INFLUENCIA DE LOS AGENTES QUIMICOS EN EL CRECIMIENTO

MICROBIANO
UNIVERSIDAD DE CARTAGENA
Facultad de Ingeniera
Programa de Ingeniera de Alimentos
Cartagena de Indias
18 de septiembre del 2014
D. Aparicio 1; J. Arrieta2; G. Agudelo2; B. Mercado,
1. Docente Universidad de Cartagena; 2.Estudiantes Universidad de Cartagena
RESUMEN

En la prctica de laboratorio se realizaron procesos de siembra de microorganismos el cual

se hizo por medio de efecto de temperatura con diferentes bacterias las cuales son
escherichia coli, coliformes fecales, Staphylococcus, y se adicionaron a tres tubos con caldo
nutritivo, para ser sometidos a diferentes temperaturas con diferente tiempo, luego se
encubaron a 37C, para finalmente observar su turbidez, la otra siembra se realiz en
accin de desinfectantes, se tom un agar nutritivo con las bacteria ya mencionadas, luego
con el asa se introduce en el caldo nutritivo para obtener la turbidez despus se marcaron
tres tubos y adicione en cada uno de ellos los desinfectantes de la suspensin bacteriana se
adiciono, 0,5 ml a cada tubo con el respectivo desinfectante. Se hizo la siembre de cada
tubo en una caja de Petri con agar nutritivo fraccionada en 3 y debidamente rotulada; para
observar si hubo o no crecimiento microbiano
PALABRAS CLAVES: temperatura, desinfectantes, crecimiento microbiano, bacterias,
agar nutritivo.
ABSTRACT: The following planting practice processes which took organisms through
temperature effect with different bacteria which are Escherichia coli, fecal coliforms,
Staphylococcus were performed, and added to three tubes with nutrient broth, to be
subjected to different temperatures with different times, then they encubaron at 37 C,
finally observing the turbidity, the other planting is done in action of disinfectants, a
nutrient agar was made with the bacteria mentioned above, then the handle is introduced
into the nutrient broth for turbidity were scored after three tubes and add to each
disinfectants of the bacterial suspension was added 0.5 ml to each tube with the respective
disinfectant. The sow from each tube was placed on a Petri dish with nutrient agar in 3
installments and properly labeled; to see whether or not there was microbial growth.
KEYWORDS: temperature, disinfectants, microbial growth, bacteria, nutrient agar.

I.

INTRODUCCION

CRECIMIENTO MICROBIANO.
Entendemos
por crecimiento
microbiano el aumento del nmero de
microorganismos a lo largo del
tiempo. Por tanto, no nos referimos al
crecimiento
de
un
nico
microorganismo (ciclo celular), sino
al demogrfico. El crecimiento de una
poblacin es el aumento del nmero
de clulas como consecuencia de un
crecimiento individual y posterior
divisin
CRECIMIENTO MICROBIANO EN
MEDIO SLIDO
Las fases, parmetros y cintica de
crecimiento discutidas para el caso de
los cultivos lquidos se presentan
tambin en cultivos slidos. La
cintica de crecimiento, en este caso,
se puede estudiar siguiendo la
evolucin del nmero de clulas
viables por unidad de superficie o por
unidad de masa.
Cuando una clula aislada e inmvil
comienza a crecer sobre un substrato
slido, el resultado del crecimiento al
cabo del tiempo es una colonia. Por
consiguiente, se denomina unidad
formadora de colonia (UFC) a una
clula bacteriana viva y aislada que si
se encuentra en condiciones de
substrato y ambientales adecuadas da
lugar a la produccin de una colonia
en un breve lapso de tiempo. Si el
nmero inicial de bacterias por unidad
de superficie es muy alto, la
confluencia de las colonias da lugar a

lo que se llama un csped cuando se

realizan los cultivos en placas de
laboratorio.
En el caso de microorganismos
mviles (deslizantes) o en el de los
hongos filamentosos que tienen
un crecimiento trfico no se producen
colonias aisladas sino formaciones
ms difusas o miceliares.
CONCEPTO DE MUERTE DE UN
MICROORGANISMO
Desde
el
punto
de
vista
microbiolgico, un microorganismo
muere cuando pierde de forma
irreversible la capacidad de dividirse.
Como consecuencia de esta prdida,
no se produce aumento en el nmero
de microorganismos y, por tanto, no
hay crecimiento. Sin embargo, un
microorganismo puede estar muerto
desde
el
punto
de
vista
microbiolgico
y
continuar
desarrollando
una
actividad
metablica que se traduzca, por
ejemplo, en liberacin de toxinas. Por
otra parte, hay que considerar que la
capacidad
de
multiplicacin
(crecimiento) de un microorganismo
puede verse transitoriamente afectada
por lesiones o por las condiciones
fsicas o qumicas del entorno. En
estos casos, podramos considerar
como muertos microorganismos que
pueden reanudar su crecimiento si las
condiciones son de nuevo.
Existen ciertas sustancias qumicas
que influyen negativamente sobre las
bacterias, pudiendo ejercer dos tipos
de efectos diferentes:

bacteriostticos: cuando impiden el

crecimiento bacteriano;
Bactericidas:
cuando
(matan) las bacterias.

destruyen

En general, sino slo nos referimos a

las bacterias, sino a cualquier tipo de
microorganismos,
hablamos
respectivamente de agentes microbios
taticos y microbicidas. Ahora bien,
para una misma sustancia qumica, la
lnea de demarcacin entre un efecto
microbiosttico y otro microbicida
depende muchas veces de la
concentracin de dicha sustancia y del
tiempo durante el que acta.
El
crecimiento
de
los
microorganismos
se
encuentra
influenciado por varios factores. Entre
ellos los ms importantes son la
aireacin y la temperatura. En cuanto
a este ltimo, la Temperatura, los
microorganismos tienen un margen de
temperaturas en el cual pueden crecer.
Este margen viene delimitado por
la temperatura
mxima de
crecimiento, a partir de la cual no
pueden vivir e incluso mueren;
la temperatura mnima por debajo de
la cual no pueden crecer aunque
generalmente
no
mueren;
y
latemperatura ptima a la cual
ofrecen el mejor crecimiento.
Atendiendo a este margen de
temperatura de crecimiento, los
microorganismos se clasifican en:
Hipertermfilos: Su
temperatura
ptima se encuentra por encima de los
80C. Muchos de ellos son arqueas.
Termfilos: Su temperatura ptima se
encuentra entre 45-70C. Suelen ser
microorganismos de vida libre

Mesfilos: Su temperatura ptima se

encuentra entre los 25-45C. Incluye
microorganismos
patgenos
y
comensales del
hombre y
animales de sangre caliente y algunos
de vida libre.
Psictrofos: La temperatura ptima
de los microorganismos de este grupo
est por debajo de los 25 30C
incluye microorganismos de vida
libre.
Psicrfilos: Su temperatura ptima de
desarrollo se encuentra entre los 12
15C.
II.

MATERIALES

Bacterias
o
cepas
conocidas (bacillus)
Caja de agar nutritivo con
bacterias en estudio.
12 tubos de caldo BHI o
Nutritivo
12 cajas de agar nutritivo o
plate count
1 tubo con 1 mL de
hipoclorito (Clorox)
1 tubo con un mL de etanol
70%
1 tubo con 1 mL de fenol
(creolina)
Pipetas de 1 mL
Pipeteadores
Gradillas
Mechero
Estufa
Termmetro
Bao de mara.
PROCEDIMIENTO
Efecto De La Temperatura:
- Tomar una asada de bacillus
spp y adicionarla en tres
tubos con caldo nutritivo, y

a, b y c, hacer lo mismo con la

bacteria
de
la
caja
desconocida
o
en
seguimiento. Incube los tubos
a 35 grados por 24 horas,
haga la lectura por la
aparicin de turbidez.
Accin De Los Desinfectante:
-Tomar la caja de agar
nutritivo con la bacteria
desconocida,
aislada
por
usted tome una asada e
introdzcala en caldo nutritivo
hasta obtener turbidez, luego
marque tres tubos y adicione
en cada uno de ellos 2 tipos
de desinfectantes. De la
suspensin
bacteriana
adicione, 0,5 ml a cada tubo
con
el
respectivo
desinfectante 1ml por tubo.
Una
vez
realizado
el
tratamiento
siembre
una
asada de cada tubo en una
caja de petri con agar
nutritivo fraccionada en 3 y
debidamente rotulada. Realice
siembra
en
cada
caja
especficamente
en
cada
cuadrante segn el tiempo
estipulado de contacto de la
bacteria con el respectivo
agente qumico. Incube las
cajas a 35 grados por 24
horas.

-Influencia de temperatura

Temperatura 60C
III.

RESULTADOS

-ACCION DESINFECTANTE

de
temperatura
efectuadas
demostrando que esta es de gran
importancia para el crecimiento
microbiolgico, debido de que con
esto se puede producir el
crecimiento o por el contrario
destruir la bacteria de acuerdo a su
condicin.
La accin desinfectante es un
mecanismo de mayor importancia
ya que esta puede establecer el
control del crecimiento microbiano
segn el producto qumico utilizado
ya que cada bacteria responde de
manera diferente a cada compuesto;
como en el caso del fenol que evito
el crecimiento de la escherichia coli
y los coliformes fecales, mientras en
el estaphylococus se redujo el
crecimiento en presencia de etanol.

Temperatura Ambiente
IV.

ANLISIS DEL RESULTADO

De acuerdo a los datos observados
se puede establecer que el efecto
desinfectante no siempre reacciona
aceptablemente para el control
microbiano, ya que al hacer una
observacin a las muestras se
presenta que la escherichia coli y
el staphylococus tuvo mayor
presencia de microorganismos
cuando se encontraba en la
disolucin de hipoclorito a
diferencia de los coliformes fecales
que
no
presentaron
este
crecimiento. en cuanto a la
influencia de la temperatura se
puede establecer que a mayor
temperatura mayor crecimiento de
microorganismos , debido a que la
muestra presento mayor turbidez
cuando se encontraba a una
temperatura de 60C, que en
temperatura ambiente .

V.

CONCLUSION
Esta prctica determino la influencia
de los agentes en el crecimiento
microbiolgico demostrando su
afectacin debido a las condiciones

VI.

PREGUNTAS

1. Cul temperatura permiti

eliminar
por
completo
el
microorganismo estudiado o al menos
se observ menos turbidez? En caso
que no haya podido eliminarse por
completo, qu otro mtodo fsico
recomienda
utilizar?
RTA:
la
temperatura que elimino las bacterias
fue la de 100C que fue cuando el
agua estaba hirviendo.
2. Cul de los microorganismos
utilizados resistira ms la accin de
la luz Ultravioleta y porqu? Los
microorganismo que mas resistieron
fueron la E. coli y los coliformes
fecales gracias a la doble capa de
lipdica que estos tienen.

3. Cul de los desinfectantes

utilizados
elimin
mejor
al
microorganismo utilizado y porqu?

[2] Brock, D; Madigan, M; Martinko, J;

Parker, J. (2004) Biologa de los
Microorganismos, M. Prencite Hall.

RTA: el desinfectante mas efectivo

para las bacterias utilizadas es el fenol
ya que este producto acta
desnaturalizando las protenas y
alterando las membranas celulares

[3] A. Forbes, Betty; Daniel F. Sahm,

Alice
S.Weissfeld. BAILEY&
SCOTT'S
Diagnostic
Microbiology (Tenth Edition edicin).

VII. BIBLIOGRAFIA
[1] Acevedo, F; Gentina, JC; Illanes,
A. (2002). Fundamentos de Ingenieria
Bioqumica, Ediciones Universitarias
deValparaso. PUCV.