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Sociedade de Ensino Superior Piauiense - SESPI

FACVLDADE MAURICIO DE NASSAU FAP PARNABA
Diretoria Acadmica DA
Curso de Engenharia Civil

MANUAL DE AULAS PRTICAS DA DISCIPLINA DE QUMICA GERAL E EXPERIMENTAL

Professor: Jos Roberto da Cunha Lima

Bloco I

Parnaba Piau

SUMRIO

PRTICA 1:
DO ESTUDO E USO DO LABORATRIO DE QUMICA,
BIOQUMICA, BIOFSICA E FISIOLOGIA

Prtica 1: Do estudo e uso do laboratrio de qumica,

bioqumica, biofsica e fisiologia

01

Prtica 2: Vidrarias e equipamentos

10

RECOMENDAES GERAIS
a) De Ordem Pessoal

Prtica 3: pH e tampes
Prtica 4: Determinao da concentrao das protenas

15
19

laboratrio;

Use calados e avental de mangas compridas fechadas;

Use sempre culos de segurana no laboratrio;

Use EPIs apropriados nas operaes que apresentarem riscos

Prtica 5: Caracterizao de triacilgliceris em leo vegetal 25

BIBLIOGRAFIA

27

Trabalhe com ateno e NO FUME, COMA OU BEBA dentro do

potenciais;

No use roupas de tecido sinttico, facilmente inflamveis;

No coloque reagentes de laboratrio no seu armrio de roupas;

No picote nenhum tipo de produto com a boca;

No leve as mos boca ou aos olhos quando estiver trabalhando

com produtos qumicos;

No use lentes de contato quando estiver trabalhando em

laboratrios;

No se exponha a radiaes ultravioleta, infravermelho etc;

Feche todas as gavetas e portas que abrir;

Leia o roteiro, atenciosamente, antes de executar a prtica;

Planeje o trabalho a ser realizado;

Em caso de derramamento de produtos txicos, inflamveis ou corrosivos,

Trabalhe com quantidades indicadas de substncias evitando o

tomar as seguintes precaues:

desperdcio dos reagentes, gs, luz e outros.

parar o trabalho, isolando na medida do possvel a rea;

Verifique as condies de aparelhagem;

advertir pessoas prximas sobre o ocorrido.

Em caso de incndio NUNCA USE EXTINTOR EM HUMANOS;

s efetuar a limpeza aps consultar a ficha de emergncia do

Conhea as periculosidades dos produtos qumicos que voc

manuseia.

b) Referentes ao Laboratrio

produto;

alertar a chefia;

verificar e corrigir a causa do problema;

no caso do envolvimento de pessoas, lavar o local atingido com

Mantenha as bancadas sempre limpas e livres de materiais

gua corrente e procurar o servio mdico.

estranhos ao trabalho;

Faa limpeza prvia, com material apropriado, aps esvaziar um

EQUIPAMENTOS DE SEGURANA

frasco de reagentes, antes de coloc-los para lavagem;

Os seguintes equipamentos de segurana devem estar ao alcance de

Rotule os reagentes ou solues preparadas e as amostras

todos:

coletadas;

luvas e aventais;

Jogue papis usados e materiais inservveis no lixo somente

protetores faciais;

quando no apresentar riscos de contato com produtos qumicos

culos de segurana;

oxidantes;

mscaras contra gases e ps;

Use pinas e materiais de tamanho adequado e em perfeito

extintores de incndio;

chuveiros de emergncia;

lavador de olhos;

cobertores de segurana.

estado de conservao;

Utilize a capela ao trabalhar com reaes que liberam fumos

venenosos ou irritantes;

Evitar descartar produtos qumicos nas pias de laboratrio.

Use-os corretamente, em caso de dvidas, consulte o seu PROFESSOR

Inspecione-os quando em operao;

OU TECNICO DO LABORATORIO.

No deixe equipamentos eltricos ligados no laboratrio, fora do

expediente normal, sem avisar a Superviso de turno e anotao

USO DE EQUIPAMENTOS E APARELHAGEM EM GERAL

em livro de avisos ou dispositivo similar;

Planeje as operaes com novos equipamentos;

Leia previamente as instrues sobre o equipamento a ser

utilizado;

Remova

frascos

de

inflamveis

do

local

onde

ir

usar

equipamentos eltricos ou fonte de calor;

Saiba de antemo o que fazer em uma situao de emergncia.

Enxugue qualquer lquido derramado no cho antes de operar

com equipamentos eltricos.

USO DE EQUIPAMENTOS ELTRICOS

Chapas ou Mantas de Aquecimento

Instrues Gerais:

S opere equipamentos eltricos quando:

Use chapas ou mantas de aquecimento, para evaporao ou

refluxos de produtos inflamveis, dentro da capela;

fios, tomadas e plug estiverem em perfeitas condies;

o fio terra estiver ligado;

tiver certeza da voltagem compatvel entre equipamentos e

No ligue chapas ou mantas de aquecimento com resduos

aderidos sobre suas superfcies;

Use termo-isolantes sob chapas ou mantas de aquecimento.

(Amianto ou similar).

circuitos;
No instale nem opere equipamentos eltricos sobre superfcies midas;

Verifique periodicamente a temperatura do conjunto plug-tomada;

Caso esteja anormal desligue-o e comunique ao PROFESSOR;

No use equipamentos eltricos sem identificao de voltagem.

No

confie

completamente

equipamentos eltricos;

no

controle

automtico

Use chama na capela ou nos locais onde for permitido.

No acenda o bico de Bunsen sem verificar e eliminar os seguintes

problemas:

Solicite ao Departamento competente que faa a identificao.

USO DE CHAMA EM LABORATRIO

de

Vazamentos;

dobra no tubo de gs;

ajuste inadequado entre o tubo de gs e conexes;

No coloque o rosto dentro da capela;

existncia de inflamveis ao redor;

O sistema de exausto somente deve ser desligado 10 a 15

Fechar o registro da linha de gs aps seu uso;

minutos aps o trmino dos trabalhos, para permitir limpeza do

No acenda maaricos, bico de Bunsen, etc, com a vlvula de gs

sistema. (gases txicos).

combustvel muito aberta;

No deixe o bico de Bunsen aceso quando no estiver sendo

utilizado.

OPERAO EM CAPELAS

Observe os seguintes cuidados, ao sinal de paralisao do exaustor de

capelas:

pare a anlise imediatamente;

feche ao mximo a janela da capela;

coloque mscara contra gases, quando houver risco de exposio

A capela s oferecer mxima proteo se for adequadamente utilizada.

OPERAO EM CAPELA COMUM

a gases e vapores;

avise o supervisor e o pessoal do laboratrio;

s reinicie a anlise no mnimo 5 minutos aps a normalizao de

Nunca inicie um servio em capelas, sem que:

exausto;

O sistema de exausto esteja operando;

Piso e janela estejam limpos;

contaminantes (gases, fungos e poeiras), a uma distncia maior

As janelas estejam funcionando perfeitamente;

que 20 cm da face da capela;

Nunca inicie qualquer trabalho que exija aquecimento, sem

Deixe na capela apenas a poro de amostra a analisar, remova

todo o material desnecessrio, principalmente produtos txicos. A

Proteja o tampo da capela com folha plstica ou similar, quando

manusear cido fluordrico;

remover produtos inflamveis da capela;

Procure instalar os equipamentos, vidros, dispositivos que gerem

Nunca utilize a capela comum para cido perclrico ou

substncias radioativas.

capela no local de armazenamento de reagentes ou solues;

Mantenha as janelas das capelas com o mnimo de abertura

RESDUOS

possvel, para maior proteo e maior velocidade facial do ar;

Definio

Toda substncia, no desejvel, resultante de um processo qumico no

qual ocorre transformao.
Cuidados

No jogue fora nenhum tipo de resduo sem antes verificar o local

adequado para faz-lo;

Para cada tipo de resduo existe uma precauo quanto a sua

eliminao, em funo da sua composio qumica e/ou biolgico.
Ex.:

no jogue produtos corrosivos concentrados na pia, eles s

podem ser descartados depois de diludos ou neutralizados;

no descarte lquido inflamveis no esgoto

descarte

os

materiais

biolgicos

em

local

adequado

(DESCARTEX).
RECOMENDAES FINAIS
Tenha este Guia sempre mo no laboratrio e releia-o periodicamente. O
risco de acidente maior quando nos acostumamos a conviver com o
perigo e passamos a ignor-lo.
A segurana de um laboratrio est apoiada na determinao de cada um
de seus elementos:
VOC TAMBM RESPONSVEL
193 BOMBEIROS.
192 SAMU

INSTRUES GERAIS PRIMEIROS SOCORROS (BSICOS)

cido na pele
Lave imediatamente com soluo de bicarbonato de sdio.
Aplique glicerina com Mg (OH)2 a 10%.
Bata esta mistura at obter uma pasta homognea.
Passe sobre a queimadura.
cido na boca
Faa bochecho com leite de magnsia. Aps, lavar com bastante gua.
cido nos olhos
Lave imediatamente com soluo de bicarbonato de sdio 1%.
lcali na pele
Lave o local com soluo de cido actico 0,1 mol/L ou vinagre.
lcali nos olhos
Lave os olhos com soluo de cido brico 2%.
lcali na boca
Faa bochecho com soluo de vinagre 1: 4
Slido nos olhos ou ouvidos
Pingue algumas gotas de leo de cozinha.
Queimadura na pele (fogo, gordura, metais quentes, etc).
Aplique uma pasta de Picrato de Butesin sobre o local.

RISCO

A
G
E
N
T
E
S
C
A
U
S
A
D
O
R
E
S

QUMICO
(VERMELHO)

FSICO
(VERDE)

BIOLGICO
(MARROM)

ERGONMICO
(AMARELO)

Fumos metlicos e
vapores

Rudo e ou som muito

alto

Microorganismos
(Vrus, bactrias,
protozorios)

M postura do corpo em
relao ao posto de
trabalho

Gases asfixiantes H,
He, N e CO2

Oscilaes e vibraes
mecnicas

Lixo hospitalar,
domstico e de animais

Trabalho estafante e ou
excessivo

Pinturas e nvoas em
geral

Ar rarefeito e ou vcuo

Esgoto, sujeira, dejetos

Falta de Orientao e
treinamento

Risco de queda de nvel,

leses por impacto de
objetos

Solventes (em
especial os volteis)

Presses elevadas

Objetos contaminados

Jornada dupla e ou
trabalho sem pausas

Mau planejamento do
layout e ou do espao
fsico

cidos, bases, sais,

alcois, -teres, etc.

Frio e ou calor e
radiao

Contgio pelo ar e ou
insetos

Movimentos repetitivos

Cargas e transportes em
geral

Picadas de animais
(ces, insetos, rpteis,
roedores, aracndeos,
etc.)

Lixo em geral, fezes e

urina de animais,
contaminao do solo e
gua

Equipamentos
inadequados e no
ergonmicos

Risco de fogo,
detonao de
explosivos, quedas de
objetos

Aerodispersides no
ambiente (poeiras
vegetais e minerais)

Alergias, intoxicaes e
queimaduras causadas
por vegetais

Fatores psicolgicos
(no gosta do trabalho,
presso do chefe, etc)

Risco de choque eltrico

(corrente contnua e
alternada)

Reaes qumicas

Ingesto de produtos
durante pipetagem
DIAMANTE DE HOMMEL

ACIDENTES
(AZUL)
Equipamentos
inadequados,
defeituosos ou
inexistentes
Mquinas e
equipamento sem
Proteo e ou
manuteno

4 - Gases inflamveis, lquidos muito volteis, materiais pirotcnicos

(<22C)
3 - Produtos que entram em ignio a temperatura ambiente (<37C)
2 - Produtos que entram em ignio quando aquecidos moderadamente
(<93C)
1 - Produtos que precisam ser aquecidos para entrar em ignio (>93C)
0 - No inflamvel
Azul - Perigo para Sade:
4 - Produto Letal
3 - Produto extremamente txico
2 - Txico
1 - Ligeiramente txico
0 - Produto no perigoso ou de risco mnimo
Amarelo - Reatividade:
OXY Oxidante Forte
ACID cido Forte
ALK - Alcalino (Base) Forte
COR - Corrosivo
W - No misture com gua
Vermelho Inflamabilidade:

4 - Podem explodir
3 - Podem explodir com choque mecnico ou calor
2 - Reao qumica violenta
1 - Instvel se aquecido
0 Estvel

RELATRIOS

Os valores tm sentido? Que informaes importantes podemos tirar?

Que implicaes esses resultados podem ter?

Os relatrios, quando solicitados, devero ser entregues nas datas

combinadas, para no haver diminuio de nota. Eles devero ser escritos
de acordo com o modelo apresentado a seguir, que tambm se baseia nas
normas da ABNT.
O relatrio dever apresentar a seguinte estrutura:
(1) Capa Deve identificar, de forma clara e organizada, a autoria do
trabalho, a instituio na qual ele foi realizado e o ttulo do mesmo. Os
itens que devem constar da capa so:
(a) Nome da Universidade; (b) Centro de Cincias...; (c) Curso; (d)
disciplina; (e) ttulo; (f) aluno; (g) professor; (h) local; (i) data. Nesta ordem.
Deve conter ainda:

Concluses um tpico mais resumido, deve ser objetivo e trazer

apenas aquilo que foi obtido.
Bibliografias Relaciona todas as fontes que voc usou para
fundamentar seu trabalho, buscar mtodos que foram usados etc. Deve
seguir as normas ABNT. Caso no tenha sido usado nenhum livro ou outra
fonte, colocar: Manual fornecido pelo professor.
Da Introduo em diante, todos os itens devem vir em sequncia
corrida. Isso quer dizer que voc no deve separar em pginas diferentes
os diferentes itens, ou seja, terminado um item, j escrever o item
seguinte, na mesma pgina se couber, com separao de dois espaos
(duas vezes a tecla Enter).

Introduo uma espcie de carto de visitas e deve conter uma breve

Exemplo de Relatrio

apresentao do trabalho, a problemtica e os objetivos sem distino em

itens, ou seja, tudo isso presente no mesmo item
Introduo. Deve conter, tambm, a fundamentao terica, se esta no

DETERMINAO DA DENSIDADE DO CHUMBO SLIDO

vier em um tpico parte.

Metodologia Deve responder s seguintes perguntas: (a) Que

RESUMO

materiais, reagentes etc. voc usou e (b) o que e como voc fez?
Resultados e Discusso Voc expe os dados obtidos, os valores

A densidade do chumbo slido foi determinada, na temperatura de

determinados e deve discutir esses resultados a luz dos pressupostos

303,15 K, pela razo entre a massa e o volume de corpos de chumbo

tericos, das previses feitas e dos objetivos. Nessas discusses

de tamanhos variados. Obteve-se o valor 11,4 0,1 g / cm3, o qual

buscamos responder a perguntas do tipo: Os resultados eram esperados?

apresenta boa concordncia com o valor reportado na literatura.

10

INTRODUO

As seguintes substncias, disponveis no laboratrio de Qumica

da Faculdade Santo Agostinho, foram utilizadas neste experimento:

O chumbo um elemento qumico metlico, de nmero atmico

82, que funde na temperatura de 600,6 K. Seu smbolo qumico Pb.

gua destilada

aplicado em proteo contra radiao ionizante, em acumuladores

Corpos de chumbo (tamanhos variados)

(baterias), soldas, munio, alm de outras. (BARBOSA, 1999)

Densidade a razo entre a massa e o volume (vide Equao 1).

Procedimento

uma propriedade fsica que pode ser utilizada para identificar

substncias. Pelo fato dos slidos serem bem pouco compressveis,
a densidade dos slidos no varia muito com a temperatura.

densidade

massa
volume

O objetivo deste experimento determinar a densidade do

chumbo slido e compar-lo com o valor 11,35 g / cm3 apresentado
na literatura. (KOTZ, 2002).PARTE EXPERIMENTAL
Materiais e Reagentes
Os seguintes materiais, disponveis no laboratrio de Qumica da
Faculdade Santo Agostinho, foram utilizados neste experimento:
Proveta de vidro (capacidade: 50,0 cm3)
Balana Tcnica (preciso 0,1 g) Fabricante: Perkin Elmer

Foram pesados trs corpos de chumbo, de tamanhos variados,

em uma balana tcnica, anotando-se as massa com preciso de 0,1
g. Cada corpo de chumbo foi imerso em uma proveta de vidro, de
capacidade igual a 50,0 cm3, contendo prviamente 25,0 cm3 de gua
destilada. A seguir, anotou-se o volume de gua deslocado aps a
imerso de cada corpo de chumbo. Todo o procedimento foi feito na
temperatura ambiente do laboratrio, igual a 303,15 K.
RESULTADOS E DISCUSSO
Os valores das massas dos corpos de chumbo e dos volumes de
gua deslocados aps a imerso de cada corpo esto apresentados
na Tabela 1. Assumiu-se que o volume deslocado de gua
corresponde ao volume do corpo imerso. A densidade de cada corpo
de chumbo foi calculada, a partir dos valores medidos de massa e de
volume, utilizando a Equao 1. Por fim, determinou-se o valor mdio

11

da densidade do chumbo e o respectivo desvio-padro, que mede a

preciso do resultado. O valor obtido para a densidade do chumbo

BARBOSA, A. L. Dicionrio de Qumica. AB Editora: Goinia, 1999.

igual a 11,4 0,1 g / cm3 e apresenta uma boa concordncia com o

p.81.

valor da literatura 11,35 g / cm3. (KOTZ e Treichel, 2002)

KOTZ, J. C.; TREICHEL, Jr. P. Qumica e Reaes Qumicas. 4.ed., v.1,

LTC Editora S.A.: Rio de Janeiro, 2002.

Tabela 1. Valores das massas dos corpos de chumbo, dos volumes

de gua deslocados e das densidades calculadas.
Corpo de Chumbo

massa / g

volume / cm3

densidade / g/cm3

57,5

5,0

11,5

79,8

7,0

11,4

101,7

9,0

11,3

Mdia

11,4

desvio-padro

0,1

CONCLUSO
A partir de medidas de massa e de volume de corpos de chumbo
de tamanhos variados, determinou-se o valor 11,4 0,1 g / cm3 para a
densidade do chumbo slido, na temperatura de 303,15 K. Este valor
apresenta uma boa concordncia com o valor 11,35 g / cm3,
reportado na literatura.

REFERNCIAS

PRTICA 2:

12

VIDRARIAS E EQUIPAMENTOS
ALMOFARIZ COM PISTILO
Usado na triturao e pulverizao de slidos.

BECKER
BALO DE FUNDO CHATO
Utilizado como recipiente para conter lquidos ou solues ou mesmo
fazer reaes com desprendimento de gases. Pode ser aquecido
sobre o TRIP com TELA DE AMIANTO.

BALO DE FUNDO REDONDO

de uso geral em laboratrio. Serve para fazer reaes entre

solues, dissolver substncias slidas, efetuar reaes de
precipitao e aquecer lquidos. Pode ser aquecido sobre a
TELA DE AMIANTO.

BURETA

Utilizado principalmente em sistemas de refluxo e evaporao

vcuo, acoplado a ROTAEVAPORADOR.
Aparelho utilizado em anlises volumtricas.

BALO VOLUMTRICO
Possui volume definido e utilizado para o preparo de solues em
laboratrio.

13

CADINHO

Usado para guardar substncias em atmosfera com baixo

ndice de umidade.

Pea geralmente de porcelana cuja utilidade aquecer

substncias a seco e com grande intensidade, por isto
pode ser levado diretamente ao BICO DE BUNSEN.

ERLENMEYER
CPSULA DE PORCELANA

Utilizado em titulaes, aquecimento de lquidos e para dissolver

substncias e proceder reaes entre solues.

Pea de porcelana usada para evaporar lquidos das

solues.

FUNIL DE BUCHNER
CONDENSADOR

Utilizado em filtraes a vcuo. Pode ser usado com a funo de

FILTRO em conjunto com o KITASSATO.

Utilizado na destilao, tem como finalidade condensar

vapores gerados pelo aquecimento de lquidos.

FUNIL DE SEPARAO
DESSECADOR

14

Utilizado na separao de lquidos no miscveis e na extrao

lquido/lquido.

FUNIL DE HASTE LONGA

Usado na filtrao e para reteno de partculas slidas. No deve
ser aquecido.

Utilizada para medir pequenos volumes. Mede volumes variveis.

No pode ser aquecida.

PIPETA VOLUMTRICA

KITASSATO
Utilizado em conjunto com o FUNIL DE BUCHNER em
FILTRAES a vcuo.

PIPETA GRADUADA

Usada para medir e transferir volume de lquidos. No pode ser

aquecida, pois possui grande preciso de medida.

15

PROVETA OU CILINDRO
GRADUADO
Serve para medir e transferir volumes de lquidos. No pode ser
aquecida.

Para a medida de massa de slidos e lquidos no

volteis com grande preciso.

TUBO DE ENSAIO

BICO DE BNSEN

Empregado para fazer reaes em pequena escala, principalmente

em testes de reao em geral. Pode ser aquecido com movimentos
circulares e com cuidado diretamente sob a chama do BICO DE
BNSEN.

a fonte de aquecimento mais utilizada em laboratrio.

Mais contemporaneamente tem sido substitudo pelas
MANTAS E CHAPAS DE AQUECIMENTO.

VIDRO DE RELGIO
Pea de Vidro de forma cncava usada em anlises e
evaporaes. No pode ser aquecida diretamente.

ESTANTE PARA TUBO DE ENSAIO

usada para suporte dos TUBOS DE ENSAIO.

GARRA DE CONDENSADOR
ANEL OU ARGOLA
Usado como suporte do funil na filtrao.

BALANA DIGITAL

Usada para prender o condensador haste do suporte

ou outras peas como bales, erlenmeyers etc.

16

PINA DE MADEIRA
SUPORTE UNIVERSAL
Usada para prender o TUBO DE ENSAIO durante o
aquecimento.

Utilizado em operaes como: Filtrao, Suporte para

Condensador, Bureta, Sistemas de Destilao
etc. Serve tambm para sustentar peas em geral.

PINA METLICA
Usada para manipular objetos aquecidos.
TELA DE AMIANTO
Suporte para as peas a serem aquecidas. A funo do
amianto distribuir uniformemente o calor recebido
pelo BICO DE BUNSEN.
PISSETA OU FRASCO LAVADOR

TRIP
Usada para lavagens de materiais ou recipientes
atravs de jatos de gua, lcool ou outros solventes.

Sustentculo para efetuar aquecimentos de solues

em vidrarias diversas de laboratrio. utilizado em
conjunto com a TELA DE AMIANTO.

17

PRTICA 3:

pesagem dos trs recipientes selecionados secos.

CONFIABILIDADE DE MEDIDAS.

Objetivo da Prtica
o Conhecer algumas vidrarias e equipamentos utilizados em
laboratrio de qumica.
o Diferenciar vidrarias com relao exatido.
o Observar a preciso de maneira prtica.
o Utilizar vidrarias de maneiras correta.
Fundamentao Terica

Em um laboratrio de qumica so utilizados comumente diversos frascos

e equipamentos que podem realizar medidas (de volume, massa,
temperatura, PH, calorimetria), regular o ambiente (estufas, dessecadores,
agitadores,...) ou ainda modific-los de forma adequada.

Pea ao seu professor instrues sobre o uso da(s) balanas e faa a

Depois de anotar a massa de cada vidraria seca, coloque 50 mL de gua
destilada em cada recipiente separado. (o volume deve ser medido de
acordo com a graduao da vidraria).

Depois de adicionar a gua no recipiente pese cada recipiente com gua.

Utilize o valor da densidade da gua de 1,00 g/ mL e anote seus

resultados na tabela abaixo.

VIDRARIA

Entre os auxiliares mais comuns entre os usurios de laboratrio esto s

vidrarias. As vidrarias so, em sua maioria, instrumentos de vidro cristal ou
temperado, para que as medidas sejam precisas e o recipiente no reaja
com as substncias contidas nele.
Considerando que estes instrumentos so partes essenciais ao trabalho
em laboratrio, ser apresentada uma lista geral com vidrarias mais
comuns e suas utilizaes.
Parte I
Teste de exatido

Separe as seguintes vidrarias: proveta de 50 mL, balo volumtrico de 100

mL e bquer de 100 mL

Massa
da
vidraria
seca

Massa
da
vidraria
+ 50
mL de
H2O

Massa
de
gua

Volume
de
gua

Diferena
para 50
mL

Erro
percentual

Bquer
Balo
Proveta

Formula do Erro Percentual = [valor real valor terico] * 100

Valor terico

18

PRTICA 4:

cidos e Bases

09 Vidro conta-gotas (para cada um dos reagentes e indicadores

testados);

Indicadores: fenolftalena e azul de timol;

Reagentes:

1. Objetivos

1. Soluo de cido clordrico 0,1 mol L-1

Detectar o carter cido e bsico de diferentes solues. Compreender a

2. Soluo de hidrxido de sdio 0,1 mol L-1

escala de pH e testar o uso de indicadores no procedimento.

3. Vinagre branco puro

4. Sabo em p em gua

5. Suco de limo

6. Soluo de leite de magnsia em gua (1:20)

2. Importante
O qumico sueco Svante Arrhenius estudou a dissociao de
eletrlitos. Em 1884, ele definiu cido como um eletrlito que fornece ons
H+, que simplesmente um prton. Pelo fato de todas as solues de
cidos em gua conterem este on em excesso, elas possuem certas

4. Procedimento Experimental

propriedades em comum, tais como o sabor azedo, a capacidade de

mudar a cor de certos corantes.

A)

das estantes A e B;

Arrhenius definiu base como um eletrlito que fornece ons OH-.

Assim, um composto inico hidrossolvel cujo nion OH- uma base,

Numere os tubos de ensaio de 1 a 6. Faa isso para os tubos

B)

tais como NaOH, Ca(OH)2, Mg(OH)2, entre outros. As bases apresentam

Transfira, com o auxlio do conta-gotas, as substncias a

serem testadas para os respectivos tubos de ensaio, de

sabor adstringente ou amargo e os hidrxidos dos metais dos grupos 1 e 2

forma que o lquido preencha aproximadamente 3 cm do

quando em soluo aquosa ou fundidos, podem conduzir eletricidade.

tubo;
3. Materiais e reagentes

Estantes para tubos de ensaio contendo 12 tubos;

C)

Estante A: adicione 3 gotas de azul de timol em cada um

dos tubos. Anote a cor e relacione com o carter cido-

19

PRTICA 5:

bsico. Ateno: vermelho = cido forte, amarelo = cido

pH e Tampes

fraco, azul = base.

D)

Estante B: adicione 3 gotas de fenolftalena em cada um

dos tubos. Anote a cor e relacione com o carter cidobsico. Ateno: vermelho = base, incolor = outras funes.

Introduo
Soluo tampo ou soluo tamponada aquela que, ao adicionarmos
uma pequena quantidade de cido ou base, mesmo que fortes, mantm o

5. Bibliografia

seu pH praticamente invarivel.

provvel

que

observao

destes

fatos

leve

ao

seguinte

- UCKO, D.A. Qumica para as cincias da sade. Uma introduo

questionamento:

qumica geral, orgnica e biolgica. 2 Ed. So Paulo: Manole,

Como as solues tampo conseguem manter o seu pH praticamente

1992.

constante?

- RUSSEL, J. B. Qumica geral. 6. ed. Rio de Janeiro, LTC, 1996.

- MAHAN, B. M.; MYERS, R. J. Qumica um curso universitrio.
4. ed. So Paulo, Edgard Blucher, 1995.
6. Anexos
1) Defina as funes qumicas cido e base.
2) Discorra sobre a escala de pH.
3) O que so indicadores? D exemplos.

Vamos imaginar uma soluo tampo constituda por uma base fraca
(BOH) e um sal (BA) derivado desta base.
Nesta soluo, ocorrem os seguintes fenmenos:
-Pequena dissociao da base (Conceito de Bronsted):

(Na soluo predominam frmulas da base BOH)

-Dissociao total do sal:
BA B+ + A(Na soluo predominam ons B+ e A-)
Observao: Note que o on B+ comum base e ao sal.
Ao juntarmos a esta soluo uma base forte, esta ir liberar ons OH -, que
sero consumidos pelo equilbrio:

20

Como consequncia, este equilbrio desloca-se para a esquerda, e com

CLCULO DO pH DE UMA SOLUO TAMPO

isso a basicidade da soluo no aumenta e o pH no sofre variao.

Vamos supor uma soluo tampo constituda por um cido fraco (HA) e

Perceba que no ir faltar o on B + para que o equilbrio acima se

um sal (BA) derivado deste cido.

desloque para a esquerda, uma vez que a dissociao do sal BA B +

Neste caso, teremos:

A fornece uma boa reserva deste on.

Se juntarmos soluo tampo um cido qualquer, este ir se ionizar
colocando ons H+ em soluo. Estes ons H+ sero consumidos pelos
-

ons OH resultantes da dissociao da base, e, desta forma, a acidez no

Deduzindo a expresso da constante do equilbrio para o cido fraco,

temos:

aumenta e o pH no muda.
H+ + OH- H2O
Perceba que no iro faltar ons OH - para reagir com o H+ do cido, pois a

Como o cido fraco, a sua concentrao praticamente no varia durante

base BOH fraca, e o estoque de frmulas BOH que continuar se

a ionizao, e a quantidade de on A- produzida muito pequena. Por

dissociando e fornecendo OH- muito grande.

outro lado, o sal se dissocia totalmente, produzindo quase todo on A-,

Desta forma, conseguimos compreender que a soluo tampo s

presente na soluo.

resistir s variaes de pH at que toda base BOH ou todo sal BA sejam

consumidos. A resistncia que uma soluo tampo oferece s variaes

[HA] [CIDO] e [A-] [SAL]

Portanto, a expresso da constante de equilbrio ficar:

de pH recebe o nome de efeito tampo.

Caso a soluo tampo fosse constituda por um cido fraco e um sal
derivado deste cido, a explicao para o comportamento desta soluo
seria semelhante anterior.
Conclumos, ento, que uma soluo tampo usada sempre que se
necessita de um meio com pH praticamente constante e preparada
dissolvendo-se em gua:
um cido fraco e um sal derivado deste cido;
uma base fraca e um sal derivado desta base.

Aplicando logaritmo aos dois membros da equao, teremos:

21

Para uma soluo tampo de base fraca e um sal derivado desta base,
podemos demonstrar que:
Como pH + pOH = 14, neste caso ficamos com: pH = 14 - pOH
Com isso teremos:

Para determinar o pH de uma soluo com indicadores de pH, adicionamse algumas gotas de soluo de um ou dois indicadores e compara-se a
cor desenvolvida com a cor de uma srie de solues-tampo de pH
conhecido e contendo a mesma quantidade de indicador.
Os indicares universais so misturas de vrios indicadores, cujos pK in se
sobrepem, o que permite abranger um intervalo de pH. Os papis
indicadores so papis impregnados de um indicador ou de indicadores
usados para determinao aproximada do pH. Veja a tabela abaixo:
INDICADOR
Azul de timol
Amarelo de Metila
Alaranjado de Metila
Azul de bromofenol
Verde de Bromocresol
Vermelho de Metila
Vermelho de clorofenol
Prpura de Bromocresol
INDICADOR

pKa
1,7
3,3
3,5
4,0
4,7
5,0
6,0
6,2
pKa

INTERVALO DE PH E COR
1,2 Vermelho 2,8 Amarelo
2,9 Vermelho 4,0 Amarelo
3,1 Vermelho 4,4 Laranja
3,8 Amarelo 5,4 Azul
3,8 Amarelo 5,4 Azul
4,2 Vermelho 6,3 Amarelo
5,1 Amarelo 6,7 Vermelho
5,2 Amarelo 6,8 Roxo
INTERVALO DE PH E COR

Azul de Bromotimol
Vermelho de fenol
Vermelho de cresol
Azul de timol
Fenolftalena
Indicador Universal (Laranja de
metila+Vermelho de metila+Azul
de bromotimol+Fenolftalena)

Papel de tornassol
Papel vermelho de congo
Papel Indicador Universal

7,1
7,8
8,3
8,9
9,4

6,1 Amarelo 7,7 Azul

7,0 Amarelo 8,6 Vermelho
7,4 Amarelo 9,0 Vermelho
8,0 Amarelo 9,6 Azul
8,3 Incolor 10,0 Vermelho
3,0-Vermelho;
4,0Alaranjado;
5,0-Laranja;
6,0-Amarelo; 7,0-Verde; 8,0Verde azulado; 9,0- Azul;
10,0-Violeta;
11ou
+
prpura.
4,5-Vermelho-8,3-Azul
3,0-Azul-4,5-Vermelho

ACIDOSE E ALCALOSE
O pH dos fludos corporais deve permanecer dentro de limites prximos. A
morte pode resultar de aumentos ou diminuies relativamente pequenos
de pH. A razo para nossa sensibilidade ao pH depende das enzimas que
catalisam as reaes qumicas do corpo. Sua atividade cai rapidamente
quando o pH muda. Uma vez que as enzimas desempenham papel to
crucial, sua inativao pode ser fatal.
Os tampes do plasma sanguneo so as primeiras defesas do corpo
contra as mudanas do pH interno. Seu papel manter o pH sanguneo
dentro dos limites 7,35 a 7,45. Se o pH do sangue de uma pessoa cai
abaixo de 7,35, diz que ela est com acidose, ou baixo pH sanguneo. A
acidose causa desorientao, coma e finalmente morte. Se o pH sobe
alm de 7,45, diz-se que ela est com alcalose, ou baixo pH sanguneo. A
alcalose pode causar respirao fraca e irregular, cibras musculares e

22

convulses. A acidose e a alcalose podem ser "respiratria", resultando de

- Responsvel pela manuteno do pH do sangue.

mudanas na concentrao de H2CO3 ou "metablicas", resultando de

mudanas na concentrao de HCO3-.

Objetivos

A acidose e a alcalose podem resultar de mudanas na concentrao de

-

- Determinar o pH de solues utilizando os mtodos colorimtricos

HCO3 . Acidose metablica, ou baixa concentrao de HCO , pode

(indicadores de pH);

resultar de desidratao severa ou de diabetes mellitus no tratada.

- Relacionar os conhecimentos adquiridos ao funcionamento dos tampes

3,

Alcalose metablica, ou alta concentrao de HCO pode resultar de

de importncia biolgica

vmito ou overdose de anticidos.

A tabela seguinte resume as mudanas que ocorrem em cada uma destas
quatro condies:

Procedimento
a) Experimento 1

CONDIO

DISTRBIO

pH

Acidose respiratria

P(CO2) sobe

diminui

Alcalose respiratria

P(CO2) cai

aumenta

Acidose metablica
Alcalose metablica

HCO diminui
3

HCO aumenta

Preparar uma bateria de 4 tubos de ensaio

TUBO 1: 5 gotas de indicador universal + 10mL de gua destilada
TUBO 2: 5 gotas de indicador universal + 1mL do tampo fosfato + 9mL de

diminui

gua destilada

aumenta

TUBO 3: 5 gotas de indicador universal + 10mL de gua destilada

Para diagnosticar a condio cido-base de um paciente, uma amostra de

TUBO 4: 5 gotas de indicador universal + 1mL do tampo fosfato + 9mL de

sangue arterial retirada. Medidas de pH, P (CO 2) e CO2(H2CO3) total so

gua destilada

ento realizadas.

Determinar o pH de cada soluo e anotar o resultado.

Resumindo temos:
SOLUO TAMPO
Tampo H2CO3/HCO

b) Experimento 2
3

TUBO 1: adicionar 1 gota de NaOH 0,1 mol/L.

TUBO 2: adicionar 1 gota de NaOH 0,1 mol/L.

Observar a mudana de cor, determinar o pH e anotar o resultado na

tabela.

23

TUBO 3: adicionar 2 gotas de HCl 0,1 mol/L.

PRTICA 6:

TUBO 4: adicionar 2 gotas de HCl 0,1 mol/L.

DETERMINAO DA CONCENTRAO DAS PROTENAS

Observar a mudana de cor, determinar o pH e anotar o resultado na

tabela.

Introduo
Os mtodos espectroscpicos baseiam-se na absoro e/ou emisso de

Continuar a adio de HCl ao tubo 4, gota a gota, at a cor 3.

radiao eletromagntica por muitas molculas, quando os seus eltrons

Determinar quantas gotas de HCl devem ser adicionadas at que se

se movimentam entre nveis energticos. A espectrofotometria baseia-se

obtenha a mesma colorao de tubo 3.

na absoro da radiao nos comprimentos de onda entre o ultravioleta e

o infravermelho (Fig. 1).

pH
Antes

Depois

TUBO 1
TUBO 2
TUBO 3
TUBO 4
N de gotas______ para obter pH=3

Figura 1. Espectro eletromagntico. A espectrofotometria utiliza a radiao

compreendida entre o ultravioleta (ultraviolet) e o infravermelho (infrared).

24

A chamada radiao luminosa corresponde a uma gama de comprimentos

foi absorvida por essa soluo (Fig. 3). Usando um prisma o aparelho

de onda que vai desde o ultravioleta ao infravermelho no espectro da

separa a luz em feixes com diferentes

radiao eletromagntica (Fig. 2).

comprimentos de onda (tal como acontece no arco-ris com a separao

das cores da luz branca). Pode-se assim fazer passar atravs da amostra
um feixe de luz monocromtica (de um nico comprimento de onda, ou
quase). O espectrofotmetro permite-nos saber que quantidade de luz
absorvida a cada comprimento de onda.

O espectro do visvel est contido essencialmente na zona entre 400 e

800 nm (Tabela 1).
Tabela 1: Comprimentos de onda da luz visvel.
Fig. 3. Espectrofotmetro. A luz dividida em feixes de diferentes
comprimentos de onda por meio de um prisma ptico e passa atravs da
amostra, contida numa cubeta ou clula de espectrofotmetro.
1. Espectros de absoro
O conjunto das absorbncias aos vrios comprimentos de onda para um
composto chamasse espectro de absoro e varia de substncia para
substncia. Se uma substncia verde, por exemplo, ento deixa passar
ou reflete a cor nesse comprimento de onda, absorvendo
mais a luz na regio do vermelho. A seguir podem ver-se espectros de
Um espectrofotmetro um aparelho que faz passar um feixe de luz
monocromtica atravs de uma soluo, e mede a quantidade de luz que

vrias substncias diferentes (Fig. 4).

25

Essas diferenas de espectro podem ser utilizadas laboratorialmente para

seguir o percurso de reaes que se esteja a estudar, por exemplo,
reaes metablicas que envolvam a oxidao do NADH ou a reduo do
NAD+.

Fig. 4. Espectros de absoro de absoro de diferentes substncias (1:

bacterioclorofila; 2: clorofila a; 3: clorofila b; 4: ficoeritrobilina; 5: betacaroteno). A substncia 1, por exemplo, absorve pouco na regio do
visvel, logo deve ser praticamente incolor para os nossos olhos.
Uma vez que diferentes substncias tm diferentes padres de absoro,
a espectrofotometria permite-nos, por exemplo, identificar substncias
com base no seu espectro. Permite tambm quantific-las, uma vez que a

Fig. 5. Espectros de absoro do NAD+ e do NADH.

quantidade de luz absorvida est relacionada com a concentrao da

substncia, como vamos ver adiante. s vezes uma substncia, quando

3.2. Espectrofotometria e quantificao

alterada quimicamente, pode passar a apresentar um espectro de

3.2.1. Princpios de absoro da luz:

absoro diferente. Quando isto acontece, temos uma maneira de detectar

1. A absoro da luz tanto maior quanto mais concentrada for a

essas mesmas alteraes. Por exemplo, o NADH reduzido absorve a 340

soluo por ela atravessada:

nm, enquanto que a forma oxidada no tem absorbncia significativa a

esse comprimento de onda (Fig. 5).

26

2. A absoro da luz tanto maior quanto maior for a distncia percorrida

pelo feixe luminoso atravs das amostras:

Normalmente usam-se cubetas com 1 cm de comprimento, de modo que a

equao fica:

Ou seja, a absorbncia da luz a cada comprimento de onda l

diretamente proporcional concentrao da soluo contida na
cubeta. Esta linearidade deixa de ocorrer a concentraes muito elevadas
Juntando (1) e (2), temos a lei de Beer-Lambert:

da substncia, podendo nesses casos diluir previamente a amostra a

medir.
3.2.2. Mtodos colorimtricos

27

Com alguma frequncia necessrio quantificar substncias em misturas

complexas, ou que no absorvem significativamente a luz a nenhum
comprimento de onda. Nestes casos utilizam-se os chamados mtodos
colorimtricos - o composto a quantificar posto em contacto com um
reagente especfico, de modo a desenvolver uma cor cuja intensidade
diretamente proporcional concentrao da substncia na mistura
original.
Por exemplo, para quantificar protenas numa soluo pura pode medir-se
a absorbncia a 280 nm, sendo esta proporcional concentrao de
protena. Mas se quisermos saber a concentrao de protena num extrato
impuro, este mtodo j no pode ser utilizado, porque outras substncias,
como por exemplo, os cidos nuclicos, tambm absorvem a este
comprimento de onda. Neste caso podemos utilizar, por exemplo, o
reagente de Biureto, que reage de modo quantitativo com as protenas,
originando um complexo violeta, que absorve fortemente a radiao a 540
nm.
Para quantificar espectrofotometricamente uma substncia necessria,
obviamente, saber o valor de e. Para isso necessrio preparar uma srie
de solues do composto a quantificar, de concentrao conhecida, fazlas contactar com o reagente e medir as absorbncias ao comprimento de
onda adequado (Fig. 8).

Fig. 8. Calibrao de um mtodo colorimtrico. A absorbncia ao

comprimento

de

onda

escolhido

diretamente

proporcional

concentrao do composto na soluo.

No exemplo da Fig. 8, h uma relao linear perfeita entre a concentrao
da substncia (expressa em molaridade, M) e a absorbncia ao
comprimento de onda l de medida. Podemos assim obter uma reta do tipo
Al= el.c (ou Al= el.c + b, caso a reta no passe na origem)
em que Al a absorbncia ao comprimento de onda l de medida, c a
concentrao em M e el a constante de proporcionalidade. Sabendo esta
relao, podemos fazer corresponder uma absorbncia medida, a uma
concentrao de substncia na soluo a analisar.

28

Muitas vezes o mtodo s linear at certa concentrao da substncia.

Adicionar 300 ml de soluo de NaOH a 10% (p/v) (114,9 g/litro de NaOH)

Nesse caso, utiliza-se a zona em que a relao linear, diluindo a soluo

sob constante agitao e completar para 1 litro com gua destilada.

a medir, sempre que necessrio, de modo a que a absorbncia resultante

Soluo de casena a 5 % em gua;

esteja contida no intervalo da reta de calibrao.

gua destilada.

Objetivos

Procedimento:

Elaborar curvas de calibrao e trabalhar o conceito de sensibilidade de

CURVA DE CALIBRAO

um mtodo fotocolorimtrico;

- Numerar 6 tubos de ensaio de 1 a 6;

Relacionar os mtodos vistos s aplicaes prticas;

- Adicionar os reagentes conforme a Tabela 1:

Resolver problemas de clculo de diluies e de concentraes.

Materiais, Equipamentos e Reagentes

Reagentes

Padro de

6 Bqueres de 100

Protena

Pipetas de 1, 2 e 5 ml (prximas aos reagentes);

(5mg/mL)
gua

1 Estante p/ tubos de ensaio;

1 Proveta de 100 ml;

Tubo 2

Tubo 3

Tubo 4

Tubo 5

Tubo 6

0,2

0,4

0,6

0,8

1,0

1,0

0,8

0,6

0,4

0,2

5,0

5,0

5,0

(mL)
Soluo

7 Tubos de ensaio;

7 Pipetas de 2 5 ml;

Tubo 1

destilada
Reagente

Fotocolormetro (com cubetas).

Biureto
5,0
5,0
5,0
- Agitar e deixar em repouso por 10 minutos.

Reativo do Biureto:

- Utilizar o tubo 1 para calibrar o espectrofotmetro: 100% de

Sulfato de cobre cristalizado (pentahidratado) - 1,5g;

transmitncia em 540 nm (ou o fotocolormetro com filtro verde.

Tartarato duplo de sdio e potssio - 6,0g;

- Determinar a absorbncia das solues dos tubos 2 a 6.

gua destilada - 500 ml;

- Calcular a curva padro construindo o grfico: Concentrao final de

protena (mg/mL) na ordenada e Absorbncia (A) nas abscissas.

29

DETERMINAO

DA

CONCENTRAO

DE

PROTENAS

NA

REED, R., HOLMES, D., WEYERS, J. & JONES, A. J. 1998. Practical Stills

AMOSTRA PROBLEMA

in Biomolecular Sciences. Ed. Prentice Hall

- Separar dois tubos de ensaio e identific-los.

SAMBROOK, J.; FRITSCH & MANIATIS, E. F. T. Molecular Cloning. Cold

- Adicionar os reagentes conforme tabela abaixo:

Spring Harbor Laboratory Press, 1989.

UNIVERSIDADE FEDERAL DE MINAS GERAIS, Apostila da Disciplina

Tabela 1 Distribuio de reagentes em diferentes propores

Reagentes (mL)
Amostra
gua destilada
Reagente do Biureto

TUBO 1
1,0
5,0

TUBO 2
0,5
0,5
5,0

Bioqumica Celular (s.n.t).

UNIVERSIDADE FEDERAL DE VIOSA (MG). Roteiros de Aulas
Prticas de Bioqumica. Departamento de qumica, (s.n.t).
UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARAN. Bioqumica: aulas prticas, 2
Ed. Scientia et
Labor, Curitiba, 1988. 116p.

BIBLIOGRAFIA

VILLELA, G. G.; BACILA, M. e TASTALDI, H. Tcnicas e Experimentos

ALFENAS, A. C. Eletroforese de isoenzimas e protenas afins:

de Bioqumica. Rio de janeiro, Guanabara Koogan, 1973. 503p.

fundamentos e aplicaes em plantas e microorganismos. Viosa:

U.F.V., 1998, 574p.

Web sites recomendados

ALFENAS, A. C.; PETERS, I.; BRUNE, W.; PASSADOR, G. C.

Sociedade brasileira de bioqumica e biologia molecular -

Eletroforese de protenas e lisozimas de fungos e essncias

http://www.sbbq.org.br/

florestais. Viosa: U.F.V., 1991. 242p.

GORDON, D. B. 1995. Spectroscopic Techniques. pp. 324-344 in

Faculdade Mauricio de Nassau - FAP

Principles and Techniques in Practical Biochemistry. K. Wilson & J.

Manual de Aulas Prticas

Walker Eds., Cambridge University Press, Cambridge

Disciplina: QUMICA GERAL E EXPERIMENTAL

LAEMMILI, U. K. Cleavage of strutural proteins during assembly of the

Curso de Nutrio Bloco I Engenharia Civil

head of bacteriophag T4. Nature, London, v.227, p.680-685, 1970.

LEHNINGER, A. L.; NELSON, D. L. e COX, M. M. Principles of
Biochemistry. New York, Worth Publishers, 1993. 1136p.

30

Colaborador: Jos Roberto da Cunha Lima Professor dos cursos de

Nutrio; Enfermagem e Engenharias da Faculdade Mauricio de
Nassau FAP Parnaba.