FACULTAD DE INGENIERIA CIVIL

PROGRAMA: INGENIERIA AMBIENTAL

PRACTICA: CROMATOGRAFA CAPA DELGADA

PRESENTADO POR:
CARLOS MAURICIO ERAZO BURBANO
ALVARO JOSE TROCHEZ

PRESENTADO A:
CLARA INES HURTADO SANCHEZ

AREA: LAB. QUIMICA ORGANICA

POPAYAN, CAUCA
2014

RESUMEN

La prctica de cromatografa de capa delgada, consiste en la separacin de una

sustancia, para ello utilizamos unas placas de aluminio recubiertas con una capa
de fase estacionaria de almina o gel de slice. Con ayuda de un capilar
aplicamos la sustancia a separar en este caso fluorescena y azul de metileno y
naranja de metilo y azul de metileno, luego las introducimos en el baso de
precipitados, el cual contiene un cantidad mnima de solvente para evitar el
contacto directo con la muestra. Luego que la placa empieza a absorber comienza
la separacin, una vez el solvente llega a la parte superior de la placa deba de ser
retirada del vaso de precipitados para posteriormente someterla a la luz ultra
violeta y determinar los cambios ocurridos.

CLCULOS Y RESULTADOS

Tabla 1.

mezcla

Distancia
Distancia
recorrida por la recorrida por
muestra cm
el solvente cm

RF

Fluoresceina +

Acetato etlico

3.3

3.6

0.916

Azul de metileno

Acetato etlico :
etanol (1:1)

3.35

3.6

0.972

Naranja de metilo +

Etanol 80%

3.3

3.6

0.916

Azul de metileno

Etanol 20%

3.4

3.6

0.44

RF= distancia recorrida por la muestra

Distancia recorrida por el solvente
RF = 3.3 / 3.6 = 0.916

Tabla 2.
Mescla
Fluoreseina +

Acetato etlico

Luz ultra violeta

Onda corta
Onda larga
Lamina fluorescente Lamina oscura

Azul de metileno

Desplazamiento de Aparece
nueva
la mancha
mancha
Acetato etlico : Lamina fluorescente Recorrido de la
etanol (1:1)
mancha

Naraja de metilo +

Etanol 80%

Azul de metileno

Etanol 20%

Observa mancha
Lamina oscura
Lamina fluorescente
Lamina fluorescente Lamina oscura

DISCUSIN DE RESULTADOS
El clculo de desplazamiento en la fase mvil no se encuentra en un valor
muy exacto, debido a que se hace la medicin se hace con una regla
comn, pudiendo verse alterados los resultados.
La polaridad de los compuestos dados la podemos diferenciar o comparar
tomando como referencia el factor de retencin (Rf) , donde, si el (Rf) es
mayor, el compuesto es menos polar, pero si es menor, la polaridad es
mayor, en este caso se presenta una similitud en todas las pruebas
realizadas.
Para lograr el efecto de separacin, la sustancia de absorcin debe ser
inerte con la sustancia a analizar y no actuar como catalizador en la
reaccin de descomposicin.
La forma de relacin de la sustancia de absorcin y la sustancia a analizar
se presenta mediante una interaccin dipolo-dipolo o mediante enlaces de
hidrogeno, en este caso podemos definir que se presentan ambos casos.
La polaridad juega un papel importante en la fase mvil, ya que, entre
mayor sea esta, mayor ser el incremento en el orden de movimiento o
elucin.
Durante el desarrollo de la fase mvil se observa que en la muestra con
etanol al 80%, se produce una rapidez mnimamente mayor que con las
otras sustancias, esta diferencia se justifica con la mayor solubilidad en las
fases estacionaria y mvil
Como la fase mvil se da por capilaridad, necesariamente implica
movimiento, por lo tanto una de las condiciones que debe cumplir el
solvente empleado, es el bajo punto de ebullicin y viscosidad, lo que
permite un movimiento, en este caso, de ascenso ms rpido.
La almina anhidra es un adsorbente muy activo, es decir que tiene una
gran capacidad para retener con gran fuerza a los compuestos, por esta
razn se utiliza para separar compuestos relativamente apolares.

 Las formulas moleculares se relacionan a continuacin; Etanol X%

(CH3CH20H+H20) , almina (Al 2O3)
los componentes menos polares, sern retenidos por la fase estacionaria,
por tanto se desplazarn a menor velocidad.
El indicador de fluorescencia utilizado es la luz UV, si la sustancia absorbe
luz ultravioleta, esta nos arrojara la longitud de onda de excitacin.

PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
Cul es la diferencia entre fluorescencia y fosforescencia? En este
caso cual de la dos se presenta?
Fluorescencia es un tipo de luminiscencia que se produce cuando una sustancia
se excita por radicacin luminosa. La longitud de onda es ms larga que de la luz
de excitacin;* por el contrario la fosforescencia es el nombre aplicado a la
radiacin espontnea de radiacin cuando los estados inicial y final tienen
diferente nmero de electrones desapareados. De nuevo el apareamiento y des
apareamiento de electrones es un proceso difcil, y cuando esto es un requisito
para que tenga lugar el proceso de radiacin este proceso tiende a ser bastante
lento, es decir el tiempo luego de la radiacin an queda una luz tenue hasta que
los electrones retoman su posicin inicial.**
Se presenta la fluorescencia con la fluorescena la sustancia se excita por
radicacin luminosa.
Consulte otras formas de revelado durante un proceso de
cromatografa en TLC.
Esta puede ser de:

Gel de slice.
Celulosa.
Poliaminas.
Gel de xido de aluminio.
Gel de silicato magnsico.

 En qu consisten las tcnicas de GC-MS y HPLC? Para qu tipos de

separaciones se utilizan? Qu relacin tienen con la cromatografa?
La electroforesis capilar, una tcnica analtica muy prometedora, ha sido
investigado aplicada al anlisis del cido domoico, las tcnicas GC-MS y HPLC
fueron propuestas tambin para la determinacin de dichos compuestos as la
tcnica GC-MS es aplicable a concentraciones de cido domoico en mariscos
contaminados en el rango de 1 / 500 mg/g. sin embargo la accin de derivatizacin
es necesaria para convertir los componentes ASP en sus derivados Ntrifluoracetyl-O-silyil requeriendose un clean-upintencivo para facilitar la
derivatizacin. La tcnica HPLC combinada con in spray MSha resultado muy til
para la confirmacin del cido domoico en mariscos.
Gracias al desarrollo de estas nuevas tcnicas analticas se han descubierto se
han descubierto nuevos grupos de biotoxinas marinas, incluyendo la espirolidas,
prorocentrolidas, gymnodiminas, pinnatoxinas,azasprircidos.
Consulte la estructura de las fases estacionarias ms comunes
usadas
Cromatografa
Etanol:

Agua:

Azul de metileno:

Fluorescena:

Naranja de metilo:

CONCLUSIONES
Podemos entender el uso y la utilidad de la cromatografa de capa delgada, en
trminos generales es un proceso rpido y permite identificar por medio de
separacin, los compuestos de una mezcla, los factores ms importantes a tener
en cuenta, son el tipo de sustancia a evaluar y las sustancia que se utilizaran para
ese proceso, en la cromatografa de capa fina juegan un papel importante, las
fuerzas intermoleculares, el momento dipolar, la polaridad y la solubilidad, entre
otros, las condiciones de trabajo deben ser adecuadas para mejorar la obtencin
de resultados.

BIBLIOGRAFIA

Abbott D. Y Andews R. S., Introduccin a la Cromatoqrafa, 3a ed.,

Alhambra, Madrid, 1970.
Ault A., Techniques and Experiments for Orqanic Chemistrv. University
Science Books. USA. 1998.
vila Z. G. et a/. Qumica Orsnica. Experimentos con un enfoque
ecolgico. Direccin General de Publicaciones y Fomento Editorial, UNAM,
Mxico, 200'1.
http://es.wikipedia.org/wiki/Fluorescencia
http://books.google.com.co/books?
id=tcCeoc0ubbEC&pg=PA94&dq=fluorescencia&hl=es&sa=X&ei=EptDUsjO
FIj8QSAk4CwAg&ved=0CCwQ6AEwAA#v=onepage&q=fluorescencia&f=false