Microscopia

Enjuagar en agua destilada.

Solucin de hematoxilina modificada segn Gill III
20 segundos
Agua corriente del grifo, fluente
3 min.

Serie creciente de alcoholes, 2 x Neo-Clear

o xileno
Montar con Neo-Mount o Entellan Nuevo
Cubrir con Entellan Nuevo los preparados humedecidos con xileno, o con
Neo-Mount y cubreobjetos los preparados humedecidos con Neo-Clear.

1.01646 Kit de tincin PAS

Resultado
Ncleos
Mucosustancias cidas
Polisacridos, mucopolisacridos neutros

Producto sanitario para diagnstico in vitro

azul
azul claro
prpura

Nota tcnica

Kit de tincin PAS

para la deteccin de aldehdo y mucosustancia

Principio
La tincin PAS (periodic acid-Schiff) es uno de los mtodos qumicos ms
empleados en histologa.
En la tincin PAS se trata el material con cido perydico, que oxida los
1,2-glicoles formndose grupos aldehdo. Con el reactivo de Schiff, los
aldehdos reaccionan dando un color rojo luminoso.
Con polisacridos no substituidos, mucopolisacridos neutros, mucoprotenas
y glucoprotenas, glucolpidos y fosfolpidos, la tincin PAS da una reaccin de
color especfica.
Combinando la tincin PAS con azul alcin pueden identificarse adems
mucosustancias cidas (glucosaminoglicanos).

Material
Como material de partida se emplean cortes de tejido fijado en formalina e
incluido en parafina o bien extensiones celulares.
Cortes parafnicos de 3-5 m de espesor

Reactivos

El microscopio usado debera corresponder a los requisitos de un

laboratorio de diagnstico mdico.
Seguir las indicaciones de empleo del fijador.
Deben seguirse las indicaciones de empleo del histoprocesamiento y las
instrucciones de empleo del fabricante del aparato y del software.
Si se utiliza un aparato automtico de tincin, deben tenerse en cuenta las
instrucciones de empleo del fabricante del aparato y del software.

Preparacin de las muestras

Todas las muestras deben tratarse de acuerdo con el estado de la
tecnologa.
Todas las muestras deben estar rotuladas inequvocamente.
Deben usarse instrumentos adecuados para la toma de muestras y en la
preparacin, y deben seguirse las instrucciones del fabricante para la
aplicacin/el empleo.

Diagnstico
Los diagnsticos debern ser establecidos solamente por personas
autorizadas y cualificadas.
Debern emplearse terminologas vigentes.
Debern elegirse y realizarse ensayos ulteriores segn mtodos
reconocidos.

Componentes en el kit de tincin PAS, Merck art. nro. 1.01646.

Solucin 1: cido perydico 0,5 %, acuoso
500 ml
Solucin 2: Reactivo de Schiff
500 ml

Almacenamiento

Preparacin

Estabilidad

El kit de tincin debe almacenarse entre +15C y +25C

Las soluciones pueden usarse hasta la fecha de caducidad indicada.

1. Solucin de azul alcin al 1%

Se disuelven, revolviendo, 5 g de azul alcin 8 GX Certistain en 500 ml de
cido actico al 3%. El valor del pH es aprox. 2,5.

Despus de abrir el frasco por primera vez, el contenido almacenado entre

+15C y +25C es utilizable hasta la fecha de caducidad indicada.
Los frascos deben mantenerse siempre bien cerrados.

2. Solucin de cido actico al 3%

Mezclar cuidadosamente 485 ml de agua destilada con 15 ml de cido actico
del 100%.

Notas sobre el empleo

Tcnica
Tincin PAS
Etapa
Tiempo
Desparafinar en forma tpica los cortes y rehidratar.
Enjuagar en agua destilada.
cido perydico
5 min.
Agua corriente del grifo, fluente
3 min.
Enjuagar en agua destilada.
Reactivo de Schiff
15 min.
Agua corriente del grifo, fluente
3 min.
Enjuagar en agua destilada.
Solucin de hematoxilina modificada segn Gill III
2 min.
Agua corriente del grifo, fluente
3 min.
Serie creciente de alcoholes, 2 x Neo-Clear
o xileno
Montar con Neo-Mount o Entellan Nuevo
Cubrir con Entellan Nuevo los preparados humedecidos con xileno, o con
Neo-Mount y cubreobjetos los preparados humedecidos con Neo-Clear.

Resultado
Ncleos
Polisacridos, glucgeno, mucopolisacridos neutros,
mucoprotenas y glucoprotenas, glucolpidos, fosfolpidos,
membrana basal, colgeno

azul
prpura

Para evitar errores, la tincin debera ser realizada por personal

especializado.
Solamente para uso profesional.
Deben cumplirse las directivas nacionales sobre seguridad en el trabajo y
aseguramiento de la calidad.
Deben emplearse microscopios equipados de acuerdo con el estndar.

Proteccin contra infecciones

Debe observarse a toda costa una proteccin eficaz contra infecciones de
acuerdo con las directivas de laboratorio.

Indicaciones para la eliminacin de residuos

Las soluciones usadas y las soluciones caducadas deben eliminarse como
desechos especiales, debindose cumplir las directivas locales de
eliminacin de residuos.
Merck, adems de aceptar la devolucin de productos usados o caducados
a travs del servicio de retrologstica, ofrece tambin ayuda tcnica para
soluciones locales de eliminacin de residuos.

Reactivos auxiliares
Merck
art. nro.
1.05174
1.01647
1.05234
1.00063
1.09843
1.09016
1.07961
1.00974

Tincin azul alcin PAS

Etapa
Desparafinar en forma tpica los cortes y rehidratar.
Solucin de azul alcin
Agua corriente del grifo, fluente
Enjuagar en agua destilada.
cido perydico
Agua corriente del grifo, fluente
Enjuagar en agua destilada.
Reactivo de Schiff
Agua corriente del grifo, fluente

Tiempo
5 min.
3 min.
10 min.
3 min.
15 min.
3 min.

1.00983
1.08681

Hematoxilina en solucin segn Gill III

Solucin de azul alcin
Azul alcin 8GX Certistain
cido actico 100% p.a.
Neo-Clear
Neo-Mount
Entellan Nuevo
Etanol
denaturalizado con 1% de
etilmetilcetona p.a.
Etanol absoluto p.a. , ACS, ISO
Xylol p.a., ACS,ISO

500 ml, 1 l, 2,5 l

500 ml
10 g
1l
5l
500 ml
100 ml, 500 ml
1l. 2,5 l
1l, 2,5 l
1l, 2,5 l

Clasificacin de sustancias peligrosas

Merck art. nro. 1.01646
Tener en cuenta la clasificacin de sustancias peligrosas en la etiqueta y
las indicaciones en la ficha de datos de seguridad.
La ficha de seguridad de Merck est disponible en Internet y a solicitud.

Componentes principales de los productos

Merck art. nro. 1.01646
Solucin 1
H5IO6
5g/l
Solucin 2
C.I. No. 42500
Na2SO3
1l =

0,91 g/l
> 0,8%
1,01 kg

Agosto 2004
Merck KGaA, 64271 Darmstadt, Alemania, tel.: +49 6151 72 -0