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Especificaciones Para Su Medicin Por Laboratorio Y

Estudio De Las Dislipidemias

Predicen enfermedad cardiovascular (colesterol)

Clasificacin de Fredrickson (electroforesis en gel)

National Cholesterol Education Program: Deteccin, evaluacin


y tratamiento de la hiperlipidemia

Transportan esencialmente todo el colesterol y lpidos


esterificados de la sangre.

Su parte proteica esta compuesta por protenas especificas


denominadas apolipoprotenas, que desempean papeles
importantes en el transporte de los lpidos, activando o
inhibiendo enzimas y/o fijando lipoprotenas a los receptores
de la superficie celular.

Existen 4 clases de lipoprotenas principales:


Quilomicrones (QM).
Lipoprotenas de muy baja densidad (VLDL).
Lipoprotenas de baja densidad (LDL).
Lipoprotenas de alta densidad (HDL).

Quilomicrones:
Partculas grandes, producidas por el
intestino, ricas en triglicridos exgenos,
pobres en colesterol libre y fosfolpidos.
Elevada proporcin lpido/protena son
menos densos en agua.
Su acumulacin genera una capa cremosa
flotante cuando se deja en reposo.
Apoliprotenas:
apoB-48, apoA-I y apoA-IV.
apoC-I, apoC-II, apoC-III, apoE.

Lipoprotenas de muy Baja Densidad (VLDL):


Pequeas, ricas en triglicridos de origen endgeno
(heptico).
Proporcin lpido/protena ms baja.
Colesterol y fosfolpidos 40%.
Protenas 10%.
apoB-100, apoC, apoE.
Amplio margen de tamao con variacin concomitante de la
composicin qumica.
Su acumulacin genera un plasma turbio.

Lipoprotenas de Baja Densidad: (LDL)


50% de la masa total de lipoprotenas plasmticas en
humanos.
Partculas ms pequeas.
No dispersan la luz o enturbian el plasma.
Colesterol estratificado representa casi la mitad de su
masa.
25% son protenas:
apoB-100, poca apoC.

Se han identificado sub-clasificaciones de LDL que difieren


en tamao y composicin qumica.

Lipoprotenas de Alta Densidad: (HDL)

Partcula pequea que consta de un 50% de protena.


apoA-I, apoA-II, aldo de apoC y apoE.
20% colesterol estratificado.
30% fosfolpidos.
Indicios de triglicridos.

2 subclases principales:
HDL2, HDL3. varan en cuanto a densidad, tamao,
composicin.

Lipoprotena Lp(a):
Intervalo de densidad: 1,055 1,085 kg/L.
27% protena [apoB, apo(a)], 65% lpido,
8% carbohidratos.
Movilidad electrofortica: pre-.
Protena pleomrfica (350-700 KDa).
Alto grado de homologa con el
plasmingeno.
Concentracin de <20mg/l a 1,500 mg/l.

Niveles aumentados con herencia


autosmica dominante de tipo
familiar.

Lipoprotena LpX:
Lipoprotena anormal que se
encuentra en pacientes con
enfermedad biliar obstructiva.
Lpidos >90% de su peso.
Protenas <10% de su peso.
apoC, albmina.
-VLDL:
Lipoprotena anormal que se
acumula en la
hiperlipoproteinemia III.
Resultado del catabolismo
defectuoso de la VLDL.

Apolipoprotena A (ApoA):

Componente proteico principal de la HDL.

ApoA-I

75% de la apoA de la HDL.


243-245aa, peso mol 29,000
Se sintetiza en hgado e intestino.
Activador de la enzima lecitin:colesterol-aciltransferasa (LCAT), la cual
esterifica el colesterol en el plasma.

ApoA-II
20% de la ApoA de la HDL.
154aa,peso 17,400.
Consta de dos pptidos idnticos unidos por puentes disulfuro.

Apolipoprotena B (ApoB):

Principal constituyente de la LDL (95%), la VLDL y QM (40%).


Grupo heterogneo de protenas, de las cuales la principal es la
ApoB-100.

Sintetizada por el hgado.


Cadena nica de 4536aa, peso 513,000.
Seal de reconocimiento que dirige al receptor de LDL.

ApoB-48, con peso de 241,000, es de origen intestinal y se haya en


los QM.

La sntesis de ambas protenas est dirigida por el mismo gen: ApoB.

Enzimas
Lipolticas:
Lipoproteinasa,
lipasa heptica de
triglicridos.

Lipoprotenlipasa

Lipasa heptica
de triglicridos:

Lecitn:colesterolaciltransferasa:

Derivada del tejido


adiposo, hidroliza
TGC de los QM y
VLDL.
Localizada en las
superficies de
clulas
endoteliales de los
capilares de tejido
adiposo,
esqueltico y
cardiaco.

(HTGL) secretada
por los hepatocitos.
Capacidad limitada
para hidrolizar TGC
en QM intactos y
VLDL.
Conversin de
VLDL e IDL a LDL.
Hidrlisis de
fosfolpidos y TGC
en las HDL.

Cataliza la
esterificacin del
colesterol,
promoviendo la
transferencia de c.
grasos desde la
lecitina al col,
dando lugar a la
formacin de
lisolecitina y ster
de colesterol.
Sintetizada en el
hgado, viaja
asociada a HDL.

Digestin de las grasas:


Lipasa lingual.
Intestino delgado emulsin de grasa por

cidos biliares.
Lipasa pancretica digestin de
triglicridos.

Absorcin:
Penetran la superficie de los enterocitos,

pasando a la linfa y de ah a la circulacin


general.

El anlisis de las lipoprotenas


del plasma requiere primero la
separacin de las distintas
clases de lipoprotenas y
segundo, la medicin de la
lipoprotena o del componente
lipoproteico de inters.

Las concentraciones de
lipoprotenas plasmticas
pueden cambiar como
resultado de una
variacin fisiolgica
normal.

Coeficiente de variacin fisiolgica intraindividual para colesterol es de 6.5%.


La variacin fisiolgica es, por lo tanto, mayor que el error analtico.

Ayuno de 12hrs a 14 hrs antes de la puncin.

Posicin sentada.

Torniquete por no ms de 1 min.

Suero o Plasma (EDTA).

Refrigerar 4C, Congelacin -20C.

Ayuno de 12- 14 Hs. (Es por los quilomicrones, es anormal su


presencia despus de este tiempo)
El ayuno menor no afecta los valores de colesterol.
Suero o Plasma (EDTA, NO Heparina)
Refrigerar 4 c , Congelacin -20c
No ingesta de drogas, medicamentos, Enf. Febriles.
Post-Infarto, etc.

No esterificados (30%), esterificados (70%).

Mtodos Qumicos:
Abell-Kendall;
KOH + Alcohol + ter de petrleo + Ac. Sulfrico Anhidro.
Reactivo de Lieberman-Buechard
(Acetico anhidro + ac. Sulfurico cloruro ferrico + ac. Sulfurico Ac. p-Tuoleno
Sulfonico ) en OH puro.

Mtodos Enzimticos:

Reacciones donde se hidrolizan los steres de colesterol.


El grupo 3-OH del col es oxidado.

Absorbancia 500 nm (560 nm en el Synchron)


Menor interferencia.
Bilirrubina, turbidez de la muestra, genera interferencias.
CV 1-2%. Calibradores sricos.

Hidrlisis de TG con la medicin del glicerol liberado.

Mtodo qumico:
Extraccin de cloroformo, seguido por cromatografa con cido silcico para aislar TG.
Glicerol separado mediante saponificacin y oxidado con peryodato de sodio.
El peryodato producido se mide mediante reaccin con una solucin de c cromotrpico

con c sulfrico cromforo rosa.

Mtodo enzimtico:
Directo en plasma o suero.
Hidrlisis de TG. Glicerol formado se convierte

en glicerofosfato, que se mide con una


reaccin.
El
NADH
formado
se
mide
con
espectrofotometra.

Esfingomielina
Fosfatidilcolina

Ictericia obstructiva, abeta o hipolipoproteinemia, enfermedad


de Tangier.

Determinacin mediante la medicin de fosforo de los


fosfolpidos.

Se extraen lo lpidos de la muestra y se oxidan hasta convertir el


fsforo en fosfato inorgnico, que se determina por colorimetra.
Etanol-dietilter, cloroformo-metanol.

Mtodo enzimtico:
WAKO Pure Chenmical Industries:

la lecitina, esfingomielina y
lisolecitina son hidrolisadas
usando fosfolipasa D, y la colina
liberada se oxida.

Mtodos actuales:

Problema
principal es la
separacin de
las diversas
clases de
lipoprotenas.

Ultracentrifugacin analtica (mtodo de referencia).


Adsorcin.
Filtracin en gel.
Afinidad cromatogrfica.
Electroforesis.
Precipitacin de polianines.
Inmunoqumica.
Combinacin de diversos mtodos.

Mtodos de Ultracentrifugacin

Se sirve de las diferentes densidades de las lipoprotenas.


1,006kg/l QM, VLDL flotan, LDL, HDL sedimentan.
1,063kg/l VLDL y LDL flotan.
1,21kg/l VLDL, LDL Y HDL flotan.

Las
lipoprotenas
pueden ser
separadas de
otras
protenas
plasmticas y
a la vez entre
s

1.

Se aslan las lipoprotenas del plasma por UC


preparatoria.

2.

Centrifugacin analtica a diferentes


densidades.

3.

Las Lp migran (dependiendo de su densidad).

4.

Su movimiento y concentracin se mide


utilizando la ptica de Schlieren

5.

(concentracin segn los cambios de refraccin).

Las concentraciones se expresan en trminos de


masa total.

Mtodos Electroforticos

Medio usado: gel de agarosa.

Velocidad, sensibilidad, resolucin.

QM permanecen en el origen. Las dems migran


a velocidades que aumentan en orden de HDL >
VLDL > LDL, y se denominan de acuerdo a su
movilidad:

HDL: -lipoprotenas.
LDL: -lipoprotena.
VLDL: lipoprotena pre-.

Colorantes para lpidos: rojo-O al aceite, grasa


roja 7B, negro sudn B.

DETERMINACIN DE HDL-COLESTEROL:

Se basa en la precipitacin polianinica con cationes


divalentes de los Quilimicrones, VLDL y LDL.
Se agrega al suero Ac. fosfotnsgtico, Cloruro de Magnesio

Manganeso, Heparina.
Del sobrenadante se determina el colesterol, el cual corresponde al
HDL-colesterol.

Los procedimientos actuales se basan en:


Inmunoseparacin.
Enzima modificada con polietilenglicol.
Polmero sinttico.

Mtodos para las mediciones de LDL-colesterol:

Ultracentrifugacin.

Precipitacin qumica.
Inmunoprecipitacin.
Reactivo que inhibe las otras Lp.

Frmula de Friedewald.

LDL-C = Col Total HDL-c TGC/5

LDL-C = Col Total HDL-c TGC/2.175


No requiere ultracentrifugacin.

Mtodos directos:

Analizadores qumicos
automatizados.

Las enfermedades cardiovasculares constituyen la primera causa de


muerte en Mxico

Entre los factores de riesgo se encuentra la hipercolesterolemia, cuya


incidencia ha ido en aumento por el consumo de grasas saturadas, el
sedentarismo y otros factores de riesgo mayores como el tabaquismo, la
diabetes y la hipertensin arterial

Conjunto de enfermedades asintomticas causadas


concentraciones anormales de las lipoprotenas sanguneas

por

El riesgo cardiovascular es directamente proporcional a la concentracin


de colesterol.
Los individuos situados por encima del intervalo de normalidad, tienen
riesgo mayor.
El Adult Treatment Panel of the National Cholesterol
Education Program public las pautas para el
reconocimiento y tratamiento de la hipercolesterolemia
en adultos, que incluyen una redefinicin de los niveles
de colesterol, LDL-c y HDL-c, en trminos de riesgo
cardiovascular.

Clculo del ndice Aterognico:


Col/HDL

COLESTEROL TOTAL / HDL-C

LDL-COLESTEROL / HDL-C

LDL/HDL

Promedio
normal

5.0

4.4

3.5

3.2

riesgo

3.4

3.3

1.0

1.4

Riesgo >2

9.6

7.1

6.2

5.0

Riesgo >3

13.5

11.0

7.9

6.1

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