acar reduzir a quantidade dos subprodutos (bagao e vinhaa) gerados
durante a fabricao de etanol. Algumas destilarias utilizam o bagao como combustvel
durante o processo produtivo, tambm realizada a fermentao contnua, reduzindo a
quantidade de vinhaa em at 75% (BASTOS, 2007).
O aproveitamento mais racional de subprodutos poder favorecer
ainda mais o balano energtico. A disposio no ambiente de resduos gerados em
diversas atividades industriais tem resultado em frequentes relatos de problemas de
poluio ambiental. Tais problemas levaram as autoridades a elaborar medidas efetivas
para minimizar a poluio. Entre essas medidas, podem ser citadas as redues da
quantidade de resduo geradas, utilizao de tecnologias que permitam gerar resduos
menos poluentes, tratamento adequado dos resduos antes da disposio no ambiente e
aproveitamento dos resduos em outras atividades (CEREDA, 2001).
Atualmente, as alternativas de valorizao de resduos atravs do
seu aproveitamento tem sido muito incentivadas, j que podem contribuir para a
reduo da poluio ambiental, bem como permitir a valorizao econmica desses

resduos tornando-o um subproduto e deste modo agregando valor ao processo de agroindustrializao (CAMILI, 2006).
Reduzir custo e o impacto dos resduos no ambiente deve ser a
estratgia a ser intensificada no aproveitamento de materiais. No custo final do processo
fundamental incluir aes que contemplem novos usos, dentro deste contexto, os
resduos deveriam ser vistos e remunerados como subprodutos reduzindo assim o
impacto do preo da matria prima no custo total do produto principal (CAMILI, 2006).
Em virtude da preocupao com a ecologia, no sentido de preservar
o meio ambiente contra o despejo de resduos poluidores, passou-se a motivar o
aproveitamento
dos
resduos
agroindustriais,
constitudos
principalmente
de
carboidratos polimerizados.A energia da planta que permanece aps a fermentao e

destilao do etanol de interesse para o mercado de alimentao animal (MENEZES,
1980).
De forma geral os principais resduos da fabricao de etanol a
partir de materiais vegetais podem ser agrupados em lquidos e slidos, os produtos
gerados,e o volume dos mesmos, dependem em parte da matria-prima utilizada
(SALLAS, 2008).
O principal efluente da destilao de lcool a vinhaa, a qual
apresenta elevada demanda bioqumica de oxignio (DBO), por ser rica em matria
orgnica, caracterizando-se como uma fonte poluente quando descartada diretamente na
gua. Em funo da carga orgnica presente na vinhaa ela tem sido usada como
alternativa parcial para substituio da adubao mineral em lavouras, principalmente
de cana (CRISPIM, 2000; LEONEL et al., 1999).
Apesar de ter consistncia lquida, pela NBR 10.004 da ABNT
(2004) a vinhaa considerada um resduo slido, pois no h soluo tcnica e
econmica para o tratamento convencional eficiente que permita seu lanamento nos
cursos dgua, dentro dos padres exigidos pela legislao (SONEGO, 2012).
Na busca por alternativas para minimizar os efeitos ambientais,
varias medidas esto sendo utilizadas para dar destino aos resduos da produo de
etanol entre elas esto: No caso do lcool a partir de cana pode-se utilizar o vinhoto
gerado no processo para adubao devido ao seu alto teor de potssio, fsforo e
nitrognio. H diversos tipos de aproveitamento do vinhoto para este fim: utilizao
direta o estado natural, utilizao em estado purificado, utilizao em forma de
concentrado, resultado da evaporao e utilizao de vinhoto calcinado (RASOVSKY,

1973); Vinhaas foram usadas como fertilizante agrcola (VIEITES, 1998), herbicida
(FIORETTO, 1985), inseticida (PONTE et al., 1992), nematicida (PONTE; FRANCO,
1981) e substrato para o crescimento de micro-organismos (WOSIACKI, 1994).
O uso de substncias estimulantes, a partir de resduos, tem
mostrado um grande potencial para aumentar a produtividade agrcola, no entanto sua
utilizao ainda no uma prtica rotineira em culturas que no atingiram um alto nvel
tecnolgico (CASTRO, 2008).
Os Materiais lignocelulsicos como talos e bagaos, correspondem
s partes estruturais da planta, geralmente utilizados para recuperao de energia com
cogerao, especificamente para atender s necessidades de energia da fase de
destilao do etanol, embora possa ser vendido o excedente (MENEZES, 1980).
Quando produzido etanol a partir de mandioca, aproximadamente
24% dos aucares redutores obtidos na hidrlise ficam retidos no resduo fibroso aps a
prensagem, foram encontrados valores de incluso de ate 15% em raes para frango de
corte em fase inicio (0 a 20 dias) substituindo parcialmente a fonte energtica, (no caso
milho), no se apresentaram diferenas significativas no desempenho dos animais
quando comparados com uma testemunha comercial (CAMACHO, 2009).
Resduos resultantes dos processos de hidrlise-sacarificao de
mandioca apresentaram boas caractersticas, para aplicao como base de produtos
dietticos ricos em fibras insolveis. O uso da pectinase como enzima complementar
gera um resduo fibroso, com boas qualidades nutricionais e o aproveitamento desse
resduo poderia, sem dvida, colaborar para a viabilizao econmica do uso desta
enzima como complementar no processo (LEONEL, 1999).
Pesquisas feitas com resduos slidos da produo de etanol a partir
de milho usados na alimentao de sunos mostraram que a incluso de 10% de resduos
slidos da produo de etanol a partir de milho em dietas para sunos em terminao
no afetam o desempenho e parmetros de carcaa, alm de contribuir para o melhor
custo de formulao (STEIN et al. 2009).
A maior demanda de alimentos para animais satisfeita numa alta
proporo com gros e diversas fontes proteicas, os pases em desenvolvimento no
contam com suficientes recursos de produo para satisfazer a demanda e tem que
recorrer a importaes cada vez maiores que afetam desfavoravelmente as economias.
Por outra parte os gros continuam sendo vitais para a alimentao humana no terceiro
mundo, o que origina uma competncia na produo para o consumo humano e o

consumo na alimentao animal. Todo o anterior indica a convenincia na busca de
alternativas para satisfazer as necessidades alimentcias (BUITRAGO, 1990).
As limitaes para a transformao dos resduos em produtos para
alimentao animal esto ligadas deficincia e/ou a desequilbrios nas caractersticas
nutricionais do resduo e aos custos com a coleta, o transporte e, geralmente, com o
tratamento necessrio para melhoria de seu valor nutritivo (BUITRAGO, 1990).
Com resduos aquosos estas limitaes so severas, pois o baixo
teor de matria seca pode comprometer o rendimento industrial do produto e impacta
diretamente nos custos de armazenamento e transporte. Por isso, muitas vezes a
destinao dada a este resduo restringe-se a utilizao pela prpria fonte geradora em
suas atividades agrcolas e pecuria ou por agricultores e pecuaristas situados prximos
aos locais de produo (RODRIGUES & RODRIGUES, 2012).
Quando um material sofre alterao em suas propriedades originais
durante o perodo de armazenamento sua possibilidade de uso fica bastante reduzida,
pois no h garantia de qualidade e consequentemente aumento de riscos e malefcios
relativos sua destinao (RODRIGUES & RODRIGUES, 2012).
BELYEA et al., (1989) e GRASSER et al., (1995) consideraram
que a incluso dos subprodutos da agroindstria na alimentao animal uma
alternativa a ser considerada para minimizar os impactos ambientais e tambm ser
economicamente justificvel devido ao preo competitivo desses subprodutos em
relao a alimentos concentrados convencionalmente usados na formulao de raes.
A ideia da utilizao de alimentos no convencionais para animais
ganha importncia, principalmente com o objetivo de atender s dificuldades de
pequenos produtores, para os quais muitas vezes o custo de alimentao dos animais
um impedimento para a criao em condies satisfatrias (RIBEIRO et al., 2007).
A possibilidade de uso dos resduos e a agregao de valor as suas
respectivas cadeias produtivas, pode ser um fator determinante para a viabilidade
econmica da atividade. Portanto, aspectos como quantidade de resduo gerado,
composio, tcnicas de armazenamento, transporte e estabilidade durante o
armazenamento devem ser estudadas para orientar a aplicabilidade e desenvolvimento
de processos tecnolgicos para a destinao adequada do mesmo (RODRIGUES &
RODRIGUES, 2012).
2.4. Experimentao Animal

Pinturas de agrupamentos neolticos, assim como pequenas
esculturas encontradas na sia e na Europa, e at mesmo restos de ossos em runas
Incas, revelam deformidades que permitem fazer certos diagnsticos e mostram
intervenes cirrgicas teraputicas. A observao de fenmenos biolgicos e as
tentativas de cura provavelmente devem ter ocorrido desde os agrupamentos
homindeos primitivos. Entretanto, s a inveno da escrita possibilitou um maior
conhecimento sobre as descobertas dos povos antigos em relao aos fenmenos do
organismo saudvel ou enfermo (LAPCHICK et al., 2009).
As primeiras menes escritas feitas a doenas e seus tratamentos
encontrasse nos famosos papiros de Ebers e de Smith. O primeiro descreve numerosas
medidas teraputicas, o segundo, contm a primeira citao ao sistema nervoso
(MATTARAIA, 2007).
Aristteles, no sculo 2 a.C., estudou a anatomia de diversos
animais, Herfilo durante o perodo alexandrino, dissecava rotineiramente animais,
chegando errnea concluso de que as artrias s continham ar, pelo fato de realizar
seus estudos em animais mortos. Galeno, no sculo 2 d.C., dissecou centenas de
animais de vrias espcies e extrapolou suas descobertas para o homem, sem
aparentemente jamais ter dissecado cadveres humanos (TIMO-IARIA, 1992)
Durante os sculos 18 e 19 a experimentao animal progrediu
lentamente de uma prtica relativamente incomum, at alcanar um enfoque cientfico.
medida que os conhecimentos cientficos avanaram, as metodologias tambm se
modificaram, adaptando-se aos novos desafios. absolutamente lcito, do ponto de
vista de metodologia cientifica, fazer uso de determinadas espcies para o estudo de
fenmenos biolgicos e transferir os resultados obtidos para outras espcies, inclusive
para espcie humana (MATTARAIA, 2007).
No Brasil, os comits de tica comearam a ser constitudos na
dcada de 1990, para avaliar condies nas quais os animais so submetidos pesquisa,
os comits surgiram a partir do interesse das instituies de pesquisa e universidades. O
uso de animais de laboratrio para fins cientficos e didticos est embasado na Lei N
11.794, de 8 de outubro de 2008, que entrou em vigor na data de sua publicao
(LAPCHICK et al., 2009)
2.4.1 Condies ambientais

Alguns fatores ambientais devem ser controlados para que os
animais se sintam confortveis e devem ser mantidos constantes para evitar que sofram
o desgaste de adaptar-se fisiologicamente a estas variaes.
Ratos
camundongos
no
desenvolvem
mecanismos
termorreguladores antes de 3-4 semanas e isto muito importante, pois nesses animais
leva alguns dias para que o pelo cresa. No se do bem em altas temperaturas, uma vez
que no suam. Para manter a temperatura, eles produzem ou perdem calor, o que
acarreta grande dispndio de energia e esta demanda de adaptao pode extrapolar a
capacidade metablica do animal (LAPCHICK et al., 2009).
Uma diminuio da temperatura ambiente abaixo da capacidade do
organismo para regular a temperatura do corpo aumenta a suscetibilidade dos animais a
infeces (POOLE, 1999). A temperatura ambiente para roedores (22 C 2 C), para
coelhos (18 C 2 C) e para sunos adultos (16 C 2 C) deve ser mantida dentro dos
limites (HEINE, 1998).
As condies climticas dentro de uma sala de experimentao
devem ser controladas por ajustes automticos do equipamento de condicionamento,
variaes na temperatura ambiente influenciam os processos metablicos.Animais em
estresse trmico alteram a ingesto de alimentos, de gua, o peso, a frequncia
respiratria e a produo. O estresse trmico tambm ocasiona alteraes de
comportamento que podem levar a erros de avaliao nas pesquisas (LAPCHICK et al.,
2009).
O biotrio de experimentao deve ter um ambiente padronizado
no que se refere temperatura, umidade, iluminao, qualidade do ar, atravs de
filtrao eficiente, e 10-15 trocas de ar por hora, de modo a no permitir a recirculao
(POOLE, 1999).
O fator umidade relevante na manuteno da termorregulao e
na transmisso de doenas, algumas linhagens so mais suscetveis que outras. A baixa
umidade realtiva aumenta a atividade dos animais (LAPCHICK et al., 2009).
A gua conduz melhor o calor que o ar. A condutividade do calor
pelo ar aumenta com o contedo de vapor presente. Variaes de temperatura e umidade
ambientais podem levar a alteraes patolgicas nas vias respiratrias, alteraes na
pele e infeces. Nos ratos, umidade relativa abaixo de 40% desencadeia o quadro de
ring disease, constries na cauda, restringindo a circulao sangunea, a parte distal
torna-se edematosa podendo necrosar. A umidade recomendada nas salas deve ficar em
torno de 45% 15% (HEINE, 1998).
A luz estimula, via nervo ptico, o sistema hipotlamo-pituitrio,
levando produo e secreo de hormnios necessrios ao processo regulatrio do
organismo. Contribui tambm para a regulao do relgio interno, influenciado pela
rotao da Terra. Inmeras funes corporais e atividades do organismo ocorrem de
forma cronologicamente dependente, isto , em ritmo circadiano. Muitos resultados
experimentais so influenciados pelos ritmos circadianos (HEINE, 1998).
A falta de ventilao adequada, aliada alta densidade demogrfica
e falta de higienizao das gaiolas, leva ao aumento das concentraes de amnia no
ar respirado causando irritao no epitlio de revestimento das vias areas superiores e
aumento da suscetibilidade a doenas infecciosas. Tambm o aumento da concentrao
de dixido de carbono superior a 8% resulta em inconscincia e morte (POOLE, 1999).
2.4.2. Rato
O rato de laboratrio, ou rato Norway, a forma domesticada da
espcie Rattus novergicus. Embora o gnero Rattus possua cerca de 300 espcies, a
outra espcie mais conhecida Rattus rattus, ou rato preto. O gnero pertence ordem
Rodentia e Famlia Muridade (LAPCHICK et al., 2009).
No sculo 21, o papel do rato se transformou de carregador de
doenas infecciosas em ferramenta indispensvel na medicina experimental e
desenvolvimento de drogas. Exemplos atuais do uso do rato na pesquisa mdica humana
incluem: cirurgia, transplante, diabetes, distrbios psiquitricos incluindo interveno
comportamental e vcio, regenerao neural, cura de ferimentos e de ossos, enjoo
espacial, e doenas cardiovasculares. No desenvolvimento de drogas o rato usado
normalmente para demonstrar eficcia teraputica e para descobrir atoxicidade de
compostos teraputicos antes dos testes clnicos em humanos (MATTARAIA, 2007).
Diversas caractersticas tornaram o rato um modelo atraente para
pesquisa, entre elas seu pequeno porte, ciclo biolgico curto e baixo custo de
manuteno. A similaridade gentica entre este roedor e os seres humanos
aproximadamente 80% (DESSEN, 2009).
O rato um mamfero roedor, nasce sem pelos, de olhos fechados,
com o conduto auditivo fechado, sem dentes, pesando em mdia cinco gramas, corpo
fusiforme, cauda longa, ausncia de glndulas sudorparas, receptores tteis bem

desenvolvidos (cabea, vibrissas, patas e cauda) e cinco dedos em cada pata. Apresenta
longas vibrissas, aproximadamente quinze de cada lado, implantadas em profundidade e
solidrias, com receptores mecnicos, constituindo um dos principais sentidos do rato.
So animais de hbito noturno. Durante as duas primeiras semanas de vida do filhote, o
sistema nervoso est em processo de maturao (SANTOS, 2010).
O instituto Wistar, fundado em 1982, o mais antigo instituto de

pesquisa nos Estados Unidos, e foi o local onde estabeleceram ratos de laboratrio
como um importante animal. Henry Donaldson e seu grupo trabalharam para padronizar
o rato albino, a fim de se realizar estudos reprodutveis sobre o crescimento e
desenvolvimento do sistema nervoso. O instituto Wistar forneceu o rato Wistar para
outros laboratrios at 1960, quando as matrizes reprodutoras e todos os direitos foram
vendidos a uma empresa comercial (LAPCHICK et al., 2009).
A linhagem Wistar uma das mais utilizadas mundialmente em
pesquisas de laboratrio e sua importncia deve-se ao fato de o Dr. Donaldson e sua
equipe terem realizado inmeras pesquisas para obter dados fundamentais,
principalmente curvas de crescimento do animal, do crnio, do esqueleto e de vrios
rgos individualmente (LAPCHICK et al., 2009).
Figura 7. Rato Wistar.
Como apresentado na Figura 7, os ratos Wistar so caracterizados

pelas orelhas alongadas, cabea grande e comprimento da cauda sempre menor que o
comprimento corporal. Ratos Wistar so considerados animais dceis, de fcil
manipulao e tm boa capacidade de aprendizado (SANTOS, 2010).
A ontogenia do rato Wistar ocorre aproximadamente da seguinte
forma: Abertura do pavilho auditivo de 2 a 4 dias de vida, a penugem aparece por
volta de 5 a 6 dias e tm o corpo coberto de pelos aproximadamente aos 9 dias de vida,

erupo dos incisivos superiores de 6 a 12 dias de vida, abertura do conduto auditivo e
dos olhos de 10 a 14 dias de vida, ingesto de alimentos slidos de 11 a 13 dias de vida,
a puberdade ocorre por volta de 45 a 55 dias de vida, a expectativa de vida em biotrio
de 24 a 36 meses (LEVINE, 2001).
Uma caracterstica peculiar dos roedores, incluindo os ratos, a
ausncia dos caninos e a presena de incisivos bem desenvolvidos. Os ratos so
monofiodnticos, significando que tm uma s dentio. O esmalte dos incisivos dos
roedores contm ferro, que confere a dureza e lhes d uma colorao amarelada. Esses
incisivos crescem durante toda a vida e devem ser gastos, com isso os ratos tm o hbito
de roer (LAPCHICK et al., 2009).
O rato no possui amdalas, tampouco receptores para o paladar da
gua. O esfago do rato inteiramente coberto com epitlio queratinizado. O estmago
contm uma poro glandular e outra no glandular, separadas por um sulco limitante.
O esfago entra pela menor curvatura do estmago atravs de uma prega do sulco
limitante e esta caracterstica anatmica impede que o rato vomite, o que o torna um
animal seletivo quanto alimentao (LAPCHICK et al., 2009).
O intestino delgado do rato composto pelo duodeno (10 cm),
jejuno (100 cm) e leo (3 cm). O ceco proeminente ocupa grande parte de cavidade
abdominal. O rato possui um fgado com quatro lobos e no possui vescula biliar. O
pncreas um rgo difuso, que se estende da ala duodenal para o epplon
gastrointestinal. Pode ser diferenciado do tecido adiposo por sua maior consistncia
(LAPCHICK et al., 2009).
Os pulmes dos ratos so imaturos no nascimento e desprovidos de
alvolos, dutos alveolares e bronquolos respiratrios. O remodelamento ocorre de
quatro a sete dias aps o nascimento, com o surgimento dos bronquolos respiratrios
aos dez dias aps o nascimento (LAPCHICK et al., 2009).
As glndulas lacrimais (Harderian), localizadas atrs de cada olho,
secretam porfirina (avermelhada), que pode ser observada nos cantos dos olhos ou na
parte externa das narinas quando o rato est doente ou estressado. As patas dianteiras
podem tambm ficar manchadas quando o animal tenta se limpar. Essas secrees
podem ser confundidas com sangue, mas a porfirina fluoresce sob a luz ultravioleta
diferente do sangue (LAPCHICK et al., 2009).
Os ratos como outros roedores, no possuem muitos mecanismos
fisiolgicos para evitar o calor. Eles no suam, no possuem glndulas sudorparas; o

calor dissipado atravs da vasodilatao na cauda e um aumento da salivao de gua
quando a temperatura aumenta. A taxa respiratria aumentada para regular a
temperatura do corpo (LAPCHICK et al., 2009). A Tabela 3 ilustra os parmetros
fisiolgicos de ratos.
Tabela 3. Parmetros Fisiolgicos de ratos.
Expectativa de vida
2,5 a 3,5 anos
Temperatura corporal
36 37,5 C
Peso do macho adulto
400-500 g
Peso da fmea adulta
250-300 g
Produo de urina (24 horas)
5-6 mL
Produo de fezes (24 horas)
10-15 g
pH da urina
7,3 8,5
Fonte: LAPCHICK et al., 2009
2.4.2.1 Requerimentos Nutricionais

O valor energtico das dietas funo de sua digestibilidade e
energia qumica e geralmente descrito em termos de energia metabolizvel (ME),
medida biologicamente. A ME dos carboidratos 17 kJ/g e das gorduras, 38 kJ/g. Os
aminocidos produzem aproximadamente a mesma quantidade de ME que o
carboidrato, mas como as protenas so os mais caros ingredientes de uma dieta, seu uso
especificamente como fonte de energia torna-se economicamente invivel. Animais em
rpido crescimento devem consumir alimento suficiente para fornecer cerca de quatro
vezes mais energia do que a necessidade para o metabolismo basal, e varia com a idade
entre espcies (LAPCHIK et al., 2009).
Protenas so molculas de estrutura complexa que constituem 50%
do peso celular e tm importantes funes na manuteno dos fenmenos vitais, na
formao do tecido, da musculatura e para as reaes bioqumicas do organismo. A
qualidade nutricional das protenas determinada pelo tipo e pela quantidade dos seus
aminocidos constituintes (LAPCHIK et al., 2009).
Gordura da dieta fornece cidos graxos essenciais (AGE) que so
requeridos para sntese de lipdeos no tecido das membranas celulares. As gorduras so

tambm uma fonte significativa de calorias (9cal/g), melhoram a palatabilidade dos
alimentos e so necessrias para absoro normal e utilizao de vitaminas
lipossolveis. Os animais estocam lipdeos nas clulas do tecido adiposo (LAPCHIK et
al., 2009).
As vitaminas so compostos qumicos puros requeridos em
pequenas quantidades para o crescimento, manuteno, reproduo e lactao. So
componentes de certas enzimas e sistemas hormonais essenciais para os processos
normais da vida. So classificados com base na sua solubilidade como lipossolveis,
que se dissolvem em gorduras (K, A, D, E) e hidrossolveis, que se dissolvem em gua
(complexo B, C e Biotina) (LAPCHIK et al., 2009).
Os minerais tm uma gama de funes, como funes estruturais
do clcio e fsforo no osso, de efeitos osmticos e inicos de sdio e potssio, e como
parte integral de enzima (LAPCHIK et al., 2009).
O animal esta constantemente perdendo gua na urina, transpirao
e expirao. A gua uma importante substncia, no sendo um nutriente, mas vital no
ambiente interno do animal para mover substncias pelo organismo e para permitir a
maioria das reaes bioqumicas que ocorrem no organismo e que so processos da
vida. A necessidade vital de gua deve ser satisfeita. Os animais de laboratrio devem
ter acesso ad libitum a gua fresca, potvel e no contaminada (LAPCHIK et al., 2009).
2.4.2.2Eutansia
O termo Eutansia vem do grego, eutansia, que vem sendo
entendida, desde a antiguidade, em seu sentido literal: boa morte (com bondade, com
benevolncia, felizmente). O termo foi proposto por Francis Bacon, em 1693, em sua
obra Historia vitae et mortis, como sendo o tratamento adequado s doenas
incurveis .Existem dois tipos de mtodos aceitveis de eutansia, os fsicos onde se
encontram: concusso, deslocamento cervical, decapitao e irradiao por micro-ondas
e os qumicos onde se encontram anestsicos, agentes inalatrios e dixido de carbono.
Em concentraes superiores a 60%, o dixido de carbono age como um agente
anestsico e causa rpida perda de conscincia, devido ao efeito narctico da ingesto
elevada sobre o crebro, provocando hipxia (LAPCHIK et al., 2009).
2.4.3. Anlises Laboratoriais

2.4.3.1 Histologia
A histologia (do grego: hydton = tecido + logos = estudos) a
cincia que estuda os tecidos biolgicos, sua formao (origem), estrutura (tipos
diferenciados de clulas) e funcionamento.A tcnica histolgica visa preparao dos
tecidos destinados ao estudo microscopia de luz. O exame ao microscpio feito
geralmente por luz transmitida, o que significa que a luz deve atravessar o objeto a ser
examinado. Assim, necessria a obteno de fragmentos dos tecidos que sero
coletados em lminas muito finas e transparentes (CAPUTO, 2008).
Os passos para a obteno de um preparado histolgico
permanente, denominado lmina histolgica resumidamente so: A colheita do material
ou obteno da pea, por bipsia ou necropsia (GRIMALDI FILHO, 1981).
A fixao que visa impedir a destruio das clulas por suas
prprias enzimas (autlise), ou bactrias. Este tratamento feito imediatamente aps a
retirada do material (bipsia), ou at antes (fixao por perfuso do animal). A fixao
visa ainda endurecer os tecidos, tornando-os mais resistentes e favorveis s etapas
subsequentes da tcnica histolgica. A fixao pode ser feita por processos fsicos ou
qumicos. A fixao qumica, mais usada em Histologia, feita por fixadores que
podem ser simples ou compostos. Como exemplo de fixador simples temos o formol e,
de composto, um exemplo o lquido de Bouin (uma mistura de formol, cido pcrico e
cido actico)(GRIMALDI FILHO, 1981).
A desidratao que visa retirar a gua dos tecidos, a fim de permitir
a impregnao da pea com parafina. Para isto, a pea submetida a banhos sucessivos
em alcois de teor crescente (ex.: lcool a 70%, 80%, 90% e 100%)(GRIMALDI
FILHO, 1981).
A impregnao pela parafina fundida com a finalidade de permitir a
obteno de cortes suficientemente finos para serem observados ao microscpio. Para
isso os tecidos devem ser submetidos a banhos de parafina a 60C, no interior da estufa.
Em estado lquido, a parafina penetra nos tecidos, dando-lhes, depois de solidificada,
certa dureza (GRIMALDI FILHO, 1981).
A Incluso, a passagem da pea que estava na estufa para um
recipiente retangular (forma) contendo parafina fundida que, depois de solidificada
temperatura ambiente, d origem ao chamado bloco de parafina. A Microtomia a
etapa em que se obtm delgadas fatias de peas includas na parafina, atravs de um
aparelho chamado micrtomo, que possui navalha de ao. A espessura dos cortes
geralmente varia de 5 a 10 um (micrmetros) (GRIMALDI FILHO, 1981).
Na Extenso, os cortes provenientes da microtomia so
enrugados. Para desfazer estas rugas, so esticados num banho de gua e gelatina a
58C, e pescados com uma lmina. Leva-se ento, estufa a 37C, por 2 horas, para
que se d a colagem do corte lmina, pela coagulao da gelatina contida na gua
quente (GRIMALDI FILHO, 1981).
A Colorao tem a finalidade de dar contraste aos componentes dos
tecidos, tornando-os visveis e destacados uns dos outros. Para realiz-la, so
observados trs itens:
a) Eliminao da parafina - por meio de banhos sucessivos em xilol, benzol ou toluol.
b) Hidratao - executada quando o corante utilizado solvel em gua. Deve ser
gradativa, com alcois de teor decrescente, para evitar o rompimento dos tecidos.
c) Colorao - os corantes so compostos qumicos com determinados radicais cidos
ou bsicos que possuem cor, e apresentam afinidade de combinao com estruturas
bsicas ou cidas dos tecidos (GRIMALDI FILHO, 1981).
Rotineiramente, usa-se hematoxilina, corante bsico, que se liga
aos radicais cidos dos tecidos, e eosina, corante cido que tem afinidade por radicais
bsicos dos tecidos. Os componentes que se combinam com corantes cidos so
chamados acidfilos e os componentes que se combinam com corantes bsicos so
chamados basfilos (GRIMALDI FILHO, 1981).
A desidratao visa retirar a gua, quando os corantes utilizados
forem solues aquosas, a fim de permitir perfeita visualizao dos tecidos, pois a gua
possui ndice de refrao diferente do vidro, e ainda prevenir a difuso dos corantes.
Para isto usam-se banhos em alcois de teor crescente (GRIMALDI FILHO, 1981).
A diafanizao feita com xilol, a fim de tornar os cortes
perfeitamente transparentes para posteriormente fazer a montagem que a etapa final da
tcnica histolgica, e consiste na colagem da lamnula sobre o corte, com blsamo do
Canad, que solvel em xilol e insolvel em gua. A lamnula impede que haja
hidratao do corte pela umidade do ar ambiente, permitindo ento que estas lminas se
mantenham estveis por tempo indefinido. Aps a montagem, levam-se as lminas
estufa, para secagem do blsamo do Canad (GRIMALDI FILHO, 1981).
2.4.3.2 Perfil Sanguneo

A composio bioqumica do plasma sanguneo reflete de modo
fiel a situao metablica dos tecidos animais, de forma a poder avaliar leses teciduais,
transtornos no funcionamento de rgos, adaptao do animal diante de desafios
nutricionais e fisiolgicos e desequilbrios metablicos especficos ou de origem
nutricional (NYBLOM. et al., 2006)
As enzimas so catalisadores proteicos responsveis pela maioria
das reaes qumicas do organismo, encontradas em todos os tecidos, muitos processos
patolgicos ocasionam alteraes na permeabilidade das membranas ou mesmo morte
celular, resultando na liberao de enzimas intracelulares no plasma. Estas enzimas so
depuradas no plasma a velocidades variveis que dependem da estabilidade da enzima e
de sua captao pelo sistema retculo endotelial. Poucas so as enzimas especficas de
um tecido ou rgo, porm, a proporo entre as diferentes enzimas varia de tecido para
tecido. Este fato, combinado com o estudo da cintica de aparecimento e
desaparecimento de enzimas particulares no plasma, permite que o diagnstico de uma
patologia especfica possa ser estabelecido (MINICIS, 2007).
A alanina aminotransferase (ALT) uma enzima encontrada
predominantemente no fgado, em concentrao moderada nos rins e em menores
quantidades no corao e nos msculos esquelticos. Na clula heptica, a ALT
localiza-se no citoplasma (90%) e na mitocndria (10%). Qualquer leso tissular ou
doena afetando o parnquima heptico liberar uma maior quantidade da enzima para a
corrente sangunea, elevando os nveis sricos da ALT (NYBLOM. et al., 2006).
Em geral, as causas mais comuns de elevao dos valores de ALT
no sangue ocorrem por disfuno heptica. Desta maneira, a ALT alm de ser sensvel
tambm bastante especfica para o diagnstico de doena hepatocelular; uma leso
tecidual nos rins, corao e nos msculos esquelticos tambm provoca uma maior
liberao de ALT para a corrente sangunea, elevando seus nveis sricos (NYBLOM. et
al., 2006)
A relao AST/ALT (ndice DeRitis) tem sido empregada algumas vezes
para auxiliar no diagnstico diferencial das hepatopatias. Na hepatite virtica aguda, a
relao AST/ALT sempre menor que 1, enquanto que nas outras doenas
hepatocelulares (cirrose, hepatites crnicas, etc) sempre > 1. Os valores elevados de
ALT so mais comumente verificados nas seguintes patologias: hepatites, cirrose,
necrose heptica, colestase,isquemia heptica, tumor heptico, drogas hepatotxicas,
ictercia obstrutiva, miosite e pancreatite (KOOMAN, 2009).

A funo renal pode ser avaliada indiretamente por alteraes nas
concentraes plasmticas de ureia, que quantitativamente o maior produto do
metabolismo proteico, creatinina que um produto da quebra de creatina e fosfocreatina
e cidos orgnicos nitrogenados envolvidos no metabolismo energtico das clulas
musculares esquelticas (KOOMAN, 2009).
A creatinina um composto orgnico nitrogenado no-protico
formado a partir da desidratao da creatina. A interconverso de fosfocreatina e
creatina uma caracterstica particular do processo metablico da contrao muscular,
uma parte da creatina livre no msculo no participa da reao e convertida
espontaneamente em creatinina. A creatinina avalia o ritmo de filtrao glomerular,
aumenta sua concentrao no sangue medida que reduz a taxa de filtrao renal, em
funo desta caracterstica possvel analisar este produto presente no sangue para
identificar alteraes (BURMEISTER, 2007)
O metabolismo de protenas libera amnia que convertida em
ureia pelo fgado. Os glicocorticoides tm um efeito antianablico e os hormnios
tireoidianos tm uma ao catablica sobre o metabolismo das protenas. Portanto,
ambos atuam aumentando a taxa de ureia sangunea. J os andrgenos e o hormnio do
crescimento tm uma ao anablica sobre o metabolismo proteico, diminuindo assim a
sntese da ureia. A leso renal provoca uma reteno de substncias txicas como a
ureia atravs de distrbios da filtrao, reabsoro, secreo e excreo. Na leso
heptica, haver uma diminuio da converso de amnia em ureia causando uma
hiperamonemia. Mesmo a ureia no tendo boa especificidade para diagnosticar
mudanas da funo renal geral, ela mais sensvel a alteraes primrias das condies
renais, por isso um marcador que tem forte importncia em casos que envolvam esta
condio (NYBLOM. et al., 2006).
3. MATERIAL E MTODOS
A primeira parte do estudo adaptou metodologias para obteno de
lcool a partir de cinco matrias-primas amilceas: Mandioca, milho, arroz, batata doce
e sorgo em uma planta piloto de produo de bioetanol.
Foram produzidos resduos slidos formando amostras separadas,
uma para cada matria-prima empregada. Posteriormente estes resduos foram
caracterizados fisico-quimicamente.
Foram formuladas raes para ratos Wistar com incluses de 10%
dos resduos caracterizados e as raes foram fabricadas e oferecidas a animais que
permaneceram por 21 dias alimentados a base destas formulaes.
Os experimentos da fase de produo dos resduos e as anlises
laboratoriais foram realizados nos laboratrios do Centro de Razes e Amidos Tropicais
CERAT/UNESP. A fabricao das raes e a avaliao biolgica com os animais foram
realizadas no Biotrio da Patologia nas instalaes da FMB/UNESP Botucatu.
3.1 Matria-Prima:
As matrias-primas utilizadas para a produo de etanol foram:
Razes de mandioca variedade Fcula Branca coletadas no Campo

Experimental do CERAT/UNESP em Botucatu.
Sorgo obtido no comercio de Botucatu - SP
Quirera de arroz obtida no comercio de Botucatu - SP
Milho em forma de fub, da Yoki Alimentos S.A.
Batata doce obtida no comercio de Botucatu - SP
As anlises centesimais das amostras de mandioca, sorgo, arroz,

milho e batata doce foram feitas seguindo a metodologia da AOAC (1990), SOMOGY,
(1945) e NELSON (1944). As anlises foram realizadas em triplicatas para cada
amostra.
3.2 Processamento
A Figura 9 apresenta o fluxograma para obteno dos resduos
slidos estudados.
Matria-prima
Limpeza
gua
gua
gua
Alfa-amilase
TERMAMYL
Amiloglucosidase
AMG
Saccharomyces
cerevisiae
Preparo de Polpa
- 20% de amido-
90 C
Liquefao
-Mtodo enzimtico-
1 mL.kg -1 Substrato
2 horas - pH: 6,0
60 C
Sacarificao
-Mtodo enzimtico-
Fermentao
-Levedura-
1 mL.kg-1 Substrato
8 horas - pH: 4,5
28 C
Separao
Hidrolisado
Calor
Secagem
Resduo solido
Figura 9. Fluxograma para produo dos resduos slidos de matrias-primas
amilceas na produo de lcool.

Cada matria-prima foi processada separadamente seguindo o
processamento ilustrado na Figura 9. Quantitativamente a preparao das polpas foram:
Mandioca: As razes foram lavadas com gua potvel para retirar terra e outras
impurezas provenientes do campo, posteriormente foram trituradas e misturadas
com gua at formar uma polpa homognea com 20% de amido, para isto foram
usados 3840 g de razes e 8160 g de gua destilada.
Sorgo:Os gros foram lavados com gua potvel para retirar terra e outras
impurezas provenientes do campo, posteriormente foram modos e misturados com
gua at formar uma polpa homognea com 20% de amido,para isto foram usados
3300 g de gros modos e 8700 g de gua destilada.
Arroz:Os gros foram lavados com gua potvel para retirar terra e outras
impurezas provenientes do campo, posteriormente foram modos e misturados com
gua at formar uma polpa homognea com 20% de amido, para isto foram usados
2480 g de gros modos e 9520 g de gua destilada.
Milho:Foi utilizado em forma de fub que foi misturado com gua at formar uma
polpa homognea com 20% de amido, para isto foram usados 3140 g de fub e
8860 g de gua destilada.
Batata doce: Os tubrculos foram lavados com gua potvel para retirar terra e
outras impurezas provenientes do campo, se formaram chips que depois de secos
em estufa a 60 grados centigrados por dois dias foram triturados e misturados com
gua at formar uma polpa homognea com 20% de amido, para isto foram usados
5280 g de farinha de batata-doce e 6720 g de gua destilada.
Posterior obteno da polpa, deu inicio liquefao, colocando
a polpa em contato com enzima alfa-amilase, foi usada a enzima comercialmente
conhecida como TERMAMYL produzida pela empresa NOVOZYMES. A
TERMAMYL usada na produo de etanol para quebrar o amido produzindo
cadeias curtas, fragmentando polissacardeos em cadeias menores, as dextrinas.
Especificamente catalisa a hidrlise de ligaes glicosdicas -D (14) e -D (14).
Foram seguidas as especificaes do fabricante, onde a reao do meio foi mantida a pH
6,0; com temperatura de 90C e com agitao constante de 100 RPM.min-1.

Aps duas horas, foi adicionada a enzima amiloglicosidase
conhecida comercialmente como AMG, produzida e comercializada pela empresa
NOVOZYMES. Para dar inicio a esta etapa resfriou-se o meio a 60C, baixou-se o pH a
4,5 com HCL (cido clordrico) e todo o conjunto foi mantido sob agitao constante de
100 RPM.min-1 por 8 horas aproximadamente.
Depois de finalizada a etapa de hidrolise, iniciou-se a fermentao
com o preparo do inculo para multiplicar a levedura. Foram usadas aproximadamente
240 gramas da levedura desidratada Sacharomyces cerevisiae, cepa Y-904 fornecida
pela empresa AB Brasil Indstria e Comrcio de Alimentos Ltda.
No mesmo reator agitado onde foi completado o processo de
hidrolise foi adicionada gua potvel para fornecer levedura um meio com 18% de
ART. O pH foi ajustado para 4.5.
A levedura foi adicionada e o mosto foi fermentado por 24 horas
at a observao da diminuio e/ou desaparecimento da produo de gs, indicando o
trmino do processo fermentativo.
A temperatura inicial do mosto foi de 25 a 28C, atingindo o valor
mximo de 33C ao final do processo fermentativo.
Finalizado o processo fermentativo a suspenso foi filtrada em tela
filtrante de filtro a vcuo marca MF DIMAN-ME, onde o lquido foi separado da parte
slida (resduos). Posteriormente os resduos produzidos foram dispostos em bandejas
plsticas e deixados em estufa com circulao de ar a 70C por 48 horas.
Foram feitas analises centesimais para a caracterizao fsicoqumica dos resduos seguindo a metodologia da AOAC (1990) e SOMOGY, (1945).
As anlises foram realizadas em triplicatas para cada amostra.
3.3. Experimentao Animal
Foram utilizados cinquenta e seis (56) ratos Wistar machos, com 21

dias de idade. Os ratos nasceram no Biotrio Central da Administrao Geral do
Campus e foram mantidos no Biotrio do Laboratrio Experimental da Patologia/FMB.
No presente estudo, os animais foram distribudos aleatoriamente
em sete grupos de oito animais. Cada grupo foi alimentado com um tipo de rao.
As raes usadas nos experimentos foram elaboradas com o
Software SUPERCRAC - Clculo de rao de custo mnimo - TD Software. De acordo
com ANDRIGUETO et al., 1990, as exigncias da rao para rato so descritas na
Tabela 4.
Tabela 4. Requerimentos nutricionais de ratos Wistar.
Nveis e Garantia
Umidade (max)
Protena bruta (min)
Extrato etreo (min)
Fibra bruta (max)
Minerais
Clcio (min)
Clcio (max)
Fforo (min)
Vitaminas
A (min)
D3 (min)
E (min)
K3 (min)
cido folico (min)
Biotina (min)
Colina (min)
Niacina (min)
cido pantotenico (min)
B1 (min)
B6 (min)
B12 (min)
Sodio (min)
Ferro (min)
Cobre (min)
Zinco (min)
Magans (min)
Iodo (min)
Selnio (min)
Cobalto (min)
Magnsio (min)
Lisina (min)
Metionina (min)
Fonte: ANDRIGUETO et al, 1990
130,00 g.kg-1
230,00 g.kg-1
40,00 g.kg-1
50,00 g.kg-1
12,00 g.kg-1
13,00 g.kg-1
8.500,00 mg.kg-1
25500,00 UI.kg-1
4000,00 UI.kg-1
82,00 UI.kg-1
6,40 mg.kg-1
13,00 mg.kg-1
0,16 mg.kg-1
1800,00 mg.kg-1
219,00 mg.kg-1
90,00 mg.kg-1
11,00 mg.kg-1
11,00 mg.kg-1
40,00 mg.kg-1
2700,00 mg.kg-1
180,00 mg.kg-1
30,00 mg.kg-1
110,00 mg.kg-1
110,00 mg.kg-1
1,00 mg.kg-1
0,20 mg.kg-1
2,00 mg.kg-1
500,00 mg.kg-1
12,50 mg.kg-1
3500,00 mg.kg-1
As raes foram balanceadas com farelo de soja, milho, farelo de

trigo, leo de soja, fosfato biclcico, sal, calcrio, vitaminas, minerais, DL metionina e
os resduos slidos gerados no processo de fabricao de lcool. Estes foram includos
separadamente utilizando-se 1 resduo para cada tratamento individual nas formulaes
em 10% do total de cada, aportando principalmente energia as raes.
Foram produzidas 6 raes, sendo 5 com inclusso de resduo e 1
testemunha, onde o residuo foi substituido por fuba de milho. A Figura 9 ilustra as
operaes realizadas na fabricao das raes. Foi usada a rao comercial Prescence
Ratos e Camundongos como testemunha comercial.
Ingredientes
gua
Pesagem
Mistura
Formao de Pellet
Ar
Secagem
Rao
Figura 9. Operaes para fabricao de raes.
Os equipamentos usados para a fabricao das raes foram:

Misturador tipo paleta totalmente em ao inox, com capacidade para 10 quilos,
peletizadora de disco e secador com fluxo de ar.
Cada formulao foi misturada por aproximadamente vinte
minutos, foram adicionados at dois litros de gua em cada formulao para facilitar a
formao dos pellets na maquina peletizadora de disco, finalmente foram colocados (os
pellets) na secadora com fluxo de ar por vinte quatro horas para eliminar a umidade
resultante das operaes anteriores. As raes foram armazenadas em sacos plasticos e
guardadas em freezer imediatamente depois de retiradas do secador para sua melhor
conservao.
Os ratos foram colocados em caixas de polipropileno com tampa de

ao inox na forma de grade e forradas com maravalha, sendo a troca da maravalha trs
vezes por semana. Cada caixa continha quatro animais e cada grupo duas caixas,
totalizando oito ratos por grupo.
Como mostra a Tabela 5,
o grupo 1 foi formado pelas caixas 1 e 2, abrigou 8 animais referentes ao grupo

chamado Testemunha onde a rao avaliada foi a que tinha incluso de 10% de
fub de milho;

chamado Mandioca onde a rao avaliada foi a que tinha incluso de 10% de
resduos slidos do processamento de mandioca;

chamado Milho onde a rao avaliada foi a que tinha incluso de 10% de
resduos slidos do processamento de milho;

chamado Batata-doce onde a rao avaliada foi a que tinha incluso de 10% de
resduos slidos do processamento de batata-doce;
chamado Arroz onde a rao avaliada foi a que tinha incluso de 10% de
resduos slidos do processamento de arroz;
o grupo 6 foi formado pelas caixas 11 e 12, abrigou 8 animais referentes ao

grupo chamado Rao Comercial onde a rao avaliada foi a normalmente usada
no biotrio, no caso Presence Ratos e Camundongos.
Tabela 5. Distribuio dos animais no biotrio.

GRUPO
CAIXA
TRATAMENTO
12
Testemunha
34
Mandioca
56
Milho
78
Batata-doce
9 -10
Sorgo
11 12
Arroz
13 14
Rao Comercial
Os animais foram adaptados ao biotrio por um perodo de oito

dias, onde receberam as raes formuladas e gua a vontade sem ser efetuado o
recolhimento de nenhum dado referente a consumo ou peso. Durante todo perodo do
estudo, o biotrio teve controle automtico de luz e temperatura de 21C.
Foram feitas marcaes com cido pcrico (amarelo) como mostra
a Figura 10 na cauda, cabea e pata dianteira para ajudar na identificao dos animais
no posterior recolhimento dos dados; esta marcao foi mantida durante todo o
experimento.
Figura 10. Marcao dos animais

Na avaliao do desempenho dos animais, coletaram-se os dados
relativos pesagem dos ratos, da rao e gua ofertada nos tempos de 1, 3, 6, 8, 10, 13,
17, 20, 22, 24, 27, 29, 31, 34, 36, 38 e 41dias. Atravs dos dados foram calculados o
Consumo de Rao (CR), Ganho de Peso (GP) e a Converso Alimentar (CA) para cada
grupo. Esses ndices foram utilizados para avaliar os efeitos da adio dos resduos
sobre o desempenho dos animais. Os dados foram submetidos anlise estatstica
utilizando o teste Tukey a 5% de probabilidade, atravs do programa de anlises
estatsticas e planejamento de experimentos ASSISTAT, 2012.
Todos os animais foram sacrificados quarenta e dois (42) dias
depois do inicio do experimento. A eutansia dos animais foi feita em cmera de
dixido de carbono - CO2, onde foi injetada uma atmosfera com 70% de CO2 no ar
para a rpida perda de conscincia, sem hipxia. Os animais foram mantidos na cmara
por 10 minutos, para confirmao de sua morte.
A morte foi confirmada pela ausncia de movimentos
respiratrios, batimentos cardacos e perda dos reflexos. Posteriormente foram feitas a
sangria, eviscerao, e congelamento antes do descarte dos cadveres.

O
sangue
foi
coletado
em
frascos
devidamente
identificados, e aps repouso foram centrifugados a 3000 rpm por dez (10) minutos para
se obter o soro de cada animal e realizar exames bioqumicos de ALT, AST
(transaminases), creatinina e ureia.
Todas as amostras foram mantidas a -10 C at o momento da
anlise. Aps a morte dos animais, os rgos foram retirados e conservados por 24
horas em formol 10%, lavados em gua corrente over night e transferidos para
soluo de lcool 70% para posterior processamento.
Os rgos retirados para estudo foram:
Estomago
Fgado;
Intestinos delgado;
Intestino grosso;
Rins direito e esquerdo
Foram preparados de modo a preservar sua estrutura original ao

mximo possvel. Os passos das tcnicas histolgicas foram: Fixao dos tecidos,
desidratao, incluso, microtomia, e colorao de lminas. A fixao paralisa o
metabolismo celular e preserva as estruturas do tecido para os tratamentos posteriores.
A fixao evitou a autlise celular, impedindo a proliferao de microrganismos, levou
ao endurecimento do tecido para resistir aos tratamentos posteriores.Para incluso foi
usada a parafina histolgica Histosec Pastilhas MERK, os tecidos foram
criteriosamente preparados para receber o meio de incluso (parafina). E foram obtidos
cortes delgados no processo de microtomia. Os cortes de tecidos apresentaram-se
incolores aps a microtomia. A colorao visou contrastar as estruturas teciduais. Foram
usados os corantes Hematoxilina e Eosina.
As laminas foram analisadas em microscpio eletrnico com
objetiva de 10x.
4. RESULTADOS E DISCUSSO
4.1 Matrias-primas
Antes do processamento cada matria-prima estudada foi
caracterizada fsico e quimicamente, cujos valores das analises centesimais so
apresentados na Tabela 6 .
Tabela 6. Composio centesimal das matrias-primas.

Matria-prima
Mandioca
/Anlise
Umidade inicial
Batata-doce
Arroz
Teores (% em base seca)
Sorgo
Milho
62,50
63,80
8,30
10,72
9,50
Carboidratos
34,10
28,50
80,00
77,06
79,95
Matria graxa
0,10
0,20
0,80
2,58
1,64
Protena
0,60
1,20
7,56
5,48
5,97
Fibras
1,50
3,80
1,38
1,62
1,20
Cinzas
0,84
0,50
0,32
0,84
0,24
Acidez*
0,70
0,60
0,50
0,70
0,50
(% base mida)
* mL de NaOH/100g
Observa-se que os teores encontrados podem ser comparados com

resultados obtidos por Camili (2009), onde foram encontrados valores para mandioca
de: Umidade 63,6%, protena 0,06%, matria graxa 0,08%, fibra 1,44%, cinzas 0,86%,
acar total 2,72% e amido 31,18%. Capobiango (2006) encontrou valores para milho
de: Umidade 11,04%, protena 6,13%, matria graxa 1,94%, fibra 5,86%, carboidratos
80,42%.Silva (2010) encontrou valores para batata-doce de: Umidade 59,05%, protena
3,14%, matria graxa 0,194%, fibra 4,33%, cinza 2,18%, carboidratos 32,04%.Walter et
al. (2010) encontraram valores para arroz de: Protena 8,94%, matria graxa 0,36%,
fibra 2,87%, cinza 0,30%, carboidratos 87,58%.
Os valores apresentados tornam estas matrias-primas interessantes
para o processo de hidrlise para obteno de acares fermentescveis. Segundo
(VENTURINI FILHO & MENDES, 2003) dentre as matrias-primas caracterizadas
como amilceas ou feculentas, a mandioca se destaca como excelente opo para a
fermentao alcolica por apresentar alto teor de amido.
Alm da raiz in natura da batata-doce, tambm a farinha e farelo
das raspas, podem ser utilizadas como matrias-primas para produo de hidrolisados.
A diferena ser refletida na proporo de gua necessria para o cozimento, e
concentrao enzimtica, que ser maior devido a elevada concentrao de amido
presente na farinha e no farelo (SILVEIRA et al. 2008).
4.2 Resduos Slidos

Depois do processamento os resduos slidos foram submetidos
secagem e posteriormente foram modos e caracterizados fsica e quimicamente. A
caracterizao dos resduos apresentada na Tabela 7, onde se tem o teor de umidade,
as concentraes de carboidratos, amido, protena bruta, extrato etreo, fibra total,
cinzas e acidez (mL de NaOH/100g ).
Tabela 7. Composio fsico-qumica dos resduos slidos do processamento das

matrias-primas.
Resduo
Mandioca
Batata-doce
/Anlise
Umidade inicial
Arroz
Sorgo
Milho
10,00
10,50
10,80
10,50
12,00
Carboidratos
54,12
45,00
40,45
47,43
43,49
Amido
3,30
2,00
3,00
3,20
4,30
Extrato etreo
0,10
0,10
0,20
2,50
1,04
Protena Bruta
0,95
1,60
7,80
6,20
6,20
Fibras
33,82
41,80
39,93
32,03
36,53
Cinzas
0,50
0,50
0,32
0,84
0,24
Acidez
0,50
0,50
0,50
0,50
0,50
(% base mida)
Observa-se que os teores encontrados podem ser comparados com

resultados obtidos por: Rodrigues & Rodrigues (2012), onde foi caracterizado o resduo
solido da obteno de etanol a partir de batata-doce e foram encontrados teores de
protena: 4,02%; matria graxa 1,73%, fibra 41,85%, carboidratos: 37,00% e pH 3,24 .
A presena de uma proporo de nutrientes orgnicos como
protena, fibra, carboidratos e matria graxa nos resduos analisados sinaliza
potencialidade de uso na nutrio animal.
TEIXEIRA (1997) destaca algumas caractersticas sobre as anlises
acima realizadas. Dentre elas, sobre o teor de protena bruta: permite identificar a qual
classe o alimento pertence. Alimentos com valores de protena bruta superiores a 20%
so considerados proteicos. O extrato etreo indica as fraes orgnicas do alimento,
sendo a que apresentou maior densidade energtica. As fibras so as fraes celulose e
hemicelulose do material vegetal.
Considerando os dados de protena bruta entre 0,95% (mandioca) e
6,20% (milho e sorgo), fibras totais entre 32,03% (sorgo) e 41,80% (batata-doce)
expressos na Tabela 1, de acordo com a Classificao Adaptada do Dr. F. B.
MORRISON (1966) apud TEIXEIRA (1997), os resduos analisados podem ser
classificados como sendo fontes de alimento energtico.
Segundo MORISSON (1966) apud TEIXEIRA (1997), os
alimentos energticos so alimentos concentrados que possuem menos de 20% de
protena bruta (base seca). Da qual pode ter origem animal ou vegetal.
Quanto ao valor baixo de acidez (0,50), justifica-se por se tratar de
resduos da fermentao alcolica de materiais amilceos para produo de etanol
evidenciando a formao de cidos orgnicos como resultantes do processo
fermentativo original. Por ser um resduo cido pode favorecer a estabilidade do
material quando em condio de armazenamento.
4.3. Experimentao Animal:

O delineamento experimental para avaliar o uso dos resduos
estudados em alimentao de ratos determinou o uso de seis tipos de formulaes
(considerando as cinco matrias-primas usadas e uma testemunha).
4.3.1. Raes
Os resduos slidos obtidos foram includos separadamente nas
formulaes em 10% do total de cada obtendo assim seis formulaes para seis
tratamentos/grupos a ser avaliados (um resduo = um tipo de formulao = um grupo).
A Tabela 8 ilustra a formulao e a composio bromatolgica
darao usada no grupo 1/Testemunha na analise de segurana com ratos Wistar.
Tabela 8. Composio porcentual e bromatolgica da rao usada como Testemunha
Ingrediente
Farelo de soja
37,70
Milho (fub)
45,30
Resduo
-0-
Sal comum
5,00
Farelo de trigo
5,00
Fosfato biclcico
3,70
leo de soja
2,20
Premix (vit/mim)
0,60
Calcrio
0,37
DL metionina
0,19
TOTAL
100
Composio Qumica
Protena
22,00
Fibra bruta
6,50
Carboidratos
55,00
Gordura
3,84
A rao usada no grupo 1/Testemunha foi balanceada com farelo

de soja, milho, farelo de trigo, leo de soja, fosfato biclcico, sal, calcrio, vitaminas,
minerais e DL metionina. No teve incluso de nenhum resduo.
A composio qumica mostrou teores de protena 20%, fibra bruta
6,50%, carboidratos 55% e gordura 3,84%.
A Tabela 9 ilustra a formulao e a composio bromatolgica da

rao usada no grupo 2/Mandioca na analise de segurana com ratos Wistar.
Tabela 9. Composio porcentual e bromatolgica da rao com incluso de resduo a

partir da matria-prima Mandioca.
Ingrediente
Farelo de soja
37,70
Milho (fub)
35,30
Resduo (mandioca)
10,00
Sal comum
5,00
Farelo de trigo
5,00
Fosfato biclcico
3,70
leo de soja
2,20
Premix (vit/mim)
0,60
Calcrio
0,37
DL metionina
0,19
TOTAL
100
Composio Qumica
Protena
22,00
Fibra bruta
7,50
Carboidratos
52,50
Gordura
3,80
A rao usada no grupo 2/Mandioca foi balanceada com farelo de

soja, milho, farelo de trigo, leo de soja, fosfato biclcico, sal, calcrio, vitaminas,
minerais e DL metionina. Teve incluso de 10% do resduo slido gerado no
processamento da mandioca para produo de lcool.
A composio qumica mostrou teores de protena 22%, fibra bruta
7,50%, carboidratos 52,50% e gordura 3,80%.
O uso dos resduos slidos provenientes a partir da produo de
lcool a partir de mandioca na alimentao animal foi estudado e demonstrado que na
alimentao de frangos de corte na fase inicio (1 a 21 dias) no se apresentaram
alteraes no desempenho das aves (CAMACHO, 2009).

rao usada no grupo 3/Milho na analise de segurana com ratos Wistar.

partir da matria-prima Milho.
Ingrediente
Farelo de soja
37,70
Milho (fub)
35,30
Resduo (milho)
10,00
Sal comum
5,00
Farelo de trigo
5,00
Fosfato biclcico
3,70
leo de soja
2,20
Premix (vit/mim)
0,60
Calcrio
0,37
DL metionina
0,19
TOTAL
100
Composio Qumica
Protena
24,50
Fibra bruta
7,00
Carboidratos
53,00
Gordura
4,00
A rao usada no grupo 3/Milho foi balanceada com farelo de soja,

milho, farelo de trigo, leo de soja, fosfato biclcico, sal, calcrio, vitaminas, minerais e
DL metionina. Teve incluso de 10% do resduo slido gerado no processamento do
milho para produo de lcool.
A composio qumica mostrou teores de protena 24,50%, fibra
bruta 7,00%, carboidratos 53,00% e gordura 4,00%.

rao usada no grupo 4/Batata-doce na analise de segurana com ratos Wistar.
partir da matria-prima Batata-doce.
Ingrediente
Farelo de soja
37,70
Milho (fub)
35,30
Resduo (batata-doce)
10,00
Sal comum
5,00
Farelo de trigo
5,00
Fosfato biclcico
3,70
leo de soja
2,20
Premix (vit/mim)
0,60
Calcrio
0,37
DL metionina
0,19
TOTAL
100
Composio Qumica
Protena
21,00
Fibra bruta
7,80
Carboidratos
54,50
Gordura
3,50
A rao usada no grupo 4/Batata-doce foi balanceada com farelo de

soja, milho, farelo de trigo, leo de soja, fosfato biclcico, sal, calcrio, vitaminas,
minerais e DL metionina. Teve incluso de 10% do resduo slido gerado no
processamento da batata-doce para produo de lcool.
Rodrigues & Rodrigues (2010) realizaram estudos com o resduo
da batata doce aps sua fermentao alcolica em dietas para peixes e concluram que o
material apresenta potencial para formulao de raes para peixes em cativeiro. No
entanto, os autores ressalvam que para que este potencial de uso seja efetivamente
comprovado, h necessidade de se aprofundar os trabalhos devendo ser avaliadas
informaes como: palatabilidade, efeitos de sua incluso em formulaes contendo

outros ingredientes e forma de fornecimento aos animais.

rao usada no grupo 5/Sorgo na analise de segurana com ratos Wistar.

partir da matria-prima Sorgo.
Ingrediente
Farelo de soja
37,70
Milho (fub)
35,30
Resduo (sorgo)
10,00
Sal comum
5,00
Farelo de trigo
5,00
Fosfato biclcico
3,70
leo de soja
2,20
Premix (vit/mim)
0,60
Calcrio
0,37
DL metionina
0,19
TOTAL
100
Composio Qumica
Protena
23,00
Fibra bruta
6,40
Carboidratos
53,00
Gordura
3,80
A rao usada no grupo 5/Sorgo foi balanceada com farelo de soja,

DL metionina. Teve incluso de 10% do resduo slido gerado no processamento da
sorgo para produo de lcool.

rao usada no grupo 6/Arroz na analise de segurana com ratos Wistar.

partir da matria-prima Arroz.
Ingrediente
Farelo de soja
37,70
Milho (fub)
35,30
Resduo (arroz)
10,00
Sal comum
5,00
Farelo de trigo
5,00
Fosfato biclcico
3,70
leo de soja
2,20
Premix (vit/mim)
0,60
Calcrio
0,37
DL metionina
0,19
TOTAL
100
Composio Qumica
Protena
25,00
Fibra bruta
5,00
Carboidratos
53,00
Gordura
3,80
A rao usada no grupo 6/Arroz foi balanceada com farelo de soja,

DL metionina. Teve incluso de 10% do resduo slido gerado no processamento da
sorgo para produo de lcool. A composio qumica mostrou teores de protena
25,00%, fibra bruta 5,00%, carboidratos 53,00% e gordura 3,80%.
A rao usada no grupo 7/Comercial foi Presence Ratos e
Camundongos fabricado pela empresa Precense Nutrio Animal. Produto destinado
para a alimentao de ratos, camundongos e hamsters de laboratrio. A composio
qumica apresenta da no rotulo mostrou teores de protena 23,00%, fibra bruta 5,00%, e
gordura 4,00%.
4.3.2 Analise Comportamental dos Ratos

Os 56 ratos foram agrupados em sete grupos (oito animais por
grupo), as Figuras a seguir ilustram os dados mdios de consumo de rao e
crescimento dos animais nas 5 semanas de experimento.
A Figura 11 ilustra os valores medios por animal de peso e
consumo de rao formulada como testemunha, os animais de este grupo pesaram no
inicio do experimento aproximadamente 105,25 g e terminaram aos 42 dias com
360,12g depois de consumir aproximandamente 1032,24 g de rao.
As principais caractersticas comportamentais identificadas em
todos os animais foram: a posio em p, docilidade no manejo, lutas entre ratos e
constante limpeza da pelagem, comportamentos normais segundo LAPCHIK, 2009.
No se apresentaram situaes de canibalismo e nenhum animal
morreu durante a execuo dos ensaios experimentais.
400
360,12
300
221,5
222,75
Peso/animal (g)
151,25
200
Consumo/animal (g)
74,62
100
0
105,25 113,63 145,75

234,38 266,88
299,5
Inicio Semana
Semana Semana
1
Semana
2
Semana
3
4
5
Figura 11. Valores mdios dos valores, por animal, dos pesos e consumo da rao
formulada como testemunha.

consumo de rao formulada com incluso de resduo slido do processamento de
mandioca, os animais de este grupo pesaram no inicio do experimento
aproximadamente 110,88 g e terminaram aos 42 dias com 367,87g depois de consumir
aproximandamente 1101,86 g de rao.

400
367,87
300
234,37
242,87
177,50
200
Peso/animal (g)
79,25
100
0
Consumo/animal (g)
110,88 124,63
Inicio
158,88 247,00
Semana
Semana
1
2
Semana
3
288,00
Semana
4
314,63
Semana
5
formulada com incluso de resduo slido do procesamento de mandioca.

milho, os animais de este grupo pesaram no inicio do experimento aproximadamente
100,50g e terminaram aos 42 dias com 357,12g depois de consumir aproximandamente
1062,24 g de rao.

400
357,12
300
220,87
232,25
173,37
200
Peso/animal (g)
78,63
100
0
Consumo/animal (g)
100,50 114,38
146,5
Inicio
224,13
Semana Semana
Semana
1
2
3
262,63
Semana
4
292,5
Semana
5
formulada com incluso de resduo solido do procesamento de milho.

batata-doce, os animais de este grupo pesaram no inicio do experimento
aproximadamente 100,50g e terminaram aos 42 dias com 284,88g depois de consumir
aproximandamente 1197,11g de rao.
Durante a semana 4 e 5 os animais de este grupo alimentados com
raes suplementadas com o resduo solido do processamento de batata-doce
apresentaram diarreias, provavelmente o comportamento dos animais se deve ao teor de
fibra na rao (7,80%) que se encontra perto do limite estabelecido por
ANDRIGUETTO, 1990. Ikegami et al (1990), comprovaram que ratos alimentados com
raes com mais de 8% de fibra apresentam menor ganho de peso e em alguns casos
quadros de diarreia.

400
350
400
300
250
300
200
150
200
100
50
100
0
0
383,62
383,62
246,12
191,75
246,12
272,62
272,62
191,75
103,00
Peso/animal (g)
Peso/animal
(g) (g)
Consumo/animal
Consumo/animal (g)
103,00
112,38
126,38
160,75
100,50 126,38
160,75
Inicio
231,13
276,25
284,88
231,13 276,25
Semana Semana
Semana
284,88
1
Inicio
Semana
2
Semana Semana
Semana
3
4
Semana
1
5
Semana
2
Semana
3
4
5
formulada com incluso de resduo solido do procesamento de batata-doce.

sorgo, os animais de este grupo pesaram no inicio do experimento aproximadamente
107,00g e terminaram aos 42 dias com 317,75g depois de consumir aproximandamente
1126,37 g de rao.
morreu durante a execuo dos ensaios experimentais
400,00
350,00
300,00
250,00
200,00
150,00
100,00
50,00
0,00
367,75
244,62
255,50
176,62
81,88
107,00
Inicio
Peso/animal (g)
Consumo/animal (g)
120,00
158,50
254,50
Semana Semana
Semana
1
2
3
289,75
Semana
4
317,75
Semana
5
formulada com incluso de resduo solido do procesamento de sorgo.

consumo de rao formulada com incluso de resduo slido do processamento de arroz,
os animais de este grupo pesaram no inicio do experimento aproximadamente 100,50g e
terminaram aos 42 dias com 304,50g depois de consumir aproximandamente 1060,74 g
de rao.
400,00
359,75
350,00
300,00
250,00
200,00
150,00
100,00
50,00
0,00
174,62
209
235
82,37
Peso/animal (g)
Consumo/animal (g)
103,75
Inicio
116,25
148,75
226,63 277,75
Semana Semana
Semana
1
Semana
2
3
4
304,50
Semana
5
formulada com incluso de resduo solido do procesamento de arroz.

consumo de rao usada como testemunha comercial, os animais de este grupo pesaram
no inicio do experimento aproximadamente 93,13g e terminaram aos 42 dias com
311,88g depois de consumir aproximandamente 948,25 g de rao.
350,00
306,5
300,00
250,00
209,75
200,00
231,62
127,00
150,00
73,38
100,00
50,00
0,00
Peso/animal (g)
Consumo/animal (g)
93,13
Inicio
103,00
135,50
235,75 281,25
311,88
Semana Semana
Semana
1
Semana
2
Semana
3
4
5
usada como testemunha comercial.
4.3.3 Desempenho
A Tabela 14 ilustra o teste de medias do consumo de rao,
consumo de gua, converso alimentar e ganho de peso dos animais desde o dia 8
(depois da adaptao) ate o dia 42 quando foi realizada a eutansia dos ratos.
Tabela 14. Resultados do desempenho mdio dos grupos de consumos das raes
formuladas.
Grupo
Consumo rao
(g)
Consumo gua
(mL)
1/Testemunha
504,000 ab
11013,000 ab
1,675 bc
194,250 ab
2/Mandioca
506,500 ab
11566,000 ab
1,730 b
192,000 ab
3/ Milho
525,250 ab
11255,500 ab
1,665 bc
203,750 a
4/ Batata-doce
575,250 a
16257,000 a
2,020 a
172,500 b
5/ Sorgo
521,750 ab
11678,500 ab
1,645 bc
210,750 a
6/ Arroz
515,250 ab
11053,000 ab
1,690 bc
200,750 a
7/Comercial
452,375 b
6309,500 b
1,450 c
218,750 a
4,88
22,16
CV%
Converso
alimentar
Ganho de peso
(g)
4,17
3,46
Mdias seguidas pela mesma letra no diferem estatisticamente entre si pelo Teste de Tukey ao nvel de
5% de probabilidade.
Apresentaram diferenas significativas entre os grupos avaliados; o

resduo do processamento da batata-doce apresentou o maior consumo de rao (575,25
g) e gua (16257,00 mL) e o menor ganho de peso (172,50 g) dos animais indicando
baixo desempenho quando comparado com outros resduos e com rao comercial. O
desempenho da rao com incluso de resduo do processamento de batata-doce esta
relacionado com o contedo de fibra apresentado na composio qumica da rao
(7,80%), o limite mximo em raes para ratos deve ser 8% (POLLE, 1987; CALVERT
et al., 1989). O maior ganho de peso foi conseguido o grupo 1 Testemunha (504,00 g)
porem os tratamentos com incluso de resduos exceto batata-doce no apresentaram
diferencias significativas nem no ganho de peso, nem na converso alimentar.
GARCIA DE FARIA (2007) apresentou dados se de ganho de peso
(190,00 g), consumo de rao (435,00 g) e converso alimentcia (1,5), em ratos da
linhagem Wistar em crescimento, alimentados com dietas extrusadas e peletizadas em
um perodo de 35 dias.
As raes suplementadas com resduos slidos do processamento
de mandioca, arroz, sorgo e milho, associadas s raes testemunha e comercial,
ofertadas a vontade, no interferiram estatisticamente em relao ao desempenho dos
animais (Tabela 14), bem como nos pesos dos rins direito/esquerdo e fgado
apresentados na Tabela 15.
Tabela 15. Valores mdios dos valores, por grupo, dos pesos dos rins e fgado.
Rim D
Rim E
Fgado
(g)
(g)
(g)
1/Testemunha
1,300 a
1,277 a
10,340 a
2/ Mandioca
1,232 a
1,245 a
11,732 a
3/ Milho
1,340 a
1,317 a
11,867 a
4/ Batata-doce
1,209 a
1,165 a
10,274 a
5/Sorgo
1,444 a
1,402 a
11,986 a
6/ Arroz
1,349 a
1,335 a
11,632 a
7/Comercial
1,222 a
1,167 a
11,260 a
12,37
12,56
14,29
Grupo
CV%
Mdias seguidas pela mesma letra no diferem estatisticamente entre si pelo

Teste de Tukey ao nvel de 5% de probabilidade.
De acordo com os valores mdios do tamanho dos rgos dos ratos,

no se apresentaram diferencias estatsticas de tamanho em rins direito/esquerdo ou
fgado.
4.3.3Funo Renal
De acordo com os valores mdios dos parmetros bioqumicos
(ALT e AST) foi avaliada a funo renal dos ratos, os parmetros avaliados no plasma
sanguneo dos animais, submetidos a raes suplementadas com resduos slidos do
processamento de materiais amilceos para fabricao de etanol, no apresentaram
diferenas significativa independente da rao ingerida como pode ser observado na
Tabela 16.
Tabela 16. Valores mdios da concentrao de ALT e AST no plasma de indivduos

dos grupos de ensaio.
ALT
AST
(U.L-1)
(U.L-1)
1/ Testemunha
33,174 a
86,427 a
2/ Mandioca
33,174 a
86,427 a
3/ Milho
33,174 a
84,681 a
4/ Batata-doce
33,174 a
86,427 a
5/ Sorgo
34,047 a
84,681 a
6/ Arroz
33,174 a
83,808 a
7/Comercial
34,047 a
83,808 a
5,22
2,74
Grupo
CV%
Mdias seguidas pela mesma letra no diferem estatisticamente entre

si pelo Teste de Tukey ao nvel de 5% de probabilidade.
Os valores se assemelham aos observados por BRANCOet al.

(2011) com camundongos Swiss onde foram achados valores de ALT (45,00 +/- 0,1),
AST (78,00 +/- 0,1). Diferem dos valores encontrados por REIS (2011) onde foram
achados em ratos Wistar valores de ALT (71,25a 2,86) e AST (273,00 17,44).
4.3.4 Funo Heptica

De acordo com os valores mdios dos parmetros bioqumicos
(ureia e creatinina) foi avaliada a funo heptica dos ratos, os parmetros avaliados no
plasma sanguneo dos animais, submetidos a raes suplementadas com resduos
slidos do processamento de materiais amilceos para fabricao de etanol, no
apresentaram diferenas significativa independente da rao ingerida como pode ser
observado na Tabela 17.
Tabela 17.
Valores mdios da concentrao de uria e creatinina no plasma de
indivduos dos grupos de ensaio

Uria
Creatinina
(mg.dL-1)
(mg.dL-1)
1/Testemunha
33,854a
0,5294a
2/ Mandioca
39,104 a
0,5882 a
3/ Milho
35,301 a
0,3529 a
4/ Batata-doce
42,784 a
0,4117 a
5/ Sorgo
36,509 a
0,5294 a
6/ Arroz
31,922 a
0,5294 a
7/ Comercial
28,905 a
0,4117 a
19,91
39,94
Grupo
CV%
Mdias seguidas pela mesma letra no diferem estatisticamente entre

si pelo Teste de Tukey ao nvel de 5% de probabilidade.
Os valores se assemelham aos observados Castello Branco et al.

(2011), com ratos Wistar onde foram achados valores de creatinina (0,3 +/- 0,1), e ureia
(45,00 +/- 0,1), e valores encontrados por REIS (2011) onde foram achados em ratos
Wistar valores de creatinina (0,45+/-0,064) e ureia (42,505,763).
4.3.5 Histologia
Os cortes histolgicos foram observados ao microscpio (objetiva
de 10x) e no foram observadas alteraes histolgicas associadas aos diferentes
tratamentos. A Figura 18 mostra fotomicrografias representativas de cortes de estmago
(poro glandular) dos diferentes grupos experimentais 1 a 7, respectivamente A Figura
19 mostra fotomicrografias representativas de cortes de fgado dos diferentes grupos
experimentais 1 a 7 respectivamente. RC= Regio centrolobular, RP= Regio periportal.
A Figura 20 mostra fotomicrografias representativas de cortes de intestino delgado
(poro jejuno/leo) dos diferentes grupos experimentais 1 a 7 respectivamente. MI=
Mucosa intestinal, VI= Vilosidade intestinal. A Figura 21 mostra fotomicrografias
representativas de cortes de intestino grosso dos diferentes grupos experimentais 1 a 7
respectivamente. MI= Mucosa intestinal. A Figura 22 mostra fotomicrografias
representativas de cortes de rim dos diferentes grupos experimentais 1 a 7,
respectivamente.. GL= Glomrulo renal, TR= Tbulos renais.
Figura 18. A-G) Fotomicrografias representativas de cortes de estmago (poro

glandular) dos diferentes grupos experimentais 1 a 7 respectivamente
(objetiva de 10x). MG= Mucosa gstrica.
Figura 19. A-G) Fotomicrografias representativas de cortes de fgado dos diferentes

grupos experimentais 1 a 7 respectivamente (objetiva de 10x). RC= Regio
centrolobular, RP= Regio periportal. No foram observadas alteraes
histolgicas associadas aos diferentes tratamentos.
Figura 20. A-G) Fotomicrografias representativas de cortes de intestino delgado

(poro jejuno/leo) dos diferentes grupos experimentais 1 a 7
respectivamente (objetiva de 10x). MI= Mucosa intestinal, VI= Vilosidade
intestinal. No foram observadas alteraes histolgicas associadas aos
diferentes tratamentos.
Figura 21. A-G) Fotomicrografias representativas de cortes de intestino grosso dos

diferentes grupos experimentais 1 a 7 respectivamente (objetiva de 10x). MI=
Mucosa intestinal. No foram observadas alteraes histolgicas associadas
aos diferentes tratamentos.
Figura 22. A-G) Fotomicrografias representativas de cortes de rim dos diferentes

grupos experimentais 1 a 7 respectivamente (objetiva de 10x). GL=
Glomrulo renal, TR= Tbulos renais. No foram observadas alteraes
histolgicas associadas aos diferentes tratamentos.
5. CONSIDERAES FINAIS
Os biocombustveis, para serem alternativas viveis, devem

apresentar um alto ganho de energia lquida, ter benefcios ecolgicos, ser
economicamente competitivos e produzir em grandes escalas sem prejudicar o
abastecimento de alimentos.
As fases do processo industrial para obteno de lcool a partir de
matrias-primas amilceas descritas no capitulo de materiais e mtodos, estudadas na
realizao das provas experimentais na planta piloto do CERAT-UNESP mostram como
vivel o funcionamento de pequenas destilarias (at 5000 litros de lcool por dia) em
comunidades rurais que abrangem cooperativas de produtores organizados, este tipo de
plantas so avaliadas igualmente no CIAT (Centro Internacional de Agricultura
Tropical) as pesquisas mostram que seu uso em pequenas comunidades d ganhos na
qualidade de vida dos moradores, a Figura 16 ilustra uma planta piloto instalada em
CIAT-Colmbia; os resduos slidos gerados em esta planta esto sendo usados para a
fabricao de blocos nutricionais, subministrados a bovinos de corte como veiculo para
ureia.
Figura 23. Planta piloto para fabricao de etanol CIAT-Colmbia.
6. CONCLUSES
Nas condies em que foi realizado o presente trabalho,
pode-se concluir que:
Diante da caracterizao da composio bromatolgica dos resduos

produzidos a partir do processamento de mandioca, milho, sorgo, arroz e
batata-doce para fabricao de lcool, conclui-se que os mesmos podem ser
considerados como fontes de alimento energtico em formulaes de raes
para ratos.
O uso dos resduos slidos do processamento de mandioca, milho, arroz e

sorgo na fabricao de bioetanol,suplementando raes para ratos no
apresentou efeitos adversos no desempenho, quando includos em 10% nas
raes, possibilitando seu uso em este tipo de aplicaes.
A incluso de resduos do processamento de batata-doce na fabricao de

bioetanol em dietas para ratos apresentou efeitos adversos no desempenho
dos animais quando includos em 10% nas raes, limitando seu uso em este
tipo de aplicaes.
A incluso de resduos do processamento de mandioca, milho, sorgo, arroz e

batata-doce na fabricao de bioetanol em dietas para ratos no causaram
interferncias na funo renal ou heptica dos animais.
Os cortes histolgicos observados ao microscpio permitiram concluir que a

incluso de resduos do processamento de mandioca, milho, sorgo, arroz e
batata-doce na fabricao de bioetanol em dietas para ratos no causaram
alteraes histolgicas.
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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Produção de Resíduos Sólidos de Matérias-Primas Amiláceas Na Fabricação de Bioetanol para Analise de Segurança

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III

UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA JLIO DE MESQUITA FILHO

PRODUO DE RESDUOS SLIDOS DE MATRIAS-PRIMAS AMILCEAS

ILEANA ANDREA ORDOEZ CAMACHO

Tese apresentada Faculdade de

UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA JLIO DE MESQUITA FILHO

PRODUO DE RESDUOS SLIDOS DE MATRIAS-PRIMAS AMILCEAS

ILEANA ANDREA ORDOEZ CAMACHO

Tese apresentada Faculdade de

A Deus muito obrigado!

LISTA DE FIGURAS .......................................................................................................

LISTA DE TABELAS .......................................................................................................

LISTA DE ABREVIATURAS .........................................................................................

2. REVISO DE LITERATURA ....................................................................................

2.1. Bioetanol ....................................................................................................................

2.2 Matrias-Primas ..........................................................................................................

2.2.1 Mandioca ................................................................................................................

2.2.2 Sorgo ......................................................................................................................

2.2.3 Arroz .......................................................................................................................

2.2.4 Milho ......................................................................................................................

2.2.5 Batata-doce .............................................................................................................

2.3 Resduos do Processamento ........................................................................................

2.4. Experimentao Animal .............................................................................................

2.4.1 Condies ambientais .................................................................................................

2.4.2 Rato ............................................................................................................................

2.4.2.1 Requerimentos Nutricionais ....................................................................................

2.4.2.2 Eutansia .................................................................................................................

2.4.3 Anlises Laboratoriais ................................................................................................

2.4.3.1 Histologia ..........................................................................................................

2.4.3.2 Perfil Sanguneo ................................................................................................

3. MATERIAL E MTODOS ..........................................................................................

3.1 Matria-Prima ..............................................................................................................

3.2 Processamento .............................................................................................................

3.3 Experimentao Animal ..............................................................................................

4. RESULTADOS E DISCUSSO ..................................................................................

4.1 Matrias-Primas ..........................................................................................................

4.2. Resduos Slidos ........................................................................................................

4.3. Experimentao Animal .............................................................................................

4.3.1 Raes ....................................................................................................................

4.3.2. Analise Comportamental dos Ratos ......................................................................

4.3.3. Desempenho ..........................................................................................................

4.3.3. Funo Renal .........................................................................................................

4.3.4. Funo Heptica ....................................................................................................

4.3.5. Histologia ..............................................................................................................

5. CONSIDERAES FINAIS .......................................................................................

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS ............................................................................

Estgios da produo de etanol a partir de matrias-primas de origem

Processo para obteno de etanol a partir de matrias-primas de origem

Pontos de ao das enzimas na hidrlise do amido.......................................

Rendimento mdio de bioetanol para diferentes culturas..............................

Balanos de massa do Etanol, gua, CO2 e Efluentes no processamento

Passos para obteno dos resduos slidos de matrias-primas amilceas

Fluxograma para produo dos resduos slidos de matrias-primas

Marcao dos animais...................................................................................

Fotomicrografias representativas de cortes de estmago (poro

Fotomicrografias representativas de cortes de fgado dos diferentes grupos

Fotomicrografias representativas de cortes de intestino delgado (poro

Fotomicrografias representativas de cortes de intestino grosso dos

Fotomicrografias representativas de cortes de rim dos diferentes grupos

Planta piloto para fabricao de etanol CIAT-Colmbia..............................

Principais tipos de carboidratos usados na fabricao de etanol................

Capacidade de produo de amido de culturas amilceas no Brasil. .........

Parmetros Fisiolgicos de ratos................................................................