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CITOGENETICA PRACTICA N1
TEMA:
DETERMINACIN DE LA CROMATINA
SEXUAL EN EPITELIO DE MUCOSA
ORAL
INTEGRANTES:
Pablo Olavarra, Yuriko
Snchez de la Cruz, Judith
PROFESOR:
Mg. Jos Enrique Olivera Garca
LIMA - 2014
INTRODUCCIN
adherida
la
membrana
nuclear.
los
leucocitos
OBJETIVOS
Observar y diferenciar entre hombres y mujeres la aparicin de corpsculos de
BAAR a partir de muestras de mucosa bucal y de esta manera identificar los
cromosomas X inactivos en las mujeres.
M ATE R I AL E S
Portaobjetos
Cubreobjetos
Frascos koplin
Hisopos
Colorante carbolfucsina
Pinzas de metal
Microscopio
PROCEDIMIENTO
1.- Toma de Muestra: Antes de tomar la muestra se recomienda enjuagar la boca.
Utilizando una esptula de madera o lmina portaobjetos limpia, se hace un
raspado de la mucosa oral y luego se hace un frotis sobre una lmina
portaobjetos, evitando retornar la lmina por el mismo lugar del extendido.
2.- Fijacin: Colocar las lminas en un frasco Koplin que contenga el fijador
(alcohol al 96%) por 15 min. Como mnimo, aunque puede quedarse en este
fijador por ms tiempo (1 semana sin deteriorarse).
3.- Hidrlisis: sacar la lmina del fijador y dejarlo secar al medio ambient5e, luego
colocarlo en otro frasco Koplin que tenga HCI 5N po un tiempo de 30 min.
Despus enjuagar en agua corriente (2veces) para parar la accin del cido.
4.- Coloracin: Cubrir por completo la lmina portaobjetos con el colorante
carbolfucsina, por un tiempo de 10 minutos (antes filtrar el colorante).
5.- Decoloracin: pasar rpidamente las lminas por 2 recipientes que contengan
alcohol etlico (100%) y alcohol corriente (96%) con la finalidad de eliminar el
exceso de colorante y decolorar el citoplasma de las clulas.
6.- Observacin microscpica: una vez seca la lmina, se procede a observar
en el microscopio con el objetivo de 10 X para seleccionar el campo a estudiar y
luego se pasa al objetivo 100 X o lente de inmersin para realizar el recuento de
corpsculos de Barr, siguiendo un criterio de conteo pre- establecido.
7.- Resultados: