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PRUEBAS BIOQUMICAS
12/03/2015
SI
NO
SI
NO
Salmonella sp. en
general produce
H2S
SI
Escherichia sp.
NO
Citrobacter sp.
Produce acetona?
SI
Enterobacter sp.
Prueba de Catalasa
La catalasa es una enzima que poseen la mayora de las bacterias aerobias.
El desprendimiento de burbujas procedentes del oxgeno indica que la prueba es
positiva.
H2O2
Catalasa
H2O + O2
12/03/2015
Prueba de Oxidasa
Se basa en la produccin de la enzima oxidasa intracelular.
Esta reaccin oxidasa se debe a un sistema de citocromo oxidasa, que activa la
oxidacin del citocromo reducido por el oxgeno molecular.
El sistema citocromo oxidasa est presente en organismos aerobios, a los que les
permite utilizar el oxgeno como aceptor final de hidrgeno para reducir el oxgeno
molecular a perxido de hidrgeno en el ltimo eslabn de la cadena respiratoria.
Prueba de Indol
Se determina si la bacteria posee una enzima (triptofanasa). La triptofanasa hidroliza
el triptfano en indol y alanina. El indol se detecta empleando un reactivo especfico
(Reactivo de Kovacs). El triptfano forma parte de las peptonas del medio
Reactivo de Kovacs
(alcohol isoamilo, pdimetilaminobenzaldehdo y cido
clorhdrico concentrado)
El HCl proporciona el pH cido que
requiere la reaccin.
El alcohol amlico es, insoluble en agua
y menos denso.
Un anillo rosa-rojizo en la superficie indica que se ha formado un complejo coloreado entre
el indol y el p-dimetilamino benzaldehdo. El alcohol amlico concentra el complejo
coloreado en la superficie.
12/03/2015
Prueba de Voges-Proskauer
Detecta la fermentacin butanodilica.
En esta fermentacin se producen menor cantidad de cidos que en la fermentacin
cido-mixta, y una gran cantidad de butanodiol.
El diacetilo origina una coloracin roja al reaccionar con los restos guanidnicos de
algunos aminocidos de la peptona del medio (Ej. Arginina)
12/03/2015
Positivo
En este caso se detecta la alcalinizacin del medio por el consumo del citrato (el
indicador toma color azul).
Recin
inoculado
Va
Fermentativa
Se detecta la acumulacin de
cidos con un indicador cido-base
(Azul de Bromotimol).
Se incuba en condiciones de
aerobiosis (sin parafina) y de
anaerobiosis (con parafina, tubo
cerrado), simultneamente.
12/03/2015
Fermentacin de Azcares
Se determina si la bacteria es capaz de fermentar un carbohidrato particular
(produccin de cidos acompaados o no de gases). Se aplica a bacterias con
metabolismo fermentador, ensayndose por separado diferentes carbohidratos.
Negativo
Produccin de
cidos. Gases(-)
Produccin de
cidos y gases
Negativo
Positivo
12/03/2015
Mtodo de Kligler
Permite un diagnstico rpido orientativo del tipo de Enterobacteria aislado. Las
Enterobacterias ms patgenas no suelen fermentar la lactosa. Se detecta la
produccin de cidos (acompaada o no del desprendimiento de gases) de glucosa
o lactosa y produccin de SH2.
Reactivos: indicador Rojo de Fenol, el cual vira
al color amarillo en medio cido. El tiosulfato
de sodio se reduce a sulfuro de hidrgeno el
que reacciona luego con una sal de hierro
proporcionando el tpico sulfuro de hierro de
color negro.
Lac (-)
SH2(+)
Lac+)
Lac (-)
Lac (-)
12/03/2015
12/03/2015