REVERSO SEXUAL DE TILPIAS

Por Maria Aparecida Guimares Ribeiro

Estao de Piscicultura de Pindamonhangaba
Instituto de Pesca - SP

As tilpias se constituem numa excelente fonte de protena. Sua rusticidade, alta

taxa de crescimento, resistncias s doenas e grande aceitao no mercado por
sua qualidade da carne e rendimento em fils, recomendam-nas para cultivo. Estas
habilidades deparam-se com um entrave, que a alta capacidade de reproduo
devida a sua maturao precoce (caracterstica de estratgia r - fecundidade
elevada, postura freqente de ovos, baixa competio intraespecfica e, por
conseqncia, crescimento lento). O desenvolvimento e a intensificao da
piscicultura so dependentes do sucesso no controle e manipulao de algumas
funes fisiolgicas, entre elas a reproduo. Nos ltimos 15 anos, os esforos de
pesquisa tm se voltado para a procura de mtodos confiveis de produzir
prognies de indivduos somente de um determinado sexo. Vrias so as opes
para se conseguir isto, incluindo os mtodos genticos, os no genticos e mesmo
a combinao entre eles. A tcnica mais prtica de se obter populaes monosexo
de tilpias (machos), atravs da manipulao do sexo fenotpico do peixe pelo
tratamento com esterides sexuais.
Embora no tenhamos a tradio do cultivo de peixes, a abundncia de terra e
gua, o clima tropical, a proximidade de mercado externos como a Amrica do
Norte e o Mercosul, a mo-de-obra barata e a recente constatao de que a
aqicultura vantajosa, so fatos que levaro a Amrica Latina a se preparar para
entrar no Sculo XXI como o maior produtor de tilpia e outros alimentos de cultivo
aqutico.
Sob este aspecto, a facilidade do emprego da tcnica da reverso sexual, passou a
ser encarada como o ovo de Colombo na resoluo do problema da superpopulao
de indivduos anes dentro do tanque.
A tilpicultura no pode sofrer mais um revs, ela merece ser tratada com mais
seriedade. Para isto, h que se batalhar para que o emprego da reverso sexual
venha a ser feita de maneira correta e consciente, h que se observar com cuidado
doses hormonais e procedimentos, h que se ter rigor na busca de resultados
realmente comprovados, da qualidade do alevino a ser posto venda e,
principalmente, de se ter pacincia para tentar, tentar, errar e errar cada vez
menos.
Reverso Sexual deTilpias em Tanques de Terra
Segundo a tcnica de Popma & Green (1990)

Desde a dcada de 80, pesquisadores de vrios pases vm demonstrando a

viabilidade de reverter sexualmente a tilpia em escala comercial, usando-se para
isso, tanques de terra ou gaiolas (hapas), o que at ento s era obtido em guas
limpas, para reduzir possveis interferncias do alimento natural (fitoplncton). Em
1990, Popma & Green propuseram um protocolo para produzir alevinos machos
atravs da tcnica de reverso sexual ou inverso sexual em tanques de terra. Para
que isto seja alcanado, oferece-se para a larva de tilpia, alimento tratado com
hormnio masculino. Na reverso sexual de tilpias em tanques de terra, alguns
aspectos devem ser considerados:

1 - a reverso sexual da tilpia deve comear antes que o tecido gonadal das
fmeas genticas jovens, tenha se diferenciado em ovrios; o hormnio na dieta
dever ser suspenso quando os testculos estiverem suficientemente desenvolvidos
para manter os nveis de hormnios endgenos numa faixa de normalidade.
2 - dependendo da temperatura da gua, um grande nmero de larvas livrenadantes pode ser encontrado em tanques de guas quentes, cerca de 2 a 3
semanas depois da estocagem de reprodutores sadios.
3 - a produo de larvas deve ser coordenada com a operao de reverso sexual
porque o tratamento hormonal dever comear imediatamente depois que as larvas
forem postas.
4 - para um manejo eficiente prefervel reverter sexualmente grupos de larvas
nascidas no mesmo dia.
5 - o procedimento envolve um ciclo de 25 a 30 dias, excluindo um perodo de 2 a
10 dias, quando as larvas ainda possuem seus sacos vitelnicos.
O que preciso :
1 - tanques de terra com caixa de coleta de terra com 30 a 40 cm de profundidade
e com uma rea superficial de cerca de 10 m2 ou 1% da rea do tanque. Em
tanques sem caixa de coleta, no possvel a coleta completa das larvas.
2 - fonte de gua (salinidade menor do que 10% , em ppt).
3 - rede de nylon (com malha de 13 - 20 mm) com dimenses que excedam
quelas da caixa de coleta por 20%, para facilitar a remoo dos reprodutores.
4 - rede de coleta manual (pu) de malha fina (1,6 mm ou 1/6 polegada)
5 - tela de filtragem de malha fina para a drenagem do tanque.
6 - reprodutores (70 a 100 kg para uma meta de produo de 50.000 larvas por
ciclo, numa relao sexual de 1,5 a 2 fmeas por macho).
7 - alimento suplementar (40 - 50 kg de alimento para 100 kg de reprodutores, por
ciclo).
8 - graduador ou selecionador de peixe
9 - tanque de reproduo de 1.000 m2, estocado com 100 a 150 kg de
reprodutores.
Como proceder :
1 - verificar se o suprimento de gua apresenta composio qumica adequada para
o crescimento do peixe e em quantidade suficiente para drenar e preencher o
tanque a cada ciclo; a temperatura mdia da gua deve ser de no mnimo 22C e
no ultrapassar 32C.
2 - eliminar absolutamente todos os peixes do tanque, usando por exemplo,
hipoclorito de clcio dissolvido em gua ou cal virgem, calcinada ou de construo
(100 kg por 1.000 m2). Os tanques devem ser drenados para verificar a completa
ausncia de peixes, antes da reestocagem.
3 - estender a rede de malhas largas na caixa de coleta, prendendo as bordas.
4 - encher o tanque com gua, de maneira que a profundidade da mesma na maior
parte do tanque seja de 50 a 80 cm.
5 - estocar todos os reprodutores em um mesmo dia, logo aps o tanque ter sido
preenchido. A produo de larvas muito mais uma funo da biomassa dos
reprodutores, do que do tamanho dos tanques. Para produzir 50.000 larvas de
tamanho aceitvel para a reverso sexual, estoque 35 a 55 kg de fmeas maduras,
e machos suficientes para que a relao sexual seja de 1 macho para 1,5 a 2
fmeas. A rea de tanque requerida para satisfazer e acomodar eficientemente esta
biomassa 500 a 1.000 m2.
6 - manejar o tanque durante o perodo de postura e de berrio primrio;
alimentao suplementar recomendada (taxa diria de 1% da biomassa), mas
no a superalimentao.
7 - drenar o tanque 14 a 23 dias depois de estocar os reprodutores, tendo como

guia a temperatura da gua, levando em conta a velocidade do escoamento da

gua, a hora da coleta (de manhzinha), o nvel de oxignio mnimo (4 mg/l), etc..
8 - deixar somente a caixa de coleta com gua; remover os reprodutores
levantando a rede previamente colocada na caixa de coleta, sendo mais
interessante j deixar os sexos separados.
9 - coletar as larvas da caixa de coleta, to logo os reprodutores tenham sido
removidos. Para isto, use um pu de malhas finas (40 a 100 cm de largura e
malha de 1,6 mm ou tela de mosqueteiro), tomando o cuidado para no provocar
turbidez na gua e tambm de no pass-lo muito ao fundo. Transfira
imediatamente as larvas para gua fresca e bem oxigenada, mas cuidado para no
provocar um choque trmico. 10 - selecionar imediatamente as larvas coletadas,
para remover aqueles indivduos maiores do que 14 mm, com auxlio de um
selecionador flutuante colocado dentro de uma gaiola (hapa) de malhas finas (1,6
mm ou menos). Larvas de tamanho-alvo no so retidas no graduador e so
aceitveis para reverso sexual; larvas de tamanho superior so retidas no
selecionador e subseqentemente rejeitadas.
O resultado mdio por ciclo de postura de 50 kg de fmeas reprodutoras (mais
machos para cada 1,5 a 2 fmeas) em tanques de 500 a 1.000 m2 de rea, de 60
a 80%, isto , 40 a 60.000 larvas.
Alimento tratado com hormnio
As larvas selecionadas so transferidas para as gaiolas (hapas) onde lhes ser dado
um alimento tratado com hormnio, at que o tecido gonadal tenha se diferenciado
em testculos. O momento exato em que o tratamento pode ser suspenso
completamente desconhecido, mas temperaturas de 24 a 29C, isto normalmente
ocorre depois de 3 a 4 semanas.
Durante o tratamento hormonal, a densidade de larvas deve ser alta para otimizar
o uso das hapas e reduzir a quantidade de alimento natural disponvel para cada
peixe, aumentando desta maneira, a probabilidade de que todas as larvas iro
consumir o alimento tratado com hormnio. Depois do tratamento ter sido
completado, nenhuma dieta hormonal adicional requerida.
O hormnio mais utilizado para a reverso sexual - 17a metiltestosterona,
insolvel em gua, mas facilmente se dissolve em lcool etlico 80 a 90%. Para
fixar o hormnio no alimento, uma soluo lcool-hormnio misturada ao
mesmo e o lcool subseqentemente perdido por evaporao.
O alimento tratado com hormnio deve ser de boa qualidade nutricional e
altamente palatvel, a fim de assegurar a ingesto da quantidade de hormnio
requerida. Nveis de protena bruta de 25 a 45% (sendo ao menos a metade, de
origem animal) e suplementos vitamnicos e minerais so recomendados. Os
ingredientes secos devem ser peneirados para remover partculas muito grandes.
Dissolva exatamente 6 g de 17 metiltestosterona em exatamente 1 litro de lcool
etlico 90 - 95%. Esta quantidade suficiente para tratar aproximadamente
300.000 larvas. Esta soluo-estoque deve ser guardada em uma garrafa escura.
Ela pode ser deixada em temperatura ambiente, mas preferivelmente sob
refrigerao. Sua vida til de cerca de 3 meses.
Lista de ingredientes por kg de dieta

- 10 ml de soluo-estoque de lcool-hormnio (exatos)

- 500 ml de lcool etlico ou isoproplico (mais ou menos)
- 1.000g de ingredientes secos
Misture a soluo-estoque lcool-hormnio com o lcool e, lentamente misture com
os ingredientes secos. Deixe o lcool evaporar sem qualquer luz do sol incidindo
diretamente, misturando suavemente com as mos, por 2 ou 3 vezes. Refrigere-a
ou congele-a por um perodo de vida til de ao menos 2 meses. A dieta deve ser
deixada ao menos uma semana temperatura ambiente, antes de ser utilizada. A
reverso sexual usualmente requer 250 a 400 g de alimento tratado, para cada lote
de 1.000 larvas.
Disposio das Hapas
O acesso fcil s hapas importante, porque o alimento deve ser dado ao menos 2
vezes ao dia. As hapas devem estar ao menos 30 cm acima do fundo do tanque,
para permitir a circulao de gua e prevenir a turbidez, e devem se estender ao
menos 20 cm acima da superfcie da gua para prevenir o escape das larvas.
Taxa de Estocagem
A densidade sugerida de 3.000 a 5.000 larvas selecionadas por m2 de cercado de
rede. O mtodo de contagem mais recomendado o baseado na comparao visual
contra um lote conhecido padro.
Alimentao
A freqncia de alimentao deve ser de duas a quatro vezes diariamente e
durante o perodo diurno, 7 dias por semana. O procedimento normal medir a
rao diria para cada cercado e visualmente estimar uma frao do total para cada
refeio. A taxa alimentar deve ser de 15 a 20% do peso do peixe diariamente, at
que a larva atinja um comprimento de 15 mm, com gradual reduo para 10% do
peso do peixe at o final do tratamento. O clculo da rao diria por hapa
baseada na taxa alimentar desejada, no conhecimento do nmero total de larvas
por hapa e no peso mdio por peixe (que por sua vez tem o clculo baseado no
comprimento mdio conhecido ou estimado). A equao aproximada da relao
peso x comprimento de larvas :
W = 0,02 x L3 onde
W = peso por 1.000 larvas em gramas e
L = comprimento mdio total da larva em mm.
As taxas de crescimento, durante o tratamento, devem ser determinadas por
amostragens semanais das larvas durante os primeiros ciclos. O sucesso da
reverso sexual mais consistente quando a durao do tratamento de 25 a 28
dias. Aps este perodo, poucas larvas tm menos do que 14 mm. Entretanto, se
mais do que 5% tm 13 mm ou menos, estes indivduos devem ser rejeitados,
porque mais do que 25% deles podem ser fmeas.
Ao final do tratamento, a mdia de peso dos peixes tratados geralmente 0,1 a
0,3g. Neste tamanho, mais conveniente e seguro, estimar o nmero final de
peixes sobreviventes dividindo-se o peso total final do peixe na hapa pelo peso
mdio de uma sub-amostra.
Berrio secundrio de larvas sexualmente revertidas

Depois da reverso sexual o peixe pode ser estocado diretamente para engordar
at o tamanho comercial, sendo que a sobrevivncia se apresenta altamente
varivel, com uma mdia de cerca de 75%. As larvas podem ser estocadas a uma
taxa de 100.000 a 125.000 por hectare.
Uma alimentao suplementar numa taxa de 5% da biomassa diria, promove o
crescimento mas no fator preponderante para a alta sobrevivncia.
A determinao sexual subseqente, pelo exame das gnadas, ajudar a esclarecer
se uma alta porcentagem inaceitvel de fmeas em um tanque-berrio foi devida
contaminao ou reverso sexual incompleta. Esta precauo tambm
recomendada se o destino dos peixes tratados ser a venda a outros criadores, que
mais tarde podero reclamar da qualidade do produto.Os resultados esperados so:
97 a 100% de machos fenotpicos, na fase de tratamento hormonal e 60 a 90%,
durante a fase de berrio secundrio.
Perguntas mais freqentes
Qual a eficcia determinada de um tratamento de reverso sexual ?
O sexo fenotpico da tilpia pode ser determinado pelo exame visual da papila
genital ou pelo sacrifcio do peixe para exame das gnadas. Entretanto, durante a
reverso sexual, a masculinizao da papila genital pode ocorrer antes da
masculinizao das gnadas e, conseqentemente, o peixe que ingeriu uma dose
sub-efetiva de hormnio pode, externamente, parecer ser macho mas,
internamente, pode se desenvolver como fmea com ovrios. Quando larvas
sexualmente revertidas so estocadas em tanques de crescimento, ou vendidas em
idades precoces, importante e seguro avaliar mais cedo o tratamento de reverso
sexual.
A segurana da estimativa da porcentagem de machos em uma ninhada de peixes
tratados uma funo do nmero de peixes nesta amostra. O intervalo de
confiana de 95% (95% de segurana de que a verdadeira mdia est dentro da
variao indicada) se torna mais ajustado, quando o tamanho da amostra aumenta
de 20 para 1.000 peixes.
Qual a porcentagem de fmeas que pode ser tolerada num tanque de crescimento?
A reverso sexual como descrita neste protocolo no geralmente 100% efetiva. A
porcentagem de fmeas fenotpicas depois do tratamento, muitas vezes menor do
que 1%, mas em outras ocasies pode ser to alta quanto 5%. Algumas destas
fmeas podem ser estreis, mas outras tero funo reprodutiva normal. Os
resultados so variveis, dependendo da prtica de manejo e condies ambientais.
Que hormnios podem ser usados?
Testosterona sinttica e compostos congneres so desenvolvidos como anablicos
(primariamente para desenvolvimento muscular) e/ou agentes masculinizantes.
Metiltestosterona e etiniltestosterona podem ser tomados oralmente e apresentam
potncia aproximadamente iguais, tanto como agente anabolizante, como agente
masculinizante. Por causa da disponibilidade geral e efetividade do
metiltestosterona, pouca pesquisa tm sido conduzida na reverso sexual com
hormnios congneres.
H alternativas para o barateamento?

1 - provvel, mas no provado, que menores quantidades de lcool etlico podem

reduzir a efetividade do tratamento.
2 - lcool isoproplico um substituto provvel para o lcool etlico.
3 - metiltestosterona solvel em alguns leos de peixe. Um benefcio da asperso
de uma mistura hormnio-leo no alimento pode aumentar a palatabilidade da
dieta. Os riscos aumentados, entretanto so o perigo de ranar os alimentos
estocados impropriamente, e a possvel perda do hormnio se o leo flutuar fora do
alimento na gua.
Outros mtodos podem ser usados para a produo de larvas sexualmente
revertidas?
Nos casos de escassez de gua, da no disponibilidade de uma caixa de coleta ou
da no necessidade de um grande nmero de larvas, o tanque de reproduo pode
ser parcialmente coletado em vrias ocasies, usando-se uma rede de malhas
finas, com a chumbada ligeiramente acima do fundo do tanque. Coletas parciais
devem comear no mais tarde do que 3 semanas depois da estocagem dos
reprodutores, mas apresenta desvantagens tais como ser mais trabalhosa devido
ao crescimento heterogneo das larvas, provocar mais stress, mortalidade, etc..
Que outros containers podem ser usados para reverso sexual de larvas?
Larvas de tilpia podem ser efetivamente revertidas sexualmente em qualquer
container que mantenha as condies ambientais apropriadas para o crescimento:
aqurios, gamelas de ao inox, tanques plsticos , tanques de concreto de mais de
30 m2, etc. Mas h que se considerar que:
1- a quantidade ministrada de alimento tratado com hormnio, requer que os
containers sejam limpos diariamente e que a qualidade da gua seja mantida pelas
freqentes trocas e/ou aerao;
2- doenas e parasitas so mais problemticos sob tais condies, especialmente
quando o container sombreado. A mortalidade de 50 a 80% no so incomuns.
A reverso sexual afetada pela freqncia com que o alimento tratado com
hormnio oferecido?
Tilpias foram efetivamente revertidas sexualmente, quando o alimento tratado
com hormnio foi oferecido somente 6 dias por semana e quando a rao diria foi
dividida em somente 2 refeies. Entretanto, estudos so sugeridos, antes que
estas prticas sejam recomendadas para operaes comerciais.
Tilpias revertidas sexualmente podem ser usadas como reprodutores quando
maduras?
Algumas poucas fmeas genticas podem consumir to pouco hormnio durante o
tratamento de reverso sexual, que elas acabam se desenvolvendo em fmeas
normais, isto , no sentido funcional. Uma outra pequena frao de fmeas
genticas pode ser estril, com desenvolvimento de ovo-testculo, como resultado
de quantidades de hormnio insuficientes. Todavia, embora a maioria dos peixes
tratados no seja estril, o criador deve tomar cuidado especial para eliminar todas
as tilpias sexualmente revertidas como potenciais reprodutores.
Fmeas revertidas sexualmente crescem mais vagarosamente do que machos
genticos?
Quando o peixe revertido sexualmente atinge o tamanho de mercado, no h
nenhuma distribuio bimodal bvia (2 grupos de tamanho), como o caso em

cultivo de sexos misturados. Muitos fatores relacionados ao sexo fenotpico e

genotpico do peixe, determinam a sua taxa de crescimento. A importncia relativa
de cada fator ainda no totalmente conhecida, mas o efeito bruto que: para
todos os propsitos prticos, fmeas genticas que tm sido revertidas
sexualmente para machos fenotpicos, crescem tanto quanto machos normais.
Quanto o custo do hormnio aumenta o custo do alevino?
O custo do hormnio em 1996, em So Paulo, de R$150,00 por 10g, os quais so
suficientes para produzir aproximadamente meio milho de alevinos sexualmente
revertidos. O custo do hormnio deve ser reduzido se quantidades menores forem
empregadas. Vrios pesquisadores tm demonstrado em escala experimental, e em
guas limpas, que a tilpia pode ser revertida sexualmente com sucesso, quando
alimentada a uma taxa de 10% do peso do corpo diariamente, com uma rao
contendo somente 20 ou 30 mg de metiltestosterona por kg de alimento, o que
somente 1/5 do hormnio recomendado nesta publicao. Entretanto, ns no
devemos recomendar estes nveis baixos at que eles tenham sido testados em
escala comercial, em guas contendo plncton abundante.
Qual o efeito que o hormnio tem nas pessoas que comem peixe tratado com ele?
A quantidade total de hormnio consumido pelas larvas durante a reverso sexual
pequena, em comparao com as doses teraputicas normais para humanos. A
dose diria mnima de testosterona recomendada para homens deficientes em
andrgenos mais do que 100 vezes maior do que a quantidade total consumida
pela larva de tilpia durante todo o processo de reverso sexual. Na realidade,
grande parte da pequena dose recomendada metabolizada e eliminada, antes que
o peixe alcance o tamanho comercial, j que o fgado converte o hormnio em
compostos solveis em gua, os quais so excretados na bile e urina. 90% do
hormnio excretado na urina dentro de 24 horas, e apenas 3 semanas depois que
a dieta de hormnio suspensa, menos do que 1% do hormnio permanece no
peixe. Durante o crescimento at o tamanho de mercado, o juvenil e o adulto
continuam a excretar o hormnio remanescente. No tempo da coleta, a quantidade
de testosterona proveniente da dieta, que ainda possa estar presente no peixe
revertido insignificante, em comparao com a quantidade produzida
normalmente por um macho adulto no revertido. Considerando todos estes
fatores, duvidoso que tais nveis, possam ser um risco para a sade dos
consumidores. O uso de metiltestosterona para a reverso sexual em peixes, ainda
no foi aprovado pela Administrao de Alimentos e Drogas dos EUA (FDA).
Todas as espcies de tilpia podem ser revertidas sexualmente?
A reverso sexual com metiltestosterona administrado oralmente nos mesmos
nveis de dosagem, tem sido demonstrada com outras espcies de tilpia, incluindo
Oreochromis aureus, O. mossambicus, O. hornorum e a tilpia vermelha, que
geralmente uma espcie resultante de uma mistura de raas ou variedades.
possvel que o tamanho inicial mnimo aceitvel das larvas seja ligeiramente menor
para os grupos das mossambicus e hornorum.
Pode-se reverter sexualmente de macho para fmea?
Depois que a reverso sexual com andrgenos demonstrou ser plausvel, os
cientistas comearam a considerar o uso de estrgenos para produzir tilpias
fenotipicamente fmeas a partir de machos genticos. A engorda de uma populao
toda de fmeas, tem pouca atrao para a prtica de aquacultura, porque as
fmeas crescem mais lentamente e vrias delas podem desovar com um nico

macho acidentalmente introduzido. Entretanto, para algumas espcies de tilpia,

existe a possibilidade de que o cruzamento de uma fmea homogamtica
sexualmente revertida com um macho normal da mesma espcie, produza prole
100% de machos. Com espcies de tilpia sexualmente revertidas com estrgenos,
pode se tornar possvel produzir supermachos, os quais por sua vez, produzem
prole somente de machos. Infelizmente, a reverso sexual para fmeas com
estrgenos muito mais difcil do que a reverso sexual para machos com
andrgenos.