Toxicologa

y
Anlisis qumico toxicolgico

Qumica

Legal

UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

(Universidad del Per, Decana de Amrica)
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICA
Escuela Acadmico Profesional: Farmacia y Bioqumica

TOXICOLOGA Y QUMICA LEGAL

Prctica N 2
Tema:
Anlisis Qumico Toxicolgico (EQT)
Grupo:
Jueves de 10- 2 pm
Integrantes:
Cayllahua Arana, Christian Max
04040069
Hernndez Bobadilla, Elida Estefana 04040070
Ninamanco Sarmiento, Renzo
Raraz Palpan, Edwin
Profesor:
Q. F. Alfonso Apesteguia
Ao:
5
Semestre:
II

Fecha:
10/04/08

Lima-Per
2 0 0 8 II

Toxicologa
y
Anlisis qumico toxicolgico

Qumica

Legal

INTRODUCCIN TERICA
El anlisis toxicolgico
Se define como el conjunto de medios tcnicos y humanos donde se identifican,
cuantifican y controlan los efectos de los txicos, teniendo en cuenta las
propiedades qumicas, fsicas y biolgicas de la sustancia estudiada. La atencin
tiene como prioridad la identificacin del txico durante los primeros minutos de la
demanda del servicio, para realizar el manejo clnico adecuado del paciente,
buscando disminuir el riesgo de morir y evitar las secuelas que puedan generar las
sustancias qumicas (1).
Importancia del anlisis toxicolgico
El anlisis toxicolgico es de gran importancia en clnica no slo como ayuda al
mdico en el diagnstico y pronstico de una intoxicacin sino en la evolucin del
tratamiento, ya que con anlisis de control subsiguientes dar idea al mdico si el
txico permanece en el organismo o ha desaparecido. En medicina legal
igualmente es de suma importancia para la comprobacin de un envenenamiento
el identificar y cuantificar el txico en vsceras u otras muestras biolgicas, ya que
una intoxicacin por accidental que parezca puede tener implicaciones mdicolegales u obrero-patronales cuyo resultado depende de un anlisis realizado o de
una
autopsia.
Los laboratorios de toxicologa se han especializado al igual que las reas que
cubre la Toxicologa, por lo tanto existen varias clases de laboratorio toxicolgico
como son:
El laboratorio de toxicologa ambiental desarrolla sus anlisis en la identificacin y
cuantificacin de sustancias txicas presentes en un ecosistema que puedan
directa o indirectamente ocasionar riesgo a las personas, involucra anlisis de
aguas, alimentos, suelos y aire (2).
El laboratorio de toxicologa industrial u ocupacional que investiga las sustancias
potencialmente txicas involucradas en los procesos de produccin de empresas
formales o informales, que de forma directa o indirecta puedan producir lesiones al
individuo o afectar a la comunidad. En salud ocupacional es igualmente
importante, ya que en esta poca de gran desarrollo industrial cabe destacar la
gran responsabilidad del laboratorio para detectar y cuantificar numerosos txicos
de trabajadores expuestos por medio de examen de orina o sangre en su fase
preclnica, y en general en todo lo referente a las enfermedades profesionales.

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Laboratorio de toxicologa forense que investiga las sustancias txicas que causan
la muerte, o investiga los hechos legales donde se involucran sustancias Txicas
(2).
El laboratorio de toxicologa clnica realiza los anlisis bsicos para l diagnostico
de sustancias qumicas que causan intoxicacin aguda y las cuales debe procesar
el laboratorio clnico de Toxicologa a travs de anlisis que permitan hacer un
pronto diagnostico y logren detectar el mayor numero de intoxicaciones. Las
intoxicaciones y procedimientos ms comunes en nuestro medio son:
Etanol,
Metanol,
Formaldehdo.
Deteccin de sustancias utilizadas con fines delictivos (Escopolamina,
Benzodiacepinas,
Fenotiacinas).
Anlisis de Colinesterasa en casos de intoxicacin por plaguicidas
Organofosforados,
como
prueba
indirecta.
Drogas de abuso (Cocana Cannabinoides, Opiceos, Anfetaminas)
Anlisis de medicamentos como Barbitricos, Fenobarbital, Carbamazepina,
Fenitoina,
Acido
Valproico.
Deteccin
de
monxido
de
carbono,
(Carboxihemoglobima)
Anlisis
de
antidepresivos
Triciclicos.
Anlisis de otras sustancias como Cianuro, Metales Pesados Plomo, Mercurio,
Talio,
Arsnico.
Identificacin
de
txicos
o
del
Animal
venenoso
Sustancias corrosivas: cidos y lcalis (blanqueadores y detergentes)
Datos que el analista debe tener en cuenta para el anlisis
Antes de efectuar los anlisis conviene recoger la mayor informacin posible que
ayudar a individualizar el txico en cuestin, relativos a la persona intoxicada, a
sus relaciones familiares y sociales, el ambiente de trabajo y muy especialmente
de las circunstancias que precedieron a la intoxicacin o a la muerte, es muy
interesante lo referente a los sntomas txicos si aparecieron despus de haber
tomado alimento o bebida y cunto tiempo despus de la ingestin.
Si se trata de intoxicaciones colectivas, debe comprobarse si todos los afectados
tomaron de los alimentos o bebidas o solo algunos de ellos.
Es importante saber la forma en que se suministr el txico, conocer el tiempo
aproximado entre la ingestin y la aparicin de sntomas, y cul fue la
sintomatologa y si fuere el caso, el tiempo transcurrido entre los primeros
sntomas y la muerte (2).
Tambin conviene precisar si el paciente estaba en perfecto estado de salud con
anterioridad a la intoxicacin o si se presento sta en el curso de una embriaguez
enfermedad, embarazo etc.

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Es de inters indicar al analista si se trata de un caso en que se sospeche suicidio,

o error de frmula o accidente, o probable mvil de un delito (robo, etc.) En todo
caso debe hacerse una relacin sencilla de los hechos, lo que puede ser de gran
utilidad y ahorrar mucho tiempo en la investigacin toxicolgica.
Para muchos de los txicos comunes puede resultar intil el examen de los fluidos
orgnicos si han transcurrido mas de 24 horas despus de su ingestin, pues
muchos de ellos son detoxicados o eliminados en menos de ese tiempo,
especialmente si estaban en pequeas cantidades. Las excepciones son los
venenos acumulativos como los metales pesados, los compuestos radioactivos
etc.

OBJETIVOS:

Aprender y relacionar los pasos sucesivos, relacionados a un anlisis

qumico toxicolgico frente a una muestra problema.
Interpretar los ensayos con papel sensible, observado las distintas
coloraciones que ocurren en cada uno de ellos.

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REACTIVOS

cido Tartarico

CuSO4 2%

Resina de guayaco

Reactivo de Yodo- Iodurado

Almidn 1%

NaCO3

NaOH 10%

AgNO3 10%

PdCl2 10%

Reactivo de Trtaro Emtico 10%

Acetato de Plomo 10%

FeSO4 10%

HCl conc.

Agua destilada

MATERIALES

Muestra problema

Palpel Watman

Pipetas de 5 mL

Frasco de Vidrio

Probeta

Placa de vidrio

Laminas de Cobre

EQUIPOS

Bao Maria

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REACCIONES:
1.-Reaccin con el Reactivo de Schombein
- Fundamento: Aumento del potencial de oxidacin de las sales cpricas al
pasar a sales cuprosas poco solubles o poco disociadas.
- Tcnica operatoria: En el extremo de una tira de papel Whatman N1
(10cmx1cm) agregar 1-2 gotas de sulfato cprico (CuSO 4 2%) adicionar 1
gota de resina de guayaco 10% en medio alcalino. En el otro extremo
colocar el nmero 1.
Obtenida la tira reactiva (papel sensible) colocarlo al borde de un frasco
boca ancha, que contenga la muestra problema en solucin de agua
destilada, procurando que el extremo reactivo se encuentre a la luz del
frasco. Iniciar un bao de Mara por cinco minutos adicionando 100 mg de
cido tartrico. Terminado el bao de Mara, observar los resultados en un
vidrio limpio.
- Mecanismo de reaccin: Segn Guatell.
16CN- + 16H+ ---> 16HCN
16HCN + 8Cu++ ---> 8Cu(CN)2 + 16H+
8(CN)2Cu ---> 4Cu2(CN)2 + 4C2N2
4C2N2 + C22H26O6 + 7H2O ---> 4HONC + 4HCN + C22H24O9 + 8H+
4Cu2(CN)2 + 4HCN ---> 4[Cu2(CN)3]- + 4H+
16CN- + 8Cu++ + 7H2O + C22H26O6 ---> 4HONC + [Cu2(CN)3]- +12H+ +
C22H24O9
Otro mecanismo propuesto es:
8HCN + 8SO4Cu + 4H2O --> 2(CNCu)2(CNCu)2 + 8SO4H2 + 2O2
- Reaccin qumica balanceada.
16CN- + 8Cu++ + 7H2O + C22H26O6 ---> 4HONC + [Cu2(CN)3]- +12H+ +
C22H24O9
- Resultados: La reaccin de Schnbein result positiva.
- Sensibilidad de la reaccin: Es un ensayo sensible pero inespecfico.
Algunos autores indican que puede reconocerse hasta 0.25 g de cido
cianhdrico.

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2.-Reaccin con el Reactivo de Yodo-almidonado

- Fundamento: Decoloracin de la solucin azulada (yodo almidn) por
compuestos reductores como el cido cianhdrico.
- Tcnica operatoria: En el extremo de una tira de papel Whatman N1
(10cmx1cm) agregar 1-2 gotas de solucin de yodo - ioduro adicionar el
reactivo de almidn 1%. En el otro extremo colocar el nmero 2.
Obtenida la tira reactiva (papel sensible) colocarlo al borde de un frasco
boca ancha, que contenga la muestra problema en solucin de agua
destilada, procurando que el extremo reactivo se encuentre a la luz del
frasco. Iniciar un bao de Mara por cinco minutos adicionando 100 mg de
cido tartrico. Terminado el bao de Mara, observar los resultados en un
vidrio limpio.
- Mecanismo de reaccin:
KI + I2 + 2 almidn ---> 2 almidn-I + KI
HCN + 2 almidn-I ---> 2I- + 2 almidn + CN- + H+
- Reaccin qumica balanceada:
HCN + I2 ---> I- + INC + H+
- Resultados: La reaccin con el reactivo de Yodo-almidonado result
positiva.
- Sensibilidad de la reaccin: Es un ensayo muy sensible pero inespecfico
(1:106)
3.-Reaccin con el Reactivo de Grignard
- Fundamento: El ensayo se fundamenta en que el cido pcrico en
presencia del HCN, liberado de la muestra cida, forma isopurpurato
alcalino, de color rojo al rojo naranja en el transcurso de cinco minutos.
- Tcnica operatoria: En el extremo de una tira de papel Whatman N1
(10cmx1cm) agregar 1-2 gotas de solucin de Na 2CO3 10% y adicionar 2
gotas del reactivo de cido pcrico 1%. En el otro extremo colocar el nmero
3.
Obtenida la tira reactiva (papel sensible) colocarlo al borde de un frasco
boca ancha, que contenga la muestra problema en solucin de agua
destilada, procurando que el extremo reactivo se encuentre a la luz del
frasco. Iniciar un bao de Mara por cinco minutos adicionando 100 mg de

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cido tartrico. Terminado el bao de Mara, observar los resultados en un

vidrio limpio.

- Mecanismo de reaccin:
HO

O
N

O 2N

OH

O-

O-

O-

HO

O 2N

O 2N

+
O 2N

NO2

O 2N

HO

-O

HO

O-

CN
H

CNNO2
OH

O+

O 2N

O-

O-

O+

O 2N

O-

H
CN

NC

NC

O-

CNReduccin

CN

NH2

O 2N

+
NC

OCN-

CN

NO 2

NO2
HO

HO-

Reaccin
qumica
balanceada:

HO

O 2N

O-

NO2

HO

O 2N

CN

CN-

O 2N

OH

CN

NC

NO 2

O2N

NH2

NC

CN

+ OCN- +

3CN-

O 2N

HO-

NO 2

Resultados:

La

reaccin con el reactivo de Grignard result positiva.

- Sensibilidad de la reaccin:
4.-Reaccin con el reactivo de Nitrato de plata (AgNO 3)
- Fundamento: El nitrato de plata al entrar en contacto con el cido
sulfhdrico (H2S) precipitar en forma de sulfuro argntico. Este mismo
fundamento se aplica para la fosfamina (PH 3). En el caso de la arsina y el
fsforo blanco provocarn la precipitacin de plata metlica.
- Tcnica operatoria: En el extremo de una tira de papel Whatman N1
(10cmx1cm) agregar 1-2 gotas de solucin de nitrato de plata 10%. En el
otro extremo colocar el nmero 4.
Obtenida la tira reactiva (papel sensible) colocarlo al borde de un frasco
boca ancha, que contenga la muestra problema en solucin de agua

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destilada, procurando que el extremo reactivo se encuentre a la luz del

frasco. Iniciar un bao de Mara por cinco minutos adicionando 100 mg de
cido tartrico. Terminado el bao de Mara, observar los resultados en un
vidrio limpio.
- Mecanismo de reaccin:
H2S + 2Ag+ ---> Ag2S + 2H+
ASH3 + 6Ag+ + 2H2O ---> AsO2H + 6H+ + 6 Ag
- Reaccin qumica balanceada:
H2S + 2Ag+ ---> Ag2S + 2H+
Otras reacciones:
a) Formol: separacin de plata metlica
CH2=O + 2Ag+ + H2O
HCOOH + 2H+ + 2AgO

b) Fosmamina: formacin de fosfuro de plata

H3P + 3Ag+

3H+ + Ag3P

c) Arsina: separacin de plata metlica:

H3As + 6Ag+

HAsO2 + 6H+ + 6AgO

+ 2 H2O

d) Estibamina: formacin de antimoniuro de plata.

H3Sb + 3AgO

Ag3Sb

+ 3H+

e) Fsforo blanco:
P4 + 6 H 2O
H3P + 3 Ag+
12Ag+ + 3 H3PO2 + 6H2O

H3P + 3H3PO2
Ag3P + 36H+
3 H3PO4- + 15H+ + 12AgO

- Resultados: La reaccin con el reactivo de nitrato de plata result negativa.

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5.-Reaccin con el reactivo de Cloruro de paladio (PdCl 2)

- Fundamento: El CO produce una mancha oscura sobre el papel de filtro
debido a la reaccin del paladio que se reduce a Pd.
- Tcnica operatoria: En el extremo de una tira de papel Whatman N1
(10cmx1cm) agregar 1-2 gotas de solucin de cloruro de paladio 5%. En el
otro extremo colocar el nmero 5.
Obtenida la tira reactiva (papel sensible) colocarlo al borde de un frasco
boca ancha, que contenga la muestra problema en solucin de agua
destilada, procurando que el extremo reactivo se encuentre a la luz del
frasco. Iniciar un bao de Mara por cinco minutos adicionando 100 mg de
cido tartrico. Terminado el bao de Mara, observar los resultados en un
vidrio limpio.
- Mecanismo de reaccin:

5.- PdCl 2

2+

Pd

CO

H 2O

2+

CO 2

Pd

O C

Pd

2+

Pd

2HCl

OH
O

O
H

Pd

Cl

Cl

- Reaccin qumica balanceada:

Pd+2 + CO + H2O ---> Pd + CO2 + 2H+
- Resultados: La reaccin con el reactivo de cloruro de paladio result
negativa.

6.-Reaccin con el reactivo de Trtaro emtico

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- Fundamento: El trtaro emtico (trtrato de antimonio y potasio) al entrar

en contacto con el cido sulfhdrico precipitar en forma de sulfuro de
antimonio.
- Tcnica operatoria: En el extremo de una tira de papel Whatman N1
(10cmx1cm) agregar 1-2 gotas de solucin de trtaro emtico 10%. En el
otro extremo colocar el nmero 6.
Obtenida la tira reactiva (papel sensible) colocarlo al borde de un frasco
boca ancha, que contenga la muestra problema en solucin de agua
destilada, procurando que el extremo reactivo se encuentre a la luz del
frasco. Iniciar un bao de Mara por cinco minutos adicionando 100 mg de
cido tartrico. Terminado el bao de Mara, observar los resultados en un
vidrio limpio.
- Mecanismo de reaccin:

6.- 2K(SbO)C4H4O6

3H2S

Sb 2O 3

2KHC4H4O 6

2H2O

C4 H 4 O 6 : T
Reaccin de doble sustitucin
2K

2SbO

Sb

2T

Sb

H 2S
O

(SbO)2S

2KHT

Sb

Sb

S
H

S
H
H

Sb

H
S

Sb

H2O

Sb

Sb

S
S

H
H
S

Sb

Sb

Sb

Sb

S
H

Sb

S Sb S

- Reaccin qumica balanceada:

H2O

H
O

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2K(SbO)C4H4O6 + 3H2S

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Sb2S3 + 2KH(C4H4O6) + 2H2O

- Resultados: La reaccin con el reactivo de trtaro emtico result negativa.

7.-Reaccin con el reactivo de Acetato de plomo
- Fundamento: El acetato de plomo al entrar en contacto con el cido
sulfhdrico precipitar en forma de sulfuro de plomo.
- Tcnica operatoria: En el extremo de una tira de papel Whatman N1
(10cmx1cm) agregar 1-2 gotas de solucin de acetato de plomo 10%. En el
otro extremo colocar el nmero 7.
Obtenida la tira reactiva (papel sensible) colocarlo al borde de un frasco
boca ancha, que contenga la muestra problema en solucin de agua
destilada, procurando que el extremo reactivo se encuentre a la luz del
frasco. Iniciar un bao de Mara por cinco minutos adicionando 100 mg de
cido tartrico. Terminado el bao de Mara, observar los resultados en un
vidrio limpio.
- Reaccin qumica balanceada:
H2S + Pb(C3H2O3) ---> PbS + 2HC3H2O3
- Resultados: La reaccin con el reactivo de acetato de plomo result
negativa.
- Sensibilidad de la reaccin: La sensibilidad de la reaccin es de 10 mg/L.
8.-Reaccin con el reactivo alcalino
- Fundamento: El acetato de plomo al entrar en contacto con el cido
sulfhdrico precipitar en forma de sulfuro de plomo.
- Tcnica operatoria: En el extremo de una tira de papel Whatman N1
(10cmx1cm) agregar 1-2 gotas de solucin de acetato de plomo 10%. En el
otro extremo colocar el nmero 7.
Iniciar un bao de Mara por cinco minutos adicionando 100 mg de cido
tartrico. Terminado el bao de Mara, colocar el papel sensible alcalino
agregando adems sulfato ferroso 10% y 1-2 gotas de cido clorhdrico,
observar los resultados en un vidrio limpio.
- Mecanismo de reaccin:
6HCN + 6OH- ---> 6CN- + 6H2O
6CN- + Fe++ ---> [Fe(CN)6]

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4Fe++ + 8OH- ---> 4 Fe(OH)3

3[Fe(CN)6]-4 + 4Fe(OH)3 + 12H+ ---> 12H2O + [Fe(CN)6]3Fe4
- Resultados: La reaccin con el reactivo alcalino result positiva.
- Sensibilidad de la reaccin: La sensibilidad de la reaccin es de 10 mg/L.

TCNICA OPERATORIA
-

Ensayo con papel sensible

Aislamiento
Cuando se sospecha la presencia de cido cianhdrico mediante los
ensayos antes especificados, se procede al aislamiento y posterior
identificacin. Para la realizacin de los ensayos mediatos, se requiere de
una separacin previa del CNH de la muestra. Son adecuadas una
destilacin simple o una microdifusin.
En la destilacin simple se agrega al material cido tartrico. El destilado
se recoge en hidrxido de sodio para evitar prdidas del cido cianhdrico
liberado. En el caso de muestras en estado de putrefaccin se debe
agregar al material a destilar acetato bsico de plomo para retener el cido
sulfhdrico.
Tcnica
Reactivos
Acido tartrico al 10%
Hidrxido de sodio al 10%
Equipos
Aparato de destilacin
Procedimiento
Colocar 10 g. del material biolgico en un matraz de destilacin y cubrir
con agua (aproximadamente 60 ml). Agregar 10 ml de cido tartrico al
10% y destilar recogiendo sobre 5ml de NaOH 10%. Se calienta al principio
suavemente para evitar la formacin de espuma y una vez alcanzado el

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punto de ebullicin se eleva lentamente la temperatura. Es importante que

la extremidad del tubo de desprendimiento conectado al extremo del
refrigerante tome contacto con la solucin alcalina. Suspender la
destilacin cuando hayan pasado alrededor de 1/3 del volumen inicial.
Medir el volumen destilado.
Ensayo de Papeles sensibles

Muestra: si es
liquida,
pesar
toda la muestra

Se agrega ac. Tartrico

(100mg) o ac. acetico

Aumentar la
superficie de
contacto

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2/3

1/3

H2O c.s.p. cubrir la

muestra problema

BMH x 5I

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Ensayos de Laminas metlicas

Lamina de Cu
+
1 mL HCl conc.

BMH x 5

Gris brillante-------Hg

Gris opaco------ As

RESULTADOS
Prosiguiendo con la metodologa expuesta obtuvimos los siguientes resultados:
Para evaluar la presencia de alguna sustancia txica en la muestra otorgada, se
consider Proseguir con la metodologa expuesta obtuvimos los siguientes
resultados a continuacin:
-

La tira N1 (Papel Sensible de Schombein), sufri una ligera coloracin

azulada.

La tira N2 (Papel sensible de Yodo Amidonado) sifri una decoloracin

del color inicial.

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La tira N3 (papel de solucin de guinard), sufri una variacin en su color

inicial, dando asi una coloracin rojo ladrillo

La tira N8 (papel de solucin alcalina, sufrio una variacin en su color

inicial, luego de aadirle 1gota del reactivo de FeSO4 (10%) y una gota de
HCl concentrado, dando asi una coloracin de Azul de Prusia.

3
4

TIRA N1 Cambi a un
color ligero a azul.
TIRA N2 Hubo una
decoloracin parcial
TIRA N3 Coloracin Rojo
ladrillo

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FORMACIN DEL
AZUL DE PRUSIA AL
AADIR GOTAS DE
HCl

ENSAYO DE LMINA METLICA

1. Fraccin de cobre
antes de someterlo
a ensayo.

2. Fraccin de cobre
luego de someterlo
a
ensayo.
Evidenciamos una
perdida
de
su
brillo
(GRIS
OPACO)

Conclusiones:
Concluimos que la muestra analizada, presenta en su composicin el HCN- ,
esto se evidenci por la formacin de la coloracin azul de Prusia en la tira de
papel sensible N (papel sensible alcalino), acompaada adems de la tira N,
la cual se presenci una coloracin rojo ladrillo propio del HCNTambin se concluye que la muestra analizada existe presencia de Arsnico
(As), el cual se pudo determinar por medio el ensayo de lmina metlica, al
opacar la varilla de cobre.

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BIBLIOGRAFIA:
Lunn, G. & Sansone, E. B., J. Chem. Ed. 1989 , Vol 66, 5, 4.
Frejaville, J. R.; Baurder, R. Toxicologa Clnica y Analtica. Editorial
JIMS 1978. Biblioteca de la Facultad de Farmacia y Bioqumica.
GUATELLI,

Manuel.

Manual Prctico de Qumyca

Toxicolgica.

Biblioteca de F y B- UNMSM. Editorial Universitaria. Argentina.1958.

http://www.biol.unlp.edu.ar/toxicologia/seminarios/parte_1/toxicos_metali
cos/acidos.html
http://cienciaforense.com/Pages/Toxicologia/HCN.htm
http://www.revmed.unal.edu.co/revistafm/v51n1/v51n1a6.html