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2)UROCULTURA:
Materiais:
-Meio de cultura gar sangue de carneiro a 5%;
-Ala calibrada;
-Amostra urina.
Tcnica/procedimento:
1-Tcnica da ala calibrada: Uma ala calibrada de 1 l (0,001 mL) usada para inocular a urina nos meios de
cultura em placas. A ala mantida verticalmente e imersa logo abaixo da superfcie da urina homogeneizada,
devendo ser movimentada para cima e para baixo. Uma alada de urina , ento, depositada e espalhada na
superfcie de cada meio. Este procedimento proporciona, invariavelmente, uma separao que permite a contagem
de colnias na faixa de importncia clnica
e a seleo de colnias isoladas para estudos subseqentes. A ala calibrada pode ser substituda por micropipetas
calibradas e ponteiras estreis, obtendo-se os mesmos resultados.
2-Tcnica de inoculao com pipeta: alternativa para o mtodo de espalhamento em superfcie com ala calibrada
consiste em inocular 0,1 mL de uma diluio de urina em gua destilada a 1:1000, na superfcie de uma placa de
gar, e distribuir esse inculo, uniformemente, sobre a superfcie total da placa com o auxlio de uma ala estril
ou basto de vidro em L. Um dispositivo giratrio pode ser usado para se obter uniformidade no espalhamento
do inculo. As colnias so contadas e os resultados so multiplicados por 1000 para dar a contagem de viveis.
Em sua execuo a ala bacteriolgica introduzida em uma amostra de urina bem homogeneizada, fazendo-se
movimentos para baixo e para cima no sentido vertical. A ala carregada ento utilizada para inocular cada meio
de cultura, fazendo-se, inicialmente, uma linha reta no centro da placa e completando-se o espalhamento com uma
srie de passagens em um ngulo de 90, atravs da linha original. Meios de cultura: As placas com meio seletivo
(Mac Conkey ou EMB) e outro meio no seletivo (gar Sangue de Carneiro a 5%) devero ser incubadas 24
horas 35-37C, (Enterococos e Streptococcus agalactiae ou leveduras). Meio CLED, permite crescimento das
enterobacterias, impedindo o espalhamento dos Proteus, a maioria dos gram positivos e leveduras. Leitura em 4872 horas quando a contagem de leuccitos ou a bacterioscopia sugerirem infeco urinria e no for verificado
crescimento bacteriano em 24 horas.
3)BACTERIOSCOPIA DE URINA:
Tcnica/procedimento:
1-Com a urina no centrifugada, e apenas homogeneizada, pegar uma ala com 10 l de urina e depositar sobre
uma lmina de vidro;
2-Deixar secar, fixar na chama e corar pelo gram;
3-Com objetiva de imerso (1000x) fazer contagem;
4-Se encontrar 1 ou mais bactrias por campo, sugere 105 UFC;
5-A presena de clulas epiteliais e vrios tipos morfolgicos de bactrias sugere contaminao.
4)SEDIMENTAO:
Observao e contagem de hemceas, leuccitos, clulas epiteliais, presena de microorganismos,
cilindros, cristais, bactrias, presena de espermatozides, presena de hifas
Materiais:
-Tubo de centrfuga;
-Centrfuga;
-Pipetas;
-Lmina;
-Lmnula;
-Microscpio.
Tcnica/procedimento:
1-Homogeneizar e transferir 10 mL de urina para um tubo de centrfuga;
2-Centrifugar a 1500-2000 rpm por 5 minutos;
3-Retirar 9,8 mL do sobrenadante e deixar 0,20 mL no tubo;
4-Ressuspender o material depositado com leves batida no fundo do tubo;
5-Transferir 0,020 mL para uma lmina, colocar uma lamnula e avaliar 10 campos.