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1. Introduo .......................................................................................................................... 3
1.1.Objectivos ........................................................................................................................ 3
2. Mtodos ou tcnicas de estudo da clula............................................................................. 4
2.1. Tcnicas para observao ao microscpio ptico ............................................................. 4
2.1.1. Tcnicas de preparao citolgica ................................................................................ 6
3. Tcnica par observao ao Microscpio eletrnico ............................................................. 7
4. Outros mtodos de estudo da clula .................................................................................... 9
4.1. Fracionamento celular ..................................................................................................... 9
4.2. Uso de substncias radioativas ...................................................................................... 10
4.2.1. Radioautografia .......................................................................................................... 10
5. Concluso ........................................................................................................................ 11
6. Referncias Bibliogrficas................................................................................................ 12
1. Introduo
O presente trabalho surge no mbito da Cadeira de Biologia Celular e Molecular, tendo como
tema mtodos ou tcnicas de estudo da clula. A clula, o objeto de estudo da Citologia, pode
ser estudada sob diversos aspectos: podemos procurar conhecer sua forma e a de seus
constituintes, a natureza qumica desses constituintes e seu modo de funcionamento. Em
outras palavras, essas investigaes so denominadas morfolgicas, qumicas ou bioqumicas
e fisiolgicas e a cada uma delas correspondem mtodos de estudo particulares.
De uma maneira geral, podemos dizer que, devido s suas pequenas dimenses, um estudo
detalhado da clula e de seus constituintes com a vista desarmada virtualmente impossvel,
por isso, o citologista obrigado a se utilizar de instrumentos de aumento para a observao
conveniente da clula. Como em geral os constituintes celulares tm muito pouco contraste, o
citologista obrigado a lanar mo de certos artifcios para contornar esse problema, a
alternativa mais lgica criar, artificialmente, este contraste, no nvel de certas estruturas
celulares
1.1.Objectivos
Geral:
Especficos:
1.2. Metodologia
Para a elaborao do presente trabalho recorreu-se a consultas bibliogrficas que esto citadas
na ltima pgina do trabalho.
b) Fixao
Para ROBERTIS & HIB (2006:358), a fixao do material essencial para preservar a
morfologia e a composio qumica dos tecidos e das clulas. Consiste na morte destas de
maneira tal que as estruturas que tinham em vida conservam-se com um mnimo de artifcios.
AMABIS & MARTHO (2004:96) afirmam que o efeito de fixao obtido mergulhando-se
as clulas em lquidos fixadores (formol, acido actico, lcool, etc.) que tm propriedade de
coagular as protenas do material preservando o espectro geral das clulas e das estruturas
celulares.
Estes agentes so utilizados em tcnicas citolgicas para inibir a actividade enzimtica da
clula, para impedir a actividade e a proliferao das bactrias, para endurecer as clulas de
modo a que resistam melhor s etapas seguintes da tcnica citolgica e para aumentar a
afinidade das estruturas celulares pelos corantes citolgicos, tornando-as assim mais
facilmente corveis, mantendo-lhes, tanto quanto possvel, a sua morfologia e estrutura.
A escolha do fixador adequado depende do estudo que se deseja realizar. Por exemplo, para
ncleo utilizam-se os fixadores cidos e para o exame da atividade enzimtica no citoplasma
emprega-se ou a acetona, o formaldedo ou o glutaraldedo, que produzem uma desnaturao
mnima e preservam muito os sistemas enzimticos, (ROBERTIS & HIB, 2006:358).
Corte manual
Esta tcnica usada perante material biolgico com clulas firmemente unidas entre si,
necessrio corta-los em fatias finas, processo denominado por cortes histolgicas.
possvel cortar manualmente certos matrias vegetais relativamente rgidos (caule, razes,
folhas, etc.), com uma lmina de barbear e observa-los fresco, com uma pequena gota de
gua entre a lamina e lamnula.
b)
Esfregao
Se o material biolgico constitudo por clulas isoladas ou fracamente unidas entre si pode
se simplesmente espalha los sobre a lmina de vidro. A tcnica de esfregao pode tambm ser
utilizada para observar clulas de revestimentos mucosos, as quais se soltam com certa
facilidade.
c)
Esmagamento
Est tcnica usada no caso das clulas frouxamente associadas, ou as partes de moles de
animais ou de vegetais. O material j fixado e corado colocado entre uma lmina em uma
lamnula de vidro e esmagado pela presso suave do dedo polegar. Em alguns casos as
matrias pode ser aquecido previamente para fazer com que as clulas se separem com mais
facilidade.
O estudo microscpico detalhado das clulas requer que elas sejam cortadas em fatias
realmente finas, e para tal usa se um aparelho chamado micrtomo. Para isso, os materiais
biolgicos so submetidos a tratamentos que endurecem as clulas e facilitam o corte.
O mtodo mais comum para enrijecer materiais biolgicos chamado incluso e consiste em
mergulhar o material biolgico em uma substancia inicialmente liquida que depois endurece,
envolvendo o completamente.
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5. Concluso
Findo o trabalho conclui-se que a observao nas estruturas biolgicas foi dificultada pelo
fato de as clulas serem muito pequenas e transparentes. Mais difcil ainda foi descobrir sua
organizao molecular e estabelecer de que maneiras as molculas atuam para determinar as
estruturas e as funes celulares. Desta forma foram descritos os princpios gerais das
microscopias ptica e eletrnica, alguns mtodos especiais que tomam possvel o estudo da
clula viva, diversos mtodos Microscpicos, radio autogrficos e fracionamento celular, e as
tcnicas empregadas na anlise molecular das clulas.
Porm, estudos morfolgicos ou morfo-fisiolgicos da clula comea normalmente com o
emprego do microscpio ptico, mais corretamente denominado de microscpio fotnico (por
se utilizar da luz como fonte de formao de imagens) ou microscpio composto (pode ser
constitudo por dois sistemas de lentes sobrepostas: a objetiva e a ocular). Este instrumento
pode ser considerado como a ferramenta bsica e indispensvel de todo o citologista.
Verificou-se tambm que o poder de resoluo (a capacidade de o instrumento fornecer
imagens diferentes de pontos muito prximos) do microscpio eletrnico to alto que a
imagem da objetiva pode ser aumentada pela ocular em uma proporo muito maior que a
obtida com o microscpio ptica. Outra diferena com o microscpio ptico que o
eletrnico oferece uma maior profundidade de foco. Por isso, o citologista obrigado a
utilizar instrumentos de aumento para a observao conveniente da clula.
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6. Referncias Bibliogrficas
1) AMABIS, Jos Mariano & MARTHO, Gilberto Rodrigues. Origem da Vida Citologia
e Histologia, Reproduo e Desenvolvimento. 2aed. So Paulo, Editora Moderna,
2004.
2) JUNQUEIRA, L. C. & CARNEIRO, J. Biologia celular e molecular. 6ed. Rio de
Janeiro RJ: Guanabara Koogan, 1997.
3) ROBERTIS, Eduardo M. F. & HIB, Jos. Bases da Biologia Celular e Molecular.
4aed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2006.