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FACULTAD DE MEDICINA
VI CICLO
CODIGO: 2014-II
GUIA DE PRACTICAS
FARMACOLOGIA Y
BASES TERAPEUTICAS
INDICE:
I.
II.
III.
IV.
Presentacin.
Competencias.
Recomendaciones Generales. Normas de Bioseguridad. Informe de Practicas.
Lista de Practicas
1. Farmacometria: Dosificacin en Farmacologa Experimental.
2. Vas de administracin: Oral, Subcutnea, Intramuscular, EV, Inhalatoria, Subconjuntival
y Rectal, Factores que influyen en la Absorcin de los Frmacos. Influencia de la Dosis,
Metabolismo y Eliminacin rpida en Efecto de la Droga.
3. Estudio de la Dosis Curva - Respuesta de la Acetilcolina en Intestino aislado de
Oryctolaqus Cunniculus (conejo): Sinergismo Antagonismo.
4. Sistema Neurovegetativo: Adrenrgicos y antiadrenrgicos: Colinrgicos y
Anticolinrgicos.
5. Prueba de Anticidos y anti secretores.
6. Diurticos.
7. Antihistamnicos.
8. Glucsidos Cardioactivos.
9. Accin de los Anestsicos Etreos y Locales.
10. Hipotensores e Hipertensores.
11. Hipnticos, antipsicticos y anticonvulsivantes.
12. Efectos de los analgsicos.
13. Drogas que actan sobre el tero.
14. Anticoagulantes.
15. Insulina e Hipoglicemiantes.
I.- PRESENTACION
La Farmacologa es la ciencia que se ocupa del estudio de las propiedades, efectos y usos de loa frmacos, as como de sus
efectos adversos, colaterales o secundarios y sus interacciones entre ellos con los seres vivos
Este Manual de Prcticas va a servir como Gua en el desarrollo de los Mtodos destinados a evaluar la actividad
farmacolgica de algunos frmacos en experimentos IN VIVO, IN S1TU e IN VITRO.
Esto permitir al alumno contrastar los resultados obtenidos en las prcticas con los conceptos y actividades dictadas en la
Teora a travs de las Clases Magistrales.
Esta Gua contiene mtodos que permite estudios Farmacocinticos y Farmacodinmicos que sirva para futuros estudios de
Investigacin de principios activos de frmacos de uso Clnico.
II.- COMPETENCIAS
Las prcticas diseadas permitirn:+6
339636
.3
389999999999999999999999999999999999+
a) Emplear y confirmar la informacin Terica adquirida y desarrollar capacidades de observacin y crtica relacionando
los resultados con la Teora recibida.
b) Informar las prcticas haciendo uso de! conocimiento del Mtodo Cientfico, demostrando capacidad y criterio en su uso
c) Desarrollo actitudinal y conductual mediante.
Manejo respetuoso de los animales, pensando con gratitud que contribuyen con su formacin
Sus relaciones interpersonales con sus compaeros y profesores, realizando la interpretacin de resultados y las
discusiones con altura, criterio y respeto
Tener presente que el manejo de los animales debe transpolarse a los seres humanos, pues son con ellos con los que
vas a poner en prctica tus conocimientos adquiridos y que de ellos depender su alivio o curacin, s que ello
represente riesgo para el paciente.
III.- RECOMENDACIONES GENERALES
Para el
normal desarrollo de
1.
2.
3.
4.
14. Verter en el lavadero todos los residuos lquidos y dejar correr abundante agua
15. Manipular sustancias de gran evaporacin bajo campanas extractoras.
VI. INFORMES DE PRCTICAS
Al trmino de la reunin de Laboratorio, cada alumno, recopilar los resultados o apreciaciones de la prctica y elaborar un
informe que debe seguir las siguientes pautas:
a)
b)
c)
d)
e)
f)
g)
A=
B xC
D
A = Dosis a calcular en mi
B = Volumen total del vaso de rgano Aislado en mi (40ml)
C = Dosis estndar a administrar en el vaso en mcg gamas/ml.
D = Concentracin de la solucin del frmaco a trabajar en mcg gamas/ml.
2.
A=
B xC
D
Se desea trabajar con Acetilcolina Clorhidrato en solucin al 1/10,000 (lml = O.1mg). Cul es la dosis en volumen
calculada para trabajar en ileon in Vitro de Oryctolagus cunniculus en dosis estndar de 0.50 mcg/ml (Emplee
frmula de Turner in vitro)?
Se desea trabajar con Salbutamol sulfato en solucin 1/1000. Cul es la dosis en volumen calculada para trabajar en
tero de Cavia porcellus in Vitro en dosis estndar de 2.5 gamas/ml.
Se tiene un conejo de 2.2 Kg de peso corporal y se desea anestesiar con Tiopental en Solucin al 1% en dosis
estndar de 20 Mg/Kg por va IV. Calcular la dosis en peso y en volumen?
Se desea administrar Vecuronio Bromuro Soluc. 0.4/10.000, dosis estndar de 0.0094 mg./l00g. p.o. por VIP en
Bufo spinulosus, cuyo peso es 110g. Calcular la dosis en peso y en volumen?
Se desea administrar AAS al 2% en Cavia porcellus cuyo peso es 650g por va SC. En dosis estndar de
10mg/100g. Calcular la dosis en peso y en volumen?
COMPETENCIAS
1.
2.
3.
Material:
Ratas albinas
Diazepam 15mg/kg
Estricnina 4 mg
Pentobarbital sdico
10 mg/2ml
10/1000
30 mg/kg 3%
EXPERIENCIA 1: VA ORAL
Control de datos basales en cada experiencia:
a)
b)
c)
Estado de conciencia
Actividad motora
Reflejos
Se coloca entre los dientes una madera o cepillo con un agujero en el centro por el que introduce una sonda nasogstrica, que
llegue al estmago; el extremo libre de la sonda se coloca en un vaso con agua, s se ve burbujear aire en la sonda est en
pulmones y debe realizarse de nuevo el procedimiento. Luego administrar con una jeringa el medicamento, agregando
inmediatamente 0.5cc. De agua destilada para arrastrar todo el frmaco que pudo quedar en las paredes de la sonda.
Observar atentamente al animal en busca de sedacin (calma) o hipnosis (perdida del reflejo postural) controlado el tiempo
para cada una de estas respuestas.
EXPERIENCIA 2: VIA SUBCUTANEA
Una vez tomada en la jeringa el volumen de diazepm calculado, se proceder a su administracin por debajo de la piel de
la cara interna del cudriceps, para lo cual la aguja y la piel deben formar un ngulo de 25 (el bisel de la aguja debe estar
hacia la piel). Tomar el tiempo para la sedacin y sueo.
EXPERIENCIA 3: VIA INTRAMUSCULAR
Con la jeringa conteniendo el volumen de diazepn calculado, se proceder a su administracin en la masa muscular de la
cara interna del muslo, para lo cual la aguja y la piel deben formar un ngulo de 90. Tomar el tiempo para sedacin y sueo
EXPERIENCIA 4: VIA INTRAPERITONEAL
Una vez tomada en la jeringa la dosis calculada de diazepn, se administra en cuadrante inferior izquierdo del abdomen, zona
en la que no corre riesgo de lesionar vsceras, la inyeccin debe hacerse siguiendo una lnea perpendicular a la pared del
abdomen. Tomar el tiempo para sedacin y sueo, la aguja y la piel forman un Angulo de 90.
EXPERIENCIA 5: VIA RECTAL
Con la jeringa conteniendo el volumen de diazepn, se coloca la sonda en el recto y se administra, retirando y ejerciendo
ligera compresin sobre el orificio anal por algunos segundos a fin de evitar la salida del frmaco. Tomar el tiempo para
sedacin y sueo.
EXPERIENCIA 6: VA INHALATORIA
Pesar la rata albina y tomar el control basal:
a) Estado de conciencia
b) Actividad motora
c) Reflejos
Medir 5 ml de solucin cloroformo qumicamente puro y colocarlo en una torunda de algodn colocarlo en un
desecador (campana de vidrio), y colocar a la rata adentro y taparlo.
Efectuar el control post administracin del frmaco, teniendo en consideracin el periodo de latencia
Vas de
administracin
Sedacin
Hipnosis
Recuperacin
ORAL
Sub Cutnea
Intramuscular
Intraperitonial
Rectal
VIA INHALATORIA: Rata Albina
PESO
CORPORAL
FARMACO
VOLUMEN
VIA
INHALATORIA
SEDACIN
TIEMPO
HIPNOSIS
TIEMPO
RECUPERACI
N
Dimetro
basal pupilar
Adrenalina
10/00
Control
10
Control
20
Control
30
Observaciones
PESO
CORPORAL
Dimetro
basal pupilar
Atropina
10/00
Control
10
Control
20
Control
30
Observaciones
Fuerza Cardiaca
Fuerza cardiaca general
5
10
Propanolol 10/00
Adrenalina 10/00
FACTORES QUE INFLUYEREN LA OBSORCION DE LOS FARMACOS MANTENIENDO LA VLA DE
ADMINISTRACION CONSTANTE (VIA SUBCUTANEA)
EXPERIENCIA N01:
Inyectar a un ratn por va subcutnea, Diazepm a 15 mg/Kg agregando 0.30cc de agua destilada. Control del animal: Toma
el tiempo desde la administracin del frmaco hasta la aparicin de somnolencia y prdida del reflejo postural.
EXPERIENCIA N02:
Inyectar a un ratn por va subcutnea, Diazepm a 15 mg/Kg agregando 0.30cc de gelatina al 1%. Control del animal: Toma
el tiempo desde la administracin del frmaco hasta la aparicin de somnolencia y prdida del reflejo postural.
EXPERIENCIA N03:
Inyectar a un ratn por va subcutnea, Diazepam a 15 mg/Kg agregando 0.30cc de adrenalina(solucin al 1/10000) Control
del animal: Toma el tiempo desde la administracin del frmaco hasta la aparicin de somnolencia y prdida del reflejo
postural.
EXPERIENCIA N 2
DESCRIPCIN:
A un ratn inyectar por la va intraperitoneal 120 mg/kg de novocana (sol, al 1% dosis sub letal).
Repetir la inyeccin de esta ltima dosis a intervalos de 40 minutos (2 3 veces).
CONTROL DEL ANIMAL.
Ceirse a las pautas
AGENTES ADRENRGICO:
1.
2.
3.
B.
AGENTES COLINOMIMTICOS:
AGENTES ANTICOLINRGICOS:
C.
1.
2.
3.
4.
5.
Adrenalina
Control 10
Control 20
Control 30
Dimetro Basal
Pupilar
Atropina
Control 10
Control 20
Control 30
Frecuencia Cardiaca
Frecuencia Cardiaca Post
Frmaco
Fuerza Cardiaca
Fuerza Cardiaca a los 5 10
El objetivo de la prctica tipo de estudio ciego, es compastar el efecto Citoprotector de los frmacos implicados, frente al
efecto gastrolesivo de la INDOMETACINA en un modelo animal susceptible (ratas albinas.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
Dividir grupos (un grupo para cada mesa) de 6 ratas cada uno.
Un da antes las ratas debern estar en ayunas. Slo agua
El da de la prctica, a primera hora se administrar primero el plascebo, o frmaco (solucin salina, ranitidina,
omeprazol y bismuto. Y luego de 3 horas administrar Indometacina en dosis de 30 mgs/Kg en solucin salina a
concentracin de 3 .38 mg/cc
Dosis de Frmacos :
Solucin salina al 0.9%
: 1.5 cc por sonda nasogstrica (sng)
Ranitidina
: 10 mg por va intraperitoneal
Omeprazol
: 10 mgs por va intraperitoneal
Bismuto
: 1.5cc por sng
Mylanta
: 1.5 cc por sng
Misoprostol
: 200 ugs
En la prctica sacrificar a las ratas con cloroformo y extraer el estmago junto con una porcin de 5 cms de intestino
delgado. Abrirlo a lo largo de la curvatura mayor y el intestino delgado a lo largo del borde antimesentrico Fijarlo en
una tabla con alfileres. Los 5 especmenes se deben fijar en una sola tabla para poder intercambiarlos al final.
Observacin y medicin de lesiones macroscpicas con ayuda de una lupa La lesiones se clasificarn como :
Puntiformes
: aquellas con > 0.5 mm en sus 2 dimensiones
Lineales
: > 0.5 mm en una de sus 2 dimensiones
rea cuadrada
: >0.5 mm en sus 2 dimensiones
Hasta aqu cada mesa desconoce el tipo de frmaco usado en sus especmenes
Presentar los resultados de cada mesa. En este momento se dar a conocer el frmaco que recibi cada grupo de ratas
Comparar los resultados entre cada uno de los frmacos respecto al blanco (as) y entre ellos mismos, tomando como
parmetros el nmero de lesiones y el tipo de las mismas.
Lesiones
Frmaco
S.S.F 0.9%
MYLANTA
OMEPRAZOL
RANITIDINA
BISMUTO
MISOPROSTOL
Marca
Peso
Puntiforme
Lineales
Cuadradas
TOTAL
PRACTICA N 6: DIURETICOS
MATERIAL:
Marca
Diurticos
B
C
L
Rc
C
Peso
corporal
Va de
administracin
Via oral
Va intraperitonial
Va intraperitonial
Va intraperitonial
Va intraperitonial
Dosis
10 ml
20 mg/kg
20 mg/kg
20 mg/kg
3.5 ml
15
30
45
60
Total
Anestesiar un cabrito con Halatal y hacer las conexiones para los registros de presin arterial y respiracin. Tomar un registro
basal y proceder a administrar por va intravenosa:
1. 0.025 mgs/ Kg de Clorhidrato de Histamina al 1/10 000 , observar y registrar efectos
2. La misma dosis de Clorhidrato de Histamina y en su mximo efecto, inyectar 3mg/ Kg de Clorfeniramina, observar y
registrar los efectos
3. La misma dosis de Clorhidrato de Histamina y en su mximo efecto, inyectar 01 c.c de Adrenalina al 1/10,000. Observar
y registrar los efectos
4. Administrar 100 mgs de Hidrocortisona, espejar 15 minutos y luego administrar la misma dosis de Clorhidrato de
Histamina, observar y registrar los efectos
Dimetro pupilar
Reflejo osteotendinoso
Secrecin salival
: en mm
: normoreflexia: +++
: Basal +++
b)
c)
d)
Adminsitrar Sulfato de Atropina 0.1 mg/kg en Sol 1% ms 0.5 mg/kg de Clorhidrato de Petidina va IM 15 minutos
antes del siguiente paso.
Administrar Eter o Halotano con mscara para anestesia: 20 ml
En plena anestesia volver a tomar todos los datos anteriores
Colocar un cavia porsellus (cobayo) o rata albino, dentro de una campana de vidrio y dejar que respire los
vapores del anestsico que se desprende la torunda del algodn impregnado con 10 ml de anestsico.
2. En todo los caso a notar el periodo de:
Latencia
Excitacin
Perdida de inmovilidad
Sueo anestsico
3. Al entrar en sueo anestsico retirar el material biolgico de la campana y control post frmaco tomar nuevos
datos hasta su recuperacin.
Tabular los datos y discutir resultados.
2. ANESTECICOS LOCALES:
1. Descerebrar un sapo mediante corte de tijera estilete dado detrs de los globos oculares.
2. Hacer una incisin en sentido longitudinal en ambos muslos y disecar los nervios citicos que corren entre las masas
musculares, manejar estos con sumo cuidado tratando de no elongarlos.
3. Buscar la excitabilidad de ambos nervios citicos, con estmulos elctricos dbiles
4. Colocar alrededor del citicos derecho un algodn embebido con Bupivacaina al 0.5%
5. El Citico izquierdo envolverlo con un algodn embebido con Lidocaina al 2%
6. Mantener ambos algodones por 20 minutos y luego retirarlos
7. Provocar estmulos elctricos crecientes en ambos citicos por encima y por debajo de la zona donde se aplic el
anestsico
COMPARAR EL EFECTO DE AMBAS DROGAS, EXPLICAR LA RAZON DE LAS DIFERENCIAS Y DISCUTIR LOS
RESULTADOS
Frmacos
10
15
20
255
Xilocana 2
Bupivacana 0.5%
Frmacos
10
15
20
25
Xilocana 1%
Bupivacana 0.5%
Anestesiar con Halatal a un cabrito de 8 a 10 kg a razn de l mi por cada 2.5 kg de peso. Hacer las conexiones para registrar
la presin arterial. Tomar un registro basal y proceder a ejecutar las siguientes experiencias:
1. Tomar un registro basal de la presin arterial y la frecuencia cardiaca
2. Administrar 0,1 mg de Nitroprusiato de Sodio IV, efectuar un registro y esperar la recuperacin.
3. Aministrar clonidina ampolla IV, hacer un registro y esperar la recuperacin.
4. Administrar enalapril ampolla IV, hacer un registro.
5. Cuando la presin todava no se ha recuperado administrar por va IV 1 mg de dopamina y efectuar un registro.
6. Registrar la presin y la frecuencia cardiaca y luego administrar la unidad de contenido lquido de una tableta de
Nifedipina.
PRACTICA 11
HIPNOTICOS SEDANTES Y ANTICONVULSIVANTES
Colocar la rata en una jaula especial, la misma que se encuentra en conexin con un estimulador elctrico, con el que se
determina el umbral del dolor del animal, este se hace por 3 veces en un intervalo de 5 minutos y se obtiene un promedio
2.
3.
Una vez administrados los frmacos, controlar cada 15 minutos el umbral del dolor mediante la estimulacin elctrica
hasta completar una hora de observacin.
4.
PROCEDIMIENTO
A. - FARMACOS OXITOCICOS:
Colocar un segmento de tero de rata albina o cavia porcellus (cuy hembra adulta), estrogenizada 24 horas antes de la
prctica y colocarlos en el aparato de rgano aislado en solucin de Krebs mamfero a 38C, constantemente oxigenado y
luego obtener un trazado de las contracciones normales. Administrar las siguientes drogas:
1. Una primera dosis de Oxitocina de 0.1 ml a la concentracin de 0.05 u.i. Ver sus Efectos.
2. Lavar 2 veces con solucin de Krebs o Tyrode
3. Colocar una segunda dosis de Oxitocina de 0.2 ml, a la concentracin de 0.05 u.i.
Ver su efecto y comparar con 1
4. Lavar dos veces con solucin de Krebs o Tyrode
5. Colocar una primera dosis de 1 ml de Ergonovma a la concentracin de 0.006 mg y ver su efecto
6. Lavar 2 veces con solucin de Krebs o Tyrode
7. Colocar una segunda dosis de 2 ml de Ergonovina a la concentracin de 0.008 mg ver su efecto y compararlo con 5
B.- FARMACOS TOCOLITICOS
1. Colocar clorhidrato de Adrenalina a 1/10,000 a dosis de 0.125 y /ml. Realizar un trazado quimogrfco, luego lavar 2
veces con solucin de Krebs o Tyrode
2. Sulfato de Mg en solucin al 1% dosis 100 y/ml. Hacer trazado quimogrfco y luego lavar 2 veces.
3. Comparar el efecto de ambas drogas, explicar la razn de las diferencias y discutir los resultados
NOTA: si no se recupera el tero de Cavia porcellus cambiar de segmento.
Obtener en u tubo de ensayo aproximadamente l0cc de sangre venosa y distribuirla de la forma siguiente:
Tubo l: 2 cc de sangre venosa
Tubo 2: 2 cc de sangre venosa + l UI de heparina r
Tubo 3: 2 cc de sangre venosa + 10 mg de warfarina
Tubo 4: 2 cc de sangre venosa + 10 UI de heparina + l mg de sulfato de protamina.
Agita los tubos, luego de agregados los frmacos y dejar reposar por 15 minutos. Evaluar la formacin de coagulo por
lateralizacin y/o inversin de los tubos.
Tomar una muestra de sangre de a vena marginal de la oreja de tres conejos y determinar a glicemia basal mediante del
glucmetro.
1. Aplicar a primer conejo 0.1 UI de insulina regular por va intraperitoneal, efectuar controles de a glicemia mediante el
glucmetro a los 15 y 30 minutos.
2. Aplicar al segundo conejo 1 mg de glibenclamida por va intraperitonea, efectuar controles de la glicemia mediante el
glucmetro a los 15 y 30 minutos.
3. Aplicar al tercer conejo 10 mg de metformina por va intraperitoneal, efectuar controles de la glicemia mediante el
glucmetro a los 15 y 30 minutos.
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
1. Arellano, J. Manuel de Prcticas de Farmacologa, 5o. ED., Ed. UNMSM, Lima, Per.
2. Arvalo Bentez y Col : Gua de prcticas de Farmacologa I UNT Trujillo
3. Barastegui, C : Gua de Prcticas de Farmacologa Ed. Spas Barcelona Espaa 1976
4. Bonacorsi, A. Mtodos de Farmacologa Experimental. Ed. Instituto Mario Negri, Miln Italia 1995.
5. Bum, J.H.: Prcticas de Farmacologa, Io ed. Ed. Acribia, Zaragoza 1957.
6. Frayle D. Valoracin Biolgica. Ed. Cientfica Mdica. Barcelona, Espaa 1973.