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Los servicios de gentica clnica brindan la labor de diagnstico y asesoramiento gentico. Si bien y por fortuna son cada
da ms las enfermedades o condiciones diagnosticadas por el
509
2. Una
REFERENCAS BIBLOGRFICAS
K Resta RG, Doyle DL: Standardized human
pedigree nomenclature: update and assessment of the
Bennett RL: The practical guide to the genetic family history. New
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2OO4;76:1-10.
RESPUESTA A LA EVALUACIN
l: c;2:
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CITOGENETICA
Dr. Alfredo Corona Rivera
pediatra, no debe omitirse el aval diagnstico y el asesoramiento gentico brindado por el mdico genetista. Si no se
cuenta con el diagnstico debe ser enviado el caso para que
se inicie o contine el proceso de diagnstico.
EVALUACIN
OBJETIVOS ESPECFICOS
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510
(Unidad 16)
tNTRODt.'CCtON
El objeto de estudio de la citogentica son los cromosomas
humanos, en particular el estudio de su impacto clnico y
genticg as como su estructura y funcin, en las diferentes
etapas del ciclo celular. El conocer los complementos cromosmicos normales y anormales es indispensable para el diagnstico de los sndromes genticos debidos a aberraciones
cromosmicas [cromosomopatas) y sndromes de inestabilidad cromosmica, o tambin como biomonitores de dao
gentico, entre otros. El.complemento cromosmico se conforma por primera yez en el cigoto y se mantiene, de forma
habitual, en todas las clulas del individuo, por 1o que su
estudio compete a la denominada citogentica constitucional. De manera alternativa, existe la citogentica de las alteraciones adquiridas que estudia los hallazgos citogenticos
limitados a las clulas de cncer (ver apartado de Aspectos
genticos del cncer infantil).
ffiffi,
Duplicacin en
proceso (2nl2c
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-Quplicado
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2nl2c
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Sencillo
'a3ff,,"
Descompactado (2nl2c)
Ciclo celular
Desde el punto de vista gentico todas las clulas nucleadas
del cuerpo poseen en comn un par de genomas [uno de origen paterno y otro de origen materno), mismos que se mantienen a 1o largo del ciclo celular. Aunque ambos estn constituidos de cromatina IAD ARN, protenas histnicas y no
histnicas), cada genoma esta subdividido en 23 paquetes
fpares) de cromatina denominados cromosomas. El ciclo
celular consiste en un complejo armnico de tiempo y eventos que suceden a partir de una clula producto de una divisin celular y hasta una nueva divisin.
Para su estudig el ciclo celular se divide en: a) interfase
festadios Gl o posmittico, S o de duplicacin del ADN y
G2 o premittico) y b) divisin [mitosis o meiosis). Durante
la interfase del ciclo celular,la cromatina que conforma el
ncleo se mantiene descompactada [ncleo interfsico), por
1o que no es posible distinguir a los cromosomas, desde el
punto de vista funcional, ocurre la expresin programada de
genes de acuerdo al tipo celular (fase Gl), la decisin de continuar el ciclo celular que da lugar a la duplicacin completa de ambos genomas de forma simultnea en los 23 pares de
cromosomas descompactados [fase S) (para su posterior distribucin a las clulas hias durante la divisin), as como preparacin parala divisin celular que incluye el inicio de una
compactacin gradual de los cromosomas (fase G2). Durante
la fase de divisin ce1u1a4 los cromosomas pueden ser observados al microscopio y contina la compactacin y acomodo
espacial que permite su distribucin equitativa a las clulas
hias. En la figura 16-5 se seala el comportamiento de los
cromosomas de manera hipottica durante la interfase, ya
que stos no son en realidad visibles durante la misma.
Mitosis
La divisin celular en las clulas somticas es clonal, es deci4
mantiene la informacin gentica constante con 1o que se logra
perpetuar la integridad gentica en todo el organismo. Esta
divisin celular consiste en dos etapas, la divisin nuclear o
Figura l6-5. Divisin celular mittica en el contexto del ciclo celular. Se representa un par cromosmico (materno en gris y paterno
en negro), asumiendo que lo mismo ocurre de forma simultnea
para los 23 pares. La "n" representa a los conjuntos de ADN y la
"c" al total de cromtides. La informacin gentica se mantiene
(2n) siempre (divisin clonal), mientras que el material gentico se
duplica para poderlo distribuir a la siguiente generacin celular
(ver alternancia 2c a 4c).
cariocinesis que al referirse al proceso de distribucin de los
cromosomas duplicados en las clulas somticas se denomina
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Meiosis
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Las clulas germinales son las nicas clulas del cuerpo que
adems de multiplicarse por mitosis poseen la propiedad de
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Gentica
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l6-7).
CROMOSOMAS
Podemos definir a un cromosoma, dependiendo del criterio
utilizado:
a.
o rompimientos
de
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I r #tHomlogo Paterno
Espermatogonia u ovogonia
Eff*"pticacin
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-Cisoteno
Profase
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Entrecruzamiento
(crossing
over)
Meiosis
-Diptoteno
Metafase
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Disyuncin de
cada par homlogo
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Meiosis ll
Espermtides
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No hay fase de
Disyuncin
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hermanas
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Alineamiento
plano ecuatorial
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Anafase
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Productos meiticos
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Flgura 16-6, Esquema de la meiosis en el contexto de la gahetogness. Se observa que el producto linal 6s generar gamelos con un
genoma sin duplicar represenhndo una combinacn gentca altematva.
512
(Unidad 16)
TCNICAS DE ESTUDIOS
CROMOSI\'!COS Y SUS APLICAGIONES
Citogentica clsica
vulos dismicos
vulos monosmaticos
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Singamia
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Cigoto trismico
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Cigoto monosmico
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Cromtides hermanas
Brazo p
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Cromosomas 3
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Figura 16-9. Carotipo normal de un varn que ilustra los 24 diferentes cromosomas del humano, Note el patrn estandarizado de acuerdo al ISCN 2009. Los pares se agrupan como sigue: 'l-3, los cromosomas mas grandes (grupoA); 4-5, grandes y muy submetacntricos
(grupo B); 6-12, submetacntricos medianos (grupo C); 13-15, acrontricos grandes (grupo D); 16-18, metr y submetacentricos peque-
os (grupo E); 19-20, metacntricos muy pequeos (gtupo F)t 21-22, acrocntricos pequeos (grupo G) y par gonosmico XY (n la
mujer es )). Resolucin de 550 bandas con bandeo c teidos con Wright.
segmentos sintticos de AD que poseen la secuencia de
inters, marcados con fluorocromos que hibridan al ADN
desnaturalizado com anterioridad fhebras separadas) de las
La hibridacin o apareamiento se realiza por complementariedad de baseq permitiendo la detepcin de casi cualquier tipo de secuencias y regiones cromosmicas fgnicas e
secuencia nica, de genes de fusin en cncer, o regiones centromricas, telomricas, subtelomricas, brazos completos o
cromosomas completosJ. La figura 16-10 muestra una FISH
secuencial (sobre una metafase bandeada con anterioridad),
de la regin 15q13 fPrader Wi1li/Agelman), para evaluar el
cromosoma 15 en un cultivo de mdula sea.
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1998), bandeo en color fMllea 1997), FISH con sondas telomricas mltiples fKnight, 1997), o CGH basado en microarre-
cariotipo constituye 1a evidencia directa de una cromosomopata sospechada de forma clnica, por 1o que el di"gnstico citogentico es determinante o complementa al
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el extremo (flechas grandes) corresponden al centrmero del cromosoma 15 y la adyacente (flechas pequeas) a la regin 15q13,
correspondientes a un patrn normal, ya que se observan ambas
seales de la regin 15q13.
514 .
(Unidad 16)
46,XY(21;21Xp11;p11)
Fl paciente.posee un cromosoma
21; .
Sn
46;X,i(Xi(q10}.,
UA 6fOfnOSOrnA",X
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de aneuploidas
Diagnstico por preimplantacin de aneuploidas comunes. La mayora de pacientes para fertilizacin in uitro
tiene mas de 35 aos, por 1o que la deteccin de aneuploidas comunes como trisomas 13, 18, 21 y de cromosomas sexuales [gonosomopatas) es til previo a la
implantacin del embrin. El procedimiento requiere la
separacin de uno o dos blastmeros del embrin previos
a la implantacin asistida, para ser analizados por FISH,
molecular o incluso citogentica.
comunes. A1
menos la mitad de los embriones presentan una cromosomopata siendo en su mayora aneuploidas, por 1o que
existe una vigorosa seleccin in tero incluso antes de la
implantacin. Thadicionalmente se realiza en preparaciones cromosmicas obtenidas de clulas del producto provenientes de vellosidades coriales, lquido amnitico o
cordn umbilical, dependiendo de la etapa de gestacin,
siendo el lquido amnitico e1 ms utilizado. Lo anterior
permite detectar adems alteraciones estructurales. Mas
--
del 950/o de las aneuploidas presentes al nacimiento involucran los cromosomas 13, 18, 27,X e I las cuales ocasionan defectos al nacimientg en particular si se presenta
edad materna avanzada. De manera alternativa, es factible buscar directamente las aneuploidas ms comunes in
tero, con el uso de sondas centromricas de dichos cromosomas por FISH. De manera adicional, es posible
detectar polimorfismos de ADN denominados repeticiones en tndem de secuencias cortas (STR), de dichos cro-
Diagnstico prenatal
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gentico. El campo de los estudios citogenticos en cncer se denomina citogentica de alteraciones adquiridas,
por que son cambios solo observados en el tejido tumoral. En tumores slidos, los hallazgos tienden a ser mas
complejos debido a que son evaluados en etapas no tem-
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pranas de la neoplasia que aunado a una menor disponibilidad de las preparaciones cromosmicas, han dificultado la aplicacin clnica de la citogentica, no as en las
neoplasias hematolgicas en las que la citogentica constituye una slida evidencia para el diagnstico, pronsticq tratamiento y evolucin, en particular en neoplasias
hematol gicas peditricas.
Biomonitoreo. Los cromosomas resultan sensibleq en particular a agentes que daan aI ADN por 1o que pueden ser
utilizados como biomonitores de dao gentico de agentes
ftsicos, qumicos o biolgicos. Se complementan entre s
con otros mtodos como intercambio de cromtidas hermanas o microncleos y ensayo cometa, entre otros.
CROMIATINA SEXUAL X
X es un corpsculo heteropicntico hiperpigmentado de forma ovalada o triangular y que se observa adosado a la membrana del ncleo de clulas femeninas, su
obtencin se realiza, de forma habitual, a partir de frotis de
mucosa oral teidos con orcena (figura 16-11). Corresponde
al cromosoma X inactivo en la mujer. Tambin es conocido
como corpsculo de Barr por su descubridor. Su utilidad clnica radica es que el nmero de corpsculos mas l, corresponde al numero total de cromosomas X por 1o tanto provee
evidencia indirecta del nmero de cromosomas X en el dlagnstico de gonosomopatas. En la actualidad su uso es limitado
debido al desarrollo de los mtodos citogenticos descritos
con anterioridad.
La citogentica se encuentra en constante evolucin y se
intercomplementa con mtodos de mas resolucin pero que
impiden una visin global directa. Por ejemplo se asume que
la citogentica constitucional detecta no ms de un 3olo de
alteracLnes, mientras que con el uso de hibridacin genmica comparativa basada en microarreglos (aCGH), puede llegar hasta :ur;.20o/o. Este procedimiento ha logrado consensos
internacionales para realizar evaluaciones amplias del genoma en 1a bsqueda de prdidas o ganancias cromosmicas.
La cromatina
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Figura 16-11. Cromatina sexual X de mucosa oral femenina teida con orcena (flecha).
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cariotipo ocasionalmente
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(Uniad 16)
ploida)
Numricas{
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Monosoma (2n-1):45'X
Aneupioidas
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lnversin
Constitucionale
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Terminal: 46,XYdel(SXp1 4)
Doble terminal (anillo):46,XY,(7)(p22q36)
Delecin
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L Estructurales *j
46,X,i(XXq f 0)
Balanceadas:46,XYt(2;51q21'03',,
Translocaciones .l
L lntracromosmicas
recprocas I*
Translocaciones
Robertsonianas
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Desbalanceadas:46,XX,+1,
der(1;3Xp10;q10)
45,XX,rob{fra;21)(q10;q10)
46,XX,rob( 1 4;2 1 Xq 1 0;q 1O),+21
Fgura 16-12. Clasificacn sintica de las cromosomopatlas en el humano. lncluye notas y ejemplos que faclitran su comprensn.
de a los tallos de cromosomas acrocntricos [l 3, 14, 15, 21 y
22) que pueden presentar longitud variable sin efecto clnico dado que contienen genes repetidos en tndem que sintetizan la mayora de tipos del RNA ribosomal. Considerando
que el ribosoma requiere ser sintetizado de forma constitutiva, estos genes resultan de los ms activos durante el ciclo
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nomenclatura
Londres
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Dado que las aberraciones cromosmicas involucran de manera habitual, segmentos o cromosomas completog los desbalances a nivel de genes son masivos, por 1o que se espera que el
efecto clnico involucre ms de un rgano o sistema, se presenten malformaciones congnitas mltiples, retraso mental,
infe*ilidad y/o abortos. En el paciente individual, la presencia de un diagnstico clnico presumiblemente ocasionado
por alteracin cromosmica, o bien ante situaciones como el
retraso psicomotoq malformaciones mltiples de severidad
variable, falla en el crecimiento, alteraciones en la diferenciacin sexual, y alteraciones dermatoglffcas son indicaciones
para realiza un cariotipg al igual que en las parejas con
aborto recurrente, infertilidad, o antecedentes de cromosomopata o producto previo malformado.
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Gentica
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En cul de las etapas de la meiosis se produce el fenmeno de entrecruzamiento [crossing over)? a) Profase de
meiosis II, b) Leptoteno de profase de meiosis I, c)
Paquiteno de profase de meiosis I, d) Dictioteno de profase de meiosis II.
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REFERENCIAS
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Figura 16-13. (A) Pares que presentan polimorfismos cromosmicos los cuales se indican con flechas. De heterocromatina constitutiva: 1 (grupo A), 9 (grupo C), 16 (grupo E), Y (gonosomas). De
longitud del tallo y tamao de satlite; 13, 14, 15 (grupo D\, 21,22
(grupo G) y 21. (B) Ejemplos de polimorfismos. G, resolucin de
600 bandas.
RESPUESTAS A LA EVALUACIN
1:
d;2: a; 3: c.
CROMOSOMOPATAS
CONC!-USIONES
La citogentica es indispensable en el estudio de enfeimedades genticas. Obliga una correlacin cariotipos- fenotipo. Ha
evolucionado y al ofrecer una visin directa y global del genoma humano con dificultad ser substituida con el tiempg en
particular en cnce4, por 1o que se estrechar ms la intercomplementacin con abord4es de mayor resolucin como la
hibridacin genmica comparativa basada en microarreglos.
ACTIVIDADES SUGERIDAS
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2.
47,XX,+18.
OBJETIVOS ESPECFICOS
Conocer e identificar las caractersticas clnicas relevantes de
los sndromes cromosmicos que por su impacto epidemiolgjco se consideran de diagnstico obligado para el mdicg
as como su manejo mdico multidisciplinario y su asesora-
miento gentico.
GENERALIDADES
Las aberraciones cromosmicas afectan a