M. de Análise de Sementes Florestais

2010
MANUAL DE PROCEDIMENTOS
PARA ANLISE DE SEMENTES
FLORESTAIS
Manuel de Jesus da Lima Jr.
MANUAL DE PROCEDIMENTOS
PARA ANLISE DE
SEMENTES FLORESTAIS
Manuel de Jesus da Lima Jr.
2010
O Manual de Procedimentos para Anlise de Sementes Florestais

foi publicado em 2010.
Copyright:
O manual de procedimentos para Anlise de Sementes Florestais est
disponvel no site da Rede de Sementes da Amaznia www.sementesrsa.org.
O texto da publicao pode ser reproduzido em parte ou completo, desde
que citado a fonte.
Citao:
Lima Junior, M. J.V. ed. Manual de Procedimentos para Anlise de Sementes
Florestais. 146p, UFAM - Manaus-Amazonas, Brasil.
Endereo:
UFAM Universidade Federal do Amazonas, Centro de Sementes de nativas
do Amazonas (CSNAM)- Faculdade de Cincias Agrrias. Av. General Rodrigo
Otavio Jordo Ramos, 3000, Japiim CEP. 69077000. Manaus- Amazonas
Editor: Manuel de Jesus Vieira Lima Junior
Fotografia: Vanessa Souza da Silva
Projeto grfico: Raul Sena
Manaus- AM
Apoio:
O manual tem apoio do projeto CNPq CT- Amaznia, intitulado Manuteno
de Germoplasma ex situ e Fomento Propagao de Espcies Nativas,
Rede de Sementes da Amaznia, Rede de Sementes RIOESBA, Rede de Sementes Rio-So Paulo e Curso de Ps-Graduao em Cincias Florestais e
Ambientais-UFAM.
ndice
CAPTULO 1
Anlise de sementes
>>
CAPTULO 2
Amostragem
>>
15
CAPTULO 3
Anlise de pureza
>>
27
CAPTULO 4
Determinao do grau de umidade
>>
39
CAPTULO 5
Teste de germinao
>>
55
CAPTULO 6
Determinaes adicionais
>>
123
CAPTULO 7
Limpeza de materiais, equipamentos

e instalaes do laboratrio de
anlise de sementes >> 127
Captulo 1
Anlise de sementes
Lima Jr., M.J.V., Figliolia, M.B., Pia-Rodrigues, F.C.M.;
Gentil, D.F.O.; Souza, M.M.; Silva, V.S.
1.1 A finalidade da anlise de sementes

Com a intensificao do comrcio de sementes,
comearam a surgir problemas relacionados avaliao
da qualidade. As adulteraes para a venda eram de ocorrncia bastante comum. As boas sementes eram misturadas com sementes de qualidade inferior, que tornava
praticamente impossvel a distino entre elas [2].
Estas e outras prticas inescrupulosas estimularam,
em muitos pases, um estudo mais intenso e aprimorado
da Tecnologia de Sementes e criao de laboratrios onde
as sementes pudessem ser analisadas. Assim, a anlise de
sementes teve a sua origem determinada pela necessidade
de regulamentar o comrcio de avaliar e definir padres
de qualidade, detectar fraudes e gerar conhecimento para
o estabelecimento de leis [2].
A nica maneira segura de conhecer a qualidade
real de um lote de sementes atravs da anlise fsica e
fisiolgica, bem como saber das peculiaridades de cada
espcie para poder interpretar corretamente os resultados.
Isto representa garantia para produtores, comerciantes e
Captulo 1
agricultores, por possibilitar a aquisio de lotes de sementes com qualidade conhecida e, ao mesmo tempo, reduzir riscos provenientes da aquisio de produtos com
qualidade desconhecida e com preos irreais, no condizentes com o lote [2].
Durante o beneficiamento, as sementes so submetidas a procedimentos manuais ou mecnicos que,
quando no ajustados corretamente espcie, podem no
efetuar a limpeza necessria, a correta classificao e, at
mesmo, provocar danos s sementes, afetando o seu
poder germinativo e seu vigor [2]. As informaes, que
permitem avaliar se as tcnicas de beneficiamento esto
sendo ou no adequadas, so obtidas atravs de anlises
de amostras retiradas antes e durante o beneficiamento, o
que resulta em objeto de pesquisa da qualidade de sementes das espcies florestais nativas.
Aps o beneficiamento, as sementes devem ser
misturadas para promover uma boa homogeneizao, ser
acondicionadas em embalagens apropriadas, constituindo
assim o lote respectivo, que dever ser armazenado em
ambiente apropriado natureza da semente. Desse lote,
deve ser retiradas amostras de sementes destinadas s
anlises de pureza fsica, de umidade, de germinao e
peso de mil sementes, entre outras, a fim de determinar
sua qualidade. importante que a amostragem seja feita
corretamente de modo a representar com segurana a
qualidade do lote que a originou.
Todas as sementes comercializadas devem ser embaladas e etiquetadas. Na etiqueta devem constar, de
maneira clara e completa, o nome da espcie, a procedncia
das sementes, a identificao do produtor e os atributos das
sementes como porcentagem de germinao, de pureza, e
de teor de gua das sementes. Os dados de identificao
do lote e da qualidade das sementes contidas nas etiquetas
das embalagens permitem aplicao e a fiscalizao da Legislao Brasileira sobre Sementes e Mudas [2].
Uma vez embaladas e convenientemente etiquetadas, as sementes so postas venda de acordo com
An lise de sementes
padres pr-determinados. Durante este perodo, tais sementes esto sujeitas fiscalizao do comrcio por parte
dos rgos oficiais, que retiram amostras de diferentes
lotes das diferentes espcies e procedncias para anlise
e comparaes. Caso os resultados no correspondam aos
que esto especificados na etiqueta ou no preencham os
padres mnimos para a comercializao, as sementes
podem ser retiradas do comrcio e o responsvel sujeito
s sanes [2].
Toda a comercializao dentro do pas, as exportaes, a fiscalizao e a legislao de sementes encontram-se respaldadas pelos resultados dos testes realizados
em Laboratrios de Anlise de Sementes, de acordo com
as Regras para Anlise de Sementes (RAS).
A fixao de bases para a distribuio, valorao,
armazenamento, necessidade de tratamento e descarte de
sementes, tambm feita em funo da anlise de sementes. As anlises de sementes realizadas antes ou durante o perodo de armazenamento so teis para indicar
se todo o processo de produo de sementes foi feito corretamente; por exemplo, o grau de umidade das sementes,
mostra se as sementes necessitam ou no de secagem; o
valor de pureza diz se as sementes precisam de ser beneficiadas novamente; se h infestao de patgenos; entre
outros [2].
Uma vez satisfeitos os padres mnimos, um lote
de qualidade superior pode ser comercializado a um preo
melhor do que um lote de qualidade inferior, mesmo estando de acordo com os padres. Desta forma, permite
estabelecer bases de referncia para a compra e venda [2].
Aps a interpretao dos resultados da anlise,
pode-se determinar o valor das sementes para a semeadura. Muitas vezes, a utilizao de sementes de baixa
qualidade tem como consequncia a necessidade de ressemeadura; esta operao extremamente prejudicial
porque, alm de onerar o processo de produo, pela
aquisio de nova quantidade de sementes e por repetir a
operao, pode haver a perda da poca mais recomendada
Captulo 1
para a semeadura [2].

Durante as diversas fases da produo de sementes, a anlise pode ser feita com o objetivo de avaliar
a qualidade das sementes e, com isto, identificar problemas e suas possveis causas, e desenvolver ou sugerir
mtodos para corrigi-los. Assim, um laboratrio de anlise
um centro de controle de qualidade, onde h possibilidade de se determinar em que ponto do programa houve
falhas, comparar lotes de diversas procedncias, alm de
contribuir para a manuteno ou melhoramento da qualidade dos lotes [2].
1.2 A importncia das Regras para a Anlise de
Sementes (RAS)
A anlise de sementes realizada com a principal
finalidade de avaliar o conjunto de caractersticas que determinam o valor das sementes para comercializao e armazenamento. Porm, para que os objetivos esperados
sejam atingidos, necessrio que se tenham instalaes e
equipamentos adequados, pessoal treinado, mtodos e
procedimentos padronizados, e um programa de pesquisa
em anlise de sementes que procure desenvolver novos
mtodos e aperfeioar os existentes, possibilitando tambm estabelecer parmetros de comparao entre diferentes lotes, bem como as condies adequadas de
armazenamento [1].
de fundamental importncia que os mtodos
padronizados forneam dados precisos e confiveis. Os
resultados somente tero o valor necessrio e indispensvel, se forem comparveis entre diferentes anlises,
analistas e laboratrios, dentro de uma determinada tolerncia. Entretanto, os nveis de preciso e de uniformidade dos resultados so limitados pelo conhecimento da
espcie, pelos equipamentos disponveis e pela habilidade
do analista.
As Regras para Anlise de Sementes (RAS) renem
um conjunto de tcnicas, procedimentos e prescries que
norteiam o tecnologista na realizao da anlise,
An lise de sementes
padronizando a metodologia empregada para uma dada

espcie. Os mtodos includos nas RAS passam, previamente, por processos de aferio e validao da metodologia, cujos dados podem ter sido obtidos tanto em
pesquisas cientficas, como no acmulo de experincias e
observaes efetuadas em anlises de rotina. Ambos os
caminhos tm a sua importncia e devem continuar a ser
seguidos; no entanto, programas de pesquisa destinados
ao aperfeioamento da metodologia devem ser considerados como prioritrios, visando revises e atualizaes
para melhor atender s exigncias do progresso da tecnologia de sementes [1].
Os tecnologistas de sementes florestais tm encontrado dificuldades no estabelecimento de condies e tcnicas adequadas para os diferentes tipos de sementes,
devido grande variao morfolgica que apresentam.
Soma-se a isso o fato de que, em muitas espcies nativas,
trabalha-se com o fruto e no com a semente, uma vez
que a sua extrao trabalhosa, como ocorre em Centrolobium tomentosum, C. robustum, Dypterix alata, Alleurites
mollucana e Pterodon pubescens, entre outras. H tambm, o caso de sementes que esto contidas no interior de
vagens indeiscentes e de difcil beneficiamento, como em
Peltophorum dubium e Mimosa scabrella, cujas tcnicas
de beneficiamento j foram estudas e estabelecidas. Essa
grande diversidade na morfologia dos frutos e sementes
de espcies florestais nativas tem comprometido e, muitas
vezes, causado insegurana quanto confiabilidade dos
resultados obtidos nas anlises [1].
A partir de 1967, com a implantao de incentivos
fiscais aos (re) florestamentos, houve demanda de sementes florestais em larga escala no Brasil. Aps 40 anos,
considera-se que a pesquisa na rea de anlise de sementes florestais fez avanos considerveis, mas ainda h
um grande nmero de espcies florestais nativas, de valor
econmico para o Brasil, sobre as quais existem poucas
informaes [3]. Somente com a ampliao do conhecimento gerado pela pesquisa em anlise e tecnologia de
Captulo 1
sementes de espcies florestais nativas, espera-se que

sejam realizados, periodicamente, procedimentos de
validao de testes e a incluso dessas novas espcies nas
RAS.
1.3 Atividades do laboratrio de sementes

O cotidiano dos servios, relacionados anlise de
sementes, contempla uma rotina estabelecida atravs das
seguintes atividades principais:
Amostragem;
Recebimento e protocolo das amostras;
Preparao da amostra de trabalho;
Anlise de pureza;
Peso de mil sementes;
Determinao do grau de umidade;
Teste de germinao;
Arquivo da contra-amostra;
Emisso de boletins;
Emisso de resultados;
Limpeza de materiais, equipamentos e
instalaes.
1.4 Infraestrutura do laboratrio

de sementes
Para a instalao de um laboratrio necessria
uma infraestrutura mnima adequada s normas especficas e ao volume de sementes que ser analisado, composta por [4]:
Sala de recepo e protocolo: a sala deve ser
ampla e conferir suporte necessrio ao armazenamento das amostras. o local onde se
realiza a checagem e a confirmao das informaes inerentes s amostras e lotes de se-
10
An lise de sementes
mentes, e posterior protocolo.

Sala de preparao das amostras: o local
onde as amostras recebidas sero homogeneizadas e reduzidas aos pesos adequados
para as anlises. Deve possuir divisores e homogeneizadores apropriados s diferentes espcies,
bandejas, placas de petri, balanas analticas
com precises variadas, dentre outros materiais.
Sala de instalao e avaliao dos testes: a
sala onde os testes sero realizados e avaliados,
com bancadas, mesas e cadeiras de alturas apropriadas, alm de material e equipamentos de suporte s avaliaes, como pinas, luminrias e
lupas de aumentos de acordo com a necessidade dos diferentes testes, paqumetro digital,
papel especfico para germinao, reagentes,
dentre outros.
Sala do teste de umidade: a sala de instalao
e avaliao dos testes de umidade, com bancada
apropriada para o uso de balanas analticas,
dessecadores, estufas de secagem, cadinhos e
demais materiais e equipamentos empregados
nessa anlise. Deve conter uma ante-sala e estar
posicionada em local livre de correntes de ar.
Sala de germinadores (cmaras de germinao): o local que contem os germinadores,
em nmero suficiente, com termmetros de
mxima e mnima, e ser refrigerada.
Sala de arquivo de contra-amostras: o local
onde sero armazenadas as contra-amostras
compatveis com o nmero de amostras recebidas, protegido contra a ao de insetos e roedores, com sistemas de refrigerao e de
desumidificao do ar, visando garantir a conservao das contra-amostras dos lotes de sementes at o perodo recomendado ao descarte.
Escritrio: o local onde, aps a emisso dos
formulrios de avaliao dos diferentes testes,
11
Captulo 1
os resultados das anlises sero analisados e

processados para compor os respectivos boletins de anlise, com equipamentos e material
de consumo necessrio.
Todos os equipamentos apropriados s anlises,
como paqumetros digitais, balanas analticas, estufas e
cmaras de germinao (Figura 1), devem ser periodicamente, calibrados e submetidos manuteno para assegurar a preciso dos resultados.
Figura 1. Equipamentos utilizados em laboratrio de sementes.
12
Cmara de germinao
Balana analtica de preciso
Estufa de secagem
Dessecador
An lise de sementes
1.5 Perfil dos profissionais do laboratrio

de sementes
O perfil das pessoas envolvidas determinante
para o sucesso, porque o trabalho exige responsabilidade,
disciplina, organizao, acuidade visual e, principalmente,
pacincia, por se tratar de uma atividade rotineira, que
exige horas de dedicao para a realizao e encerramento
de uma anlise. Outros aspectos relevantes so a tica
profissional e a capacidade de apresentao, defesa, discusso e argumentao sobre os testes, alm da habilidade em trabalhar em equipe [4].
A avaliao da qualidade do trabalho dos analistas
e tcnicos de laboratrio realizada, normalmente,
atravs de testes de aferio, treinamentos e reciclagens.
Quando so verificadas dificuldades na execuo de testes
para uma dada espcie, torna-se necessrio buscar treinamento especfico at a adequao necessria, para que
todos atendam o mesmo padro referencial [4].
1.6 Referncias
1
FIGLIOLIA, M.B.; OLIVEIRA, E.C.; PIA-RODRIGUES, F.C.M. Anlise de sementes. In: AGUIAR, I.B.;
PIA-RODRIGUES, F.C.M.; FIGLIOLIA, M.B. (coord.) Sementes florestais tropicais. Braslia: ABRATES, 1993.
p.137-174.
2
MARCOS FILHO, J.; CICERO, S.M.; SILVA, W.R.
Avaliao da qualidade das sementes. Piracicaba:
FEALQ, 1987. 230p.
3
SILVA, E.M.N. Laboratrio de anlise de sementes
(LAS) e regras para anlise de sementes (RAS). In: RODRIGUES, F.C.M.P. (coord.) Manual de anlise de sementes florestais. Campinas: Fundao Cargill, 1988.
13
Captulo 1
p.41-43.
ZORATO, F. Evoluo do laboratrio de anlise de
sementes. Net, Revista SEED News, nov. e dez., ano IX,

n. 6. Disponvel em: <http://www.seednews.inf.br/portugues/seed96/artigocapa96.shtml>. Acesso em: 12 mar.
2009.
14
Captulo 2
1
Amostragem
tema
2.1 Introduo
A quantidade de sementes encaminhada aos laboratrios para anlise , em geral, muito pequena em relao ao tamanho do lote que representa. Desse modo, a
finalidade da amostragem obter uma amostra que represente o lote, de tamanho representativo para os testes,
na qual estejam presentes os mesmos componentes e em
propores semelhantes do lote de sementes que a originou [1].
Como exemplo, em um lote com massa de 1
tonelada de sementes de Pinus caribaea, as RAS recomendam que a amostra a ser remetida ao laboratrio sejam
no mnimo de 100g, o que significa a reduo de 10.000
vezes o tamanho do lote. Isto reflete a importncia da
amostragem correta, em que seja mantida a composio
inicial do lote e nas mesmas propores [2].
Uma das caractersticas mais importantes de um
lote a sua homogeneidade. Assim, quanto maior for a
homogeneidade do lote de sementes, mais representativa
ser a amostra destinada anlise. O conceito de lote ho-
Captulo 2
mogneo dado como sendo uma quantidade de sementes cujas partes que a compem estejam razovel e
uniformemente distribudas por toda a sua massa. Esta
uniformidade se refere em qualquer um dos atributos que
possa ser determinado em um exame ou teste [3].
Na prtica, a amostragem ser recusada se o lote
for to heterogneo que as diferenas entre as amostras
simples sejam visveis ao amostrador. Caso seja verificada
a heterogeneidade em um lote de sementes, este problema
pode ser resolvido dividi-se o lote em outros menores,
fazendo uma nova homogeneizao do lote ou realizando
novo beneficiamento [1].
2.2 Definies
As Regras de Anlise de Sementes definem:
Lote: uma quantidade definida de sementes,
identificada por letra, nmero ou combinao
dos dois, da qual cada poro , dentro de
tolerncias permitidas, homognea e uniforme
para as informaes contidas na identificao
[1] (Figura 1).
Figura 1. Lote de semente de leucena (Leucaena leucocephala Lan).
16
Amostr agem
Amostragem
Para sementes florestais o lote deve ser constitudo

por sementes colhidas numa mesma poca, mesmo estgio de maturao, tendo a mesma origem ou procedncia,
especificando-se o tipo de rea em que as sementes foram
produzidas (rea de colheita ACS, rea de produo
APS ou pomar de sementes - PS), ou a categoria de sementes (identificada, selecionada, qualificada ou testada).
Para o seu acondicionamento, so empregados diversos
tipos de recipientes, como sacos de algodo ou plstico,
barricas de papelo ou caixas de madeira. O lote pode ser
constitudo por um ou vrios recipientes [2].
As RAS prescrevem o tamanho mximo do lote
para vrias espcies florestais exticas; no entanto, no
existem prescries para a grande maioria de espcies nativas [2]. O peso mximo do lote pode ser determinado
por comparao com uma espcie cujas sementes tenham
tamanho e peso semelhante ao da espcie em anlise
tamanho do lote depende da espcie e do tamanho das
sementes, sendo no mximo de 5.000 kg (como Quercus
spp.) para sementes de dimenses iguais ou maiores do
que as de quiabo, e no mnimo 1.000 kg (como Cedrela
spp, Pinus spp. e Eucalyptus spp.) para sementes menores
do que as de quiabo. Nas RAS espcies florestais com
tamanho mximo de lote. Acer spp. 500 kg; Betula spp,
Calocedrus e Taxodium distichum 300 kg.
Devido irregularidade de produo e baixa produtividade, comum um nmero considervel de espcies
brasileiras florestais nativas produzirem, em determinados
anos, uma quantidade to pequena de sementes fazendo
com que os lotes apresentam geralmente poucas sementes. Outro aspecto importante a ser considerado o
tamanho das sementes, especialmente as grandes, como
Dypterix alata, Alleurites mollucana, Terminalia catappa,
entre outras, que contm cerca de 60, 100 e 200 sementes/kg, respectivamente. Neste caso, pode acontecer
que o lote contenha apenas as sementes necessrias para
as demandas de plantio, no havendo sementes suficientes para os testes de controle de qualidade [2].
17
Captulo 2

18
Amostra simples: uma pequena poro de sementes retirada de um ponto do lote, por meio
de aparelho mostrador ou manualmente, de
diferentes recipientes ou pontos do lote. As
pores devem ser iguais [1].
Amostra composta: a amostra formada pela
combinao e mistura de todas as amostras simples do lote. Esta amostra usualmente bem
maior que a necessria para os vrios testes e
normalmente necessita ser adequadamente reduzida antes de ser enviada ao laboratrio [1].
Amostra mdia: a prpria amostra composta
ou subamostra desta, recebida pelo laboratrio
para ser submetida anlise e deve ter os pesos,
especificados nas RAS (Tabela 1). geralmente
resultante da homogeneizao e reduo da
amostra composta, podendo ser a prpria
quando o seu peso estiver de acordo com o
exigido [1].
Amostra de trabalho: a amostra obtida no
laboratrio, por homogeneizao e reduo da
amostra mdia, at os pesos mnimos requeridos e nunca inferiores aos prescritos para os
testes das RAS [1].
Subamostra: a poro de uma amostra obtida
pela reduo da amostra de trabalho, sendo utilizadas como replicatas (repeties) nos testes [1].
Amostra duplicata: a amostra obtida da
amostra composta e nas mesmas condies da
amostra mdia e identificada como Amostra
duplicata. obtida para fins de fiscalizao da
produo e do comrcio de sementes, no caso
da necessidade de uma reanlise [1].
Amostr agem
Amostragem
Tabela 1. Tamanho mximo dos lotes e mnimo das amostras mdias de

algumas espcies florestais.
Espcies
Tamanho mximo
do lote (kg)
Peso mnimo da
amostra mdia (g)
Acacia spp
1.000
70
Cedrela spp
1.000
80
Cryptomeria japnica
1.000
20
Cupressus sempervirens
1.000
40
Eucalyptus camaldulensis
1.000
15
Eucalyptus citriodora
1.000
40
Eucalyptus deglupta
1.000
10
Eucalyptus globulus
1.000
60
Eucalyptus grandis
1.000
Eucalyptus maculata
1.000
40
Eucalyptus pauciflora
1.000
60
Eucalyptus robusta
1.000
15
Eucalyptus saligna
1.000
15
Eucalyptus tereticornis
1.000
15
Ginkgo biloba
5.000
500 sementes
Gleditsia triacanthos
1.000
800
Koelreuteria paniculata
1.000
800
Leucaena leucocephalla
5.000
240
Pinus banksiana
1.000
20
Pinus caribaea
1.000
100
Pinus elliottii
1.000
160
Pinus kesiya
1.000
80
Pinus koraiensis
1.000
2.000
Pinus oocarpa
1.000
70
Pinus palustris
1.000
500
Pinus taeda
1.000
140
Taxodium distichum
Tectona grandis
300
500
1.000
2.000
Fonte: Brasil (2009)
2.3 Procedimentos e cuidados na

amostragem
Os procedimentos de amostragem incluem a homogeneizao do lote e das amostras, e a retirada e a re-
19
Captulo 2
duo das amostras[2].

Homogeneizao: se faz necessria, uma vez
que os componentes mais pesados do lote tendem a se depositar na parte inferior do recipiente. Em todas as etapas do processo de
amostragem e obteno das amostras simples,
necessria a homogeneizao do lote, manualmente (sementes grandes) ou com uso de
equipamentos (homogeneizador de solo, divisor
cnico e amostrador).
Retirada: a retirada das amostras deve ser efetuada manualmente ou com uso de
amostradores. A amostragem manual a mais
adequada para sementes de muitas espcies arbreas. Neste sistema de amostragem, deve-se
ter o cuidado de manter a mo fechada, evitando
que as sementes escapem por entre os dedos.
Entretanto, difcil obter amostras representativas manualmente a mais de 40 cm de profundidade e, quando for necessrio obt-las, o
encarregado da amostragem deve solicitar que
alguns sacos ou embalagens sejam parcial ou totalmente esvaziados para facilitar amostragem,
e em seguida, reensacar as sementes.
Reduo: na reduo das amostras so empregados divisores de solo ou cnicos de menor
tamanho, ou rguas quando efetuada manualmente. A poro a ser reduzida passada no
equipamento onde dividida em duas fraes,
sendo uma desprezada. Com a frao restante,
repete-se o procedimento at se obter a amostra
do tamanho desejado. Com o uso de rguas, a
amostra subdividida consecutivamente, sendo
uma das pores sempre desprezada. A cada
novo lote amostrado, os instrumentos e os
equipamentos devem ser limpos para evitar
contaminao.
20
Amostr agem
Amostragem
2.4 Intensidade de amostragem

As RAS determinam o nmero de amostras simples
que devem ser obtidas a cada lote de sementes. Para lotes
de acondicionados em recipientes com capacidade de
mais de 100kg durante o beneficiamento a RAS determinam [1]:
Lotes a granel
Tamanho do lote (Kg)
Nmero de amostras simples
At 500
5 amostras simples, pelo menos
501-3.000
1 amostra simples para cada 300Kg,

mas no menos do que 5
3.001 20.000

Acima de 20.000

Em lotes de sementes acondicionadas em recipientes, como sacos, tambores e outros, com capacidade de
at 100kg, a intensidade mnima de amostragem dever
[1]:
Lotes de sementes acondicionadas em recipientes
com capacidade de at 100Kg
No. de recipientes do lote
Nmero de amostras simples
1-4
3 amostras simples de cada recipiente
5-8
9-15
16-30
15 amostras simples no total
31-59
60 ou mais
Para sementes acondicionadas em recipientes pequenos, como latas, envelopes e pacotes usados no
comrcio varejista, recomenda-se que o peso mximo de
100 quilos seja tomado como unidade bsica e os pe-
21
Captulo 2
quenos recipientes combinados, de maneira a formar as

seguintes unidades de amostragem [1]:
20 recipientes de 5 kg;

33 recipientes de 3 kg;
100 recipientes de 1kg;
1.000 recipientes de 100 g;
10.000 recipientes de 10 g.
A amostragem realizada nas unidades bsicas deve
ser feita tomando-se recipientes inteiros e fechados. Os
contedos combinados dos diversos recipientes devem
suprir as quantidades mnimas para a amostra mdia.
De acordo com a legislao vigente (Lei
10.711/2003 e Decreto 5.153/2004), a amostra mdia ou
submetida ser acondicionada em recipiente que dever
ser identificado com os seguintes dados: espcie, cultivar
(quando for o caso), categoria, natureza da semente, data
de coleta da semente, identificao do lote, indicao do
tratamento, quando for o caso, determinaes solicitadas,
data da amostragem, identificao e assinatura do
amostrador.
As sementes de natureza intolerante ao dessecamento sero amostradas somente por meio manual,
acondicionadas de modo a assegurar a manuteno de
sua umidade e encaminhadas imediatamente para anlise.
2.5 Recepo, embalagem e armazenamento

das amostras
O intervalo entre a amostragem e a anlise da
amostra mdia deve ser o menor possvel, para evitar alteraes na qualidade das sementes [1]. A amostra mdia
deve estar identificada e embalada de acordo com tipo de
anlise a ser realizada, como por exemplo: em embalagens porosas, para os testes de pureza e germinao; embalagens hermticas e completamente cheias, para os
22
Amostr agem
Amostragem
testes de umidade e peso de mil sementes. Aps a recepo, a amostra recebe um registro para identificao
interna no laboratrio de sementes [4].
As embalagens individuais devem ser acondicionadas de maneira a evitar danos durante o transporte,
sendo preservadas contra o excesso de calor, umidade e
contaminao [1].
Caso seja necessrio algum tempo para realizar a
anlise, a amostra mdia deve ser armazenada em local
preferencialmente climatizado, de tal modo que as alteraes na qualidade das sementes como teor de gua, porcentagem de germinao e dormncia sejam as mnimas
possveis.
O remanescente da amostra mdia, depois de retiradas as amostras de trabalho, colocado em recipientes
apropriados e ir constituir a amostra de arquivo, devendo
permanecer armazenado por um perodo equivalente ao
da validade do teste de germinao [1]. As amostras
devem ser armazenadas em locais adequados, de acordo
com a espcie, com controle de temperatura e umidade
relativa. O laboratrio no pode ser responsabilizado pelo
declnio da porcentagem de germinao durante o armazenamento das amostras de arquivo.
As amostras enviadas ao laboratrio em embalagens hermticas devero ser armazenadas nas condies
semelhantes s originais de embalagem.
2.6 Equipamentos e materiais necessrios

para a amostragem
So necessrios os seguintes equipamentos e materiais [4]:
Amostradores;
Embalagens diversas para coleta de amostras

simples;
Divisores de amostras (divisor de solo, cnico e
23
Captulo 2
centrfugo);
Rguas e;
Balanas.
O uso de equipamentos de amostragem tem sido
restrito s espcies arbreas florestais com sementes de
pequeno tamanho, como Eucalyptus ssp., Tibouchina ssp.
e Pinus ssp., entre outros [2]. O divisor de solo adequado para sementes de espcies florestais, principalmente aquelas que fluem com dificuldade. No caso de
sementes grandes, empregada a reduo manual.
2.7 Amostragem para sementes de

espcies florestais
A irregularidade da produo e a baixa produtividade na maioria das espcies florestais, principalmente
daquelas pertencentes aos grupos ecolgicos das secundrias e das tolerantes, fazem com que muitas vezes
no se obtenham, numa colheita, quantidades de sementes suficientes para compor uma amostra mdia, contendo o mnimo de 2.500 sementes para a anlise de
pureza, conforme as recomendaes das RAS [2].
Outro problema est relacionado ao tamanho da
semente. Vrias espcies apresentam sementes grandes,
ultrapassando o peso limite de 1.000 g para amostras de
trabalho na anlise de pureza, sem atingir o nmero mnimo determinado pela RAS. Como por exemplo, na
anlise de pureza de Licania tomentosum (oiti), que
apresenta cerca de 100 sementes por quilograma, para
uma amostra de trabalho prescrita pela RAS seriam
necessrios 25 kg, o que muitas vezes pode ultrapassar a
produo de um determinado ano [2].
O Instituto Florestal de So Paulo adota, para casos
semelhantes, o seguinte procedimento: calcula-se o
nmero de sementes necessrio para os testes de pureza,
germinao e umidade e duplica-se ou triplica-se esse
24
Amostr agem
Amostragem
valor para o estabelecimento da amostra mdia, em

funo da quantidade disponvel. No caso do oiti, a
amostra mdia seria de 2,5 kg [2].
As RAS citam que, no caso de lotes pequenos e de
sementes muito caras, permitido se trabalhar com
amostras mdias menores, tendo no mnimo, o peso suficiente para a realizao dos testes solicitados, devendo
constar o peso real da amostra mdia no Boletim de
Anlise de Sementes. So considerados pequenos os lotes
iguais ou menores do que 10% do peso mximo de lote indicado nas RAS [2].
2.8 Referncias
1
BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e
Abastecimento. Regras para anlise de sementes.
Braslia: MAPA/ACS, 2009. 395p.
2
FIGLIOLIA, M.B.; OLIVEIRA, E.C; PIA-RODRIGUES, F.C.M. Anlise de Sementes. In: AGUIAR, I.B.;
p.137-174.
3
MARCOS FILHO, J.; CICERO, S. M.; SILVA, W.R.
FEALQ, 1987. 230p.
4
SILVA, E.M.N, Amostragem. In: RODRIGUES,
F.C.M.P. (coord.) Manual de anlise de sementes florestais. Campinas: Fundao Cargill, 1988. p.44-50.
25
Captulo 3
Anlise de pureza
3.1 Introduo
a primeira anlise a ser realizada com a amostra
de trabalho de um lote de sementes e visa avaliar, por
meio de procedimentos tcnicos em laboratrio, a qualidade da fsica da semente. A anlise de pureza tem como
objetivo determinar a composio percentual por peso e
a identidade das diferentes espcies de sementes e do material inerte da amostra e por inferncia a do lote de sementes [1].
De acordo com a Lei de Sementes e Mudas, a
anlise de sementes dever ser realizada em laboratrio
credenciado para a anlise de sementes florestais e em
conformidade com as metodologias e procedimentos estabelecidos nas Regras para Anlise de Sementes.
A amostra de trabalho separada nos trs componentes: semente pura, outras sementes (que dificilmente
ocorrem em lotes de sementes florestais e somente possvel no caso de o beneficiamento no ser realizado com
os cuidados e tcnicas devidas) e material inerte, que so
indicados em porcentagem por peso da amostra de tra-
Captulo 3
balho. As sementes puras e o material inerte so indicados

em porcentagem por peso e as outras sementes indicadas
relacionando-se o nmero de outras sementes pelo peso
da amostra de trabalho. Cada tipo de material inerte presente deve ser identificado tanto quanto possvel e,
quando solicitado pelo requerente, sua porcentagem em
peso pode ser determinada [1].
Deve-se destacar que o teste de germinao, por
ser conduzido com a utilizao de sementes fisicamente
puras, que so separadas da amostras de trabalho recebidas, fornece resultados complementares aos da anlise
de pureza. Assim, o valor do lote, ou melhor, o seu potencial de estabelecimento no campo, pode ser avaliado
quando se considera, em conjunto, os resultados dos
testes de pureza e de germinao [3].
As amostras de sementes de natureza intolerante
ao dessecamento devem ser analisadas prioritariamente.
3.2. Componentes da amostra

Sementes puras: so consideradas sementes puras
todas as sementes e/ou unidades de disperso pertencentes espcie em exame, indicada pelo requerente ou
identificada como predominante na amostra, devendo
ainda ser includas nesta poro todas as variedades
botnicas e cultivares da espcie. Considera-se a poro
do lote pertencente espcie em exame, desde que represente mais do que 5 % do peso da amostra de trabalho.
Quando uma amostra apresenta duas espcies com mais
de 5 % do peso da amostra, pode-se considerar que h
uma mistura [1].
Alm das sementes inteiras, maduras e no danificadas da espcie, devem ser includas como puras as sementes que se encontrarem nas seguintes condies [1]:
Sementes inteiras de tamanho inferior ao normal, enrugadas, chochas, imaturas, trincadas,
infectadas ou germinadas, desde que possam
28
An lise de pureza
ser definitivamente identificadas como sendo da

espcie em exame;
Sementes levemente atacadas por molstias,
desde que seja possvel identific-las com preciso como pertencentes espcie em exame;
Fragmentos de sementes e/ou unidades de disperso, quebrados, porm maiores que a metade
do seu tamanho original, desde que apresentem
uma poro aderida do tegumento, em espcie
pertencentes famlia Leguminosae;
Unidades de disperso intactas tambm designadas como disporos, isto , aqunios, nculas, vagem ou smara, de difcil beneficiamento
e cujas sementes esto contidas no seu interior,
como Peltophorum dubium, estas podem ser
analisadas e comercializadas nesta forma: a
regra da metade se aplica aos fragmentos slidos, entretanto, pode haver dificuldade na classificao das sementes que tenham um orifcio
no tegumento. Se o orifcio for suficiente para
permitir uma avaliao segura do contedo da
semente, o julgamento feito de acordo com o
tamanho da massa de tecido remanescente. Se a
verificao no puder ser feita facilmente, a semente ser considerada pura. No preciso
virar a semente procura de orifcios ou outros
danos. O analista, durante a realizao do teste
de pureza, no deve se preocupar com as
condies fisiolgicas e sanitrias das sementes,
mas com a identificao desse material.
Outras sementes: devem ser includas, neste
grupo, todas as sementes e/ou unidades de disperso de
qualquer espcie cultivada ou silvestre, bulbilhos ou
tubrculos de plantas reconhecidas como daninhas ou invasoras e que no sejam as da espcie em exame. exceo daquelas que, por serem to mal desenvolvidas ou
severamente danificadas, no concorrem com a cultura e
29
Captulo 3
as quais devem ser includas no material inerte [1].

Em lotes de sementes florestais, a classe outras
sementes no comum, devido s tcnicas de produo
e colheita. O aspecto mais importante do teste de pureza
a proporo entre sementes puras e impurezas [2].
Material inerte: deve incluir unidades de disperso
e todos os outros materiais e estruturas no definidas
como semente pura ou outras sementes, como [1]:
Unidades de disperso nas quais no contenha
semente;
Pedaos de unidades de disperso quebrados ou
danificados iguais ou menores do que a metade
de seu tamanho original;
As expanses aladas das sementes dos gneros
Cedrus, Picea, Tsuga e Pinus, que se encontram
ainda aderidas, devem ser inteiramente removidas e consideradas como material inerte. As expanses aladas das sementes dos gneros Abies,
Larix, Libocedrus e Pseudotsuga, e das espcies
Pinus echinata, P. elliotti, P palustris, P. regida e
P. taeda, que se encontram aderidas, devem ser
removidas e consideradas como material inerte, exceto a parte que reveste a semente que
difcil de ser removida pelos processos normais
de beneficiamento, sem danificar a semente. As
expanses aladas dos gneros Acer, Betula,
Catalpa, Chamaecyparis, Cupresseis, Fraxinus,
Liquidambar, Liriodendron, Platanus, Thuja e
Ulmus, no devem ser removidas;
Sementes de Fabacea, Cupressaceae e Taxodiaceae com tegumento inteiramente removido.
Em Fabaceae, cotildones separados so considerados material inerte;
Sementes portadoras de molstias e que tenham
sido atacadas por fungos com formao de esclercios ou gros com carvo, bem como as galhas que resultam da infestao de nematides,
30
An lise de pureza
tambm so consideradas material inerte;

Todos os materiais da frao leve, quando a
separao for feita pelo Mtodo da Ventilao
Uniforme, exceto outras sementes;
Na frao pesada, quando a separao for
feita pelo Mtodo da Ventilao Uniforme, todo
material que no seja semente pura e outras sementes, como partculas de solo e areia, pedras,
palhas, pedaos de tegumento ou pericarpo, escamas de cones, pedaos de casca de caule e
flores, cuja presena deve ser indicada no Boletim de Anlise;
3.3 Equipamentos e materiais para a anlise

de pureza
So necessrios os seguintes equipamentos e materiais: Boletim de Anlise especfico; divisores de
amostras (de solos, cnicos ou centrfugo); balanas com
diversas sensibilidades; rguas; mostrurio de sementes;
diversos tipos de lupas; diafanoscpio; pinas; esptulas;
pincis; estiletes; recipientes variados (vidros de relgios,
placas de petri, etc.); jogos de peneiras; folhas de cartolina
branca ou azul-clara; sopradores pneumticos; dentre
outros [1].
3.4 Procedimentos e clculos

Recepo da amostra mdia
Ao receber a amostra mdia para anlise de
pureza, o analista dever verificar as condies da embalagem, determinar o peso da amostra e protocolar no Boletim de Anlise. Caso a amostra esteja desconforme, deve
ser recusada [3].
31
Captulo 3
Preparao da amostra de trabalho

A amostra de trabalho deve ser obtida por homogeneizao e diviso da amostra mdia, de tal maneira
que seja representativa do lote. Deve conter o peso exato
ou ligeiramente superior ao mnimo exigido para as
anlises. Deve sempre ser preferido o mtodo mecnico
de diviso, mas no sendo possvel o seu uso, pode se
usar o mtodo manual at alcanar o peso desejado da
amostra de trabalho para a realizao dos testes [1].
Peso mnimo da amostra de trabalho
Espcies relacionadas nas RAS: Os pesos das
amostras de trabalho para as diferentes espcies de sementes nunca deve ser menor que o indicado para a espcie nas RAS. A anlise pode ser realizada sobre uma
amostra de trabalho com o peso prescrito pelas RAS ou
sobre duas subamostras com no mnimo a metade deste
peso, cada uma retirada independentemente da amostra
mdia [1].
Espcies no relacionadas na RAS: O peso das
amostras para a anlise de pureza e das sementes nocivas
pode ser determinado por comparao com uma semente
de espcie relacionada nas RAS, que tenha tamanho e
peso semelhante, desde que a amostra de trabalho para a
pureza tenha no mnimo 2.500 sementes [1].
Para sementes extremamente grandes ou pequenas, o peso da amostra de trabalho deve basear-se numa
amostra contendo nunca menos que 2.500 sementes,
desde que no seja maior do que 1.000 g e nunca menor
do que 0,1 g [1].
A amostra de trabalho ou as subamostras e para
cada um de seus componentes devem ser pesadas, em
gramas, at o nmero mnimo de casas decimais (Tabela
1) necessrio para calcular a porcentagem de seus componentes, com uma casa decimal [1].
32
An lise de pureza
Tabela 1. Nmero de casas decimais exigidas para a amostra de trabalho e

para cada um de seus componentes.
Peso da amostra de trabalho (g)
Nmero de Casas decimais
Menor que 1.000
1,000 a 9,999
10,00 a 99,00
100,00 a 999,9
1.000 ou mais
Fonte: Brasil (2009).
Com o avano das pesquisas, novas metodologias

vm sendo estudadas no sentido de tornar as anlises
mais prticas e eficientes. Quanto anlise de sementes
florestais, em especial as sementes de Eucaliptus spp., o
tamanho prescrito para a amostra de trabalho varia de 2
a 20 g, o que demanda um tempo do laboratorista de
aproximadamente 8 horas para proceder a anlise de
pureza, apesar do auxlio de um jogo de peneiras. Na
busca de maior agilidade dos trabalhos de anlise, foi sugerida uma nova metodologia (Figura 1) para Eucalyptus
spp., em que a anlise seja feita em amostras de 0,5 g, reduzindo o tempo de anlise para aproximadamente 4
horas, com resultados prximos aos das amostras de 5 g.
Essa metodologia deve ser ainda repetida e avaliada em
vrios laboratrios, para que venha constar nas RAS [2].
33
Captulo 3
Figura 1. Metodologia de anlise de pureza para sementes de Eucaliptus spp

Fonte: Figliolia et al., (1993)
Separao dos componentes

A amostra de trabalho ou as subamostras, depois
de pesadas e conferidas quanto autenticidade dos dados
do requerente com relao espcie, deve(m) ser criteriosamente examinada(s) e separada(s) nos trs componentes seguintes: sementes puras (SP), outras sementes
(OS) e material inerte (MI) [1].
A separao da Semente Pura deve ser realizada
com base na definio de semente pura, contida nas RAS
e baseada no exame de cada partcula da amostra de trabalho, mas, em certos casos, procedimentos especiais so
obrigatrios, como o uso de peneiras ou sopradores. A
separao das sementes puras deve ser feita com base nas
caractersticas morfolgicas visveis, por meio de presso
ou de processos mecnicos, mas sem prejudicar a capacidade germinativa das sementes [1].
Identificao dos componentes e clculos
Aps a separao dos componentes, procede-se a
identificao e contagem das outras sementes encontradas
na amostra, anotando-se na ficha de anlise os respectivos
nomes e nmeros por peso da amostra [1].
Depois de caracterizada a natureza do material
34
An lise de pureza
inerte, pesa-se tais componentes, anotando-se na ficha de

anlise o resultado desta pesagem. Conservando-se este
material no prato da balana e juntando-se a ele as outras
sementes (previamente identificada, contadas e anotadas), faz-se nova pesagem, obtendo-se, assim, o peso
total das impurezas, o qual , por sua vez, anotado na
ficha de anlise [1].
A pesagem direta das sementes puras depende do
tamanho da amostra de trabalho [1]:
Quando o peso da amostra for inferior a 25 g: as
sementes puras so pesadas diretamente. Os
clculos das porcentagens por peso das trs determinaes (material inerte, total de impurezas
e sementes puras), devem ser baseados na soma
dos pesos correspondentes ao total de impurezas e sementes puras e no no peso inicial
da amostra de trabalho. Essa soma deve, entretanto, ser primeiramente comparada ao peso
inicial, a fim de verificar se houve excessiva
variao de peso ou outro erro qualquer. No
deve haver mais de 1 % de variao entre o
peso inicial e o peso final da amostra de trabalho. Se o ganho ou perda for maior do que 1
% devese refazer a anlise;
Quando o peso da amostra for igual ou superior
a 25 g: o peso das sementes puras obtido por
diferena, subtraindo-se do peso inicial da
amostra de trabalho o peso total de impurezas.
As porcentagens do material inerte e total de impurezas devem ser baseadas no peso inicial da
amostra e a das sementes puras ser obtida subtraindo-se de 100 a porcentagem do total de impurezas.
Exemplo 1. Clculo da porcentagem da pureza de uma
amostra de trabalho com peso inferior a 25 g [4].
Um laboratrio recebeu uma amostra mdia de Eucalyptus saligna de 17 g. Aps a devida diviso, obteve-se
35
Captulo 3
uma amostra de trabalho de 5,864 g. Passando a efetuar

a separao dos componentes, obteve-se os seguintes
pesos: material inerte (MI) = 4,603 g; total de impurezas
(TI) = 4,968 g; sementes puras (SP) = 0,870 g. Calcular
a porcentagem de pureza da amostra.
a) Clculo do peso final (Pf)
Pf = TI + SP
Pf = 4,968 + 0,87 = 5,838
b) Comparao entre peso inicial e peso final da amostra
5,864 100%
x 1%
5,864 x 0,01 = 0,05864 (1%)
5,864 0,05864 = 5,80536 ou,
5,864 5,838 = 0,026 0,026 < 0,05864
Neste exemplo, no houve variao entre o peso
inicial e o peso final superior a 1%, podendo-se ento calcular as porcentagens de impurezas e pureza.
c) Clculo da porcentagem total de impurezas
5,838 100%
4,968 x
x = 85,1% % impurezas = 85,1%
d) Clculo da porcentagem de pureza
% pureza = 100 85,1% = 14,9% % pureza = 14,9%
Exemplo 2. Clculo da porcentagem de pureza de uma
amostra de trabalho com peso igual ou superior a 25 g
[4].
Um laboratrio recebeu uma amostra mdia de
Pinus caribea com peso de 115 g. Aps a devida diviso,
obteve-se uma amostra de trabalho de 52,47 g. Aps a
separao dos componentes, obtiveram-se os seguintes
pesos: material inerte (MI) = 1,25 g e total de impurezas
(TI) = 2,18 g. Calcular a porcentagem de pureza da
amostra.
36
An lise de pureza
a) Clculo da porcentagem do total de impurezas

52,47 100%
2,18 x%
x = 4,2% % impurezas = 4,2%
b) Clculo da porcentagem de pureza
% pureza = 100 4,2 = 95,8% % pureza = 95,8%.
3.5 Apresentao dos resultados

Quanto apresentao dos resultados desta
anlise, existem prescries citadas nas RAS, as quais se
encontram enumeradas a seguir [1]:
1. Os resultados do exame de sementes puras, material inerte e total de impurezas devem ser expressos em
porcentagem por peso e com uma casa decimal;
2. Quando a amostra em exame apresentar uma
mistura de espcies, a palavra MISTURA deve aparecer
claramente escrita no boletim de anlise e cada espcie
deve ser citada separadamente, sendo tambm determinadas as suas porcentagens por peso e com uma casa
decimal;
3. No caso de espcies florestais do gnero Eucaliptus, cujo resultado expresso em nmero de plntulas por
peso da amostra, a semente pura no normalmente determinada;
4. As outras sementes e a natureza do material inerte presente devem ser identificadas tanto quanto possvel. O resultado de outras sementes deve ser expresso
em nmero de sementes encontradas por peso da amostra
de amostra de trabalho ou por unidade de peso;
5. Quando a porcentagem de alguns componentes
for inferior a 0,05, a palavra TRAO dever ser registrada;
6. Se o resultado da avaliao de algum dos componentes for nulo, este dever ser informado como 0,0
no espao apropriado;
7. Os espaos vazios do boletim devem ser inuti-
37
Captulo 3
lizados com o sinal - 0 -;

8. A presena de sementes atacadas por doenas
ou insetos deve ser relatada;
9. Quando, por qualquer motivo, forem examinadas menos que 2.500 sementes, na anlise de pureza,
a seguinte nota deve constar no Boletim de Anlise: O
peso da amostra de trabalho foi tomado de acordo com
as RAS, mas continha apenas sementes;
10. Quando duas ou mais anlise de pureza so
feitas sobre a mesma amostra de trabalho, o resultado
final deve ser a mdia dos resultados obtidos;
11. Todos os resultados parciais devem ser includos no clculo da mdia, a menos que seja evidente que
um ou mais deles sejam incorretos e, nesse caso, tais resultados no sero utilizados no clculo;
12. O Boletim de Anlise no pode conter rasuras.
3.6 Referncias
1
2
FIGLIOLIA, M.B.; OLIVEIRA, E.C; PIA-RODRIGUES, F.C.M. Anlise de sementes. In: AGUIAR, I.B.;
p.137-174.
3
MARCOS FILHO, J.; CICERO, S.M.; SILVA, W.R.
FEALQ, 1987. 230p.
4
SILVA, E.M.N. Anlise de pureza. In: RODRIGUES,
F.C.M.P. (coord.) Manual de anlise de sementes florestais. Campinas: Fundao Cargill, 1988. p.51-59.
38
Captulo 4
1
Determinao do
tema
grau de umidade
4. 1 Introduo
Determinaes peridicas do grau de umidade
entre a colheita e a comercializao permitem a identificao de problemas que porventura ocorram ao longo das
diferentes fases do processamento e possibilitam a adoo
de medidas adequadas para a sua soluo [5].
Com essa informao, possvel manejar corretamente as sementes utilizando-se, se necessrio, prticas
adequadas que propiciem sua conservao por maiores
perodos, como o caso de sementes do grupo das ortodoxas que requerem baixo grau de umidade para a
manuteno de viabilidade e que apresentam alto contedo de umidade na colheita, necessitando de secagem,
previamente ao armazenamento.
No caso das ortodoxas, as sementes com alto grau
de umidade tendem a perder a viabilidade mais rapidamente se no forem manejadas corretamente. Isto porque,
a umidade propicia uma intensificao da atividade respiratria da semente, consumindo suas reservas nutritivas.
Como conseqncia, libera calor tornando o ambiente de
Captulo 4
armazenamento propcio ao aparecimento de agentes

patognicos [3].
A determinao do grau de umidade tambm um
critrio importante para o estabelecimento de preos. Em
alguns casos, a matria seca pode estar sendo comercializada junto com a gua, acarretando maior custo no transporte da semente com maior grau de umidade do que o
necessrio. No entanto, essa considerao s vlida
quando se utiliza embalagens impermeveis, caso contrrio, a tendncia de se estabelecer uma umidade de
equilbrio com o ambiente [7].
A umidade e a temperatura so fatores preponderantes no armazenamento de sementes. A longevidade
prolongada quando a semente armazenada com baixa
umidade e temperatura. Entretanto, essa regra no se
aplica as espcies recalcitrantes cujas sementes requerem
alto grau de umidade para seu acondicionamento, como
o caso de Hevea brasiliensis, Theobroma cacao, Carapa
sp., Virola surinamensis, Inga uruguensis, Araucaria angustiflia e Euterpe edulis, entre outras [3].
A gua pode se apresentar sob diferentes formas
em uma semente [5]:
gua absorvida ou gua livre: presa ao
sistema coloidal por meio de foras capilares, ocupando
espaos intercelulares e poros do material.
gua adsorvida: tambm livre presa ao sistema atrao molecular; sendo retida por adeso de suas
molculas ao material slido;.
gua de constituio e/ou de composio:
est unida quimicamente substncia adsorvente ou
forma parte integrante dessa substncia e s pode ser removida sob condies especiais. A tentativa de sua remoo pelo calor pode provocar volatilizao de outras
substncias e acarretar erros nas determinaes.
As diferentes formas com que a gua se apresenta
na semente podem causar dvidas quanto determinao
correta do grau de umidade, isto , quanto eficincia dos
mtodos para avaliar a presena das diferentes formas de
40
gua nas sementes. No entanto, deve ser ressaltado que,

quando se procura determinar o teor de gua de uma
amostra, no to importante o conhecimento da presena desta ou daquela forma de gua [5] e sim, assegurar
a remoo mxima, tanto quanto possvel da gua e que
no sejam volatilizados outros elementos volteis que no
somente a gua .
Os testes so realizados de acordo com as prescries das RAS, as quais nem sempre so adequadas a
determinadas espcies, dadas as grandes variaes morfolgicas, fisiolgicas e na composio qumica das sementes e/ou unidades de disperso existentes entre as
espcies florestais [6].
As RAS prescrevem o peso mnimo de amostras
mdias nos mtodos de estufa de 100 g para espcies que
devem ser modas e de 50 g para as demais espcies que
no necessitam de moagem. Essas quantidades nem sempre so possveis para grande nmero de espcies arbreas com sementes grandes, como o caso de Dypterix
alata, que possui em mdia 60 unidades de disperso (frutos) por quilograma [6].
O objetivo desta anlise determinar o teor de
gua das sementes por mtodos adequados para uso em
anlise de rotina [1].
4.2 Princpio bsico

A determinao do grau de umidade baseia-se na
perda de peso das sementes quando secas em estufa. A
gua contida nas sementes expelida em forma de vapor
pela aplicao do calor sob condies controladas, ao
mesmo tempo em que so tomadas precaues para reduzir a oxidao, a decomposio ou a perda de outras
substncias volteis durante as operaes [1].
A reduo do peso reflete a perda de gua das sementes e, baseado neste princpio, as pesagens realizadas
antes e aps a secagem fornecem dados para o clculo do
41
Captulo 4
grau de umidade [1].
4.3 Sementes ortodoxas e recalcitrantes de

espcies florestais
O controle do grau de umidade de sementes ortodoxas tem grande importncia na colheita e no beneficiamento, na conservao do poder germinativo e do vigor
durante o armazenamento, na escolha do tipo de embalagem, no controle de insetos e de microorganismos e do
peso durante a comercializao. No caso das sementes recalcitrantes, essa verificao essencial manuteno da
qualidade fisiolgica, principalmente durante a etapa de
secagem, at ser atingido o grau de umidade de segurana, abaixo do qual a viabilidade e, ou, ou vigor
comeam a ser afetados negativamente.
Apesar de estar prescrita nas RAS a amplitude de
tolerncia mxima de 0,6 a 2,8% para as diferenas entre
duas subamostras de trabalho (repeties) de sementes
de espcies arbreas e arbustivas, dentre as quais muitas
que apresentam comportamento recalcitrante, os resultados de uma mesma determinao so, geralmente, discrepantes, cujas diferenas ultrapassam esses limites. As
causas dessas variaes ainda no foram devidamente esclarecidas e comprovadas, muito embora se saiba que o
grau de umidade individual de sementes recalcitrantes
possa variar consideravelmente e o coeficiente de variao
possa ser maior do que o verificado em amostras similares
de sementes ortodoxas. Adicionalmente, os mtodos para
determinao do grau de umidade daquelas sementes
foram pouco estudados [4].
A perda de peso das sementes, que ocorre durante
a secagem, est relacionada tanto com a temperatura sob
a qual est submetida quanto ao perodo de exposio a
essa temperatura. Assim sendo, as RAS prescrevem as
temperaturas de 105C por 24 horas e 103C por 17 horas,
sendo estas as mais utilizadas no Brasil, para as espcies
42
florestais, com sementes de tamanho grande e para as

contidas dentro de frutos indeiscentes, ou 130C por 1 a
4 horas, sendo esta mais empregada para as grandes culturas. Outro mtodo que vem sendo muito estudado o
de estufa a 70C at peso constante [4; 6].
4.4 Mtodos de estufa

Para que os resultados obtidos nos diversos laboratrios possam ser uniformes e comparveis entre si h
necessidade de se seguir rigorosamente as instrues do
mtodo adotado, oficialmente estabelecidos pelas RAS
para uso nos laboratrios de anlise de sementes do pas.
Os mtodos baseiam-se na perda de peso das sementes
quando secas em estufa. considerado um mtodo preciso, mas alguns fatores podem interferir nos resultados
obtidos [5]:
O tamanho da amostra ou erros de amostragem, a
temperatura de secagem, o tempo de permanncia das sementes na estufa, a preciso pesagens ou erros na pesagem, etc. O procedimento adequado para cada espcie
previamente prescrito e qualquer alterao em uma das
instrues pode provocar alteraes nos resultados.
A temperatura empregada pode ser suficiente para
remover substncias volteis juntamente com a gua,
provocar a decomposio ou a oxidao de outras, e consequentemente, variaes no peso da amostra; isto ocorre
principalmente nos estgios finais da secagem.
A pesagem do material ainda quente provoca alterao no comportamento das balanas de preciso.
Devido s condies de adequao dos laboratrios
brasileiros para a conduo destes mtodos, a determinao em estufa 105C 3C por 24 horas foi adotado
como oficialmente como mtodo padro no Brasil, podendo ser utilizado em qualquer espcie, inclusive essncias florestais. Os resultados so expressos em
porcentagem com base no peso mido da amostra.
43
Captulo 4
4.4.1 Mtodo de estufa a 105 3C por 24 horas [1]

Empregado para todas as espcies e com sementes
inteiras;
Regular a temperatura da estufa a 105C, admitindo-se uma variao 3C;
Secar os recipientes por 30 minutos em estufa a
105C ou atravs de procedimento similar e resfri-los em
dessecador;
Conduzido com duas repeties;
Usar sementes inteiras, qualquer que seja a espcie;
Pesar o recipiente e sua tampa, devidamente identificados, em balana com sensibilidade de 0,001g, anotando-se os resultados (peso da tara = T);
Distribuir uniformemente as amostras nos
recipientes;
Pesar novamente os recipientes contendo as sementes, juntamente com as respectivas tampas, obtendose o peso bruto das sementes midas (Pu);
Colocar os recipientes na estufa 105C, sobre as
respectivas tampas;
Iniciar a contagem do tempo de secagem somente
depois da temperatura retornar a 105C.
Manter as amostras na estufa durante 24 horas;
Retirar as amostras da estufa aps o perodo de
secagem, tampar rapidamente os recipientes e coloc-los
em dessecador at esfriar e pesar, obtendo-se o peso bruto
das sementes secas (Ps);
Utilizar como dessecantes slica gel, pentxido de
fsforo, alumina ativada ou peneira molecular 4A, pelotas
1,5mm;
Quando, durante a determinao da umidade em
certas espcies, houver risco de algumas serem jogadas
fora do recipiente, pela ao do calor, este deve ser cobrindo com tela de material no corrosvel.
4.4.2 Mtodo de estufa a baixa temperatura 101-105C
por 17 horas [1]
Esse mtodo o mais indicado para as espcies flo-
44
restais, sendo considerado seguro para aquelas que contenham substncias volteis. o mtodo bsico de referncia para introduo de novas espcies e mtodos
adotados pelas Regras Internacionais de Anlise de Sementes da International Seed Testing Association- ISTA.
O procedimento deste mtodo o mesmo do
mtodo anterior exceto:
A temperatura da estufa deve ser mantida a 103
2C;
O perodo de permanncia das amostras na estufa
deve ser de 17 1 hora.
4.5 Procedimentos
4.5.1 Amostragem
A amostra deve ser retirada de diferentes locais de
um lote, para que possa represent-lo fielmente. Imediatamente aps sua obteno, deve ser acondicionada em
recipiente intacto prova de umidade (hermeticamente
fechado) e do qual tenha se extrado o ar, tanto quanto
possvel. A utilizao de embalagem permevel acarretar
alteraes no grau de umidade durante o perodo compreendido entre a sua retirada e a anlise, o que no correto. Essa amostra enviada ao laboratrio separada das
destinadas s demais determinaes [1].
A determinao deve ser iniciada o mais rpido
possvel aps o recebimento, observando-se que a temperatura da amostra esteja em equilbrio com a temperatura do ambiente.
Durante a determinao, a exposio da amostra
ao ambiente do laboratrio deve ser reduzida ao mnimo
e para espcies que no necessitam de moagem no mais
que dois minutos devem separar a remoo da amostra
do recipiente em que foi enviada at a colocao da
amostra de trabalho no recipiente de secagem e, para as
sementes modas, 30 segundos. Alm disso, devem ser
preservadas de altas temperaturas para reduzir a possibi-
45
Captulo 4
lidade de alteraes causadas pela respirao das

sementes [1].
4.5.2 Pesos das amostras
O peso mnimo das amostras mdias, nos mtodos
de estufa, de 100 g para as espcies que devem ser modas (sementes grandes) e 50 g para as espcies que sero
usadas inteiras [1].
No caso de sementes pequenas e/ou caras permitido enviar amostras mdias menores, tendo no mnimo o
peso suficiente para a realizao dos testes solicitados.
Deve ser feita a seguinte declarao e esta dever constar
no campo Observaes do Boletim de Anlise de Sementes: A amostra mdia pesou ...g [1].
Antes da retirada das amostras de trabalho, a amostra
mdia deve ser cuidadosa e rapidamente homogeneizada,
reduzindo-se ao mximo a exposio das sementes ao ambiente, podendo ser feita da seguinte forma [1]:
Misturar a amostra em seu recipiente com uma
colher, ou;
Colocar a abertura do recipiente original contra a
abertura de um recipiente similar e despejar a semente de
um para o outro.
Devem ser retiradas, no mnimo, trs pores de
diferentes pontos e combinados para formar a amostra de
trabalho de tamanho requerido;
O peso da amostra dever ser anotado em espao
especfico no boletim de anlise. Os recipientes devem ser
abertos no momento do incio do teste. Essas preocupaes so necessrias a fim de que o grau de umidade
das sementes se conserve praticamente inalterado at a
ocasio da sua determinao em laboratrio.
A determinao deve ser realizada em duplicata,
isto , com duas amostras de trabalho, sendo estas retiradas independentemente da amostra mdia, colocadas em
recipientes secos, com tampa e previamente pesados [1].
Para os mtodos de estufa, o peso requerido depender do dimetro do recipiente usado (Tabela 1).
46
Tabela 1. Peso da amostra de trabalho requerido de acordo com o dimetro do

recipiente.
Dimetro do recipiente (cm)
Peso da amostra de trabalho (g)
5-8
4, 5 0,5
10,0 1,0
Para sementes grandes de espcies florestais que

necessitam de corte, um tamanho diferente de amostra de
trabalho pode ser necessrio. Para sementes cortadas, a
amostra deve ser de tamanho suficiente para a retirada de
duas repeties, onde cada uma tenha peso aproximado
de cinco sementes intactas.
A pesagem das amostras de trabalho ou subamostras a serem utilizadas e a respectiva anotao desses
pesos so suficientes para que se considere cumprida a
recomendao de um incio imediato do teste. Uma vez
registrados os pesos iniciais das amostras, qualquer alterao que posteriormente venha a ocorrer na umidade das
sementes no ter, em curto prazo, maior influncia sobre
os resultados [1].
4.5.3 Moagem
A moagem ou de corte recomendada para sementes grandes (equivalentes a menos de 5.000 unidades
por quilograma de sementes puras ou ao peso individual
superior a 0,2 g) de espcies arbreas e arbustivas, e para
sementes com tegumento que impedem a perda de gua,
a menos que seu contedo em leo torne difcil esta operao ou sujeitas a ganhar peso pela oxidao do material
modo. Essa preparao visa assegurar que as amostras
sequem mais rpida e uniformemente do que se fossem
constitudas por sementes inteiras. A moagem deve ser
feita numa poro da amostra mdia, antes da obteno
das duas amostras [1].
As sementes de leguminosas e espcies florestais
exigem uma textura mais grossa, no mnimo, 50% do ma-
47
Captulo 4
terial modo deve passar atravs de peneira de malha de

4,00 mm, e no mais do que 55% deve passar atravs de
uma peneira com abertura de 2.00mm. O moinho deve
ser ajustado para se obter partculas do tamanho requerido [1].
Para estabelecer a textura indicada, uma pequena
quantidade da amostra moda e a seguir rejeitada. Uma
vez estabelecida textura requerida, tritura-se uma quantidade ligeiramente superior exigida para o teste. O
tempo total do processo de moagem no deve exceder a
dois minutos [1].
4.5.4 Corte
O corte indicado quando no for possvel realizar
a moagem, sendo recomendado para as sementes grandes
de espcies florestais (peso de mil sementes > 200g) e
sementes com tegumento muito duro, como de Fabaceae
(Leguminosae), e/ou sementes com alto teor de leo.
Devem ser cortados em pequenos pedaos, menores do
que 7,0mm.
O corte deve ser realizado em duas amostras, cada
uma de peso aproximado ao de cinco sementes intactas,
retirada da amostra mdia.
As amostras devem ser rapidamente cortadas, recombinadas e misturadas com uma colher, antes de serem retiradas as duas repeties, as quais devem ser colocadas em
recipientes previamente pesados. A exposio da amostra ao
ambiente no deve ser superior a quatro minutos.
4.5.5 Pr-secagem
Deve-se realizar a pr-secagem nos testes com
moagem, em sementes com grau de umidade acima de
17%. Sementes de espcies que apresentam dificuldade
de moagem devero sofrer tambm pr-secagem, mesmo
quando mais secas do que 17% [1].
Retiram-se da amostra mdia duas amostras, cada
uma com o peso suficiente para atingir, depois de prsecas, o peso mnimo indicado nas RAS. Essas amostras
48
so pesadas e colocadas em recipientes de peso previamente conhecidas e secas para reduzir o grau de umidade
a um valor que permita a moagem satisfatria [1].
Depois de pr-secas as amostras so repesadas em
seus recipientes para determinar a perda de peso e a
seguir so modas separadamente e o material sujeito aos
procedimentos prescritos no subitem 4.4 (Mtodos em
estufa) [1].
Exceto para o caso descrito a seguir, as amostras,
dependendo do grau umidade, devem ser pr-secas em
uma estufa de temperatura constante de 130C por 5 a 10
minutos, e depois, expostas ao ambiente do laboratrio
por aproximadamente duas horas [1].
Para o caso de espcies com grau de umidade
acima de 30%, as amostras devem ser secas durante o
perodo de 12 horas, sobre uma estufa aquecida [1].
A pr-secagem no obrigatria para as sementes
de espcies florestais em que o corte indicado.
4.6 Equipamentos
Para determinao do grau de umidade so
necessrios [5]:
Estufa dotada de sistema eltrico de aquecimento,
controle termosttico, isolamento eficiente, com temperatura uniforme em todo o seu interior e a temperatura especificada ao nvel da prateleira, equipada com prateleiras
removveis, perfuradas onde so colocados os recipientes
que contem amostras e, com sistema de circulao de ar
forado. A capacidade de aquecimento deve ser tal que
aps o pr-aquecimento temperatura requerida, seguido
pela abertura e colocao dos recipientes, a estufa alcance
a temperatura indicada em at 30 minutos;
Balana de pesagem rpida e com preciso de
0,001g;
Recipientes de metal no corrosvel ou de vidro
com aproximadamente 0,5mm de espessura, com tampa
49
Captulo 4
bem ajustada, para evitar trocas de vapor d'gua das sementes com o ar exterior durante a preparao e as pesagens; tanto o recipiente como a sua tampa devem ser
identificados com o mesmo nmero e mantidos limpos e
secos e, quando necessrio, seque-os por 30 minutos a
105C, ou por procedimento similar e resfrie-os em
dessecador. Os recipientes devem ter capacidade efetiva
para que a amostra de trabalho seja distribuda de modo
a no ultrapassar 0,3g/cm;
Dessecadores com suporte de metal espesso ou
porcelana, contendo slica-gel, cloreto de clcio, pentxido
de fsforo ou alumina ativa; usados como desidratante. A
slica-gel mais utilizada; quando seca tem colorao azul
e, quando mida, rosa;
Bandejas, luvas, termmetros escala de 0,1 de intervalo, pinas, ferramentas de corte como bisturi, tesoura
de poda, alicate, ou qualquer outro instrumento de corte
adequado;
Moinho ajustvel, de material no corrosivo e que
no absorva gua, ser de fcil limpeza, permitir que a
moagem seja executada de forma rpida e uniforme, sem
o desenvolvimento de calor e, tanto quanto possvel, sem
contato com o ambiente externo ; ser ajustvel, de
maneira a obter as partculas das dimenses indicadas;
Peneiras de arame no corrosivo, com abertura de
malhas 0,50mm; 1,00mm; 2,00mm e 4,00 mm ;
Boletim de Anlise especfico.
4.7 Clculo para Determinao do Grau de

Umidade
O grau de umidade calculado atravs da seguinte
expresso e expresso em porcentagem [1]:
50
%de Umidade (U) = 100 (P p)

P-t
onde:
P = peso inicial, peso do recipiente e sua tampa mais o
peso da semente mida;
p = peso inicial, peso do recipiente e sua tampa mais o
peso da semente seca;
t = tara, peso do recipiente com sua tampa.
A pesagem deve ser em gramas, com trs casas
decimais. O resultado final obtido atravs da mdia
aritmtica das porcentagens de cada uma das repeties
retiradas da amostra de trabalho[1].
A aproximao dos resultados, quando necessria,
deve ser feita depois de calculada a mdia das repeties.
Toda frao inferior a 0,05 deve ser desprezada. O resultado dessa determinao deve ser informado no campo
destinado a Outras Determinaes do Boletim de
Anlise de Sementes em porcentagem e com uma casa
decimal[1].
Os resultados tambm podem ser expressos em relao ao peso das sementes secas[1]:
%U(bs)= Pu Ps x 100
Ps T
Para a converso dos valores de uma base para a
outra, utiliza-se as seguintes expresses[5]:
U(bu)=
U(bs)
U(bs)= U(bu)
100 + U(bs)
100 + U(bu)
onde:
U(bu) = porcentagem de gua calculada em funo do
peso das sementes midas e
U(bs) = porcentagem em funo do peso das sementes
secas.
51
Captulo 4
4.8 Tolerncias
A diferena entre os resultados das duas amostras
(repeties), no deve exceder de 0,5%. Se essa diferena
for maior, a determinao deve ser repetida com outras
amostras de trabalho, novamente coletas para este fim. Se
as repeties desta segunda determinao tambm estiverem fora da tolerncia, verifique se a mdia dos resultados dos dois testes est dentro da tolerncia de 0,5%. Se
estiver, informe o resultado mdio [1].
Para sementes de espcies florestais e arbustivas,
onde a variao normalmente excede 0,5%, a amplitude
de 0,3% a 2,5% permitida e relacionada ao tamanho da
semente e ao grau de umidade inicial (Tabela 2). Essa
tabela fornece as diferenas mximas toleradas entre os
resultados de duas repeties. usada de acordo com a
mdia inicial do grau de umidade da amostra e a diferena
tolerada para cada tamanho da semente [1].
Tabela 2. Nveis de Tolerncia para diferenas entre as repeties na determinao do grau de umidade em sementes florestais e arbustivas.
Tamanho da
semente
Nmeros de
sementes
puras/kg
Grau de
umidade
(%)
Tolerncia
(%)
Sementes pequenas
> 5000
< 12
0,6
Sementes pequenas
> 5000
> 12
0,8
Sementes grandes
< 5000
< 12
0,7
Sementes grandes
< 5000
12-25
1,1
Sementes grandes
< 5000
> 25
2,8
Classe
Tamanho da semente
Mdia do grau de umidade (%)

<12
12 a 25
>25
Sementes pequenas *
0,3
0,5
0,6
Sementes pequenas**
0,4
0,8
2,,8
* Sementes pequenas so aquelas com um tamanho tal que o peso de mil sementes menor do que 200g
52
** Sementes grandes so aquelas com um tamanho tal que o peso de mil sementes maior do que 200g
Fonte: BONNER, F.T. (1984).
4.9 Referncias
1
BRASIL. Ministrio da Agricultura e Reforma
Agrria. Regras para anlise de sementes. Braslia: 2009.
365p.
2
BONNER, F.T. Tolerance limits in measurement of
tree moisture. Seed Science and Technology, Zurich, v.12,
p.789-794, 1984.
3
FIGLIOLIA, M.B.; OLIVEIRA, E.C; PIA-RODRIGUES, F.C.M. Anlise de Pureza. In: AGUIAR, I.B.;
p.145-148.
4
GENTIL, D.F.O.; FERREIRA, S.A.N. Preparao das
subsamostras, temperatura e perodo de secagem na determinao do grau de umidade de sementes de camucamu (Myrciaria dubia (H.B.K.) McVaugh). Revista
Brasileira de Sementes, vol. 24, no 2, p.62-69, 2002.
5
MARCOS FILHO, J; CICERO, S.M.; SILVA, W.R.
FEALQ, 1987. 230p.
6
PIA-RODRIGUES, F.C.M; FIGLIOLIA, M.B.;
PEIXOTO, M.C. Teste de Qualidade In: BORGUETTI, et al.
(orgs.), Germinao do bsico ao aplicado. So Paulo,
Ed. ARTMED, 2004.
7
SILVA, E.M.N, Determinao de Umidade. In: PIARODRIGUES, F.C.M.(coord.) Manual de anlise de sementes
florestais. Campinas: Fundao Cargill, 1988. p.61-69
53
Captulo 5
Teste de germinao
Ferraz, I.D.K., Calvi, G.P.
5.1 Introduo
Normalmente, fcil distinguir entre uma planta
viva ou morta. Entretanto, esse no o caso em sementes.
Para avaliar a vida das sementes existem procedimentos
especficos: o teste direto avalia a germinabilidade das sementes e os testes indiretos avaliam a viabilidade das mesmas. Em geral, deve ser dada sempre preferncia a um
teste direto de germinao. Porm, s vezes este teste
pode ser impraticvel; neste caso, um dos testes indiretos
pode ser aplicado.
Precisa-se ter em mente que um teste de germinao no laboratrio deve refletir o potencial mximo de
germinao de um lote de sementes sob condies ambientais ideais. Portanto, o resultado nem sempre reflete a
emergncia no viveiro ou uma previso do resultado no
viveiro. Em geral, um teste de germinao no laboratrio
uma superestimao do resultado no viveiro e um teste
de viabilidade uma superestimao do resultado do teste
de germinao.
Os resultados de um teste de germinao devem
Captulo 5
ser independentes da pessoa de execuo e devem ter

replicabilidade, ou seja, um teste subsequente, do mesmo
lote de sementes, deve dar o mesmo resultado, dentro de
limites estatisticamente definidos. Para tal, h a necessidade de adoo de procedimentos padronizados que so
as Regras para Anlises de Sementes (RAS) [18]. O uso
de RAS, aplicando a mesma metodologia em diferentes
laboratrios, fundamental para a avaliao da qualidade
de um lote de sementes para fins comerciais. O teste deve
refletir a qualidade das sementes e no a qualidade das
condies do teste. Assim, as condies do teste devem
corresponder s exigncias das sementes em termos das
condies ambientais como temperatura, substrato, umidade e luz.
Visando subsidiar o comrcio de sementes para a
propagao das espcies, o teste de germinao avalia a aptido das sementes de formar uma plntula normal sob
condies favorveis de campo. A anlise permite ao produtor estimar a quantidade de sementes necessria para a
semeadura e avaliar o investimento econmico pela comparao de lotes de sementes, com diferenas na qualidade.
A validade dos resultados dos testes de germinao
, s vezes, questionada, pois, no laboratrio, as
condies so controladas, a fim de possibilitar a mxima
capacidade germinativa das sementes. Como mencionado
acima, a germinao no laboratrio nem sempre igual ao
desempenho no campo, onde as condies ambientais
no so controladas e, s vezes, adversas ao processo de
germinao e desenvolvimento do vegetal. No entanto, as
discrepncias entre os resultados do laboratrio e campo
podem ser reduzidas, quando as sementes apresentam
alto vigor.
As RAS apresentam as especificaes para a germinao de 276 espcies florestais e arbustivas. Muitas
no so nativas no Brasil ou na Amrica do Sul, so originrias da Amrica do Norte, Europa, frica ou Austrlia,
como Pinus, Eucaliptus, Tectona, Alnus, etc. Frente alta
biodiversidade das florestas neotropicais, este nmero
56
Teste de germinao
muito pequeno. Porm, para que uma nova espcie possa

ser includa nas RAS h um longo protocolo a ser seguido.
Os resultados cientficos devem ser confirmados
com sementes de vrias procedncias e diferenas no
vigor; em seguida, a metodologia selecionada deve ser
validada entre os laboratrios credenciados, antes que as
recomendaes possam ser includas nas RAS. Os estudos
na tecnologia de sementes das espcies florestais nativas
so ainda muito incipientes, em comparao aos das espcies de importncia agrcola, que j foram estudadas e
domesticadas por dcadas ou at sculos.
Seguem alguns pontos que so particulares s espcies florestais, diferenciando-as das espcies agrcolas.
A diversidade de espcies arbreas muito alta.
No se conhece o nmero exato de espcies florestais no
Brasil. Estima-se que somente na regio amaznica existem num total entre 4.000 a 5.000 espcies de rvores
[66]. Somente em uma rea de 500 ha foram identificadas
1.077 espcies de rvores nas proximidades de Manaus
[65]. Em outros 70 ha, na mesma regio, foram registradas
698 espcies arbreas com DAP igual ou acima de 10 cm
[64]. Devido a esta alta diversidade, existem poucas informaes sobre cada espcie. Um dos maiores problemas
, ainda, a correta identificao botnica das rvores. s
vezes os frutos, sementes e mudas nem foram ainda adequadamente descritos. A produo de sementes de muitas
rvores irregular e no anual. Muitas espcies apresentam sementes grandes e sensveis ao dessecamento (recalcitrante) [24]. As sementes de espcies florestais
podem apresentar estruturas especficas de proteo e/ou
disperso que podem dificultar a coleta e aumentar o
tempo de germinao. As rvores tm um ciclo de vida
longo (dcadas e at centenas de anos) e podem demorar
anos at a primeira frutificao. Desta forma, a produo
em nmero de sementes geralmente pequeno e, consequentemente, o lote das sementes. Dentro das espcies
nativas, existem espcies raras e/ou ameaadas de extino que exigem procedimentos diferenciados, devido o
57
Captulo 5
alto valor ecolgico das sementes.

Assim, nem todos os procedimentos geralmente
aplicados s sementes agrcolas podem ser
transferidos diretamente s espcies florestais.
Neste captulo, os procedimentos mais importantes para a avaliao da germinao das sementes florestais foram extrados das RAS.
Quando considerado oportuno, os procedimentos foram comentados e ilustrados com exemplos disponveis, na maioria das vezes de
espcies florestais da Amaznia. O intuito dos
autores foi facilitar a aplicao das RAS para iniciantes em avaliao de sementes florestais.
Desta forma, este captulo se entende como um
complemento s RAS e no dispensa sua consulta.
5.2 DEFINIES
As RAS apresentam definies bsicas de termos
utilizados para os testes de germinao, entende-se por:
5.2.1. Germinao: a emergncia e desenvolvimento das
estruturas essenciais do embrio, demonstrando sua aptido para produzir uma planta normal sob condies favorveis de campo.
5.2.2. Porcentagem de germinao: corresponde proporo do nmero de sementes que produziu plntulas
classificadas como normais obtidas sob as condies e
perodos especificados para cada espcie.
5.2.3. Estruturas essenciais: So estruturas que permitiro que uma plntula possa continuar seu desenvolvimento at tornar-se uma planta normal. Nestas, so
consideradas a avaliao do sistema radicular (razes
primria, secundrias e, em alguns gneros, razes semi-
58
Teste de germinao
nais) e da parte area (hipoctilo e/ou epictilo, cotildones, primeiras folhas e gema terminal). O detalhamento
da avaliao do sistema radicular e da parte area varia
para os diferentes tipos de germinao. Geralmente,
avaliada a plntula como toda e, em seguida, cada estrutura. Uma breve discusso sobre tipos de germinao encontram se neste captulo no item 5.5.
5.2.4. Plntulas normais: so aquelas que apresentam
potencial para continuar seu desenvolvimento e dar
origem a plantas normais, quando desenvolvidas sob
condies favorveis. Para serem classificadas como normais, as plntulas devem estar de acordo com uma das
seguintes categorias:
Plntulas intactas devem apresentar todas as suas
estruturas essenciais bem desenvolvidas, completas, proporcionais e sadias. Dependendo da espcie podem ser encontradas diferentes combinaes das estruturas
essenciais.
Plntulas com pequenos defeitos podem ser includas nas plntulas normais, desde que mostrem um desenvolvimento satisfatrio e equilibrado, quando
comparadas com uma plntula intacta do mesmo teste.
Entende-se por pequenos defeitos:
a) No sistema radicular: raiz primria com
dano limitado ou com pequeno retardamento no crescimento; raiz primria deficiente, mas com razes secundrias suficientemente bem desenvolvidas;
b) Nas estruturas areas: hipoctilo,
epictilo ou mesoctilo com danos limitados; cotildones
e primeiras folhas com danos limitados - metade ou mais
da rea total do tecido deve funcionar normalmente (regra
dos 50 %); folhas primrias com tamanho reduzido a, no
mnimo, um quarto do tamanho normal.
Plntulas com infeco secundria podem ser includas nas plntulas normais mesmo quando seriamente
deterioradas devido presena de fungos ou bactrias, se
ficar evidente que a prpria semente no a fonte da in-
59
Captulo 5
feco e se possvel verificar que todas as estruturas

essenciais esto presentes.
A morfologia da plntula deve ser bem conhecida
para definir qual estrutura essencial ou no. Vrias plntulas de espcies florestais mostram alta taxa de regenerao, mesmo quando danificadas; por exemplo, em
Eugenia stipitata com germinao hipgea (H-C-R),
quando h ferimento do meristema apical, observa-se alta
regenerao do eixo nas axilas dos cotildones e catfilos.
A relao entre a parte area e a raiz pode variar,
dependendo da espcie, tornando-se difcil julgar um desenvolvimento equilibrado sem conhecer as caractersticas da espcie; por exemplo, Schizolobium amazonicum
apresenta um crescimento da raiz muito reduzido em
comparao da parte area. Difcil tambm julgar at
que estdio do desenvolvimento as plntulas devem ser
acompanhadas para avaliar o desenvolvimento normal;
por exemplo, em Hevea guianensis, o epictilo pode apresentar entre 14 a 29 cm, antes da primeira folha.
5.2.5. Plntulas anormais: so aquelas que no mostram
potencial para continuar seu desenvolvimento e dar
origem a plantas normais, mesmo crescendo em
condies favorveis. As plntulas anormais podem ser
classificadas em:
Plntulas danificadas apresentam qualquer uma
das suas estruturas essenciais ausentes ou to danificadas
que no possa ocorrer desenvolvimento proporcional;
Plntulas deformadas apresentam desenvolvimento
fraco, com distrbios fisiolgicos, ou com estruturas
essenciais deformadas ou desproporcionais;
Plntulas deterioradas apresentam quaisquer
uma de suas estruturas essncias infectadas ou deterioradas, como resultado de uma infeco primria (originada da prpria semente).
Nas RAS pode ser encontrada uma srie de caractersticas que definem a anormalidade de uma plntula,
dentre as quais pode ser citadas:
60
Teste de germinao
a) sistema radicular atrofiado, ausente, retorcido, desproporcional em relao s outras estruturas,

preso dentro do tegumento, com geotropismo negativo;
b) parte area deformada, quebrada,
ausente, deteriorada devido a uma infeco primria.
Nas avaliaes da germinao, devem ser desconsideradas anomalias causadas pelo mtodo de germinao
como, por exemplo, raiz com crescimento horizontal, devido a germinao sobre papel; eixo curvado, causado
pela altura da caixa de germinao; estiolamento, devido
a insuficincia de luz, entre outras.
No ponto de vista dos autores, os mtodos de germinao so limitados, principalmente para sementes
grandes, pois estas necessitam maior espao, dificultando
um desenvolvimento normal no laboratrio. Uma srie de
deficincias fsicas das plntulas em espcies agrcolas
pode ser causada pela colheita e processamento mecnico
das sementes ou por ao de defensivos agrcolas. A frequncia destes danos deve ser bastante reduzida em essncias florestais nativas, pois estas sementes so,
geralmente, coletadas e processadas ainda de maneira
manual. Alm disso, anormalidades na fase de plntulas
em espcies agrcolas, que possuem ciclo de vida curto,
podem comprometer o seu desenvolvimento. Desta
forma, vale uma reflexo se estes mesmos defeitos podem
prejudicar o desenvolvimento de espcies florestais que
teriam anos e dcadas para se recuperar de um dano nos
cotildones ou nas primeiras folhas. Considera-se mais
importante na avaliao de essncias florestais, a observao da integridade dos meristemas (apical e radicular)
e do eixo que possibilite o desenvolvimento.
5.2.6. Unidade - sementes mltiplas: so sementes que
podem produzir mais que uma plntula no teste de germinao. uma caracterstica da espcie e pode ocorrer
quando:
a) a unidade de semeadura contm mais que uma
semente verdadeira;
61
Captulo 5
b) uma semente verdadeira contm mais que um

embrio;
c) os embries esto unidos.
Para efeito do teste de germinao, quando uma
semente produz mais que uma plntula normal, somente
uma plntula contada para a determinao da porcentagem de germinao. Caso haja interesse, pode-se determinar o nmero de plntulas formadas por cem unidades
ou o nmero de sementes que produziram uma, duas ou
mais plntulas normais.
H uma srie de espcies florestais que contm
mais que uma semente verdadeira na unidade de semeadura, como por exemplo Byrsonima chrysophylla
(murici [20]. Mais que um embrio foi observado em sementes de Iryanthera juruensis (ucubarana-pun [20].
Carapa procera (andirobinha) geralmente apresenta sementes poliembrinicas, nunca observado em C. guianensis (andiroba) [24]. Algumas sementes quando cortadas
em duas ou mais partes, podem produzir uma plntula
normal de cada um das fraes, como por exemplo, Eugenia stipitata [9]. Outras podem produzir caules secundrios nas axilas dos cotildones, principalmente
quando um desenvolvimento normal impedido devido
falta de espao vertical no germinador, sendo mais frequente em plntulas com germinao hipgea, como por
exemplo, Carapa guianensis. Estes caules no devem ser
confundidos com plntulas de sementes mltiplas, pois
apresentam somente uma raiz para vrias partes areas.
5.2.7. Sementes no germinadas: so as sementes que,
no final do teste de germinao, no germinaram devido
a diferentes causas. Podem ser classificadas como:
Sementes duras no absorvem gua e no intumescem e, no final do teste de germinao, continuam
duras como no incio. Esse fenmeno causado pela impermeabilidade do tegumento gua, sendo considerado
um tipo de dormncia.
Ao verificar a presena de sementes duras no final
62
Teste de germinao
do teste de germinao, elas devem ser contadas, anotadas na ficha de germinao e permanecer no substrato
por um perodo adicional de at sete dias, juntamente
com as sementes que, nessa ocasio, ainda se encontrem
somente intumescidas e/ou em estado inicial de germinao. As plntulas normais encontradas no fim do
perodo adicional so includas na porcentagem de germinao, e as sementes que permaneceram duras so informadas separadamente.
Quando requerido pelo interessado, o laboratrio
poder aplicar um tratamento especfico para superar a
dormncia das sementes. Neste caso, so conduzidos
testes com e sem pr-tratamento com a mesma amostra,
e os resultados so indicados no Boletim de Anlise.
Sementes dormentes embora aparentemente
viveis, no germinam, mesmo quando colocadas nas
condies especificadas para a espcie em teste. Podem
ser capazes de absorver gua e intumescer, mas no germinam e nem apodrecem at o final do teste.
importante ressaltar que nem todas as sementes
classificadas como dormentes ao final do teste de germinao so viveis. A viabilidade dessas sementes pode ser
verificada por testes indiretos. O mais comum a colorao com tetrazlio, pois somente tecidos vivos se tornam vermelhos. Os tecidos mortos continuam na cor
original geralmente branco ou marrom. As RAS possuem
um captulo especialmente para detalhar os procedimentos para o teste de tetrazlio.
Portanto, as RAS distinguem as sementes com
dormncia devido a impermeabilidade do tegumento
(chamadas sementes duras) das sementes com outros
tipos de dormncia (chamadas sementes dormentes).
Esta diferenciao baseada na praticidade, pois,
quando as sementes apresentam outros tipos de dormncia h uma gama de possibilidades para sua superao.
Nas RAS so listadas, alm das recomendaes para o
teste de germinao, como temperatura, substrato e
perodo para primeira contagem e contagem final, in-
63
Captulo 5
strues especficas para a superao da dormncia para

todas as espcies listadas.
Sementes mortas no germinaram, no esto
duras, nem dormentes e, ao final do teste, geralmente
apresentam-se amolecidas e atacadas por microrganismos.
Outras categorias de sementes no germinadas
podem ser sementes vazias, sementes sem embrio ou sementes danificadas por insetos.
5.3. EQUIPAMENTOS PARA GERMINAO

As RAS no determinam quais os tipos de equipamentos devem ser usados durante os testes de germinao, a escolha depende da estrutura do laboratrio.
Porm, para que os resultados reflitam o potencial mximo de germinao das sementes, as condies ambientais devem ser mantidas, durante o teste, o mais prximo
do timo possvel. Para tal, necessrio o uso de equipamentos adequados, em bom estado de conservao e
funcionamento.
As RAS descrevem como equipamentos para os
testes de germinao, apenas germinadores e contadores
de sementes para a semeadura. Os germinadores so bastante variveis quanto ao tamanho, sistema empregado
para a acomodao das amostras, dispositivos para o controle de temperatura, luz, umidade relativa do ar interno
e de outros detalhes. Os germinadores mais usados se enquadram em um dos tipos a seguir:
Cmara de germinao (germinador) consiste,
em linhas gerais, de uma cmara com paredes duplas,
adequadamente isoladas a fim de diminuir as variaes
internas de temperatura, e, so equipados com um conjunto de bandejas onde as amostras podem ser colocadas
para germinar.
Existem germinadores de cmara mais simples que
possuem apenas o aquecimento, assim somente tempe-
64
Teste de germinao
raturas iguais ou superior a do ambiente podem ser reguladas. Modelos mais modernos possibilitam tambm a refrigerao; desta forma, a temperatura pode ser ajustada
abaixo da do ambiente. As RAS prescrevem que a variao
de temperatura no interior do equipamento no deve ser
maior que 2 C, em cada perodo de 24 horas.
Hoje em dia, muitos equipamentos possuem um
timer para programar o fotoperodo (perodo de luz e escuro) e um timer para programar o termoperodo (alternncia de temperatura) simulando as condies
naturais. Na programao, deve-se observar que a temperatura baixa sempre coincida com o perodo escuro e a
temperatura alta com o de luz. Quando a luz for indicada
para o teste de germinao, deve-se oferecer, no mnimo,
8 horas de luz. Nos casos de espcies que exigem testes
de germinao em temperaturas alternadas, e, se o
equipamento disponvel no for capaz de proporcionar
tais condies, as amostras devem ser transferidas diariamente de um germinador para outro, regulados a temperaturas diferentes, para conseguir o termoperodo.
Existem equipamentos que permitem o controle da
umidade no interior da cmara. Caso o modelo empregado no tenha esta funo, pode ser necessrio que os
substratos, contendo as sementes, sejam envolvidos por
materiais resistentes a troca do vapor dgua ou mantidas
em recipientes para evitar dessecao excessiva.
Sala de germinao os princpios de construo
e funcionamento so semelhantes ao de cmara de germinao, porm suficientemente grande para permitir a
entrada de pessoas. As amostras so colocadas em
prateleiras laterais ou sobre carrinhos. Devem ser instalados ventiladores para reduzir a possibilidade de estratificao da temperatura, bem como umidificadores para
manter um alto grau de umidade relativa, quando os
testes no forem colocados em recipientes prova de umidade.
Combinao de cmaras e salas de germinao a
sala, construda com isolamento trmico, mantida, por
65
Captulo 5
meio de um sistema de refrigerao, a uma temperatura

constante. Nesta so colocados germinadores tipo simples, dotados apenas com aquecimento e regulados individualmente temperatura desejada. A temperatura da
sala deve corresponder a mais baixa usada nos testes de
germinao. Tanto temperaturas constantes como alternadas podem ser obtidas com esta combinao.
Contador de sementes - possibilita a contagem das
sementes para a instalao dos testes de germinao. Os
contadores depositam as sementes acima do substrato de
forma uniforme e equidistante. Os equipamentos possuem placas perfuradas e podem ser acoplados a um sistema de suco (contadores a vcuo), com o qual as
sementes so sugadas nas perfuraes. Assim, pode-se
fazer a semeadura de milhares de sementes em pouco
tempo, sem a necessidade de cont-las individualmente.
Maiores detalhes dos contadores de sementes podem ser
obtidos nas RAS.
As RAS prescrevem que, sempre que possvel,
devem ser utilizadas contadores de sementes, para facilitar a operao e garantir a seleo ao acaso das sementes.
Entretanto, devido grande biodiversidade e grande variao em tamanho e forma, necessrio a criao de
modelos exclusivos para a maioria das espcies. Outro
assim, o uso de contadores de sementes invivel para espcies com grande variao no tamanho e em sementes
muito grandes. Por exemplo, Lecythis barnebyi possui sementes com comprimento mdio de 3,8 cm variando de
2,3 a 8,8 cm [20]; Scleronema micranthum tem sementes
com massa mdia de 89 g, variando de 31 a 220g (outros
exemplos podem ser encontradas na Tabela 5.1).
5.3.1. Condies sanitrias dos materiais
e equipamentos
O resultado do teste de germinao deve refletir a
qualidade das sementes submetidas; desta forma, a germinao no pode ser influenciada negativamente por fatores externos, incluindo a contaminao com fungos e
66
Teste de germinao
bactrias. Assim, todos os utenslios usados nos testes de

germinao devem ser conservados limpos e os substratos, depois de esterilizados ou descontaminados,
devem ser acondicionados em locais secos e protegidos
de p. Os utenslios reutilizveis, como as placas de petri,
caixas plsticas, gerbox e recipientes de alumnio devem
ser cuidadosamente lavados com gua e sabo e secados
aps o uso.
Os germinadores devem merecer especial ateno,
devendo ser lavados com gua e sabo e desinfetados periodicamente. A desinfestao pode ser feita com lcool a
70%, Lysoform, paraformol, glutaraldeido e outros,
cada um deles empregado na dosagem recomendada na
embalagem.
Tambm deve ser levada em considerao a
condio sanitria das sementes utilizadas no teste. Embora as RAS no recomendem nenhum tratamento antifngico especfico, quando um fungicida for usado, o
nome do produto qumico, a porcentagem de ingrediente(s) ativo(s) e sua(s) dosagem(ns) dever(o) ser informado(s) no Boletim de Anlise de Sementes.
Rotineiramente, em algumas espcies florestais
feita a assepsia das sementes com soluo comercial de
NaClO (hipoclorito de sdio) a 1 ou 2 %. Para tal, 1 mL
ou 2 mL, respectivamente, da soluo comercial de
hipoclorito de sdio so dissolvidos em 100 mL de gua.
As sementes, depois de imergidas na soluo, so agitadas
cuidadosamente e deixadas em repouso por dois minutos.
Em seguida, utiliza-se uma peneira para lavar as sementes
em gua corrente e por ltimo enxgue com gua destilada. As sementes so dispostas sobre papel absorvente
para secagem. A assepsia com hipoclorito de sdio pode
causar efeitos negativos na germinao, principalmente
quando aplicada em concentraes maiores. Portanto, recomenda-se somente o uso deste produto aps avaliao
prvia.
67
Captulo 5
5.4. INSTALAO DO TESTE DE

GERMINAO
Como princpio bsico, os testes de germinao
devem ser conduzidos sob condies ideais de temperatura, luz e umidade, de modo a possibilitar uma germinao uniforme, rpida e completa da amostra de
sementes da espcie em questo, e possibilitar o desenvolvimento das plntulas at que possam ser classificadas
como normais ou anormais. Os testes devem ser
padronizados para que os resultados de um mesmo lote
possam ser reproduzidos e comparados entre laboratrios,
dentro dos limites tolerados pelas RAS (ver tabelas de
tolerncia). Nas RAS encontra-se uma longa listagem, que
ocupa mais que 40 pginas, com instrues para a execuo dos testes de germinao das sementes listadas.
5.4.1. Amostra de trabalho e tolerncias
dentro e entre testes
As sementes utilizadas no teste de germinao
devem ser tomadas, ao acaso, da poro de Semente
pura da anlise de pureza. O restante da amostra deve
ser conservado at o final do teste, para eventual necessidade de repetio.
As RAS exigem o uso de 400 sementes para a realizao do teste de germinao, usando quatro repeties
de 100 sementes ou, oito de 50, ou ainda 16 de 25. Por
outro lado, para algumas espcies, como as do gnero Tibouchina e Eucalyptus, que possuem sementes muito pequenas, as repeties para o teste de germinao podero
ser formadas por peso. As tabelas de tolerncia permitem
a comparao dos resultados dentro do teste, entre testes
ou com um padro estabelecido. As RAS permitem, na
avaliao do teste de germinao, utilizar 2,5 % de probabilidade para as espcies agrcolas e 1 % de probabilidade para sementes de espcies florestais, considerando
que a maior variabilidade natural contribui para o aumento da diferena entre resultados. Esta permisso ba-
68
Teste de germinao
seia-se no fato que, a tolerncia aumentada com a

diminuio da probabilidade.
A reduo do nmero de sementes por repetio,
traz, como conseqncia, a perda de preciso. No caso
especfico do teste de germinao, as tabelas de tolerncia
foram elaboradas para quatro repeties de 100 sementes.
Desta forma, quando se utiliza sub-repeties de 50 ou de
25 sementes, os resultados devem ser agrupados para formar quatro repeties de 100 sementes. Portanto, as
tabelas de tolerncia exigidas nas RAS no podem ser aplicadas, quando se utiliza um nmero menor de sementes
para o teste de germinao, como por exemplo, quatro
repeties de 25 sementes.
So disponveis nas RAS, referente ao teste de germinao, as seguintes tabelas, indicando as tolerncias
mximas admitidas para comparao de resultados:
das repeties do mesmo teste;
de amostras de trabalho obtidas da mesma ou
de diferentes amostras mdias do mesmo lote,
analisadas no mesmo laboratrio;
de amostras de trabalho obtidas da mesma ou
em diferentes laboratrios;
relativos a cada repetio do mesmo teste de
germinao (repeties por peso);
do teste de germinao ou de tetrazlio da
amostra com o padro estabelecido. (uso exclusivo pela fiscalizao, a partir de resultados de
anlises fiscais);
de dois testes de germinao realizados a partir
quando o resultado da segunda anlise pior
do que o resultado da primeira anlise, realizada no mesmo laboratrio ou em diferentes
laboratrios.
O cumprimento de utilizar 400 sementes para um
teste de germinao nem sempre possvel para sementes
florestais por principalmente trs motivos: o primeiro
69
Captulo 5
refere-se disponibilidade de sementes. Muitas espcies

florestais produzem uma pequena quantidade de sementes por ano que, dependendo do valor dessas sementes, no vivel a utilizao de 400 sementes para o
teste de germinao. O segundo motivo est relacionado
ao tamanho das sementes. Muitas espcies florestais possuem sementes muito grandes (Tabela 5.1) o que pode inviabilizar o teste de germinao por questes prticas
como, por exemplo, falta de espao nos germinadores ou
necessidade de caixas de germinao muito grandes. Por
exemplo, para sementes de Scleronema micranthum
(cardeiro), as 400 sementes pesariam 35,6 kg (Tabela 5.1).
Devido ao tamanho das sementes, sero
necessrias sub-repeties com 25 sementes cada. O recipiente de cada uma das 16 sub-repeties dever medir
42 x 42 cm, no mnimo. Necessariamente, a avaliao da
germinao das sementes desta espcie requer a reduo
do nmero de sementes. O terceiro refere-se a espcies
raras e/ou ameaadas de extino (Aniba rosaeodora,
pau-rosa) que exigem tambm procedimentos diferenciados, de preferncia no destrutivos. Como a reduo do
nmero de sementes para o teste de germinao no
prevista pelas RAS, h necessidade de rever esta possibilidade e adequar as tabelas de tolerncia.
5.4.2. Semeadura e espaamento
O espaamento entre as sementes no teste de germinao deve ser uniforme e suficiente para minimizar a
competio e contaminao entre as sementes e impedir,
ao mximo, o entrelaamento entre as plntulas. O espaamento mnimo depende do tamanho das sementes.
Nas RAS, recomendada uma distncia de 1,5 a 5,0 vezes
a largura ou o dimetro da semente. O espaamento adequado deve considerar tambm o aumento do volume das
sementes devido ao processo de embebio.
5.4.3. Substrato
A semeadura deve ser realizada em embalagens
70
Teste de germinao
contendo o substrato mais apropriado para as sementes a

serem testadas. O substrato tem funo de prover o ambiente de germinao das sementes e desenvolvimento das
plntulas. Os tipos de substratos mais utilizados, descritos
e prescritos nas RAS para as espcies listadas, so o papel
e a areia. Para espcies no listadas nas RAS, a escolha do
substrato deve levar em considerao aspectos morfolgicos das sementes (principalmente tamanho e formato),
suas exigncias em relao gua e a luz e, tambm, a facilidade que o substrato oferece no momento das avaliaes da germinao. A seguir, sero abordadas as
diferentes formas de utilizao dos substratos recomendados pelas RAS e os tipos de sementes para os quais so
mais adequados.
5.4.3.1. Papel: o papel comumente utilizado como substrato nos testes de germinao pode ser mais espesso (tipo
mata-borro) ou mais fino (tipo toalha ou de filtro). As
especificaes gerais do papel se encontram nas RAS,
assim como a descrio de testes biolgicos necessrios
para verificar a toxidade do substrato. A esterilizao do
papel, caso necessria, pode ser feita em autoclave a uma
atmosfera e 120 C por 30 minutos ou, alternativamente,
em estufa regulada a 105 C durante duas horas. Existem
as seguintes formas de semeadura no papel:
Sobre papel (SP): as sementes so colocadas para
germinar sobre duas ou mais folhas de papel que podem
ser colocadas em caixas de plstico incolor e transparente,
em placas de Petri ou diretamente sobre as bandejas do
germinador. Este substrato indicado para sementes pequenas, achatadas e exigentes a luz. No recomendado
para sementes redondas, pois estas podem ter dificuldade
na absoro de gua, deslizar no substrato prejudicando
o espaamento e as avaliaes.
Entre papel: as sementes so colocadas para germinar entre duas ou mais folhas de papel, sendo descritas
as seguintes variaes:
1) Entre papel (EP): as sementes so se-
71
Captulo 5
meadas acima de uma ou mais folhas de papel e cobertas

frouxamente com mais uma camada de papel. recomendado para sementes pequenas, que preferem ambientes
midos e no so sensveis luz;
2) Envelope: as sementes so colocadas em
envelopes de papel dobrados, podendo ser posicionados
na vertical ou horizontal dentro dos germinadores;
3) Rolo de Papel (RP): as sementes so
colocadas para germinar entre folhas de papel. As folhas
so enroladas e os rolos colocados no germinador, na
posio vertical ou horizontal. o mtodo mais recomendado para sementes de tamanho relativamente grande e
no sensveis luz, porm inconveniente para sementes
de germinao lenta.
Papel plissado (PP): as sementes so colocadas
para germinar entre folhas de papel plissado como uma
sanfona. Usualmente, so formadas pelo menos cinco
canaletas com cinco sementes cada. As folhas plissadas
so ento colocadas em caixas ou diretamente nas bandejas do germinador com, geralmente, uma folha de papel
lisa ao redor do papel plissado, para garantir condies
uniformes de umidade. Este mtodo mais indicado para
unidades de germinao ou sementes mltiplas.
5.4.3.2. Areia: usada como substrato, para confirmar a
avaliao de um teste de germinao com resultado duvidoso, quando as plntulas apresentarem sintomas fitotxicos ou quando recomendada nas RAS. Pode ser usada
em substituio ao papel, quando a avaliao de uma
amostra for impraticvel por excesso de infeco. Especificaes gerais e controle de qualidade do substrato areia
podem ser encontradas nas RAS. A areia pode ser lavada
e esterilizada antes de seu uso em autoclave a 1 atm e 120
C durante 60 minutos ou em estufa a 200 C por duas
horas. A areia pode ser reutilizada e, neste caso, deve ser
peneirada, lavada, secada e esterilizada antes da reutilizao. A areia utilizada em testes com sementes tratadas
quimicamente deve ser obrigatoriamente descartada.
72
Teste de germinao
A areia tem como inconveniente a desuniformidade na

reteno e distribuio da gua, uma vez que a gua tende
a se depositar na parte inferior do substrato. Desta forma,
a areia mida deve ser sempre revirada antes do uso, para
homogeneizar a umidade. especialmente indicada para
sementes grandes e globosas. Entretanto, estas necessitam
recipientes maiores, contendo muito areia, o que torna os
recipientes pesados, dificultando seu manuseio incluindo
a danificao das prateleiras dos germinadores.
A semeadura com areia pode ser feita de duas
maneiras:
Entre areia (EA): as sementes so colocadas sobre
uma camada uniforme de areia e cobertas com areia solta
de aproximadamente 1 cm. Este mtodo mais utilizado
para sementes grandes (maior que 2 cm), no exigentes
luz e de lenta germinao.
Sobre areia (SA): neste caso, as sementes so colocadas sobre uma camada uniforme de areia e comprimidas contra a superfcie da mesma. recomendada para
sementes exigentes em luz e para aquelas, cujas plntulas
no processo de germinao, no suportam resistncia
fsica como, por exemplo, Couratari sp. (tauari) e algumas
espcies do gnero Aspidosperma (carapanaba).
5.4.3.3. Solo: no recomendado pelas RAS nos testes de
rotina de germinao como substrato preferencial, devido
dificuldade de obter estoques padronizados. O solo pode
ser usado para avaliao em caso de fitotoxidez ou em
testes de vigor.
5.4.3.4. Vermiculita: a vermiculita expandida um produto industrializado, formado essencialmente por silicatos
hidratados de alumnio e magnsio. Por ser um produto
de origem mineral , portanto, inorgnico, sendo tambm
insolvel em bases e cidos fracos e solventes orgnicos,
apresenta ainda um pH praticamente neutro. Necessita,
para sua formao, um aquecimento (cerca de 800 C)
que promove a evaporao da gua e a expanso das
73
Captulo 5
partculas que se transformam em flocos sanfonados.

Cada floco expandido aprisiona ar inerte, o que confere
ao material excepcional leveza, principalmente quando
comparada com a areia.
Embora no mencionada nas RAS como substrato
para testes de germinao, a vermiculita amplamente
utilizada na produo de mudas de espcies florestais,
pois apresenta boa capacidade de absoro e reteno de
gua, promove boa aerao e possibilita o desenvolvimento adequado das plntulas. A vermiculita pode ser esterilizada antes do uso em autoclave ou descontaminada
em estufa. No mercado, possvel encontrar vermiculita
de diferentes granulometrias, sendo as mais finas indicadas para sementes menores e as mais grossas para sementes maiores. O substrato no adequado para
sementes muito pequenas, devido dificuldade de avaliao das sementes mortas e vazias ao final do teste de
germinao. Pode ser utilizada nas modalidades:
Entre vermiculita (EV): indicada para sementes de
tamanho mdio a grande de forma globosa, exigentes em
umidade do substrato e no exigentes a luz.
Sobre vermiculita (SV): indicada para sementes
exigentes em luz e para aquelas, cujas plntulas no
processo de germinao, no suportam resistncia fsica
como, por exemplo, Couratari sp. (tauari) e algumas espcies do gnero Aspidosperma (carapanaba).
5.4.4. gua
O fornecimento de gua condio essencial para
que as sementes iniciem a germinao e as plntulas se
desenvolvam normalmente. Sementes que reduziram no
final da maturao o seu teor de gua toleram, geralmente, um dessecamento adicional que possibilita o armazenamento; estas sementes so chamadas tolerantes
ao dessecamento ou ortodoxas. Quando entram em contato com gua, intumescem e aumentam seu volume
antes de germinar. De outro lado, as sementes sensveis ao
dessecamento ou recalcitrantes, no passam, no final da
74
Teste de germinao
maturao, por uma fase de dessecamento na planta-me.

Estas necessitam manter o seu teor de gua alto para no
perder a germinabilidade. Sementes recalcitrantes, quando
semeadas, normalmente no aumentam visualmente o
seu volume.
A embebio das sementes tolerantes ao dessecamento apresenta um padro tipicamente trifsico [15]. Na
primeira fase, observa-se o aumento do peso e, consequentemente, do volume. Esta fase ocorre em sementes
vivas e mortas devido um processo fsico. Nesta fase, a
velocidade de embebio est condicionada composio
qumica das sementes e a permeabilidade do tegumento,
alm da disponibilidade de gua. Na segunda fase, o peso
da semente se mantm estvel e, somente as sementes
vivas, apresentam atividade metablica. Os processos
biolgicos diferenciam esta fase da primeira. As sementes
mortas, aps a embebio na primeira fase, so atacadas
por microrganismos e apodrecem. A terceira fase inicia-se
com a protruso de uma parte do embrio, geralmente, a
raiz primria; entretanto, em sementes florestais j foram
observadas primeiramente a protruso de outras estruturas como o hipoctilo em Hevea sp. (seringueira) e
Carapa sp. (andiroba) ou a parte area em espcies com
germinao bipolar, exemplo Bertholletia excelsa (castanha-da-amaznia). Na terceira fase a plntula se desenvolve e, com o crescimento, observa-se aumento de peso.
A gua a ser empregada no teste de germinao tem suas
especificaes definidas pelas RAS. De maneira geral,
deve ser livre de impurezas orgnicas e inorgnicas e
apresentar pH de 6,0 a 7,5. Recomenda-se gua destilada,
caso a gua da torneira no atenda estas caractersticas.
Para maior controle da qualidade da gua, as RAS recomendam a realizao peridica da anlise da gua.
A quantidade inicial de gua no teste de germinao depende da natureza e da quantidade do substrato,
alm de exigncias especficas das sementes. Especialmente no uso de papel, deve ser evitado que se forme
uma pelcula de gua em torno das sementes, pois esse
75
Captulo 5
excesso restringe a aerao e prejudica a germinao. Durante todo o teste, o substrato deve estar suficientemente
mido. Se necessria, a adio subsequente de gua fica
a critrio do analista, mas deve ser evitada sempre que
possvel, uma vez que pode aumentar as variaes entre
as repeties e entre os testes. O ressecamento durante os
testes de germinao pode ser reduzido, mantendo os recipientes fechados ou a umidade relativa dentro do germinador alta (> 90 %). Caso o germinador utilizado no
possua sistema de controle da umidade interna, pode-se
colocar recipientes com gua no interior do equipamento
ou umidificadores. As RAS apresentam procedimentos
bsicos para determinar a quantidade de gua de acordo
com os diferentes tipos de substratos.
Substrato de papel para a maioria das sementes
recomenda-se adicionar uma quantidade de gua de duas
a trs vezes o peso do papel. Considerando que um litro
de gua pesa um quilograma, a quantidade de gua adicionada pode ser medida em volume. Por exemplo, para
100 g de papel, deve-se adicionar de 200 a 300 mL de
gua, que corresponde de 200 a 300 g de gua.
Substrato de areia a quantidade de gua depende da granulometria da areia e deve ser determinada
previamente visando padronizar os testes de rotina do laboratrio. Devem ser levadas em considerao as exigncias das sementes. Os seguintes exemplos so fornecidos
nas RAS: sementes de cereais (exceto as de milho) podem
ser semeadas em areia com umidade de 50% da sua capacidade de reteno; sementes grandes de Fabaceae e de
milho exigem areia umedecida a 60% da capacidade de
reteno.
Na determinao da capacidade de reteno da
areia recomenda-se, por exemplo, pesar 500 g da areia
seca e colocar em um filtro de papel, tipo coador de caf
comercial. Em seguida, adicionar uma quantidade de gua
previamente determinada (por exemplo, 200 mL). Decorridos aproximadamente 15 minutos, o excesso de gua
aparado determinado e, por diferena, pode-se determi-
76
Teste de germinao
nar a quantidade de gua retida na areia. A quantidade

retida corresponde a 100% da capacidade de reteno.
Com uma regra de trs pode ser calculada a quantidade
de gua para 50% ou 60% da capacidade de reteno.
5.4.5. Oxignio
Aps a primeira fase de embebio, a necessidade
de oxignio aumenta, devido a ativao do metabolismo.
Se o suprimento com oxignio no for adequada, haver
retardamento do processo de germinao e a formao da
plntula normal poder ser prejudicada. A maioria das espcies no exige concentrao de oxignio maior que 10
% [48]. Esta necessidade facilmente suprida pelo ar, que
apresenta cerca de 20 % de oxignio. Desta forma, pouca
nfase dada pelas RAS aos cuidados relacionados
aerao das sementes. As recomendaes gerais so que
sejam evitados todos os fatores que limitem o suprimento
de oxignio, como excesso de umidade e proximidade excessiva entre as sementes na semeadura.
5.4.6. Temperatura
A temperatura regula a germinao em vrias formas: determina a capacidade de germinao (porcentagem final), a velocidade de germinao (tempo para
primeira contagem e contagem final) e, em algumas espcies, pode superar uma dormncia primria e/ou secundria ou induzir uma dormncia secundria. As
temperaturas cardeais limitam a faixa de temperatura
onde a germinao ocorre e, definem as condies timas
do processo. Entende-se como temperatura mnima e
mxima, as condies trmicas nas quais, abaixo ou
acima, respectivamente, no se observa mais a germinao. Na temperatura tima, as sementes apresentam a
maior porcentagem de germinao em menor perodo de
tempo. A temperatura tima de germinao no comum
para todas as espcies, sendo geralmente relacionada com
as condies climticas do habitat natural. Assim, espcies tropicais exigem geralmente uma temperatura mais
77
Captulo 5
elevada do que espcies de zonas temperadas.

Algumas sementes germinam melhor em temperatura constante (por exemplo, Jacaranda copaia - caroba
ou par-par). Porm, no ambiente natural as flutuaes
de temperatura, relativas aos perodos diurno e noturno,
podem ser significativas; assim, algumas espcies exigem
temperaturas alternadas (termoperodo) para a germinao das sementes, como por exemplo, Dalbergia nigra
(jacarand-da-bahia) e Trema micrantha (trema) (Tabela
5.2). Recentemente foi revelado que, em espcies pioneiras tropicais, a necessidade de temperaturas alternadas
para a germinao depende do tamanho das sementes.
Sendo que sementes muito pequenas germinam somente
em temperaturas constantes e necessitam de luz; com aumento do tamanho, as sementes podem germinar no escuro, porm exigem temperaturas alternadas [53; 61].
Nas RAS so informadas, para todas as espcies
listadas, as temperaturas adequadas, nas quais os testes
de germinao devem ser conduzidos. Porm, como j
mencionado anteriormente, ainda so poucas as espcies
florestais tropicais includas. Para que uma nova espcie
possa ser includa nas RAS h um longo procedimento.
Os resultados cientficos devem ser confirmados com sementes de vrias procedncias e diferenas no vigor; em
seguida, a metodologia selecionada deve ser validada
entre os laboratrios credenciados, antes que as recomendaes possam ser includas nas RAS. Os resultados de
alguns trabalhos cientficos, tratando da temperatura de
germinao de mais de 80 espcies tropicais e subtropicais
so apresentados na Tabela 5.2. A anlise destes dados
mostra a temperatura de 25C como a mais indicada para
a maioria destas espcies (excluindo as com indicaes
de temperaturas alternadas; Figura 5.1). Desta forma, caso
a espcie seja de origem tropical e no listada nas RAS, recomenda-se realizar, inicialmente, o teste de germinao
na temperatura constante de 25C.
Uma vez conhecida a temperatura na qual se deve
conduzir o teste de germinao, a mesma deve per-
78
Teste de germinao
manecer to uniforme quanto possvel no interior do germinador. Como mencionado anteriormente, variaes na
temperatura podem afetar a velocidade, a porcentagem e
a uniformidade da germinao, provocando resultados
que no condizem com a qualidade das sementes em
avaliao. Desta forma, as RAS prescrevem que a variao
de temperatura, devida ao equipamento, no deve ser
maior que 2 C, em cada perodo de 24 horas. Quando
indicado a alternncia de temperatura para a realizao
do teste, a temperatura mais baixa deve ser mantida,
geralmente, durante 16 horas (perodo noturno) e a mais
alta por oito horas (perodo diurno).
5.4.7. Luz
As sementes possuem todas as reservas
necessrias para formao da plntula normal, sendo que,
somente posterior a germinao, h necessidade de fotossntese para o crescimento da planta. Assim, a luz no
considerada um fator essencial para a germinao, como
gua, oxignio e temperatura adequada. Existem algumas
sementes que germinam somente na presena de luz,
chamadas de sementes fotoblsticas positivas e outras que
somente germinam no escuro, chamadas fotoblsticas
negativas. Estas exigncias so classificadas como dormncia e, neste caso, a presena ou ausncia de luz so
vistas como fatores que superam a dormncia. Entretanto,
a maioria das espcies produz sementes que so fotoblsticas neutras e germinam na presena ou na ausncia de
luz.
O fotoblastismo positivo possibilita que as sementes percebam a aproximao com a superfcie do
solo e a abertura de dossel. Em pioneiras neotropicais, foi
recentemente mostrado, que a necessidade de luz se
reduz gradativamente com aumento do tamanho das sementes, at o ponto em que todas as sementes podem germinar no escuro [53]. Para sementes maiores, a
alternncia de temperatura se torna mais importante; pois,
devido maior quantidade de reservas, as plntulas
79
Captulo 5
podem alcanar a superfcie do solo, mesmo quando as

sementes esto enterradas profundidades que a luz no
alcana [75; 61]. A associao entre o tamanho das sementes e o estmulo da germinao pela luz e temperaturas alternadas foi demonstrada para espcies da floresta
pluvial tropical semidecdua do Panam [61] e para pioneiras da Amaznia Central [12]. Uma lista de algumas
espcies com sementes fotoblsticas positivas encontrase na Tabela 5.3.
As plantas possuem fotoreceptores (como o fitocromo, criptocromo e precursores de clorofila), que desencadeiam o processo do desenvolvimento tpico na
presena de luz (fotomorfogenese). O fitocromo, que
apresenta maior sensibilidade na luz vermelha, tambm
responsvel pela quebra de dormncia das sementes fotoblsticas positivas. Portanto, mesmo para as fotoblsticas
neutras, a iluminao desejvel nos testes de germinao, pois a morfologia de uma planta desenvolvida na
luz diferente do que no escuro. A escurido torna as
plntulas estioladas, hialinas e sensveis ao ataque de microrganismos. Alm disso, certos defeitos, como deficincia de clorofila, no podem ser detectados.
A luz empregada nos testes de germinao pode
ser proveniente de fontes naturais ou artificiais. Neste ltimo caso, as RAS recomendam lmpadas fluorescentes
de luz branca e fria devido a relativamente baixa emisso
de raios infravermelhos, pois estes podem aumentar a
temperatura do experimento; alm disso, a emisso espectral na regio vermelho relativamente alta e aciona o
fitocromo.
As sementes fotoblsticas positivas devem ser iluminadas durante, no mnimo, oito horas a cada ciclo de 24
horas. O ciclo de 8 horas luz e 18 horas escuro, foi desenvolvido para espcies de zonas temperadas. Em regies
tropicais o perodo diurno e noturno similar. Nos laboratrios de pesquisa, utlilizam-se, muitas vezes, perodos
iguais com 12 horas de escuro e 12 horas de luz. Sementes
fotoblsticas devem ser colocadas para germinar sobre o
80
Teste de germinao
substrato e a luz deve ser distribuda uniformemente,

alm de evitar qualquer filtrao diferencial da luz antes
que esta alcance as sementes.
A avaliao para fins comerciais de espcies com
sementes fotoblsticas negativas desconhecida pelos autores deste captulo; porm, quando for o caso, deve ser
feita no escuro e com luz de segurana verde.
5.5. TIPOS DE GERMINAO

Nas RAS foram includas dois tipos de plntulas:
com germinao hipgea ou com germinao epgea,
baseado no trabalho de Klebs [40]. Tradicionalmente, na
germinao hipgea subentende-se que os cotildones so
criptocotiledonar, quer dizer, permanecem cobertos por
uma ou mais camadas do pericarpo ou pelo tegumento da
sementes durante a germinao e na germinao epgea
os cotildones emergem da semente e so fanerocotiledonar. Porm, estas caractersticas so independentes do
alongamento do hipoctilo, que o responsvel pela
elevao dos cotildones acima do nvel do solo. Desta
forma os tipos de germinao podem ser detalhados, considerando trs aspectos distintos: (1) a posio dos cotildones relativa posio da semeadura: no caso de
germinao hipgea (H), os cotildones permanecem na
altura da semeadura, quer dizer no h crescimento do
hipoctilo; e, na germinao epgea (E), o crescimento do
hipoctilo eleva os cotildones acima do solo; (2) a exposio dos cotildones da semente: quando criptocotiledonar (C), os cotildones permanecem no interior da
semente; e, quando fanerocotiledonar (P), os mesmos
emergem da semente e (3) a forma e funo dos cotildones, quando no apresentam reservas so do tipo foliar
(F), finos e apresentam funo fotossintetizante ou haustorial (absorvendo as reservas do endosperma e/ou
perisperma); e quando possuem reservas (R) so grossos
e no-fotossintetizantes. Estas caractersticas podem ser
81
Captulo 5
combinadas fatorialmente (2 x 2 x 2), o que resulta em

oito diferentes tipos de germinao. Todas as combinaes
j foram encontradas em espcies florestais tropicais,
sendo que algumas com maior frequncia que outras. Em
todos os oito casos, a protruso do embrio ocorre em somente um lado da semente, na regio da micrpila, denominada como germinao unipolar. Porm, em algumas
sementes (exemplos em Lecythidaceae, Caryocaraceae,
Clusiaceae, etc.), o hipoctilo o rgo de armazenamento e os cotildones so rudimentares ou ausentes.
Nestas sementes, a raiz e a parte area emergem em lados
opostos da semente, determinado como germinao bipolar (em dois plos da semente). Quando se consideram
tambm outras caractersticas da plntula, como por exemplo, o tamanho igual ou desigual dos cotildones, a
posio do eixo caulinar em relao aos cotildones, a presena de catfilos ou folhas rudimentares antes da formao da primeira folha, pode-se aumentar
consideravelmente a lista dos tipos de plntulas tropicais
[20; 35; 79]. Entretanto, nove tipos de plntulas, listados
na Figura 5.2, podem servir como orientao bsica na
determinao do tipo de germinao em dicotiledneas
florestais neotropicais. Representantes amaznicos dos diversos tipos de plntulas podem ser encontrados na
Tabela 5.1.
As espcies de monocotiledneas possuem somente um cotildone e, alm das estruturas encontradas
nas dicotiledneas, apresentam algumas estruturas adicionais. Alm disso, a organizao destas estruturas
diferente, o que torna a classificao dos tipos de germinao em monocotiledneas ainda mais complicada. Em
um levantamento para os neotrpicos, Garwood [35] reconheceu os seguintes tipos de plntulas monocotiledneas: (a) hipgea-Sssil (H-S), anlogo de tipo
H-C-R das dicotildoneas; (b) epgea-peciolata (E-P), anlogo do tipo E-C-R; e (c) epgea-folicea (E-F), anlogo do
tipo E-F-F. Alguns exemplos destes tipos de germinao
so citados na Tabela 5.4.
82
Teste de germinao
O manual de avaliao de plntulas da Associao

de Tecnologia de Sementes Internacional [38] fornece detalhamento de quatro tipos de plntulas de monocotiledneas: tipo A: germinao epgea, sem
alongamento do epictilo e com cotildones verdes, a raiz
primria essencial na avaliao (exemplo, Allium sp.,
alho); tipo B: germinao hipgea, sem alongamento do
epictilo e primeira folha verde, sendo a raiz primria
essencial na avaliao (exemplo, Freesia sp., frsia); tipo
C: germinao hipgea e com alongamento do epictilo
verde, sendo raiz primria essencial na avaliao (exemplo, Asparagus sp., aspargo); tipo D: germinao hipgea
e primeira folha verde e geralmente envolta pelo coleptilo transparente. Pode ser subdividido em sub-tipo D-1,
com raiz primria essencial na avaliao (exemplo,
Lolium sp., azevm); sub-tipo D-2, em que a raiz primria
pode ser substituda por razes secundrias (exemplo, Zea
sp., milho e Oryza sp., arroz); sub-tipo D-3, com diversas
razes seminais(exemplo, Triticum sp.,trigo).
O manual da ISTA classifica trs tipos de germinao para as dicotiledneas: tipo E: germinao epgea,
sem alongamento do epictilo e cotildones verdes. Pode
ser subdividido em sub-tipo E-1, com raiz primria essencial na avaliao (exemplo, Beta sp., beterraba, Daucus
sp., cenoura, Lactuca sp., alface; exemplo florestal,
Robinia sp., accia-falsa); sub-tipo E-2, com raiz primria
podendo ser substituda por razes secundrias (exemplo,
Cucumis sp., abbora e Gossypium sp., algodo); sub-tipo
E-3, com diversas razes seminais e hipoctilo tuberoso
(exemplo, Cyclamen sp., ciclamen); tipo F: germinao
epgea, com alongamento do epictilo, podendo a raiz
primria ser substituda por razes secundrias (exemplo,
Phaseolus sp., feijo). Observao: todos os exemplos citados do tipo F apresentam cotildones com reservas e na
avaliao deve ser includo o desenvolvimento da
primeira folha. Tipo G: germinao hipgea, com alongamento do epictilo, podendo a raiz primria ser substituda por razes secundrias (exemplo, Pisum sp., ervilha;
83
Captulo 5
exemplo florestal, Quercus sp., carvalho). H tambm um

oitavo tipo de germinao no manual da ISTA referente s
conferas: tipo H: germinao epgea, sem alongamento
do epictilo, com hipoctilo e cotildones verdes, com raiz
primria essencial na avaliao (exemplo, Pinus sp., pinus
e Abies sp., abeto).
As RAS fornecem somente algumas ilustraes
sobre plntuals normais e anormais com germinao
hipgea (Araucaria sp., Triticum sp., Zea mays, Pisum
sp.) e epgea (Allium sp., Helianthus sp., Phaseolus sp.).
5.6. DORMNCIA DAS SEMENTES

Considera-se uma semente dormente, quando ela
no germina, apesar das condies adequadas de gua,
oxignio e temperatura para a germinao. Ao passo, o
termo quiescente aplicado a uma semente que no germina, quando uma destas condies no esteja adequada.
Portanto, a dormncia uma caracterstica da semente e
no do ambiente.
A entrada no estado de dormncia, no final da
maturao, evita a germinao das sementes ainda na
planta-me. A superao da dormncia na poca adequada pode sincronizar a germinao com ambientes favorveis ao desenvolvimento da plntula. A sincronizao
com a sazonalidade especialmente importante em habitats onde alguma poca do ano desfavorvel ao desenvolvimento; por exemplo, em zonas temperadas, evita a
germinao no outono, quando as sementes so dispersas, e a permite na primavera. A dormncia pode tambm
manter as sementes no banco do solo at que o local seja
adequado, como a abertura de uma clareira. Em outras
palavras, a dormncia e o mecanismo de sua superao
fornecem s sementes a capacidade de "reconhecer" se o
ambiente favorvel sua germinao e sobrevivncia. A
dormncia pode tambm distribuir a germinao ao
longo do tempo, para aumentar as chances de perpe-
84
Teste de germinao
tuao da espcie. Neste caso, a dormncia pode resultar

em uma germinao espordica, possvel em ambiente
com condies favorveis. Desta forma, a germinao
pode ocorrer sem poca pr-determinada, sendo importante em espcies florestais que apresentam uma frutificao irregular e/ou no necessitam alta luminosidade
para o crescimento inicial. Desta forma, o tipo de dormncia intimamente vinculado com o habitat da espcie e s condies ambientais da poca de disperso e
germinao.
Em linhas gerais, o tipo de dormncia pode ser
definido por trs aspectos: pela sua causa (fisiolgica,
morfolgica, fsica, qumica ou mecnica), pela definio
do local (endgeno no embrio ou exgeno em estruturas
fora do embrio, como endosperma, perisperma, tegumento ou pericarpo), e pela definio do momento em
que a dormncia se manifesta na disperso (primria) ou
aps a disperso (secundria).
Existem vrios tipos de dormncia nas sementes
florestais de climas tropical e subtropical, apesar da
sazonalidade ser menos pronunciada nestes ambientes. A
dormncia fisiolgica, que pode ser superada por luz (sementes fotoblasticas) geralmente encontrada em espcies pioneiras na sucesso florestal [24]. A dormncia
fsica, causada pela impermeabiliade do tegumento,
comum em espcies da famlia Fabaceae e Malvaceae
(Schizolobium amazonicum, paric, [74]); Ochroma pyramidale pau-de-balsa; Leo et al., (2008). H dormncia
morfolgica, por exemplo, em Minquartia guianensis
(acariquara-roxa; [19]) e Helicostylis tomentosa (inharda-folha-peluda; [11]). A dormncia mecnica muitas
vezes causada por estruturas dos frutos que protegem as
sementes dos predadores, como um endocarpo duro nas
espcies que possuem frutos tipo drupa. Mesmo sementes
sensveis ao dessecamento (recalcitrantes) podem apresentar estruturas que retardam a germinao (Eugenia
stipitata, ara-boi; [8]; Maquira sclerophylla - pau-tanino;
[56], Bertholletia excelsa - castanha-da-amaznia). As es-
85
Captulo 5
pcies que apresentam um longo perodo de germinao

devem ter um tipo de dormncia, porm para muitas a
causa no foi ainda determinada (Tabela 5.1).
A seguir, ser apresentada uma pequena explanao sobre cada tipo de dormncia e alguns tratamentos indicados para sua superao. Contudo, a dormncia
em sementes um fenmeno complexo e com diversas
interaes, havendo ainda muitos aspectos a serem estudados e esclarecidos.
5.6.1. Tratamentos para superar a dormncia e promover a germinao
A utilizao de um tratamento pr-germinativo, ou
a combinao de vrios, pode aumentar a taxa de germinao e reduzir o tempo do teste de germinao. O tratamento necessrio quando um nmero considervel de
sementes permanece sem germinar no final do teste.
Neste caso, pode ser realizado um novo teste de germinao aplicando tratamento pr-germinativo. Quando a
dormncia conhecida ou existe a suspeita de dormncia,
o tratamento pode ser aplicado no teste inicial.
As RAS fornecem uma lista de pr-tratamentos,
agrupando-os para a superao da dormncia fisiolgica;
dormncia fsica e para remoo de substncias inibidoras. Os tratamentos especficos para todas as espcies listadas nas RAS so tambm indicados. importante
observar que a durao do teste de germinao no inclui
o perodo do pr-tratamento (que pode demorar de
poucos minutos at meses). No Boletim de Anlise de Sementes deve ser informada a descrio e durao do prtratamento.
Para as espcies no listadas nas RAS, a escolha
entre os pr-tratamentos deve ser baseada no tipo de dormncia, levando em considerao a disponibilidade de
materiais e a experincia do analista e da equipe do laboratrio. Resultados de pesquisas cientficas com sementes da mesma espcies ou do mesmo gnero, tambm
podem auxiliar na tomada de deciso.
86
Teste de germinao
5.6.1.1. Mtodos para superar a dormncia fisiolgica

Em linhas gerais, esse tipo de dormncia est relacionado aos processos fisiolgicos que bloqueiam o crescimento do embrio. O embrio, apesar de fisicamente
estruturado e completo, no germina por razes diversas
localizadas no prprio embrio. Alguns autores distinguem, alm das diferentes causas da dormncia fisiolgica, ainda trs nveis (no profunda, intermediria e
profunda [59]). Seguem os principais mtodos para a superao da dormncia fisiolgica listados nas RAS, cada
um visando superar uma causa distinta da dormncia
fisiolgica:
Armazenamento em locais secos: para algumas espcies o armazenamento das sementes em locais secos j
suficiente para que a dormncia seja superada.
Pr-esfriamento: as sementes so colocadas em
substrato mido, como em um teste de germinao.
Porm, so mantidas em ambiente frio (geralmente entre
5 e 10 C), por um perodo determinado, antes da transferncia para a temperatura recomendada para o teste de
germinao.
Pr-aquecimento: as sementes so pr-aquecidas
antes do teste de germinao (conforme as exigncias da
espcie), por um perodo determinado, antes da transferncia para a temperatura recomendada para o teste de
germinao.
Nitrato de Potssio KNO3: o substrato do teste de
germinao saturado com soluo de 0,2 % de Nitrato
de Potssio antes da semeadura. Caso necessrio, o
reumedecimento do substrato deve ser feito com gua.
cido Giberlico GA3: umedecimento do substrato de germinao com uma soluo de, geralmente,
0,05 % de GA3. Dependendo da intensidade da dormncia
a concentrao de GA3 poder ser de 0,02 ou 0,08 %.
Germinao a baixa temperatura: a germinao de
sementes em temperatura constante inferior recomendada para o teste de germinao ou em temperatura al-
87
Captulo 5
ternada, diminuindo-se ainda mais a temperatura mnima

especificada. Com a reduo da temperatura, a germinao tende a ser mais lenta e, neste caso, o teste pode ser
estendido.
Luz: os testes devem ser iluminados por, pelo
menos, oito horas a cada ciclo de 24 horas; caso o teste
seja realizado em alternncia de temperatura, o perodo
de luz deve coincidir com o perodo de temperatura mais
alta.
Envelopes de polietileno lacrado: o substrato e as
sementes so envolvidos, durante o teste de germinao,
com embalagens de polietileno bem ajustados e lacrados.
5.6.1.2. Mtodos para superar a dormncia fsica
A dormncia fsica causada pela impermeabilidade do tegumento gua. Estas sementes no embebem
em contato com gua e continuam duras. Pode ser confundida com a dormncia mecnica, porm sementes com
dormncia mecnica aumentam o teor de gua em contato com gua. A dormncia fsica relativamente comum
em espcies florestais, principalmente em representantes
da famlia Fabaceae e Malvaceae. Enquadram-se nessa
categoria Enterolobium spp. (orelha-de-macaco) Hymenaea sp. (jatob) Ormosia sp. (tento) Parkia sp. (fava),
Schizolobium sp. (paric), Ochroma pyramidale (pau-debalsa), entre outras. A superao desta dormncia torna o
tegumento permevel gua, ou seja, possibilita que as
sementes possam embeber. Conforme o tamanho das sementes e a dureza do tegumento um dos seguintes tratamentos recomendado:
Embebio: a embebio em gua por 24 a 48
horas acelera a germinao.
Escarificao mecnica: perfurao, remoo de
um pedao ou lixamento do tegumento, com uso de alicate, cortador de unha, lixa de papel ou lima. O local da
escarificao deve ser na regio oposta protruso da
radcula.
Escarificao qumica: imerso das sementes em
88
Teste de germinao
cido sulfrico concentrado (H2SO4). O perodo de imerso varia em funo da dureza do tegumento e deve ser
determinado para cada espcie. Decorrido o tempo
necessrio, as sementes e o cido devem ser despejados
em um recipiente de vidro contendo pelo menos um litro
de gua. Aps agitao por alguns minutos, derramar o
contedo em uma peneira plstica e lavar as sementes em
gua corrente at eliminar completamente os resduos do
cido. A utilizao desse mtodo exige precaues especiais, devido ao poder corrosivo do cido sulfrico, como por
exemplo, o uso de equipamentos de proteo individual.
5.6.1.3. Mtodos para superar a dormncia mecnica
A dormncia mecnica causada por estruturas
externas do embrio que impedem mecanicamente a sua
expanso e, consequentemente, a protruso da radcula.
O impedimento muitas vezes causado por estruturas do fruto que protegem as sementes dos predadores,
como um endocarpo duro nas espcies que possuem frutos tipo drupa. Existem tambm tegumentos duros ou fibrosos que oferecem resistncia a expanso do embrio.
As unidades de disperso se mantm tambm
duras aps entrar em contato com gua, porm, diferente
das sementes com dormncia fsica, os envoltrios so
permeveis a gua e troca gasosa. Desta forma, as duas
dormncias podem ser distinguidas pela determinao do
teor de gua das sementes aps imerso. Devido a permeabilidade dos envoltrios gua e gases, este tipo de
dormncia tambm pode ocorrer em sementes sensveis
ao dessecamento (recalcitrantes).
Para a superao da dormncia mecnica, os envoltrios devem ser enfraquecidos, removidos completamente ou parcialmente de modo a permitir a expanso do
embrio. s vezes somente necessrio retirar o impedimento pontualmente no local da protruso da raiz
primria (Eugenia stipitata, ara-boi). Neste caso, a retirada do impedimento no lado oposto da protruso no
apresentaria o mesmo efeito. Exemplos com sementes
89
Captulo 5
sensveis ao dessecamento nas quais a remoo manual

do tegumento com faca acelera a germinao so Carapa
spp. (andiroba) e Bertholletia excelsa (castanha-daamaznia). A retirada do endocarpo, por exemplo, em Astrocaryum aculeatum (tucum), pode ser feita, segurando
a unidade de disperso com uma tira de borracha e quebrando o endocarpo com um golpe de martelo. A
rachadura do endocarpo facilita a retirada manual da
semente [24].
5.6.1.4. Mtodos para superar a dormncia morfolgica
Em algumas espcies, as sementes so dispersas
com o embrio morfologicamente imaturo. Esse tipo de
dormncia tambm conhecido como imaturidade do embrio ou embrio rudimentar. Para que a semente germine, necessrio um determinado perodo de tempo at
que o embrio alcance maturidade. Portanto, somente
necessrio esperar para que o embrio possa completar
seu desenvolvimento. O ambiente de armazenamento
deve ser adequado, sem que temperaturas mais elevadas
podem acelerar o processo de maturao. Sementes recalcitrantes de espcies tropicais perdem, geralmente, a viabilidade se armazenadas em temperaturas menores que
15C.
5.6.1.5. Mtodos para remover substncias inibidoras
A dormncia causada por compostos, geralmente
solveis em gua. Esse tipo de dormncia tambm conhecido como dormncia qumica. Desta forma, a lavagem
das sementes em gua corrente, pode ser um mtodo eficiente para a superao da dormncia.
90
Teste de germinao
5.7. CONDUO DO
TESTE DE GERMINAO
5.7.1. Durao do teste
As avaliaes dos testes de germinao (contagens) devem ser reduzidas ao mximo, para evitar danos
s plntulas em desenvolvimento e poupar trabalho. As
RAS sugerem apenas duas contagens: primeira contagem
e contagem final. Porm, avaliaes intermedirias podem
ser realizadas, caso haja elevada contaminao das sementes ou quando o perodo de germinao muito
longo. Nas avaliaes intermedirias devero ser removidas as plntulas formadas, com a devida anotao na
ficha de avaliao.
A durao do teste de germinao depende de cada
espcie e deve permitir que o lote expresse o seu mximo
potencial germinativo. As espcies listadas nas RAS tm
informados a durao dos testes e o perodo para a realizao da primeira contagem.
Espcies florestais nativas apresentam grande variao no tempo de germinao; como exemplos discrepantes, podem ser: Parkia pendula - visgueiro (entre 7
a 9 dias) e Naucleopsis caloneura - muiratinga (entre 600
a 1320 dias; Tabela 5.1), pois tratamentos pr-germinativos
para a ltima espcie no so conhecidos. Assim, para
estas espcies, como as demais no listadas nas RAS, existe a dificuldade de estimar a durao do teste e cumprir
o perodo necessrio. Um longo tempo de germinao
torna-se invivel para avaliao num laboratrio credenciado e para a comercializao. Segundo as RAS, para as espcies...onde o teste de germinao no pode ser
completado dentro de dois meses, so recomendados testes
rpidos de viabilidade, como o Teste de Tetrazlio ... ou
Teste de Embrio Excisado.... Esta recomendao pode resolver o problema relacionado durao do teste de germinao. Porm, continua o problema com a quantidade
de sementes necessrias para o teste de germinao ou de
tetrazlio, pois para ambos so exigidas 400 sementes, tor-
91
Captulo 5
nando a certificao invivel para muitas espcies nativas.

5.7.2. Interpretao do teste
Nas avaliaes do teste de germinao sero observadas o nmero de sementes germinadas e no germinadas. As sementes que foram capazes de germinar sero
classificadas em plntulas normais ou plntulas anormais,
de acordo com as definies das RAS. O estdio de desenvolvimento das plntulas deve ser ...suficiente para permitir uma avaliao correta das mesmas e a diferenciao
entre plntulas normais e anormais. Para as plntulas de
espcies florestais que possuem grande variao dos tipos
de germinao (item 5.5), a correta classificao depende,
quase que exclusivamente, do conhecimento e da prtica
do analista.
Na primeira e em qualquer outra contagem intermediria, devem ser removidas do teste as plntulas que
alcanaram o estdio em que todas as estruturas essenciais podem ser precisamente verificadas e as seriamente
deterioradas. Porm, devem ser deixadas at a contagem
final as plntulas anormais com outros defeitos. Em caso
de dvidas, quanto a anormalidades de plntulas, um
novo teste deve ser feito em areia. Outra amostra da
mesma espcie, que tenha germinado de modo satisfatrio, pode ser simultaneamente semeada para servir de
testemunha ao novo teste. Por vezes, necessrio adiar a
primeira contagem para que as plntulas atinjam o desenvolvimento adequado.
Para espcies em que o teste de germinao realizado com unidade-semente mltipla, somente uma plntula normal por unidade contada para determinar a
porcentagem de germinao. Quando solicitado, o
nmero de plntulas normais produzidas por 100
unidades ou o nmero de unidades que tenha produzido
uma, duas ou mais plntulas normais pode ser informado.
As sementes no germinadas, ao final do teste de
germinao, sero contadas e classificadas conforme descrito nas RAS em sementes duras, dormentes e mortas.
92
Teste de germinao
As suas respectivas porcentagens devem ser informadas

no Boletim de Anlise de Sementes.
Quando uma quantidade expressiva de sementes
duras ou dormentes forem encontradas, deve-se refazer o
teste, utilizando um ou um conjunto de mtodos para promover a germinao.
Se sementes dormentes forem encontradas a uma
taxa de 5% ou mais, deve ser verificado se estas sementes
possuem potencial para produzir plntulas normais, utilizando-se o Teste de Tetrazlio ou outro teste de viabilidade. Se, aps essa verificao, ainda existir dvida se a
semente est dormente ou morta, deve-se consider-la
como morta.
Deve-se atentar que, caso seja possvel observar
que uma semente, mesmo que classificada como morta
no momento da avaliao, produziu qualquer parte de
uma plntula (por exemplo, a ponta da raiz primria),
deve ser contada como plntula anormal e no como semente morta.
Apenas quando houver a solicitao do requerente,
podem ser feitas outras determinaes informando as sementes vazias, sem embrio ou danificadas por insetos.
5.7.3. Repetio do teste de germinao
Existem certos casos descritos nas RAS em que os
teste de germinao devem ser refeitos. De maneira geral
estes casos ocorrem quando:
1. houver evidncias de erros nas condies do
teste, sejam eles nas avaliaes das plntulas ou nas
anotaes na ficha. Neste caso, o teste de germinao
deve ser repetido usando-se o mesmo mtodo. O resultado
deste novo teste o que deve ser relatado no Boletim de
Anlise;
2. o resultado do teste de germinao no confivel devido fitotoxidade ou disseminao de fungos ou
bactrias. Neste caso deve-se refazer o teste usando um ou
mais mtodos alternativos, em areia ou solo. O melhor resultado e o mtodo utilizado devem ser relatados no Bo-
93
Captulo 5
letim de Anlise;
3. houver certo nmero de plntulas que so difceis de serem avaliadas. Para o reteste deve-se usar um
ou mais mtodos alternativos, em areia. O melhor resultado e o mtodo utilizado devem ser relatados no Boletim
de Anlise;
4. houver suspeita de dormncia. Neste caso,
quaisquer dos mtodos indicados nas RAS devem ser utilizados em um ou mais testes adicionais. O melhor resultado e o mtodo utilizado devem ser informados no
Boletim de Anlise de Sementes;
5. a variao entre as repeties de 100 sementes
excederem a tolerncia mxima permitida pelas RAS.
Neste caso, o teste de germinao deve ser refeito, usando
o mesmo mtodo. Se a diferena do segundo resultado
no exceder tolerncia, a mdia dos dois testes deve ser
relatada no Boletim de Anlise. Se o segundo resultado
tambm exceder tolerncia indicada pelas RAS, deve ser
feito um terceiro teste usando o mesmo mtodo. A mdia
dos resultados compatveis deve ser relatada no Boletim
de Anlise;
6. houver evidncia, antes ou durante o teste normal de germinao, da ocorrncia de qualquer um dos
casos acima, testes de germinao simultneos podem ser
realizados utilizando-se os mtodos alternativos indicados
pelas RAS;
5.7.4. Clculo e informao dos resultados
O resultado do teste de germinao representa o
potencial mximo do lote de sementes, quando em
condies ideais. Deve ser calculado pela mdias de quatro repeties de 100 sementes. Caso se utilize subrepeties, as mesmas devem ser combinadas a formar
repeties de 100 sementes. O resultado do teste expresso em porcentagem, em nmeros inteiros, e a soma
das porcentagens de plntulas normais, plntulas anormais, sementes duras, dormentes e mortas deve totalizar
100%. Para os casos em que essa soma no corresponda
94
Teste de germinao
a 100%, as RAS estabelecem como deve ser realizada a

aproximao. De maneira geral, deve-se: (1) manter a
aproximao do nmero inteiro para a porcentagem de
plntulas normais; (2) Selecionar, dentre os outros valores
apenas aquele com a maior parte fracionria e fazer a
aproximao do mesmo; (3) Pegar apenas o nmero inteiro dos outros trs valores e refazer a soma. Se o valor
fechar em 100%, informar esses resultados. Se no, aproximar tambm o valor com a segunda maior parte fracionria e repetir o clculo. Lembra-se que, quando
houver partes fracionrias iguais, a prioridade dada para
os valores de plntulas anormais, sementes duras, dormentes e mortas. Um exemplo de como proceder as
aproximaes dos valores mostrado nas RAS.
Outras informaes como a viabilidade de sementes no germinadas e o mtodo utilizado para determin-la, a porcentagem de outras categorias de sementes
no germinadas e o mtodo utilizado para determin-las,
podem ser mencionadas no Boletim de Anlise.
Quando se trabalha com sementes que produzem
mais de uma plntula normal por unidade de semeadura
(unidades-sementes mltiplas) somente uma plntula
normal por unidade de semeadura contada no clculo
da porcentagem. Porm, pode-se informar tambm, por
exemplo, o nmero de plntulas normais produzidas por
100 unidades ou a porcentagem de unidades que produziu
uma, duas ou mais que duas plntulas normais.
Para as sementes cujos testes de germinao so
feitos com base no peso das quatro repeties, o resultado
deve ser expresso pelo nmero de plntulas germinadas
no total do peso de sementes testadas. Neste caso, a
tabela de tolerncia diferenciada das demais.
Como j mencionado anteriormente, quando for
solicitado pelo interessado, as porcentagens de sementes
vazias, sem embrio ou danificadas por insetos podem ser
informadas em Outras Determinaes.
Assim como para a execuo de todo o teste de germinao, o preenchimento do Boletim de Anlise de Se-
95
Captulo 5
mentes regido pelas RAS. De maneira geral, no boletim

que devem ser detalhadas todas as informaes do teste,
como por exemplo, sua durao, data da concluso, porcentagem de plntulas normais, anormais, sementes
duras, dormentes e mortas, substrato e temperatura usadas. Quaisquer tratamentos especiais ou mtodos utilizados para promover a germinao tambm devero constar
no Boletim de Anlise de Sementes. Nota-se que, caso
haja um valor de porcentagem igual a zero, a recomendao das RAS para o preenchimento do Boletim de
Anlise que esse valor seja expresso como 0.
5.7.5. Tabelas de tolerncia
Para que o resultado de um teste de germinao
possa ser considerado satisfatrio e vlido para emisso
do certificado, necessria que a variao entre as porcentagens de germinao das repeties de 100 sementes
esteja dentro das tolerncias mximas permitidas. As
tabelas de tolerncia devem ser aplicadas, no mnimo,
para a categoria de plntulas normais. Maiores detalhes
sobre a aplicao destas tabelas foram mencionados neste
texto, no item 5.4.1.
5.8. CONSIDERAES FINAIS

A aplicabilidade da atual verso das RAS para a
certificao das sementes de todas as espcies florestais
no possvel. A quantidade de sementes para a conduo do teste de germinao precisa ser revista para
muitas espcies. Consequentemente as tabelas de tolerncias devem ser adequadas, visando tambm maior variabilidade gentica. H necessidade tambm de entrar em
consenso sobre os diferentes tipos de germinao e em
seguida definir as respectivas estruturas essenciais.
Os autores deste captulo sugerem agrupar as sementes florestais em trs grupos para fins de avaliao da
qualidade de suas sementes em laboratrios credenciados:
96
Teste de germinao
1) o primeiro grupo refere-se as sementes ortodoxas, com tamanho pequeno a mdio, que frutificam regularmente todos os anos e produzem sementes em
grande quantidade. Para estas, quando possvel finalizar
o teste de germinao em, no mximo, oito semanas, a
germinabilidade (teste direto) pode ser avaliada conforme
prevista nas RAS.
2) no segundo grupo enquadra-se as sementes
ortodoxas de tamanho grande e as de que necessitam
mais de oito semanas para completar a germinao, alm
das sementes recalcitrantes. Para tais sementes devem ser
aplicados somente testes indiretos para avaliar a viabilidade (sobre a escolha do teste indireto, ver detalhamento
abaixo). Em caso de baixa disponibilidade de sementes,
tamanho e peso muito grande, o nmero de sementes,
necessrio para a certificao, deve ser reduzido.
3) o terceiro grupo engloba as espcies raras e/ou
em perigo de extino. As espcies deste grupo necessitam ser plantadas para assegurar a sua conservao,
assim, nenhuma semente deveria ser submetida a um
teste destrutivo. Para tais espcies, outros critrios devem
ser aplicados, tanto para o tamanho da amostra, como
para a avaliao. Deve ser dada preferncia para procedimentos no destrutivos.
Os autores deste captulo sugerem a seguinte
ordem de preferncia para os testes indiretos:
a) A protruso da raiz primria pode ser utilizada
como teste indireto de germinao para sementes ortodoxas de tamanho pequeno a mdio que necessitam mais
do que oito semanas para formao de plntulas normais,
entretanto, finalizam a protruso da raiz primria neste
perodo. As sementes recalcitrantes necessitam testes
mais rpidos, devido a dificuldade de armazenamento,
por isso no foram indicadas para este procedimento.
b) O teste de tetrazlio pode ser utilizado para sementes recalcitrantes e para ortodoxas, que no finalizam a protruso da raiz em um perodo de oito
semanas. Somente sementes de tamanho pequeno a
97
Captulo 5
mdio so recomendadas para este teste, devido ao alto

custo do material.
c) O teste de corte pode ser aplicado para as sementes muito grandes tanto ortodoxas como recalcitrantes. No caso das recalcitrantes a avaliao pode
englobar sementes que iniciaram a germinao, conforme
sugesto da ISTA [37].
Apesar da quantidade razovel de publicaes
cientficas sobre a germinao das espcies nativas, verificou-se na reviso da literatura que, geralmente, os resultados no podem ser diretamente aplicados na avaliao
da qualidade das sementes. Por exemplo, trabalhos cientficos caracterizam a germinao pelo tempo inicial,
mdio e final, a velocidade e/ou o ndice de velocidade
(IVG) [46]. Porm, para um laboratrio de certificao, h
a necessidade de conhecer o tempo para a primeira contagem e a contagem final e ambos devem ocorrer em um
prazo mximo de oito semanas. O cumprimento deste
prazo, tambm raramente um objetivo da pesquisa.
Imediatamente h necessidade de protocolos confiveis e devidamente descritos sobre o teste de tetrazlio,
apoiado pela descrio morfolgica das sementes. Esses
resultados apoiaro, de imediato, a incluso de novas espcies nas RAS, possibilitando a comercializao de suas
sementes com a devida certificao exigida pela Lei de Sementes (Lei n. 10.711, de 05 de agosto de 2003).
H necessidade de aprimorar testes indiretos. Por
exemplo, o teste de corte um teste sub-utilizado que
poderia oferecer informaes teis sobre a qualidade das
sementes, alm da simples classificao em sementes
vazias, atacadas por insetos ou sem embrio. O teste de
Raio-X, possuiu a grande vantagem de fornecer resultados
imediatamente, alm de ser no destrutivo, que poderia
ser aplicado em sementes de espcies raras. Desenvolver
novos mtodos indiretos, por exemplo para sementes
grandes um grande desafio.
To importante quanto o desenvolvimento das
pesquisas relacionadas acima, o estabelecimento de pro-
98
Teste de germinao
cedimentos padres nos laboratrios credenciados, para

a avaliao das sementes recalcitrantes. Devido a curta
longevidade e dificuldade de armazenamento, as recalcitrantes deveriam receber um tratamento especial e rpido,
desde o recebimento da amostra at o preenchimento do
Boletim de Anlise de Sementes (furando a fila das sementes ortodoxas).
As RAS foram desenvolvidas para atestar a qualidade de sementes comercializadas para fins de reproduo de material vegetal. No setor florestal temos a
produo de madeira de lei, celulose e papel em plantios
comerciais, em grande escala com alto retorno econmico.
Temos tambm vores exploradas pelos seus produtos
no-madeireiros (frutos, sementes, resinas, fibras, leos
essenciais, etc.), algumas em plantios comerciais e outras
oriundas do extrativismo, sem sempre sustentvel. H
tambm a restaurao florestal e recuperao de reas
degradadas, e a necessidade do replantio de espcies raras
ou ameaadas da extino. Visando estes ltimos objetivos, ao contrrio dos exemplos citados anteriormente,
necessita-se grande variabilidade gentica. Desta forma,
o objetivo final das sementes deveria ser levado em considerao na avaliao da qualidade e dos procedimentos.
Com essa sugesto, os autores questionam a real necessidade de submeter todas as sementes mesma rigorosa
avaliao da qualidade.
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terra-firme na Amaznia Central. Manaus, INPA. 816p.
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(disponvel
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<http://webdoc.sub.gwdg.de/diss/2010/roeder/>.
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SALOMO, A.N.; EIRA, M.T.S.; CUNHA, R. 1991.
Temperatura para teste de germinao de Dalbergia nigra
108
Teste de germinao
Allem. Informativo ABRATES, 1(4):79.

69
SILVA, A; AGUIAR, I.B. 1997. Germinao de sementes de canela-preta (Ocotea catharinensis - Mez. Lauraceae) em diferentes condies de luz e temperatura.
Informativo ABRATES, 7(1/2):203.
70
SILVA, A; CASTELLANI, E.D.; SADER, R; AGUIAR,
I.B.; RODRIGUES, T.J.D. 1995. Influncia da luz e da temperatura na germinao de sementes de guarant (Esenbeckia leiocarpa Engl.). Informativo ABRATES, 5(2):165.
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temperatura ideal de germinao de sementes de copaba
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2005. Paric, Schizolobium amazonicum Huber ex Ducke.
Informativo Tcnivo Rede de Sementes da Amaznia. N.
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germination and seedling survival of brazilian tropical tree
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109
Captulo 5
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Malesian taxa. Wageningen: Centre for Agricultural Publishing and Documentation ([PUDOC]). 465p.
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ZPEVAK, F.A; PEREZ, S.C.J.G.A 1993. Efeito da
temperatura na germinao de sementes de Adenanthera
pavonia. Informativo ABRATES, 3(3):75.
110
envira-bob
pepino-doce
breu-preto
breu-ambulante
breu-do-n-inchado
breu-do-p-branco
castanha-de-galinha
Guatteria olivaceae
Ambelania acida
Protium apiculatum
Protium decandrum
Protium hebetatum
Protium spruceanum
Couepia longipendula
Conceveiba hostmanii
Buchenavia grandis
urucuarana-mabi
tanimbuca-da-terra-firme
Calophyllum brasiliense jacareba
Annonaceae
enira-surucucu-da-folhamida
Bocageopsis multiflora
Euphorbiaceae
Combretaceae
0,6 (0,2 - 0,7)
1,9 (0,9 - 2,7)
3,3 (2,3 - 4,2)
Clusiaceae
0,4 (0,3 - 0,5)
Burseraceae
48 (23 - 94)
3,0 (2,0 - 4,1)
Burseraceae
Chrysobalanaceae
0,6 (0,2 - 1,0)
0,4 (0,3 - 0,5)
Burseraceae
Burseraceae
0,04 (0,04 - 0,05)
0,2 (0,2 - 0,3)
39 (32 - 55)
34 (29 - 43)
30 (15 - 53)
70 (63 - 77)
56 (49 - 84)
35 (21 - 70)
21 (NI NI)
P-E-F
P-E-F
C-H-R
P-E-R
C-H-R
C-H-R
C-H-R
C-E-R
P-E-F
240
(150 - 480)
26 (25 - 27)
P-E-F
C-E-F
70 (63 - 126)
0,09 (0,04 - 0,11) 210 (NI NI)
Apocynaceae
Annonacea
Famlia
Nome popular
Espcie
Massa de uma
Tempo para
semente ou
formao de
unidade de
plntula(dia)
semeadura(g)
mdia
mdia
(min max)
(min max)
sem
sem
sem
NI
NI
NI
NI
sem
NI
NI
NI
Dormncia**
Tabela 5.1. Caractersticas das sementes (ou da unidade de semeadura) e da germinao em condies de viveiro na regio de Manaus,
de 50 espcies florestais da Amaznia. Dados extrados de Camargo et al., 2008.
tema de germinao
Teste
Anexos
111
112
Fabaceae
Fabaceae
copaba-roxa
angelim-vermelho
juat-mirim
juat-do-fruto-grande
paric-grande-da-terrafrime
faveira-bengue
visgueiro
escorrega-macaco
paracutaca
muirajibia-amarela
arab-preto
Copaifera mulijuga
Dinizia excelsa
Hymenaea reticulata
Hymenaea parviflora
Parkia multijuga
Parkia nitida
Parkia pendula
Peltogyne paniculata
Swartzia polyphylla
Swartzia recurva
Swartzia reticulata
Fabaceae
Fabaceae
Fabaceae
Fabaceae
Fabaceae
Fabaceae
Fabaceae
Fabaceae
Fabaceae
Euphorbiaceae
seringueira-vermelha
Hevea guianensis
Euphorbiaceae
seringueira
Hevea brasiliensis
35 (28 - 42)
42 (35 - 56)
21 (07 - 35)
08 (07 - 09)
12 (11 - 23)
15 (09 - 25)
35 (28 - 44)
26 (23 - 30)
12 (10 - 27)
28 (16 - 58)
22 (15 - 27)
27 (11 - 45)
60,1 (22,5 - 96,8) 57 (38 - 87)
5,8 (3,6 - 7,7)
78 (20 - 112)
0,6 (0,4 - 0,9)
0,1 (0,05 - 0,2)
0,7 (0,4 - 1,0)
7,4 (3,0 - 9,2)
4,3 (2,6 - 6,4)
2,9 (1,3 - 4,8)
0,2 (0,1 - 0,3)
1,8 (1,3 - 2,5)
1,5 (0,8 - 2,5)
4,9 (2,0 - 6,2)
P-H-R
C-H-R
P-H-R
P-E-R
P-H-R
P-E-R
C-H-R
P-E-R
P-E-R
P-E-F
P-E-R
C-H-F
C-H-F
NI
sem
sem
sem
Fsica
Fsica
Fsica
Fsica
Fsica
Fsica
sem
sem
sem
Captulo 5
Lauraceae
pau-rosa
castanha-de-macaco
matamat-verdadeiro
Aniba rosaeodora
Cariniana micrantha
Eschweilera coriacea
Lecythidaceae
matamat-romeu
matamat-preto
matamat-mirim
jarana-da-folha-grande
castanha-jarana
Eschweilera romeo-cardosoi
Eschweilera truncata
Eschweilera wachenheimii
Lecythis barneby
Lecythis prancei
sem
sem
70 (23 - 111)
89 (31 - 220)
Malvaceae
Malvaceae
0,4 (0,3 - 0,6)
75 (24 - 141)
70 (42 - 140)
P-H-R
P-H-R
P-E-F
307 (127 457)

70 (35 - 287)
BIPOLAR
259 (161 420)
NI
NI
NI
NI
NI
BIPOLAR
BIPOLAR
15,5 (7,1 - 21,2) 154 (98 - 224) BIPOLAR
24 (12 - 45)
27 (25 - 30)
20 (13 - 36)
NI
sem
sem
NI
sem
Catostemma albuquerque
Scleronema micranthum cardeiro
BIPOLAR
49 (28 - 112) BIPOLAR
20 (12 - 35)
P-E-F
C-H-R
NI
BIPOLAR
1,7 (0,5 - 3,5)
2,0 (1,1 - 3,1)
3,9 (3,0 - 4,9)
2,0 (1,6 - 2,6)
7,8 (2,5 - 14,9)
Malvaceae
mamorana
77 (35 - 210)
98 (84 - 140) C - H - R
0,14 (0,08 - 0,17) 28 (21 - 56)
3,5 (1,8 - 5,5)
1,9 (1,3 - 2,5)
Byrsonima chrysophylla murici
Lecythidaceae
Lecythidaceae
Lecythidaceae
Lecythidaceae
Lecythidaceae
Eschweilera cyathiformis matamat
Lecythidaceae
Lecythidaceae
Fabaceae
muirajibia
Swartzia tessmanii
Teste de germinao
113
114
Olacacea
Sapotaceae
Sapotaceae
ucuubarana-pun
ucuubarana-vermelha
acariquara-roxa
abiurana-gigante
abiu-do-jari
pincel-de-macaco
imbaubarana
Iryanthera juruensis
Iryanthera laevis
Minquartia guianensis
Pouteria guianensis
Pouteria jariensis
Duckeodendron cestroides
Pourouma melionii
C-H-R
29 (14 - 47)
0,8 (0,6 - 0,9)
Urticacea
1,3 (0,7 - 1,6)
3,3 (1,7 - 4,6)
1,5 (1,2 - 2,0)
2,5 (1,8 - 3,0)
3,9 (3,1 - 5,0)
Solanaceae
Myristicaceae
Myristicaceae
Moraceae
Moraceae
3,3 (2,6 - 4,2)
960 (600 1320)
muiratinga
Naucleopsis caloneura
C-H-R
0,25 (0,12 - 0,36) 39 (26 - 88)
inhar-da-folha-peluda
Helicostylis tomentosa
P-H-R
40 (34 - 52)
1,1 (0,3 - 1,7)
Moraceae
guariba
Clarisia racemosa
91 (63 - 161)
3,6 (0,7 - 5,2)
49 (42 - 91)
360 (270 390)
55 (39 - 97)
33 (22 - 43)
28 (15 - 65)
35 (28 - 49)
63 (35 - 112)
C-H-R
P-E-F
P-E-R
P-H-R
C-E-F
C-H-F
C-H-F
C-H-R
C-H-R
Meliaceae
jit
Guarea silvatica
98 (70 - 140)
0,8 (0,2 - 0,9)
Meliaceae
jatuaba-vermelha
Guarea carinata
161 (77 - 210) C - H - R
1,9 (1,0 - 3,0)
Melastomataceae
mamozinho
Mouriri collocarpa
NI
NI
NI
sem
Mecnica e
morfolgica
sem
NI
NI
Mecnica e
morfolgica
sem
NI
NI
NI
Captulo 5
Teste de germinao
* Classificao dos tipos de germinao: a primeira letra indica a exposio dos

cotildones, podendo ser criptocotiledonar (C) ou fanerocotiledonar (P). A segunda
letra indica o alongamento do hipoctilo, podendo ser epgea (E) ou hipgea (H) e a
terceira letra indica a classificao dos cotildones em foliceos (F) ou com reservas
(R). O termo Bipolar indica que a protruso da raiz e da parte area ocorre em
plos opostos da semente.
** Foi considerado sem dormncia, quando a germinao finalizou em um perodo
menor que 60 dias. Caso o tipo de dormncia seja mencionado, o tempo para formao de plntulas normais foi obtido aps o tratamento de quebra de dormncia.
NI- No Informado
115
Captulo 5
Tabela 5.2. Temperaturas recomendadas para o teste de germinao de sementes florestais tropicais e subtropicais do Brasil.
Espcie
Temperatura (C)
Fonte
Acacia decurrens
Fabaceae Mim.
20:30
Amaral,1986
Adenanthera pavonina
Fabaceae Caes.
20, 25, 30, 35
Zpevak e Peres, 1993
Anadenanthera macrocarpa
Fabaceae Mim.
20, 25, 3020:30
Figliolia, 1984
Aniba rosaeodora
Lauraceae
25, 30
Ferraz e Varela, 2003
Apuleia leiocarpa
Fabaceae Caes.
30
Amaral, 1986
Aspidosperma polyneuron
Apocynaceae
20, 2525
Astronium urundeuva
Anacardiaceae
25:30
Albrecht e Colli,1995
Bauhinia variegata
Fabaceae Caes..
20, 25, 30
20:30
Figliolia, 1984
Bertholletia excelsa
Lecythidaceae
30, 35
Brosimum rubescens
Moraceae
25, 30, 35
Buchenavia grandis
Combretaceae
25, 30, 35
Buchenavia macrophylla
Combretaceae
25, 30, 35
Buchenavia viridiflora
Ramos e Bianchetti, 1984

*
Figliolia, 1984
Combretaceae
25, 30, 35
Cabralea canjerana
Meliaceae
20
Calophyllum angulare
Clusiaceae
30
Canavalia rosea

Frassetto e Menezes, 1997 *
Fabaceae Pap.
35
Arrigoni e Lucas, 1989
Carapa guianensis
Meliaceae
35
Carapa procera
Meliaceae
20, 25, 30, 35
Cariniana estrellensis
Lecythidaceae
30
Bilia et al.,1995
Cariniana excelsa
Lecythidaceae
25
Barbosa et al.,1988
Cariniana micrantha
Lecythidaceae
20, 25, 30
20:30
Cassia leptophylla
Fabaceae Caes.
20:30
Meliaceae
25, 30
Meliaceae
25
20, 25, 30
30
30
20:30
Amaral et al., 1978

Figliolia, 1984
Amaral, 1986
Bilia et al.,1995
Figliolia,1984
Fabaceae Mim.
25, 30, 35
Malvaceae
20, 25, 30
20:30
Figliolia, 1984
Moraceae
30
Ferraz e Varela, 2003 b
Fabaceae Pap.
20:30
Fontinelli et al.,1994
Cochlospermum orinoccense Cochlospermaceae
20, 25
Columbrina glandulosa
25
20:30
Cedrela odorata
Cedrela fissilis
Cedrelinga cataeniformis
Chorisia speciosa
Clarisia racemosa
Clitoria ternatea
116
Famlia
Rhamanaceae
Imakawa e Ferraz, 1995 *

Amaral,1986
Andrade e Pereira, 1994 *
Albuquerque et al.,1997 *
Teste de germinao
Copaifera langsdorfti
Fabaceae Caes.
25
Silva e Afonso, 1985
Copaifera multijuga
Fabaceae Caes.
Cordia trichotoma
Boraginaceae
Couma guianensis
Apocynaceae
30, 35
25
20:30
20, 25, 30, 35
Couma utilis
Apocynaceae
25
Dalbergia nigra
Fabaceae Pap.
20:30
Salomo et al.,1991
Dalbergia variabilis
Fabaceae Pap.
25
Amaral, 1986
Dinizia excelsa
Fabaceae Mim.
25
Mesquita et al., 2009
Diplotropis sp.
Fabaceae Pap.
25, 30, 35
Dipteryx alata
Fabaceae Pap.
30, 35
Melhem,1975
Dipteryx magnifica
Fabaceae Pap.
25, 30, 35
Dipteryx odorata
Fabaceae Pap.
Enterolobium contortisiliquum
Fabaceae Mim.
Enterolobium schomburkii
Fabaceae Mim.

Lima et al., 1997
Amaral,1986
Silva et al., 1995
Andrade et al., 1997

Amaral, 1986
Souza et al.,1995
Amaral, 1986
Euterpe precatoria
Arecaceae
20, 25, 30, 35

de 18 a 38
20:30
25, 30, 35
25, 30
25:30
20
25
20:30
25, 30
Geissospermum sp.
Apocynaceae
30, 35
Gmelina arborea
Lamiaceae Vitico.
25
Cavallari et al.,1992
Gypsophila elegans
Caryophyllaceae
20:25
Negreiros et al.,1995
Moraceae
25, 30
Hovenia dulcis
Rhamanaceae
20
25

*
Amaral, 1986
Jacaranda copaia
Bignoniaceae
Jacaranda micrantha
Bignoniaceae
Jacquinia brasiliensis
Primulaceae
Clusiaceae
Bonnetioideae
Clusiaceae
Bonnetioideae
Lythraceae
25, 30
20, 25
30
25

*
Amaral, 1986
Garcia e Lucas, 1989
*
Esenbeckia leiocarpa
Rutaceae
Eugenia dysenterica
Myrtaceae
Euterpe edulis
Arecaceae
Helicostylis tomentosa
Kielmeyera albopunctata
Kielmeyra coriaceae
Lafoensia glyptocarpa
25
Neves e Lucas,1989
22, 27
Dionelo e Basta,1981
20:30
Figliolia e Faulim,1997
Leandra breviflora
Melastomataceae
30
Andrade, 1995
Luehea divaricata
Malvaceae
25
Amaral, 1986
Mabea fistulifera
Euphorbiaceae
25, 30
Moraceae
30
30
20:30, 25:35
22, 24, 26
20:30
30
Maquira scleropylla
Miconia cinnamomifolia
Mimosa scrabella
Melastomataceae
Fabaceae Mim.
Olacaceae
Leal Filho e Borges,1992 *

Miranda, 1998
Pereira e Andrade, 1995 *
*
Amaral,1986
Camargo e Ferraz, 2004
117
Tes te d e ge rminao
Captulo 5
Olacaceae
30
Camargo e Ferraz, 2004
Muntingiaceae
35
Leite e Takaki, 1995
Myrtaceae
20:30
Myrocarpus frondosus
Fabaceae Pap.
25
Amaral, 1986
Myroxilon balsamum
Fabaceae Pap.
20
Borges et al., 1980
Myroxylon peruiferum
Fabaceae Pap.
20:30
Figliolia,1997
Ochroma pyramidale
Malvaceae
30
30, 35
Martins Netto, 1994

Ocotea catharinensis
Lauraceae
20
Silva e Aguiar,1997
Ocotea puberula
Lauraceae
Muntingia calabura
Myrcia lineata
Pereira e Andrade, 1993 *
Parapiptadenia rigida
Fabaceae Mim.
Parkia discolor
Fabaceae Mim.
25
25
20, 25
25, 30, 35
Boraginaceae
25
Amaral, 1986
Fabaceae Caes.
20, 25, 30
Fabaceae Caes.
25
20, 26
Amaral et al., 1978

*
Rosaceae
20, 26
Ramos e Bianchetti, 1984 *
Schizolobium parayba
Fabaceae Caes.
25, 30
Ramos e Bianchetti, 1984 *
Senna multijuga
Fabaceae Caes.
30, 35
Maluf,1992
Simaroubaceae
30
30, 35
Goldman et al.,1986/87
Malvaceae
30
Marques et al.,1978
Patagonula americana
Peltogyne paniculata
Peltophorum dubium
Prunus brasiliensis
Simarouba amara
Sterculia stricta
Amaral, 1986
*
Amaral et al.,1978
*
*
Stevia rebaudiana
Asteraceae
25
Takahashi et al.,1995
Styrax leprosum
Styracaceae
20:30
Amaral, 1986
Bignoniaceae
25
Amaral, 1986
Tabebuia cassinoides
Bignoniaceae
30
25, 30
Tabebuia chrysotricha
Bignoniaceae
25
Amaral, 1986
Tabebuia pulcherrima
Bignoniaceae
25
Amaral et al.,1978
Tibouchina benthamiana
Melastomataceae
30
Andrade, 1995
Tibouchina grandiflora
Melastomataceae
30
Andrade, 1995
Tibouchina moricandiana
Melastomataceae
30
Andrade, 1995
Trema micrantha
Cannabaceae
20:30
Castellani et al.,1997
Triplaris surinamensis
Polygonaceae
20,30
Silva e Matos, 1995
Malvaceae
30
Figueiredo e Popinigis,
1980
Fabaceae Caes.
25, 30, 35
Tabebuia avellanedae
Urena lobata
Vouacapoua palidor
* baseado no levantamento de Miranda, 1998
118

*
Nogueira et al., 1995
Teste de germinao
Tabela 5.3. Caractersticas das sementes (ou da unidade de semeadura) e

da germinao de 20 espcies tropicais com sementes que exigem luz para a
germinao (sementes fotoblsticas positivas).
Massa de uma semente
ouunidade de semeadura Tipo de
(g)
germinao
*
mdia ( desv pad)
Espcie
Nome
popular
Famlia
Alseis blackiana
NI
Rubiaceae
0,00012
NI
NI
Pearson et al.,
2002
urubu-ca
Aristolochiaceae
0,00035
0,0004
P-E-F
Roeder, 2010
goiaba-deMelastomataceae
anta
0,00010
0,0000
P-E-F
Aud, 2008
0,00017
0,0004
P-E-F
Aristolochia
silvatica
Bellucia
grossularioides
Byrsonima
chrysophylla
Cecropia insignis
murici
Malpighiaceae
Fonte
Aud, 2008
Pearson et al.,
2002
Vzquez-Yanes,
1979
Pearson et al.,
2002
Pearson et al.,
2002
imbaba
Urticaceae
0,00068
NI
NI
imbaba
Urticaceae
NI
NI
NI
imbaba
Urticaceae
0,00059
NI
NI
Cecropia peltata
imbaba
Urticaceae
0,00058
NI
NI
Cecropia
sciadophylla
imbaba
Urticaceae
0,00011
0,0001
P-E-F
Aud, 2008
NI
Vitaceae
0,00031
0,0002
P-E-F
Roeder, 2010
dima
Euphorbiaceae
0,00014
0,0004
P-E-F
Aud, 2008
Cecropia
obtusifolia
Cecropia
obtusifolia
Cissus sicyoides
Croton
lanjouwensis
Isertia hypoleuca foguetinho
Rubiaceae
0,00030
0,0000
P-E-F
Aud, 2008
Jacaranda copaia
caroba
Bignoniaceae
0,00065
0,0003
P-E-F
Aud, 2008
Matelea badilloi
NI
Apocynaceae
0,00016
0,0002
P-E-F
Miconia argentea
Roeder, 2010
Pearson et al.,
2002
Pearson et al.,
2002
Pearson et al.,
2002
buxixu
Melastomataceae
0,00008
NI
NI
Piper dilatatum
NI
Piperaceae
0,00010
NI
NI
Piper peltatum
NI
Piperaceae
0,00004
NI
NI
lacre
Hypericaceae
0,00040
0,0000
P-E-F
Aud, 2008
lacre-branco
Hypericaceae
0,00002
NI
NI
Ludewigs, 1997
lacre
Hypericaceae
0,00006
NI
NI
Ludewigs, 1997
Vismia
cayennensis
Vismia
guianensis
Vismia
japurensis
* Classificao dos tipos de germinao: a primeira letra indica a exposio dos cotildones, podendo
ser criptocotiledonar (C) ou fanerocotiledonar (P). A segunda letra indica o alongamento do hipoctilo,
podendo ser epgea (E) ou hipgea (H) e a terceira letra indica a classificao dos cotildones em
foliceos (F) ou com reservas (R).
NI No Informado
119
Captulo 5
Tabela 5.4. Tipo de germinao de 23 gneros de monocotiledneas,

baseado na classificao de Garwood (2009).
Gnero
Famlia
Tipo de
germinao *
Ananas
Bromeliaceae
H-S
Astrocaryum
Areacaceae
H-S
Attalea
Areacaceae
E-P
Bactris
Areacaceae
H-S
Bromelia
Bromeliaceae
H-S
Cocus
Areacaceae
H-S
Dyckia
Bromeliaceae
E-F
Elaeis
Areacaceae
H-S
Euterpe
Areacaceae
H-S
Geonoma
Areacaceae
H-S
Leopoldina
Areacaceae
H-S
Lindmania
Bromeliaceae
E-F
Manicaria
Areacaceae
H-S
Mauritia
Areacaceae
H-S
Oenocarpus
Areacaceae
H-S
Phytelephas
Areacaceae
E-P
Renealmia
Zingiberaceae
H-S
Ruppia
Ruppiaceae
E-F
Smilax
Smilacaceae
H-S
Socratea
Areacaceae
H-S
Strelitzia
Strelitziaceae
H-S
Syagrus
Areacaceae
H-S
Vellozia
Velloziaceae
H-S
* H-S: Hipgea-Sssil; E-P: Epgea-Peciolata, E-F:

Epgea-Folicea.
120
Teste de germinao
Figura 5.1. Indicao da temperatura mais adequada para o teste de germinao de 86 espcies florestais sub-tropicais e tropicais, baseada na Tabela
5.2, excluindo as espcies com recomendao somente de temperaturas alternadas. Quando, mais que uma temperatura foi recomendada, optou-se
pela mdia, ou a primeira abaixo da mdia. Exemplo 1: Temperaturas recomendadas: 25, 30 e 35C => Temperatura selecionada: 30C. Exemplo
2: Temperaturas recomendadas: 20 e 25C => Temperatura selecionada:
20C.
Nmero de espcies
50
40
30
20
10
0
20oC
25oC
30oC
35oC
121
Captulo 5
Figura 5.2. Classificao dos nove tipos de germinao encontrados em dicotiledneas tropicais. Nas abreviaes, a primeira letra indica a exposio
dos cotildones, podendo ser criptocotiledonar (C) ou fanerocotiledonar (P).
A segunda letra indica o alongamento do hipoctilo, podendo ser epgea (E)
ou hipgea (H) e a terceira letra indica a classificao dos cotildones em
foliceos (F) ou com reservas (R). O termo Bipolar indica que a protruso
da raiz e da parte area ocorre em plos opostos da semente.Exemplos
podem ser encontrados nas Tabelas 5.1 e 5.3.
Protruso da raiz
primria e da parte area
Unipolar
Bipolar
Criptocotiledonar
Hipgea
Fanerocotiledonar
Epgea
Hipgea
Epgea
Com
Reserva
Sem
Reserva
Com
Reserva
Sem
Reserva
Com
Reserva
Sem
Reserva
Com
Reserva
Sem
Reserva
C-H-R
1
C-H-F
2
C-E-R
3
C-E-F
4
P-H-R
5
P-H-F
6
P-E-R
7
P-E-F
8
122
Bipolar
8
Captulo 6
Determinaes
adicionais
6.1 Introduo
A qualidade da semente avaliada por um conjunto de ndices determinados por anlises. Como determinaes adicionais so designadas as anlises que
contribuem para fornecer outras informaes sobre a qualidade do lote. De todas estas determinaes, a mais importante para espcies florestais o peso de mil sementes.
6.2 Peso de mil sementes [1]

O peso de mil sementes em geral utilizado para
calcular a densidade de semeadura e o peso da amostra de
trabalho, para a anlise de pureza. um dado que est diretamente relacionado com a qualidade das sementes,
assim como de seu estado de maturidade e sanidade. O
peso de mil sementes tambm influenciado pelo grau
de umidade.
A amostra de trabalho para essa determinao toda a
Captulo 6
semente pura, proveniente da anlise de pureza ou consiste de, no mnimo, oito subamostras de 100 sementes
provenientes da poro semente pura.
A amostra de trabalho pesada em gramas, com o
mesmo nmero de casas decimais indicadas para anlise
de pureza. Contam-se ao acaso, manualmente ou com
auxlio de contadores mecnicos, oito subamostras de 100
sementes cada. Em seguida, pesam-se essas subamostras
com o mesmo nmero de casas decimais utilizadas na
anlise de pureza.
6.3 Clculos e informao do resultado

Quando o peso foi obtido com oito repeties ou
subamostras de 100 sementes, calcula-se a varincia, o
desvio padro e o coeficiente de variao dos valores obtidos na pesagem da seguinte maneira:
Varincia = n(x2) - (x ) , onde
n(n - 1)
x = peso de cada subamostra de 100 sementes;
n = nmero de amostras (oito)
Desvio padro (s) = varincia
Coeficiente de variao = s x 100, onde
x
x = peso de 100 sementes.
2
Se o coeficiente de variao no exceder a 6% para

palhetas ou 4% para as outras sementes, o resultado da
determinao poder ser calculado multiplicando-se por
10 o peso mdio obtido das subamostras de 100 sementes.
Se o coeficiente de variao exceder os limites j
mencionados, outras oito subamostras de 100 sementes
devero ser contadas e pesadas; logo aps, calcula-se o
desvio padro das 16 repeties. Desprezam-se todas as
que apresentam uma divergncia da mdia maior do que
o dobro do desvio padro obtido. Multiplica-se por 10 o
124
Determinaes adi cion ais
peso obtido entre as demais subamostras de 100 sementes, sendo este o resultado do teste.
O resultado ser expresso em gramas com o
nmero de casas decimais correspondente s utilizadas
nas pesagens fazendo-se a devida aproximao no final.
6.4 Referncias bibliogrficas

1
125
Captulo 7
Limpeza de materiais,
equipamentos e
instalaes do laboratrio
de anlise de sementes
Gentil, D.F.O.
7.1 Introduo
A disseminao de microrganismos no Laboratrio
de Anlise feita atravs do ar, gua, solo, materiais, pessoas e sementes. Caso existam condies favorveis,
ocorre a colonizao e o estabelecimento desses seres no
ambiente, ficando suspensos no ar, depositados sobre as
superfcies e contaminando/infectando sementes.
Alguns microrganismos, como os dos gneros Aspergillus, Penicillium, Rhizopus e Trichoderma, podem interferir na execuo das anlises e na obteno de
resultados confiveis [21]. Os testes baseados na avaliao
de plntulas podem ser prejudicados, pois as condies
necessrias germinao de sementes tambm favorecem
o desenvolvimento de microrganismos, promovendo o
desencadeamento de doenas [25]. Com isso, os testes
Captulo 7
que apresentarem resultados duvidosos devero ser

repetidos [5].
Para evitar que esses microrganismos indesejveis
afetem o andamento das anlises no laboratrio, imprescindvel eliminar ou reduzir as fontes de inculo no local,
o que pode ser conseguido com a adoo de procedimentos de limpeza.
Na limpeza, devem ser considerados os custos, a
eficincia de operacionalizao e o padro de qualidade
dos procedimentos a serem adotados, alm de visar o aumento no tempo de vida til dos materiais, equipamentos
e instalaes [6]. Os procedimentos de limpeza mais empregados so descritos abaixo. As etapas esto ordenadas
didaticamente, para facilitar o entendimento. Na prtica,
entretanto, a escolha e ordenao das etapas devem ser
baseadas no grau de sujidade da superfcie e no objeto da
ao de limpeza.
7.2 Pr-Lavagem
A presena de detritos num material protege os microrganismos do contato indispensvel com o agente
desinfetante ou esterilizante [3]. Por isso, necessrio
elimin-los atravs da pr-lavagem, que consiste na
frico com esponja, pano ou escova, sob gua limpa e
corrente.
7.3 Lavagem
a retirada da sujidade de qualquer superfcie.
Consta na frico com esponja, pano ou escova, utilizando gua limpa e um detergente tensoativo, que pode
ser o sabo [6]. O efeito desinfetante dos sabes aumenta
com a elevao da temperatura [1]. Dessa forma, recomendvel utilizar gua ligeiramente aquecida, em torno
de 38 a 46C, nas lavagens [17].
128
Limpeza de materiais, equipamentos e instalaes do laboratrio de anlise de sementes
Artigos metlicos, plsticos e de vidro devem ser

cuidadosamente lavados [5]. Equipamentos, como germinadores, alm de bancadas e pias, devem receber o
mesmo tratamento.
7.4 Descontaminao
a eliminao total ou parcial da carga microbiana
presente em materiais, tornando-os aptos para o manuseio
seguro. Corresponde imerso completa de materiais em
soluo desinfetante, acompanhada ou no de frico com
escova ou esponja. A descontaminao realizada com
frequncia em artigos plsticos ou de vidro, atravs de
soluo de hipoclorito de sdio com 1% de cloro ativo,
por 30 minutos [6], ou de detergente em p, por uma
hora.
7.5 Enxgue
realizado com gua limpa e corrente, para eliminar os resduos do desinfetante usado na lavagem e/ou
na descontaminao [6]. Em algumas situaes, costumase fazer um novo enxgue com gua destilada, uma vez
que a mesma no apresenta condies para sobrevivncia
e desenvolvimento de certos microrganismos [19].
7.6 Secagem
Objetiva eliminar a interferncia da umidade nos
produtos e mtodos da limpeza em curso. Em materiais
pode ser feita com pano limpo e seco [6] ou em estufa a
40C. Conforme o destino, os materiais podem ser estocados ou submetidos desinfeco ou esterilizao. Os
equipamentos e instalaes devem ser secados com pano
129
Captulo 7
limpo e seco, sendo posteriormente desinfetados.
7.7 Desinfeco
um processo encaminhado a destruir microrganismos patognicos. Portanto, no implica na eliminao
de todos os microrganismos vivos presentes numa superfcie. A destruio de microrganismos patognicos pode
ser alcanada com o uso de produtos qumicos, denominados desinfetantes, os quais podem ser eficazes contra
alguns tipos de microrganismos. Para designar esta especificidade dos produtos empregam-se os termos bactericida,
fungicida, dentre outros [29].
Quando se utilizam desinfetantes no controle de
microrganismos, alguns fatores importantes devem ser
considerados: concentrao - quanto mais concentrado o
produto, mais efetiva ser sua ao. H, contudo, um limite mnimo de concentrao, abaixo do qual a ao do
desinfetante nula, podendo at estimular o desenvolvimento dos microrganismos. Por isso, nas instrues de
prticas de desinfeco preciso definir a concentrao
do produto qumico que ser usado; tempo de ao - desenvolve-se em duas fases: a primeira a de fixao, que
atua impedindo a multiplicao microbiana e pode ser
anulada por lavagem ou neutralizao qumica; a segunda
a de destruio do protoplasma microbiano, por coagulao dos colides celulares, que irreversvel. Logo, fica
evidenciado que nenhum desinfetante atua de maneira
instantnea; por isso, o tempo de ao somente deve ser
considerado a partir do momento em que a superfcie a
desinfetar esteja completamente recoberta pelo produto
qumico; temperatura - a eficcia dos desinfetantes aumenta com a elevao da temperatura, podendo-se us-los
mais diludos para uma mesma condio, desde que a
temperatura seja elevada. Isso se deve acelerao das
reaes qumicas pelo calor; matria orgnica - a presena de matria orgnica pode modificar profundamente
130
a ao de um desinfetante, sendo provvel que este se

desgaste atacando a matria orgnica ao invs das clulas
microbianas. Por isso, essencial reduzir a matria
orgnica presente nas superfcies antes do emprego de
produtos qumicos [9; 20; 29].
Os desinfetantes afetam as clulas microbianas de
diferentes modos: coagulando e desnaturando as protenas - muitas protenas celulares so enzimticas e encontram-se na forma de disperso coloidal fina. Se ocorrer a
coagulao ou a desnaturao, elas perdem sua capacidade funcional e a clula morre; desorganizando a membrana celular - as substncias qumicas podem alterar as
propriedades fsicas e qumicas da membrana celular, impedindo o seu funcionamento normal. Com isso, pode
ocorrer a perda de protoplasma para o meio externo e a
entrada de substncias nocivas para o meio interno, resultando na inibio da clula ou em sua morte; como antagonista qumico - as enzimas tm funo cataltica em
virtude de sua afinidade com seus substratos naturais. Se
estruturalmente um dado composto se assemelha a um
substrato nos aspectos principais, a enzima ter afinidade
por este composto. Se a afinidade for suficientemente intensa, o composto tomar o lugar do substrato natural e
impedir os processos normais de produo de energia ou
dificultar os processos biossintticos essenciais, inibindo
como consequncia a reproduo da clula [1; 8; 20].
Apesar de no existir um desinfetante ideal, a
seguir so citadas as caractersticas que os produtos deveriam apresentar: amplo espectro de ao, destruindo
todos os microrganismos num perodo relativamente
curto; alta estabilidade, conservando sua ao plena, inclusive, durante sua exposio ao ar e a temperaturas
elevadas; alto poder de penetrao; alta solubilidade em
gua, em qualquer concentrao, para constituir solues
ou emulses permanentes; poder especfico suficientemente elevado, que permita seu uso em grandes diluies;
poder de dissolver graxas; no ser corrosivo e no ter ao
descolorante; ter ao desodorante; carecer de pro-
131
Captulo 7
priedades txicas quando ingerido ou inalado pelo

homem; ser de baixo custo, abundante e de fcil aplicao
[7; 9; 29].
Os desinfetantes mais usados no laboratrio so:
a) Detergentes tensoativos: possuem a propriedade de desorganizar a membrana da clula microbiana ou de atuar como antagonista qumico [1; 20]. Tm
a finalidade de limpar superfcies, pela umectao, disperso, suspenso e emulso das substncias orgnicas
[15]. So usados com frequncia na desinfeco de materiais, equipamentos e instalaes.
Esses compostos so classificados em:
No inicos: o poder bactericida baixo ou nulo e,
ainda, podem inibir o efeito de outros compostos [ 29].
Ademais, no so biodegradveis [17].
Aninicos, cuja ao detergente reside no on de
carga negativa: fazem parte desse grupo os sabes, os detergentes sulfonados e os sulfonatos, os quais apresentam
acentuada propriedade desengordurante [19; 29]. So empregados nas lavagens e/ou descontaminaes.
Os sabes so sais de sdio e potssio de cidos
graxos [29]. Sua importncia devida, sobretudo, reduo do nmero de microrganismos, por sua ao em si
e eliminao mecnica que acompanha a lavagem. Consegue-se, assim, diminuir a populao de microrganismos
e auxiliar outros meios para elimin-la totalmente [20].
Os compostos sulfonados e sulfonatos possuem boas caractersticas detergentes, sendo estes ltimos os principais
tensoativos utilizados [11]. No Brasil, o sulfonato de sdio
do alquilbenzeno linear (LASNa) praticamente o nico
tensoativo empregado nas formulaes de detergentes.
Seu teor nos detergentes em p varia de 12 a 24% e nos
lquidos de 4 a 10% [27].
Catinicos, cuja ao detergente reside no on de
carga positiva: so compostos eficientes como germicidas,
mas fracos como detergentes [17]. Possuem alto poder
bactericida e fungicida, porm apresentam as desvantagens de no agirem sobre esporos e serem pouco ativos
132
contra vrus. So de baixa toxicidade e muito bem tolerados pela pele [18; 19]. Os mais importantes so os compostos quaternrios de amnio, caracterizados pela
ligao de um tomo de nitrognio a quatro radicais,
geralmente orgnicos, um dos quais de cadeia longa [23].
Como exemplos de princpios ativos de quaternrios de
amnio seguem: cloreto de alquil dimetil benzil amnio,
cloreto de alquil dimetil etilbenzil amnio, cloreto de
alquil dimetil etiltoluil amnio, cloreto de lauril piridnio,
cloreto e brometo de cetil trimetil amnio e cloreto de
alquil trimetil amnio [4]. So aplicados em pano embebido, com frico sobre as superfcies. Porm, no devem
ser usados aps lavagens realizadas com detergentes
aninicos, uma vez que so incompatveis [15].
b) Compostos inorgnicos liberadores de cloro
ativo: so eficazes somente quando emitem cloro livre.
Quanto mais instvel um composto de cloro, mais rapidamente se manifesta sua eficcia e mais intensa ser sua
ao [29]. Um composto de cloro muito utilizado em
limpeza o hipoclorito de sdio (NaClO), que pode ser
encontrado na forma comercial de gua sanitria. Atua
desnaturando as protenas das clulas microbianas [8],
especialmente de bactrias, fungos, vrus e esporos [18].
O hipoclorito de sdio, com 1% de cloro ativo, pode ser
aplicado por dez minutos visando desinfeco de
equipamentos e instalaes [6], com o auxlio de um
pano. O uso dos compostos de cloro limitado por sua
decomposio rpida, pela capacidade corrosiva e descolorante e por irritar a pele e a mucosa. No so indicados,
inclusive, em aplicaes sobre metais [2; 6; 29].
c) lcool etlico (CH3CH2OH): tem elevada atividade desinfetante, baixo custo e baixa toxicidade, sendo
o mais empregado no controle de microrganismos [6; 29].
Atua coagulando e desnaturando as protenas, tendo tambm a propriedade de dissolver lipdios [1; 23; 29]. Apresenta boa ao sobre fungos, vrus e bactrias; entretanto,
no age sobre esporos [19; 23].
A gua facilita a ao do lcool. Por isso, o lcool
133
Captulo 7
absoluto, que no contm gua, menos eficaz que as

solues aquosas de lcool a 70, 80 ou 95%. Se a superfcie a desinfetar est ressecada, ser mais eficaz o lcool
a 70% que a 95%; se est mida, o lcool a 95% destruir
os microrganismos com mais rapidez [29]. Entretanto, as
solues com concentraes inferiores a 10%, praticamente, no tm ao desinfetante [20]. O lcool utilizado na desinfeco peridica de artigos metlicos,
plsticos e de vidro, bancadas e equipamentos [5; 6]. A
aplicao feita com pano ou papel toalha embebido, podendo ser usado um borrifador para atingir os cantos mais
difceis. O lcool voltil e de ao rpida; alm do mais,
inflamvel e seu uso constante provoca o ressecamento
da pele [29].
d) Formalina (formol): uma soluo de 40% de
formaldedo (HCHO) gasoso em gua, que atua inativando um grande nmero de enzimas e tambm coagulando e desnaturando as protenas das clulas
microbianas [20; 29]. Em solues concentradas, apresentam um amplo espectro germicida, atingindo formas vegetativas de bactrias, fungos e vrus e muitos esporos
[18]. O poder desinfetante aumenta com a elevao da
temperatura [29], porm diminui quando usado em dissoluo com lcool [1].
Artigos metlicos podem ser desinfetados com formol [6]. A desinfeco de germinadores pode ser feita na
concentrao de 0,5% [5]. A operao consiste em friccionar, com pano embebido em soluo, a superfcie do
equipamento, que em seguida mantido fechado por quatro a seis horas, para aumentar a eficincia do tratamento.
Este tempo poder ser reduzido, se o germinador for
aquecido sem gua. Outro modo de desinfetar germinadores consiste em colocar uma placa de Petri com algumas gotas de formol a 0,5% dentro do equipamento e
deix-lo fechado por uma noite [10]. Antes de ser reutilizado, o germinador deve permanecer aberto at que os
vapores txicos sejam eliminados totalmente.
O formol no reage com metais, voltil e consti-
134
tui-se num autntico inibidor de odores [2; 29]. Apresenta

alta toxicidade, que produz efeito necrtico nos tecidos,
exceto em concentraes muito baixas. Seus vapores penetrantes so irritantes mucosa nasal e farngea, com
comprovado potencial carcinognico, o que impossibilita
o seu uso frequente [6; 12; 29].
7.8 Esterilizao
Consiste na destruio completa de todos os microrganismos presentes na superfcie de qualquer material. Logo, um material considerado estril aquele
plenamente isento de microrganismos vivos [29]. Pode ser
alcanada por meio de diferentes agentes fsicos. Os que
utilizam calor so os mais frequentemente utilizados, devido ao seu baixo custo, ao fcil controle e por no deixar
resduos txicos [18; 29].
Alguns fatores importantes devem ser considerados quando se objetiva a eliminao dos microrganismos
pelo calor: intensidade do agente fsico usado - entre as
instrues para o emprego de mtodos de esterilizao
preciso incluir o grau de calor que dever ser mantido.
Pois, muito provvel que sobrevivam alguns dos microrganismos que se pretendia destruir, quando se adotam
temperaturas mais baixas. Por outro lado, as temperaturas
mais elevadas so naturalmente prejudiciais a muitos materiais, o que inviabiliza a sua adoo; tempo de ao nenhum agente esterilizante atua de maneira instantnea:
sempre requerido um perodo para se conseguir a destruio dos microrganismos. Assim, quando se emprega
calor, o perodo de exposio se inicia a partir do momento em que atingido o grau de temperatura desejado
[29].
O calor pode ser aplicado de diferentes maneiras
no laboratrio:
a) Fogo direto: o ato de aquecer diretamente os
materiais contaminados numa chama um mtodo fcil
135
Captulo 7
e eficaz de destruio de microrganismos indesejveis.

Porm, evidente que s poder ser adotado se o material
a esterilizar for resistente ao fogo, que atua oxidando os
componentes das clulas microbianas [29]. obtido
atravs de um bico aquecedor conectado a uma fonte de
gs, denominado bico de Bunsen, ou por meio de uma
lamparina a lcool. Correntemente, empregado na flambagem de artigos metlicos, antes e depois de serem utilizados, que so submetidos at adquirirem uma
colorao vermelho intenso, tendo a precauo de deixlos esfriar para poder us-los [13]. Pode ser utilizado em
extremidades de alguns artigos de vidro, no momento do
uso, sem deixar que atinjam a colorao vermelha [13].
No se recomenda a prtica de submergir os artigos em lcool para pass-los posteriormente pela chama, j que a
superfcie do instrumento no aquecer o suficiente, por
estar coberta por uma capa de lcool vaporizado. Objetos
cortantes no devem ser submetidos ao fogo direto, pois
ocorre a deteriorao do seu fio [29]. A instalao e avaliao de testes de germinao devem ser realizadas prximas a uma chama de bico de Bunsen ou lamparina, a fim
de evitar a contaminao do substrato e/ou a disseminao de esporos no ambiente [21].
b) Calor seco (ar quente): o princpio que rege a
ao do calor seco como agente fsico de esterilizao a
conduo. A conduo a transmisso do calor por contato ntimo de uma parte a outra de um mesmo corpo, ou
de um corpo a outro, sem deslocamento aprecivel de
partculas [15]. O calor seco no um mtodo eficaz de
esterilizao, pois o ar um mal condutor de calor e
apresenta um menor poder de penetrao. Logo, o grau de
temperatura e o tempo de exposio necessrios esterilizao, por este procedimento, so maiores que os requeridos para se chegar ao mesmo resultado com o calor
mido [1; 29]. As bactrias, por exemplo, sobretudo as
que se encontram sob a forma de esporos so muito resistentes ao calor seco [12].
Para aproveitar o poder esterilizante do calor seco,
136
que elimina os microrganismos por desidratao e oxidao dos componentes celulares, necessrio valer-se
de certos equipamentos conhecidos como estufas [23]. A
estufa de ar quente um recipiente retangular de paredes
duplas, isoladas termicamente e aquecida eletricidade.
No seu interior h prateleiras mveis; na parte superior,
orifcios para ventilao e um orifcio onde se coloca um
termmetro graduado, caso no venha acoplado no
equipamento [3]. A esterilizao pelo calor seco recomendada para objetos slidos feitos de material termoestvel, isto , todos os artigos que o calor no destrua,
como os metlicos e alguns de vidro [24]. So adotados
diferentes graus de temperatura e perodos de exposio,
como: 150C por trs horas, que parece ser a temperatura
mnima praticada [12]; 160C por uma hora a uma hora
e 30 minutos [1]; e 170C por uma a duas horas, que a
temperatura mais digna de confiana [12; 29]. Entretanto,
deve-se evitar que a temperatura ultrapasse os 180C, pois
pode ocasionar o chamuscamento dos tampes de algodo e/ou a alterao dos materiais que a ela esto submetidos [20; 22].
Os substratos para o teste de germinao tambm
podem ser esterilizados em estufas de ar quente. Assim,
temos as seguintes recomendaes: papel - 105C por
duas horas [5]; carvo - 105C por quatro horas; areia 105C por quatro horas [14] ou 200C por duas horas [5];
vermiculita - 105C por duas a quatro horas [21].
Na sequncia, so apresentados os procedimentos
bsicos de esterilizao em estufa de ar quente que, apesar de no serem complexos, requerem muita ateno:
i) a esterilizao, geralmente, um processo
preparatrio que visa disponibilidade de materiais para
uso imediato e, por isso, deve incluir meios para mantlos estreis at o momento de sua utilizao. Portanto,
indispensvel o acondicionamento dos artigos, antes de
serem colocados na estufa [29]. O papel manilha, de
alumnio e o algodo so recomendados vedao dos
materiais [28];
137
Captulo 7
ii) os materiais devem ser introduzidos na estufa,

evitando o contato com as paredes internas do equipamento e distribudos de modo a permitir a circulao do
ar, assegurando assim um recebimento regular de calor
[1; 13];
iii) a estufa fechada e conectada tomada
eltrica de mesma voltagem;
iv) a energia ligada e o termostato regulado
temperatura desejada;
v) pelo termmetro observado o momento em
que a temperatura atinge o grau adequado esterilizao,
considerando a partir dele o tempo de ao necessrio;
vi) ao final do perodo de esterilizao, o termostato regulado ao ponto inicial, a energia desligada
e a estufa desconectada da tomada eltrica;
vii) antes de abrir a estufa deve-se esperar que esfrie por um perodo de uma ou duas horas ou at que a
temperatura tenha descido a 100C ou menos, j que um
esfriamento rpido dos artigos de vidro poder causarlhes roturas [1; 8; 28]. Caso os vidros estejam quentes, recomenda-se no coloc-los sobre superfcies frias, o que
lhes provocaria alteraes, ou em local onde algum possa
peg-los inadvertidamente, uma vez que o vidro quente
tem o mesmo aspecto do frio [20].
c) Calor mido sob presso (vapor a presso): se
os materiais a esterilizar forem termo-resistentes, podero
ser submetidos ao vapor a presso em autoclave, que
apresenta como vantagens a facilidade operacional e a reduo nos custos, alm de ser o mtodo mais eficaz de
esterilizao [6]. O mecanismo de esterilizao pelo vapor
a presso est relacionado com o calor latente. Pois, o
vapor ao entrar em contato com a superfcie fria do material se condensa, liberando o calor latente. Aps a condensao do vapor, devido elevada temperatura, a gua
voltar ao estado gasoso e o calor latente ser novamente
absorvido a fim de possibilitar a mudana de estado. Essa
troca entre o meio e o material a base da esterilizao
[15]. O vapor a presso destri os microrganismos por
138
quebrar as ligaes qumicas envolvidas na manuteno

da conformao espacial das protenas, causando coagulao [23]. especialmente dirigido eliminao de esporos [20].
A autoclave (modelo vertical) uma caldeira cilndrica de cobre ou outro metal resistente, cuja espessura da
parede depende da presso mxima que o equipamento
pode suportar; correntemente esta espessura de 1,5 a
2,0 cm. A tampa de bronze batido veda perfeitamente, devido interposio de uma guarnio de borracha e a oito
ou dez parafusos que se apertam facilmente. No interior
da caldeira existe um suporte sobre o qual se coloca uma
cesta metlica contendo o material a esterilizar. Entre o
fundo da cesta metlica e o fundo ligeiramente cncavo
da caldeira fica um espao que se enche de gua. A tampa
possui um orifcio de escapamento, uma vlvula de segurana e um manmetro com duas escalas, correspondentes a presso e a temperatura, alm de uma indicao
em vermelho da presso mxima que est calculada a resistncia do equipamento. Algumas autoclaves tm em
sua lateral um tubo indicador do nvel da gua que se encontra no interior da caldeira. A gua no interior do
equipamento aquecida por meio de gs, eletricidade ou
mediante a passagem de uma corrente de vapor atravs de
serpentina submergida na gua [1; 2; 13; 20]. O funcionamento da autoclave baseado no seguinte princpio: a
gua, ao ser aquecida em recipiente fechado, pode atingir
temperaturas muito elevadas sem ferver; o vapor retido
sob presso [2], que pode alcanar at 6 atmosferas ou
mais sobre a normal, segundo a resistncia do modelo
empregado [13].
De maneira geral, a esterilizao em autoclave
realizada a 120C de temperatura e 1 atm de presso. O
perodo de exposio ao vapor a presso para artigos
metlicos e de vidro, gua destilada, solues e meios de
cultura de 15-20 minutos [22; 26]; para a areia, solo e
vermiculita varia entre 30 minutos a duas horas [21; 26].
Os operadores da autoclave devem familiarizar-se
139
Captulo 7
com seu funcionamento e manejo, inclusive com as instrues fornecidas pelo fabricante. Quando se tem no
cargo um novo operador, este deve primeiramente observar como executa a tarefa uma pessoa experiente, para
depois atuar ele mesmo, pelo menos uma vez, sob superviso [29].
A seguir, so relacionados os procedimentos bsicos que devem ser observados em uma unidade controlada manualmente:
i) colocar gua no interior da caldeira, verificando
o nvel pelo tubo indicador externo;
ii) acondicionar adequadamente o material a ser
esterilizado, com papel manilha e/ou tampes de algodo.
O papel manilha dever ser de cor natural, para
no manchar os materiais e nem deixar resduos txicos.
Os tampes de algodo devem ficar suficientemente apertados e no podem se desfazer ao serem retirados. O papel
de alumnio inadequado para acondicionar os materiais
que sero submetidos esterilizao em autoclave, pois
no permevel ao vapor;
iii) depositar o material na cesta metlica, distribuindo-os de modo a permitir a circulao do vapor
sem obstculos;
iv) averiguar se o orifcio de escapamento est
aberto;
v) verificar a vlvula de segurana;
vi) adaptar a tampa e apertar os parafusos, assegurando o completo fechamento da autoclave;
vii) ligar a fonte de energia;
viii) permitir que o vapor saia de forma livre e contnua durante vrios minutos, a fim de expulsar todo o ar
do interior da autoclave. Pois, o ar remanescente pode interferir com a condensao do vapor formando um filme
protetor ao redor do material, que torna deficiente a penetrao do calor, ou misturando-se com a corrente de
vapor, que proporciona um calor real indubitavelmente
menor;
ix) fechar o orifcio de escapamento;
140
x) quando atingir a presso desejada, diminuir o

fornecimento de calor, para manter constante a temperatura durante o tempo necessrio. O operador deve ficar
atento ao manmetro, por todo o perodo em que o
equipamento estiver em funcionamento;
xi) aps o tempo requerido esterilizao, desligar
a fonte de energia;
xii) esperar esfriar o equipamento at que a
presso indicada no manmetro seja 0 atm. Esta precauo fundamental, porque abrir a autoclave com alta
presso faria projetar a tampa ou o vapor superaquecido,
com riscos ao operador;
xiii) abrir o orifcio de escapamento lentamente e
posteriormente a tampa;
xiv) retirar o material [1; 2; 3; 15; 16; 28; 29].
7.9 Consideraes finais

O emprego de desinfetantes e mtodos de esterilizao requer o uso do equipamento de proteo individual (EPI) especfico, conforme a natureza do risco que o
pessoal de laboratrio se expe (Tabela 1). Um outro
cuidado que deve ser tomado na utilizao de desinfetantes a verificao do prazo de validade, para evitar o
uso de produtos incuos.
Tabela 1. Desinfetantes e mtodos de esterilizao e respectivos equipamentos
de proteo individual (EPIs) necessrios.
Desinfetante/mtodo de esterilizao EPI especfico
Quaternrios de amnio
luvas de borracha
Hipoclorito de sdio
luvas de borracha
Formaldedo
mscara com filtro qumico, culos, luvas

de borracha e avental impermevel
Calor seco
luvas isolantes, com cano longo
Calor mido sob presso
luvas isolantes, com cano longo
141
Captulo 7
Aps submeter os materiais ao processamento

mais adequado, deve-se estoc-los em local separado,
limpo, seco e protegido de poeira [6].
No manuseio de materiais estreis ou desinfetados,
bem como na instalao e avaliao de testes, deve-se
realizar a higienizao das mos e braos atravs de
lavagem com detergente e desinfeco com lcool.
A limpeza do piso e bancadas do laboratrio deve
ser feita diariamente, enquanto dos materiais e equipamentos deve ser aps o uso. Antes da instalao e avaliao de testes, recomenda-se a desinfeco das bancadas
ou mesas de trabalho e dos materiais que sero usados.
7.10 Referncias
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2.ed. Zaragoza: Acribia, 1970. 510p.
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Captulo 7
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29
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145

M. de Análise de Sementes Florestais

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2010

Manuel de Jesus da Lima Jr.

Manuel de Jesus da Lima Jr.

O Manual de Procedimentos para Anlise de Sementes Florestais

Determinao do grau de umidade

Limpeza de materiais, equipamentos

1.1 A finalidade da anlise de sementes

para a semeadura [2].

padronizando a metodologia empregada para uma dada

sementes de espcies florestais nativas, espera-se que

1.3 Atividades do laboratrio de sementes

1.4 Infraestrutura do laboratrio

mentes, e posterior protocolo.

os resultados das anlises sero analisados e

Balana analtica de preciso

1.5 Perfil dos profissionais do laboratrio

ZORATO, F. Evoluo do laboratrio de anlise de

sementes. Net, Revista SEED News, nov. e dez., ano IX,

Para sementes florestais o lote deve ser constitudo

Tabela 1. Tamanho mximo dos lotes e mnimo das amostras mdias de

Fonte: Brasil (2009)

2.3 Procedimentos e cuidados na

duo das amostras[2].

2.4 Intensidade de amostragem

Nmero de amostras simples

5 amostras simples, pelo menos

1 amostra simples para cada 300Kg,

1 amostra simples para cada 500Kg,

1 amostra simples para cada 700Kg,

Nmero de amostras simples

3 amostras simples de cada recipiente

2 amostras simples de cada recipiente

1 amostras simples de cada recipiente

15 amostras simples no total

20 amostras simples no total

30 amostras simples no total

quenos recipientes combinados, de maneira a formar as

2.5 Recepo, embalagem e armazenamento

2.6 Equipamentos e materiais necessrios

Embalagens diversas para coleta de amostras

2.7 Amostragem para sementes de

valor para o estabelecimento da amostra mdia, em

balho. As sementes puras e o material inerte so indicados

3.2. Componentes da amostra

ser definitivamente identificadas como sendo da

as quais devem ser includas no material inerte [1].

tambm so consideradas material inerte;

3.3 Equipamentos e materiais para a anlise

3.4 Procedimentos e clculos

Preparao da amostra de trabalho

Tabela 1. Nmero de casas decimais exigidas para a amostra de trabalho e

Nmero de Casas decimais

Menor que 1.000

Fonte: Brasil (2009).

Com o avano das pesquisas, novas metodologias

Figura 1. Metodologia de anlise de pureza para sementes de Eucaliptus spp

Separao dos componentes

inerte, pesa-se tais componentes, anotando-se na ficha de

uma amostra de trabalho de 5,864 g. Passando a efetuar

a) Clculo da porcentagem do total de impurezas

3.5 Apresentao dos resultados

lizados com o sinal - 0 -;