UNIVERSIDAD COLEGIO MAYOR DE CUNDINAMARCA

65 Aos
VICERRECTORA ACADMICA

2- TCNICAS DE INTERACCIN SECUNDARIA

2 . AGLUTINACIN
2.1 OBJETIVO.

El estudiante debe entender conceptos generales y bsicos para la ejecucin de

reacciones de aglutinacin entre antgeno y anticuerpo.
2.1 OBJETIVOS ESPECIFICOS
1. Diferenciar entre aglutinacin directa e Indirecta
2. Saber cul es aplicacin prctica de estas reacciones.
2.2 MARCO TEORICO.
Aglutinacin es La aglomeracin de antgenos no solubles, ocasionada por
anticuerpos especficos contra antgenos de superficie o adsorbidos a un soporte,
tiene como resultado la formacin de grumos que son fcilmente visualizados. las
ms empleadas son las tcnicas de aglutinacin directa, en la que una clula que
porta el antgeno en su superficie, es aglutinada directamente por anticuerpos
contra este antgeno y de aglutinacin indirecta o pasiva, en la cual se dispone de
partculas inertes como soporte de la reaccin. El soporte universal es el ltex, al
que se le fijan antgenos solubles que son unidos por anticuerpos especficos.
. REACCIONES DE AGLUTINACION

2.2.1 AGLUTINACION DIRECTA

Es s aquella en que un antgeno celular o de partculas insolubles es aglutinado
directamente por el anticuerpo presente en el suero.
2.2.1. A. IDENTIFICACIN DE GRUPOS SANGUINEOS
MARCO TEORICO
La aglutinacin se produce por la actuacin de los anticuerpos (Acs) del suero o
aglutininas sobre los antgenos (Ags) de los glbulos rojos o aglutingenos.
De acuerdo a la existencia de los diversos aglutingenos y aglutininas los
individuos pueden clasificarse dentro de 4 grupos sanguneos bsicos (O, A, B
AB).
Grupo O: este grupo no tiene aglutingenos pero si 2 aglutininas, alfa y beta.
Grupo A: este grupo tiene aglutingeno A y aglutininas beta.
Grupo B: este grupo tiene aglutingeno B y aglutininas alfa.
Grupo AB: grupo ambos aglutingenos y ninguna aglutinina.

FACTOR Rh:
En los hemates humanos existe un aglutingeno denominado factor Rh; su
existencia se puso de manifiesto por la aglutinacin producida en presencia de
aglutininas obtenidas al inyectar a conejos o cobayos con hemates de una
variedad de mono Rhesus (Macaca Mulatta). La aglutinacin se produce en el 85
% de los hemates humanos constituye el grupo de los denominados Rh positivos.
El 15% restante, que no posee ese aglutingeno, no produce aglutinacin y
conforma el grupo de los Rh negativos.

LABORATORIO
AGLUTINACION DIRECTA. Determinacin de grupos sanguneos
MATERIALES Y REACTIVOS
- Equipo de venopuncin.
- tubo tapa lil
- Laminas de vidrio
- pipetas pasteur
- palillos.
- Toallas absorbentes
- Antisuero para identificacin de grupos sanguneos
i- Hipoclorito de Sodio a 5.000 p p m
PROCEDIMIENTO
1- Con su equipo de venopuncin tome una muestra de sangre venosa a su
compaero
2- Coloque la sangre extrada en un tubo tapa lila
3- Coloque una gota de sangre total en cada lamina (3 gotas)
4- A la primera gota agregue una gota de anti A, a la segunda de anti B y a la
tercera de anti D.
5- Revuelva con un palillo cada gota
6- agite manualmente por tres minutos
7- observe la Aglutinacin.

RESULTADOS Y DISCUSIN.
- Describa los resultados obtenidos.
- Esquematice lo que hizo en la prctica.

BIBLIOGRAFIA:
De referencia
ABBAS, A. Cellular and Molecular Immunology. 3a. ed Philadelphia: Saunders
Company, 2004.
MARGNI R. Inmuinologa e inmunoqumica. Ed Panamericana. La inmunologa en
el diagnstico clnico Pontificia Universidad Javeriana
ROJAS, W. Inmunologa. 13ava. ed. Corporacin para las investigaciones
Biolgicas. Colombia.2004
REGUEIRO, J. Inmunologa e Inmunopatologa. Ed Panamericana. Madrid
Espaa. 2003.
KUHY. Immunology. 5. Ed. MAC. USA. 2002.
FIORENTINO, S. Inmunologa en el Laboratorio Clnico. 1. Ed. Universidad
Javeriana. 1999.
ROITT,B. Inmunologa. Harper y Row Publisher,2003.
RUBIO, F. Inmunologa: aplicaciones prcticas en hematologa y microbiologa
Madrid, 1995.
MARGNI, R. Inmunologa e inmunoqumica 5. Ed. Mdica Panamericana. Buenos
Aires, 1996.
Complementaria
REVISTAS: Journals of Immunology, J. Immunology and allergy,
J.
Immunologycal methods, J. of microbiology, J. Biochemistry, Science, Nature,
Investigacin y Ciencia.

2.3.1 AGLUTINACION INDIRECTA

MARCO TEORICO

Reaccin de interaccin secundaria en la que e detectan anticuerpos por

medio de un antgeno especfico unido a un soporte. Los soportes utilizados
pueden ser inertes como partculas de ltex o clulas como glbulos rojos.

PARTICULA
INERTE

ANTIGENO

PARTICULA
ANTIGENO

ANTICUERPO

Reaccion de aglutinacin indirecta

REACCION DE AGLUTINACION POR AG -AC

LA AGLUTININA REACCIONA CON UN AGLUTINOGENO QUE

HA SIDO TRANSFERIDO PASIVAMENTE A LA SUPERFICIE DE UNA
PARTICULA VIRAL O INERTE

PROCESO EN EL CUAL LAS PARTICULAS SON RECUBIERTAS CON

AGLUTINOGENOS QUE NO LES SON PROPIOS

2.6 2. PRUEBAS DE APLICACIN CLINICA. Reacciones de aglutnacion.

2.6. 2. a. PROTEINA C REACTIVA:
La protena C reactiva fue descrita por primera vez por Tillet y francis en 1930.
Estos autores comprobaron que los sueros de pacientes afectados de diversos
estados infecciosos en fase aguda.
Posteriormente se demostr que la protena C reactiva se encuentra normalmente
en el suero de individuos sanos en concentraciones muy bajas, no superando en
la mayora de los casos la tasa de 6 mg/L.
La elevacin de la protena C reactiva se produce de forma inespecfica en
diversos procesos de agresin tisular, como por ejemplo estados infecciosos,
fiebres reumticas, artritis reumatoidea, infarto del miocardio tumores malignos,
quemaduras, etc.
Latex

anti-PCR

PCR

latex con anti PCR

PCR en suero

PRINCIPIO.
El reactivo latex PCR es una suspensin de prticulas de ltex de poliestireno de
tamao uniforme sensibilizadas con un suero especfico anti PCR humana. Si se
pone de manifiesto la reaccin antgeno- anticuerpo. (PCR - IgG anti PCR). Si
debido a la presencia de protena C reactiva en el suero tiene lugar dicha reaccin,
la suspensin de latex pierde su aspecto uniforme haciendo evidente una clara
aglutinacin.
LABORATORIO
MATERIALES Y REACTIVOS
-

Reactivo latex PCR. Suspensin de prticulas de ltex de poliestireno

sensibilizadas con IgG anti-PCR en un tampn.

Control positivo. Suero humano diluido que contiene ms de 10 mg/l de

proteina C reactiva.

Control Negativo: Suero humano diludo que contiene menos de 1 mg/L de

protena C.
solucin salina

MATERIAL
-Pipetas Automticas
-Agitador de Manzini
-Pipetas pasteur
-placas microtituladoras

PROCEDIMIENTO
1-Dejar que el reactivo y los controles alcancen la temperatura ambiente.
(20 c a 30c)
- Agitar Suavemente el frasco para re-suspender las partculas de latex.
- En una placa de reaccin
- Agregar 25 ul de suero, control positivo y control negativo en cada pozo
- Agregar 25 ul de reactivo en cada pozo, sobre cada muestra
- Agitar el portaobjetos con un suave movimiento de rotacin por dos
minutos.
- Observar la presencia o ausencia de aglutinacin. Si observa aglutinacin
repita el procedimiento con la dilucin , y asi sucesivamente hasta la
dilucin que ya no observa aglutinacin, informe el resultado en diluciones
RESULTADOS
-La presencia de aglutinacin indica un contenido de protena C reactiva igual o
superior a la dil 1/1 (6 mg/)l
- la Ausencia de aglutinacin indica un contenido de proteina C reactiva en el
suero inferior a la dil 1/1 (6 mg/L)
NOTA: (revise los insertos que vienen en cada kit del reactivo
correspondiente)
EL MISMO PROCEDIMIENTO SE REALIZA CON FATOR REUMATOIDEO Y
ANTI ESTREPTOLISINAS.
TALLER.
-Investigue el principio y la importancia clnica de estos otros dos procedimientos.
- Describa lo observado
- Esquematice cada uno de los procedimientos

BIBLIOGRAFIA:
De referencia
ABBAS, A. Cellular and Molecular Immunology. 3a. ed Philadelphia: Saunders
Company, 2004.
MARGNI R. Inmuinologa e inmunoqumica. Ed Panamericana. La inmunologa en
el diagnstico clnico Pontificia Universidad Javeriana
ROJAS, W. Inmunologa. 13ava. ed. Corporacin para las investigaciones
Biolgicas. Colombia.2004
REGUEIRO, J. Inmunologa e Inmunopatologa. Ed Panamericana. Madrid
Espaa. 2003.
KUHY. Immunology. 5. Ed. MAC. USA. 2002.
FIORENTINO, S. Inmunologa en el Laboratorio Clnico. 1. Ed. Universidad
Javeriana. 1999.
ROITT,B. Inmunologa. Harper y Row Publisher,2003.
RUBIO, F. Inmunologa: aplicaciones prcticas en hematologa y microbiologa
Madrid, 1995.
MARGNI, R. Inmunologa e inmunoqumica 5. Ed. Mdica Panamericana. Buenos
Aires, 1996.
Complementaria
REVISTAS: Journals of Immunology, J. Immunology and allergy,
J.
Immunologycal methods, J. of microbiology, J. Biochemistry, Science, Nature,
Investigacin y Ciencia.