Universidad Rafael Landvar, Ingeniera Qumica Industrial

Laboratorio de Microbiologia
Lcda. Sandra Lima
Microbiologa de lacteos.

PRCTICA NO. 7

Osman Navas Vsquez

Carn: 1233812
Seccin: 02
Guatemala, 25 de octubre de 2014 (9:00 am)

Objetivos Generales
1. Cuantificar el anlisis microbiolgico de la crema.
Objetivos Especficos
1. Determinar cualitativamente la presencia de Escherichia coli en
la crema analizada, adems del numero mas probable del
microorganismo.
2. Determinar cualitativamente la presencia de coliformes totales
en la crema analizada, adems del numero mas probable del
microorganismo.
3. Determinar cualitativamente la presencia de coliformes fecales
en la crema analizada, adems del numero mas probable del
microorganismo.
4. Determinar la existencia de enterobacterias y Salmonella en
crema trebolac despus de una semana en Chromocult.
5. Determinar la existencia de mohos en crema trebolac despus
de una semana en el medio agar papa dextrosa.
6. Determinar la existencia de lactobacilos en crema trebolac
despus de una semana en el medio de cultivo MRS.
7. Determinar todas las bacterias en crema trebolac despus de
una semana en el medio de cultivo recuento total.
8. Determinar la existencia de staphylococus en crema trebolac
despus de una semana en el medio de cultivo Manitol salt.

Material
Material: Solucin contaminada con microorganismos estafilococos.
Se empleo los siguientes medios de cultivo:
1. Cultivo chromocult.
2. Cultivo Agar papa dextrosa.
3. Cultivo Manitol Salt.
4. Cultivo Recuento Total.
5. Cultivo MRS.
6. Cultivo Flourocult.
Equipo utilizado:
1. Bao maria, tubos de ensayo, cajas Petri.
Utensilios de laboratorio como bistur. Pinzas. Aza , esptula.
Reactivos:
Reactivo de korvacks

METODOLOGA
Diagrama no. 1 Preparacin de las muestras con microorganismos
en floruocult.
INICIO
1. Tomar 9 tubos con caldo fluorocult y 2 tubos con presencia de agua estril.

FIN

2. Colocar 1 ml de la muestra de agua por analizar en tres de los tubos de fluorocult y en un tubo de agua estril
(dilucin 1/10).

3. Colocar 1 ml de agua del tubo de agua estril con agua de muestra y agregarlo a 3 tubos de fluorocult y a un tubo de
agua estril (dilucin 1/100) .

4. Colocar 1 ml de agua del segundo tubo de agua estril con agua del primer tubo estril con muestra de agua
analizada y agregarlo a los utlimos 3 tubos de fluorocult (dilucin 1/1000).

5. Tomar los nueve tubos preparados y colocarlos en la incubadora para determinar presencia de microorganismos
despus de 48 horas.

Observar los tubos en la maquina UV, asi como realizar prueba de reactivo de korvacks

Diagrama no. 2 Preparacin de las bacterias en diferentes medios

de cultivo.
INICIO
1. Tomar un asa bacteriolgica, Introducir muestra en un tubo con agua esteril agitando .
2. Agregar 1 ml del agua preparada (dilucion de leche) en una caja petri y agregar
medio de cultivo deseado haciendo este paso con cada cultivo MRS, chromocult, agar
papa dextrosa, manitol salt y recuento total.

4. Cerrar las cajas petri y esperar a que se lleven a cabo el crecimiento bateriologico.

FIN

Resultados
Tabla no. 1 Resultados de Prueba de Gas de Mtodo Multitubos de 3
Tubos y rayos UV.
PRUEBA DE GAS

Dilucin

Tubo 1

Tubo 2

Tubo 3

1/ 10

Positivo

Positivo

Positivo

1 /100

Positivo

Positivo

Positivo

1 /1000

Negativo

Negativo

Negativo

PRUEBA FISICA EN RAYOS UV.

Dilucin

Tubo 1

Tubo 2

Tubo 3

1/ 10

Positivo

Positivo

Positivo

1 /100

Positivo

Positivo

Positivo

1 /1000

Negativo

Negativo

Negativo

Tabla no.1 Resultados de los medios de cultivos en la practica lcteos

Observaci
n

PDA
El
agar
papa MACRO
dextrosa
usado
para determinar la
existencia
y
crecimiento
acelerado
de
hongos (mohos).
En
el
creado

medio

experimentalment
e se observo el
crecimiento de 25
colonias
blancas
de mohos.
Imagen 2. Fuente propia,
Observaci
n

Observaci
n

MRS
En la fotografia MACRO
tomada
experimental
se
puede
observar
lactobacilos
debido a que son
colonias
grises
blancas pequeas
en ek medio de
cultivo
selectivo
mrs.

Imagen 3. Fuente propia,

Flourocult
Se
observo
la MACRO
formacin de un
anillo color fuscia
el cual confirmo la
existencia de la
bacteria
escherichia coli

Imagen 4. Fuente propia,

Medio de Cultivo Chromocult
Observaci
n

El agar chromocult MAC

se utiliza para llevar RO
a
cabo
el
crecimiento
de
coliformes totales y
fecales.

En el medio se
determino mediante
la observacin la
formacin
de
colonias
rojas
y
amarillas verdosas,
correspondientes de
enterobacterias
y
Salmonella.

Ima
gen 5. Fuente propia,
Recuento total
Observaci
n

El
recuento
total MAC
muestra el numero RO
total de las bacterias
en
la
fotografa
experimentalmente
no se puede hacer
un conteo debido a
que existen muchos
puntos
poco
definidos.

Imagen 6. Fuente propia,

Manitol sal

Observaci
n

En la muestra se MAC
observo la bacteria RO
staphylococus,
debido a las colonias
de
las
mismas
amarillas que genera
la
existencia
de
coagulasa positiva,
se
observaron
7
colinias.

Imagen 7. Fuente propia,

Tabla no. 4 Resultados de Prueba con Reactivo de Kovacks de Mtodo
Multitubos de Tres Tubos.
Dilucin

Tubo 1

Tubo 2

Tubo 3

1/ 10

Positivo

Positivo

Positivo

1 /100

Positivo

Positivo

Positivo

1 /1000

Positivo

Positivo

Positivo

Tabla no. 6 Resultados finales de los tubos experimentales de

florocult.
Prueba

Resultado

NMP / Lmites de NMP

g
Inferior

Superior

Prueba de Coliformes
Totales

Positivo

<4

Prueba de Coliformes
Fecales

Positivo

<4

Prueba de Escherichia
coli

Positivo con
Turbidez

380

15

380

Prueba de Escherichia
coli

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.

Positivo con Anillo

<5

CONCLUSIONES
Se determino cualitativamente la presencia de Escherichia coli
en la crema analizada por una prueba con korvacks, adems del
numero mas probable del microorganismo.
Se determino cualitativamente la presencia de coliformes
totales en la crema analizada por medio de la turbidez, adems
del numero mas probable del microorganismo.
Se determino cualitativamente la presencia de coliformes
fecales en la crema analizada por medio de la prueba UV,
adems del numero mas probable del microorganismo.
Se determino la existencia de enterobacterias y Salmonella en
crema trebolac despus de una semana en Chromocult.
Se determino la existencia de mohos en crema trebolac
despus de una semana en el medio agar papa dextrosa.
Se determino la existencia de lactobacilos en crema trebolac
despus de una semana en el medio de cultivo MRS.
Se determino todas las bacterias en crema trebolac despus de
una semana en el medio de cultivo recuento total.
Se determino la existencia de staphylococus en crema trebolac
despus de una semana en el medio de cultivo Manitol salt.

Bibliografia
1. Alberts, Bruce; Bray, Dennis; Hopkin, Karen; et al. Introduccin a la
Biologa Celular. 2 Edicin [2004] Editorial Mdica Panamericana,
S.A.; Madrid, Espaa.
2. Prats, G. Microbiologa Clnica. 1 Edicin [2008] Editorial Mdica
Panamericana, S.A.; Madrid, Espaa